CN111821311A - 盐酸小檗碱与水苏糖组合物在调节肠道菌群中的用途 - Google Patents
盐酸小檗碱与水苏糖组合物在调节肠道菌群中的用途 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种由盐酸小檗碱和水苏糖组成的药物组合物在调节动物肠道菌群中的用途，属于医药技术领域。该组合物能选择性地增加动物肠道内一部分有益菌的数量、改善肠道菌群结构。特别地，能够显著增加动物肠道内嗜黏蛋白阿克曼氏菌(Akkermansia muciniphila)的数量，进而通过肠道菌群的调节作用提高肠道屏障功能，预防或治疗肥胖、糖尿病、高脂血症等疾病。
Description
技术领域
本发明属于医药技术领域，具体涉及一种改善肠道菌群结构的方法，及其在制备药物、保健品和食品中的应用。
背景技术
水苏糖(英文名：stachyose，分子式C24H42O21)，是一种天然的功能性寡糖，可以强效增殖人体肠道内有益菌群(双歧杆菌和乳酸菌等)，具有良好的生理功能。另外，水苏糖是中药鲜地黄中含量最高(含量高达50％，折干计)的化学成分，在加工炮制过程中发生降解从而药性发生改变。
盐酸小檗碱(即黄连素，英文名：berberine，分子式C20H18ClNO4)，为常用的抗菌药物，临床上用于治疗肠道感染，例如胃肠炎等，也有用于治疗糖尿病方面的报道。盐酸小檗碱是中药黄连的主要化学成分，含量约9％(干品计)。
我们在前期研究中发现鲜地黄中的水苏糖具有一定的降糖和降脂等作用并且细胞毒性低，且进一步发现水苏糖和盐酸小檗碱联合用药对高脂饮食与链脲菌素(STZ)诱导的ICR小鼠糖尿病模型有明显的降糖、降脂、改善胰岛素抵抗和改善糖尿病心肌病相关指标的作用，而且多数情况下两者联合用药比分别单独使用效果更佳，提出以水苏糖和盐酸小檗碱组合物进行2型糖尿病及相关心脏并发症的适药性研究，所用原料来源丰富，化学结构清楚，克服了中药复方物质复杂难以阐明的问题，以期通过符合现代医药学规律的研发使之成为一种创新性药物(专利公开号：106176773A)。本发明进一步发现该组合物能调节正常及高脂饮食加STZ诱导的糖尿病模型小鼠的肠道菌群，增加肠道有益菌嗜黏蛋白阿克曼氏菌的丰度。
脊椎动物肠道微生物群是地球上最复杂的生态系统之一，微生物细胞的数量超过1000万亿个,相当于人体细胞总数的10倍，其拥有的微生物宏基因组数量约为300万个，大约是人类基因组基因数量的100多倍。人类肠道微生物群与宿主的健康密切相关，微生物已成为人类营养的重要组成部分，含有大量活菌的某些发酵食品，特别是乳制品和发酵蔬菜，是全球数百万人日常食用的一部分。在人体肠道内永久定居的微生物群对人类健康的影响极其深远，小到消化道内环境，消化问题，大到胖瘦问题，高血压，糖尿病，高血脂，癌症等，人类的生命健康已经与它们息息相关，因此人体肠道微生物基因组也被誉为人类的第二套基因组。不同的肠道菌群谱的改变可以致病，亦可以防病和治病。
肠道微生物可分成黏液层微生物和肠腔内微生物，两类微生物菌群组成有较大不同，但在营养物质交换、信息交流、免疫系统发育和抵抗病原微生物入侵等方面均有重要作用。在哺乳动物胃肠道内定殖的微生物主要分属于厚壁菌门、拟杆菌门、放线菌门、变形菌门和疣微菌门等。嗜黏蛋白阿克曼氏菌作为疣微菌门的代表菌种，占整个疣微菌门数量的80％以上，该菌定殖在胃肠道黏液层，是人类肠道微生物群中最丰富的物种之一，占结肠细菌总数的1-4％，是近年来有关肠道微生物的研究热点，大量研究表明该菌与宿主健康存在密切联系。
嗜黏蛋白阿克曼氏菌与多种代谢性疾病的发生发展密切相关，其中在肥胖及二型糖尿病(T2D)中的研究最为广泛。自从该菌被发现以来，许多研究主要将嗜黏蛋白阿克曼氏菌的丰度与其对机体的有益效应联系起来，不少于25项研究表明，在饮食诱导或基因缺陷诱导的肥胖或其它代谢紊乱的小鼠模型中，嗜黏蛋白阿克曼氏菌的含量降低。目前，嗜黏蛋白阿克曼氏菌被广泛认为是改善肥胖，糖尿病，肝脏疾病和心脏代谢紊乱等代谢疾病的新型潜在候选物。专利(公开号WO2014/076246)中描述重复施用单独的嗜黏蛋白阿克曼氏菌影响与肥胖症和相关病症相关的三种潜在的功能障碍，即代谢功能障碍、与较高的血液脂多糖(LPS)水平相关的低级炎症状态和受损的肠道屏障功能。
