CN111812069A - 一种中药中锌离子现场快速检测的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种中药中锌离子现场快速检测的方法，包括：荧光法定量检测待测中药药样中的Zn²⁺以及表面增强拉曼散射定性定量检测待测中药药样中的Zn²⁺：其中，所用席夫碱药样络合物的制备方法包括：首先将4‑甲酰基‑3‑羟基苯甲酸及2,6‑二氨基萘配制成稀溶液，经加热冷凝回流后，得到席夫碱探针；之后将待测药样与席夫碱探针进行混合，并通过加热冷凝回流后，得到席夫碱药样络合物。与现有技术相比，本发明采用SERS和荧光双传感检测手段，有效消除其他物质的干扰，提高中药分析检测结果的灵敏度、准确度和可靠性，并具有操作简便、样品用量少、应用范围广泛、快速高效和便于携带等特点，满足了药材中痕量组分的分析检测需求。

Description

一种中药中锌离子现场快速检测的方法

技术领域

本发明属于中药分析检测技术领域，涉及一种中药中锌离子现场快速检测的方法。

背景技术

中药是以中国传统医药理论指导采集、炮制、制剂，说明作用机理，指导临床应用的药物。中药以其悠久历史、独特的疗效、毒副作用相对较小等特点越来越受到人们青睐和重视。安全有效是评价药品的重要指标，围绕这一中心不但要对中药有效成分进行控制，还要对药物中有毒、有害成分进行控制，如中药中的农药、重金属残留等。在重金属元素中，锌元素是比较活跃的微量元素之一。锌的来源一方面源于种植，中药一般以植物药为主，而植物由于受到环境(土壤、气候、供肥条件等)的影响，其质量也将受到影响，突出表现在重金属含量差异上；另外原药材炮制加工的粗处理、炮制加工都可能影响重金属含量；还有保存过程中的重蒸导致药材污染。少量的微量元素对人体是有益处。锌是200多种含锌酶的组成成分，是酶的激活剂。但是当它们过量就会对人体的健康造成严重的影响，严重时会使人体内的蛋白质凝固。

因此，为了确保人们食用中药的质量和安全，运用有效的分析方法来测定中药中的微量元素含量的需求越来越迫切，以便更快速和灵敏地鉴定并量化中药中的锌离子，并完成在中药种植加工过程中的离子浓度的监控。

表面增强拉曼散射(SERS)是指当一些分子被吸附到某些粗糙金属(Au、Ag、Cu等)表面时，它们的拉曼散射强度会增加10⁴-10⁶倍。由于SERS技术快速灵敏的特点，广泛用于食品安全、生物检测等方面。多年来，对于中药中Zn²⁺的检测，大多采用分光光度法、原子吸收分光光度法(AAs)、荧光分光光度法、高效液相色谱法和电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)分析技术等。而用表面增强拉曼散射和荧光光谱法同时分析检测Zn²⁺的方法却鲜有报道。

席夫碱与席夫碱金属络合物对拉曼信号有不同的响应，因此，SERS技术可以实现中药中Zn²⁺的现场快速检测，且其具有分析速度快、检测灵敏度高和选择性好等特点，可进一步应用于医药等方面的分析检测。

发明内容

本发明的目的就是提供一种中药中锌离子现场快速检测的方法，用于解决现有中药中锌离子检测步骤繁琐、检测周期长等问题。

本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：

一种中药中锌离子现场快速检测的方法，包括：

荧光法定量检测待测中药药样中的Zn²⁺：将席夫碱药样络合物稀释后，放入石英比色皿中，使用荧光分光光度计进行检测，获得荧光光谱，对照席夫碱锌离子浓度的荧光标准图谱，得出待测中药药样中的Zn²⁺浓度，完成Zn²⁺的定量检测；

表面增强拉曼散射(SERS)检测待测中药药样中的Zn²⁺：将席夫碱药样络合物分别与L-半胱氨酸及银纳米颗粒溶液通过共价键结合，并加入氯化钠溶液，之后采用拉曼光谱仪进行检测，获得席夫碱药样络合物的拉曼图谱，并对照席夫碱锌离子浓度的拉曼标准图谱，从而实现Zn²⁺定性定量检测；

