CN111840312A - 一种具有增强卵母细胞及胚胎发育成熟的枸杞多糖组合物 - Google Patents
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Abstract
本说明书一个或多个实施例提供一种具有增强卵母细胞及胚胎发育成熟的枸杞多糖组合物，中药调理可提高其卵巢功能及卵子质量，通过补肾刺激子宫内膜生长，使子宫内膜利于接受受精卵种植，还具有调理气血，促进生殖的功能。利用一定浓度的枸杞多糖和多糖组分A处理受精卵或激活后孤雌胚胎能显著改善胚胎质量，增加胚胎的囊胚率为获取高质量的胚胎成为可能。使用药品剂量小，操作较简单易配制的特点，成为推广的应用的先决条件。本方法方便快捷、药物价格低廉、获取囊胚数量多，适于推广应用。
Description
技术领域
本说明书一个或多个实施例涉及增强卵母细胞及胚胎发育成熟的多糖组合物技术领域，尤其涉及一种具有增强卵母细胞及胚胎发育成熟的枸杞多糖组合物。
背景技术
进入21世纪以来生命科学尤其是在胚胎发育技术上取得巨大成就，为人类做出重大贡献。然而研究者获取的胚胎或“改造”后的胚胎体外培养条件，常出现发育率低、胚胎碎裂、胚胎发育不全、胚胎质量等级低等一系列问题，上述问题致使获取的胚胎数量过低、质量差、遗传性不稳定，移植动物子宫内出现流产、胎死、胎弱。
发明内容
有鉴于此，本说明书一个或多个实施例的目的在于提出一种具有增强卵母细胞及胚胎发育成熟的枸杞多糖组合物，以解决现有技术中的体外培养胚胎数量过低、质量差、遗传性不稳定，移植动物子宫内出现流产、胎死、胎弱的问题。
基于上述目的，本说明书一个或多个实施例提供了一种具有增强卵母细胞及胚胎发育成熟的枸杞多糖组合物，包括枸杞多糖和多糖组分A，所述的多糖组分A包括百合多糖、大枣多糖、番茄多糖、黑豆多糖、荔枝多糖、龙眼多糖、酸枣仁多糖、桑椹多糖、银耳多糖或芝麻多糖中的任意一种。
可选的，所述枸杞多糖和多糖组分A的浓度比为2.5～10:2～10mg/mL。
可选的，所述枸杞多糖和多糖组分A的浓度比为2.5～7.5:2.5～6mg/mL。
一种采用枸杞多糖组合物具有增强卵母细胞及胚胎发育成熟的操作方法，包括如下步骤：
肌注：选取成年发情的母鼠，分别采用不同浓度的枸杞多糖和多糖组分A连续进行肌注7天；
获取卵母细胞：将肌注处理的母鼠，颈部脱臼法处死，腹部消毒后剖开母鼠腹部，暴露生殖系统；提起输卵管剪去脂肪及子宫系膜，在输卵管与卵巢部及子宫角连接处剪断，输卵管放入盛有操作液的器皿中；
获取胚胎：将性成熟的公鼠颈部脱臼法处死，外生殖器部消毒后剖开，暴露生殖器官，在附睾处采集公鼠的成熟精子，直接添加获取的卵母细胞，进行体外受精的孵育，分别在48h、56h、72h、96h检测二细胞、四细胞、桑椹胚、囊胚数。
可选的，所述孵育的环境参数为正常的胚胎培养液中，37℃、5％CO2培养箱中孵育。
从上面所述可以看出，本说明书一个或多个实施例提供的一种具有增强卵母细胞及胚胎发育成熟的枸杞多糖组合物，中药调理可提高其卵巢功能及卵子质量，通过补肾刺激子宫内膜生长，使子宫内膜利于接受受精卵种植，还具有调理气血，促进生殖的功能。利用一定浓度的枸杞多糖和多糖组分A处理受精卵或激活后孤雌胚胎能显著改善胚胎质量，增加胚胎的囊胚率为获取高质量的胚胎成为可能。使用药品剂量小，操作较简单易配制的特点，成为推广的应用的先决条件。本方法方便快捷、药物价格低廉、获取囊胚数量多，适于推广应用。
附图说明