发明人在研究小檗碱与水苏糖组合物治疗糖尿病及其并发症的过程中发现，该组合物能大大增加肠道中有益菌嗜黏蛋白阿克曼氏菌的丰度。因此，本发明涉及盐酸小檗碱与水苏糖组合物通过影响肠道菌用于防治肥胖、2型糖尿病、高血脂症和/或2型糖尿病并发症以及其他可能的代谢性疾病中的用途。
发明内容
本发明的解决的技术问题是提供一种组合物在制备调节肠道菌群药物或保健品中的应用。在本发明人已申请专利(专利公开号：106176773A)中已确定该组合物对糖尿病小鼠代谢以及心脏并发症的改善作用。发明人后续研究发现，正常及二型糖尿病模型小鼠给予盐酸小檗碱与水苏糖组合物后，小鼠肠道菌群结构发生改变，给药后拟杆菌门(Bacteroidetes)与厚壁菌门(Firmicutes)相对丰度的比值增加，菌群alpha多样性指数降低，疣微菌门(Verrucomicrobia)占总菌比例增加，其中疣微菌门代表菌种嗜黏蛋白阿克曼氏菌丰度增加最为显著。
为解决本发明的技术问题，本发明提供了如下技术方案：
本发明技术方案的第一方面提供了一种组合物在制备调节肠道菌群药物或保健品中的应用，其特征在于，所述的组合物包含盐酸小檗碱和水苏糖两种化合物，其结构式如下所示，
优选的，所述组合物中盐酸小檗碱和水苏糖的重量份数配比为1:0.1～50。更优选的，所述组合物中盐酸小檗碱和水苏糖的重量份数配比为1:0.2～25。最优选的，所述组合物中盐酸小檗碱和水苏糖的重量份数配比为1:1。
所述组合物对肠道菌群的调节是指对放线菌门Actinobacteria、拟杆菌门Bacteroidetes、厚壁菌门Firmicutes、疣微菌门Verrucomicrobia、变形菌门Proteobacteria在总肠道菌中所占比例的调节。优选的，该组合物使拟杆菌门与厚壁菌门所占比例的比值增加。优选的，该组合物使疣微菌门所占比例增加，进一步优选地，所述组合物使嗜黏蛋白阿克曼氏菌Akkermansia muciniphila在肠道中所占比例增加
本发明技术方案的第二方面是提供了一种药物组合物在制备调节肠道菌群药物或保健品中的应用，其特征在于，所述的药物组合物包含盐酸小檗碱和水苏糖两种化合物组成的组合物以及药学上可接受的载体或赋形剂，其中盐酸小檗碱和水苏糖结构式如下所示，
所述药物组合物包括颗粒剂、胶囊剂、片剂、口服液、丸剂、混悬剂、滴丸剂、微丸剂、口含片、口崩片、胶丸、软胶囊、分散片、溶液剂、气雾剂或喷雾剂。
所述组合物对肠道菌群的调节是指对放线菌门Actinobacteria、拟杆菌门Bacteroidetes、厚壁菌门Firmicutes、疣微菌门Verrucomicrobia、变形菌门Proteobacteria在总肠道菌中所占比例的调节。优选的，该组合物使拟杆菌门与厚壁菌门所占比例的比值增加。优选的，该组合物使疣微菌门所占比例增加，进一步优选地，所述组合物使嗜黏蛋白阿克曼氏菌Akkermansia muciniphila在肠道中所占比例增加。
在本发明的一个实施例中，该组合物被口服施用。
本发明技术方案第一方面和第二方面中，组合物盐酸小檗碱和水苏糖配方重量份数配比为1:0.1～50，优选重量份数配比为1:0.2～25，最优选重量份数配比为1:1。
本发明技术方案第一方面和第二方面中，所述组合物的给药剂量为盐酸小檗碱与水苏糖各5mg/kg-320mg/kg，优选地组合物的给药剂量为盐酸小檗碱与水苏糖各40mg/kg-160mg/kg，更优选地组合物的给药剂量为盐酸小檗碱与水苏糖各80mg/kg。盐酸小檗碱单独的给药剂量为5mg/kg-320mg/kg，优选地盐酸小檗碱单独给药剂量为40mg/kg-160mg/kg，更优选地盐酸小檗碱单独的给药剂量为80mg/kg。水苏糖单独的给药剂量为5mg/kg-320mg/kg，优选地水苏糖单独给药剂量为40mg/kg-160mg/kg，更优选地水苏糖单独的给药剂量为80mg/kg。
