CN111826280B - 培养基处理系统和培养基处理方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及培养基处理系统和培养基处理方法。消除根据每个培养基的种类而调整各液的分注条件的必要性,易于进行分注条件的设定作业。培养基处理系统包括:提取装置配置部;试样容器配置部;试剂容器配置部;试样分注部;试剂分注部;过滤部;输送臂;以及控制部,其构成为控制所述试样分注部、所述试剂分注部以及所述输送臂的动作以进行试样的除蛋白质处理,所述控制部构成为在向空的所述过滤容器分注甲醇溶液而进行所述过滤器的调节之后,向所述过滤容器分注试样,向所述过滤容器内的试样添加作为除蛋白质剂的乙腈溶液,之后,利用所述过滤部进行所述过滤处理。
Description
技术领域
本发明涉及用于进行用于细胞的培养的培养基的除蛋白质处理的培养基处理系统和培养基处理方法。
背景技术
有时为了判断正在培养的细胞的状态(分化/未分化等),从培养细胞中的容器提取培养基的上清液,对该培养基实施除蛋白质处理,然后进行液相色谱分析。为了进行培养基的除蛋白质处理,使用专利文献1所公开那样的预处理装置。
现有技术文献
专利文献
专利文献1:WO2016/017042A1
发明内容
发明要解决的问题
培养基的除蛋白质处理通过使用在内部设有过滤器的过滤容器来进行。具体而言,向过滤容器分注调节剂而进行过滤器的调节处理,然后向过滤容器分注内标试样、作为试样的培养基、除蛋白质剂并搅拌,之后,向过滤容器内施加压力而使过滤容器内的液体通过过滤器,将滤液回收于回收容器。
在至今为止的除蛋白质处理中,使用相同种类的有机溶剂作为调节剂和除蛋白质剂,但用于细胞的培养的培养基根据细胞的种类而不同,因此获得的滤液的量(回收率)根据培养基的种类而不同。因此,以往,需要根据培养基的种类而准备较多的为了测量而准备的培养基的液量。然而,也存在培养所使用的培养基为少量的情况,也存在难以准备测量所需要的培养基的液量的情况。
本发明是鉴于上述问题而完成的,其目的在于,能够提高滤液的回收率,使测量所使用的培养基的液量为尽量少的量。
用于解决问题的方案
本发明人发现:在除蛋白质处理中,通过使用甲醇溶液作为调节剂,使用乙腈溶液作为除蛋白质剂,能够与培养基的种类无关地获得较高的回收率。本发明是基于这样的见解而完成的。
本发明的培养基处理系统包括:提取装置,其包括过滤容器和回收容器,该过滤容器上方开放,在内部具有用于进行用于细胞培养的培养基的除蛋白质处理的过滤器,并且在下端具有用于向下方提取通过了所述过滤器的滤液的提取口,该回收容器配置于所述过滤容器的正下方,用于回收从所述过滤容器的所述提取口提取的滤液;提取装置配置部,其供所述提取装置以空的状态配置;试样容器配置部,其供试样容器配置,该试样容器收纳作为试样的应实施除蛋白质处理的培养基;试剂容器配置部,其供试剂容器配置,该试剂容器至少分别收纳作为试剂的甲醇溶液、乙腈溶液;试样分注部,其构成为从配置于所述试样容器配置部的试样容器提取试样,向配置于预定的试样分注位置的所述过滤容器分注提取的试样;试剂分注部,其构成为从配置于所述试剂容器配置部的试剂容器提取期望的试剂,向配置于预定的试剂分注位置的所述过滤容器分注提取的试剂;过滤部,其具有过滤口,该过滤口供在所述过滤容器的正下方配置有所述回收容器的状态的所述提取装置设置,该过滤部用于进行设置于所述过滤口的所述提取装置的所述过滤容器内的溶液的过滤处理并将滤液回收于所述回收容器;输送臂,其构成为保持配置于所述提取装置配置部的所述提取装置的所述过滤容器和/或所述回收容器,向所述试样分注位置、所述试剂分注位置以及所述过滤部输送保持的所述过滤容器和/或所述回收容器;以及控制部,其构成为控制所述试样分注部、所述试剂分注部以及所述输送臂的动作以进行试样的除蛋白质处理,所述控制部构成为在向空的所述过滤容器分注甲醇溶液而进行所述过滤器的调节之后,向所述过滤容器分注试样,向所述过滤容器内的试样添加作为除蛋白质剂的乙腈溶液,之后,利用所述过滤部进行所述过滤处理。
