CN111825780A - 一种西番莲果皮酶辅助碱提多糖的制备方法及其降解工艺 - Google Patents

一种西番莲果皮酶辅助碱提多糖的制备方法及其降解工艺 Download PDF

Info

Publication number
CN111825780A
CN111825780A CN202010881560.8A CN202010881560A CN111825780A CN 111825780 A CN111825780 A CN 111825780A CN 202010881560 A CN202010881560 A CN 202010881560A CN 111825780 A CN111825780 A CN 111825780A
Authority
CN
China
Prior art keywords
polysaccharide
alkali
reaction
extracted
enzyme
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202010881560.8A
Other languages
English (en)
Inventor
李佳宇
关媛
刘承鑫
李霞
崔萌佳
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guilin University of Technology
Original Assignee
Guilin University of Technology
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guilin University of Technology filed Critical Guilin University of Technology
Priority to CN202010881560.8A priority Critical patent/CN111825780A/zh
Publication of CN111825780A publication Critical patent/CN111825780A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/0003—General processes for their isolation or fractionation, e.g. purification or extraction from biomass

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Cosmetics (AREA)

Abstract

本发明公开了一种西番莲果皮酶辅助碱提多糖的制备方法及其降解工艺，特别涉及降解后西番莲果皮碱提多糖在制备抗氧化剂中的应用。本研究考察了盐酸浓度、温度和时间三个酸降解条件以及酶解时间、pH值和温度三个酶降解条件对降解后西番莲果皮碱提多糖的体外抗氧化活性的影响，为西番莲果皮碱提多糖深入研究与开发奠定基础。