附图说明
图1：菌群主成分分析图，表示盐酸小檗碱与水苏糖组合物给药后对正常以及糖尿病小鼠肠道菌群结构的影响。
图2：盐酸小檗碱与水苏糖组合物给药后对正常以及糖尿病小鼠肠道菌群alpha多样性相关指数中香农指数的影响。
图3：盐酸小檗碱与水苏糖组合物给药后对正常以及糖尿病小鼠肠道菌群alpha多样性相关指数中辛普森指数的影响。
图4：盐酸小檗碱与水苏糖组合物给药后对正常以及糖尿病小鼠肠道菌群alpha多样性相关指数中查欧指数的影响。
图5：盐酸小檗碱与水苏糖组合物给药后对正常以及糖尿病小鼠肠道菌群中拟杆菌门与厚壁菌门的相对丰度比值的影响，其中拟杆菌作为肠道有益菌的代表，厚壁菌作为肠道有害菌的代表，其比值越高表示肠道菌群状态更为健康。
图6：盐酸小檗碱与水苏糖组合物给药后对正常以及糖尿病小鼠肠道菌群在门分类水平上各菌群相对丰度的变化，其中疣微菌门(用黑框标出)增加最为显著。
图7：盐酸小檗碱与水苏糖组合物给药引起正常以及糖尿病小鼠肠道肠道嗜黏蛋白阿克曼氏菌相对丰度显著增加，图中颜色越深说明相对丰度越高。
图8：用实时荧光定量PCR方法检测正常和糖尿病小鼠给与盐酸小檗碱与水苏糖组合物后每克粪便中嗜黏蛋白阿克曼氏菌绝对个数的变化。
图9：正常小鼠给盐酸小檗碱与水苏糖组合物后，不同给药剂量与肠道粪便中嗜黏蛋白阿克曼氏菌的个数关系。
图10：菌群主成分分析图，盐酸小檗碱与水苏糖单独及联合给药对糖尿病小鼠肠道菌群结构的影响。
图11：盐酸小檗碱与水苏糖单独及联合给药后对糖尿病小鼠肠道菌群alpha多样性相关指数中香农指数的影响。
图12：盐酸小檗碱与水苏糖单独及联合给药后对糖尿病小鼠肠道菌群alpha多样性相关指数中可观察到物种指数的影响。
图13：盐酸小檗碱与水苏糖单独及联合给药后对糖尿病小鼠肠道菌群alpha多样性相关指数中查欧指数的影响。
图14：盐酸小檗碱与水苏糖单独及联合给药后对糖尿病小鼠肠道菌群中拟杆菌门与厚菌门的相对丰度比值的影响。
图15：盐酸小檗碱与水苏糖单独及联合给药后对糖尿病小鼠肠道菌群在门分类水平上各菌群相对丰度的变化，其中疣微菌门(用黑框标出)增加最为显著。
图16：盐酸小檗碱与水苏糖对糖尿病小鼠肠道菌群在属分类水平上各菌群相对丰度的变化，其中嗜黏蛋白阿克曼氏菌(用黑框标出)增加最为显著。
图17：用实时荧光定量PCR方法检测糖尿病小鼠单独及联合给与盐酸小檗碱与水苏糖后每克粪便中嗜黏蛋白阿克曼氏菌绝对个数的变化。
图18：盐酸小檗碱与水苏糖单独以及联合给药后小鼠结肠组织H&E染色典型图。
图19：盐酸小檗碱与水苏糖单独以及联合给药后小鼠结肠组织黏液层厚度变化及典型图。
具体实施方式
下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。
下述实施例中，盐酸小檗碱和水苏糖分别由黄连和地黄中人工分离提取。
下述实施例中所述室温如本领域常规所述，一般指15～25℃。
实施例1:盐酸小檗碱与水苏糖组合物对正常及糖尿病小鼠肠道菌群影响实验(1)模型制备、实验分组及给药方案
SPF级ICR小鼠(雄性，3-4周龄)购自北京维通利华实验动物技术有限公司，饲养于中国医学科学院药物研究所实验动物中心，恒温恒湿，自由饮食。小鼠适应性饲养一周后，按性别和体重随机分为4组：①正常组10只，②正常给组合物组10只，③糖尿病组10只，④糖尿病给组合物组10只。具体造模方案为：ICR小鼠给予高脂高糖饲料(含有35％脂肪，18％蛋白质，47％碳水化合物)，持续4周后腹腔注射链脲菌素(STZ)100mg/kg(溶于0.1M柠檬酸缓冲液，PH 4.5)，并继续给予高脂高糖饲料；对照及正常给药组腹腔注射溶剂0.1M柠檬酸缓冲液。持续8周后尾静脉取血检测血糖(BG)，将高脂+STZ处理动物按血糖>11.1mM的小鼠随机分为模型组和模型给药组，并持续给予高脂高糖饲料。对照组以及正常给药组持续给予基础饲料直到实验结束，正常给药组以及模型给药组12周后开始灌胃给予盐酸小檗碱与水苏糖组合物。