本发明的培养基处理方法是使用提取装置的方法,所述提取装置包括过滤容器和回收容器,该过滤容器上方开放,在内部具有用于进行用于细胞培养的培养基的除蛋白质处理的过滤器,并且在下端具有用于向下方提取通过了所述过滤器的滤液的提取口,该回收容器配置于所述过滤容器的正下方,用于回收从所述过滤容器的所述提取口提取的滤液,在所述培养基处理方法中依次执行如下步骤:调节步骤,在该步骤中,向空的所述过滤容器分注甲醇溶液来进行所述过滤器的调节;试样分注步骤,在该步骤中,向所述过滤容器分注试样;除蛋白质剂分注步骤,在该步骤中,向所述过滤容器内的试样添加作为除蛋白质剂的乙腈溶液;以及过滤步骤,在该步骤中,以在所述过滤容器的正下方配置有所述回收容器的状态进行所述过滤容器内的溶液的过滤处理并将滤液回收于所述回收容器。
发明的效果
在本发明的培养基处理系统中,使用甲醇溶液作为用于进行过滤器的调节的调节剂,使用乙腈溶液作为除蛋白质剂,因此能够与作为试样的培养基的种类无关地以较高的回收率回收滤液,能够使测量所使用的培养基的液量为尽量少的量。
在本发明的培养基处理方法中,使用甲醇溶液作为用于进行过滤器的调节的调节剂,使用乙腈溶液作为除蛋白质剂,因此能够与作为试样的培养基的种类无关地以较高的回收率回收滤液,能够使测量所使用的培养基的液量为尽量少的量。
附图说明
图1是表示培养基处理系统的一实施例的除蛋白质处理部的俯视图。
图2A是表示在该实施例中使用的提取装置的过滤容器的一例的主视图。
图2B是图2A的过滤容器的剖视图。
图3A是表示该提取装置的回收容器的一例的主视图。
图3B是图3A的回收容器的剖视图。
图4是用于说明该实施例的培养基处理系统的动作的流程图。
图5是表示该实施例的培养基处理系统整体的结构的一例的概略结构图。
附图标记说明
1、除蛋白质处理部;2、试样容器配置部;4、样品架;6、试样容器;8、试剂容器配置部;10、试剂容器;12、提取装置配置部;20、采样臂;21、采样嘴;22、29、轴;24、输送臂;25、保持部;26、试剂臂;27、试剂嘴;30、过滤部;32、分注口;34、废弃口;36、搅拌部;36a、搅拌口;38、40、调温部;42、转送装置;43、转送口;44、移动部;45、清洗口;50、过滤容器;51、提取口;52、过滤器;54、回收容器;100、控制部;200、LC部;202、试样注入部;204、分析部;300、MS;400、系统管理装置。
具体实施方式
以下,说明培养基处理系统和培养基处理方法的一实施例。
在图1中表示培养基处理系统的除蛋白质处理部的一例。
除蛋白质处理部1使用由过滤容器50和回收容器54构成的提取装置进行培养基的除蛋白质处理。过滤容器50和回收容器54由输送臂24输送。对于输送臂24而言,在顶端侧具有用于保持过滤容器50和回收容器54的保持部25,以保持其基端部的铅垂轴29为旋转中心而以保持部25描画圆弧状的轨道的方式在水平面内旋转。