Description

一种西番莲果皮酶辅助碱提多糖的制备方法及其降解工艺
技术领域
本发明属于药用食品研发领域，特别涉及一种西番莲果皮酶辅助碱提多糖的制备方法及其降解工艺。
背景技术
百香果又名鸡蛋果，是一种热带水果，果肉不仅含有丰富的维生素、氨基酸、有机酸等成分，而且还具有重要的生物学功能。果皮占全果的50％左右，含有黄酮类化合物，天然色素、膳食纤维、果胶等活性成分，这些成分赋予西番莲果皮提取物具有抗炎、抗氧化、抗癌、抗焦虑等生理活性。
传统的热水浸提操作方法简单，多糖的提取率及生产效率都相对较低，为提高多糖的浸提取率，会采用碱液提取多糖。由于植物细胞、细胞壁会在碱性的溶液中溶胀、破裂而使多糖溶出，可以利用碱提法提取多糖，碱液的浓度必须要适宜，才能提高多糖提取率。多糖的连接方式和异构体极为复杂，其结构具有多样性，就算是只由一种单糖形成的糖类聚合物，也会因为其分子量、空间结构等方面的不同导致生物特性的不同。多糖的聚合度越高，分子量越大，其体积就越大，越影响多糖透过细胞膜进到生物的体内发挥其作用，只有在一定范围的分子量之内才能够有较高的活性。适当的方法降解天然多糖，让天然多糖的分子键断裂，导致天然多糖分子中的大分子转变为小分子，可以让天然多糖具有更好的生物活性。本研究考察了盐酸浓度、温度和时间三个酸降解条件以及酶解时间、pH值和温度三个酶降解条件对降解后西番莲果皮多糖的体外抗氧化活性的影响，为西番莲果皮多糖深入研究与开发奠定基础。
发明内容
本发明目的是提供一种西番莲果皮酶辅助碱提多糖的制备方法及其降解工艺，研究降解后西番莲果皮碱提多糖在制备抗氧化剂中的作用。
本发明的技术方案是：一种西番莲果皮酶辅助碱提多糖的制备方法：选取水提后的干燥西番莲果皮，按料液比为1:25(g/mL)的比例加入蒸馏水浸泡，50℃水浴预热10min，按料液比为0.6mg/mL称取纤α-淀粉酶，混合后加入预热好的溶液，将反应溶液的pH值调至5.0，50℃水浴40min，反应期间需要每隔10分钟调节一次pH值，目的是为了避免pH值会发生变化。反应完成后100℃水浴10min，目的是使酶失活。冷却至室温，用0.75mol/L的NaOH溶液调节pH值至10.0，40℃水浴碱解60min，碱解期间每隔10分钟调一次pH值。碱解后离心(4000r/min，15min)，取上清液，浓缩，再加入3倍体积的无水乙醇醇沉12小时。醇沉后离心(4000r/min，15min)，沉淀，冷冻干燥，得到西番莲果皮碱提多糖。
将碱提多糖配制成5mg/mL的溶液，在反应时间为60min、反应温度为70℃、盐酸浓度为0.4mol/L的条件下降解，反应结束后，调至中性，流水透析48h，经浓缩后冻干得盐酸降解后西番莲果皮碱提多糖。
将碱提多糖配制成5mg/mL的溶液，选用α-淀粉酶降解碱提多糖，酶活力为150U/mL。在pH值为4、反应温度为40℃、反应时间60min的条件下对碱提多糖降解，反应结束后，置于100℃的水浴锅中10min，离心(9000r/min，10min)，取上清液，冻干得酶解西番莲果皮碱提多糖。
优选的是：反应时间为60min、反应温度为70℃、盐酸浓度0.4mol/L，流水透析48h。
优选的是：酶活力为150U/mL，在pH值为4、反应温度为40℃、反应时间60min。
本发明还提供了所述降解后碱提多糖在制备抗氧化剂中的应用。
附图说明
图1为碱提多糖在不同盐酸浓度的条件下降解及其产物对羟基自由基清除率的影响；
图2为碱提多糖在不同温度的条件下降解及其产物对羟基自由基清除率的影响；
图3为碱提多糖在不同时间的条件下降解及其产物对羟基自由基清除率的影响；
图4为碱提多糖在不同pH值的条件下降解及其产物对羟基自由基清除率的影响；
图5为碱提多糖在不同温度的条件下降解及其产物对羟基自由基清除率的影响；
图6为碱提多糖在不同时间的条件下降解及其产物对羟基自由基清除率的影响；
图7为降解后多糖对羟基自由基清除能力；
图8为降解后多糖对DPPH自由基清除能力；
图9为降解后多糖的还原能力。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明进一步说明。
1、盐酸降解西番莲果皮碱提多糖
(1)盐酸浓度对多糖降解的影响：
将碱提多糖配制成5mg/mL的溶液，在反应时间为60min，反应温度为60℃的条件下，考察不同的盐酸浓度(0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mol/L)对碱提多糖降解的影响。反应结束后，调至中性，流水透析48小时，经浓缩后冻干(图1)。
(2)反应温度对多糖降解的影响：
将碱提多糖配制成5mg/mL的溶液，在反应时间为60min，盐酸浓度为0.3mol/L的条件下，考察不同的反应温度(40、50、60、70、80℃)对碱提多糖降解的影响。反应结束后，调至中性，流水透析48小时，经浓缩后冻干(图2)。
(3)反应时间对多糖降解的影响：
将碱提多糖配制成5mg/mL的溶液，在盐酸浓度为0.3mol/L，反应温度为60℃的条件下，考察不同的反应时间(20、40、60、80、100min)对碱提多糖降解的影响。反应结束后，调至中性，流水透析48小时，经浓缩后冻干(图3)。
2、酶降解西番莲果皮碱提多糖
(1)酶解时间对多糖降解的影响：
以碱提多糖终浓度为5mg/mL为反应体系，选用α-淀粉酶降解碱提多糖，酶活力为150U/mL。在pH值为5、反应温度为50℃的条件下考察不同的反应时间(30、45、60、75、90min)对碱提多糖降解的影响。反应结束后，置于100℃的水浴锅中10min。离心(9000r/min，10min)，取上清液，冻干(图4)。
(2)酶解温度对多糖降解的影响：
以碱提多糖终浓度为5mg/mL为反应体系，选用α-淀粉酶降解碱提多糖，酶活力为150U/mL。在pH值为5、反应时间为60min的条件下考察不同的反应温度(30、40、50、60、70℃)对碱提多糖降解的影响。反应结束后，置于100℃的水浴锅中10min。离心(9000r/min，10min)，取上清液，冻干(图5)。
(3)酶解pH值对多糖降解的影响：
以碱提多糖终浓度为5mg/mL为反应体系，选用α-淀粉酶降解碱提多糖，酶活力为150U/mL。在反应温度为50℃、反应时间为60min的条件下考察不同的反应pH值(3、4、5、6、7)对碱提多糖降解的影响。反应结束后，置于100℃的水浴锅中10min。离心(9000r/min，10min)，取上清液，冻干(图6)。
3、碱提多糖对体外抗氧化活性测定
西番莲果皮碱提多糖及其降解后的产物的抗氧化活性是通过测定其对羟基自由基的清除率(图7)、DPPH自由基清除能力(图8)和还原能力(图9)来判断的。将L-抗坏血酸和碱提多糖粉末分别用去离子水配制0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg/mL的不同浓度。以配制的多糖样品溶液浓度为横坐标，清除率为纵坐标，测定不同梯度多糖溶液的抗氧化活性。结果显示经降解后西番莲果皮碱提多糖具有更好的抗氧化性，在制备抗氧化剂、抗氧化类保健品和化妆品中具有广阔的应用前景。