给药组的最大给药剂量参考临床和日常保健常用剂量确定，具体如下：盐酸小檗碱(成人1.2g/日，折合为成人剂量为18mg/kg，再折合为小鼠的最大给药剂量设为200mg/kg。水苏糖(成人保健剂量为6g/日，折合为成人剂量为85mg/kg，再折合为小鼠最大给药剂量设为1000mg/kg)。根据本发明人申请的上一项专利(专利公开号106176773A)，确定小檗碱和水苏糖的给药重量份数配比为1:1，最终确定组合物的给药剂量为盐酸小檗碱和水苏糖各167mg/kg。
具体给药方案为：盐酸小檗碱和水苏糖各167mg/kg，溶于纯水中，灌胃给药，每日一次；对照及模型组给予对照溶剂水，灌胃给药，每日一次。所有小鼠持续给药8周。
(2)小鼠肠道菌群相对丰度检测
每组随机取4例小鼠粪便样本，样本首先进行DNA提取，PCR扩增16SrDNA的V3～V5区，然后用545平台，测序方向V5至V3，读长300EP。16S分析主要采用mothur软件(http://www.mothur.org/wiki/Mothur_manual)，包括质控，OTU聚类，注释等分析，并在完成数据物种分类的基础上，分析各个物种的相对丰度。
(3)小鼠粪便嗜黏蛋白阿克曼氏菌绝对量检测
收集小鼠结肠粪便，按照下述方法，对每克粪便中嗜黏蛋白阿克曼氏菌的绝对量进行检测，统计组合物对正常以及糖尿病小鼠肠道嗜黏蛋白阿克曼氏菌绝对量的影响。
1)从粪便样品中分离提取DNA：将新鲜收集的小鼠粪便样本或收集后立刻储存于－80度的粪便样本，使用天根粪便基因组提取试剂盒(货号DP328)根据制造商说明书从粪便样品中提取基因组DNA。2)qPCR检测：用于检测嗜黏蛋白阿克曼氏菌的引物基于16SrRNA基因序：F-5’CCTTGCGGTTGGCTTCAGAT3’、R-5’CAGCACGTGAAGGTGGGGAC3’。利用ABI7500Fast实时PCR系统，使用FastStart Universal SYBR Green Master(Roche)根据制造商说明书实现检测。在同一轮测定中一式三份进行测定。然后将每个样品的循环阈值与通过稀释标准基因组DNA(5倍连续稀释)(DSMZ，Germany)得到的标准曲线(重复三次)进行进行比较。将数据表示为细菌个数/克盲肠内容物的对数(Log10)。
(4)数据处理与统计方法
试验数据以平均值±标准误(mean±SEM)表示，用SPSS 17.0软件对结果进行单因素方差分析，p＜0.05表示有显著性差异。
(5)实验结果
PCA主成分分析显示，与正常小鼠对比，糖尿病小鼠的菌群结构发生显著改变，给予组合物能影响正常以及糖尿病小鼠菌群结构(图1)；降低菌群alpha多样性指数，包括香农指数(图2，表1)、辛普森指数(图3，表1)和查欧指数(图4，表1)；能显著增加糖尿病组拟杆菌与厚壁菌的比例(其中拟杆菌作为肠道有益菌的代表，厚壁菌作为肠道有害菌的代表，其比值越高表示肠道菌群状态更为健康)(图5，表2)。另外，给予组合物后疣微菌门的相对丰度显著增加(图6，表2)，嗜黏蛋白阿克曼氏菌作为疣微菌门唯一的肠道菌代表，给药后丰度增加最为显著(图7，表3)。此外，组合物给药之后每克粪便中嗜黏蛋白阿克曼氏菌的绝对数量显著增加，且相比于正常小鼠给药，糖尿病模型小鼠给药后该菌的绝对数量增加更为显著，相比模型组增加了3000倍以上(图8，表4)。
表1.组合物对正常及糖尿病小鼠肠道菌群alpha多样性指数的影响
表2.组合物对正常及糖尿病小鼠肠道拟杆菌门、厚壁菌门、疣微菌门丰度的影响
表3.组合物对正常及糖尿病小鼠肠道嗜黏蛋白阿克曼氏菌相对丰度变化的影响
表4.组合物对正常及糖尿病小鼠每克粪便中嗜黏蛋白阿克曼氏菌绝对数量的影响
实施例2:盐酸小檗碱与水苏糖组合物不同给药剂量对正常小鼠肠道嗜黏蛋白阿克曼氏菌绝对量的影响
(1)实验方案
SPF级ICR小鼠(雄性，3-4周龄)按性别和体重随机分为8组，每组5只，灌胃给予组合物，每组的给药剂量分别为0，5，10，20，40，80，160，320mg/kg，给药剂量为0的对照组给同体积的对照溶剂水，组合物连续灌胃给药2周后，收集小鼠新鲜粪便，按实施例1中所述方法，检测每克粪便中嗜黏蛋白阿克曼氏菌的绝对量。
