CN111770918B - Trpc6的抑制剂 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及式(I)的化合物及其药学上可接受的盐，其中R1至R6、A、U、V、W、X、Y和Z如本文所定义。本发明还涉及包含这些化合物的药物组合物、使用这些化合物治疗各种疾病和病症的方法、制备这些化合物的方法以及用于这些方法的中间体。

Description

TRPC6的抑制剂
发明领域
本发明涉及用于治疗心脏及呼吸病状、肾病、肝病、肌营养不良、纤维化病症、疼痛、缺血或 缺血再灌注损伤、及癌症以及抑制瞬时受体电位C6离子通道(TRPC6)的药物化合物、组合物及方法。
背景
存在多种离子通道蛋白来介导穿过细胞膜的离子通量。离子通道蛋白的正确表达及功能对于维 持细胞功能、细胞内通信等是必不可少的。实现细胞稳态的一个重要方面为在发育期间及响应多种 刺激时维持各种细胞类型中的适当离子浓度。大量不同类型的离子通道是通过使离子穿过质膜移入及移出细胞及在细胞内通过使离子移动穿过细胞内细胞器(包括例如内质网、肌质网、粒线体及包括 内体及溶酶体的内吞细胞器)的膜来维持细胞稳态。许多疾病是膜电位失调或异常钙处理的结果。鉴 于离子通道在调节细胞膜电位及离子通量中的重要性，鉴定可促进或抑制特定离子通道的试剂作为 研究工具及可能治疗剂具有重要意义。
一种此类通道为瞬时受体电位C6(TRPC6)通道。TRPC6属于TRP离子通道大家族(参见，Desai 等人，2005 Eur J Physiol 451:11-18；Clapham等人，2001 Nat Neurosci 2:387-396；Clapham,2003 Nature 426:517-524；Clapham等人，Pharmacol Rev 55:591–596,2003)。TRPC6为钙渗透通道，具体地为非 选择性钙渗透阳离子通道。除钙离子外，TRPC6通道也对其他阳离子(例如钠)可渗透。因此，TRPC6 通道不仅调节细胞内钙浓度，还通过调节包括钙及钠离子的阳离子的通量来调节膜电位。尽管非选 择性阳离子通道(诸如TRPC6)尤其调节钙离子通量，但其在机理上不同于电压门控钙通道。通常，电压门控钙通道响应跨膜电位差的去极化，且可打开以允许钙从细胞外介质流入并使细胞内钙水平 或浓度快速增加。相反，非选择性阳离子通道(诸如TRPC6)通常为持久信号转导门控，且产生较低 的离子浓度变化。其显示增加的响应第二信使二酰甘油产生的活性(Hofmann等人，1999)。此外，TRPC6可响应压力的变化。这些机理差异伴随着电压门控与阳离子渗透通道之间的结构差异。因此， 尽管许多不同通道起调节各种细胞类型中的离子通量及膜电位并响应许多刺激的作用，但重要的是认识到不同类别的离子通道之间的显著结构、功能及机理差异。
TRPC6功能尤其涉及肌源性紧张度的调节。TRPC6在平滑肌细胞、内皮细胞、血管平滑肌细胞、 心肌细胞、肺动脉、主动脉、心脏、肝、脑及肾中高度表达。连同在基因剔除小鼠及培养细胞中进 行的实验，TRPC6的表达表明TRPC6可为治疗高血压及其他心脏及血管病状、先兆子痫(preeclampsia) 提供有用的靶标。
人类TRPC6通道的突变可引起局灶性节段性肾小球硬化(FSGS)(Winn等人，2005，Reiser等人， 2005)。据报导为功能获得型(Reiser等人，2005)的这些突变足以诱发疾病。此外，升高的TRPC6表 达与肾病综合征、轻微改变型肾病及糖尿病性肾病(Moller等人，2006，Ilatovskaya等人，2013，Thilo 等人，2011)或其他肾病状相关联。
基于TRPC6在TGF-B信号传导中的表达及工作，还认为其在呼吸病状、再狭窄、肝病、肌营 养不良、纤维化病症、疼痛、缺血及缺血再灌注损伤、及某些形式的癌症中是重要的。
Yue等人研究TRPC6通道在调节肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用，其可导致特发性肺动脉高压 (IPAH)。由肺动脉平滑肌细胞(PASMC)过度增殖引起的肺血管内侧肥大是IPAH患者肺血管阻力升高 的主要原因。作者发现来自健康肺组织的PASMC中高度表达TRPC6，且最小表达TRPC3。然而， 在IPAH患者的肺组织中，与正常血压患者相比，TRPC3及TRPC6的mRNA及蛋白表达显著升高。 此外，在与TRPC6 siRNA培养后，源自IPAH患者的PASMC细胞的增殖显著降低。基于这些结果， 作者得出结论，TRPC6可在介导正常PASMC增殖中起重要作用，且TRPC6失调可导致在IPAH患者中发现的PASMC增殖增加及肺血管内侧肥大(Yu等人，2004 Proc Natl Acad Sci 101(38):13861-6)。 观察到IPAH患者中增加表达的TRPC6启动子中的单核苷酸多态性的频率与正常个体相比显著更高提供进一步支持(Yue等人，2009Circulation 119:2313-22)。
涉及IPAH中的TRPC6失调的其他证据来自波生坦(bosentan，一种双重内皮素受体阻断剂，其 在临床上用于治疗IPAH)的研究。该抑制剂可降低PASMC的增殖，但其发生的机制尚不清楚。有趣地是，波生坦在IPAH患者的肺组织中不仅降低PASMC的增殖，还降低TRPC6表达(Kunichika等 人，2004 Am J Respir Crit Care Med 170(10):1101-7)。
香烟烟雾(CS)对大鼠的长期暴露导致远程肺动脉中的TRPC6 mRNA及蛋白质表达增加，且在体 外使用PASMC观察到类似效果。烟碱处理的培养大鼠PASMC上调TRPC6表达且增加细胞内钙水 平，该两者均因TRPC6 siRNA沉默而减少(Wang等人，2014 Am J PhysiolCell Physiol 306:C364-73)。 这些结果表明TRPC6在CS诱导的肺损伤中的作用。
证据支持TRPC6在其他肺病症中的作用。在慢性阻塞性肺病(COPD)患者的肺泡巨噬细胞中， 发现与对照相比，TRPC6表达升高(Finney-Hayward等人，2010 Am J RespirCell Mol Biol 43:296-304)。 在人类囊性纤维化上皮细胞中，TRPC6介导的钙内流异常增加且可导致黏液分泌过多。 siRNA-TRPC6能够减少此异常钙内流(Antigny等人2011 Am JResp Cell Mol Biol,44:83-90)。在小鼠肺成纤维细胞中，PDGF的促纤维化活性依赖于TRPC6的活化，表明TRPC6抑制会减少肺纤维 化(Lei等人，2014 Biomaterials 35:2868-77)。缺血再灌注诱导水肿及脂多醣诱导炎症的小鼠肺模型证 实TRPC6在肺内皮细胞功能中的作用，其中TRPC6缺乏能够通过保留内皮屏障功能来减少急性肺损伤(Weissmann等人，Nature Communications第3卷,论文编号:649(2012), DOI:10.1038/ncomms1660及Tauseef等人，2012 J Exp Med 209:1953-68)。
最近研究还涉及TRPC6在其他心脏病状(包括心脏肥大)中的作用。与正常心脏相比，扩张型心 肌病患者的心脏具有升高的TRPC6 mRNA表达(Kuwahara等人，2006J ClinInvest 116:3114-26)。在 心脏肥大的小鼠模型中，TRPC6心脏mRNA水平因压力超负荷(Kuwahara等人，2006 J Clin Invest 116:3114-26)、慢性异丙基肾上腺素治疗(Xie等人，2012 Nat Commun 3:1238)及由肾部分切除术所致 的尿毒症性心肌病(Xie等人，2015 JAm Soc Nephrol 26:1150-60)而升高。此外，转基因小鼠心肌细胞中的TRPC6心脏特异性过度表达诱导心脏肥大及过早死亡(Kuwahara等人，2006 J Clin Invest 116:3114-26)。
Wu及其同事发现，以心脏特异性方式表达显性阴性TRPC6的转基因小鼠在神经内分泌激动剂 输注或压力超负荷模拟后心脏肥大反应减弱，指示TRPC6为通道复合物(其为肥大的必需介体)的组 分(Wu等人，2010 Proc Natl Acad Sci.107:7000-05)。靶向TRPC6的小分子药物最近也开始在治疗心 脏病状中显示前景。例如，Seo及其同事证实TRPC6及TRPC3拮抗剂(GSK2332255B及GSK833503A) 在新生儿及成人心肌细胞中显示细胞肥大信号传导的剂量依赖性抑制(Seo等人，2014 Proc Natl Acad Sci 111:1551-1556)。同样，缺乏TRPC6的小鼠免受异丙基肾上腺素诱导心脏肥大(Xie等人，2012 Nat Commun 3:1238)。
降低TRPC6活性可对心血管疾病的治疗是有益的。在体外，与动脉粥样硬化保护(atheroprotective) 流动条件相比，人类血管内皮细胞(EC)中动脉粥样硬化倾向(atheroprone)剪切应力诱导的TRPC6 mRNA水平升高(Thilo等人，2012 Hypertension 59:1232-40)。EC迁移对动脉损伤后的愈合而言是重 要的，且TRPC6缺陷小鼠的细胞在体外防止溶血磷脂酰胆碱介导的EC迁移抑制。此外，与野生型 对照相比，高胆固醇饮食结合颈动脉损伤不会损害TRPC6缺陷小鼠的愈合(Rosembaum等人，2015 J Vasc Surg 62:1040-47及Chaudhuri等人，2008 Mol Biol Cell 19:3203-11)。同样，与未扩张动脉相比，气囊扩张术诱导的人类内乳动脉离体损伤导致TRPC6 mRNA水平升高(Bergdahl等人，2005 Am JPhysiol Cell Physiol 288:C872-80)。内皮细胞凋亡参与动脉粥样硬化病变的发生及发展，且氧化低密度脂蛋白诱导的人类主动脉EC的细胞凋亡经证实取决于TRPC6(Zhang等人，2015 Sci Rep 5:9401-10)。在大鼠前脑缺血模型中，血管SMC中的TRPC6 mRNA水平升高且与脑血流量减少相 关(Johannson等人，2015 Acta Physiol 214:376-89)。
Reiser、Winn及研究发现，患者的TRPC6突变是FSGS的致病因素(Reiser等人， 2005 Nature Genet 37:739-744；Winn等人，2005Science 308:1801-1804；/>等人，2009 Am J Physiol CellPhysiol 296:C558-69)。后续研究发现与类固醇抗性肾病综合征相关的其他TRPC6突变 (C.Sadowski等人，2014 J Am Soc Nephrol 26:1279-89)。进一步研究证实，TRPC6通过控制钙内流及 活化T细胞活化的核因子在正常足细胞功能中是重要的，其中通过通道的升高电流与肾损伤及蛋白尿的诱导相关(Moller等人，2007 JAm Soc Nephrol 18:29-36及/>等人，2009 Am J Physiol Cell Physiol 296:C558-69)。除了功能获得型突变外，还已显示TRPC6的表达在包括FSGS、轻微改 变型肾病、膜性肾小球肾炎及糖尿病性肾病的人类慢性肾病(Moller等人，2007 J Am Soc Nephrol18:29-36及Thilo等人，2011 Nephrol.Dial.Transplant 27:921-9)以及足细胞损伤的小鼠模型(Moller等 人，2007 J Am Soc Nephrol 18:29-36)中升高。已证实TRPC6缺陷小鼠具有降低的II型血管紧张素(Ang II)诱导白蛋白尿(Eckel等人，2011 J Am Soc Nephrol22:526-35)，而人类GoF突变在小鼠中的转基因 足细胞特异性表达诱导白蛋白尿及肾小球病变(Krall等人，2010 PLoS ONE e12859及Canales等人，2015 Brit J Medicine Med Res5:1198-1212)。因此，TRPC6抑制可用于治疗慢性肾病。这些发现不仅 表明TRPC6通常起到维持适当肾功能的作用，而且也表明TRPC6为至少某些FSGS病例的特定原 因。基于TRPC6在肾功能中的可能作用，TRPC6抑制剂化合物可用于治疗或改善(全部或部分)由 TRPC6功能障碍引起的慢性肾病或病状。另外，TRPC6抑制剂化合物可用于治疗或改善肾病(例如， 高血压、蛋白尿等)的症状，无关于疾病的原因。
TRPC6在妊娠期间在子宫肌层及胎盘中表达(Ku等人，2006 J Soc GynecolInvestig 13:217-225； Clarson等人，2003 J Physiol 550:515-528)。因此，TRPC6可有助于在胎盘中维持适当的肌原性紧张 度和/或在怀孕期间维持适当的胎儿及母体血压。
最近证据表明TRPC6与某些形式的癌症有关。若干研究小组已确定采自多形性胶质母细胞瘤(最 常见及无法治愈的脑癌类型)患者的细胞中的TRPC6表达升高(Chigurupati等人，2010 Cancer Res, 70:418-427；Ding等人，2010 J Natl CancerInst.102:1052-1068)。同样，Ding等人发现人类神经胶质 瘤细胞中TRPC6水平升高，且药理学或显性阴性突变体对TRPC6的抑制在体外抑制细胞生长。在 人类神经胶质瘤的两种异种移植模型中，与对照相比，在皮下或颅内植入之前，肿瘤细胞中显性阴 性TRPC6的慢病毒介导表达减小肿瘤体积(Ding等人，J.Natl.Cancer Inst.2010,102,1052-1068)。还 发现TRPC6水平增加与子宫颈癌(Wan等人，2012 Onco Targets Ther 5:171-176)、乳癌(Dhennin-Duthille等人，2011 Cell Physiol Biochem 28:813-822)、肾细胞癌(Song等人，2013 Mol Biol Rep 40:5115-5122)、头及颈鳞状细胞癌(de Quiros等人，2013 BMCCancer 13:116-127)及食道鳞状细 胞癌(Zhang等人，2013 Med Oncol 30:607)等相关联。在肝细胞癌细胞中，证实多柔比星(doxorubicin)、 缺氧及电离辐射增加TRPC6 mRNA表达，及发现TRPC6在肿瘤组织中的水平比在非涉及组织中高。 升高的TRPC6与耐药性相关，其在体外因TRPC6 RNA沉默而减少。在小鼠皮下异种移植模型中在 植入之前将TRPC6特异性短发夹RNA慢病毒递送至Huh7肿瘤细胞中减少肿瘤生长并使肿瘤对多 柔比星敏感(Wen等人，2016 Sci Rep 6:23269)。这些发现表明TRPC6可以是癌症治疗的有前景治疗 靶标。
包括非酒精性脂肪性肝炎的肝病可通过降低TRPC6活性来治疗。与常氧条件相比，缺氧增加人 类肝星状细胞系中的TRPC6表达。在使用这些细胞时，TRPC6 RNA沉默下调α平滑肌肌动蛋白及 1A1胶原蛋白(两者均与纤维化相关)的转录物，以应对缺氧(Iyer等人，2015 Exp Cell Res 336:66-75)。
TRPC6的抑制可为杜兴氏肌营养不良(Duchenne muscular dystrophy，DMD)患者提供益处。在使 用分离的心肌细胞的DMD的mdx/utrn+/-模型中，与具有野生型TRPC6基因的小鼠相比，TRPC6缺 陷将应力刺激的收缩力及钙瞬时反应恢复至正常，表明TRPC6抑制会保护DMD患者的心脏功能(Seo 等人，2014 Circ Res 114:823-32)。
纤维化病症可使用TRPC6抑制剂来治疗。TRPC6的过度表达诱导成肌纤维细胞活化，而TRPC6 的缺失减少转化生长因子β诱导的成肌纤维细胞转化。此外，TRPC6缺陷小鼠证实皮肤及心脏伤口愈合减少(Davis等人，2012 Dev Cell 23:705-15)。
TRPC6抑制剂可用于治疗疼痛。TRPC6反义寡核苷酸的脊椎递送降低临床前疼痛模型中由机 械、低渗及热刺激诱导的痛觉过敏(Alessandri-Haber等人，2009 J Neurosci29:6217-28)。
调节TRPC6的功能提供用于调节细胞中钙稳态、钠稳态、细胞内钙水平、膜极化(静止膜电位) 和/或阳离子水平的手段。可调节一或多种TRPC6功能的化合物可用于许多方面，包括但不限于维 持钙稳态；维持钠稳态；调节细胞内钙水平；调节膜极化(膜电位)；调节阳离子水平；和/或治疗或 预防与钙稳态、钠稳态、钙或钠失衡、或膜极化/超极化(包括低兴奋及过度兴奋)相关的疾病、病症 或病状，和/或治疗或预防与TRPC6表达或功能的调节或失调相关的疾病、病症或病状。
需要高选择性TRPC6拮抗剂来治疗可通过调节TRPC6来缓解的疾病或病症。
发明概述
本发明提供调节TRPC6的新的化合物，其因此适用于治疗多种可通过调节TRPC6来缓解的疾 病及病症，包括高血压、先兆子痫、再狭窄、心脏或呼吸病状、肾病、肝病、肌营养不良、纤维化 病症、疼痛、缺血或缺血再灌注损伤及癌症。本发明还涉及包含这些化合物的药物组合物、使用这 些化合物来治疗各种疾病及病症的方法、用于制备这些化合物的方法以及这些方法中所用的中间体。
在第一个实施方案(实施方案1)中，本发明涉及式(I)的化合物
其中
A为CR7或N；
U为CH或N；
V为CR8或N；
W为CR9或N；
X为CH、CC1-6烷基、COC1-6烷基或N；
Y为CH或N；
Z为CH、COH、COC1-6烷基或N；
R1选自H和卤素；
R2选自H、C1-6烷基、-CN、-CF3、-OCF3、C3-6环烷基、OC1-6烷基和OC3-6环烷基；
当Z为COH时，R1可与连接至Z环原子的羟基基团一起形成中心呋喃基环；
R3选自：
H、
任选地被一至三个独立地选自卤素、羟基或甲氧基的基团取代的C1-6烷基，以及C3-6环烷基；
R4选自H、任选地被羟基取代的C1-6烷基、C3-6环烷基；
R5为H或C1-6烷基；
R3和R5能一起形成双环；
R6选自：
H、
C1-6烷基、
-CN、
-CF3、
-OCF3、
C3-6环烷基，和
任选地被一至三个卤素取代的OC1-6烷基；
R7选自H、C1-6烷基和任选地被一至三个卤素取代的OC1-6烷基；
R8选自
H、
任选地被C3-6环烷基或一至三个卤素取代的C1-6烷基、
卤素、
-CN、
-CF3、
-NH2、
苯基、
C3-6环烷基、
OC3-6环烷基、
任选地被一至三个卤素取代的OC1-6烷基或任选地被一至三个卤素取代的C3-6环烷基，及 1-氟甲基-环丙基甲氧基；
R9选自
H、
任选地被一至三个卤素取代的C1-6烷基、
卤素、
-CN、
-CF3、
OH、
C3-6环烷基、
任选地被C3-6环烷基或一至三个卤素取代的OC1-6烷基，以及 OC3-6环烷基；
当V为CR8并且W为CR9时，R8和R9能一起形成5至6元稠合杂环；
及其药学上可接受的盐。
在第二实施方案(实施方案2)中，本发明涉及根据实施方案1的化合物，其中
R2选自H、C1-6烷基和OC1-6烷基；
R3选自H和任选地被一至三个独立地选自卤素和羟基的基团取代的C1-6烷基；
R4选自H和任选被羟基取代的C1-6烷基；
R5是H；
R6选自H、C1-6烷基和任选地被一至三个卤素取代的OC1-6烷基；
及其药学上可接受的盐。
在第三实施方案(实施方案3)中，本发明涉及根据实施方案1或2的化合物，其中Z为CH，且 U、V、W、X、Y和A如实施方案(a)至(o)中所定义：
实施方案 A U V W X Y
(a) N CH CR8 CR9 CH CH 或，
(b) N CH CR8 CR9 N CH 或，
(c) CR7 CH CR8 CR9 N N 或，
(d) CR7 CH CR8 CR9 N CH 或，
(e) CR7 CH CR8 CR9 CH N 或，
(f) N N CR8 CR9 N CH 或，
(g) N N CR8 N N CH 或，
(h) N N CR8 CR9 CH CH 或，
(i) N CH N CR9 CH CH 或，
(j) CR7 N CR8 CR9 N N 或，
(k) CR7 CH CR8 CR9 N N 或，
(l) CR7 N CR8 CR9 N CH 或，
(m) N N CR8 N CH CH 或，
(n) N CH CR8 CR9 CH N 或，
(o) N CH CR8 CR9 N N 。
及其药学上可接受的盐。
在第四实施方案(实施方案4)中，本发明涉及根据实施方案1至3中任一项的化合物，其中
U为N、V为CR8，且W为CR9，
X为CH或N，
及其药学上可接受的盐。
在第五实施方案(实施方案5)中，本发明涉及根据实施方案1至4中任一项的化合物，其中
A为N，
X为N，
Y为CH，
及其药学上可接受的盐。
在第六实施方案(实施方案6)中，本发明涉及根据上文实施方案1至4中任一项的化合物，其中
A为N，
X为CH，
Y为CH，
及其药学上可接受的盐。
在第七实施方案(实施方案7)中，本发明涉及根据实施方案1至4中任一项的化合物，其中
A为CR7，
X为N，
Y为N，
及其药学上可接受的盐。
在第八实施方案(实施方案8)中，本发明涉及根据实施方案1至4中任一项的化合物，其中
A为CR7，
X为N，
Y为CH，
及其药学上可接受的盐。
在第九实施方案(实施方案9)中，本发明涉及根据实施方案1至8中任一项的化合物，其中R8选自H、F、CF3、乙基、甲氧基、乙氧基、仲丁氧基、三氟甲氧基、三氟乙氧基、环丙基、环丙基甲氧基、1-环丙基乙氧基、1-甲基环丙基甲氧基、1-氟甲基环丙基甲氧基、2,2,2-三氟乙氧基、2,2- 二甲基环丙基甲氧基、2,2-二氟环丙基甲氧基、环丙氧基和环丁氧基，
及其药学上可接受的盐。
在第十实施方案(实施方案10)中，本发明涉及根据实施方案1至9中任一项的化合物及其药学 上可接受的盐，其中R2为H或OCH3。
在第十一实施方案(实施方案11)中，本发明涉及根据实施方案1至10中任一项的化合物，其中
R3、R4、R5和R6各自为H，