Claims (3)

1.一种西番莲果皮酶辅助碱提多糖的制备方法，其特征在于：
(1)选取水提后的干燥西番莲果皮，按料液比为1:25(g/mL)的比例加入蒸馏水浸泡，50℃水浴预热10min，按料液比为0.6mg/mL称取纤α-淀粉酶，混合后加入预热好的溶液，将反应溶液的pH值调至5.0，50℃水浴40min，冷却至室温，用0.75mol/L的NaOH溶液调节pH值至10.0，40℃水浴碱解60min，碱解后4000r/min离心15min，取上清液，浓缩，再加入3倍体积的无水乙醇醇沉12小时，醇沉后4000r/min离心15min，沉淀，冷冻干燥，得到西番莲果皮碱提多糖；
(2)将碱提多糖配制成5mg/mL的溶液，在反应时间为60min、反应温度为70℃、盐酸浓度为0.4mol/L的条件下降解，反应结束后，调至中性，流水透析48h，经浓缩后冻干得盐酸降解后西番莲果皮碱提多糖；
(3)将碱提多糖配制成5mg/mL的溶液，选用α-淀粉酶降解碱提多糖，酶活力为150U/mL，在pH值为4、反应温度为40℃、反应时间60min的条件下对碱提多糖降解，反应结束后，置于100℃的水浴锅中10min，9000r/min离心10min，取上清液，冻干得酶解西番莲果皮碱提多糖。
2.根据权利要求1所述一种西番莲果皮酶辅助碱提多糖的制备方法，其特征在于，步骤(1)中水浴反应期间需要每隔10分钟调节一次pH值，目的是为了避免pH值会发生变化，反应完成后100℃水浴10min，目的是使酶失活，碱解期间每隔10分钟调一次pH值。
3.根据权利要求1所述的西番莲果皮酶辅助碱提多糖的降解工艺，其特征在于，步骤(2)中盐酸降解方法：反应时间为60min、反应温度为70℃、盐酸浓度0.4mol/L，流水透析48h，步骤(3)中酶解方法：酶活力为150U/mL，在pH值为4、反应温度为40℃、反应时间60min。
CN202010881560.8A 2020-08-27 2020-08-27 一种西番莲果皮酶辅助碱提多糖的制备方法及其降解工艺 Pending CN111825780A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010881560.8A CN111825780A (zh) 2020-08-27 2020-08-27 一种西番莲果皮酶辅助碱提多糖的制备方法及其降解工艺

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010881560.8A CN111825780A (zh) 2020-08-27 2020-08-27 一种西番莲果皮酶辅助碱提多糖的制备方法及其降解工艺

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN111825780A true CN111825780A (zh) 2020-10-27

Family

ID=72918394

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010881560.8A Pending CN111825780A (zh) 2020-08-27 2020-08-27 一种西番莲果皮酶辅助碱提多糖的制备方法及其降解工艺

