CN111836881A - 植物病原性真菌的检测装置、以及使用了该检测装置的检测方法和农药浓度的选择方法 - Google Patents
植物病原性真菌的检测装置、以及使用了该检测装置的检测方法和农药浓度的选择方法 Download PDFInfo
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Abstract
本公开提供下述植物病原真菌检测装置、以及植物病原性真菌的检测方法和有效农药浓度的选择方法,上述植物病原真菌检测装置能够选择性地判定试验试样是否含有植物病原性真菌,并且能够在真菌性病害发病前提示对该植物病原性真菌的有效农药和有效农药浓度。本公开涉及的检测装置的特征在于,具备器件和观察部,上述器件具备人工细胞壁、设置在上述人工细胞壁的上部的试验试样投入部、和设置在上述人工细胞壁的下部的培养基层,利用所述观察部从横向观察上述培养基层,上述培养基层中包含各不相同的农药原药,并且在上述培养基层中,包含基准量和从基准量进行稀释后的浓度的农药的多个层从下向上从浓度高的层起依次叠层,并且具备不包含农药的层作为最上层。
Description
技术领域
本发明涉及具有农药浓度选择功能的植物病原性真菌的检测装置、以及使用了该检测装置的病原性真菌的检测方法和农药浓度的选择方法。
背景技术
关于植物病原性真菌,作为与植物侵入性有关的性质,具有在植物表面形成附着器而附着后,寻找气孔组织等细孔并从这里将菌丝伸到植物体中,或从菌丝分泌植物细胞壁分解酶(纤维素酶、果胶酶)等特征。
利用这些特征,例如,在专利文献1中公开了使用微多孔膜支持体的真菌计量方法。此外,在非专利文献1中公开了:作为植物病原性卵菌的1种的大豆疫霉菌(Phytophthora sojae)的假菌丝好像试图向下潜入而非水平地生长,并且贯通具有3μm的孔的PET(聚对苯二甲酸乙二醇酯)膜。
此外,着眼于该性质,本发明人等已经提出了植物病原性卵菌类的判定方法(专利文献2)。
进一步,也报导了通过使用具有多个孔的板进行扫描,随时观察菌繁殖,进行细菌或真菌的固定检查、药剂敏感性检查这样的技术(专利文献3)。
现有技术文献
专利文献
专利文献1:日本特开2005-287337号公报
专利文献2:日本专利第6167309号
专利文献3:日本特开2015-177768号公报
非专利文献
非专利文献1:Paul F.Morris.et.al.“Chemotropic and Contact Responses ofPhytophthora sojae Hyphae to Soybean Isoflavonoids and ArtificialSubstrates”,Plant Physiol.(1998)117:1171-1178
发明内容
发明所要解决的课题
背景技术中所示的技术(专利文献1~2和非专利文献1)虽然能够进行植物病原性真菌的选择性检测,但在植物栽培场所中,需要病原性真菌检测后的应对,即通过农药投药来进行病原性真菌的生长抑制、排除。在这点上,在迄今为止已知的现有技术中,由于病原性真菌而发病后由其症状推定病原菌而进行投药、或将病原菌分离/鉴定后进行投药,发生不能防止蔓延的状况。或者,有时也在发病的前提下采取事前投入过剩农药等应对,导致农场管理作业的重劳动化。现状是发现该过剩投药进一步导致促进耐性菌出现的结果,即使花费劳力也不能抑制病,发现陷入收成减少/放弃作物的例子。
此外,在专利文献3的技术中,并未对有效的农药、农药浓度的选择进行研究,进而由于检测方法是水平的,因此在选择农药浓度的情况下等不可以说是有效率的。
本发明是鉴于这样的情况而提出的,其目的是提供下述检测装置、以及检测方法和有效农药浓度的选择方法,上述检测装置能够选择性地判定试验试样是否含有植物病原性真菌,并且能够在真菌性病害发病前提示对该植物病原性真菌的有效农药和有效农药浓度。
用于解决课题的方法