及其药学上可接受的盐。
在第十二实施方案(实施方案12)中，本发明涉及根据实施方案1至11中任一项的化合物及其药 学上可接受的盐，其中R2为OCH3。
在第十三实施方案(实施方案13)中，本发明涉及根据实施方案1至3中任一项的化合物，其中
U为CH，
V为CR8，
W为CR9，
及其药学上可接受的盐。
在第十四实施方案(实施方案14)中，本发明涉及根据实施方案1至3和13中任一项的化合物， 其中
A为N，
X为CH，
Y为CH，
及其药学上可接受的盐。
在第十五实施方案(实施方案15)中，本发明涉及根据实施方案1至3和13中任一项的化合物， 其中
A为N，
X为N，
Y为CH，
及其药学上可接受的盐。
在第十六实施方案(实施方案16)中，本发明涉及根据实施方案1至3和13中任一项的化合物， 其中
A为CH，
X为N，
Y为N，
及其药学上可接受的盐。
在第十七实施方案(实施方案17)中，本发明涉及根据实施方案1至3和13中任一项的化合物， 其中
A为CH，
X为N，
Y为CH，
及其药学上可接受的盐。
在第十八实施方案(实施方案18)中，本发明涉及根据实施方案1至3和13中任一项的化合物， 其中
A为CH，
X为CH，
Y为N，
及其药学上可接受的盐。
在第十九实施方案(实施方案19)中，本发明涉及根据实施方案1至3和13中任一项的化合物， 其中
A为CH，
X为N，
Y为N，
及其药学上可接受的盐。
在第二十实施方案(实施方案20)中，本发明涉及根据实施方案1至3和13中任一项的化合物， 其中
A为N，
X为CH，
Y为N，
及其药学上可接受的盐。
在第二十一实施方案(实施方案21)中，本发明涉及根据实施方案1至3和13至20中任一项的 化合物，其中R8选自H、氟、氯、CF3、-CN、甲基、乙基、异丁基、叔丁基、二氟甲基、甲氧基、 二氟甲氧基、乙氧基、异丙氧基、三氟甲氧基、2,2,2-三氟乙氧基、环丙基甲氧基、环丙氧基和环戊 氧基，
及其药学上可接受的盐。
在第二十二实施方案(实施方案22)中，本发明涉及根据实施方案1至3和13至21中任一项的 化合物及其药学上可接受的盐，其中R2为H或OCH3。
在第二十三实施方案(实施方案23)中，本发明涉及根据实施方案1至3和13至22中任一项的 化合物，其中
R8选自H、氯、CF3、甲基、乙基、异丁基、叔丁基、甲氧基、异丙氧基、三氟甲氧基和2,2,2- 三氟乙氧基；和
R9选自H、氟、氯和甲氧基，
及其药学上可接受的盐。
在第二十四实施方案(实施方案24)中，本发明涉及根据实施方案1至3和13至23中任一项的 化合物及其药学上可接受的盐，其中R2为OCH3。
在第二十五实施方案(实施方案25)中，本发明涉及根据实施方案1至3和13至23中任一项的 化合物及其药学上可接受的盐，其中R2为H。
在第二十六实施方案(实施方案26)中，本发明涉及根据实施方案4至25中任一项的化合物及其 药学上可接受的盐，其中Z为CH。
在第二十七实施方案(实施方案27)中，本发明涉及式(I’)的化合物
其中
A为CR7或N；
U为CH或N；
V为CR8或N；
W为CR9或N；
X为CH或N；
Y为CH或N；
R1选自H和卤素；
R2选自H、C1-6烷基、-CN、-CF3、-OCF3、C3-6环烷基、OC1-6烷基和OC3-6环烷基；
R3选自：
H、
任选地被一至三个独立地选自卤素、羟基或甲氧基的基团取代的C1-6烷基，以及C3-6环烷基；
R4选自H、任选被羟基取代的C1-6烷基、C3-6环烷基；
R5为H或C1-6烷基；
R3和R5能一起形成双环；
R6选自：
H、
C1-6烷基、
-CN、
-CF3、
-OCF3、
C3-6环烷基，和
任选地被一至三个卤素取代的OC1-6烷基；
R7选自H、C1-6烷基和任选地被一至三个卤素取代的OC1-6烷基；
R8选自
H、
任选地被C3-6环烷基或一至三个卤素取代的C1-6烷基、
卤素、
-CN、
-CF3、
-NH2、
苯基、
C3-6环烷基、
OC3-6环烷基，和
任选地被一至三个卤素取代的OC1-6烷基或任选地被一至三个卤素取代的C3-6环烷基； R9选自
H、
任选地被一至三个卤素取代的C1-6烷基、
卤素、
-CN、
-CF3、
OH、
C3-6环烷基、
任选地被C3-6环烷基或一至三个卤素取代的OC1-6烷基，以及
OC3-6环烷基；
当V是CR8并且W是CR9时，R8和R9能一起形成5至6元稠合杂环；或
当V是C-苯基并且W是C-OH时，R8和R9能一起形成7至8元稠合的杂双环；
及其药学上可接受的盐。
在第二十八实施方案(实施方案28)，本发明涉及药物组合物，其包含根据实施方案1至27中任 一项的化合物或其药学上可接受的盐、以及药学上可接受的赋形剂或载体。
具体实施方式
表1.1示出了可以通过以下合成路线和合成实施例部分中所示的实施例制备的本发明的化合物。
表1.1：
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在一个实施方案中，本发明涉及上表1.1中所述的任何化合物及其药学上可接受的盐。
在另一实施方案中，本发明涉及根据上述实施方案1的化合物及其药学上可接受的盐，其选自 表1.1的化合物1-116。
本发明还涉及药物组合物，其包含来自表1.1的化合物1至116中的任一种及其药学上可接受 的盐，和药学上可接受的赋形剂或载体。
在另一个实施方案中，本发明涉及药物组合物，其包含选自表1.1的化合物1-116的根据上述实 施方案1的化合物及其药学上可接受的盐，和药学上可接受的赋形剂或载体。
一般定义
本文中未明确定义的术语应由本领域技术人员根据公开及上下文对该术语指定其含义。然而， 如本说明书中所用，除非有相反指明，否则以下术语具有所指明的含义且附随以下约定。
在下文定义的基团、残基或部分中，碳原子数通常指明于基团之前，例如，C1-6-烷基意指具有1 至6个碳原子的烷基或残基。一般而言，在如HO、H2N、(O)S、(O)2S、NC(氰基)、HOOC、F3C等 的基团中，本领域技术人员可从该基团自身的自由价知晓连接分子的基团连接点。对于含两个或更 多个子基团的组合基团而言，最后命名的子基团为基团连接点，例如，取代基“芳基-C1-3-烷基”意指 结合至C1-3-烷基的芳基，后者结合至该取代基所连接的核或基团。
在本发明化合物描述为化学名称形式及呈化学式的情况下，若有任何差异，以化学式为准。
星号可在子式中用于指示连接至定义的核分子的键。
如本文所用，术语“被取代”意指所指定的原子上的任何一或多个氢被来自所指示基团的选择代 替，条件为不超过所指定的原子的正常价态，及该取代导致稳定化合物。
除非明确指明，否则在整篇说明书及所附权利要求中，所给定的化学式或名称应包含互变异构 体及所有立体、光学及几何异构体(例如，对映异构体、非对映异构体、E/Z异构体等)及其外消旋体以及不同比例的分别的对映异构体的混合物、非对映异构体的混合物或其中存在这样的异构体及对 映异构体的任何前述形式的混合物，以及盐，包括其药学上可接受的盐及其溶剂合物，诸如(例如) 水合物，包括游离化合物的溶剂合物或该化合物的盐的溶剂合物。
本发明的对映异构体纯化合物或中间体可通过不对称合成进行制备，例如通过制备及后续分离 适当非对映异构体化合物或中间体，其可通过已知方法(例如通过色谱分离或结晶)和/或通过使用手 性试剂(诸如手性原料、手性催化剂或手性助剂)进行分离。
此外，本领域技术人员已知如何从对应外消旋混合物制备对映异构体纯化合物，诸如通过在手 性固定相上色谱分离对应外消旋混合物；或通过使用适当拆分剂拆分外消旋混合物，例如通过外消 旋化合物与光学活性酸或碱形成非对映异构体盐，随后拆分该盐并从该盐中释放所需化合物；或通过用光学活性手性辅助试剂衍生化对应外消旋化合物，随后进行非对映异构体分离并移除手性辅助 基团；或通过外消旋体的动力拆分(例如，通过酶拆分)；通过在合适条件下从对映异构体晶体的聚集 体中进行对映选择性结晶；或通过在光学活性手性助剂存在下从合适溶剂中(分级)结晶。
本文所用的短语“药学上可接受的”指在合理范围的医疗判断下，适于与人体及动物组织接触而 无过度毒性、刺激、过敏反应或其他问题或并发症，且符合合理效益/风险比值的那些化合物、物质、 组合物和/或剂型。如本文所用，“药学上可接受的盐”指所公开化合物的衍生物，其中母化合物是通 过制备其酸或碱盐进行改性。药学上可接受的盐的实例包括(但不限于)碱性基(诸如胺)的矿物盐或有 机酸盐；及酸性基(诸如羧酸)的碱盐或有机盐等。
例如，这样的盐包括来自苯磺酸、苯甲酸、柠檬酸、乙磺酸、富马酸、龙胆酸、氢溴酸、盐酸、 马来酸、苹果酸、丙二酸、扁桃酸、甲磺酸、4-甲基-苯磺酸、磷酸、水杨酸、琥珀酸、硫酸和酒石 酸的盐。
可使用来自氨、L-精胺酸、钙、2,2'-亚胺基二乙醇、L-赖胺酸、镁、N-甲基-D-葡糖胺、钾、钠 及三(羟甲基)-胺基甲烷的阳离子形成其他药学上可接受的盐。
本发明的药学上可接受的盐可通过常规化学方法从含有碱性或酸性部分的母化合物加以合成。 通常，这样的盐可通过使这些化合物的游离酸或碱形式与足量的适当碱或酸于水或诸如乙醚、乙酸 乙酯、乙醇、异丙醇、或乙腈或其混合物的有机稀释剂中反应来合成。
除上述的那些以外，还包括适用于(例如)纯化或分离本发明化合物的其他酸的盐(例如三氟乙酸 盐)作为本发明的一部分。
术语卤素通常表示氟、氯、溴及碘
单独或与另一基团组合的术语“C1-n-烷基”(其中n为选自2、3、4、5或6的整数，优选4或6) 表示具有1至n个C原子的非环状饱和支链或直链烃基。例如术语C1-5-烷基包括基团H3C-、 H3C-CH2-、H3C-CH2-CH2-、H3C-CH(CH3)-、H3C-CH2-CH2-CH2-、H3C-CH2-CH(CH3)-、 H3C-CH(CH3)-CH2-、H3C-C(CH3)2-、H3C-CH2-CH2-CH2-CH2-、H3C-CH2-CH2-CH(CH3)-、 H3C-CH2-CH(CH3)-CH2-、H3C-CH(CH3)-CH2-CH2-、H3C-CH2-C(CH3)2-、H3C-C(CH3)2-CH2-、 H3C-CH(CH3)-CH(CH3)-及H3C-CH2-CH(CH2CH3)-。
单独或与另一基团组合的术语“C3-n-环烷基”(其中n为4至n的整数)表示具有3至n个C原子的 环状饱和无分支烃基。例如，术语C3-7-环烷基包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基及环庚基。
通过将术语“卤素”添加至“烷基”、“亚烷基”或“环烷基”(饱和或不饱和)为这样的烷基或环烷基， 其中一或多个氢原子被选自氟、氯或溴，优选氟及氯，特别优选氟的卤素原子代替。实例包括：H2FC-、 HF2C-、F3C-。
单独使用或与另一基团组合使用的术语“碳环基”意指由3至9个碳原子及任选存在的选自N、O 及S的杂原子组成的单环、双环或三环结构。术语“碳环基”指完全饱和的环系统，且涵盖稠合、桥 环及螺环系统。
上文所给定的许多术语可在化学式或基团的定义中重复使用且在各情况中彼此独立地具有上文 所给定的含义中的一种。
本申请提供可调节TRPC6功能的化合物。还提供使用这些化合物的方法。某些实施方案提供调 节细胞或动物中TRPC6功能的方法，其包括施用有效量的抑制TRPC6功能的化合物，其中该化合物抑制TRPC6介导的离子通量。某些实施方案提供调节细胞或动物中TRPC6功能的方法，其包括 施用有效量的抑制TRPC6功能的化合物，其中该化合物抑制TRPC6介导的钙内流。某些实施方案提供调节细胞或动物中TRPC6功能的方法，其包括施用有效量的抑制TRPC6功能的化合物，其中 该化合物抑制TRPC6介导的细胞骨架重组或细胞形态的改变。某些实施方案提供调节细胞中TRPC6 功能的方法，其包括向该细胞施用有效量的抑制TRPC6功能的化合物，其中该化合物抑制由TRPC6 介导的外向电流。某些实施方案提供调节细胞中TRPC6功能的方法，其包括向该细胞施用有效量的抑制TRPC6功能的化合物，其中该化合物抑制由TRPC6介导的内向电流。某些实施方案提供调节 细胞中TRPC6功能的方法，其包括向该细胞施用有效量的抑制TRPC6功能的化合物，其中该化合物抑制由TRPC6介导的内向及外向电流。某些实施方案提供调节细胞中TRPC6功能的方法，其包 括向该细胞施用有效量的抑制TRPC6功能的化合物，其中该化合物抑制TRPC6介导的细胞内钙浓度增加。某些实施方案提供调节细胞中TRPC6功能的方法，其包括向该细胞施用有效量的抑制 TRPC6功能的化合物，其中该化合物抑制细胞形态改变。某些实施方案还提供预防或治疗个体中与 TRPC6功能相关的疾病或病症的方法，其包括向该个体施用治疗有效量的抑制TRPC6功能的化合 物，其中该化合物抑制由TRPC6介导的内向电流。某些实施方案提供预防或治疗个体中与TRPC6 功能相关的疾病或病症的方法，其包括向该个体施用治疗有效量的抑制TRPC6功能的化合物，其中该化合物抑制由TRPC6介导的外向电流。某些实施方案还提供预防或治疗个体中与TRPC6功能相 关的疾病或病症的方法，其包括向该个体施用治疗有效量的抑制TRPC6功能的化合物，其中该化合 物抑制由TRPC6介导的内向及外向电流。某些实施方案提供预防或治疗个体中与TRPC6功能相关的疾病或病症的方法，其包括向该个体施用治疗有效量的抑制TRPC6功能的化合物，其中该化合物 抑制由TRPC6介导的离子通量。应注意，特定电流的抑制是指化合物在体外或体内试验中抑制该电 流(例如，内向和/或外向)的能力。在体内或体外试验中对特定电流的抑制作为特定化合物的特定功 能活性的代表。
本发明提供治疗个体中TRPC6介导的病症的方法，该方法包括施用有效量的本发明化合物，其 中上述各变量如本文(例如，在下文详述中)所述。
本发明还提供治疗个体中TRPC6介导的病症的方法，其中该方法包括施用包含本发明化合物及 药学上可接受的赋形剂、稀释剂或载体的组合物。
本发明还提供治疗个体中TRPC6介导的病症的方法，其中该方法包括施用包含本发明化合物及 药学上可接受的赋形剂、稀释剂或载体的组合物，且该TRPC6介导的病症选自败血症、严重败血症、 感染性休克、心脏肥大、缺血、缺血再灌注损伤、高血压、肺动脉高压、特发性肺动脉高压、再狭窄、慢性阻塞性肺病、囊性纤维化、阿尔茨海默病、帕金森病、亨廷顿病、肌萎缩侧索硬化(ALS)、 创伤诱导的脑病症、哮喘、疾病、类风湿性关节炎、骨关节炎、炎性肠病、多发性硬化症、肌营养 不良、迪谢内肌营养不良、先兆子痫及妊娠诱导的高血压、非酒精性脂肪性肝炎、轻微改变型肾病、 局灶性节段性肾小球硬化(FSGS)、肾病综合征、糖尿病性肾病变或糖尿病性肾病(DKD)、慢性肾病、 肾功能不全、终末期肾病、缺血或缺血再灌注损伤、癌症、糖尿病、肺纤维化、特发性肺纤维化(IPF)、 肺气肿和急性呼吸道疾病综合征(ARDS)。
除非明确指明，否则在整篇说明书及所附权利要求中，所给定的化学式或名称应包含互变异构 体及所有立体、光学及几何异构体(例如，对映异构体、非对映异构体、E/Z异构体等)及其外消旋体 以及不同比例的分别的对映异构体的混合物、非对映异构体的混合物或其中存在这样的异构体及对 映异构体的任何前述形式的混合物，以及盐，包括其药学上可接受的盐及其溶剂合物，诸如(例如) 水合物，包括游离化合物的溶剂合物或该化合物的盐的溶剂合物。
表1.1中的一些化合物可呈一种以上的互变异构形式存在。本发明包括使用所有这样的互变异 构体的方法。
本发明包括本发明化合物的药学上可接受的衍生物。“药学上可接受的衍生物”指任何药学上可 接受的盐或酯，或在施用至患者后能够(直接或间接地)提供适用于本发明的化合物、或其药理活性代谢物或药理活性残基的任何其他化合物。药理活性代谢物应理解为意指能够以酶或化学方式代谢的 任何本发明化合物。这包括例如本发明的羟基化或氧化的衍生化合物。
如本文所用，“药学上可接受的盐”指所公开化合物的衍生物，其中母化合物是通过制备其酸或 碱盐进行改性。药学上可接受的盐的实例包括(但不限于)碱性基(诸如胺)的矿物盐或有机酸盐；及酸 性基(诸如羧酸)的碱盐或有机盐等。例如，这样的盐包括乙酸盐、抗坏血酸盐、苯磺酸盐(benzenesulfonate)、苯甲酸盐、苯磺酸盐(besylate)、碳酸氢盐、酒石酸氢盐、溴化物/氢溴酸盐、依 地酸盐(edetate)、樟脑磺酸盐、碳酸盐、氯化物/盐酸盐、柠檬酸盐、乙二磺酸盐(edisylate)、乙二磺 酸盐(ethane disulfonate)、依托酸盐(estolate)、乙磺酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、葡萄糖酸盐、谷氨 酸盐、羟乙酸盐、乙内酰胺苯砷酸盐(glycollylarsnilate)、己基间苯二酚盐、哈胺(hydrabamine)、羟基 马来酸盐、羟基萘甲酸盐、碘化物、异硫代硫酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、扁 桃酸盐、甲磺酸盐、甲基溴化物、甲基硝酸盐、甲基硫酸盐、黏酸盐、萘磺酸盐、硝酸盐、草酸盐、双羟萘酸盐、泛酸盐、苯乙酸盐、磷酸盐/二磷酸盐、聚半乳糖醛酸盐、丙酸盐、水杨酸盐、硬脂酸 盐、次乙酸盐、琥珀酸盐、磺酰胺、硫酸盐、鞣酸盐、酒石酸盐、茶氯碱盐、甲苯磺酸盐、三乙碘 化物、铵、苄星(benzathine)、氯普鲁卡因(chloroprocaine)、胆碱、二乙醇胺、乙二胺、葡甲胺及普鲁卡因。可与诸如铝、钙、锂、镁、钾、钠、锌等金属的阳离子形成其他药学上可接受的盐(还参见 Pharmaceutical salts,Birge,S.M.等人，J.Pharm.Sci.,(1977),66,1-19)。
本发明的药学上可接受的盐可通过常规化学方法从含有碱性或酸性部分的母化合物加以合成。 通常，这样的盐可通过使这些化合物的游离酸或碱形式与足量的适当碱或酸于水或诸如乙醚、乙酸 乙酯、乙醇、异丙醇、或乙腈或其混合物的有机稀释剂中反应来合成。
除上述的那些以外，还包括适用于(例如)纯化或分离本发明化合物的其他酸的盐(例如三氟乙酸 盐)作为本发明的一部分。
另外，使用本发明化合物的前药在本发明的范围内。前药包括那些在经简单化学转化后能够改 性以产生本发明化合物的化合物。简单化学转化包括水解、氧化及还原。具体而言，当将前药施用 至患者时，前药可转化成以上所公开的化合物，由此给予所需药理效果。
本发明化合物还包括其同位素标记形式。本发明组合的活性剂的同位素标记形式等同于该活性 剂，只是所述活性剂的一或多个原子已经由具有不同于通常在自然中发现的该原子的原子质量或质 量数的原子质量或质量数的原子置换。容易购得且可按照已经良好确立的程序并入本发明组合的活性剂中的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、氟及氯的同位素，例如分别为2H、3H、13C、14C、15N、18O、17O、31P、32P、35S、18F及36Cl。包含一或多种上述同位素和/或其他原子的其他同位素的 本发明组合的活性剂、其前药或其药学上可接受的盐涵盖于本发明的范围内。
本发明化合物仅为如本领域技术人员所理解的视为“化学稳定”的那些。例如，具有“摇摆价 (dangling valency)”或“碳负离子”的化合物不包括在本文中所公开的本发明方法中。
对于在本申请的上文中所公开的所有化合物而言，当命名法与结构相冲突时，应理解为该化合 物由该结构定义。
缩写列表
ACN或MeCN 乙腈
aq. 水性的
BEH 乙烯桥联的杂化物
Boc 叔丁氧羰基
℃ 摄氏度
CDI 二(咪唑-1-基)甲酮
CPhos-3G-甲磺酸环钯 甲烷磺酸基(2-二环己基膦基-2',6'-双
(二甲基氨基)-1,1'-联
(palladacycle methane sulfonate) 苯)(2'-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)
DCM 二氯甲烷
DIPEA N,N-二异丙基乙胺
DMF N,N-二甲基甲酰胺
DMA N,N-二甲基乙酰胺
DMSO 二甲亚砜
EDCI.HCl 1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺
盐酸盐
eq 当量
ESI-MS 电喷雾电离质谱法
Et2O 乙醚
EtOAc或EE 乙酸乙酯
h 小时
H2 氢气
HATU N,N,N’,N’-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-
1-基)脲鎓六氟磷酸盐
HCl 盐酸
HOBT 1-羟基苯并三唑
HPLC 高效液相色谱法
L 升
LiOH 氢氧化锂
MeI 甲基碘
MeOH 甲醇
min 分钟
mL 毫升
MS 质谱
MTBE 叔丁基甲基醚
m/z 质荷比
NaH 氢化钠
NH3 氨
NH4OH NH3水溶液
n-BuOH 1-丁醇
Pd2(dba)3 三(二亚苄基丙酮)二钯(0)
Pd/C 碳载钯
PdCl2(dppf)CH2Cl2 [1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯
(II)二氯甲烷
PdCl2(PPh3)2 双(三苯基膦)氯化钯(II)
Pd(OH)2 氢氧化钯
RP 反相
RT或rt 室温(约20℃)
Rt 保留时间
RuPhos Pd G3 (2-二环己基膦基-2’,6’-二异丙氧基-1,
1’-联苯)[2-(2’-氨基-1,1’- 联苯)]甲
磺酸钯(II)
SFC 超临界流体色谱法
TBAF 四丁基氟化铵
TBTU 苯并三唑基四甲基脲四氟硼酸盐
TEA 三乙胺
TetrakisPd 四(三苯基膦)钯(0)
TF或TFA 三氟乙酸
THF 四氢呋喃
TLC SiO2薄层色谱法
XPhos 2-二环己基膦基-2’,4’,6’-三异丙基-1,
1’-联苯
XPhos Pd G2或Xphos Pd 2nd 氯(2-二环己基膦基-2’,4’,6’-三异丙基
-1,1’-联苯)[2-(2’-氨基
Gen. -1,1’-联苯)]钯(II)
XantPhos 4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨
合成实施例
以下实施例是说明性的，且如本领域技术人员所知晓，可根据个别化合物的需要修改特定试剂 或条件而无需过度实验。
以下报道的带有碱性或酸性基团的中间体和实施例可以作为相应的盐或中性化合物获得，这取 决于所采用的纯化方法和条件。盐可以通过本领域技术人员已知的标准操作转化成它们的中性对应 物。
一般方法：除非另有说明，否则所有反应均在室温(约25℃)下，在惰性气(例如，氩气、N2)下， 且在无水条件下进行。所有化合物由以下方法中的至少一种进行表征：1HNMR、HPLC、HPLC-MS 或熔点。
一般而言，反应进程是通过薄层色谱法(TLC)或HPLC-MS监测。中间体及产物使用下列方法中 的至少一种进行纯化：
在硅胶上快速色谱；重结晶；超临界流体(SCF)手性HPLC，其使用3.0x25.0cmRegisPack柱， 使用MeOH、异丙胺(IPA)及超临界二氧化碳的等浓度混合物在125bar下以80mL/min洗脱；和/或反相HPLC，其使用C18半制备型柱，使用以下梯度进行洗脱：
·MeCN+0.1％TFA及H2O+0.1％TFA,
·MeCN+0.1％甲酸及H2O+0.1％甲酸，或
·MeCN及H2O含2.5mM NH4HCO3
·MeCN及H2O及0.1％TFA，
·MeCN及H2O及0.1％NH3水溶液
·MeCN及H2O+0.1％TFA
·MeCN及H2O+0.1％NH3水溶液
·MeCN及H2O+0.1％TFA
·MeCN及H2O+0.1％NH3水溶液
·MeCN+0.08％TFA及H2O+0.1％TFA
分析数据
所报告的质谱(MS)数据是针对所观察到的质量(例如，[M+H]+)。用于表征本发明化合物的HPLC 方法描述于表1.2中。
表1.2.HPLC方法
HPLC方法描述如下。
方法1
ESI+/-离子模式。柱：CSH C18 2.1x50mm,1.7μm粒径。梯度：在1.19分钟内90％A至100％B， 在100％B下保持至1.70分钟。流速0.8mL/min。A＝(95％水+5％乙腈+0.05％甲酸)B＝(乙腈+0.05％甲 酸)。
方法2
ESI+/-离子模式。柱：BEH 2.1x50mm C18,1.7μm粒径。梯度：在4.45分钟内90％A至100％B， 在100％B下保持至4.58分钟。流速0.8mL/min。A＝(95％水+5％乙腈+2.5mM碳酸氢铵)B＝(乙腈)。
方法3
ESI+/-离子模式。柱：BEH 2.1x50mm C18,1.7μm粒径。梯度：在1.7分钟内90％A至100％B， 在100％B下保持至1.19分钟。流速0.8mL/min。A＝(95％水+5％乙腈+2.5mM碳酸氢铵)B＝(乙腈)。
方法4
ESI+/-离子模式。柱：HSS T3 2.1x100mm,1.8μm粒径。梯度：保持100％A1.00分钟，在4.50 分钟内100％A至95％B，保持100％B至4.91分钟。流速0.6mL/min。A＝(95％水+5％乙腈+0.05％甲 酸)B＝(乙腈+0.05％甲酸)。
方法5
ESI+/-离子模式。柱：CSH C18 2.1x50mm,1.7μm粒径：梯度：在4.45分钟内90％A至100％B， 在100％B下保持至4.58分钟。流速0.8mL/min。A＝(95％水+5％乙腈+0.05％甲酸)B＝(乙腈+0.05％甲 酸)。
方法6
ESI+/-离子模式。柱：HSS T3 2.1x100mm,1.8μm粒径。梯度：在3.65分钟内95％A至100％B， 在100％B下保持至4.95分钟。流速0.6mL/min。柱温60℃。A＝(95％水+5％乙腈+0.05％甲酸)B＝(乙 腈+0.05％甲酸)。
方法7
方法8
方法9
方法10
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方法11
方法12
方法13
方法14
方法15
方法16
合成实施例
本发明化合物可通过以下说明的一般方法及实施例及本领域普通技术人员已知的方法进行制 备。最佳反应条件及反应时间可根据所用特定反应物变化。除非另有说明，否则本领域普通技术人 员可容易选择溶剂、温度、压力及其他反应条件。合成实施例部分中提供具体操作。用于以下合成的中间体是商业可获得的或可通过本领域技术人员已知的方法容易地制备。反应进程可通过常规方 法诸如薄层色谱(TLC)或高压液相色谱-质谱(HPLC-MS)加以监测。中间体及产物可通过本领域已知 的方法包括柱色谱、HPLC、制备型TLC或重结晶进行纯化。
下文和合成实施例部分中描述的方法可用于制备本发明的化合物。
为了简单起见，合成实施例部分中描述的中间体中的一些可以游离碱的形式画出，但是根据所 描述的反应操作，这些化合物实际上可以形成盐。
制备
本发明化合物及其中间体可以用本领域技术人员已知的和有机合成文献中描述的合成方法，例 如用“Comprehensive Organic Transformations”,2nd Edition,RichardC.Larock,John Wiley&Sons,2010 和“March′s Advanced Organic Chemistry”,7thEdition,Michael B.Smith,John Wiley&Sons,2013中描 述的方法获得。优选地，类似于在下文中更详细地解释的制备方法，特别是如在实验部分中描述的 制备方法获得所述化合物。在一些情况下，在反应路线的实施中采用的顺序可以变化。还可以使用本领域技术人员已知的但在此未详细描述的这些反应的变体。通过研究以下路线，制备根据本发明 的化合物的一般方法对于本领域技术人员将变得显而易见。起始化合物是可商购的或可以通过文献 中或本文中描述的方法制备，或可以以类似或相似方式制备。在进行反应之前，可以使用常规保护 基团保护起始化合物中的任何官能团。这些保护基团可以在反应顺序中的合适阶段使用本领域技术人员熟悉的和描述于例如“Protecting Groups”,3rd Edition,Philip J.Kocienski,Thieme,2005和 “Protective Groups in Organic Synthesis”,4thEdition,Peter G.M.Wuts,Theodora W.Greene,John Wiley&Sons,2006”文献中的方法再次裂解。
如路线1中所描绘，本发明的通式(I)的化合物可以通过合适的式INT-1的羧酸(或者作为游离酸 或者作为与合适的金属阳离子如Li+、Na+、K+等的盐)和合适的通式INT-2的胺中间体(或者作为游 离胺或者作为盐，例如盐酸盐、氢溴酸盐等)在合适的溶剂(例如N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙 酰胺、1-甲基-2-吡咯烷酮、二氯甲烷、四氢呋喃、1,4-二噁烷等)中，在合适的偶联剂(例如O-(7-氮 杂苯并三唑-1-基)-N,N-N’,N’-四甲基脲六氟硼酸盐(HATU)、O-(苯并三唑-1-基)-N,N-N’,N’-四甲基脲四氟硼酸盐(TBTU)、(苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷鏻鎓六氟磷酸盐(PyBOP)、碳二亚胺试剂等)和碱 (例如三甲胺、N,N-二异丙基乙胺、吡啶等)存在下反应以形成酰胺键来制备。路线1中的基团/术语 R1至R6、A、U、V、W、X，Y和Z具有如上文和下文所定义的含义。
路线1：
或者，可以将羧酸INT-1转化成羧酸氯化物(使用例如亚硫酰氯或草酰氯的二氯甲烷溶液)并在合 适的碱(例如三甲胺、N,N-二异丙基-乙胺、吡啶等)存在下在合适的溶剂中与胺INT-2原样偶联。或 者，羧酸INT-1可以用二(咪唑-1-基)甲酮(CDI)活化，并在合适的碱(例如三甲胺、N,N-二异丙基-乙 胺等)存在下，在合适的溶剂(例如N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺等)中与胺INT-2原样偶联。 中间体INT-1和INT-2是本领域已知的或可以通过下述方法制备。
如在以下路线2中进一步描绘的，可替代地，本发明的化合物(I)可以从式INT-3的硼酸衍生物 和式INT-4的含卤素衍生物通过在适当的条件下进行过渡金属催化的偶联反应制备。路线2中的基 团/术语R1至R6、A、U、V、W、X、Y和Z具有如上文和下文所定义的含义。该反应优选在40℃ 至120℃下，在合适的溶剂(水/四氢呋喃、水/1,4-二噁烷、1,4-二噁烷或N,N-二甲基甲酰胺等)中，在 碱(例如磷酸钾、碳酸钠等)的存在下用钯衍生的催化剂，例如[1,1’-双(二苯基膦基)-二茂铁]-二氯钯 (II)-CH2Cl2-络合物(PdCl2(dppf)*CH2Cl2)进行。
路线2：
中间体INT-3和INT-4是本领域已知的或是可商购的或可以通过下述方法制备。
如以下路线3中所描绘的，可替代地，本发明的通式(I)的化合物可以通过通过在适当的条件下 进行过渡金属催化的偶联反应，使式INT-5的含卤素衍生物与式INT-6的硼酸衍生物反应来制备。 路线3中的基团/术语R1至R6、A、U、V、W、X、Y和Z具有如上文和下文所定义的含义。该反 应优选在40℃至120℃下，在碱(例如磷酸钾、碳酸钠等)存在下，在合适的溶剂(水/四氢呋喃、水/1,4- 二噁烷、1,4-二噁烷或N,N-二甲基甲酰胺等)中，用钯衍生的催化剂例如[1,1’-双(二苯基膦基)-二茂铁]- 二氯钯(II)-CH2Cl2-络合物(PdCl2(dppf)*CH2Cl2)进行。该反应可任选地在微波中进行。
路线3：
中间体INT-5和INT-6是本领域已知的或是可商购的，或可以通过下述方法制备。
或者，本发明的通式(I)的化合物可以通过使式INT-5的含卤素衍生物与式INT-7的金属化衍生 物在合适的条件下反应来制备，如以下路线4中所描绘的。路线4中的基团/术语R1至R6、A、U、 V、W、X、Y和Z具有如上文和下文所定义的含义。该反应用催化剂，优选用钯催化剂(例如四(三 苯基膦)钯)在适当的溶剂(例如1,4-二噁烷等)中在100℃至150℃下进行。
或者，该反应用催化剂，优选用钯催化剂(例如四(三苯基膦)钯、Pd2(dba)3等)，在碱(例如氟化铯 等)和铜-(I)衍生物(例如CuBr或CuI)存在下，在合适的溶剂(例如N,N-二甲基甲酰胺等)中，在40-120℃ 下进行。可以添加另外的配体(例如P(o-MeC6H4)3)。
路线4：
中间体INT-5和INT-7是本领域已知的或可以通过下述方法制备。
路线1所示的通式INT-2的中间体可以按照路线5制备。路线5中的基团/术语R3至R6、A和 Y＝CH具有如上文和下文所定义的含义。
中间体INT-10可以由硼酸衍生物INT-8和含卤素的杂芳族衍生物INT-9制备。反应在碱(例如磷 酸钾、碳酸钠等)存在下，在适当的溶剂(水/四氢呋喃、水/1,4-二噁烷、水/正丁醇、1,4-二噁烷或N,N- 二甲基甲酰胺等)中，在升高的温度例如80℃-150℃下，用钯催化剂(例如1,1’-双(二苯基膦基)-二茂铁]- 二氯钯(II)-CH2Cl2-络合物(PdCl2(dppf)*CH2Cl2)、氯(2-二环己基膦基-2’,4’,6’-三异丙基-1,1’-联 苯)[2-(2’-氨基-1,1’-联苯)]钯(II)(XPhos Pd第二代催化剂)、具有另外的XPhos作为配体的三(二亚苄基 丙酮)-二钯Pd2(dba)3等)进行。
在使用具有受保护的或掩蔽的氨基(NL2不是NH2)的杂芳族中间体INT-9的情况下，该基团可以 随后通过应用有机化学文献中报道的标准操作裂解保护基团而转化成NH2基团。叔丁基羰基(诸如 Boc保护基团)优选在酸性条件下用例如三氟乙酸或盐酸在溶剂(诸如二氯甲烷、1,4-二噁烷、异丙 醇、在1,4-二噁烷或乙酸乙酯中的HCl等)中裂解。可以通过在过渡金属诸如碳载钯的存在下使用 氢来除去苄基。也可以在酸性条件下(例如用三氟乙酸或盐酸)除去芳环上带有给电子基团诸如甲氧基的苄基。2,5-二甲基吡咯环可以被羟胺盐酸盐和三甲胺在适当的溶剂(如乙醇和水的混合物)中在升 高的温度优选80℃下裂解以释放氨基官能团。
中间体INT-8的哌啶环的氮原子用合适的保护基团PG1(例如叔丁氧基羰基(Boc)、苄氧基羰基 (Cbz)、苄基(Bn)等)保护。可通过本领域技术人员已知的方法引入保护基团PG1。
双键在中间体INT-8的哌啶烯(piperidene)环中的位置可以取决于取代基R3、R4和R5。中间体 INT-8的取代基R3和R4可以含有也可以带有适当保护基团的官能团。特别地，可以用合适的含甲硅 烷基的保护基团(例如三乙基甲硅烷基、叔丁基-二甲基甲硅烷基等)保护羟基。可以以一定方式选择 R3和R4处官能团的保护基团，使得可以在不除去PG1的情况下除去该保护基团，以允许在R3和 R4处进行进一步修饰。可以例如用氟化物源(例如四正丁基氟化铵)在合适的溶剂(例如四氢呋喃)中， 在环境温度或在酸性条件(例如盐酸的1,4-二噁烷溶液、HCl的1,4-二噁烷溶液等，在升高的温度下) 下裂解甲硅烷基保护基团。
所得双键在中间体INT-10的哌啶烯环中的位置可以取决于取代基R3、R4、R5和R6。可通过在 过渡金属，优选碳载钯(或Pd(OH)2等)存在下在溶剂(例如甲醇、乙醇、四氢呋喃、1,4-二噁烷、甲醇 /乙酸等)中使用氢来氢化中间体INT-10的哌啶烯环中的双键。优选地，在1-5bar压力下施加氢气， 并且反应在室温至50℃下进行。
在使用具有受保护或掩蔽的氨基(NL2不是NH2)的杂芳族中间体INT-10的情况下，该基团可以 转化为NH2-基团，如有机化学文献中所报道的或早前在本段中提及的。
可以如有机化学文献中所报道的去除保护基团PG1。优选地，在具有例如三氟乙酸或盐酸的酸 性条件下，在溶剂(如二氯甲烷、1,4-二噁烷、异丙醇、在1,4-二噁烷或乙酸乙酯中的HCl等)中裂解 叔丁基羰基(Boc)。可以在过渡金属如碳载钯的存在下用氢除去苄基(Bn)或苄氧羰基(Cbz)基团。也可 以在酸性条件下(例如用三氟乙酸或盐酸)除去芳环上带有给电子基团(诸如甲氧基)的苄基。取决于 反应条件，可以以游离碱或盐(诸如盐酸盐、三氟乙酸盐、氢溴酸盐等)的形式获得中间体INT-2。中 间体INT-2的盐可以通过本领域技术人员已知的标准操作转化成它们的中性对应物。
路线5：
Hal,Cl,Br,I
PG1＝Boc,Cbz或苄基
B(OR)2＝B(OH)2或
NL2＝NH2或者受保护或掩蔽的NH2，例如NH-Bn、NH-Bcc或 NH-DMP(DMB＝2,4-二甲氧基苄基)或
如果Y＝N，可以根据路线6制备路线1中所示的通式INT-2的化合物。路线6中的基团/术语 R3至R6、A和Y＝N具有如上文和下文所定义的含义。中间体INT-12的取代基R3和R4可以含有也 可以带有适当保护基团的官能团。特别地，可以用合适的含甲硅烷基的保护基团(例如三乙基甲硅烷 基、叔丁基-二甲基甲硅烷基等)保护羟基基团。可以以一定方式选择R3和R4处官能团的保护基团， 使得可以在不除去PG1的情况下除去该保护基团，以允许在R3和R4处进行进一步修饰。可以例如 用氟化物源(例如四正丁基氟化铵)在合适的溶剂(例如四氢呋喃)中，在环境温度下，或在酸性条件(例 如盐酸的1,4-二噁烷溶液、HCl的1,4-二噁烷溶液)下在升高的温度下，裂解甲硅烷基保护基团。
路线6中的INT-9可以直接与含氮杂环INT-12偶联以形成碳-氮键，从而提供中间体INT-13。 路线6中的基团/术语R3至R6、A和Y＝N具有如上文和下文所定义的含义。优选地，该反应在碱(例 如叔丁醇钠、碳酸铯等)存在下，在合适的溶剂(例如甲苯、四氢呋喃、1,4-二噁烷等)中，在40至120℃ 下，用钯衍生的催化剂(例如2-(2’-二叔丁基膦)-联苯乙酸钯(II)、(2-二环己基膦基-2’,6’-二异丙氧基 -1,1’-联苯)[2-(2’-氨基-1,1’-联苯)]-甲磺酸钯(II)(RuPhos Pd第三代)、Cphos-3G-甲磺酸环钯等)进行。
在使用具有受保护或掩蔽的氨基(NL2不是NH2)的杂芳族中间体INT-9的情况下，该基团可以随 后通过应用有机化学文献中报道的或如上文所述的标准方法裂解掉保护基团而转化为NH2基团。根 据总合成策略和总保护基团策略，如路线6所示，这种向NH2-基团的转化可以在中间体INT2(其中Y＝N)的总合成中的不同阶段进行(例如，以提供Y＝N的中间体INT-14或中间体INT-2)。
路线6：
Hal＝Cl,Br,I
NL2＝NH2或者受保护或掩蔽的NH2，例如NH-Bn、NH-DMB(DMB＝2,4-二甲氧基苄基)或PG1＝Boc,Cbz或苄基
可以如有机化学文献或上文所报道的除去保护基团PG1。优选地，叔丁基羰基(Boc)在具有例如三氟 乙酸或盐酸的酸性条件下在溶剂诸如二氯甲烷、1,4-二噁烷、异丙醇或乙酸乙酯中裂解。可以通过在 过渡金属诸如碳载钯存在下使用氢除去苄基(Bn)基团或苄氧羰基(Cbz)基团。也可以在酸性条件下(例 如具有三氟乙酸或盐酸)除去芳环上带有给电子基团诸如甲氧基的苄基。
根据反应条件和整个脱保护策略，可以以游离碱或盐(例如盐酸盐、三氟乙酸盐、氢溴酸盐等) 的形式获得其中Y＝N的中间体INT-2。盐可以通过本领域技术人员已知的标准操作转化成它们的中 性对应物。可在中间体INT-2(其中Y＝N)的整个合成过程中的各个步骤进行保护基团PG1的去除(例 如，如路线6所示，从中间体INT-13或中间体INT-14去除保护基团PG1)，这取决于整个合成策略 和脱保护策略。
或者，可以根据路线7制备通式INT-14的中间体。路线7中的基团/术语R1至R6、A、U、V、 W、X和Z具有如上文和下文所定义的含义，并且Y＝N。
在中间体INT-16中，NOn表示硝基基团(n＝2)或亚硝基基团(n＝1)。可以通过在合适的溶剂(例如 乙醇)中和在合适的碱(例如二异丙基乙胺等)存在下，对带有硝基基团或亚硝基基团的式INT-16的缺 电子杂芳族衍生物和式INT-12的合适哌嗪衍生物进行亲核取代来制备通式INT-17的中间体。
或者，可以通过在催化剂优选钯催化剂(例如三(二亚苄基丙酮)二钯Pd2(dba)3等)和合适配体优选XantPhos(4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨)存在下，在合适的溶剂(例如，1,4-二噁烷等)中，在合 适的碱(例如，碳酸铯等)存在下，在较高的温度例如80-120℃下，使合适的式INT-12的哌嗪衍生物 和带有硝基基团(n＝2)的式INT-16的杂芳族衍生物进行过渡金属催化的偶联反应来制备中间体 INT-17。
中间体INT-14也可以根据路线7合成。INT-17的亚硝基(n＝1)或硝基(n＝2)基团可以通过本领域 技术人员已知的方法转化成氨基基团。优选地，在氢气氛(例如在1bar至5bar)下并且在过渡金属(优 选碳载钯)的存在下，在溶剂(诸如甲醇、乙醇、四氢呋喃、1,4-二噁烷等)中进行INT-17的氢化。可 以根据路线7由INT-14合成通式(I)的化合物。可以使用与路线6中所述相同的反应条件进行从中间 体INT-14至中间体INT-2(其中Y＝N)的反应。可以使用与路线1中所述相同的反应条件进行从中间 体INT-2(其中Y＝N)至通式(I)的化合物的反应。
式INT-19的中间体可以如路线1中所述由化合物INT-18和羧酸INT-1制备。可以类似于有机 化学文献中报道的方法，优选在氢气氛中，在碳载钯存在下，在合适的溶剂(例如甲醇、乙醇等)中， 通过亚硝基(n＝1)或硝基(n＝2)基团转化为氨基基团而由INT-19合成通式(I)化合物。
路线7：
如路线8中所示，优选由相应的通式INT-21的酯通过水解或氢解制备式INT-1的羧酸(其中基团 /术语R1至R2、U、V、W、X和Z具有如上文和下文所定义的含义)，这取决于保护基团PG2的性 质。如果保护基团PG2代表低级烷基酯诸如乙酯或甲酯，则优选通过用氢氧化物碱诸如NaOH、LiOH 或KOH在水和合适的可混溶的溶剂(例如四氢呋喃、甲醇、乙醇、1,4-二噁烷等或它们的混合物)的 混合物中水解(如果需要，则加热)来裂解这些酯。酸INT-1可以作为与金属阳离子的盐或作为游 离酸分离。优选通过在合适的溶剂(例如二氯甲烷、1,4-二噁烷、甲醇、乙醇、四氢呋喃、水或这些 溶剂的混合物)中用酸处理(例如盐酸或三氟乙酸)来裂解叔丁酯。优选通过在合适的溶剂(例如乙醇、 甲醇、四氢呋喃、二氯甲烷、乙酸乙酯)中在氢气氛(优选1-5bar)下用合适的催化剂(例如碳载钯等) 氢解来裂解苄基酯。
可以根据路线8经由过渡金属催化的偶联反应制备通式INT-21的酯。优选按照类似于有机化学 文献中报道的称作Suzuki偶联反应的操作，使用合适的钯催化剂、配体、碱和溶剂进行过渡金属催 化的偶联反应。路线8中的基团/术语R1至R2、U、V、W、X和Z具有如上文和下文所定义的含义。 优选在碱(例如磷酸钾、碳酸钠等)存在下，在合适的溶剂(水/四氢呋喃、水/1,4-二噁烷、1,4-二噁烷 或N,N-二甲基甲酰胺等)中，在40℃至120℃下，用钯衍生的催化剂，例如[氯(2-二环己基膦基-2’,4’,6’- 三异丙基-1,1’-联苯)[2-(2’-氨基-1,1’-联苯)]钯(II)(XPhos Pd第二代Gen)、1,1’-双(二苯基膦基)-二茂铁]- 二氯钯(II)-CH2Cl2-络合物(PdCl2(dppf)*CH2Cl2)进行硼酸衍生物INT-3和含卤素的杂芳族INT-20的反应。
路线8：
或者，可以根据路线9，经由过渡金属催化的偶联反应来合成通式INT-21的酯。路线9中的基 团/术语R1至R2、U、V、W、X和Z具有如上文和下文所定义的含义。
优选按照类似于有机化学文献中报道的称作Suzuki偶联反应的操作，使用合适的钯催化剂、配 体、碱和溶剂进行过渡金属催化的偶联反应。优选在40℃至120℃下在合适的溶剂(水/四氢呋喃、水 /1,4-二噁烷、1,4-二噁烷或N,N-二甲基甲酰胺等)中在碱(例如磷酸钾、碳酸钠等)存在下，用钯衍生 的催化剂，例如[氯(2-二环己基膦基-2’,4’,6’-三异丙基-1，1’-联苯)[2-(2’-氨基-1,1’-联苯)]钯(II)(XPHOS Pd第二代Gen)、1,1’-双(二苯基膦基)-二茂铁]-二氯钯(II)-CH2Cl2-络合物(PdCl2(dppf)*CH2Cl2)进行硼 酸衍生物INT-22和含卤素的杂芳族INT-5的反应。该反应可任选地在微波中进行。
