CN111759993A - 一种治疗肝癌的中药组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种治疗肝癌的中药组合物及其制备方法,所述中药组合物的组分及其重量份数为:枣皮10~15份、水蛭6~10份、麦冬10~15份、人工牛黄3~5份、莪术8~12份、野荞麦根13~15、土茵陈18~22份、天葵子8~10份、虎杖8~12份、甘草2~4份、山慈菇8~12份、半枝莲10~14份、重楼10~14份、犁头草10~15份、野菊花10~15份。本发明提供的治疗肝癌的中药组合物及其制备方法,通过特定的配方和药材处理方法,既具有显著的抗肝癌效果,同时又能降低毒性,提高药效。
Description
技术领域
本发明属于中药技术领域,更具体地,涉及一种治疗肝癌的中药组合物及其制备方法。
背景技术
原发性肝癌(简称肝癌)是我国最常见的恶性肿瘤之一,尤其是大肝癌,治疗棘手生存期短,生存质量差。全世界每年新发肝癌约26万例,占全部恶性肿瘤的4.0%。其中42.5%分布在中国。20世纪以来,我国肝癌已上升为恶性肿瘤的第二位,在城市仅次于肺癌,在农村仅次于胃癌。原发性肝癌起病隐匿,进展迅速,生存质量差生存期短。
就肝癌的治疗面言,手术是早期肝癌治疗的首选方法,放射疗法、化学疗法则是中晚期肝癌及转移性肝癌常用的治疗方法。然而大肝癌根治性切除后5年复发率高达80%以上。小肝癌切除后5年复发率也高达40% ~60%;任何一种放疗、化疗方案又都件有明显的毒副反应,使许多患者无法坚持而放弃治”。而以中医药为主的综合治疗,对控制肝癌患者病情发展、改善生活质量、延长生存期有着重要意义。
由于中药的药理较复杂,药物抗癌机制受各方面因素的影响,中药材的品种、产地、预处理、炮制等均会对中药药效产生较大程度的影响,从而影响整个肝癌治疗效果。例如,山慈菇有抗癌作用,其有效成分为秋水仙碱(秋水仙素),秋水仙碱具有细胞毒作用,它能将细胞内的微管中主要的成分微管蛋白黏合,阻止微管的聚合作用,从而抑制纺锤体的形成,阻止随着细胞支架改变的有丝分裂,而且还会停止嗜中性球的活动能力,因为纺锤体无法形成,染色体不可能到达赤道板上,可有效杀死癌细胞;但是秋水仙碱有毒,其氧化产物二秋水仙碱进入人体后,侵犯消化道、泌尿系,可产生严重的刺激症状,造成严重的电解质紊乱,抑制神经系统,使中枢神经麻痹,触觉不敏感,降低体温。再例如,中药常用的提取方法有水提法、有机溶剂提取法、微波提取法、超声提取法、酶解法、大孔树脂吸附法、超滤法以及超临界流体萃取法等,不同提取方法的选择,直接影响药材中有效成分的提取率。因此,采取相关有效加工措施来降低中药的毒性,增加有效成分的提取率,对于中药的临床应用有着重大的意义。
然而现有的很多中药药材,其加工处理比较粗糙,造成药材有效成分损失或变质,且毒性未得到消除,严重影响了药材药效,不仅达不到预期的治疗效果,还产生系列毒副作用。
综上所述,如何设计一种治疗肝癌的中药组合物及其制备方法,既具有显著的抗肝癌效果,同时去毒存效,是目前急需解决的问题。
发明内容
本发明的目的在于为了解决现有的手术、放疗和化疗方法治疗肝癌的方法易复发、副作用大,且现有的很多治疗肝癌的中药药材加工处理比较粗糙,造成药材有效成分损失或变质,且毒性未得到消除,严重影响了药材药效和抗癌效果的技术问题,而提供一种治疗肝癌的中药组合物及其制备方法,既具有显著的抗肝癌效果,同时又能较好地保留中药药材的有效成分,降低毒性,提高药效。
本发明通过以下技术方案来实现上述目的,一种治疗肝癌的中药组合物,所述中药组合物的组分及其重量份数为:枣皮10~15份、水蛭6~10份、麦冬10~15份、人工牛黄3~5份、莪术8~12份、野荞麦根13~15、土茵陈18~22份、天葵子8~10份、虎杖8~12份、甘草2~4份、山慈菇8~12份、半枝莲10~14份、重楼10~14份、犁头草10~15份、野菊花10~15份,所述山慈菇的预处理方法为将山慈菇导入改性蒙脱石内层结构中制成改性蒙脱石复合山慈菇,所述半枝莲和重楼的提取方法为不同波长光线照射辅助酶解法。