本发明人等进行了深入研究,结果发现,通过下述构成的检测装置能够解决上述课题,基于这样的认识而进一步反复进行了研究,从而完成了本发明。
即,本发明的一个方案涉及的检测装置的特征在于,具备器件和观察部,所述器件具备人工细胞壁、设置在上述人工细胞壁的上部的试验试样投入部、和设置在上述人工细胞壁的下部的培养基层,利用所述观察部从横向观察上述培养基层,上述培养基层中包含各不相同的农药原药,并且在上述培养基层中,包含基准量和从基准量进行稀释后的浓度的农药的多个层从下向上从浓度高的层起依次叠层,并且具备不包含农药的层作为最上层。
发明的效果
根据本发明,可以提供能够简易并且安全地选择性地检测出植物病原性真菌的装置和方法。此外,通过本发明,可以在真菌性病害的发病前选择有效的农药和农药浓度。由此,除了抑制撒布无益的农药的劳力、过剩投药等以外,还具有防止不必要地撒布高浓度的农药、可以减少农药量的可能性,对于抑制残留农药等是有效的。
附图说明
图1为显示本发明的一种实施方式涉及的检测装置的一部分的概略截面图。
图2为显示本实施方式的检测装置中的器件所具备的人工细胞壁的一例的概略截面图。
图3为显示本实施方式的检测装置的一例的俯视图(上)和截面图(下)。
图4为显示本发明的另一实施方式涉及的检测装置的一例的截面图(上)和俯视图(下)。
图5为显示图3所示的本实施方式的检测装置的检测动作的一例的概略图。
图6为显示图4所示的本实施方式的检测装置的检测动作的一例的概略图。
图7为显示实施例的结果的显微镜照片。
具体实施方式
以下,对本发明涉及的实施方式具体地说明,但本发明不限定于此。
(检测装置)
本实施方式涉及的、检测植物病原性真菌的装置如图1所示,具有器件1,上述器件1具有人工细胞壁2、设置在上述人工细胞壁2的上部的试验试样投入部3、和设置在上述人工细胞壁2的下部的培养基层6。本实施方式中的器件1可以另称为培养器。进一步,本实施方式的装置具有后述的图5和图6所示那样的、检测各器件内的菌丝生长的光学观察部7。
上述培养基层6包含各不相同的农药原药,由叠层于培养基容器4的多个层构成。即,在上述培养基层中,包含基准量和从基准量进行稀释后的浓度的农药的多个层从下向上从浓度高的层起依次叠层,并且具备不包含农药的层作为最上层。例如,在图1中,在最上部具有无农药固体培养基61,在其下依次叠层有配合了基准量的1/50量的农药的培养基62、配合了基准量的1/5量的农药的培养基63、和配合了基准量的农药的培养基62。
试验试样投入部3为用于投入试验试样5的容器,试验试样投入部3的底面由人工细胞壁2形成。
人工细胞壁2如图2所示,优选至少具备具有贯通孔22的基板21、和设置在上述基板21的一面的纤维素膜23。通过使用这样的人工细胞壁,从而更容易选择性地检测出作为目标的植物病原性真菌。
上述贯通孔22从基板21的表面侧的面贯通到背侧的面,该贯通孔的孔径优选为2~7μm(截面积4.5~38.5μm2)。通过孔径为上述范围,从而可以更可靠地选择性地检测出目标的病原性真菌。
此外,为了更可靠地选择性地检测出目标的病原性真菌,优选也调整纤维素膜23的厚度。具体而言,纤维素膜23的厚度优选为0.5~2μm。
在本实施方式的人工细胞壁2中,通过将基板21的贯通孔22的孔径和纤维素膜23的膜厚如上述范围那样调整,从而植物非病原性真菌不贯通纤维素膜23的情况多,与此相对,由于在本实施方式中作为目标的病原性真菌选择性地出现在纤维素膜23的背面,因此认为可以选择性地检测出植物非病原性真菌。
此外,上述基板21的厚度没有特别限定,作为一例,优选为5~150μm左右。
如图1所示,向试验试样投入部3的内部供给试验试样5。这样地操作,在试验试样5含有植物病原性真菌的情况下,在基板21的表面侧的面上存在植物病原性真菌。
在本实施方式中,试验试样5为固体、液体、或气体。试验试样5期望为固体或液体。固体的试验试样5的例子为土壤或破碎的植物等。其它例为蛭石、岩棉、或氨基甲酸酯那样的农业材料等。液体的试验试样5的例子为农业用水、用于水耕栽培的溶液、为了洗涤植物而使用后的液体、从植物提取的液体、为了洗涤农业材料而使用后的液体、或为了洗涤作业者的衣类或鞋而使用后的液体等。