设有用于设置收纳了作为试样的培养基的试样容器6的试样容器配置部2,在其附近设有用于从设置于试样容器配置部2的试样容器6吸入培养基并向过滤容器50分注的采样臂20(试样分注部)。用于保持多个试样容器6的样品架4呈圆环状设置于试样容器配置部2。试样容器配置部2以使样品架4在其周向上移动的方式在水平面内旋转,利用试样容器配置部2的旋转将期望的试样容器6配置于预定的吸入位置。吸入位置是沿着采样臂20的顶端的采样嘴21的轨道的位置,是用于利用采样嘴21吸入培养基的位置。
铅垂轴22贯穿采样臂20的基端部,采样臂20进行以轴22为中心的水平面内的旋转动作和沿着轴22的铅垂方向的上下运动。采样嘴21以其顶端朝向铅垂下方的方式保持于采样臂20的顶端侧,利用采样臂20进行水平面内的描画圆弧状的轨道的移动和铅垂方向的上下运动。
在采样嘴21的轨道上且是输送臂24的保持部25的轨道上的位置设有分注口32。分注口32是用于利用采样嘴21对空的过滤容器50分注培养基的试样分注位置。空的过滤容器50由输送臂24设置于分注口32。另外,分注口32也是用于向收纳了培养基的过滤容器50添加各种试剂的试剂分注位置。
在试样容器配置部2的内侧设有用于设置试剂容器10的试剂容器配置部8,设有用于从配置于试剂容器配置部8的试剂容器10提取试剂的试剂臂26(试剂分注部)。对于试剂臂26而言,基端由与输送臂24共用的铅垂轴29支承,在水平面内旋转且进行上下运动。在试剂臂26的顶端部设有试剂嘴27。试剂嘴27以其顶端朝向铅垂下方的状态设置,进行描画与输送臂24的保持部25相同的圆弧状的轨道的水平面内的移动和上下运动。试剂嘴27的基端连接于进行液体的吸入和喷出的注射泵,从顶端进行试剂的吸入和喷出。
试剂容器配置部8与试样容器配置部2独立地在水平面内旋转。多个试剂容器10呈圆环状配置于试剂容器配置部8,通过试剂容器配置部8旋转而沿着其旋转方向输送试剂容器10,将期望的试剂容器10配置于预定的试剂提取位置。试剂提取位置是沿着试剂臂26的试剂嘴27的轨道的位置,是用于利用试剂嘴27进行试剂的吸入的位置。试剂嘴27在吸入预定的试剂之后,对设置于分注口32的过滤容器50分注吸入的试剂。在配置于试剂容器配置部8的试剂中包括甲醇溶液、乙腈溶液、内标溶液。
在与试样容器配置部2和试剂容器配置部8不同的位置设有提取装置配置部12。将未使用的过滤容器50和回收容器54重叠的状态的多组提取装置呈圆环状设置于提取装置配置部12。提取装置配置部12在水平面内旋转而使提取装置在圆周方向上移动,将任意的一组提取装置配置于沿着输送臂24的保持部25的轨道的位置。输送臂24能够保持配置于沿着保持部25的轨道的位置的未使用的过滤容器50和/或回收容器54。
使用图2A、图2B、图3A以及图3B说明构成提取装置的过滤容器50和回收容器54。
如图2A和图2B所示,过滤容器50是上方开放的圆筒状的容器。在内部空间的底部设有过滤器52,在下端设有用于提取通过了过滤器52的滤液的提取口51。过滤器52是用于通过过滤去除作为试样的培养基所含有的蛋白质的过滤器,由PTFE、丙烯酸共聚物膜等构成。如图3A和图3B所示,回收容器54收纳过滤容器50的下部,是用于回收从过滤容器50的提取口51提取的滤液的圆筒状的容器。
回到图1继续说明。除蛋白质处理部1包括过滤部30、搅拌部36、调温部38以及调温部40。过滤部30设于提取装置配置部12的内侧的两个位置。搅拌部36包括3个搅拌口36a,用于搅拌设置于搅拌口36a的过滤容器50内。调温部38用于进行过滤容器50的调温,调温部40用于进行回收容器54的调温。调温部36、40在圆弧上排列地配置。