为了更清楚地说明本说明书一个或多个实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本说明书一个或多个实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本说明书一个或多个实施例操作方法示意图。
具体实施方式
为使本公开的目的、技术方案和优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本公开进一步详细说明。
为了解决现有技术中存在的出现发育率低、胚胎碎裂、胚胎发育不全、胚胎质量等级低等一系列问题，上述问题致使获取的胚胎数量过低、质量差、遗传性不稳定，移植动物子宫内出现流产、胎死、胎弱的问题，本发明提供一种具有增强卵母细胞及胚胎发育成熟的枸杞多糖组合物，包括枸杞多糖和多糖组分A，所述的多糖组分A包括百合多糖、大枣多糖、番茄多糖、黑豆多糖、荔枝多糖、龙眼多糖、酸枣仁多糖、桑椹多糖、银耳多糖或芝麻多糖中的任意一种。同时提供一种采用枸杞多糖组合物具有增强卵母细胞及胚胎发育成熟的操作方法，包括如下步骤：
肌注：选取成年发情的母鼠，分别采用不同浓度的枸杞多糖和多糖组分A连续进行肌注7天；
获取卵母细胞：将肌注处理的母鼠，颈部脱臼法处死，腹部消毒后剖开母鼠腹部，暴露生殖系统；提起输卵管剪去脂肪及子宫系膜，在输卵管与卵巢部及子宫角连接处剪断，输卵管放入盛有操作液的器皿中；
获取胚胎：将性成熟的公鼠颈部脱臼法处死，外生殖器部消毒后剖开，暴露生殖器官，在附睾处采集公鼠的成熟精子，直接添加获取的卵母细胞，进行体外受精的孵育，分别在48h、56h、72h、96h检测二细胞、四细胞、桑椹胚、囊胚数。
具体的，举例来说，本发明实施例1提供的一种具有增强卵母细胞及胚胎发育成熟的枸杞多糖组合物，包括枸杞多糖和百合多糖。枸杞多糖和百合多糖的浓度比为2.5～10:2～10mg/mL。
具体的操作步骤如下：
1、枸杞多糖浓度梯度实验
设置5个浓度梯度进行浓度梯度实验，浓度分别为0mg/mL、1mg/mL、2mg/mL、3mg/mL、4mg/mL，连续肌注7天后取卵，统计卵母细胞成熟率，确定卵母细胞成熟率最高的浓度为4mg/mL。
2、百合多糖浓度梯度实验
设置5个浓度梯度进行浓度梯度实验，浓度分别为0mg/mL、1mg/mL、2mg/mL、3mg/mL、4mg/mL，连续肌注7天后取卵，统计卵母细胞成熟率，确定卵母细胞成熟率最高的浓度为1mg/mL。
3、小鼠卵母细胞和受精卵获取
(1)分离输卵管
多糖肌注处理的母鼠，颈部脱臼法处死，腹部喷洒酒精消毒后用剪刀剖开母鼠腹部，暴露生殖系统。顺着子宫准确找到输卵管位置，用镊子提起输卵管用剪刀剪去脂肪及子宫系膜，在输卵管与卵巢部及子宫角连接处剪断，输卵管放入盛有操作液的35mm的小皿中。
(2)体外受精获取胚胎
性成熟的公鼠颈部脱臼法处死，外生殖器部喷洒酒精消毒后用剪刀剖开，暴露生殖器官，在附睾处采集公鼠的成熟精子，直接添加入筛选浓度过程中获取的卵母细胞，进行体外受精的孵育。在正常的胚胎培养液中，37℃、5％CO2培养箱中孵育，分别在48h、56h、72h、96h检测二细胞、四细胞、桑椹胚、囊胚数，其体外培养囊胚发育率。
每组多糖组分分别进行三次试验，测量的结果如表1和2所示。
表1枸杞多糖和百合多糖对小鼠体卵母细胞成熟的影响
表2枸杞多糖和百合多糖对小鼠体外胚胎发育的影响
利用4mg/mL枸杞多糖和1mg/mL百合多糖处理母鼠后，卵母细胞数量及体外受精胚24h可显著提高囊胚率。
枸杞药食的历史悠久，具有免疫调节、抗辐射损伤、调节血脂等功能，百合则有促进胚胎发育、补充自身维生素等微量元素的功效。达到提高胚胎囊胚率。