路线9：
如路线10中所描绘的，可以通过合适的羧酸INT-23(作为游离酸或作为与合适的金属阳离子诸 如Li+、Na+等的盐)与如路线1中所述的合适的胺INT-2(作为游离胺或作为盐诸如盐酸盐、氢溴酸盐 等)的反应来制备通式INT-6的化合物。路线10中的基团/术语R2至R6、A、X、Y和Z具有如上文 和下文所定义的含义。
路线10：
如路线11中所描绘的，可以通过合适的羧酸INT-24(作为游离酸或作为与合适的金属阳离子诸 如Li+、Na+等的盐)与如路线1中所述的合适的胺INT-2(作为游离胺或作为盐诸如盐酸盐、氢溴酸盐 等)的反应制备通式INT-4的化合物。路线11中的基团/术语R2至R6、A、X、Y和Z具有如上文和 下文所定义的含义。
如路线11所描绘的，可以通过钯催化剂(例如四(三苯基膦钯等)介导的合适中间体INT-4和合适 的锡烷衍生物(例如1,1,1,2,2,2-六甲基-二锡烷)在合适溶剂(例如1,4-二噁烷/二甲基甲酰胺等)中在升 高的温度(例如100℃)下反应来合成中间体INT-7。
路线11：
中间体的合成
4-(6-氨基-哒嗪-3-基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯
将K3PO4(64.0g，301mmol)添加至4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢 -2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(26.7g，86.2mmol)和6-溴-哒嗪-3-基胺(15.0g，86.2mmol)的n-BuOH/H20(306 mL/70mL)溶液中，并用氩气脱气5分钟。然后添加Xphos(4.11g，8.62mmol)和三(二亚苄基丙酮) 二钯(3.95g，4.31mmol)。在115℃下将所得混合物搅拌15小时。将反应混合物用水稀释并用EtOAc 萃取。将合并的有机层用水、盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗制混合物通过 柱色谱法(MeOH/DCM)纯化以获得标题化合物。
收率：23.1g(97％) ESI-MS:m/z＝277(M+H)+ Rt(HPLC):0.44min(方法1)
4-(6-氨基-哒嗪-3-基)-哌啶-1-甲酸叔丁酯
在氮气氛下，将碳载Pd(OH)2(2.03g，14.4mmol)添加至4-(6-氨基-哒嗪-3-基)-3,6-二氢-2H-吡啶 -1-甲酸叔丁酯(20.0g，72.3mmol)的乙醇(400mL)溶液中，然后将反应混合物在PARR振荡器中在 60PSI氢压下搅拌16小时。通过硅藻土过滤反应混合物。在减压下蒸发滤液，并通过硅胶柱色谱纯化得到的粗料以得到标题化合物。
收率：10.6g(53％) ESI-MS:m/z＝279(M+H)+ Rt(HPLC):0.38min(方法1)
6-哌啶-4-基-哒嗪-3-基胺二盐酸盐
将4M氯化氢二噁烷溶液(45mL，179.6mmol)添加至4-(6-氨基-哒嗪-3-基)-哌啶-1-甲酸叔丁酯 (10.0g，35.9mmol)的1,4-二噁烷(35mL)溶液中。在环境温度下将反应混合物搅拌3h。在减压下除 去所有挥发物，所得粗料用己烷洗涤以获得标题化合物。
收率：8.0g(89％)ESI-MS:m/z＝179(M+H)+ Rt(HPLC):0.34min(方法4)
6-哌啶-4-基-哒嗪-3-基胺
将6-哌啶-4-基-哒嗪-3-基胺二盐酸盐溶解于适当体积的甲醇中，并通过HPLC(碱性条件， Xbridge，梯度：ACN/水+NH3)纯化以获得相应的游离碱。
或者，可以在以下反应步骤中通过向反应混合物中添加另外两当量的碱而获得游离碱。
ESI-MS:m/z＝179(M+H)+ Rt(HPLC):0.31min(方法9)
5-溴-4-甲氧基-吡啶-2-甲酸
将LiOH(325mg，8.13mmol)添加至5-溴-4-甲氧基-吡啶-2-甲酸甲酯(1.0g，4.06mmol)的MeOH/ 水/THF1/1/1(10mL)溶液中，并在室温下搅拌16小时。在减压下除去所有挥发物。将粗产物溶解在 水(10mL)中并用EtOAc(10mL)洗涤。将水层用1N HCl酸化至pH中性。收集沉淀，干燥以获得标 题化合物。
收率：863mg(92％)。
[4-(6-氨基-哒嗪-3-基)-哌啶-1-基]-(5-溴-4-甲氧基-吡啶-2-基)-甲酮
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将6-哌啶-4-基-哒嗪-3-基胺(307mg，1.72mmol)添加至5-溴-4-甲氧基-吡啶-2-甲酸(0.40g，1.72 mmol)、TBTU(0.55g，1.72mmol)和三乙胺(0.72mL，5.17mmol)的DMF(1mL)溶液中。在室温下搅 拌反应混合物2小时，通过硅胶色谱纯化以获得标题化合物。
收率：588mg(87％) ESI-MS:m/z＝394(M+H)+
[4-(6-氨基-哒嗪-3-基)-哌啶-1-基]-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-甲酮
将三乙胺(180μL，1.30mmol)、TBTU(139mg，0.43mmol)和哌啶-4-基-哒嗪-3-基胺(77.0mg， 0.43mmol)添加至4-溴-3-甲氧基-苯甲酸(100mg，0.42mmol)的DMF(1mL)溶液中。在室温下搅拌反 应混合物2小时，通过HPLC纯化以获得标题化合物。
收率：63.0mg(37％)ESI-MS:m/z＝393(M+H)+
[4-(6-氨基-哒嗪-3-基)-哌啶-1-基]-(4-溴-3-甲基-苯基)-甲酮
根据合成中间体[4-(6-氨基-哒嗪-3-基)-哌啶-1-基]-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-甲酮所述的操作来从4- 溴-3-甲基-苯甲酸(100mg，0.47mmol)和哌啶-4-基-哒嗪-3-基胺(83.0mg，0.47mmol)合成标题化合物。
收率：112mg(64％)
[4-(6-氨基-哒嗪-3-基)-哌啶-1-基]-(5-溴-6-甲氧基-吡啶-2-基)-甲酮
根据合成中间体[4-(6-氨基-哒嗪-3-基)-哌啶-1-基]-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-甲酮所述的操作来从5- 溴-6-甲氧基-吡啶-2-甲酸(100mg，0.43mmol)和哌啶-4-基-哒嗪-3-基胺(77.0mg，0.43mmol)合成标题 化合物。
收率：149mg(88％)
[4-(6-氨基-哒嗪-3-基)-哌啶-1-基]-(6-溴-5-甲氧基-吡啶-3-基)-甲酮
根据合成中间体[4-(6-氨基-哒嗪-3-基)-哌啶-1-基]-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-甲酮所述的操作来从6- 溴-5-甲氧基-烟酸(250mg，1.08mmol)和哌啶-4-基-哒嗪-3-基胺(192mg，1.08mmol)合成标题化合物。
收率：368mg(87％)
{4-[4-(6-氨基哒嗪-3-基)哌啶-1-羰基]-2-甲氧基苯基硼酸
根据合成中间体[4-(6-氨基-哒嗪-3-基)-哌啶-1-基]-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-甲酮所述的操作来从4-二羟硼基-3-甲氧基苯甲酸(1.0g，5.10mmol)和哌啶-4-基-哒嗪-3-基胺(1.64g，7.65mmol)合成标题化 合物。通过硅胶柱色谱(DCM/MeOH，含有1％NH4OH水溶液)进行产物的纯化。
收率：335mg(18％)
[4-(6-氨基-哒嗪-3-基)-哌啶-1-基]-(4-溴-2-甲氧基-苯基)-甲酮
根据合成中间体[4-(6-氨基-哒嗪-3-基)-哌啶-1-基]-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-甲酮所述的操作来从4- 溴-2-甲氧基-苯甲酸(250mg，1.08mmol)和哌啶-4-基-哒嗪-3-基胺(192mg，1.08mmol)合成标题化合物。
收率：313mg(74％)
6-[1-(4-溴-3-乙基苯甲酰基)哌啶-4-基]哒嗪-3-胺
将哌啶-4-基-哒嗪-3-基胺(351mg，1.64mmol)添加至4-溴-3-乙基苯甲酸(250mg，1.09mmol)和 TBTU(1.05g，3.27mmol)在DMA的溶液中。将三乙胺(760μL，5.46mmol)添加至反应混合物。在室温下搅拌反应混合物24h。在减压下除去挥发物，残余物通过硅胶柱色谱(DCM/甲醇，含有1％ NH4OH水溶液)纯化，得到所需产物。
收率：334mg(79％)
4-(6-硝基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
将哌嗪-1-甲酸叔丁酯(3.0g，16.11mmol)、5-溴-2-硝基-吡啶(3.3g，16.11mmol)和DIPEA(6.2g， 48.32mmol)的乙醇(30mL)溶液在室温下搅拌20小时。在减压下浓缩反应混合物，用乙酸乙酯和水 稀释残余物。将有机层用水、盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物用硅胶柱 色谱(EtOAc/庚烷)纯化以获得标题化合物。
收率：1.34g(27％) ESI-MS:m/z＝309(M+H)+ Rt(HPLC):0.89min(方法1)
4-(6-氨基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在H2气球维持的氢气氛下，将Pd/C(200mg)添加至4-(6-硝基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(2.0 g，6.43mmol)的EtOH(15mL)溶液中，持续3小时。过滤反应混合物，在减压下浓缩滤液以获得粗 标题化合物。
收率：1.90g(定量)
5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基胺二盐酸盐
根据合成中间体6-哌啶-4-基-哒嗪-3-基胺二盐酸盐所述的操作来从4-(6-氨基-吡啶-3-基)-哌嗪-1- 甲酸叔丁酯(1.00g，3.59mmol)合成标题化合物。
收率：590mg(92％)
5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基胺
类似于关于6-哌啶-4-基-哒嗪-3-基胺所述的操作，可以从5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基胺二盐酸盐合成 标题化合物。或者，可以在以下反应步骤中通过向反应混合物中添加另外两当量的碱而获得游离碱。
6-氨基-3’,4’,5’,6’-四氢-2’H-[3,4’]联吡啶-1’-甲酸叔丁酯
在氮气氛下将碳载Pd(OH)2(255mg，1.82mmol)添加至6-硝基-3’,6’-二氢-2’H-[3,4’]联吡啶-1’- 甲酸叔丁酯(10.0g，36.3mmol)的乙醇(250mL)溶液中，并在PARRShaker中在30psi的H2压下搅 拌反应混合物16小时。通过硅藻土过滤反应物，在减压下蒸发滤液，并通过硅胶柱色谱纯化得到的 粗料以获得标题化合物。
收率：4.90g(49％)
5-(哌啶-4-基)吡啶-2-胺二盐酸盐
将6-氨基-3’,4’,5’,6’-四氢-2’H-[3,4’]联吡啶-1’-甲酸叔丁酯(0.8g，2.88mmol)的二氯甲烷(8mL)溶 液添加至4N HCl的二噁烷(7.2mL，28.8mmol)溶液中。将反应混合物在室温下搅拌4小时。在减压 下浓缩反应混合物。无需进一步纯化即可使用所需产物。
收率：694mg(96％)
5-(哌啶-4-基)吡啶-2-胺
可以根据类似于对6-哌啶-4-基-哒嗪-3-基胺所述的操作，从5-(哌啶-4-基)吡啶-2-胺二盐酸盐获 得5-(哌啶-4-基)吡啶-2-胺。或者，可以在以下反应步骤中通过向反应混合物中添加另外两当量的碱 而获得游离碱。
[4-(6-氨基-哒嗪-3-基)-哌啶-1-基]-(5-溴-4-甲氧基-吡啶-2-基)-甲酮
根据合成中间体[4-(6-氨基-哒嗪-3-基)-哌啶-1-基]-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-甲酮所述的操作来从5- 溴-4-甲氧基-吡啶-2-甲酸(200mg，0.86mmol)和6-哌啶-4-基-哒嗪-3-基胺(154mg，0.86mmol)合成标 题化合物。通过硅胶色谱法进行纯化。
收率：118mg(35％)
{4-([4-(6-氨基哒嗪-3-基)哌啶-1-羰基]苯基}硼酸
根据合成中间体[4-(6-氨基-哒嗪-3-基)-哌啶-1-基]-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-甲酮所述的操作来从 4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-苯甲酸(500mg，2.02mmol)和6-哌啶-4-基-哒嗪-3- 基胺(359mg，2.02mmol)合成标题化合物。
收率：411mg(50％)
[4-(6-氨基-哒嗪-3-基)-哌啶-1-基]-(4-溴-2-甲基-苯基)-甲酮
根据合成中间体[4-(6-氨基-哒嗪-3-基)-哌啶-1-基]-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-甲酮所述的操作来从4- 溴-2-甲基-苯甲酸(250mg，1.16mmol)和6-哌啶-4-基-哒嗪-3-基胺(207mg，1.16mmol)合成标题化合 物。
收率：393mg(90％)
5-[1-(5-溴-4-甲氧基吡啶-2-羰基)哌啶-4-基]吡啶-2-胺
将在合适体积的DMA(3mL)中的5-溴-4-甲氧基-吡啶-2-甲酸(500mg，2.16mmol)、CDI(1.05g，6.47mmol)和二异丙基乙胺(6.47mmol)在室温下搅拌30分钟。添加5-(哌啶-4-基)吡啶-2-胺二盐酸盐 (552mg，2.21mmol)，在室温下搅拌反应混合物24小时。在减压下除去挥发物，将残余物溶于EtOAc 和10％NaHCO3水溶液中。分层，并用EtOAc萃取水相(2次)。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥， 过滤并在减压下浓缩。通过硅胶柱色谱(DCM/MeOH)纯化残余物。
收率：0.55g(63％)
化合物的合成
一般方法I
将在合适体积的DMF(约0.5mL DMF/0.4mmol中间体1)中的羧酸(1当量)(下表2中的中间体 2)和TBTU(1当量)于室温下搅拌15分钟，并添加至在含合适体积的DMF(约0.5mLDMF/0.4mmol 中间体1)中的胺(1当量)(下表2中的中间体1)和三乙胺(3当量)中。在室温下搅拌反应混合物2小时。 使用反相HPLC(酸性或碱性条件)纯化粗反应混合物以获得产物。
表2：本发明的化合物1-12。
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一般方法II
将K3PO4(2当量)和硼酸(1当量至1.5当量)(下表3中的中间体2)添加至在合适体积的水和1,4- 二噁烷(水/二噁烷约0.25mL/2.0mL/0.06mmol至2.5mmol中间体1)的Br-中间体(1当量)(下表3中 的中间体1)中，并用氩气脱气5分钟。然后添加PdCl2(dppf)*CH2Cl2(0.2当量)，并再次用氩气脱气 5分钟。将所得混合物在120℃下搅拌10分钟或直至反应完成(60分钟或过夜)。然后将反应混合物过 滤并通过反相HPLC(酸性或碱性条件)纯化。
表3：本发明的化合物13-72。
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中间体的合成
5-溴-2-环丙基甲氧基-吡啶
将5-溴-2-氟-吡啶(250mg，1.42mmol)、环丙基-甲醇(154mg，2.13mmol)和叔丁醇钾(287mg， 2.56mmol)在THF(5mL)中合并。在室温下搅拌反应混合物24小时。用EtOAc和水稀释反应混合物。分离水相，用EtOAc再萃取两次。合并有机层，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥、过滤并在减压下浓 缩。经SiO2快速色谱(乙酸乙酯/庚烷)纯化残余物以获得标题产物。
收率：298mg(92％)ESI-MS:m/z＝228/230(M+H)+Rt(HPLC):1.14min(方法10)
5-溴-2-环丙氧基-吡啶
根据合成中间体5-溴-2-环丙基甲氧基-吡啶所述的操作来从5-溴-2-氟-吡啶(250mg，1.42mmol) 和环丙醇(124mg，2.13mmol)合成标题化合物。
收率：272mg(89％)
5-溴-2-((R)-叔丁氧基)吡啶
根据合成中间体5-溴-2-环丙基甲氧基-吡啶所述的操作从5-溴-2-氟-吡啶(250mg，1.42mmol)和 (R)-丁-2-醇(158mg，2.13mmol)合成标题化合物。
收率：263mg(81％)
5-溴-2-((S)-叔丁氧基)吡啶
根据合成中间体5-溴-2-环丙基甲氧基-吡啶所述的操作从5-溴-2-氟-吡啶(250mg，1.42mmol)和 (S)-丁-2-醇(158mg，2.13mmol)合成标题化合物。
收率：252mg(77％)
5-溴-2-(2,2-二氟-环丙基甲氧基)-吡啶
根据合成中间体5-溴-2-环丙基甲氧基-吡啶所述的操作来从5-溴-2-氟-吡啶(250mg，1.42mmol) 和(2,2-二氟-环丙基)-甲醇(230mg，2.13mmol)合成标题化合物。
收率：349mg(93％)ESI-MS:m/z＝264/266(M+H)+Rt(HPLC):1.27min(方法13)
5-溴-2-(2,2-二甲基-环丙基甲氧基)-吡啶
根据合成中间体5-溴-2-环丙基甲氧基-吡啶所述的操作来从5-溴-2-氟-吡啶(250mg，1.42mmol) 和(2,2-二甲基-环丙基)-甲醇(213mg，2.13mmol)合成标题化合物。
收率：320mg(88％)
5-溴-2-[(S)-环丙基-乙氧基]-吡啶
根据合成中间体5-溴-2-环丙基甲氧基-吡啶所述的操作来从5-溴-2-氟-吡啶(250mg，1.42mmol) 和(S)-1-环丙基-乙醇(183mg，2.13mmol)合成标题化合物。
收率：240mg(70％)
5-溴-2-((R)-环丙基-乙氧基)-吡啶
根据合成中间体5-溴-2-环丙基甲氧基-吡啶所述的操作来从5-溴-2-氟-吡啶(250mg，1.42mmol) 和(R)-1-环丙基-乙醇(183mg，2.13mmol)合成标题化合物。
收率：230mg(67％)
5-溴-2-(1-甲基-环丙基甲氧基)-吡啶
根据合成中间体5-溴-2-环丙基甲氧基-吡啶所述的操作来从5-溴-2-氟-吡啶(250mg，1.42mmol) 和(1-甲基-环丙基)-甲醇(183mg，2.13mmol)合成标题化合物。
收率：229mg(67％)
5-溴-2-(1-氟甲基-环丙基甲氧基)-吡啶
根据合成中间体5-溴-2-环丙基甲氧基-吡啶所述的操作来从5-溴-2-氟-吡啶(250mg，1.42mmol) 和(1-氟甲基-环丙基)-甲醇(222mg，2.13mmol)合成标题化合物。
收率：280mg(76％)
一般方法III
将K3PO4(2当量)和硼酸(1当量)(下表4中的中间体1)添加至芳基溴(1当量)(下表4中的中间体 2)在合适体积的水和1,4-二噁烷(水/1,4-二噁烷，约0.25mL/2.0mL/0.07mmol至0.14mmol的表4中 的中间体1)中的溶液中，并用氩气脱气5分钟。然后添加PdCl2(dppf)*CH2Cl2(0.2当量)，并再次用 氩气脱气5分钟。在120℃在微波中将反应混合物搅拌60分钟。在减压下除去挥发物，将得到的残 余物溶于DMF，通过反相HPLC纯化以获得所需产物。
表4：本发明的化合物73-83。
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中间体的合成
2-甲氧基-4’-三氟甲基-联苯-4-甲酸
将K3PO4(551mg，2.60mmol)和[4-(三氟甲基)苯基]硼酸(247mg，1.30mmol)添加至4-溴-3-甲氧 基-苯甲酸(300mg，1.23mmol)在水(250μL)和1,4-二噁烷(2mL)中的溶液中，并用氩气脱气5分钟。 然后添加PdCl2(dppf)*CH2Cl2(212mg，0.26mmol)并再次用氩气脱气5分钟。将反应混合物在微波 中在130℃下搅拌30分钟。添加乙酸乙酯和水，分离各层。用乙酸乙酯萃取水层，合并的有机层用 盐水洗涤、用MgSO4干燥，过滤并在减压下浓缩。通过硅胶色谱(EtOAc/庚烷)纯化粗产物以获得标 题产物。
收率：217mg(56％)ESI-MS:m/z＝295(M-H)-Rt(HPLC):2.57min(方法5)
4-甲氧基-5-(4-三氟甲基-苯基)-吡啶-2-甲酸甲酯