过滤部30包括过滤口,该过滤口用于设置在过滤容器52的正下方配置有回收容器54的状态,即,在回收容器54上重叠有过滤容器52的状态的提取装置。过滤部30包括对设置于过滤口的过滤容器52内的液体施加压力(例如负压)的机构。对过滤容器52内的液体施加负压的机构的结构可以与专利文献1所公开的结构相同。
搅拌部36具有使各搅拌口36a独立地在水平面内周期性地进行动作的机构,搅拌配置于各搅拌口36a的过滤容器50内。搅拌部36的结构可以与专利文献1所公开的搅拌部的结构相同。
除蛋白质处理部1还包括转送装置42,该转送装置42用于向与除蛋白质处理部1相邻配置的LC部200(参照图5)侧转送回收于回收容器54的滤液。转送装置42包括移动部44,该移动部44利用具有齿轮齿条机构的驱动机构在水平面内向一方向(图1的箭头的方向)移动。在移动部44的上表面设有转送口43,该转送口43用于设置收纳了滤液的回收容器54。
在不进行滤液的向LC部200侧的转送时,转送口43配置于沿着输送臂24的保持部25的轨道的位置(图的实线所示的位置),在该位置处,利用输送臂24进行回收容器54相对于转送口43的设置、回收容器54的自转送口43的回收。
在分注口32的附近沿着输送臂24的保持部25的轨道的位置设有废弃口34,该废弃口34用于废弃使用过的过滤容器50和回收容器54。另外,在沿着采样嘴21的轨道的位置设有用于进行采样嘴21的清洗的清洗口45。
除蛋白质处理部1的试样容器配置部2、试剂容器配置部8、提取装置配置部12、采样臂20、输送臂24、试剂臂26、过滤部30、搅拌部36、调温部38、40以及转送装置42的动作由控制部100控制。控制部100例如是在设于除蛋白质处理部1的计算机电路中执行程序而获得的功能。
使用图1及图4的流程图说明从培养基的脱蛋白质处理到LCMS分析的流程。
首先,利用输送臂24向分注口32输送空的过滤容器50,利用试剂嘴27向过滤容器50分注作为调节剂的甲醇溶液(步骤101)。由此,进行过滤容器50内的过滤器52的调节。甲醇溶液的分注量可以与实施脱蛋白质处理的培养基的种类无关地设为恒定。之后,向过滤容器50利用试剂嘴27分注内标溶液(步骤102),并且利用采样嘴21分注作为试样的培养基(步骤103)。此处的内标溶液的分注量、试样的分注量也可以与培养基的种类无关地设为恒定。
并且,利用试剂嘴27分注作为除蛋白质剂的乙腈溶液(步骤104)。此处的除蛋白质剂的分注量可以与培养基的种类无关地设为恒定。
接着,利用输送臂24向搅拌部36的搅拌口36a输送过滤容器50,搅拌过滤容器50内(步骤105)。之后,利用输送臂24以在回收容器54上重叠有过滤容器50的状态向过滤部30的过滤口输送过滤容器50和回收容器54,对过滤容器50内的溶液施加压力而将滤液回收于回收容器54(步骤106)。在过滤处理结束之后,利用输送臂24向废弃口34输送使用过的过滤容器50而废弃。
利用输送臂24向转送装置42的转送口43输送回收了滤液的回收容器54(步骤107),向LC部200转送回收容器54(步骤108)。在LC部200中,利用取样用的针吸入一定量的滤液(步骤109),将滤液以预定的倍率稀释(步骤110)。将稀释的滤液注入液相色谱分析的分析流路,进行液相色谱质谱分析(LCMS分析)(步骤111)。
本发明人通过实验获得如下见解:使用甲醇溶液作为过滤器52的调节剂,使用乙腈溶液作为除蛋白质剂,能够以较高的回收效率获得滤液。将该实验数据示于以下的表1。
【表1】