具体的，举例来说，实施例2提供的一种具有增强卵母细胞及胚胎发育成熟的枸杞多糖组合物，包括枸杞多糖和大枣多糖。枸杞多糖和大枣多糖的浓度比为2.5～10:2～10mg/mL。枸杞多糖确定卵母细胞成熟率最高的浓度为7.5mg/mL，大枣多糖确定卵母细胞成熟率最高的浓度为2.5mg/mL，其他步骤同实施例1，性能测试如表3和表4所示。
表3枸杞多糖和大枣多糖对小鼠体卵母细胞成熟的影响
表4枸杞多糖和大枣多糖对小鼠体外胚胎发育的影响
利用7.5mg/mL枸杞多糖和2.5mg/mL大枣多糖处理母鼠后，卵母细胞数量及体外受精胚24h可显著提高囊胚率。
枸杞药食的历史悠久，具有免疫调节、抗辐射损伤、调节血脂等功能，大枣则有补中益气、养血安神的功效，达到提高胚胎囊胚率。
具体的，举例来说，实施例3提供的一种具有增强卵母细胞及胚胎发育成熟的枸杞多糖组合物，包括枸杞多糖和番茄多糖。枸杞多糖和番茄多糖的浓度比为2.5～10:2～10mg/mL。枸杞多糖确定卵母细胞成熟率最高的浓度为7.5mg/mL，番茄多糖确定卵母细胞成熟率最高的浓度为2.5mg/mL，其他步骤同实施例1，性能测试如表5和表6所示。
表5枸杞多糖和番茄多糖对小鼠体卵母细胞成熟的影响
表6枸杞多糖和番茄多糖对小鼠体外胚胎发育的影响
利用7.5mg/mL枸杞多糖和2.5mg/mL番茄多糖处理母鼠后，卵母细胞数量及体外受精胚24h可显著提高囊胚率。
枸杞药食的历史悠久，具有免疫调节、抗辐射损伤、调节血脂等功能，番茄则有促进胚胎发育、补充维生素、抗辐射的功效，达到提高胚胎囊胚率。
具体的，举例来说，实施例4提供的一种具有增强卵母细胞及胚胎发育成熟的枸杞多糖组合物，包括枸杞多糖和黑豆多糖。枸杞多糖和黑豆多糖的浓度比为2.5～10:2～10mg/mL。枸杞多糖确定卵母细胞成熟率最高的浓度为7.5mg/mL，黑豆多糖确定卵母细胞成熟率最高的浓度为2.5mg/mL，其他步骤同实施例1，性能测试如表7和表8所示。
表7枸杞多糖和黑豆多糖对小鼠体卵母细胞成熟的影响
表8枸杞多糖和黑豆多糖对小鼠体外胚胎发育的影响
利用7.5mg/mL枸杞多糖和2.5mg/mL黑豆多糖处理母鼠后，卵母细胞数量及体外受精胚24h可显著提高囊胚率。
枸杞药食的历史悠久，具有免疫调节、抗辐射损伤、调节血脂等功能，黑豆则有促进胚胎发育、活血利水的作用，达到提高胚胎囊胚率。
具体的，举例来说，实施例5提供的一种具有增强卵母细胞及胚胎发育成熟的枸杞多糖组合物，包括枸杞多糖和荔枝多糖。枸杞多糖和荔枝多糖的浓度比为2.5～10:2～10mg/mL。枸杞多糖确定卵母细胞成熟率最高的浓度为4mg/mL，荔枝多糖确定卵母细胞成熟率最高的浓度为1mg/mL，其他步骤同实施例1，性能测试如表9和表10所示。
表9枸杞多糖和荔枝多糖对小鼠体卵母细胞成熟的影响
表10枸杞多糖和荔枝多糖对小鼠体外胚胎发育的影响
利用4mg/mL枸杞多糖和1mg/mL荔枝多糖处理母鼠后，卵母细胞数量及体外受精胚24h可显著提高囊胚率。
枸杞药食的历史悠久，具有免疫调节、抗辐射损伤、调节血脂等功能，荔枝则有促进血液循环、增加食欲的功效，达到提高胚胎囊胚率。
具体的，举例来说，实施例6提供的一种具有增强卵母细胞及胚胎发育成熟的枸杞多糖组合物，包括枸杞多糖和龙眼多糖。枸杞多糖和龙眼多糖的浓度比为2.5～10:2～10mg/mL。枸杞多糖确定卵母细胞成熟率最高的浓度为4mg/mL，龙眼多糖确定卵母细胞成熟率最高的浓度为1mg/mL，其他步骤同实施例1，性能测试如表11和表12所示。
表11枸杞多糖和龙眼多糖对小鼠体卵母细胞成熟的影响
表12枸杞多糖和龙眼多糖对小鼠体外胚胎发育的影响