(2)实验结果
肠道中嗜黏蛋白阿克曼氏菌的丰度随给药剂量增加而不断增加，并在给药剂量为80mg/kg时达到最高值，此后再增加给药剂量嗜黏蛋白阿克曼氏菌的丰度不发生明显增加(图9，表5)。
表5.组合物不同给药剂量对正常小鼠每克粪便中嗜黏蛋白阿克曼氏菌绝对数量的影响
实施例3:盐酸小檗碱与水苏糖单独及联合给药对糖尿病小鼠肠道菌群的影响(1)模型制备、实验分组及给药方案
SPF级ICR小鼠(雄性，3-4周龄)按性别和体重随机分为4组：①正常组10只，②糖尿病组10只，③糖尿病给小檗碱组10只，④糖尿病给水苏糖组10只，⑤糖尿病给组合物组10只。饲养环境和条件以及造模方法同实施例1，正常组持续给予基础饲料直到实验结束，糖尿病小鼠给予高脂饲料直到实验结束；糖尿病给盐酸小檗碱组、糖尿病给水苏糖组以及糖尿病给组合物组12周后开始灌胃给药，其中，糖尿病给小檗碱组给予盐酸小檗碱80mg/kg，糖尿病给水苏糖组给予水苏糖80mg/kg，糖尿病给组合物组给予盐酸小檗碱和水苏糖各80mg/kg，化合物溶于纯水中，每日一次，持续给药12周。模型组给予对照溶剂水。
(2)肠道菌群相对丰度检测方法：同实施例1
(3)盐酸小檗碱与水苏糖单独及联合给药对小鼠结肠嗜黏蛋白阿克曼氏菌的绝对量的影响。
收集小鼠结肠粪便，按照实施例2中所述方法，检测每克粪便中嗜黏蛋白阿克曼氏菌的绝对量，统计化合物单独以及联合给药对其绝对量的影响。
(4)数据处理与统计方法：同实施例1
(5)实验结果
菌群结构分析显示，盐酸小檗碱与水苏糖单独给药和联合给药都能影响糖尿病小鼠菌群结构，但是盐酸小檗碱和组合物的影响较强，与糖尿病组相比菌群结构差异较大，单独给水苏糖组与糖尿病模型组的菌群结构更为接近(图10)。给盐酸小檗碱或组合物均能降低菌群alpha多样性指数，包括香农指数(图11，表6)、可观察到物种指数(图12，表6)和查欧指数(图13，表6)。给组合物组以及给水苏糖组都能显著增加菌群中拟杆菌门比厚壁菌门的比值(图14，表7)，提示我们水苏糖能使肠道菌群状态更为健康。给组合物组以及单给盐酸小檗碱组疣微菌门的相对丰度都显著增加(图15，表7)，阿克曼氏属的相对丰度也显著增加(图16，表8)。实时荧光定量PCR结果也显示组合物组以及盐酸小檗碱组给药后小鼠粪便中嗜黏蛋白阿克曼氏菌的绝对含量都显著增加(图17，表9)，说明组合物中调节该菌丰度的主要成分是盐酸小檗碱。
表6.盐酸小檗碱与水苏糖单独及联合给药后肠道菌群alpha多样性指数变化
表7.盐酸小檗碱与水苏糖单独及联合给药后肠道拟杆菌门、厚壁菌门、疣微菌门相对丰度
表8.盐酸小檗碱与水苏糖单独及联合给药后肠道菌群中嗜黏蛋白阿克曼氏菌相对丰度变化
表9.盐酸小檗碱与水苏糖单独及联合给药对糖尿病小鼠每克粪便中嗜黏蛋白阿克曼氏菌绝对数量的影响
实施例4.盐酸小檗碱与水苏糖单独及联合给药对糖尿病小鼠结肠组织病理结构影响(1)结肠组织H&E染色
在实施例3的实验对象中，取小鼠结肠组织进行苏木精和伊红染色(H&E染色)。具体操作包括：将结肠组织用固定液(4％多聚甲醛)固定后，石蜡包埋切片，切片二甲苯脱蜡，过梯度酒精至水剂，苏木精水溶液染色数分钟，1％盐酸酒精分化，流水冲洗，入酒精伊红染色液染色2-3min。染色后的切片常规脱水，透明中性树胶封片。将染色完的切片进行全景扫描(3D Histech，Pannoramic SCAN)，统计出化合物单独以及联合给药对小鼠结肠组织病理结构的改变。
(2)实验结果
高脂饮食与STZ诱导的糖尿病小鼠的肠道结构与正常组相比，固有层中炎性细胞数量增加，上皮结构发生改变，部分出现隐窝结构改变，呈现不规则形态，给予组合物后显著减少了固有层中炎性细胞的数量，改善了隐窝结构的完整，且杯状细胞均正常分布排列，单独给予水苏糖在一定程度上改善了隐窝结构，但对固有层炎性细胞浸润没有明显的改善作用，而单独给予盐酸小檗碱对肠道结构没有明显保护作用，甚至在一定程度上加重了固有层中炎性细胞浸润(图18)。