将K3PO4(8.6g，40.6mmol)和[4-(三氟甲基)苯基]硼酸(3.9g，20.3mmol)添加至在水(4mL)和1,4- 二噁烷(16mL)中的5-溴-4-甲氧基-吡啶-2-甲酸甲酯(5.0g，20.3mmol)中，并用氩气脱气5分钟。然 后添加PdCl2(dppf)*CH2Cl2(3.3g，4.01mmol)并再次用氩气脱气5分钟。将反应混合物在100℃下搅 拌30分钟。在减压下除去挥发物并通过硅胶色谱(EtOAc/庚烷)纯化所得残余物以获得标题产物。
收率：2.5g(40％)
4-甲氧基-5-(4-三氟甲基-苯基)-吡啶-2-甲酸
将LiOH(769mg，32.1mmol)添加至4-甲氧基-5-(4-三氟甲基-苯基)-吡啶-2-甲酸甲酯(2.5g，8.03 mmol)在合适体积的THF/MeOH/H2O(1/1/1比率，约30mL)中的溶液中，并将反应混合物在室温下 搅拌4小时。在减压下除去挥发物，将残余物溶于H2O。向混合物中滴加浓HCl水溶液以使混合物 的pH为2。通过过滤分离所得沉淀物，并在真空下在80℃下干燥8小时以提供标题化合物。
收率：2.1g(88％)
4-甲氧基-5-苯基-吡啶-2-甲酸甲酯
将K3PO4(724mg，3.41mmol)和4-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-吡啶 -2-甲酸甲酯(500mg，1.71mmol)添加至在水(0.25mL)和1,4-二噁烷(2mL)中的溴苯(401mg，2.56 mmol)中，并用氩气脱气5分钟。然后添加PdCl2(dppf)*CH2Cl2(278mg，0.34mmol)，再次用氩气脱 气5分钟。将反应混合物在120℃下在微波中搅拌15分钟。在减压下除去挥发物，所得残余物经硅 胶色谱纯化以获得标题产物。
收率：335mg(81％)
4-甲氧基-5-苯基-吡啶-2-甲酸
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将LiOH(132mg,5.51mmol)添加至4-甲氧基-5-苯基-吡啶-2-甲酸甲酯(335mg，1.38mmol)在合 适体积的THF/MeOH/H2O(约4mL/2mL/1mL)的溶液中，并在室温下搅拌反应混合物48h。在减压 下除去挥发物，将残余物溶于H2O。向混合物中滴加浓HCl水溶液以使混合物的pH为2。通过过滤 分离所得沉淀物，并在真空下在80℃下干燥8小时以提供标题化合物。
收率：283mg(90％)
5-(4-氟-苯基)-4-甲氧基-吡啶-2-甲酸甲酯
将K3PO4(362mg，1.70mmol)和4-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-吡啶 -2-甲酸甲酯(250mg，0.85mmol，商购的MFCD18727245)添加至在水(0.25mL)和1,4-二噁烷(2mL) 中的1-溴-4-氟-苯(149mg，0.85mmol)中，并用氩气脱气5分钟。然后添加PdCl2(dppf).CH2Cl2(139mg， 0.17mmol)，并再次用氩气脱气5分钟。将反应混合物在120℃下搅拌18小时。在减压下除去挥发物， 所得残余物经硅胶色谱纯化以获得标题产物。
收率：131mg(59％)
5-(4-氟-苯基)-4-甲氧基-吡啶-2-甲酸
将1M LiOH水溶液(54mL，53.6mmol)添加至5-(4-氟-苯基)-4-甲氧基-吡啶-2-甲酸甲酯(3.5g， 13.4mmol)在合适体积的THF/MeOH(180mL/20mL)中的溶液中，并将反应混合物在室温下搅拌2 小时。在减压下除去挥发物，将残余物溶于H2O。向混合物中滴加6N HCl水溶液以使混合物pH达 到2。通过过滤分离所得沉淀物，并在真空下在80℃下干燥8小时以提供标题化合物。
收率：2.6g(78％)
4-甲氧基-6’-三氟甲基-[3,3’]联吡啶-6-甲酸甲酯
将K3PO4(7.8g，36.6mmol)和[6-(三氟甲基)-吡啶-3-基]-硼酸(5.3g，27.4mmol)添加至在水(10mL) 和1,4-二噁烷(100mL)中的5-溴-4-甲氧基-吡啶-2-甲酸甲酯(4.5g，18.3mmol)中，并用氩气脱气5分 钟。然后添加PdCl2(dppf).CH2Cl2(747mg，0.91mmol)并再次用氩气脱气5分钟。在90℃下搅拌反应 混合物过夜。通过硅藻土过滤反应混合物。在减压下除去有机挥发物，将得到的残余物溶于水和 EtOAc。用EtOAc将水层萃取三次。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。残余物 经硅胶色谱(乙酸乙酯/己烷)纯化以获得标题产物。
收率：2.8g(49％)
4-甲氧基-6’-三氟甲基-[3,3’]联吡啶-6-甲酸
在0℃下将1M LiOH水溶液(19mL，19.0mmol)添加至4-甲氧基-6’-三氟甲基-[3,3’]联吡啶-6-甲 酸甲酯(3.0g，9.61mmol)的THF(50mL)溶液中，并在室温下搅拌反应混合物过夜。在减压下除去挥 发物，将残余物溶于H2O。向混合物中逐滴添加浓HCl，使混合物pH达到2。过滤分离得到的沉淀， 得到标题化合物。
收率：2.7g(94％)ESI-MS:m/z＝299(M+H)+Rt(HPLC):0.74min(方法7)
(R)-3-甲基-4-(6-硝基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
将Cs2CO3(963mg,2.96mmol)和XantPhos(71.3mg,0.12mmol)添加至5-溴-2-硝基-吡啶(500 mg，2.46mmol)和(R)-3-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(592mg，2.96mmol)的1,4-二噁烷溶液中。将混合 物脱气5分钟。添加Pd2(dba)3(123mg，0.12mmol)，脱气5分钟，并在回流下搅拌15小时。通过 硅藻土过滤反应混合物，并用DCM(50mLx 2)洗涤。用盐水洗涤经合并的有机层，用Na2SO4干燥， 过滤并在减压下浓缩。将得到的残余物用硅胶色谱纯化(乙酸乙酯/己烷)以获得标题产物。
收率：400mg(50％)
(R)-2-甲基-1-(6-硝基-吡啶-3-基)-哌嗪盐酸盐
在0℃下，将4M HCl的1,4-二噁烷(20mL)溶液添加至(R)-3-甲基-4-(6-硝基-吡啶-3-基)-哌嗪-1- 甲酸叔丁酯(3.0g，9.30mmol)的DCM(40mL)溶液中，在室温下搅拌5小时。在减压下除去1,4-二噁 烷和DCM，用30％EtOAc己烷溶液来洗涤残余物。通过倾析溶剂分离所得沉淀物，并在减压下干 燥以获得标题产物。
收率：2.1g(87％)ESI-MS:m/z＝223(M+H)+
(1S,4S)-5-(6-亚硝基-哒嗪-3-基)-2,5-二氮杂-双环[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁 酯
在室温下将3-氯-6-亚硝基-哒嗪(2.0g，13.9mmol)、(1S,4S)-2,5-二氮杂-双环[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁酯(3.3g，16.7mmol)和DIPEA(7.2mL，41.8mmol)于乙醇(12mL)中搅拌2.5天。收集所得沉淀以获得标题化合物。
收率：1.8g(42％)ESI-MS:m/z＝282(M+H)+ Rt(HPLC):0.69min(方法1)
(1S,4S)-2-(6-亚硝基-哒嗪-3-基)-2,5-二氮杂-双环[2.2.1]庚烷盐酸盐
在室温下将(1S,4S)-5-(6-亚硝基-哒嗪-3-基)-2,5-二氮杂-双环[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁酯(175mg， 0.57mmol)在4M HCl的1,4-二噁烷(1.5mL)溶液中搅拌1小时。在减压下除去溶剂，添加乙醚。收集所得沉淀以获得标题化合物。
收率：120mg(定量)
6-氨基-4-甲氧基-3’,6’-二氢-2’H-[3,4’]联吡啶-1’-甲酸叔丁酯
将2M Na2CO3水溶液(3.5mL)添加至4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢 -1H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5.02g，16.3mmol)和5-溴-4-甲氧基-吡啶-2-基胺(3.30g，16.3mmol)的1,4- 二噁烷(15mL)溶液中，并用氩气脱气5分钟。添加Pd(dppf)Cl2*CH2Cl2(1.32g，1.63mmol)。在115℃ 下将反应混合物搅拌45分钟。将反应混合物用水稀释并用EtOAc萃取。将合并的有机层用水、盐 水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。通过硅胶色谱(DCM/MeOH)纯化残余物。
收率：2.88g(97％) ESI-MS:m/z＝306(M+H)+ Rt(HPLC):0.75min(方法5)
6-氨基-4-甲氧基-3’,4’,5’,6’-四氢-2’H-[3,4’]联吡啶-1’-甲酸叔丁酯
在氮气氛下将Pd/C(0.26g,0.25mmol)添加至6-氨基-4-甲氧基-3’,6’-二氢-2’H-[3,4’]联吡啶-1’-甲 酸叔丁酯(0.75g，2.46mmol)的甲醇(25mL)溶液中，并经受H2气球。在室温下搅拌反应混合物2天。 过滤反应混合物，并在减压下蒸发。通过硅胶色谱(DCM/MeOH)纯化残余物。
收率：715mg(94％)ESI-MS:m/z＝308(M+H)+Rt(HPLC):0.88min(方法5)
4-甲氧基-5-(哌啶-4-基)吡啶-2-胺二盐酸盐
将4M HCl的1,4-二噁烷(17mL)溶液添加至6-氨基-4-甲氧基-3’,4’,5’,6’-四氢-2’H-[3,4’]联吡啶 -1’-甲酸叔丁酯(4.98g，16.2mmol)的DCM(66mL)溶液中。将反应混合物在环境温度下搅拌16小时。 在减压下蒸发反应混合物。用乙醚洗涤残余物以获得标题化合物。
收率：4.0g(定量)ESI-MS:m/z＝208(M+H)+Rt(HPLC):0.39min(方法4)
4-(6-氨基-4-甲氧基-哒嗪-3-基)-3,6-二氢-2h-吡啶-1-甲酸叔丁酯
根据合成中间体6-氨基-4-甲氧基-3’,6’-二氢-2’H-[3,4’]联吡啶-1’-甲酸叔丁酯所述的操作来从(6- 氯-5-甲氧基-哒嗪-3-基)-氨基甲酸叔丁酯(595mg，1.93mmol)和4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂 环戊烷-2-基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(500mg，1.93mmol)合成标题化合物。
收率：78.0mg(13％)ESI-MS:m/z＝307(M+H)+Rt(HPLC):0.63min(方法5)
4-(6-氨基-4-甲氧基-哒嗪-3-基)-哌啶-1-甲酸叔丁酯
根据合成中间体6-氨基-4-甲氧基-3’,4’,5’,6’-四氢-2’H-[3,4’]联吡啶-1’-甲酸叔丁酯所述的操作来 从4-(6-氨基-4-甲氧基-哒嗪-3-基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(650mg，2.12mmol)合成标题化合 物。
收率：498mg(76％)ESI-MS:m/z＝309(M+H)+Rt(HPLC):1.56min(方法2)
5-甲氧基-6-哌啶-4-基-哒嗪-3-基胺二盐酸盐
根据合成中间体4-甲氧基-5-(哌啶-4-基)吡啶-2-胺二盐酸盐所述的操作来从4-(6-氨基-4-甲氧基- 哒嗪-3-基)-哌啶-1-甲酸叔丁酯(388mg，1.26mmol)合成标题化合物。
收率：232mg(66％)ESI-MS:m/z＝209(M+H)+Rt(HPLC):0.15min(方法5)
4-(6-氨基-4-甲基-哒嗪-3-基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯
根据合成中间体6-氨基-4-甲氧基-3’,6’-二氢-2’H-[3,4’]联吡啶-1’-甲酸叔丁酯所述的操作来从6- 氯-5-甲基-哒嗪-3-基胺(250mg，1.74mmol)和4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,6- 二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(538mg，1.74mmol)合成标题化合物。
收率：326mg(65％)ESI-MS:m/z＝292(M+H)+Rt(HPLC):0.51min(方法5)
4-(6-氨基-4-甲基-哒嗪-3-基)-哌啶-1-甲酸叔丁酯
根据合成中间体6-氨基-4-甲氧基-3’,4’,5’,6’-四氢-2’H-[3,4’]联吡啶-1’-甲酸叔丁酯所述的操作从4-(6-氨基-4-甲基-哒嗪-3-基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(500mg，1.72mmol)合成标题化合物。
收率：176mg(35％)ESI-MS:m/z＝293(M+H)+Rt(HPLC):1.38min(方法2)
5-甲基-6-哌啶-4-基-哒嗪-3-基胺二盐酸盐
根据合成中间体4-甲氧基-5-(哌啶-4-基)吡啶-2-胺二盐酸盐所述的操作来从4-(6-氨基-4-甲基-哒 嗪-3-基)-哌啶-1-甲酸叔丁酯(289mg，0.99mmol)合成标题化合物。
收率：243mg(93％)ESI-MS:m/z＝193(M+H)+Rt(HPLC):0.14min(方法5)
6-硝基-3’,6’-二氢-2’H-[3,4’]联吡啶-1’-甲酸叔丁酯
将K2CO3(18.0g,130mmol)添加至4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢 -2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(8.81g，43.4mmol)和5-溴-2-硝基-吡啶(13.8g，44.7mmol)在1,4-二氧杂环己 烷/H2O(90mL/22.5mL)中的溶液中，并用氩气脱气5分钟。然后添加PdCl2(PPh3)2(152mg，0.22 mmol)。将反应混合物在90℃下搅拌3小时。将反应混合物用水(70mL)稀释并蒸馏出1,4-二噁烷至 130g。随后添加MTBE(22.5mL)和庚烷(90mL)并搅拌30分钟。过滤沉淀物。滤饼用水、1:4的TBE/ 庚烷洗涤，并真空干燥。
收率：13.2g(定量)ESI-MS:m/z＝306(M+H)+
5-溴-2-(2,5-二甲基-吡咯-1-基)-4-甲基-吡啶
将对甲苯磺酸(61.0mg，0.32mmol)添加至5-溴-4-甲基-吡啶-2-基胺(2.00g，10.7mmol)和己烷 -2,5-二酮(1.47g，12.8mmol)的甲苯(50mL)溶液中，并在140℃下搅拌反应混合物18小时。将反应 混合物倒入水中并在EtOAc中稀释。将分离的有机层用盐水洗涤并用MgSO4干燥，过滤并在减压下 浓缩。通过硅胶柱色谱(乙酸乙酯/庚烷)纯化残余物以获得标题化合物。
收率：2.68g(95％)
5-溴-2-(2,5-二甲基-吡咯-1-基)-4-甲氧基-吡啶
根据合成中间体5-溴-2-(2,5-二甲基-吡咯-1-基)-4-甲基-吡啶所述的操作来从5-溴-4-甲氧基-吡啶 -2-基胺(10.6g，52.1mmol)合成标题化合物。
收率：14.0g(96％) ESI-MS:m/z＝283(M+H)+ Rt(HPLC):0.93min(方法3)
(R)-2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基甲基)-4-(6-(2,5-二甲基-吡咯-1-基)-4-甲氧 基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
将RuPhos Pd G3(815mg，0.98mmol)添加至5-溴-2-(2,5-二甲基-吡咯-1-基)-4-甲氧基-吡啶(5.48 g，19.5mmol)、(R)-2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(6.75g，20.4mmol)和叔 丁醇钠(3.75g，39.0mmol)的THF(75mL)溶液中，并用N2脱气5分钟。将反应混合物在85℃下搅 拌18小时，通过硅藻土过滤反应混合物，用EtOAc洗涤并浓缩。经HPLC(碱性条件，C-18柱)纯 化残余物以获得标题产物。
收率：4.8g(37％)ESI-MS:m/z＝531(M+H)+
(R)-4-(6-氨基-4-甲氧基-吡啶-3-基)-2-羟基甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
将(R)-2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-4-[6-(2,5-二甲基-吡咯-1-基)-4-甲氧基-吡啶-3-基]-哌嗪 -1-甲酸叔丁酯(1.29g，2.07mmol)、羟胺盐酸盐(718mg，10.3mmol)和三乙胺(0.29mL，2.07mmol)在乙醇(6mL)和3mL水中的溶液在80℃下搅拌18小时。在减压下浓缩反应混合物并通过硅胶柱色 谱(DCM/甲醇)纯化以获得标题产物。
收率：369mg(53％)ESI-MS:m/z＝339(M+H)+
[(R)-4-(6-氨基-4-甲氧基-吡啶-3-基)-哌嗪-2-基]-甲醇盐酸盐
将4M氯化氢的1,4-二噁烷溶液(0.17mL，0.67mmol)添加至(R)-4-(6-氨基-4-甲氧基-吡啶-3-基)-2- 羟基甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(45mg，0.13mmol)的DCM(0.5mL)溶液中。将反应混合物在环境温度 下搅拌2小时。在减压下蒸发所有挥发物。向残余物中添加乙醚，过滤，获得标题化合物。
收率：30mg(82％)ESI-MS:m/z＝239(M+H)+Rt(HPLC):0.23min(方法9)
(S)-2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
将叔丁基-氯-二甲基-硅烷(2.09g，13.9mmol)和咪唑(1.89g，27.7mmol)添加至(S)-2-羟基甲基- 哌嗪-1-甲酸叔丁酯(2.00g，9.25mmol)的DMA(10mL)溶液中。在室温下搅拌反应混合物24小时。 将反应混合物用NH4Cl溶液稀释并用EtOAc萃取。将有机层用水及盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过 滤并在减压下浓缩。通过硅胶柱色谱纯化残余物以获得标题化合物。
收率：2.80g(92％)。
(S)-2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基甲基)-4-(6-(2,5-二甲基-吡咯-1-基)-4-甲氧 基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在压力容器中加入5-溴-2-(2,5-二甲基-吡咯-1-基)-4-甲氧基-吡啶(3.25g，11.6mmol)、Cphos-3G- 甲磺环钯(0.47G，0.58mmol)和(S)-2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(3.82g，11.6 mmol)的1,4-二噁烷(40mL)溶液。添加叔丁醇钠(3.3g，34.7mmol)并将容器用氩气冲洗、密封并在 100℃下搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温，用水和EtOAc稀释，通过硅藻土过滤。分离有机层，用盐水洗涤，干燥，过滤并在减压下浓缩。通过硅胶柱色谱(EtOAc/庚烷)纯化残余物以得到所需化 合物。
收率：4.94g(73％)ESI-MS:m/z＝531(M+H)+Rt(HPLC):1.49min(方法3)
(S)-4-(6-氨基-4-甲氧基-吡啶-3-基)-2-羟基甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
将(S)-2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-4-[6-(2,5-二甲基-吡咯-1-基)-4-甲氧基吡啶-3-基]-哌嗪 -1-甲酸叔丁酯(5.9g，11.2mmol)、羟胺盐酸盐(3.89g，56.0mmol)和三乙胺(1.6mL，11.2mmol)在乙 醇(30mL)及水(15mL)中的溶液在80℃下搅拌18小时。另外添加三乙胺(7.8mL，56.0mmol)。在减 压下浓缩反应混合物，通过硅胶色谱(甲醇/DCM)纯化残余物以获得标题化合物。
收率：2.57g(68％)
(S)-4-(6-氨基-4-甲氧基-吡啶-3-基)-哌嗪-2-基]-甲醇盐酸盐
将4N HCl的二噁烷溶液(0.73mL，2.92mmol)添加至(S)-4-(6-氨基-4-甲氧基-吡啶-3-基)-2-羟基甲 基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(264mg，0.58mmol)的二氯甲烷(1mL)溶液中。在室温下搅拌反应混合物直至 反应显示完成。在减压下蒸发反应混合物。残余物无需进一步纯化即可使用。
收率：160mg(定量)
(R)-2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基甲基)-4-(6-(2,5-二甲基-吡咯-1-基)-4-甲 基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