或者,在想要调查哪种农药有效、想要对特定植物选择有效农药的情况下,也可以预先培养对该植物有害的病原性真菌,使用其培养液作为试验试样5。
本实施方式的检测装置作为目标的植物病原性真菌可举出例如,番茄病原性真菌、以及属于镰孢属(Fusarium属)、梨孢属(Pyricularia属)、或毛盘孢属(Colletotrichum属)的真菌等。作为番茄病原性真菌,可举出番茄灰葡萄孢(Botrytis cinerea)、番茄煤污假尾孢(Pseudocercospora fuligena)、番茄黄褐钉孢(Passalora fulva)等。
此外,植物病原性真菌的例子为尖孢镰孢(Fusarium oxysporum)、灰梨孢(Pyricularia grisea)、或盘长孢状刺盘孢(Colletotrichum gloeosporioides)等。这些植物病原性真菌引起根腐病(Root rot disease)、瘟病(blast)、炭疽病(Anthrax)、灰霉病(Gray mold)等。这些植物病原性真菌使植物枯萎。植物非病原性真菌的例子为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、产黄青霉(Penicillium chysogeum)、或米曲霉(Aspergillus oryzae)。
在本实施方式中,作为目标的植物优选为番茄,进而,作为植物病原性真菌,优选为选自番茄灰葡萄孢(Botrytis cinerea)、番茄煤污假尾孢(Pseudocercosporafuligena)、和番茄黄褐钉孢(Passalora fulva)中的至少一种。
另外,在本说明书中,术语“植物病原性”是指对植物具有病原性。术语“植物非病原性”是指对植物不具有病原性。即使真菌具有病原性,只要对植物不具有病原性,则该真菌是“植物非病原性”。换言之,只要真菌对植物不产生不良影响,则该真菌是“植物非病原性”。术语“植物非病原性”所包含的前缀“非”不修饰“植物”,前缀“非”修饰“病原性”。
在本实施方式的检测装置中,设置在上述人工细胞壁2的下部的培养基层6如上述那样由在培养基容器4内叠层的多个层构成。作为用作培养基层6的培养基,只要是可以培养真菌的培养液,就没有特别限定,可以使用一般的培养基、培养液。例如,可以使用马铃薯葡萄糖琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基等,但为了叠层多个层,期望为固体。另外,为了加速真菌的培养,可以不仅在培养基层6中添加培养液,而且也在上述试验试样5中添加培养液。
为了易于进行观察,上述培养基容器4优选为玻璃制或由透明的树脂等制成的容器。形状没有特别限定,可以为圆筒型、方形等。
在本实施方式中,在该培养基层6中与培养基一起投入农药原药。在具有多个装置所具有的器件的情况下,在各器件中分别投入不同的农药原药。作为农药原药,只要是想要调查是否为对所希望的植物有效的农药的农药原药,就可以没有特别限定地使用。
可以使用例如,春雷霉素(Kasugamycin hydrochloride monohydrate)、嘧菌胺(Mepanipyrim)、吡噻菌胺(Penthiopyrad)、氟菌唑(Triflumizole)、苯醚甲环唑(Difenoconazole)、胺苯吡菌酮(Fenpyrazamine)、异菌脲(Iprodione)、咯菌腈(Fludioxonil)、四氯间苯二腈(TPN)、双胍三辛烷基苯磺酸盐(Iminoctadinealbesilate)、克菌丹(Captan)、甲基硫菌灵(Tiophanete-methyl)、苯菌灵(Benomyl)、乙霉威(Diethofencarb)、嘧菌酯(Azoxystrobin)、多抗霉素(Polioxin)等。