实施例5.盐酸小檗碱与水苏糖单独及联合给药对糖尿病小鼠结肠黏液层厚度的影响(1)结肠组织阿尔新蓝染色
在实施例3的实验对象中，取带有粪便的小鼠结肠组织进行阿尔新蓝染色。具体操作包括：结肠组织用carnoy’s固定液(乙醇：冰醋酸：氯仿＝6:1:3)固定后脱水石蜡包埋切片，切片二甲苯脱蜡，过梯度酒精至水剂，阿利新蓝(pH 2.5)液染30min，流水稍洗，核固红复染5-10min，稍水洗，常规脱水，透明中性树胶封片。将染色完的切片进行全景扫描，统计出化合物单独以及联合给药对小鼠结肠黏液层厚度的改变。
(2)实验结果
高脂饮食与STZ诱导的糖尿病小鼠与正常小鼠对比，其结肠黏液层厚度显著下降，单独给小檗碱组对黏液层厚度无显著影响，而给水苏糖和组合物组能显著增加小鼠结肠黏液层厚度，且组合物增加的更为显著(图19，表10)。
表10.盐酸小檗碱与水苏糖单独及联合给药对糖尿病小鼠结肠黏液层厚度的影响
Claims (10)
1.一种组合物在制备调节肠道菌群药物或保健品中的应用，其特征在于，所述的组合物包含盐酸小檗碱和水苏糖两种化合物，其结构式如下所示，
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述组合物中盐酸小檗碱和水苏糖的重量份数配比为1:0.1～50。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述组合物中盐酸小檗碱和水苏糖的重量份数配比为1:0.2～25。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述组合物中盐酸小檗碱和水苏糖的重量份数配比为1:1。
5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述组合物中盐酸小檗碱和水苏糖的剂量均为5-320mg/kg，优选的剂量为80mg/kg。
6.一种药物组合物在制备调节肠道菌群药物或保健品中的应用，其特征在于，所述的药物组合物包含盐酸小檗碱和水苏糖两种化合物组成的组合物以及药学上可接受的载体或赋形剂，其中盐酸小檗碱和水苏糖结构式如下所示，
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述药物组合物包括颗粒剂、胶囊剂、片剂、口服液、丸剂、混悬剂、滴丸剂、微丸剂、口含片、口崩片、胶丸、软胶囊、分散片、溶液剂、气雾剂或喷雾剂。
8.根据权利要求1或6任一项所述的应用，其特征在于，所述组合物对肠道菌群的调节是指对放线菌门Actinobacteria、拟杆菌门Bacteroidetes、厚壁菌门Firmicutes、疣微菌门Verrucomicrobia、变形菌门Proteobacteria在总肠道菌中所占比例的调节。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，该组合物使拟杆菌门与厚壁菌门所占比例的比值增加。
10.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，该组合物使疣微菌门所占比例增加，优选地，所述组合物使嗜黏蛋白阿克曼氏菌Akkermansia muciniphila在肠道中所占比例增加。
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Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115414362A (zh) * | 2022-08-30 | 2022-12-02 | 南京纽邦生物科技有限公司 | 二氢小檗碱组合物及其应用 |
| WO2023088463A1 (en) * | 2021-11-22 | 2023-05-25 | Shenzhen Hightide Biopharmaceutical Ltd. | Compositions and methods of berberine ursodeoxycholate for modulating gut microbiome compositions |