其中，所述的席夫碱药样络合物的制备方法包括以下步骤：

1)冷凝回流法合成席夫碱探针：将4-甲酰基-3-羟基苯甲酸及2,6-二氨基萘配制成稀溶液，经加热冷凝回流后，得到如上式所示的席夫碱探针，该探针的亚胺特性基团与锌离子产生螯合作用，使检测更加灵敏。席夫碱探针对锌离子的荧光猝灭可以归因于锌离子的顺磁性和分子内电荷转移机制；

2)冷凝回流法进行络合反应：将待测药样与席夫碱探针进行混合，并通过加热冷凝回流后，得到席夫碱药样络合物。

进一步地，所述的荧光法定量检测待测中药药样中的Zn²⁺中，所述的席夫碱药样络合物的稀释倍数为10-30倍。

进一步地，所述的荧光分光光度计检测过程中，激发波长为300-350nm。

进一步地，所述的席夫碱锌离子浓度的荧光标准图谱的制备方法包括以下步骤：

A1，将锌盐与乙醇混合并配制成多份不同Zn²⁺浓度的标准溶液，采用冷凝回流法将每份标准溶液分别与席夫碱探针进行络合反应，得到席夫碱标样络合物；

A2，将席夫碱标样络合物稀释后，放入石英比色皿中，使用荧光分光光度计进行检测，获得荧光光谱，根据Zn²⁺浓度以及荧光光谱中的荧光强度，即可得到席夫碱锌离子浓度的荧光标准图谱。

其中，所述的锌盐包括醋酸锌，步骤A1中所进行的络合反应与步骤2)相同；步骤A2中的稀释过程及荧光分光光度计的检测过程，分别与荧光法定量检测待测中药药样中的Zn²⁺过程相同。

进一步地，所述的拉曼光谱仪检测过程中，激发波长为750-800nm，积分时间为3-8s。

进一步地，所述的表面增强拉曼散射检测待测中药药样中的Zn²⁺中，所述的席夫碱药样络合物、L-半胱氨酸、银纳米颗粒溶液以及氯化钠溶液之间的体积比为(1-12):(0.1-2.0):(1-15):(0.1-2.0)；

所述的氯化钠溶液的浓度为0.001-0.1M。

作为优选的技术方案，所述的席夫碱药样络合物、L-半胱氨酸、银纳米颗粒溶液以及氯化钠溶液之间的体积比为(2-12):(0.1-1.5):(2-12):(0.1-1.5)。

进一步地，所述的席夫碱锌离子浓度的拉曼标准图谱的制备方法包括以下步骤：

B1，将锌盐与乙醇混合并配制成多份不同Zn²⁺浓度的标准溶液，采用冷凝回流法将每份标准溶液分别与席夫碱探针进行络合反应，得到席夫碱标样络合物；

B2，将席夫碱标样络合物分别与L-半胱氨酸及银纳米颗粒溶液通过共价键结合，并加入氯化钠溶液，之后采用拉曼光谱仪进行检测，获得席夫碱标样络合物的拉曼图谱，根据Zn²⁺浓度以及拉曼图谱中的拉曼强度，即可得到席夫碱锌离子浓度的拉曼标准图谱。

其中，所述的锌盐包括醋酸锌，步骤B1中所进行的络合反应与步骤2)相同；步骤B2中席夫碱标样络合物与L-半胱氨酸、银纳米颗粒溶液及氯化钠溶液之间通过共价键结合过程，以及拉曼光谱仪的检测过程均与表面增强拉曼散射检测待测中药药样中的Zn²⁺过程相同。

进一步地，所述的银纳米颗粒溶液的制备方法为柠檬酸钠还原法，包括：将水与甘油混合并加热至50-70℃，之后加入0.005-0.015M硝酸银溶液与0.005-0.015M柠檬酸钠溶液，并依次经过加热冷凝回流与离心浓缩过程后，得到银纳米颗粒溶液；

其中，所述的硝酸银溶液、柠檬酸钠溶液及水的体积比为1:(1-3):(20-30)；

所述的加热冷凝回流中，回流温度为50-70℃，回流时间为0.5-1.5h；

所述的离心浓缩过程中，离心转速为7000-9000rpm，离心时间为10-20min；

所述的银纳米颗粒溶液中，银纳米颗粒的浓度为0.2-0.3mmol/L。

进一步地，步骤1)中，所述的稀溶液中，4-甲酰基-3-羟基苯甲酸及2,6-二氨基萘的浓度为(0.5-1.5)×10^-4M，溶剂包括乙醇；

所述的加热冷凝回流中，回流温度为60-80℃，回流时间为10-14h。

进一步地，步骤2)中，所述的待测药样与席夫碱探针的体积比为(0.5-1.5):1；

所述的加热冷凝回流中，回流温度为90-100℃，回流时间为1-3h。

与现有技术相比，本发明具有以下特点：

1)通过荧光分光光度法，可以实现对中药中Zn²⁺的检测，其峰位置明显且稳定性强，可以消除其他物质的干扰，实现中药中Zn²⁺的同时检测；

2)以往检测中药中Zn²⁺多采用火焰原子吸收光谱法，本发明采用SERS、荧光双传感检测手段，有效消除其他物质的干扰，提高中药分析检测结果的灵敏度、准确度和可靠性，并具有操作简便、样品用量少、应用范围广泛、快速高效和便于携带等特点，满足了药材中痕量组分的分析检测需求；

3)通过SERS和荧光双传感，可实现对中药中Zn²⁺的现场快速定性和定量检测，Zn²⁺的检测限达到1×10^-10M。

附图说明

图1为实施例1中席夫碱探针加入Zn²⁺的荧光变化对比图；

图2为实施例1中制备得到的标准Zn²⁺溶液浓度变化的荧光图谱；

图3为实施例1中制备得到的席夫碱探针的SERS图谱，中间曲线为特征峰(1604cm^-1，C＝N)；

图4为实施例2中中药中Zn²⁺检测流程图。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施例对本发明进行详细说明。

一种中药中锌离子现场快速检测的方法，包括以下步骤：

1)冷凝回流法合成席夫碱探针：配制含(0.5-1.5)×10^-4M 4-甲酰基-3-羟基苯甲酸及(0.5-1.5)×10^-4M 2,6-二氨基萘的乙醇稀溶液，在60-80℃下冷凝回流10-14h后，得到席夫碱探针；

2)柠檬酸钠还原法制备银纳米颗粒溶液：将水与甘油混合并加热至50-70℃，之后加入0.005-0.015M硝酸银溶液与0.005-0.015M柠檬酸钠溶液，并依次经过加热冷凝回流与离心浓缩过程后，得到0.2-0.3mmol/L银纳米颗粒溶液；

其中，所述的硝酸银溶液、柠檬酸钠溶液及水的体积比为1:(1-3):(20-30)；

加热冷凝回流中，回流温度为50-70℃，回流时间为0.5-1.5h；

离心浓缩过程中，离心转速为7000-9000rpm，离心时间为10-20min；

3)冷凝回流法进行络合反应：将待测药样与席夫碱探针以体积比为(0.5-1.5):1混合均匀，并在90-100℃下冷凝回流1-3h后，得到席夫碱药样络合物；

4)荧光法定量检测待测中药药样中的Zn²⁺：将席夫碱药样络合物稀释10-30倍后，放入石英比色皿中，使用荧光分光光度计进行检测，激发波长为300-350nm，获得荧光光谱，对照席夫碱锌离子浓度的荧光标准图谱，得出待测中药药样中的Zn²⁺浓度，完成Zn²⁺的定量检测；

表面增强拉曼散射检测待测中药药样中的Zn²⁺：将席夫碱药样络合物分别与L-半胱氨酸及银纳米颗粒溶液通过共价键结合，并加入氯化钠溶液，之后采用拉曼光谱仪进行检测，激发波长为750-800nm，积分时间为3-8s，获得席夫碱药样络合物的拉曼图谱，并对照席夫碱锌离子浓度的拉曼标准图谱，从而实现Zn²⁺定性定量检测。

其中，席夫碱锌离子浓度的荧光标准图谱的制备方法包括以下步骤：

A1，将锌盐与乙醇混合并配制成多份不同Zn²⁺浓度的标准溶液，采用冷凝回流法将每份标准溶液与席夫碱探针进行络合反应，得到席夫碱标样络合物；

A2，将席夫碱标样络合物稀释后，放入石英比色皿中，使用荧光分光光度计进行检测，获得荧光光谱，根据Zn²⁺浓度以及荧光光谱中的荧光强度，即可得到席夫碱锌离子浓度的荧光标准图谱。

其中，锌盐包括醋酸锌，步骤A1中所进行的络合反应与步骤2)相同；步骤A2中的稀释过程与荧光分光光度计的检测过程与荧光法定量检测待测中药药样中的Zn²⁺过程相同。

席夫碱锌离子浓度的拉曼标准图谱的制备方法包括以下步骤：

B1，将锌盐与乙醇混合并配制成多份不同Zn²⁺浓度的标准溶液，采用冷凝回流法将每份标准溶液分别与席夫碱探针进行络合反应，得到席夫碱标样络合物；

B2，将席夫碱标样络合物分别与L-半胱氨酸及银纳米颗粒溶液通过共价键结合，并加入氯化钠溶液，之后采用拉曼光谱仪进行检测，获得席夫碱标样络合物的拉曼图谱，根据Zn²⁺浓度以及拉曼图谱中的拉曼强度，即可得到席夫碱锌离子浓度的拉曼标准图谱。

其中，锌盐包括醋酸锌，步骤B1中所进行的络合反应与步骤2)相同；步骤B2中席夫碱标样络合物与L-半胱氨酸、银纳米颗粒溶液及氯化钠溶液之间通过共价键结合过程，以及拉曼光谱仪的检测过程均与表面增强拉曼散射检测待测中药药样中的Zn²⁺过程相同。

席夫碱药样络合物(或席夫碱标样络合物)、L-半胱氨酸、银纳米颗粒溶液以及氯化钠溶液之间的体积比为(1-12):(0.1-2.0):(1-15):(0.1-2.0)(优选为(2-12):(0.1-1.5):(2-12):(0.1-1.5))；氯化钠溶液的浓度为0.001-0.1M。

本实施例以本发明技术方案为前提进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。

实施例1：

本实施例用于通过检测水样中的Zn²⁺，判断该方法的可行性，具体包括以下步骤：

1)冷凝回流法合成席夫碱探针：在冷凝回流装置中，以乙醇为溶剂，配制含10^-4M4-甲酰基-3-羟基苯甲酸及10^-4M 2,6-二氨基萘的稀溶液，并在70℃下冷凝回流12h，得到席夫碱探针；

2)柠檬酸钠还原法制备银纳米颗粒溶液：将50mL蒸馏水与50mL甘油混合并加热至60℃，之后加入2mL 0.01M硝酸银溶液与4mL 0.01M柠檬酸钠溶液，并在60℃下冷凝回流1h，再在8000rpm的转速下离心15min，得到浓度为0.25mmol/L的银纳米颗粒溶液；

3)冷凝回流法进行络合反应：在冷凝回流装置中，以乙醇为溶剂，配制不同浓度的醋酸锌溶液，并分别与席夫碱探针以体积比1:1混合均匀，之后分别在95℃下冷凝回流2h后，得到席夫碱标样络合物；

4)紫外法检测样品中的Zn²⁺：将席夫碱探针与席夫碱标样络合物分别置于紫外灯下，结果如图1所示，从图中可以看出，席夫碱探针发出黄色荧光，加入Zn²⁺离子之后荧光减弱至猝灭，因此，本方法可实现Zn²⁺的检测；

5)荧光法定量检测样品中的Zn²⁺：将席夫碱标样络合物稀释20倍后，放入石英比色皿中，所得标准溶液中Zn²⁺浓度依次为10^-9、10^-8、10^-7、10^-6、10^-5、10^-4、10^-3、10^-2M，使用荧光分光光度计进行检测，设置激发波长为340nm，获得不同Zn²⁺浓度下的荧光光谱(如图2所示)，从图中可以看出，Zn²⁺络合物的荧光发射波长为540nm，并且随着Zn²⁺浓度增加，荧光强度呈现递减趋势，因此，本方法可实现Zn²⁺的定量检测；

6)绘制荧光标准图谱：根据步骤5)中各样品中Zn²⁺浓度及荧光光谱中的荧光强度，得到席夫碱锌离子浓度的荧光标准图谱；

7)绘制拉曼标准图谱：将步骤3)中制备的多份10μL席夫碱标样络合物分别与1μLL-半胱氨酸及10μL银纳米颗粒溶液通过共价键连接(即将三者在常温下搅拌混合15min)，并加入1μL 0.01M氯化钠溶液混合均匀，再滴加在多个硅片表面上，之后采用拉曼光谱仪分别进行检测，激发波长为785nm，积分时间为5s，获得席夫碱标样络合物的拉曼图谱，根据Zn²⁺浓度以及拉曼图谱中的拉曼强度，得到席夫碱锌离子浓度的拉曼标准图谱；

8)验证：取某河流中的水样，采用同步骤3)的方法与席夫碱探针进行络合反应，得到席夫碱水样络合物，将10μL席夫碱水样络合物分别与1μL L-半胱氨酸及10μL银纳米颗粒溶液通过共价键结合，并加入1μL 0.01M氯化钠溶液，再滴加在硅片表面上，之后采用拉曼光谱仪分别进行检测，获得席夫碱标样络合物的拉曼图谱，激发波长为785nm，积分时间为5s，根据拉曼强度并对照拉曼标准图谱，从而实现河流水样中Zn²⁺的定量检测(如图3所示)，检测结果如表1所示，从表中可以看出，本方法与基于火焰原子吸收光谱法的检测结果基本吻合，表明本发明方法可用于河水水样中Zn²⁺的分析检测。

表1

实施例2：

本实施例用于检测中药中的Zn²⁺，具体流程如图4所示，包括以下步骤：

1)冷凝回流法合成席夫碱探针：配制含10^-4M 4-甲酰基-3-羟基苯甲酸及10^-4M2,6-二氨基萘的乙醇稀溶液，在70℃下冷凝回流12h后，得到席夫碱探针；

2)柠檬酸钠还原法制备银纳米颗粒溶液：将50mL蒸馏水与50mL甘油混合并加热至60℃，之后加入2mL 0.01M硝酸银溶液与4mL 0.01M柠檬酸钠溶液，并在60℃下冷凝回流1h，再在8000rpm的转速下离心15min，得到浓度为0.25mmol/L的银纳米颗粒溶液；

3)冷凝回流法进行络合反应：在冷凝回流装置中，将5mL待测药样与5mL席夫碱探针混合均匀，之后分别在95℃下冷凝回流2h后，得到席夫碱药样重金属络合物；

4)荧光和SERS双传感器检测中药中Zn²⁺：

A、将席夫碱药样重金属络合物稀释20倍后，放入石英比色皿中，使用荧光分光光度计进行检测，设置激发波长为340nm，得到包含络合了Zn²⁺的席夫碱药样重金属络合物的荧光光谱图，根据Zn²⁺的发射波长(675nm)及荧光强度，对照实施例1中的席夫碱锌离子浓度的荧光标准图谱，得到Zn²⁺浓度，完成Zn²⁺的定量检测；

B、将10μL席夫碱药样重金属络合物分别与1μL L-半胱氨酸及10μL银纳米颗粒溶液通过共价键结合，并加入1μL 0.01M氯化钠溶液，再滴加在硅片表面上，之后采用便携式拉曼光谱仪进行拉曼信号的检测，设置激发波长为785nm，积分时间为5s，获得席夫碱药样重金属络合物的拉曼图谱，根据拉曼强度并对照拉曼标准图谱，从而得到中药中Zn²⁺浓度。

此外，本实施例还采用火焰原子吸收光谱法对该中药样品进行分析检测，结果如表2所示，从表中可以看出，本实施例的分析结果与火焰原子吸收光谱法的结果匹配度较好，表明本方法具有较好的检测准确度，有望作为一种快速检测方法用于中药中金属离子的快速分析检测。

表2

上述的对实施例的描述是为便于该技术领域的普通技术人员能理解和使用发明。熟悉本领域技术的人员显然可以容易地对这些实施例做出各种修改，并把在此说明的一般原理应用到其他实施例中而不必经过创造性的劳动。因此，本发明不限于上述实施例，本领域技术人员根据本发明的揭示，不脱离本发明范畴所做出的改进和修改都应该在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种中药中锌离子现场快速检测的方法，其特征在于，该方法包括：

荧光法定量检测待测中药药样中的Zn²⁺：将席夫碱药样络合物稀释后，使用荧光分光光度计进行检测，获得荧光光谱，对照席夫碱锌离子浓度的荧光标准图谱，得出待测中药药样中的Zn²⁺浓度，完成Zn²⁺的定量检测；

表面增强拉曼散射检测待测中药药样中的Zn²⁺：将席夫碱药样络合物分别与L-半胱氨酸及银纳米颗粒溶液通过共价键结合，并加入氯化钠溶液，之后采用拉曼光谱仪进行检测，获得席夫碱药样络合物的拉曼图谱，并对照席夫碱锌离子浓度的拉曼标准图谱，从而实现Zn²⁺定性定量检测；

其中，所述的席夫碱药样络合物的制备方法包括以下步骤：

1)冷凝回流法合成席夫碱探针：将4-甲酰基-3-羟基苯甲酸及2,6-二氨基萘配制成稀溶液，经加热冷凝回流后，得到席夫碱探针；

2)冷凝回流法进行络合反应：将待测药样与席夫碱探针进行混合，并通过加热冷凝回流后，得到席夫碱药样络合物。

2.根据权利要求1所述的一种中药中锌离子现场快速检测的方法，其特征在于，所述的荧光法定量检测待测中药药样中的Zn²⁺中，所述的席夫碱药样络合物的稀释倍数为10-30倍。

3.根据权利要求1所述的一种中药中锌离子现场快速检测的方法，其特征在于，所述的荧光分光光度计检测过程中，激发波长为300-350nm。

4.根据权利要求1所述的一种中药中锌离子现场快速检测的方法，其特征在于，所述的席夫碱锌离子浓度的荧光标准图谱的制备方法包括以下步骤：

A1，将锌盐与乙醇混合并配置成多份不同Zn²⁺浓度的标准溶液，采用冷凝回流法将每份标准溶液分别与席夫碱探针进行络合反应，得到席夫碱标样络合物；

A2，将席夫碱标样络合物稀释后，使用荧光分光光度计进行检测，获得荧光光谱，根据Zn²⁺浓度以及荧光光谱中的荧光强度，即可得到席夫碱锌离子浓度的荧光标准图谱。

5.根据权利要求1所述的一种中药中锌离子现场快速检测的方法，其特征在于，所述的拉曼光谱仪检测过程中，激发波长为750-800nm，积分时间为3-8s。

6.根据权利要求1所述的一种中药中锌离子现场快速检测的方法，其特征在于，所述的表面增强拉曼散射检测待测中药药样中的Zn²⁺中，所述的席夫碱药样络合物、L-半胱氨酸、银纳米颗粒溶液以及氯化钠溶液之间的体积比为(1-12):(0.1-2.0):(1-15):(0.1-2.0)；

所述的氯化钠溶液的浓度为0.001-0.1M。

7.根据权利要求1所述的一种中药中锌离子现场快速检测的方法，其特征在于，所述的席夫碱锌离子浓度的拉曼标准图谱的制备方法包括以下步骤：

B1，将锌盐与乙醇混合并配置成多份不同Zn²⁺浓度的标准溶液，采用冷凝回流法将每份标准溶液与席夫碱探针进行络合反应，得到席夫碱标样络合物；

B2，将席夫碱标样络合物分别与L-半胱氨酸及银纳米颗粒溶液通过共价键结合，并加入氯化钠溶液，之后采用拉曼光谱仪进行检测，获得席夫碱标样络合物的拉曼图谱，根据Zn²⁺浓度以及拉曼图谱中的拉曼强度，即可得到席夫碱锌离子浓度的拉曼标准图谱。

8.根据权利要求1所述的一种中药中锌离子现场快速检测的方法，其特征在于，所述的银纳米颗粒溶液的制备方法为柠檬酸钠还原法，包括：将水与甘油混合并加热至50-70℃，之后加入0.005-0.015M硝酸银溶液与0.005-0.015M柠檬酸钠溶液，并依次经过加热冷凝回流与离心浓缩过程后，得到银纳米颗粒溶液；

其中，所述的硝酸银溶液、柠檬酸钠溶液及水的体积比为1:(1-3):(20-30)；

所述的加热冷凝回流中，回流温度为50-70℃，回流时间为0.5-1.5h；

所述的离心浓缩过程中，离心转速为7000-9000rpm，离心时间为10-20min；

所述的银纳米颗粒溶液中，银纳米颗粒的浓度为0.2-0.3mmol/L。

9.根据权利要求1所述的一种中药中锌离子现场快速检测的方法，其特征在于，步骤1)中，所述的稀溶液中，4-甲酰基-3-羟基苯甲酸及2,6-二氨基萘的浓度为(0.5-1.5)×10^-4M；

所述的加热冷凝回流中，回流温度为60-80℃，回流时间为10-14h。

10.根据权利要求1所述的一种中药中锌离子现场快速检测的方法，其特征在于，步骤2)中，所述的待测药样与席夫碱探针的体积比为(0.5-1.5):1；

所述的加热冷凝回流中，回流温度为90-100℃，回流时间为1-3h。

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