培养基层6由多个层构成,在各个层中包含不同浓度的农药原药。通过这样地制作农药浓度的梯度,在最上层配置无农药培养基,从而在试验试样中包含病原性真菌的情况下,贯通了上述人工细胞壁的真菌从无农药培养基进一步向下伸长菌丝。可以判定该菌丝的生长停止的层中的农药浓度为对该真菌的有效的农药浓度。另外,在该真菌使菌丝生长直到最下层的包含基准量的农药的培养基的情况下,判断该农药原药对该真菌不是有效的。
培养基层6所包含的层的数目虽然在图1中为4层,但没有特别限定,可以根据需要来适当设定。此外,关于各层所包含的农药浓度,也只要使最下层为基准量,将包含从基准量进行稀释后的浓度的农药的多个层从下向上从浓度高的层起依次叠层,包含不含农药的层作为最上层,则中间层中的农药浓度就能够适当设定。
对于本实施方式的检测装置,在经过了一定培养期间后,观察在与上述人工细胞壁2的纤维素膜23的背面接触的培养基层是否出现植物病原性真菌,从而可以检测试样中有无植物病原性真菌,此外,通过是否出现真菌,可以确认该器件所包含的农药原药是否有效,进一步通过观察该真菌的菌丝生长到哪个培养基层,可以判定上述农药的有效浓度。
为了进行该观察,本实施方式的检测装置在器件1的侧面(前)具备如图5和图6所示那样的光学观察部7。作为光学观察部7,可以使用光学显微镜等。
真菌的培养期间没有特别限定,根据叠层的农药培养基的数目、各层的厚度变化而变化,但通常优选为72小时以上。此外,关于培养温度,优选为20~28℃左右。
本实施方式的检测装置具备多个图1所示那样的至少由试验试样投入部3、人工细胞壁2和培养基层6构成的器件1。关于多个器件1的配置/排列,例如,可以如图3所示配置在圆周上,也可以如图4所示直线排列地配置。关于器件1的配置,只要是通过光学观察部可以从横向观察培养基层那样的配置,就没有特别限定。
图3为在圆周上配置了本实施方式的器件1的情况下的俯视图(上)和截面图(下)。此外,图4为直线排列地配置了本实施方式的器件1的情况下的截面图(上)和俯视图(下)。
本实施方式的检测装置优选具有多个上述那样的器件,优选在该多个器件之中的至少一个器件的培养基层中不包含农药原药。例如,在后述图5和6中在表示为“空白组”的器件中不包含农药原药。空白组的器件可以设置一个或多个。对空白组的器件的位置,优选以能够进行掌握、判别的方式设置。
本实施方式的检测装置在多个各器件被配置在圆周上的情况下,如图5所示,优选配置在圆周上的上述器件沿水平方向旋转,并且上述光学观察部7被固定在特定场所,在通过旋转而各器件1到达该光学观察部7时,从器件的横向观察在培养基层6是否出现菌。
此外,在多个各器件直线排列地配置的情况下,如图6所示,可以不使器件移动而使光学观察部7左右移动进行各器件的观察。
这样,在任何情况下,光学观察部7都可以仅设置一个,之后可以使器件旋转,或使光学观察部7移动来检测培养基层6中有无真菌。
检测(光学观察)优选从空白组(blank,不包含农药原药)的器件开始。首先观察空白组,在空白组确认不到菌丝的生长时,可以判断为在该试验试样中不存在病原性真菌类而可以停止其以后的检测。只有在上述空白组中确认到菌丝的生长的情况下,其以后才可以依次检测各农药原药是否有效,因此也可以有效率地抑制成本。
各农药原药的配置顺序没有特别限定,但优选从被认为耐性风险低的农药原药起准备配置。具体而言,例如,在检测番茄的病原性真菌的情况下,优选依次配置TPN、克菌丹、双胍三辛烷基苯磺酸盐、胺苯吡菌酮、咯菌腈。然后,期望配置耐性风险为中~高(=易于出现耐性菌)的农药原药。具体而言,优选依次配置例如春雷霉素、嘧菌胺、吡噻菌胺、嘧菌酯、多抗霉素、氟菌唑、苯醚甲环唑、异菌脲、甲基硫菌灵、苯菌灵、乙霉威。
农药原药的数目也根据作为对象的病原性真菌不同而不同,例如,在仅使番茄煤污假尾孢(Pseudocercospora fuligena)为检测对象的情况下,可以将农药原药的数目减少到5种。