利用4mg/mL枸杞多糖和1mg/mL龙眼多糖处理母鼠后，卵母细胞数量及体外受精胚24h可显著提高囊胚率。
枸杞药食的历史悠久，具有免疫调节、抗辐射损伤、调节血脂等功能，龙眼肉则有补气血、安神益心脾的功效，达到提高胚胎囊胚率。
具体的，举例来说，实施例7提供的一种具有增强卵母细胞及胚胎发育成熟的枸杞多糖组合物，包括枸杞多糖和酸枣仁多糖。枸杞多糖和酸枣仁多糖的浓度比为2.5～10:2～10mg/mL。枸杞多糖确定卵母细胞成熟率最高的浓度为4mg/mL，酸枣仁多糖确定卵母细胞成熟率最高的浓度为1mg/mL，其他步骤同实施例1，性能测试如表13和表14所示。
表13枸杞多糖和酸枣仁多糖对小鼠体卵母细胞成熟的影响
表14枸杞多糖和酸枣仁多糖对小鼠体外胚胎发育的影响
利用4mg/mL枸杞多糖和1mg/mL酸枣仁多糖处理母鼠后，卵母细胞数量及体外受精胚24h可显著提高囊胚率。
枸杞药食的历史悠久，具有免疫调节、抗辐射损伤、调节血脂等功能，酸枣仁则有养心益肝、安神补气血的功效。达到提高胚胎囊胚率。
具体的，举例来说，实施例8提供的一种具有增强卵母细胞及胚胎发育成熟的枸杞多糖组合物，包括枸杞多糖和桑椹多糖。枸杞多糖和桑椹多糖的浓度比为2.5～10:2～10mg/mL。枸杞多糖确定卵母细胞成熟率最高的浓度为4mg/mL，桑椹多糖确定卵母细胞成熟率最高的浓度为3mg/mL，其他步骤同实施例1，性能测试如表15和表16所示。
表15枸杞多糖和桑椹多糖对小鼠体卵母细胞成熟的影响
表16枸杞多糖和桑椹多糖对小鼠体外胚胎发育的影响
利用4mg/mL枸杞多糖和3mg/mL桑椹多糖处理母鼠后，卵母细胞数量及体外受精胚24h可显著提高囊胚率。
枸杞药食的历史悠久，具有免疫调节、抗辐射损伤、调节血脂等功能，桑椹则有滋阴补血、生津润燥的功效，达到提高胚胎囊胚率。
具体的，举例来说，实施例9提供的一种具有增强卵母细胞及胚胎发育成熟的枸杞多糖组合物，包括枸杞多糖和银耳多糖。枸杞多糖和银耳多糖的浓度比为2.5～10:2～10mg/mL。枸杞多糖确定卵母细胞成熟率最高的浓度为7.5mg/mL，银耳多糖确定卵母细胞成熟率最高的浓度为5mg/mL，其他步骤同实施例1，性能测试如表17和表18所示。
表17枸杞多糖和银耳多糖对小鼠体卵母细胞成熟的影响
表18枸杞多糖和银耳多糖对小鼠体外胚胎发育的影响
利用7.5mg/mL枸杞多糖和5mg/mL银耳多糖处理母鼠后，卵母细胞数量及体外受精胚24h可显著提高囊胚率。
枸杞药食的历史悠久，具有免疫调节、抗辐射损伤、调节血脂等功能，银耳则有促进钙吸收、提高免疫力的功效，达到提高胚胎囊胚率。
具体的，举例来说，实施例10提供的一种具有增强卵母细胞及胚胎发育成熟的枸杞多糖组合物，包括枸杞多糖和芝麻多糖。枸杞多糖和芝麻多糖的浓度比为2.5～10:2～10mg/mL。枸杞多糖确定卵母细胞成熟率最高的浓度为7.5mg/mL，芝麻多糖确定卵母细胞成熟率最高的浓度为2.5mg/mL，其他步骤同实施例1，性能测试如表19和表20所示。
表19枸杞多糖和芝麻多糖对小鼠体卵母细胞成熟的影响
表20枸杞多糖和芝麻多糖对小鼠体外胚胎发育的影响
利用7.5mg/mL枸杞多糖和2.5mg/mL芝麻多糖处理母鼠后，卵母细胞数量及体外受精胚24h可显著提高囊胚率。
枸杞药食的历史悠久，具有免疫调节、抗辐射损伤、调节血脂等功能，芝麻则有促进胚胎发育、补充微量元素的功效，达到提高胚胎囊胚率。
所属领域的普通技术人员应当理解：以上任何实施例的讨论仅为示例性的，并非旨在暗示本公开的范围(包括权利要求)被限于这些例子；在本公开的思路下，以上实施例或者不同实施例中的技术特征之间也可以进行组合，步骤可以以任意顺序实现，并存在如上所述的本说明书一个或多个实施例的不同方面的许多其它变化，为了简明它们没有在细节中提供。
本说明书一个或多个实施例旨在涵盖落入所附权利要求的宽泛范围之内的所有这样的替换、修改和变型。因此，凡在本说明书一个或多个实施例的精神和原则之内，所做的任何省略、修改、等同替换、改进等，均应包含在本公开的保护范围之内。
Claims (5)
1.一种具有增强卵母细胞及胚胎发育成熟的枸杞多糖组合物，其特征在于，包括枸杞多糖和多糖组分A，所述的多糖组分A包括百合多糖、大枣多糖、番茄多糖、黑豆多糖、荔枝多糖、龙眼多糖、酸枣仁多糖、桑椹多糖、银耳多糖或芝麻多糖中的任意一种。
2.根据权利要求1所述的具有增强卵母细胞及胚胎发育成熟的枸杞多糖组合物，其特征在于，所述枸杞多糖和多糖组分A的浓度比为2.5～10:2～10mg/mL。
3.根据权利要求1所述的具有增强卵母细胞及胚胎发育成熟的枸杞多糖组合物，其特征在于，所述枸杞多糖和多糖组分A的浓度比为2.5～7.5:2.5～6mg/mL。
4.一种采用枸杞多糖组合物具有增强卵母细胞及胚胎发育成熟的操作方法，其特征在于，包括如下步骤：
肌注：选取成年发情的母鼠，分别采用不同浓度的枸杞多糖和多糖组分A连续进行肌注7天；
获取卵母细胞：将肌注处理的母鼠，颈部脱臼法处死，腹部消毒后剖开母鼠腹部，暴露生殖系统；提起输卵管剪去脂肪及子宫系膜，在输卵管与卵巢部及子宫角连接处剪断，输卵管放入盛有操作液的器皿中；
获取胚胎：将性成熟的公鼠颈部脱臼法处死，外生殖器部消毒后剖开，暴露生殖器官，在附睾处采集公鼠的成熟精子，直接添加获取的卵母细胞，进行体外受精的孵育，分别在48h、56h、72h、96h检测二细胞、四细胞、桑椹胚、囊胚数。
5.根据权利要求4所述的采用枸杞多糖组合物具有增强卵母细胞及胚胎发育成熟的操作方法，其特征在于，所述孵育的环境参数为正常的胚胎培养液中，37℃、5％CO2培养箱中孵育。
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Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN116726090A (zh) * | 2023-06-06 | 2023-09-12 | 华中科技大学 | 枸杞细胞外囊泡在促进组织修复或生长中的应用 |
Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101530195A (zh) * | 2008-01-28 | 2009-09-16 | 中国食品发酵工业研究院 | 一种供产妇食用含短肽的特殊膳食用食品配方 |
| CN101555466A (zh) * | 2009-05-18 | 2009-10-14 | 浙江大学 | 一种含黄芪多糖的羊胚胎体外培养液及其培养方法 |
| CN102875690A (zh) * | 2012-10-15 | 2013-01-16 | 南京美福天然药物科技有限公司 | 一种抗卵巢功能衰退的中药多糖提取物、制备方法及用途 |
| CN103859375A (zh) * | 2012-12-10 | 2014-06-18 | 天津红日药业股份有限公司 | 一种有助于增强免疫力的养生保健食品配方及其制备方法 |
| CN105521308A (zh) * | 2014-09-28 | 2016-04-27 | 付宁婧 | 一种安胎药剂 |
| CN107058215A (zh) * | 2017-01-20 | 2017-08-18 | 江苏省中医院 | 一种添加中药单体的猪卵母细胞体外受精液及培养方法 |