| CN116327830A (zh) * | 2023-05-04 | 2023-06-27 | 海南医学院 | 一种抗氧化、调节肠道菌群的中药组合物及其制备方法 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101810631A (zh) * | 2010-02-26 | 2010-08-25 | 中国食品发酵工业研究院 | 水苏糖在制备防治腹泻药物中的应用 |
| CN106176773A (zh) * | 2015-05-25 | 2016-12-07 | 中国医学科学院药物研究所 | 盐酸小檗碱和水苏糖组成的组合物及其应用 |
| CN106620189A (zh) * | 2012-06-06 | 2017-05-10 | 上海交通大学 | 改善肠道菌群结构的方法及应用 |
-
2019
- 2019-04-18 CN CN201910311683.5A patent/CN111821311A/zh active Pending
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101810631A (zh) * | 2010-02-26 | 2010-08-25 | 中国食品发酵工业研究院 | 水苏糖在制备防治腹泻药物中的应用 |
| CN106620189A (zh) * | 2012-06-06 | 2017-05-10 | 上海交通大学 | 改善肠道菌群结构的方法及应用 |
| CN106176773A (zh) * | 2015-05-25 | 2016-12-07 | 中国医学科学院药物研究所 | 盐酸小檗碱和水苏糖组成的组合物及其应用 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| CAO Y, 等: "Modulation of Gut Microbiota by Berberine Improves Steatohepatitis in High-Fat Diet-Fed BALB/C Mice", 《ARCH IRAN MED.》 * |
| HUAN WANG;等: "The Effects of Berberine on the Gut Microbiota in Apc min/+ Mice Fed with a High Fat Diet", 《MOLECULES》 * |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2023088463A1 (en) * | 2021-11-22 | 2023-05-25 | Shenzhen Hightide Biopharmaceutical Ltd. | Compositions and methods of berberine ursodeoxycholate for modulating gut microbiome compositions |
| CN115414362A (zh) * | 2022-08-30 | 2022-12-02 | 南京纽邦生物科技有限公司 | 二氢小檗碱组合物及其应用 |
| WO2024046208A1 (zh) * | 2022-08-30 | 2024-03-07 | 南京纽邦生物科技有限公司 | 二氢小檗碱组合物及其应用 |
| CN116327830A (zh) * | 2023-05-04 | 2023-06-27 | 海南医学院 | 一种抗氧化、调节肠道菌群的中药组合物及其制备方法 |
| CN116327830B (zh) * | 2023-05-04 | 2024-04-12 | 海南医学院 | 一种抗氧化、调节肠道菌群的中药组合物及其制备方法 |
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