以上,根据已说明那样的本实施方式的检测装置,可以从器件中的真菌的生长繁殖状况提示有效果的农药和该农药的有效浓度。此外,可以认为也能够从农药的效果模式鉴定病原性真菌的种类。进一步,可以认为通过积累检测结果的数据进行整理,也可以暗示在真菌中抗性菌株的出现。
(病原性真菌的检测方法)
进一步,在本发明中包含植物病原性真菌的检测方法,其包含下述步骤:使用上述那样的检测装置,选择性地检测植物病原性真菌。
本实施方式的植物病原性真菌的检测方法只要使用上述检测装置,就对其它工序没有特别限定,例如包含下述工序:向上述检测装置的试验试样投入部3投入试验试样的工序;将试验试样在检测装置内静置的工序(进行培养的工序);静置后,对上述检测装置的人工细胞壁2(纤维素膜23)的下部进行观察的工序;以及在上述纤维素膜23的下部、和/或培养基层6观察到真菌的菌丝的情况下,判定为上述试验试样包含植物病原性真菌的工序。
(农药和有效农药浓度的选择方法)
此外,在本发明中包含农药浓度的选择方法,其使用上述那样的检测装置,选择有效的农药原药和农药浓度。
本实施方式的农药浓度的选择方法只要使用上述检测装置,就对其它工序没有特别限定,但优选至少包含下述工序,例如,
·向除空白组以外的多个器件的培养基层6的最上层以外的层分别以基准量和从基准量进行稀释后的浓度投入各不相同的农药原药的工序;
·向空白组的器件的试验试样投入部3投入试验试样5的工序;将试验试样5在检出装置内静置的工序(进行培养的工序);静置后,对上述检测装置的培养基层6进行观察的工序;
·在上述培养基层6观察到真菌的情况下,则认为上述试验试样5包含植物病原性真菌,使器件移动,在包含接下来的农药原药的器件中的培养基层6中,观察真菌使菌丝生长到哪个层的工序;
·判定在上述培养基层6中菌丝的生长停止的层中的农药浓度为对该真菌有效的农药浓度的工序。
本说明书如上所述公开了各种方案的技术,但以下汇总其中主要的技术。
本发明的一个方案涉及的植物病原性真菌的检测装置,其特征在于,具备器件和观察部,上述器件具备人工细胞壁、设置在上述人工细胞壁的上部的试验试样投入部、和设置在上述人工细胞壁的下部的培养基层,利用所述观察部从横向观察上述培养基层,上述培养基层中包含各不相同的农药原药,并且在上述培养基层中,包含基准量和从基准量进行稀释后的浓度的农药的多个层从下向上从浓度高的层起依次叠层,并且具备不包含农药的层作为最上层。
通过这样的构成,可以提供能够简易并且安全地选择性地检测植物病原性真菌的装置和方法。此外,可以在真菌性病害的发病前选择有效的农药和农药浓度。由此,除了抑制撒布无益的农药的劳力、过剩投药等以外,还具有能够防止不必要地撒布高浓度的农药,可以减少农药量的可能性,对于抑制残留农药等是有效的。
此外,在上述检测装置中,上述人工细胞壁优选至少具备具有孔径2~7μm的贯通孔、并且厚度5~150μm的基板、和设置在该基板的一面的厚度0.5~2μm的纤维素膜。由此,可以认为能够更可靠地获得上述效果。
此外,在上述检测装置中,优选多个上述器件在圆周上或直线排列地配置。由此,更容易从横向观察各器件的培养基层。
此外,在上述检测装置中,优选在多个器件之中的、至少一个器件的培养基层中不包含农药原药。通过这样的构成,具有下述优点:在试验试样不包含病原性真菌的情况下可以对其进行早期判定,可以省去其以后的无益的检查。
进一步,在上述检测装置中,优选上述器件移动,并且上述观察部被固定,利用该观察部从横向观察各器件。由此,可以认为能够更高效地获得上述效果。
进一步,在上述检测装置中,优选作为对象的植物为番茄,此外,检测对象为选自番茄灰葡萄孢(Botrytis cinerea)、番茄煤污假尾孢(Pseudocercospora fuligena)、和番茄黄褐钉孢(Passalora fulva)中的至少一种。由此,可以认为能够更加发挥上述那样的效果。