在上述实验中,针对使用甲醇溶液作为调节剂(Con)和除蛋白质剂(Dep)的情况、使用乙腈溶液作为调节剂(Con)和除蛋白质剂(Dep)的情况、使用甲醇溶液作为调节剂(Con)且使用乙腈溶液作为除蛋白质剂(Dep)的情况,分别求出各种培养基的滤液的回收量(和回收率)。在任一情况下均是,向过滤容器50分注10μL~20μL的调节剂、20μL~35μL的内标溶液(纯水)、20μL的培养基、240μL~280μL的除蛋白质剂,过滤容器50内的溶液总量成为310μL~330μL。
由表1可知,在使用甲醇溶液作为调节剂(Con)和除蛋白质剂(Dep)的情况下,mTeSR1获得良好的滤液回收率,另一方面,另外的3种培养基的回收率较低。在使用乙腈溶液作为调节剂(Con)和除蛋白质剂(Dep)的情况下,AK03N、FBS的培养基获得良好的滤液回收率,另一方面,另外的两种培养基的回收率较低。相对于此,在使用甲醇溶液作为调节剂(Con)且使用乙腈溶液作为除蛋白质剂(Dep)的情况下,任一培养基均获得良好的滤液回收率。由此可知,使用甲醇溶液作为调节剂(Con),使用乙腈溶液作为除蛋白质剂(Dep),即使与培养基的种类无关地将调节剂、培养基、内标溶液、除蛋白质剂各自的向过滤容器50分注的分注量设为恒定,也能够获得良好的滤液回收率。
根据上述的见解,在该实施例中,使用甲醇溶液作为过滤器52的调节剂,使用乙腈溶液作为除蛋白质剂,与培养基的种类无关地将调节剂、培养基、内标溶液、除蛋白质剂各自的向过滤容器50分注的分注量设为恒定。由此,使用者不需要根据每个培养基的种类而设定向过滤容器50分注的溶液的种类、量,易于进行分注条件的设定。
接着,使用图5说明包括除蛋白质处理部1的培养基处理系统整体的结构的一例。
与在上述实施例中说明的除蛋白质处理部1相邻地配置LC部200,并且与该LC部200相邻地配置质谱仪(MS)200。除蛋白质处理部1、LC系统200以及MS300由共同的系统管理装置400进行其动作管理。系统管理装置400是具备用于进行除蛋白质处理部1、LC系统200以及MS300的控制、管理的软件的专用的计算机或泛用的个人计算机。
LC部200包括试样注入部202和分析部204。试样注入装置202构成为从由除蛋白质处理部1的转送装置42向LC部200侧转送来的回收容器54提取一定量的滤液,将提取的滤液以预定的倍率稀释,注入液相色谱分析用的分析流路。在转送装置42的移动部44向LC部200侧移动时,设置于移动部44的转送口43的回收容器54配置于试样注入装置202内的预定的位置。分析部204构成为进行由试样注入部202注入的滤液的液相色谱分析。
在以上说明的实施例中,培养基处理系统由除蛋白质处理部1、LC部200、MS300以及系统管理装置400构成,但本发明不限定于此,培养基处理系统也可以由包括除蛋白质处理部1在内的一部分要素构成。本发明的培养基处理系统和培养基处理方法的实施方式如下。
本发明的培养基处理系统的实施方式包括:提取装置,其包括过滤容器和回收容器,该过滤容器上方开放,在内部具有用于进行用于细胞培养的培养基的除蛋白质处理的过滤器,并且在下端具有用于向下方提取通过了所述过滤器的滤液的提取口,该回收容器配置于所述过滤容器的正下方,用于回收从所述过滤容器的所述提取口提取的滤液;提取装置配置部,其供所述提取装置以空的状态配置;试样容器配置部,其供试样容器配置,该试样容器收纳作为试样的应实施除蛋白质处理的培养基;试剂容器配置部,其供试剂容器配置,该试剂容器至少分别收纳作为试剂的甲醇溶液、乙腈溶液;试样分注部,其构成为从配置于所述试样容器配置部的试样容器提取试样,向配置于预定的试样分注位置的所述过滤容器分注提取的试样;试剂分注部,其构成为从配置于所述试剂容