| CN108618128A (zh) * | 2018-05-08 | 2018-10-09 | 广州莱可福生物科技有限公司 | 调节免疫力的组合物及其制备方法和应用 |
| CN109096411A (zh) * | 2018-09-10 | 2018-12-28 | 叶培德 | 一种植物多糖及用于促进猪卵母细胞体外成熟的用途 |
| CN109820918A (zh) * | 2019-01-15 | 2019-05-31 | 浙江省立同德医院 | 一种治疗排卵障碍性不孕症的中药制剂及其制备方法 |
-
2020
- 2020-06-30 CN CN202010619949.5A patent/CN111840312A/zh active Pending
Patent Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101530195A (zh) * | 2008-01-28 | 2009-09-16 | 中国食品发酵工业研究院 | 一种供产妇食用含短肽的特殊膳食用食品配方 |
| CN101555466A (zh) * | 2009-05-18 | 2009-10-14 | 浙江大学 | 一种含黄芪多糖的羊胚胎体外培养液及其培养方法 |
| CN102875690A (zh) * | 2012-10-15 | 2013-01-16 | 南京美福天然药物科技有限公司 | 一种抗卵巢功能衰退的中药多糖提取物、制备方法及用途 |
| CN103859375A (zh) * | 2012-12-10 | 2014-06-18 | 天津红日药业股份有限公司 | 一种有助于增强免疫力的养生保健食品配方及其制备方法 |
| CN105521308A (zh) * | 2014-09-28 | 2016-04-27 | 付宁婧 | 一种安胎药剂 |
| CN107058215A (zh) * | 2017-01-20 | 2017-08-18 | 江苏省中医院 | 一种添加中药单体的猪卵母细胞体外受精液及培养方法 |
| CN108618128A (zh) * | 2018-05-08 | 2018-10-09 | 广州莱可福生物科技有限公司 | 调节免疫力的组合物及其制备方法和应用 |
| CN109096411A (zh) * | 2018-09-10 | 2018-12-28 | 叶培德 | 一种植物多糖及用于促进猪卵母细胞体外成熟的用途 |
| CN109820918A (zh) * | 2019-01-15 | 2019-05-31 | 浙江省立同德医院 | 一种治疗排卵障碍性不孕症的中药制剂及其制备方法 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| 樊敏欢 等: "4种多糖对山羊卵母细胞体外成熟的影响" * |
| 贾甜甜 等: "内质网应激对哺乳动物卵母细胞成熟的影响研究进展" * |
| 高海霞 等: "枸杞子提取液对体外培养小鼠早期胚胎发育的影响及机制探讨" * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN116726090A (zh) * | 2023-06-06 | 2023-09-12 | 华中科技大学 | 枸杞细胞外囊泡在促进组织修复或生长中的应用 |
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