将叔丁醇钠(1.09g，11.3mmol)和CPHOS-G3-甲磺酸环钯(152mg，0.19mmol)添加至5-溴-2-(2,5- 二甲基-吡咯-1-基)-4-甲基-吡啶(1.00g，3.77mmol)和(R)-2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-哌嗪-1- 甲酸叔丁酯(1.25g，3.77mmol)的1,4-二噁烷(13mL)溶液中。将混合物用氮气脱气5分钟，并在100℃ 下搅拌18小时。将反应混合物通过硅胶垫过滤，并用EtOAc洗脱。在减压下浓缩滤液以获得标题化合物。
收率：1.67g(86％)ESI-MS:m/z＝515(M+H)+Rt(HPLC):1.56min(方法1)
(R)-4-(6-氨基-4-甲基-吡啶-3-基)-2-羟基甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
将(R)-2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基甲基)-4-(6-(2,5-二甲基-吡咯-1-基)-4-甲基-吡啶-3-基)-哌嗪-1- 甲酸叔丁酯(1.67g，24mmol)、羟胺盐酸盐(1.13g，16.2mmol)和三乙胺(452μL，3.24mmol)在乙醇 (10mL)和水(5mL)中80℃下搅拌18小时。在减压下浓缩反应混合物，经反相色谱纯化残余物以获得 标题化合物。
收率：0.5g(47％)ESI-MS:m/z＝323(M+H)+Rt(HPLC):0.66min(方法3)
[(R)-4-(6-氨基-4-甲基-吡啶-3-基)-哌嗪-2-基]-甲醇二盐酸盐
将4N HCl的二噁烷溶液(2mL，8.0mmol)添加至(R)-4-(6-氨基-4-甲基-吡啶-3-基)-2-羟基甲基- 哌嗪-1-甲酸叔丁酯(450mg，1.40mmol)的二氯甲烷(2mL)溶液中，并将反应混合物在室温下搅拌4 小时。在减压下浓缩反应混合物。残余物无需进一步纯化即加以使用。
收率：412mg(定量)
(R)-4-[6-(2,5-二甲基-吡咯-1-基)-4-甲氧基-吡啶-3-基]-2-羟甲基-哌嗪-1- 甲酸叔丁酯
将TBAF(1M的THF溶液，16.1mL，16.1mmol)添加至(R)-2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲 基)-4-[6-(2,5-二甲基-吡咯-1-基)-4-甲氧基-吡啶-3-基]-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(8.56g，16.1mmol)的THF (100mL)溶液中。在室温下搅拌反应混合物2.5小时。在减压下浓缩反应混合物，并通过硅胶色谱(EtOAc/庚烷)纯化残余物以获得标题产物。
收率：6.1g(91％)ESI-MS:m/z＝417(M+H)+Rt(HPLC):0.98min(方法1)
(R)-4-[6-(2,5-二甲基-吡咯-1-基)-4-甲氧基-吡啶-3-基]-2-甲氧基甲基-哌 嗪-1-甲酸叔丁酯
将NaH(60％，230mg，9.58mmol)添加至(R)-4-[6-(2,5-二甲基-吡咯-1-基)-4-甲氧基-吡啶-3-基]-2- 羟基甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(2.0g，4.80mmol)和MeI(401μL，7.20mmol)的DMA(20mL)溶液中。 在室温下搅拌反应混合物2小时。添加水，用EtOAc提取反应混合物(3次)。将合并的有机层用盐水 洗涤，经MgSO4干燥，过滤并在减压下浓缩。残留物经正相色谱纯化(乙酸乙酯/庚烷)。
收率：1.8g(87％)ESI-MS:m/z＝431(M+H)+Rt(HPLC):1.11min(方法1)
(R)-4-(6-氨基-4-甲氧基-吡啶-3-基)-2-甲氧基甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
将(R)-4-[6-(2,5-二甲基-吡咯-1-基)-4-甲氧基-吡啶-3-基]-2-甲氧基甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.8g， 4.18mmol)、羟胺盐酸盐(1.45g，20.9mmol)和三乙胺(0.58mL，4.18mmol)在乙醇(10mL)及水(5mL)中在80℃下搅拌18小时。在减压下浓缩反应混合物，在DCM中浆化，过滤以除去盐并再次在减压 下浓缩。残余物经正相柱色谱纯化以获得标题产物。
收率：440mg(30％)ESI-MS:m/z＝353(M+H)+Rt(HPLC):0.44min(方法1)
4-甲氧基-5-((R)-3-甲氧基甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-2-基胺二盐酸盐
将(R)-4-(6-氨基-4-甲氧基-吡啶-3-基)-2-甲氧基甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(440mg，1.25mmol)溶于 二氯甲烷(2mL)，并添加4N HCl的二噁烷(1.56mL)溶液。在室温下搅拌反应混合物4小时。在减压 下浓缩反应混合物。残余物无需进一步纯化即使用。
收率：406mg(定量)
4-[6-(2,5-二甲基-吡咯-1-基)-4-甲氧基-吡啶-3-基]-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
用氮气吹扫5-溴-2-(2,5-二甲基-吡咯-1-基)-4-甲氧基-吡啶(1.5g，5.37mmol)、哌嗪-1-甲酸叔丁酯 (1.0g，5.37mmol)、CPHOS-3G-甲磺酸环钯(0.2g，0.27mmol)和叔丁醇钠(1.55g，16.1mmol)的1,4- 二噁烷(15mL)溶液5分钟，然后加热至100℃保持10小时。将反应混合物冷却至室温，通过二氧化硅垫过滤，用乙酸乙酯洗脱并在减压下浓缩。通过硅胶柱色谱纯化残余物。
收率：2.1g(87％)ESI-MS:m/z＝387(M+H)+Rt(HPLC):1.15min(方法1)
4-(6-氨基-4-甲氧基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
根据合成中间体(R)-4-(6-氨基-4-甲氧基-吡啶-3-基)-2-羟基甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯所述的操作 来从4-[6-(2,5-二甲基-吡咯-1-基)-4-甲氧基-吡啶-3-基]-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(2.1g，4.73mmol)合成标题 化合物。
收率：1.07g(73％)
4-甲氧基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基胺二盐酸盐
根据合成中间体[(R)-4-(6-氨基-4-甲氧基-吡啶-3-基)-哌嗪-2-基]-甲醇盐酸盐所述的操作来从 4-(6-氨基-4-甲氧基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.07g，3.47mmol)合成标题化合物。
收率：976mg(定量)ESI-MS:m/z＝209(M+H)+
2-(2,2-二氟-乙基)-4-[6-(2,5-二甲基-吡咯-1-基)-4-甲氧基-吡啶-3-基]-哌 嗪-1-甲酸叔丁酯
在装有Teflon搅拌棒的压力容器中添加5-溴-2-(2,5-二甲基-吡咯-1-基)-4-甲氧基-吡啶(360mg， 1.28mmol)和CPhos-3G-甲磺酸环钯(51.6mg，0.06mmol)。将2-(2,2-二氟-乙基)-哌嗪-1-甲酸叔丁酯 (320mg，1.28mmol)添加到1,4-二噁烷(6mL)中。添加碳酸铯(1.25g，3.84mmol)并将容器用氩气冲 洗，密封并在80℃下搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温，用EtOAc和水稀释，并通过硅藻土过滤。除去水层，有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥，过滤并浓缩。残余物通过硅胶柱色谱(EtOAc/庚烷) 纯化。
收率：477mg(83％)ESI-MS:m/z＝451(M+H)+Rt(HPLC):1.18min(方法3)
4-(6-氨基-4-甲氧基-吡啶-3-基)-2-(2,2-二氟-乙基)-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
根据合成中间体(R)-4-(6-氨基-4-甲氧基-吡啶-3-基)-2-羟基甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯所述的操作 来从2-(2,2-二氟-乙基)-4-[6-(2,5-二甲基-吡咯-1-基)-4-甲氧基-吡啶-3-基]-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(477mg， 1.06mmol)合成标题化合物。
收率：0.40g(定量)ESI-MS:m/z＝373(M+H)+Rt(HPLC):0.82min(方法3)
5-[3-(2,2-二氟-乙基)-哌嗪-1-基]-4-甲氧基-吡啶-2-基胺盐酸盐
根据合成中间体[(R)-4-(6-氨基-4-甲氧基-吡啶-3-基)-哌嗪-2-基]-甲醇盐酸盐所述的操作来从 4-(6-氨基-4-甲氧基-吡啶-3-基)-2-(2,2-二氟-乙基)-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(395mg，1.06mmol)合成标题化 合物。2小时反应时间后，添加另外的二噁烷(5mL)。在室温下搅拌反应混合物。在减压下浓缩反应 混合物。
收率：327mg(定量)
(2R)-2-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]哌嗪-1,4-二甲酸4-叔丁酯
在室温下搅拌(2R)-4-[(苄氧基)羰基]-1-[(叔丁氧基)羰基]哌嗪-2-甲酸(4.00g，11.0mmol)、DIPEA (5.1mL，27.4mmol)、HATU(5.01g，13.2mmol)和N,O-二甲基羟胺盐酸盐(1.29g，13.2mmol)的DMA (40mL)溶液过周末。将反应混合物用EtOAc稀释，并用水及盐水洗涤。通过MgSO4干燥有机层， 过滤，并在减压下浓缩。通过硅胶柱色谱(EtOAc/庚烷)纯化残余物以获得标题化合物。
收率：4.44g(99％)ESI-MS:m/z＝408(M+H)+
(2R)-2-乙酰基哌嗪-1,4-二甲酸4-苄基酯1-叔丁酯
将甲基溴化镁(5.40mL，16.20mmol)滴加至(2R)-2-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-哌嗪-1,4-二甲酸4- 苄基酯(4.40g，10.80mmol)于THF(25mL)中的-20℃冷却混合物，并在-20℃下搅拌30分钟。用饱和 NH4Cl水溶液猝灭反应混合物，用EtOAc稀释，用水+1N HCl及盐水洗涤。通过MgSO4干燥有机 层，过滤并在减压下浓缩。通过硅胶色谱(EtOAc/庚烷)纯化残余物以获得所需产物。通过手性HPLC 进行进一步纯化以获得纯R对映异构体。
收率：2.38g(61％) ESI-MS:m/z＝363(M+H)+ Rt(HPLC):1.01min(方法1)
(2R)-2-(1-羟基乙基)哌嗪-1,4-二甲酸4-苄基酯1-叔丁酯
将硼氢化钠(0.36g，9.52mmol)添加至(2R)-2-乙酰基哌嗪-1,4-二甲酸4-苄基酯1-叔丁酯(2.30g， 6.35mmol)的甲醇(100mL)溶液中。搅拌反应混合物30分钟后，在减压下除去溶剂。通过硅胶色谱(乙 酸乙酯/庚烷)纯化残余物。
收率：2.10g(91％)
(2R)-2-{1-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]乙基}哌嗪-1,4-二甲酸4-苄基酯1- 叔丁酯
将叔丁基(氯)二甲基硅烷(1.30g，8.64mmol)添加至(2R)-2-(1-羟基乙基)哌嗪-1,4-二甲酸4-苄基酯 1-叔丁酯(2.10g，5.76mmol)及咪唑(1.18g，17.29mmol)的二氯甲烷(15mL)溶液中。搅拌反应混合物 过夜。在添加水(10mL)后，用二氯甲烷(2x 25mL)萃取水层。用盐水洗涤经合并的有机层。干燥有 机层，过滤并在减压下浓缩。通过硅胶色谱(乙酸乙酯/庚烷)纯化残余物。
收率：2.75g(99.7％)
(2R)-2-{1-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]乙基}哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在室温下在氢气氛(气球)下在乙醇(50mL)中搅拌(2R)-2-{1-[(叔丁基二甲基硅烷基)-氧基]乙基} 哌嗪-1,4-二甲酸4-苄基酯1-叔丁酯(2.75g，5.75mmol)及Pd/C(0.20g)2小时。在通过经硅藻土过滤移除催化剂后，在减压下移除溶剂。通过二氧化硅过滤残余物，用10％MeOH/二氯甲烷洗脱。
收率：1.89g(96％)
(2R)-2-{1-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]乙基}-4-[6-(2,5-二甲基-1H-吡咯- 1-基)-4-甲氧基吡啶-3-基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯
将CPhos-G3-甲磺酸环钯(0.22g)及叔丁醇钠(1.58g，16.5mmol)添加至(2R)-2-{1-[(叔丁基二甲基 甲硅烷基)氧基]乙基}哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.89g，5.49mmol)及5-溴-2-(2,5-二甲基-吡咯-1-基)-4-甲氧 基-吡啶(1.54g，5.49mmol)的1,4-二噁烷(20mL)溶液中，并用氮气吹扫反应混合物。在100℃下搅 拌反应混合物10小时。通过二氧化硅垫片过滤反应混合物，用EtOAc洗脱并浓缩。将残余物通过 硅胶色谱(乙酸乙酯/庚烷)纯化两次以获得标题化合物。
收率：((2R)-2-[(1S)-1-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]乙基]-4-[6-(2,5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-4-甲 氧基吡啶-3-基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯)：0.57g(19％)及((2R)-2-[(1R)-1-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]乙 基]-4-[6-(2,5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-4-甲氧基吡啶-3-基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯)：0.78g(26％)
(2R)-4-(6-氨基-4-甲氧基吡啶-3-基)-2-[(1R)-1-羟基乙基]哌嗪-1-甲酸叔丁 酯
将(2R)-2-[(1R)-1-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]乙基]-4-[6-(2,5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-4-甲氧基 吡啶-3-基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.87g，1.60mmol)、羟胺盐酸盐(0.56g，7.99mmol)及三甲基胺(0.22mL，1.60mmol)在乙醇(8mL)及水(4mL)中在80℃下加热42小时。添加额外量的羟胺盐酸盐(0.22g， 3.19mmol)并在80℃下搅拌反应混合物过夜。在减压下浓缩反应混合物，溶于二氯甲烷中并过滤。 将所需的化合物通过硅胶色谱法(MeOH/DCM)进行纯化。
收率：0.20g(36％)
(1R)-1-[(2R)-4-(6-氨基-4-甲氧基吡啶-3-基)哌嗪-2-基]乙-1-醇二盐酸盐
将4N HCl的二噁烷溶液(0.71mL，2.84mmol)添加至(2R)-4-(6-氨基-4-甲氧基吡啶-3- 基)-2-[(1R)-1-羟基乙基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.20g，0.57mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液中并在室温下搅 拌2小时。添加额外1mL的4N HCl的二噁烷溶液并在室温下搅拌1小时。在减压下浓缩反应混合 物。残余物无需进一步纯化即使用。
收率：0.18g(定量)
(2R)-4-(6-氨基-4-甲氧基吡啶-3-基)-2-[(1S)-1-羟基乙基]哌嗪-1-甲酸叔丁 酯
将(2R)-2-[(1S)-1-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]乙基]-4-[6-(2,5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-4-甲氧基 吡啶-3-基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.57g，1.04mmol)、羟胺盐酸盐(0.36g，5.21mmol)及三甲基胺(0.15 mL，1.04mmol)在乙醇(4mL)及水(2mL)中在80℃下加热42小时。添加额外量的羟胺盐酸盐(0.15g， 2.09mmol)并在80℃下搅拌反应混合物过夜。在减压下浓缩反应混合物，溶于二氯甲烷中并过滤。 将所需的化合物通过硅胶色谱(乙酸乙酯/庚烷)纯化并且通过HPLC再纯化。
收率：0.12g(33％)
(1S)-1-[(2R)-4-(6-氨基-4-甲氧基吡啶-3-基)哌嗪-2-基]乙-1-醇二盐酸盐
将4N HCl的二噁烷溶液(0.50mL，2.00mmol)添加至(2R)-4-(6-氨基-4-甲氧基吡啶-3- 基)-2-[(1S)-1-羟基乙基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.12g，0.34mmol)的二氯甲烷(1mL)溶液中，并在室温下 搅拌1小时。在减压下浓缩反应混合物。残余物无需进一步纯化即使用。
收率：定量
[4-(6-氨基-哒嗪-3-基)-哌啶-1-基]-(4-甲氧基-5-三甲基甲锡烷基-吡啶-2- 基)-甲酮
将[4-(6-氨基-哒嗪-3-基)-哌啶-1-基]-(5-溴-4-甲氧基-吡啶-2-基)-甲酮(1.0g，2.55mmol)、1,1,1,2,2,2-六甲基-二锡烷(1.0g，3.06mmol)和Tetrakis Pd(295mg，0.26mmol)在1,4-二噁烷/DMA中在100℃下 搅拌4小时。在减压下除去挥发物。添加EtOAc，并将混合物倒入10％NaHCO3水溶液中。分离水 相，并用EtOAc萃取两次。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过 快速色谱法(MeOH/DCM)纯化。
收率：454mg(37)％
[(R)-3-甲基-4-(6-硝基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-基]-(4’-三氟甲基-联苯-4-基)- 甲酮
将4’-三氟甲基-联苯-4-甲酸(100mg，0.38mmol)与TBTU(120mg，0.37mmol)、(R)-2-甲基-1-(6- 硝基-吡啶-3-基)-哌嗪盐酸盐(0.096，0.37mmol)和三乙胺(157μL，1.13mmol)在DMF(1mL)中在室 温下搅拌2小时。通过HPLC纯化反应混合物。
收率：99mg(56％)ESI-MS:m/z＝501(M+H)+Rt(HPLC):2.56min(方法5)
(2-甲氧基-4’-三氟甲基-联苯-4-基)-[(R)-3-甲基-4-(6-硝基-吡啶-3-基)-哌 嗪-1-基]-甲酮
将2-甲氧基-4-三氟甲基-联苯-4-甲酸(50.0mg，0.17mmol)和HATU(77.0mg，0.20mmol)的DMA (1.5mL)溶液添加至(R)-2-甲基-1-(6-硝基-吡啶-3-基)-哌嗪盐酸盐(48.0mg，0.19mmol)和DIPEA(152 μL，0.84mmol)中。在室温下搅拌反应混合物18小时，并通过硅胶色谱(EtOAc/庚烷)纯化以得到期 望的产物。
收率：84.0mg(99％)ESI-MS:m/z＝501(M+H)+Rt(HPLC):2.56min(方法5)
[4-甲氧基-5-(4-三氟甲基-苯基)-吡啶-2-基]-[(1S,4S)-5-(6-亚硝基-哒嗪-3- 基)-2,5-二氮杂-双环[2.2.1]庚-2-基]-甲酮