器配置部的试剂容器提取期望的试剂,向配置于预定的试剂分注位置的所述过滤容器分注提取的试剂;过滤部,其具有过滤口,该过滤口供在所述过滤容器的正下方配置有所述回收容器的状态的所述提取装置设置,该过滤部用于进行设置于所述过滤口的所述提取装置的所述过滤容器内的溶液的过滤处理并将滤液回收于所述回收容器;输送臂,其构成为保持配置于所述提取装置配置部的所述提取装置的所述过滤容器和/或所述回收容器,向所述试样分注位置、所述试剂分注位置以及所述过滤部输送保持的所述过滤容器和/或所述回收容器;以及控制部,其构成为控制所述试样分注部、所述试剂分注部以及所述输送臂的动作以进行试样的除蛋白质处理,所述控制部构成为在向空的所述过滤容器分注甲醇溶液而进行所述过滤器的调节之后,向所述过滤容器分注试样,向所述过滤容器内的试样添加作为除蛋白质剂的乙腈溶液,之后,利用所述过滤部进行所述过滤处理。
在本发明的培养基处理系统的上述实施方式的第1形态中,使用甲醇溶液作为用于进行过滤器的调节的调节剂,使用乙腈溶液作为除蛋白质剂,因此能够与作为试样的培养基的种类无关地以较高的回收率回收滤液。因此,在本发明的培养基处理系统的上述实施方式的第1形态中,所述控制部能够构成为与作为所述试样的培养基的种类无关地向所述过滤容器分注恒定量的甲醇溶液、试样、乙腈溶液。根据这样的形态,不需要根据每个培养基的种类而调整各液的分注条件,易于进行分注条件的设定作业。
在本发明的培养基处理系统的上述实施方式的第2形态中,在所述试剂容器配置部配置有收纳内标溶液的标准溶液容器,所述控制部构成为在进行所述过滤器的调节之后且是向所述过滤容器分注试样之前向所述过滤容器内分注所述内标溶液。认为若在向过滤容器内分注甲醇溶液之后立刻分注培养基,则也有可能引起培养基与甲醇的急剧的反应而导致除蛋白质处理无法正常地进行,但通过在分注培养基之前预先分注内标溶液(例如纯水),能够缓和培养基与甲醇的急剧的反应,正常地进行除蛋白质处理。该第2形态能够与上述第1形态组合。
在上述第2形态中,所述控制部也可以构成为与作为所述试样的培养基的种类无关地向所述过滤容器内分注恒定量的所述内标溶液。
在本发明的培养基处理系统的上述实施方式的第3形态中,该培养基处理系统包括LC部,该LC部具有:试样注入部,其吸入一定量的通过所述过滤处理回收于所述回收容器的滤液并将其注入液相色谱分析用的分析流路;以及分析部,其用于进行利用所述试样注入部注入所述分析流路的滤液的液相色谱分析。在本发明的培养基处理系统中,在除蛋白质处理时,使用甲醇溶液作为过滤器的调节剂,使用乙腈溶液作为除蛋白质剂,因此能够获得较高的滤液回收率。因此,分析所需要的滤液量被可靠地回收于回收容器,因此能够可靠地吸入一定量的滤液并将其向分析流路注入。该第3形态能够与上述第1形态和第2形态自由地组合。
在上述第3形态中,所述试样注入部也可以构成为以预定的倍率稀释从所述回收容器吸入的一定量的滤液。
在本发明的培养基处理方法的实施方式中,使用提取装置,
所述提取装置包括:过滤容器,其上方开放,在内部具有用于进行用于细胞培养的培养基的除蛋白质处理的过滤器,并且在下端具有用于向下方提取通过了所述过滤器的滤液的提取口;以及回收容器,其配置于所述过滤容器的正下方,用于回收从所述过滤容器的所述提取口提取的滤液,
在该培养基处理方法中,依次执行如下步骤:
调节步骤,在该步骤中,向空的所述过滤容器分注甲醇溶液来进行所述过滤器的调节;
试样分注步骤,在该步骤中,向所述过滤容器分注作为试样的培养基;
除蛋白质剂分注步骤,在该步骤中,向所述过滤容器内的试样添加作为除蛋白质剂的乙腈溶液;以及