此外,上述培养基层所包含的农药原药优选为选自春雷霉素(Kasugamycinhydrochloridemonohydrate)、嘧菌胺(Mepanipyrim)、吡噻菌胺(Penthiopyrad)、氟菌唑(Triflumizole)、苯醚甲环唑(Difenoconazole)、胺苯吡菌酮(Fenpyrazamine)、异菌脲(Iprodione)、咯菌腈(Fludioxonil)、四氯间苯二腈(TPN)、双胍三辛烷基苯磺酸盐(Iminoctadin ealbesilate)、克菌丹(Captan)、甲基硫菌灵(Tiophanete-methyl)、苯菌灵(Benomyl)、乙霉威(Diethofencarb)、嘧菌酯(Azoxystrobin)、和多抗霉素(Polioxin)中的1种以上。由此,可以认为能够更加发挥上述那样的效果。
此外,本发明的另一方案涉及的植物病原性真菌的检测方法,其特征在于,包含下述步骤:使用上述检测装置,选择性地检测植物病原性真菌。
本发明的另一方案涉及的农药的选择方法,其特征在于,包含下述步骤:使用上述检测装置,选择有效的农药浓度。
以下,通过实施例进一步具体地说明本发明,但本发明的范围不限定于此。
(实施例)
(灰葡萄孢(Botrytis cinerea)的培养)
作为植物病原菌的一种且为番茄灰霉病的病原真菌的灰葡萄孢(Botrytiscinerea)被接种于马铃薯葡萄糖琼脂培养基(Difco(注册商标)Potato Dextrose Agar)。接着,培养基在摄氏25度的温度下静置1周。灰葡萄孢(Botrytis cinerea)由属于岐阜大学应用生物科学部的清水准教授提供。接着,将菌丝充分生长了的灰葡萄孢(Botrytiscinerea)培养马铃薯葡萄糖琼脂培养基在黑光照射下放置4天以上后,在室温环境放置2周以上,促进了孢子形成。在进行了上述处理的灰葡萄孢(Botrytis cinerea)培养马铃薯葡萄糖琼脂培养基中滴加数ml灭菌纯水,用铂环、笔等擦蹭菌丝表面,获得了破碎菌丝/孢子混合悬浮液。以下,将该水溶液称为“植物病原性真菌水溶液”。
(农药浓度三水平叠层培养基的准备)
在马铃薯葡萄糖琼脂培养基中改变投入量(浓度)而添加农药主成分试剂克菌丹(Captan)(东京化成工业株式会社(TCI)制),制作出3层成为基础的培养基。克菌丹调制为基准使用浓度的100倍浓度的DMSO(SIGMA-ALDRICH社制)溶液,相对于每1L马铃薯葡萄糖琼脂培养基,各投入混合0、2、10ml,制作出克菌丹浓度为0(无配合)、基准使用量的5分之1、基准使用量这样的三个水平的培养基。在本实施例中,将包含上述三个水平的克菌丹的马铃薯葡萄糖琼脂培养基从下部起按照克菌丹基准量培养基、基准量的5分之1培养基、克菌丹无配合培养基的顺序叠层,用玻璃的圆筒形或方形的成型构件挖通,制成实施例的器件。
(不添加农药的叠层培养基的准备)
进一步为了进行比较,作为具有仅包含不添加农药的培养基的培养基层的器件(空白组),将不添加克菌丹的马铃薯葡萄糖琼脂培养基重叠三层而成的物质与上述同样地进行成型而使用。
(对器件添加植物病原性真菌水溶液和培养)
在上述中制作的、内部收纳农药浓度三水平叠层培养基的器件(实施例1)和收纳不添加农药的叠层培养基的器件(空白组)的最上部,即在农药浓度三水平叠层培养基中、在不添加克菌丹的马铃薯葡萄糖琼脂培养基上分别添加了包含200个灰葡萄孢(Botrytiscinerea)的菌丝片和孢子的、植物病原菌水溶液200微升。
添加了植物病原菌水溶液的各器件在摄氏25度的温度下静置7天进行了培养。
(结果/考察)
在培养后,将实施例的器件和空白组的器件从各个透明构件的侧面用显微镜观察了叠层琼脂培养基。将其显微镜照片示于图7中。左侧为空白组的器件的结果,右侧为实施例的器件的结果。
如图7所示,通过经由光学显微镜的目视捕捉到菌丝从位于最上部的灰葡萄孢(Botrytis cinerea)菌丝团块5侵入到各个器件中的叠层琼脂培养基内部进行生长的情形。