根据合成中间体(2-甲氧基-4’-三氟甲基-联苯-4-基)-[(R)-3-甲基-4-(6-硝基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-基]- 甲酮所述的操作来从4-甲氧基-5-(4-三氟甲基-苯基)-吡啶-2-甲酸(88.0mg，0.30mmol)和(1S,4S)-2-(6- 亚硝基-哒嗪-3-基)-2,5-二氮杂-双环[2.2.1]庚烷盐酸盐(71.6mg，0.30mmol)合成标题化合物。
收率：110mg(77％)
(2-甲氧基-4’-三氟甲基-联苯-4-基)-[(1S,4S)-5-(6-亚硝基-哒嗪-3-基)-2,5- 二氮杂-双环[2.2.1]庚-2-基]-甲酮
根据合成中间体(2-甲氧基-4’-三氟甲基-联苯-4-基)-[(R)-3-甲基-4-(6-硝基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-基]- 甲酮所述的操作来从2-甲氧基-4’-三氟甲基-联苯-4-甲酸(65.0mg，0.22mmol)和(1S,4S)-2-(6-亚硝基- 哒嗪-3-基)-2,5-二氮杂-双环[2.2.1]庚烷盐酸盐(53.0mg，0.22mmol)合成标题化合物。
收率：105mg(99％)Rt(HPLC):2.13min(方法5)
(R)-2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-4-(6-硝基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-甲酸 叔丁酯
将Cs2CO3(4.44g，13.6mmol)、Pd2(dba)3(208mg，0.23mmol)和Xantphos(263mg，0.45mmol) 添加至(R)-2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.50g，4.54mmol)和5-溴-2-硝基 吡啶(1.00g，4.93mmol)的1,4-二噁烷(12mL)溶液中。将反应混合物在100℃下搅拌24小时。然后通 过硅藻土过滤并在减压下浓缩。通过硅胶柱色谱(乙酸乙酯/庚烷)纯化残余物以获得标题化合物。
收率：1.35g(66％)ESI-MS:m/z＝453(M+H)+Rt(HPLC):1.31min(方法1)
(R)-4-(6-氨基-吡啶-3-基)-2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-哌嗪-1-甲酸 叔丁酯
将(R)-2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-4-(6-硝基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.35g，2.98 mmol)和Pd/C(317mg，0.15mmol)的甲醇(20mL)溶液在H2气球下搅拌24小时。通过硅藻土过滤反 应混合物，用甲醇洗涤，并在减压下浓缩滤液。
收率：1.26g(定量)
[(R)-4-(6-氨基-吡啶-3-基)-哌嗪-2-基]-甲醇二盐酸盐
将(R)-4-(6-氨基-吡啶-3-基)-2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.26g，2.98 mmol)的DCM(10mL)溶液和4M HCl的1,4-二噁烷溶液(7.5mL，30.0mmol)在室温下搅拌1小时。 在减压下浓缩反应混合物，在乙醚中浆化，过滤并用乙醚洗涤以获得标题化合物。
收率：838mg(定量)
化合物的合成
一般方法IV
将羧酸(1.0当量)(下表5中的中间体2)和HATU(1.2当量)在合适体积的DMA(约0.5mL至1mL DMA/0.18mmol中间体1)中的溶液搅拌15分钟，并添加至胺(1当量)(下表5中的中间体1)和DIPEA (5当量)在合适体积的DMA(约0.5mL至1mL DMA/0.18mmol中间体1)的溶液中。在室温下搅拌 反应混合物18小时。使用反相HPLC(C-18柱、酸性或碱性条件)纯化粗反应混合物以获得所需产物。
一般方法V
将羧酸(1.0当量)(下表5中的中间体2)和CDI(1.3当量)在合适体积的DMA(约2mLDMA/0.25 mmol中间体1)中的溶液搅拌30分钟，并向其中添加胺(1.0当量)(下表5中的中间体1)和DIPEA(2 当量)。在室温下搅拌反应混合物18小时。使用反相HPLC(C-18柱，酸性或碱性条件)纯化粗反应 混合物以获得所需产物。
表5：本发明的化合物84-110。
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手性分离方法1：
手性分析方法1：
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化合物的合成
一般方法VI
将4-(6-氨基-哒嗪-3-基)-哌啶-1-基]-(4-甲氧基-5-三甲基甲锡烷基-吡啶-2-基)-甲酮(1.0当量)(下 表6中的中间体2)、溴化合物(1.3当量)(下表6中的中间体1)和Tetraki Pd(0.1当量)在密封的试管 中于50℃至150℃下在脱气的合适体积的1,4-二噁烷中加热2小时。过滤反应混合物，通过反相柱 色谱或硅胶色谱纯化产物。
表6：本发明的化合物111-112。
化合物的合成
一般方法VII
将锌金属(10当量)添加至硝基衍生物(下表7的中间体1)(1.0当量)的冰醋酸(约1.0mL冰醋酸/0.2 mmol中间体1)和适当体积的乙醇(约1.0mL乙醇/0.2mmol中间体1)的溶液中。在室温下搅拌反应 混合物2小时。经硅藻土过滤反应混合物，用乙醇洗涤并在减压下浓缩。随后通过硅胶色谱(甲醇/DCM) 纯化残余物，然后通过反相HPLC纯化残余物。
一般方法VIII
将Pd/C(0.1eq)和填充氢气的气球添加至亚硝基衍生物(下表7的中间体1)(1当量)在合适体积的 乙醇(约1.0mL乙醇/0.2mmol中间体1)中的溶液中。将反应在室温下搅拌4小时。通过硅藻土过滤 反应混合物，用甲醇洗涤并在减压下浓缩。通过反相HPLC纯化残余物。
表7：本发明的化合物113-116
4-(6-氨基-4-甲氧基-哒嗪-3-基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的替代合成
将在1,4-二氧杂环己烷(10mL)和2M Na2CO3水溶液(4.0mL，8.0mmol)中的4-(4,4,5,5-四甲基 -[1,3,2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.24g，4.00mmol)、(6-氯-5-甲氧基- 哒嗪-3-基)-氨基甲酸叔丁酯(1.04g，4.00mmol)和PdCl2(dppf)*CH2Cl2(0.33g，0.40mmol)用氮气吹扫 5分钟，然后在微波中在150℃下加热30分钟。将反应混合物用乙酸乙酯(10mL)和水(10mL)稀释， 分离各层。用乙酸乙酯萃取含水部分(10mL)。将合并的有机部分用盐水(25mL)洗涤，经Na2SO4干 燥，过滤并浓缩。通过硅胶色谱(DCM/MeOH)纯化残余物。
收率：0.11g(9％)ESI-MS:m/z＝307(M+H)+Rt(HPLC):0.65min(方法5)
4-(6-氨基-4-甲氧基-哒嗪-3-基)-哌啶-1-甲酸叔丁酯的替代合成
在氮气氛下，将Pd/C(0.14g，0.13mmol)添加至4-(6-氨基-4-甲氧基-哒嗪-3-基)-3,6-二氢-2H-吡 啶-1-甲酸叔丁酯(405mg，1.32mmol)在MeOH(10mL)和乙酸(1mL)中的溶液中。将反应混合物脱气 并使其经受氢气球。在室温下搅拌反应混合物直至反应完成。将反应过滤并浓缩。通过硅胶色谱 (DCM/MeOH)纯化残余物。
收率：0.39mg(95％)ESI-MS:m/z＝309(M+H)+Rt(HPLC):0.73min(方法5)
2-(N-苄基-2-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-4,4-二氟丁酰胺)乙酸乙酯
将2-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-4,4-二氟丁酸(0.50g，2.09mmol)和N,N'-二环己基碳二亚胺(0.43g， 2.09mmol)的DCM(14mL)溶液在室温下搅拌5分钟。添加2-(苄基氨基)乙酸乙酯(0.39mL；2.09 mmol)，并在室温下搅拌反应混合物过夜。在减压下浓缩反应混合物并不经进一步纯化而使用。
收率：定量ESI-MS:m/z＝415(M+H)+ Rt(HPLC)：1.07min(方法3)
1-苄基-3-2,2-二氟乙基)哌嗪-2,5-二酮
将2-(N-苄基-2-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-4,4-二氟丁酰胺)乙酸乙酯(2.60g，6.27mmol)和TFA(33 mL，0.43mol)的含DCM(33mL)溶液在室温下搅拌1.5小时。在减压下蒸发溶剂，并将残余物溶于乙醇(30mL)和三乙胺(4.4mL；31.35mmol)。在回流下搅拌1.5小时后，在减压下浓缩反应混合物。 通过硅胶色谱(DCM/MeOH)纯化残余物。
收率：1.65g(98％)ESI-MS:m/z＝269(M+H)+Rt(HPLC):0.58min(方法3)
1-苄基-3-(2,2-二氟乙基)哌嗪
将1-苄基-3-(2,2-二氟乙基)哌嗪-2,5-二酮(1.65g，6.15mmol)和氢化铝锂(1mol/L；THF溶液；24.60mL；24.60mmol)的THF(36mL)溶液回流搅拌2小时。冷却至室温后，将反应混合物用乙醚稀释并 冷却至0℃。缓慢添加水(1mL)，然后添加氢氧化钠(15％；水溶液，1mL)和水(3mL)。向混合物中 添加MgSO4并在室温下搅拌过夜。将混合物通过硅藻土过滤并在减压下浓缩。残余物无需进一步纯 化即使用。
收率：1.00g(68％)ESI-MS:m/z＝241(M+H)+Rt(HPLC):0.76min(方法3)
4-苄基-2-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
将1-苄基-3-(2,2-二氟乙基)哌嗪(0.43g；1.80mmol)、二碳酸二叔丁酯(0.51g；2.34mmol)和三乙 胺(0.50mL；3.60mmol)的DCM(18mL)溶液在室温下搅拌过夜。将反应混合物用DCM稀释并用水 及盐水洗涤。分离有机层，经MgSO4干燥，过滤，并在减压下浓缩。通过硅胶色谱(EtOAc/己烷)纯 化残余物。
收率：0.46g(75％)ESI-MS:m/z＝341(M+H)+Rt(HPLC):1.25min(方法3)
2-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
将乙酸(27.09mL，1.35mmol)中的4-苄基-2-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.46g，1.35mmol) 通过H-Cube氢化柱(1.0mL/min；80bar；80℃)。蒸发溶剂，并将残余物溶于DCM，用NaHCO3(饱 和水溶液)中和。将有机层通过相分离器并在减压下浓缩。残余物无需进一步纯化即使用。
收率：0.32g(94％)
化合物71的替代制备
5-[1-(4-甲氧基-5-苯基吡啶-2-羰基)哌啶-4-基]吡啶-2-胺
4-甲氧基-5-苯基吡啶-2-甲酸甲酯
将在1,4-二氧杂环己烷(2mL)及水(0.25mL)中的4-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环 戊烷-2-基)吡啶-2-甲酸甲酯(0.25g；0.85mmol，商购的MFCD18727245)、PdCl2(dppf)*CH2Cl2(0.14g； 0.17mmol)、K3PO4(0.36g；1.71mmol)和溴苯(0.13g；0.85mmol)并用氩气吹扫。将反应混合物在120℃ 下在微波中搅拌60分钟。在减压下浓缩反应混合物并且不经纯化进一步作为粗产物使用。
收率：0.21g(定量)
4-甲氧基-5-苯基吡啶-2-甲酸
将在THF/MeOH(4mL/2mL)中的4-甲氧基-5-苯基吡啶-2-甲酸甲酯(0.80g，3.29mmol)和LiOH (0.16g；6.58mmol于1mL水中)在室温下搅拌2小时。在减压下浓缩反应混合物。将残余物溶于水 中并用浓HCl水溶液酸化。通过冻干分离产物。
收率：0.75g(定量)ESI-MS:m/z＝230(M+H)+Rt(HPLC)：0.56min(方法2)
5-[1-(4-甲氧基-5-苯基吡啶-2-羰基)哌啶-4-基]吡啶-2-胺三氟乙酸
将4-甲氧基-5-苯基吡啶-2-甲酸(55.0mg；0.24mmol)、HATU(110.0mg；0.29mmol)和DIPEA (105.0μL；0.61mmol)含于DMF(3mL)溶液在室温下搅拌30分钟。添加5-((哌啶-4-基)吡啶-2-胺 (50.0mg；mmol)。在室温下搅拌过夜后，通过RP-HPLC(ACN/水+TFA)纯化反应混合物。
收率：75.0mg(71％)ESI-MS:m/z＝389(M+H)+Rt(HPLC):0.74min(方法7)
化合物105的替代制备
4-甲氧基-5-4-(4-甲氧基-5-苯基吡啶-2-羰基)哌嗪-1-基]吡啶-2-胺
5-溴-2-(2,5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-4-甲氧基吡啶
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将5-溴-4-甲氧基吡啶-2-胺(9.50g；46.79mmol)、己烷-2,5-二酮(7.1mL；60.83mmol)和对甲苯磺 酸(0.81g；4.68mmol)的甲苯(80mL)溶液在Dean-Stark装置中在120℃下搅拌过夜。将反应混合物在 减压下浓缩，并通过硅胶色谱(DCM)纯化。
收率：7.60g(58％)ESI-MS:m/z＝281/283(M+H)+Rt(HPLC):1.13min(方法7)
1-[6-(2,5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-4-甲氧基吡啶-3-基]哌嗪双三氟乙酸
步骤1：
在氩气氛下进行反应。将5-溴-2-(2,5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-4-甲氧基吡啶(0.60g；2.13mmol)、 哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.44g；2.36mmol)、CPhos-3G-甲磺酸环钯(0.17g；0.21mmol)和碳酸铯(2.10g； 6.45mmol)于1,4-二噁烷(15mL)中在80℃下搅拌过夜。通过RP-HPLC(ACN/水+NH3)纯化反应混合 物。收集含有4-[6-(2,5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-4-甲氧基吡啶-3-基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯的级分并冻干。
ESI-MS:m/z＝387(M+H)+Rt(HPLC):1.11min(方法7)
步骤2：
将来自前一步骤的4-[6-(2,5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-4-甲氧基吡啶-3-基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯溶于适量的CH2Cl2中并添加TFA(1mL)。在室温下搅拌过夜后，添加另外的TFA(0.3mL)并在40℃下搅 拌3小时。在减压下浓缩反应混合物并不经进一步纯化而使用。
收率：定量ESI-MS:m/z＝287(M+H)+Rt(HPLC)：0.67min(方法7)
4-甲氧基-5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-胺
将1-[6-(2,5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-4-甲氧基吡啶-3-基]哌嗪双三氟乙酸(1.20g；2.33mmol)、羟胺 盐酸盐(0.70g；10.03mmol)和三乙胺(1.00mL；7.11mmol)于EtOH/水(1/1，16mL)中在80℃下搅拌 过夜。在减压下除去有机溶剂，并用RP-HPLC(ACN/水+NH3)纯化残余物。
收率：0.29g(60％) ESI-MS:m/z＝209(M+H)+Rt(HPLC):0.35min(方法9)
4-甲氧基-5-4-(4-甲氧基-5-苯基吡啶-2-羰基)哌嗪-1-基]吡啶-2-胺
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将4-甲氧基-5-苯基吡啶-2-甲酸(0.11g，0.46mmol)、HATU(0.18g，0.46mmol)和DIPEA(200μL， 1.16mmol)于DMF(3mL)中在室温下搅拌30分钟。添加4-甲氧基-5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-胺(95.0mg； 0.46mmol)。在室温下搅拌过夜后，通过RP-HPLC(ACN/水+NH3)纯化反应混合物。
收率：40mg(21％)ESI-MS:m/z＝420(M+H)+Rt(HPLC):0.87min(方法9)
化合物27的替代制备
6-(1-{4-甲氧基-5-[4-(三氟甲基)苯基]吡啶-2-羰基}哌啶-4-基)哒嗪-3-胺
4-甲氧基-5-[4-(三氟甲基)苯基]吡啶-2-甲酸
在氩气氛下进行反应。将5-溴-4-甲氧基吡啶-2-甲酸甲酯(100.0mg；0.41mmol)、[4-(三氟甲基) 苯基]硼酸(84.9mg；0.45mmol)、XPhos Pd G2(9.6mg；0.01mmol)和碳酸钠(2mol/L；水溶液；0.81 mL；1.63mmol)于1,4-二噁烷(20mL)中在100℃下搅拌2小时。通过RP-HPLC(ACN/水+TFA)纯化反应混合物。
收率：70mg(58％)ESI-MS:m/z＝298(M+H)+Rt(HPLC):0.87min(方法7)
6-(哌啶-4-基)哒嗪-3-胺二盐酸盐
将4-(6-氨基哒嗪-3-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.10g，0.36mmol)和HCl(4mol/L；1,4-二噁烷溶液； 1mL；4.00mmol)于1,2-二氯乙烷(3mL)中在室温下搅拌16小时。在减压下浓缩反应混合物并不经 进一步纯化而使用。
收率：82mg(82％)
6-(1-{4-甲氧基-5-[4-(三氟甲基)苯基]吡啶-2-羰基}哌啶-4-基)哒嗪-3-胺
将4-甲氧基-5-[4-(三氟甲基)苯基]吡啶-2-甲酸(0.30g，1.01mmol)、6-(哌啶-4-基)哒嗪-3-胺二盐酸 盐(0.22g，0.87mmol)、HATU(0.46g，1.21mmol)和DIPEA(0.91mL，5.28mmol)于DMA(5mL)中 在室温下搅拌2小时。通过RP-HPLC纯化反应混合物。
收率：0.10g(22％)ESI-MS:m/z＝458(M+H)+Rt(HPLC):0.60min(方法16)
化合物36的制备
6-{1-[5-(4-氟苯基)-4-甲氧基吡啶-2-羰基]哌啶-4-基}哒嗪-3-胺
6-[1-(5-溴-4-甲氧基吡啶-2-羰基)哌啶-4-基]哒嗪-3-胺
将5-溴-4-甲氧基-吡啶-2-甲酸(0.18g，0.80mmol)、TBTU(0.26g，0.80mmol)和DIPEA(0.55mL， 3.19mmol)于DMF(6mL)中在室温下搅拌5分钟后，加入6-哌啶-4-基-哒嗪-3-基胺二盐酸盐(0.20g， 0.80mmol)。将反应混合物在50℃下搅拌2小时，然后在室温下搅拌过夜。用水稀释反应混合物， 滤出所得沉淀物以获得标题化合物。
收率：0.15g(49％)ESI-MS:m/z＝392/394(Br同位素)(M+H)+
Rt(HPLC):0.74min(方法7)
6-{1-[5-(4-氟苯基)-4-甲氧基吡啶-2-羰基]哌啶-4-基}哒嗪-3-胺*甲酸
将6-[1-(5-溴-4-甲氧基吡啶-2-羰基)哌啶-4-基]哒嗪-3-胺(0.13g；0.32mmol)、(4-氟苯基)硼酸 (0.07g；0.48mmol)和磷酸钾(0.14g；0.64mmol)于1,4-二噁烷/水(2mL/0.25mL)中用氩气吹扫5分钟。添加PdCl2(dppf)*CH2Cl2(0.05g；0.06mmol)，并再次用氩气吹扫5分钟。将反应混合物在120℃下 搅拌1小时，然后将反应混合物通过RP-HPLC(ACN/水/甲酸)纯化。
收率：40mg(31％)ESI-MS:m/z＝408(M+H)+Rt(HPLC):0.75min(方法7)
5-(4-氟-苯基)-4-甲氧基-吡啶-2-甲酸的替代合成
在氩气氛下进行反应。将5-溴-4-甲氧基吡啶-2-甲酸甲酯(0.25g；1.00mmol)、2-(4-氟苯基)-4,4,5,5- 四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(0.22g；1.00mmol)和碳酸钠(2mol/L；水溶液；2.00mL；4.00mmol) 于1,4-二噁烷(10mL)中用氩气吹扫5分钟。Xphos PdG2(0.08g；0.10mmol)作为催化剂添加。在80℃ 下搅拌过夜后，将反应混合物用水稀释并用EtOAc洗涤两次。用HCl(1mol/L；水溶液)将水层酸化 至pH 5-6。将所得沉淀物过滤，用水洗涤并干燥。