过滤步骤,在该步骤中,以在所述过滤容器的正下方配置有所述回收容器的状态进行所述过滤容器内的溶液的过滤处理,将滤液回收于所述回收容器。
在本发明的培养基处理方法的上述实施方式中,使用甲醇溶液作为用于进行过滤器的调节的调节剂,使用乙腈溶液作为除蛋白质剂,因此能够与作为试样的培养基的种类无关地以较高的回收率回收滤液。因此,在本发明的培养基处理方法的上述实施方式的第1形态中,在所述调节步骤中向所述过滤容器分注的甲醇溶液的量、在所述试样分注步骤中向所述过滤容器分注的试样的量、在所述除蛋白质剂分注步骤中向所述过滤容器分注的乙腈溶液的量能够分别与作为所述试样的培养基的种类无关地设为恒定。根据这样的形态,不需要根据每个培养基的种类而调整各液的分注条件,易于进行分注条件的设定作业。
在本发明的培养基处理方法的上述实施方式的第2形态中,在所述调节步骤之后且是所述试样分注步骤之前执行向所述过滤容器内分注内标溶液的标准溶液分注步骤。在向利用甲醇进行了调节的过滤器上分注培养基之前预先分注内标溶液(例如纯水),能够缓和培养基与甲醇的急剧的反应,正常地进行除蛋白质处理。该第2形态能够与上述第1形态组合。
在上述第2形态中,在所述标准溶液分注步骤中,能够与作为所述试样的培养基的种类无关地向所述过滤容器内分注恒定量的所述内标溶液。
在本发明的培养基处理方法的实施方式的第3形态中,在所述过滤步骤之后,执行如下步骤:注入步骤,在该步骤中,吸入一定量的通过所述过滤步骤回收于所述回收容器的滤液,将其注入液相色谱用的分析流路中;以及分析步骤,在该步骤中,进行通过所述滤液注入步骤注入所述分析流路中的滤液的液相色谱分析。在本发明的培养基处理方法中,在除蛋白质处理时,使用甲醇溶液作为过滤器的调节剂,使用乙腈溶液作为除蛋白质剂,因此能够获得较高的滤液回收率。因此,分析所需要的滤液量被可靠地回收于回收容器,因此能够可靠地吸入一定量的滤液并将其向分析流路注入。该第3形态能够与上述第1形态和第2形态自由地组合。
在上述第3形态中,在所述注入步骤中,也可以是,在吸入一定量的回收于所述回收容器的滤液之后,以预定的倍率稀释所述滤液。
Claims (12)
1.一种培养基处理系统,其中,
该培养基处理系统包括:
提取装置,其包括过滤容器和回收容器,该过滤容器上方开放,在内部具有用于进行用于细胞培养的培养基的除蛋白质处理的过滤器,并且在下端具有用于向下方提取通过了所述过滤器的滤液的提取口,该回收容器配置于所述过滤容器的正下方,用于回收从所述过滤容器的所述提取口提取的滤液;
提取装置配置部,其供所述提取装置以空的状态配置;
试样容器配置部,其供试样容器配置,该试样容器收纳作为试样的应实施除蛋白质处理的培养基;
试剂容器配置部,其供试剂容器配置,该试剂容器至少分别收纳作为试剂的甲醇溶液、乙腈溶液;
试样分注部,其构成为从配置于所述试样容器配置部的试样容器提取试样,向配置于预定的试样分注位置的所述过滤容器分注提取的试样;
试剂分注部,其构成为从配置于所述试剂容器配置部的试剂容器提取期望的试剂,向配置于预定的试剂分注位置的所述过滤容器分注提取的试剂;
过滤部,其具有过滤口,该过滤口供所述提取装置以在所述过滤容器的正下方配置有所述回收容器的状态设置,该过滤部用于进行设置于所述过滤口的所述提取装置的所述过滤容器内的溶液的过滤处理并将滤液回收于所述回收容器;
输送臂,其构成为保持配置于所述提取装置配置部的所述提取装置的所述过滤容器和/或所述回收容器,向所述试样分注位置、所述试剂分注位置以及所述过滤部输送保持的所述过滤容器和/或所述回收容器;以及