在空白组的器件的照片中,在叠层的马铃薯葡萄糖琼脂培养基的内部,观察到灰葡萄孢(Botrytis cinerea)的菌丝到达第三层,与此相对,对于实施例的器件,对于表层的克菌丹无配合层61观察到旺盛的灰葡萄孢(Botrytis cinerea)的菌丝的侵入/培养基内部的菌丝的繁殖,与此相对,对于第二层的克菌丹的基准使用量的1/5配合层63,在培养基内部确认不到灰葡萄孢(Botrytis cinerea)的菌丝,为透明状态。在其下部的克菌丹基准量配合层64也确认不到菌丝。这显示出农药成分克菌丹以基准使用量的5分之1的量对灰葡萄孢(Botrytis cinerea)显示出效果。
通过以上试验显示出,根据本发明,能够选择性地判定试验试样是否含有植物病原性真菌,并且能够提示对该植物病原性真菌的有效农药浓度。通过该结果,可以显示出减少农药量的可能性。
产业可利用性
本公开的具有农药选择功能的植物病原性真菌的检测装置能够选择性地判定试验试样是否含有植物病原性真菌,并且能够在真菌性病害发病前提示对该植物病原性真菌的有效农药浓度。因此,本公开的检测装置可以在各种农业等的技术领域中适合地利用。
符号的说明
1 器件
2 人工细胞壁
3 试验试样投入部
4 培养基容器
5 试验试样
6 培养基层
7 光学观察部
21 基板
22 贯通孔
23 纤维素膜
61 无农药培养基层
62 配合基准量的1/50农药的培养基层
63 配合基准量的1/5农药的培养基层
64 配合基准量农药的培养基层。
Claims (11)
1.一种植物病原性真菌的检测装置,其特征在于,
其具备器件和观察部,
所述器件具备人工细胞壁、设置在所述人工细胞壁的上部的试验试样投入部、和设置在所述人工细胞壁的下部的培养基层,
利用所述观察部从横向观察所述培养基层,
所述培养基层中包含各不相同的农药原药,并且,
在所述培养基层中,包含基准量和从基准量进行稀释后的浓度的农药的多个层从下向上从浓度高的层起依次叠层,并且具备不包含农药的层作为最上层。
2.根据权利要求1所述的检测装置,所述人工细胞壁至少具备:
具有孔径为2~7μm的贯通孔、并且厚度为5~150μm的基板,以及
设置在该基板的一面的厚度为0.5~2μm的纤维素膜。
3.根据权利要求1或2所述的检测装置,多个所述器件配置在圆周上。
4.根据权利要求1或2所述的检测装置,多个所述器件直线排列地配置。
5.根据权利要求3或4所述的检测装置,在多个所述器件之中的、至少一个器件的培养基层中不包含农药原药。
6.根据权利要求1~5中任一项所述的检测装置,其特征在于,
所述器件移动,并且,
所述观察部被固定,利用该观察部从横向观察各器件。
7.根据权利要求1~6中任一项所述的检测装置,作为对象的植物为番茄。
8.根据权利要求7所述的检测装置,检测对象为选自番茄灰葡萄孢即Botrytiscinerea、番茄煤污假尾孢即Pseudocercospora fuligena、和番茄黄褐钉孢即Passalorafulva中的至少一种。
9.根据权利要求1~8中任一项所述的检测装置,所述培养基层所包含的农药原药为选自春雷霉素即Kasugamycin hydrochloride monohydrate、嘧菌胺即Mepanipyrim、吡噻菌胺即Penthiopyrad、氟菌唑即Triflumizole、苯醚甲环唑即Difenoconazole、胺苯吡菌酮即Fenpyrazamine、异菌脲即Iprodione、咯菌腈即Fludioxonil、四氯间苯二腈即TPN、双胍三辛烷基苯磺酸盐即Iminoctadine albesilate、克菌丹即Captan、甲基硫菌灵即Tiophanete-methyl、苯菌灵即Benomyl、乙霉威即Diethofencarb、嘧菌酯即Azoxystrobin、和多抗霉素即Polioxin中的1种以上。
10.一种检测方法,其包含下述步骤:使用权利要求1~9中任一项所述的检测装置,选择性地检测植物病原性真菌。
11.一种农药浓度的选择方法,其包含下述步骤:使用权利要求1~9中任一项所述的检测装置,选择有效的农药浓度。
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