收率：0.08g(32％)ESI-MS:m/z＝248(M+H)+Rt(HPLC):0.60min(方法9)
化合物84的制备
4-甲氧基-5-(1-{4-甲氧基-5-[4-(三氟甲基)苯基]吡啶-2-羰基}哌啶-4-基)吡啶-2-胺
6-氨基-4-甲氧基-1’,2’,3’,6’-四氢-[3,4’-联吡啶]-1’-甲酸叔丁酯
在氩气氛下进行反应。将5-溴-4-甲氧基吡啶-2-胺(7.40g；32.80mmol)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2- 二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-1-甲酸叔丁酯(11.16g；36.08mmol)和碳酸钠(2mol/L；水 溶液；65.60mL；131.21mmol)于1,4-环噁烷(300mL)用氩气吹扫。5分钟后添加Xphos Pd 2nd Gen (0.77g；0.98mmol)，并在100℃下在密封小瓶中搅拌反应混合物过夜。在减压下浓缩反应混合物。将残余物溶于水中，用EtOAc提取数次。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。 通过硅胶色谱(DCM/MeOH)纯化残余物。
收率：9.69g(97％)ESI-MS:m/z＝306[M+H]+Rt(HPLC):0.83min(方法15)
4-(6-氨基-4-甲氧基吡啶-3-基)-哌啶-1-甲酸叔丁酯
在氢气氛(Parr-设备；50psi)下，将6-氨基-4-甲氧基-1’,2’,3’,6’-四氢-[3,4’-联吡啶]-1’-甲酸叔丁酯 (5.11g；16.73mmol)和Pd/C(10％；0.60g)于MeOH(100mL)中在室温下搅拌41.5小时。添加另外的 催化剂两次，并进一步氢化反应混合物。过滤除去催化剂后，在减压下浓缩母液。产物无需进一步 纯化即使用。
收率：4.71g(92％)ESI-MS:m/z＝308[M+H]+Rt(HPLC):0.82min(方法15)
4-甲氧基-5-(哌啶-4-基)吡啶-2-胺二盐酸盐
将4-(6-氨基-4-甲氧基吡啶-3-基)-哌啶-1-甲酸叔丁酯(6.90g；22.45mmol)和HCl(4mol/L；1,4- 二噁烷溶液；69.00mL；224.47mmol)于DCM(89.70mL)中在室温下搅拌过夜。在减压下浓缩反应 混合物。将残余物在乙醚中研磨并过滤。产物无需进一步纯化即使用。
收率：5.30g(84％)ESI-MS:m/z＝208[M+H]+Rt(HPLC):0.66min(方法9)
4-甲氧基-5-(1-{4-甲氧基-5-[4-(三氟甲基)苯基]吡啶-2-羰基}哌啶-4-基)吡啶-2-胺*甲酸
将4-甲氧基-5-(哌啶-4-基)吡啶-2-胺二盐酸盐(35.0mg；0.12mmol)和DIPEA(0.11mL；0.59mmol) 添加至4-甲氧基-5-[4-(三氟甲基)苯基]吡啶-2-甲酸(28.7mg；0.12mmol)和HATU(53.7mg；0.12mmol) 的DMA(1.5mL)溶液中。在室温下搅拌过夜后，通过RP-HPLC(ACN/水/甲酸)纯化反应混合物。
收率：31mg(53％)ESI-MS:m/z＝487(M+H)+Rt(HPLC):1.13min(方法5)
化合物68的制备
5-[4-(4-甲氧基-5-苯基吡啶-2-羰基)哌嗪-1-基]吡啶-2-胺
5-[4-(5-溴-4-甲氧基吡啶-2-羰基)哌嗪-1-基]吡啶-2-胺
将5-溴-4-甲氧基-吡啶-2-甲酸(0.25g，1.08mmol)、5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-胺(0.19g；1.08mmol)、 TBTU(0.52g，1.62mmol)和DIPEA(0.39mL，2.26mmol)于DMA(2.5mL)中搅拌2小时。通过硅胶 色谱法纯化所得反应混合物。
收率：42mg(10％)
5-[4-(4-甲氧基-5-苯基吡啶-2-羰基)哌嗪-1-基]吡啶-2-胺
将5-[4-(5-溴-4-甲氧基吡啶-2-羰基)哌嗪-1-基]吡啶-2-胺(50.0mg；0.13mmol)、苯基硼酸(19.0mg； 0.19mmol)和磷酸钾(25.0mg；0.25mmol)于1,4-二噁烷/水(2mL/0.25mL)中用氩气吹扫5分钟。添加 PdCl2(dppf)*CH2Cl2(21.0mg；0.03mmol)并再次用氩气吹扫5分钟。将反应混合物在120℃下搅拌1 小时。通过RP-HPLC纯化反应混合物。
收率：5.2mg(11％)ESI-MS:m/z＝390(M+H)+Rt(HPLC):0.47min(方法16)
化合物79的制备
6-[1-(3-甲氧基-4-{6-[(1-甲基环丙基)甲氧基]吡啶-3-基}苯甲酰基)哌啶-4-基]哒嗪-3-胺
5-溴-2-[(1-甲基环丙基)甲氧基]吡啶
将5-溴-2-氟吡啶(0.25g，1.42mmol)、(1-甲基环丙基)甲醇(0.18g，2.13mmol)和叔丁醇钾(0.29g， 2.56mmol)于THF(5mL)中在室温下搅拌24小时。用EtOAc和水稀释反应混合物。将水层用EtOAc 萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤，分离，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。通过硅胶色 谱纯化残余物(EtOAc/庚烷)。
收率：0.23g(67％)
{4-[4-(6-氨基哒嗪-3-基)哌啶-1-羰基]-2-甲氧基苯基}硼酸
将6-(哌啶-4-基)哒嗪-3-胺二盐酸盐(1.64g；6.53mmol)和DIPEA(6.22mL；35.72mmol)添加至 4-(二羟基硼烷)-3-甲氧基苯甲酸(1.00g；5.10mmol)和TBTU(4.92g；15.31mmol)的N,N-二甲基乙酰 胺(25mL)溶液中。在室温下搅拌过夜后，在减压下浓缩反应混合物并通过硅胶色谱 (DCM/MeOH/NH4OH)纯化。
收率：1.40g(77％)
6-[1-(3-甲氧基-4-{6-[(1-甲基环丙基)甲氧基]吡啶-3-基}苯甲酰基)哌啶-4-基]哒嗪-3-胺*甲酸
将{4-4-6-氨基哒嗪-3-基)哌啶-1-羰基-2-甲氧基苯基}硼酸(50.0mg；mmol)、5-溴-2-[(1-甲基环丙 基)甲氧基]吡啶(34.0mg；mmol)、磷酸钾(59.6mg；mmol)和PdCl2(dppf)*CH2Cl2(22.9mg；mmol)在 脱气的1,4-二噁烷/水(2mL/0.25mL)中合并，并用氩气吹扫。在120℃下在微波中搅拌反应混合物1 小时。将反应混合物通过RP-HPLC(ACN/水/甲酸)纯化。
收率：19.0mg(29％)ESI-MS:m/z＝475(M+H)+Rt(HPLC):0.66min(方法16)
化合物35的制备
6-{1-[5-(3-氟苯基)-4-甲氧基吡啶-2-羰基]哌啶-4-基}哒嗪-3-胺
将6-[1-(5-溴-4-甲氧基吡啶-2-羰基)哌啶-4-基]哒嗪-3-胺(50.0mg；0.13mmol)、(3-氟苯基)硼酸 (21.4mg；0.15mmol)、磷酸钾(54.1mg；0.26mmol)和PdCl2(dppf)CH2Cl2(20.8mg；0.03mmol)在脱 气的1,4-二噁烷/水(2mL/0.25mL)中合并，并用氩气吹扫。将反应混合物在120℃下在微波中搅拌1 小时。将反应混合物通过RP-HPLC纯化。
收率：5mg(10％)ESI-MS:m/z＝408(M+H)+Rt(HPLC):0.50min(方法16)
评估生物活性
高通量筛选试验
此筛选试验通过添加商购的DAG配体类似物OAG(1-油酰基-2-乙酰基-sn-甘油)或TRPC6激动剂1-[1-(4,5,6,7,8-五氢环庚[2,1-d]噻吩-2-基羰基)-4-哌啶基]-3-氢苯并咪唑-2-酮(GSK1702934A)来量 测人TRPC6(瞬时受体电位阳离子通道，亚家族C，成员6)离子通道活化。该试验使用购自Molecular Devices的荧光钙感测剂4-(6-乙酰氧基甲氧基-2,7-二氟-3-氧代-9-呫吨基)-4'-甲基-2,2'-(亚乙基二氧基) 二苯胺-N,N,N',N'-四乙酸四(乙酰氧基甲基)酯(Fluo4/AM)染料。如通过荧光信号增加所测量的细胞内 钙浓度的变化(增加)提供对通道活性的测量。
用人TRPC6构建体稳定转染商购的HEK293/TREx系(Invitrogen)，并通过常规钙成像筛选以发 现在经1μg/ml四环素刺激后具有人TRPC6表达的克隆。将这些细胞维持在制造商所推荐的生长培 养基中，该培养基补充有100μg/ml潮霉素(hygromycin)以促进人TRPC6构建体的保留。在生长至接 近融合后，在1μg/ml四环素存在下，将细胞以约35,000个细胞/孔的密度接种至384孔CellBind板 (Corning)中，并允许其生长20至30小时。产生几乎融合的单层。从孔中移除生长培养基，并随后 向细胞添加25mL在林格氏溶液(Ringer'ssolution)中稀释的Fluo4/AM(6.5g NaCl、0.42g KCl、0.25g CaCl2及0.2g碳酸氢钠；pH7.4)，补充1％Pluronic F-127至终浓度为0.5μM并在室温下培育60分 钟。随后通过快速轻弹翻转平板从细胞中移除染料溶液，并用25μl林格氏替换。在从装载恢复约 0.5小时后，使用Hamamatsu FDSS 6000系统测定细胞，其允许以485nm照射。以0.2Hz的速率获 取帧。在试验期间，将板连续涡旋，在添加各试剂后用移液管混合孔。为了筛选试验，在收集短(4帧)基线后，历时2分钟将26μl经稀释的化合物储液(50μM)添加至每个孔中。随后将13μl由125nM 在高Ca2+林格溶液(含90mM Ca2+)中稀释的GSK1702934A组成的激动剂溶液添加至每个孔中，实现20mM Ca2+及10μM测试化合物的最终浓度。在添加高Ca2+林格后收集数据持续约3分钟。将 每个孔在特定时间点观察到的荧光强度除以该孔的初始荧光强度，并通过对在实验期间获得除最终 帧外的最后4帧的所得荧光比率求平均值来确定总反应。每个板均包括阴性及阳性对照。阴性对照 孔由暴露于试验缓冲液及激动剂溶液的HEK293/TRExTRPC6细胞组成，且不含测试化合物。阳性 对照由孔组成，该孔由暴露于在林格溶液及激动剂溶液中稀释的25μM 3-[(2-氯苯氧基)甲基]苯基哌 啶基酮(Chembridge)的HEK293/TRExTRPC6细胞组成。这些对照分别定义0％及100％阻断，且每 个孔的强度标准化为这些值。
IC50使用上述荧光法进行测定，只是不是在10μM下测试化合物，而是在20μM、6.667μM、 2.222μM、0.741μM、0.247μM、0.082μM及0.027μM的最终浓度下测试化合物。化合物在所有浓 度下一式三份地进行测试。使用标准软件拟合IC50曲线。
表3.本发明化合物对人TRPC6的拮抗剂作用(IC50)
还可使用人TRPC6膜片钳试验显示所要求保护的化合物的生物活性。
治疗用途的方法
TRPC6抑制是预防及治疗由TRPC6活性加剧的各种疾病或病症的有吸引力方式。本文所公开 的化合物有效抑制TRPC6活性。特别地，本发明的化合物是选择性离子通道抑制剂，且在人类微粒 体中具有良好代谢稳定性。更特别地，与包括TRPC3、TRPC5及TRPC7的其他TRP通道相比，本 发明的化合物对TRPC6通道具有极好的效力及选择性。因此，本发明的化合物适用于治疗如背景及 详述部分中所述的疾病及病症，包括以下病状及疾病：
心脏病状(例如，心脏肥大)、高血压(例如，原发性或继发性)、肺动脉高压(例如，IPAH)、神经 退行性疾病或病症(例如，阿尔茨海默病(AD)、帕金森病、亨廷顿病、肌萎缩侧索硬化(ALS)及由创 伤或包括衰老的其他损伤引起的其他脑病症)、发炎疾病(例如，哮喘、肺气肿、慢性阻塞性肺病、类 风湿性关节炎、骨关节炎、炎性肠病、多发性硬化症、肌营养不良、迪谢内肌营养不良及免疫系统 疾病)、先兆子痫及妊娠诱导的高血压、肾疾病(局灶性节段性肾小球硬化、肾病综合征、糖尿病性肾病或糖尿病肾病、慢性肾病(CKD)、肾功能不全、终末期肾病、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、轻微 改变型肾病、缺血或缺血再灌注损伤、癌症、诸如糖尿病的代谢病症、特发性肺纤维化(IPF)和急性 呼吸道疾病综合征(ARDS)。用于预防或治疗任何前述或后续疾病及病状的方法包括治疗与这些疾病 或病状相关的任何症状。例如，治疗肾病的方法涵盖治疗包括但不限于继发性高血压、蛋白尿、脂 肪尿、高胆固醇血症、高脂血症及凝血异常的症状。
由于钙调节在许多细胞过程(包括细胞活化、细胞骨架重排、基因表达、细胞运输及凋亡细胞死亡)中的重要作用，钙失衡涉及许多疾病及病症。这些疾病及病症包括神经及神经退行性疾病及病症； 发炎性疾病及病症，诸如炎性肠病及克罗恩氏病(Crohn'sdisease)；肾病，诸如高钙血症、肾结石及多囊肾病；代谢疾病及病症，包括肥胖及糖尿病；肝及肾疾病及病症；心血管疾病及病症，包括高 血压；呼吸系统疾病，包括COPD、IPAH和哮喘及癌症，包括脑癌、乳癌、肾癌、子宫颈癌、前列 腺癌、胃肠道癌、皮肤癌及上皮癌。
这些病症已在人体中得到良好表征，但在其他哺乳动物中也存在类似病因，且可通过本发明药 物组合物进行治疗。
因此，如本文所述，本发明化合物或其药学上可接受的盐可用于制备用于治疗由TRPC6介导的 疾病或病症的药物，这些疾病或病症包括上文及背景及详述部分中所提及的那些。
对于治疗用途而言，本发明的化合物可通过以任何常规方式呈任何常规药物剂型的药物组合物 进行施用。常规剂型通常包括适用于所选特定剂型的药学上可接受的载体。施用途径包括但不限于 静脉内、肌内、皮下、滑膜内、通过输注、舌下、经皮、口服、局部或通过吸入。优选施用方式为口服及静脉内施用。
本发明化合物可单独施用或与可增强该抑制剂的稳定性、在某些实施方案中促进包含其的药物 组合物的施用、提供增加的溶解性或分散性、增加抑制活性、提供辅助治疗等的辅剂(包括其他活性 成分)组合施用。例如，在一实施方案中，可施用多种本发明化合物。有利地，这样的组合疗法使用 较低剂量的常规治疗剂，从而避免当那些药剂用作单一疗法时可能产生的毒性及不良副作用。本发明的化合物可与常规治疗剂或其他辅剂物理组合成单一药物组合物。有利地，该化合物可随后一起 以单一剂型进行施用。在一些实施方案中，包含这样的化合物组合的药物组合物含有至少约5％，但 更优选至少约20％的本发明的化合物(w/w)或其组合。本发明化合物的最优百分比(w/w)可变化，且 在本领域技术人员的认识范围内。或者，本发明的化合物及常规治疗剂或其他辅剂可分开施用(连续 或平行)。单独给药在给药方案上具有更大灵活性。
如上所述，本发明的化合物的剂型可包括本领域技术人员已知且适于剂型的药学上可接受的载 体及辅剂。这些载体及辅剂包括，例如，离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、血清蛋白、缓 冲物质、水、盐或电解质及基于纤维素的物质。优选剂型包括片剂、胶囊、囊片、液体、溶液、悬浮剂、乳液、锭剂、糖浆、可复水粉剂、颗粒剂、栓剂及经皮贴片。制备这样的剂型的方法是已知 的(参见，例如，H.C.Ansel及N.G.Popovish，PharmaceuticalDosage Forms and Drug Delivery Systems， 第5版，Lea and Febiger(1990))。本领域技术人员可从适用于特定患者的可用方法及技术中选择本 发明的化合物的剂量水平及要求。在一些实施方案中，对于70kg患者而言，剂量水平为约1至1000 mg/剂量。尽管每天一个剂量可以是充足的，但每天可给予高至5个剂量。对于口服剂量而言，可需 要高至2000mg/天。如本领域技术人员会理解的，视特定因素而定，可需要更低或更高的剂量。例如，具体剂量及治疗方案会取决于诸如患者的一般健康状况、患者病症的严重程度及病程或其处置以及治疗医师的判断等因素。
本发明的化合物可单独使用或与一或多种额外治疗剂组合使用。额外治疗剂的非限制性实例可 包括：
II型血管紧张素受体拮抗剂(血管紧张素受体阻断剂(ARB))，诸如坎地沙坦(candesartan)、依普罗 沙坦(eprosartan)、坎地沙坦、厄贝沙坦(irbesartan)、氯沙坦(losartan)、奥美沙坦(olmesartan)、替米沙 坦(telmisartan)、缬沙坦(valsartan)、阿齐沙坦(azilsartan)及medoxomil；
血管紧张素转化酶抑制剂(例如，贝那普利(benazepril)、卡托普利(captopril)、依那普利(enalapril)、 福辛普利(fosinopril)、赖诺普利(lisinopril)、莫西普利(moexipril)及培哚普利(perindopril))；
抗糖尿病药，诸如α-葡萄糖苷酶抑制剂(例如，米格列醇(miglitol)及阿卡波糖(acarbose))、淀粉 素(amylin)类似物(例如，普兰林肽(pramlintide))、二肽基肽酶4抑制剂(例如，阿格列汀(alogliptin)、 西他列汀(sitagliptin)、沙格列汀(saxagliptin)及利格列汀(linagliptin))、肠促胰岛素(incretin)模拟物(例 如，利拉鲁肽(liraglutide)、艾塞那肽(exenatide)、利拉鲁肽、艾塞那肽、达拉鲁肽(dulaglutide)、阿必鲁肽(albiglutide)及利西那肽(lixisenatide))、胰岛素、美格替耐(meglitinide)(例如，瑞格列奈(repaglinide) 及那格列奈(nateglinide))、双胍(例如，二甲双胍)；SGLT-2抑制剂(例如，卡格列净(canagliflozin)、 艾帕列净(empagliflozin)及达格列净(dapagliflozin))、磺酰脲(例如，氯磺丙脲、格列美脲(glimepiride)、 格列本脲(glyburide)、格列吡嗪(glipizide)、格列本脲、妥拉磺胺(tolazamide)及甲苯磺丁脲(tolbutamide)) 及噻唑啶二酮(例如，罗格列酮(rosiglitazone)及吡格列酮(pioglitazone))；
支气管扩张剂，包括短效及长效β激动剂(例如，沙丁胺醇(albuterol)、左旋沙丁胺醇(levalbuterol)、 沙美特罗(salmeterol)、福莫特罗(formoterol)及阿福特罗(arformoterol))及短效及长效抗胆碱能药(异丙 托溴铵(ipratropium)、噻托溴铵(tiotropium)、芜地溴胺(umeclidinium)、格隆溴铵(glycopyrrolatei))及阿 地溴胺(aclidinium))。
类固醇，诸如氟替卡松(fluticasone)及布地奈德(budesonide)；
当作为药物组合的组合治疗进行使用时，本发明的化合物及一或多种额外药剂可呈相同剂型或 不同剂型进行施用。作为方案的一部分，本发明的化合物及一或多种额外药剂可同时或分开进行施 用。

Claims (6)

1.式(I’)的化合物
其中
A为CH或N；
U为CH或N；
V为CR8或N；
W为CR9或N；
X为CH或N；
Y为CH或N；
R1选自H和卤素；
R2选自H、C1-6烷基、-CN、-CF3、-OCF3、C3-6环烷基、OC1-6烷基和OC3-6环烷基；
R3选自：
H，
任选地被一至三个独立地选自卤素、羟基或甲氧基的基团取代的C1-6烷基，以及
C3-6环烷基；
R4选自H、任选被羟基取代的C1-6烷基、C3-6环烷基；
R5为H或C1-6烷基；
R6选自：
H、
C1-6烷基、
-CN、
-CF3、
-OCF3、
C3-6环烷基、和
任选地被一至三个卤素取代的OC1-6烷基；
R8选自
H、
任选地被C3-6环烷基或一至三个卤素取代的C1-6烷基、
卤素、
-CN、
-CF3、
-NH2、
苯基、
C3-6环烷基、
OC3-6环烷基、和
任选地被一至三个卤素取代的OC1-6烷基或任选地被一至三个卤素取代的C3-6环烷基；
R9选自
H、
任选地被一至三个卤素取代的C1-6烷基、
卤素、
-CN、
-CF3、
OH、
C3-6环烷基、
任选地被C3-6环烷基或一至三个卤素取代的OC1-6烷基、以及
OC3-6环烷基；
或其药学上可接受的盐。
2.根据权利要求1的化合物，其选自：
/>
/>
/>
/>
/>
/>
/>
/>
或其药学上可接受的盐。
3.药物组合物，其包含根据权利要求1或2的化合物或其药学上可接受的盐、以及药学上可接受的赋形剂或载体。
4.根据权利要求1至3中任一项的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗能够通过TRPC6抑制而缓解的疾病或病症的药物中的用途。
5.根据权利要求4的用途，其中所述疾病或病症选自败血症、感染性休克、心脏肥大、缺血、缺血再灌注损伤、高血压、肺动脉高压、再狭窄、慢性阻塞性肺病、囊性纤维化、阿尔茨海默病、帕金森病、亨廷顿病、肌萎缩侧索硬化(ALS)、创伤诱导脑病症、哮喘、类风湿性关节炎、骨关节炎、炎性肠病、多发性硬化症、肌营养不良、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、轻微改变型肾病、局灶性节段性肾小球硬化(FSGS)、肾病综合征、糖尿病性肾病变或糖尿病性肾病(DKD)、慢性肾病(CKD)、肾功能不全、终末期肾病、癌症、糖尿病、肺纤维化、肺气肿和急性呼吸道疾病综合征(ARDS)。
6.根据权利要求4的用途，其中所述疾病或病症选自严重败血症、特发性肺动脉高压、迪谢内肌营养不良、先兆子痫、妊娠诱导的高血压和特发性肺纤维化(IPF)。
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