控制部,其构成为控制所述试样分注部、所述试剂分注部以及所述输送臂的动作以进行试样的除蛋白质处理,
所述控制部构成为在向空的所述过滤容器分注甲醇溶液而进行所述过滤器的调节之后,向所述过滤容器分注试样,向所述过滤容器内的试样添加作为除蛋白质剂的乙腈溶液,之后,利用所述过滤部进行所述过滤处理。
2.根据权利要求1所述的培养基处理系统,其中,
所述控制部构成为与作为所述试样的培养基的种类无关地向所述过滤容器分注恒定量的甲醇溶液、试样、乙腈溶液。
3.根据权利要求1所述的培养基处理系统,其中,
在所述试剂容器配置部配置有收纳内标溶液的标准溶液容器,
所述控制部构成为在进行所述过滤器的调节之后且是向所述过滤容器分注试样之前向所述过滤容器内分注所述内标溶液。
4.根据权利要求3所述的培养基处理系统,其中,
所述控制部构成为与作为所述试样的培养基的种类无关地向所述过滤容器内分注恒定量的所述内标溶液。
5.根据权利要求1~4中任一项所述的培养基处理系统,其中,
该培养基处理系统包括LC部,该LC部具有:试样注入部,其吸入一定量的通过所述过滤处理回收于所述回收容器的滤液并将其注入液相色谱分析用的分析流路;以及分析部,其用于进行利用所述试样注入部注入所述分析流路的滤液的液相色谱分析。
6.根据权利要求5所述的培养基处理系统,其中,
所述试样注入部构成为以预定的倍率稀释从所述回收容器吸入的一定量的滤液。
7.一种培养基处理方法,其使用提取装置,其中,
所述提取装置包括:
过滤容器,其上方开放,在内部具有用于进行用于细胞培养的培养基的除蛋白质处理的过滤器,并且在下端具有用于向下方提取通过了所述过滤器的滤液的提取口;以及
回收容器,其配置于所述过滤容器的正下方,用于回收从所述过滤容器的所述提取口提取的滤液,
在所述培养基处理方法中依次执行如下步骤:
调节步骤,在该步骤中,向空的所述过滤容器分注甲醇溶液来进行所述过滤器的调节;
试样分注步骤,在该步骤中,向所述过滤容器分注作为试样的培养基;
除蛋白质剂分注步骤,在该步骤中,向所述过滤容器内的试样添加作为除蛋白质剂的乙腈溶液;以及
过滤步骤,在该步骤中,以在所述过滤容器的正下方配置有所述回收容器的状态进行所述过滤容器内的溶液的过滤处理,将滤液回收于所述回收容器。
8.根据权利要求7所述的培养基处理方法,其中,
在所述调节步骤中向所述过滤容器分注的甲醇溶液的量、在所述试样分注步骤中向所述过滤容器分注的试样的量、在所述除蛋白质剂分注步骤中向所述过滤容器分注的乙腈溶液的量分别与作为所述试样的培养基的种类无关地设为恒定。
9.根据权利要求7所述的培养基处理方法,其中,
在所述调节步骤之后且是所述试样分注步骤之前执行向所述过滤容器内分注内标溶液的标准溶液分注步骤。
10.根据权利要求9所述的培养基处理方法,其中,
在所述标准溶液分注步骤中与作为所述试样的培养基的种类无关地向所述过滤容器内分注恒定量的所述内标溶液。
11.根据权利要求7~10中任一项所述的培养基处理方法,其中,
在该培养基处理方法中在所述过滤步骤之后执行如下步骤:
注入步骤,在该步骤中,吸入一定量的通过所述过滤步骤回收于所述回收容器的滤液并将其注入液相色谱用的分析流路中;以及
分析步骤,在该步骤中,进行通过所述滤液注入步骤注入所述分析流路中的滤液的液相色谱分析。
12.根据权利要求11所述的培养基处理方法,其中,
在所述注入步骤中,在吸入一定量的回收于所述回收容器的滤液之后,以预定的倍率稀释所述滤液。
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