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111825780A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113354752A (zh) * 2021-06-16 2021-09-07 桂林理工大学 一种提高西番莲果皮多糖抗氧化作用的碱提多糖制备方法及应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107793494A (zh) * 2017-12-02 2018-03-13 桂林理工大学 西番莲果皮多糖提取工艺及响应面优化法
CN108976309A (zh) * 2018-06-29 2018-12-11 桂林理工大学 西番莲叶中多糖提取工艺及正交试验优化
CN109232754A (zh) * 2018-06-29 2019-01-18 桂林理工大学 一种具有提高抗氧化活性的西番莲果皮多糖羧甲基化修饰产物及其制备方法
CN109400752A (zh) * 2018-10-31 2019-03-01 福建中医药大学 西番莲果皮中果胶的微波辅助酶法提取方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107793494A (zh) * 2017-12-02 2018-03-13 桂林理工大学 西番莲果皮多糖提取工艺及响应面优化法
CN108976309A (zh) * 2018-06-29 2018-12-11 桂林理工大学 西番莲叶中多糖提取工艺及正交试验优化
CN109232754A (zh) * 2018-06-29 2019-01-18 桂林理工大学 一种具有提高抗氧化活性的西番莲果皮多糖羧甲基化修饰产物及其制备方法
CN109400752A (zh) * 2018-10-31 2019-03-01 福建中医药大学 西番莲果皮中果胶的微波辅助酶法提取方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
FENG XIONG等: "Characterization and antioxidant activities of polysaccharides from Passiflora edulis Sims peel under different degradation methods", 《CARBOHYDRATE POLYMERS》 *
熊峰: "西番莲果皮多糖提取、降解条件优化及生物活性研究", 《万方数据库》 *
郭力 等: "《中药化学实验》", 31 July 2015, 中国医药科技出版社 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113354752A (zh) * 2021-06-16 2021-09-07 桂林理工大学 一种提高西番莲果皮多糖抗氧化作用的碱提多糖制备方法及应用

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103484513B (zh) 一种酶法制备小分子寡聚透明质酸的方法
CN102690847A (zh) 酶切法制备寡聚透明质酸盐的方法及所得寡聚透明质酸盐和其应用
CN105039453A (zh) 一种具有提高的抗氧化性的米糠多糖的制备方法及应用
CN111978421B (zh) 一种桑树桑黄多糖及其制备和用途
CN103951761A (zh) 酶法降解浒苔多糖的方法
CN111825780A (zh) 一种西番莲果皮酶辅助碱提多糖的制备方法及其降解工艺
CN107686854A (zh) 利用裂褶菌发酵体系自产内切酶对裂褶多糖进行降解改性的方法
CN113786356A (zh) 一种绣球菌胞外多糖醇溶液的制备方法
CN114847494A (zh) 一种提取芦苇笋中膳食纤维的方法
CN113248631B (zh) 一种螺旋藻多糖及其在制备精华液中的应用
CN109232754B (zh) 一种具有提高抗氧化活性的西番莲果皮多糖羧甲基化修饰产物及其制备方法
CN104178539A (zh) 一种规模化制备特定分子量小分子透明质酸的方法
CN112807322A (zh) 低聚甘露糖醛酸盐在制备延缓皮肤衰老和免疫抗炎的药物和功能性食品中的应用
CN110122868B (zh) 一种臭参酵素、臭参酵素饮品及制备方法
CN111096976A (zh) L-低聚古罗糖醛酸盐在制备用于延缓皮肤衰老和免疫抗炎的药物和功能食品中的应用
CN111264877A (zh) 一种药食同源高纤维功能性食品的制备方法
CN114209621B (zh) 一种保湿、抗氧化的红曲发酵物及其制备方法与应用
CN115590800A (zh) 平卧菊三七提取物及其发酵提取物的制备和应用
CN112961883B (zh) 一种耐热型白芸豆淀粉酶抑制剂及制备方法
CN115232220A (zh) 一种灵芝多糖及其提取方法和应用
CN114231576A (zh) 罗伊氏乳杆菌在制备植物多糖中的应用
CN113637091A (zh) 一种高纯度低分子量黄芪多糖的提取方法及其产品和应用
CN112022756A (zh) 一种含有灵芝子实体孢子粉发酵液的沐浴露及其制备方法
CN106755177B (zh) 一种绿藻来源的鼠李寡糖的制备及其在化妆品中的应用
CN111978431A (zh) 一种橘皮果胶的降解方法及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20201027

WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication