CN111781128B - 一种尿分析仪用鞘液及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
一种尿分析仪用鞘液及其制备方法，属于鞘液技术领域。解决了现有技术中尿分析仪用鞘液含有有机溶剂、需要加热溶解的技术问题。本发明的尿分析仪用鞘液，包括水、渗透压补偿剂、螯合剂、表面活性剂、粒子稳定剂和抗菌剂，pH范围为6‑8，渗透压范围为220‑340mOsm/kg；其中，粒子稳定剂为透明质酸钠、鞘磷脂、腺嘌呤、抑肽酶、海藻糖、葡萄糖等一种或多种，鞘液中，粒子稳定剂的质量浓度小于等于4g/L。该尿分析仪用鞘液可以形成鞘流的同时不改变粒子形态，对检测装置腐蚀性小，用本发明鞘液包裹的样本不仅仅使得检测装置进行粒子计数，还可以被高速拍摄成像。
Description
技术领域
本发明属于鞘液技术领域，具体涉及一种尿分析仪用鞘液及其制备方法。
背景技术
流动的液体可以分为层流和湍流两种状态，流动的液体有一个分界点，即雷诺数Re。Re＝dρv/η，式中，d为管内直径，ρ为液体密度，v液体流速，η为黏滞系数。当Re＜2300时，液流处于层流的状态，当Re＞2300时，液流处于湍流状态。测试仪器要求样本处于层流状态，通常控制流速在10m/s以内。测试过程中，样本外面包裹着一层流速更高的鞘液，使得样本里的粒子不发散，实现样本与鞘液稳定的同轴流动状态，同时利用液体聚焦原理，使样本流的直径变小，分散样本中的粒子，避免多个粒子重叠，经过检测区后进行粒子的检测。
尿分析仪用鞘液基于流动式显微成像原理，使样本在鞘液的包裹下进入流动池，流动池中的检测器检测光学和电子信息进行粒子计数。
现有技术中的尿分析仪用部分鞘液含有有机溶剂，影响环境，部分鞘液需要加热溶解，操作复杂。
发明内容
本发明的目的是解决现有技术中尿分析仪用鞘液含有有机溶剂、需要加热溶解的技术问题，提供一种尿分析仪用鞘液及其制备方法。
本发明的尿分析仪用鞘液，包括水、渗透压补偿剂、螯合剂、表面活性剂、粒子稳定剂和抗菌剂，pH范围为6-8，渗透压范围为220-340mOsm/kg；
所述粒子稳定剂为透明质酸钠、鞘磷脂、腺嘌呤、抑肽酶、海藻糖、葡萄糖等一种或多种，鞘液中，粒子稳定剂的质量浓度小于等于4g/L。
优选的是，还包括缓冲剂，缓冲剂为乙酸盐、磷酸盐、邻苯二甲酸氢钾、柠檬酸、Tris-HCl、硼酸、柠檬酸磷酸盐、Tris、麦黄酮、Good's、MES中的一种或多种，鞘液中，缓冲剂的摩尔浓度小于等于40mmol/L。
优选的是，所述渗透压补偿剂为氯化钠、氯化钾中的一种或多种，鞘液中，渗透压补偿剂的质量浓度小于等于15g/L。
优选的是，所述螯合剂为乙二胺四乙酸、乙二胺四乙酸二钠、乙二胺四乙酸四钠、乙二胺四乙酸二钾、乙二胺四乙酸四钾中的一种或多种，鞘液中，螯合剂的质量浓度小于等于5g/L。
优选的是，所述表面活性剂为聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物、聚山梨脂、聚氧乙烯脂肪醇中的一种或多种，鞘液中，表面活性剂的质量浓度小于等于4％。
优选的是，所述抗菌剂为甲基异噻唑啉酮(MIT)、叠氮钠、吡啶硫酮钠、苯氧乙醇、ProClin系列、KroVin系列中的一种或多种，鞘液中，抗菌剂的质量浓度小于等于7g/L。
本发明还提供上述尿分析仪用鞘液的制备方法：按配比，将渗透压补偿剂、螯合剂、表面活性剂、粒子稳定剂、抗菌剂和缓冲剂溶于水中，调节pH范围至6-8，微孔滤膜过滤，得尿分析仪用鞘液。
优选的是，通过HCl、NaOH中的一种或多种调节pH。
优选的是，所述微孔滤膜的孔径为0.05-0.5μm，更优选的是，所述微孔滤膜的孔径为0.1μm。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
本发明尿分析仪用鞘液不含有机溶剂，毒性小，对环境影响小，且常温即可溶解，无需加热，操作简单。
本发明尿分析仪用鞘液可以形成鞘流的同时不改变粒子形态，对检测装置腐蚀性小，用本发明鞘液包裹的样本不仅仅使得检测装置进行粒子计数，还可以使尿有形成分，例如红细胞、白细胞、上皮细胞、管型等，在显微镜镜头的焦点范围内从显微镜镜头和高速相机前流过，然后被高速拍摄成像。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。
图1为本发明实施例1的尿分析仪用鞘液包裹的红细胞样品图；
图2为本发明实施例1的尿分析仪用鞘液包裹的白细胞样品图；
图3为本发明实施例1的尿分析仪用鞘液包裹的鳞状上皮细胞样品图；
图4为本发明实施例2的尿分析仪用鞘液包裹的红细胞样品图；
图5为本发明实施例2的尿分析仪用鞘液包裹的透明管型样品图。
具体实施方式
为了进一步了解本发明，下面结合具体实施方式对本发明的优选实施方案进行描述，但是应当理解，这些描述只是为进一步说明本发明的特征和优点而不是对本发明专利要求的限制。
本发明提供的尿分析仪用鞘液，包括水、渗透压补偿剂、螯合剂、表面活性剂、粒子稳定剂和抗菌剂，pH范围为6-8，渗透压范围为220-340mOsm/kg。
上述技术方案中，鞘液还可以包括缓冲剂，缓冲剂为乙酸盐、磷酸盐、邻苯二甲酸氢钾、柠檬酸、Tris-HCl、硼酸、柠檬酸磷酸盐、Tris、麦黄酮、Good's、MES中的一种或多种按任意比例的混合，鞘液中，缓冲剂的摩尔浓度小于等于40mmol/L。
上述技术方案中，粒子稳定剂为透明质酸钠、鞘磷脂、腺嘌呤、抑肽酶、海藻糖、葡萄糖等一种或多种按任意比例的混合，鞘液中，粒子稳定剂的质量浓度小于等于4g/L。粒子稳定剂的作用是使尿液样本中的粒子维持原有形态。
上述技术方案中，渗透压补偿剂为氯化钠、氯化钾中的一种或多种按任意比例的混合，鞘液中，渗透压补偿剂的质量浓度小于等于15g/L。渗透压补偿剂用于维持溶液渗透压，防止粒子发生溶解。
上述技术方案中，螯合剂为乙二胺四乙酸、乙二胺四乙酸二钠、乙二胺四乙酸四钠、乙二胺四乙酸二钾、乙二胺四乙酸四钾中的一种或多种按任意比例的混合，鞘液中，螯合剂的质量浓度小于等于5g/L。螯合剂的作用是降低细胞聚集。
上述技术方案中，表面活性剂为非离子表面活性剂，优选为聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物、聚山梨脂、聚氧乙烯脂肪醇中的一种或多种按任意比例的混合，鞘液中，表面活性剂的质量浓度小于等于4％。
上述技术方案中，抗菌剂为甲基异噻唑啉酮、叠氮钠、吡啶硫酮钠、苯氧乙醇、ProClin系列、KroVin系列中的一种或多种按任意比例的混合，鞘液中，抗菌剂的质量浓度小于等于7g/L。抗菌剂度作用是杀灭细菌或抑制细菌生成，防止细菌对拍照检测产生影响。
本发明还提供上述尿分析仪用鞘液的制备方法：按配比，将渗透压补偿剂、螯合剂、表面活性剂、粒子稳定剂、抗菌剂和缓冲剂溶于水中，调节pH范围至6-8，微孔滤膜过滤，即得尿分析仪用鞘液。
上述技术方案中，通过HCl或者NaOH调节pH；微孔滤膜的孔径为0.05-0.5μm，优选0.1μm。将渗透压补偿剂、螯合剂、表面活性剂、粒子稳定剂、抗菌剂和缓冲剂溶于水中的顺序没有特殊限制，通常先将缓冲剂溶液水中，配置成缓冲液，或直接使用含有缓冲剂的水，再将渗透压补偿剂、螯合剂、表面活性剂、粒子稳定剂和抗菌剂溶于其中。
本发明的尿分析仪用鞘液适用于各类尿分析仪，如迪瑞FUS100全自动尿有形成分分析仪、迪瑞FUS200全自动尿有形成分分析仪、迪瑞FUS2000全自动尿液分析工作站、迪瑞FUS1000全自动尿液分析系统、迪瑞FUS1000PLUS全自动尿液分析系统等。
在本发明中所使用的术语，一般具有本领域普通技术人员通常理解的含义，除非另有说明。
为了使本领域的技术人员更好地理解本发明的技术方案，下面将结合实施例和附图对本发明作进一步的详细介绍。
在以下实施例中，未详细描述的各种过程和方法是本领域中公知的常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂、装置、仪器、设备等，如无特殊说明，均可从商业途径获得。
实施例1
尿分析仪用鞘液，配方如下：
上述尿分析仪用鞘液的制备方法：将pH为6.8的35mmol/L乙酸盐缓冲液800mL与35mmol/L磷酸盐缓冲液200mL混合，分别加入氯化钠、氯化钾、乙二胺四乙酸二钠、泊洛沙姆、透明质酸钠和吡啶硫酮钠至溶解完全，用HCl、NaOH调节pH为6.8，用0.1μm的微孔滤膜进行过滤，即得所需尿分析仪用鞘液，渗透压为280Osm/kg。
将实施例1的尿分析仪用鞘液与仪器联合检测细胞，结果如图1-3所示，可以看出，各细胞分类正确，图片清晰。
实施例2
尿分析仪用鞘液，配方如下：
| 组分 | 浓度 | 含量 |
| 磷酸盐缓冲液 | 25mmol/L | 1L |
| 氯化钾 | 3g/L | 3g |
| 氯化钠 | 3g/L | 3g |
| 乙二胺四乙酸二钠 | 0.08g/L | 0.08g |
| 吐温20 | 0.5％ | 5ml |
| 鞘磷脂 | 0.02g/L | 0.02g |
| ProClin300 | 0.1％ | 1ml |
上述尿分析仪用鞘液的制备方法：pH为7.0的25mmol/L磷酸盐缓冲液1L，分别加入氯化钠、氯化钾、乙二胺四乙酸二钠、吐温20、鞘磷脂和ProClin300至溶解完全，用HCl、NaOH调节pH为7.0，用0.1μm的微孔滤膜进行过滤，即得所需尿分析仪用鞘液，渗透压为285Osm/kg。
将实施例2的尿分析仪用鞘液与仪器联合检测，结果如图4-5，可以看出，各细胞分类正确，图片清晰。
显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有实施方式予以穷举。而由此所引申出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。
Claims (10)
1.尿分析仪用鞘液，其特征在于，包括水、渗透压补偿剂、螯合剂、表面活性剂、粒子稳定剂和抗菌剂，pH范围为6-8，渗透压范围为220-340mOsm/kg；
所述粒子稳定剂为鞘磷脂，或者为鞘磷脂与透明质酸钠、腺嘌呤、抑肽酶、海藻糖、葡萄糖中的一种或多种的混合物；
鞘液中，粒子稳定剂的质量浓度小于等于4g/L。
2.根据权利要求1所述的尿分析仪用鞘液，其特征在于，还包括缓冲剂，缓冲剂为乙酸盐、磷酸盐、邻苯二甲酸氢钾、柠檬酸、Tris-HCl、硼酸、柠檬酸磷酸盐、Tris、麦黄酮、Good's、MES中的一种或多种，鞘液中，缓冲剂的摩尔浓度小于等于40mmol/L。
3.根据权利要求1所述的尿分析仪用鞘液，其特征在于，所述渗透压补偿剂为氯化钠、氯化钾中的一种或多种，鞘液中，渗透压补偿剂的质量浓度小于等于15g/L。
4.根据权利要求1所述的尿分析仪用鞘液，其特征在于，所述螯合剂为乙二胺四乙酸、乙二胺四乙酸二钠、乙二胺四乙酸四钠、乙二胺四乙酸二钾、乙二胺四乙酸四钾中的一种或多种，鞘液中，螯合剂的质量浓度小于等于5g/L。
5.根据权利要求1所述的尿分析仪用鞘液，其特征在于，所述表面活性剂为聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物、聚山梨脂、聚氧乙烯脂肪醇中的一种或多种，鞘液中，表面活性剂的质量浓度小于等于4％。
6.根据权利要求1所述的尿分析仪用鞘液，其特征在于，所述抗菌剂为甲基异噻唑啉酮、叠氮钠、吡啶硫酮钠、苯氧乙醇、ProClin系列、KroVin系列中的一种或多种，鞘液中，抗菌剂的质量浓度小于等于7g/L。
7.根据权利要求1-6任何一项所述的尿分析仪用鞘液，其特征在于，按配比，将渗透压补偿剂、螯合剂、表面活性剂、粒子稳定剂、抗菌剂和缓冲剂溶于水中，调节pH范围至6-8，微孔滤膜过滤，得尿分析仪用鞘液。
8.根据权利要求7所述的尿分析仪用鞘液，其特征在于，通过HCl、NaOH中的一种或多种调节pH。
9.根据权利要求7所述的尿分析仪用鞘液，其特征在于，所述微孔滤膜的孔径为0.05-0.5μm。
10.根据权利要求9所述的尿分析仪用鞘液，其特征在于，所述微孔滤膜的孔径为0.1μm。
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