其中,山慈菇主要功能为清热解毒,消痈散结,其有效成分是秋水仙碱,秋水仙碱具有细胞毒作用,是特异性的细胞有丝分裂(中期)阻滞剂,可以杀死癌细胞和肿瘤细胞。
半枝莲主要功能为清热解毒,散瘀止血,利尿消肿。其有效成分为黄酮类、生物碱和多糖,均具有良好的抗癌作用。
重楼为百合科植物云南重楼或七叶一枝花的干燥根茎,用于治疗疮痈肿、咽喉肿痛、毒蛇咬伤、跌扑伤痛和惊风抽搐,其主要药效成分为甾体皂甙,具有细胞毒作用,能够诱导癌细胞凋亡、调节人体免疫功能、影响癌基因表达、抗肿瘤血管生成。
进一步地,所述山慈菇的预处理方法为:
(1)山慈菇初提取物制备:
A、取山慈菇原料,洗净干燥后,加入粉碎机中以400~500r/min的速度进行粉碎,干燥后过40~60目筛,得山慈菇粉末;
B、将山慈菇粉末加入到5~8倍的70~90%乙醇溶液中,在40~50℃和70~80W功率下超声提取0.5~1h,过滤后取滤液,滤渣依次提取3~5次后,合并滤液蒸发溶剂,即得山慈菇初提取物。
(2)改性蒙脱石的制备:
A、取乳酸亚铁颗粒,在30~40℃和50~80W功率的密闭式超微粉碎机中进行粉碎,制得粒径为0.1~0.3μm的乳酸亚铁超微粉;
B、取蒙脱石和蒸馏水混合后 ,加入到高剪切分散机中,在60~80℃和8000~10000r/min转速的条件下分散0.5~1h,然后升温至90~110℃在10000~12000r/min的条件下继续分散20~30min,然后降温至50~60℃,将上一步骤制得的乳酸亚铁超微粉加入高剪切分散机中,在12000~15000r/min和充氮条件下加速剪切30~40min后停止,30~40℃封闭干燥后,在常温70~80W功率的密闭式超微粉碎机中进行粉碎,制得粒径为0.5~1μm的改性蒙脱石超微粉。
(3)改性蒙脱石复合山慈菇混悬液制备:
A、按照(0.1~0.15)/1的药料比,将山慈菇初提取物和改性蒙脱石超微粉混合后搅拌均匀,加入到PH为8~10的氢氧化钾水溶液中;
B、然后在60~70℃和300~400r/min的搅拌机中搅拌2~3h,相同温度下超声振荡15~30min后,投入高压均质机中,在50~60℃、40~50MPa和50~60W功率下均质1~2h,即得改性蒙脱石复合山慈菇混悬液。
进一步地,所述蒙脱石和乳酸亚铁超微粉的质量比为1:(0.2~0.4)。
由于山慈菇的有效成分秋水仙碱易氧化成有毒物质二秋水仙碱,因此本发明通过导入乳酸亚铁进行蒙脱石改性,然后再将山慈菇导入改性蒙脱石,使得载药后的改性蒙脱石因为层间的亚铁粒子从而具备抗氧化性,因此最后制得的改性蒙脱石复合山慈菇混悬液中的秋水仙碱不易氧化产生有毒物质,降低了山慈菇的毒副作用。
进一步地,所述半枝莲和重楼的提取方法为:
(1)分别取半枝莲和重楼,洗净干燥后,在粉碎机中以300~400r/min的速度进行粉碎,干燥后过30~40目筛,分别得半枝莲粉末和重楼粉末;
(2)将半枝莲粉末与70~80%乙醇溶液混合,然后加入复合酶,先在常温下暗期处理并酶解0.5~1h,然后升温至60~70℃在蓝光(λ=430~440nm,功率为2~4mW/cm3)照射下酶解8~10min,然后再降温至40~50℃在绿光(λ=500~520nm,功率为1~2mW/cm3)照射下酶解10~15min;
(3)将重楼粉末加入到步骤(2)获得的溶液中,然后在常温下暗期处理并酶解30~40min,然后升温至70~80℃在红光(λ=650~700nm,功率为4~5mW/cm3)照射下酶解20~30min后,趁热过滤,取滤液蒸发溶剂后即得半枝莲和重楼提取物。
进一步地,所述复合酶占半枝莲粉末和重楼粉末总质量的1~2%,所述复合酶包括质量比为5:1:8的纤维素酶、果胶酶和半纤维素酶。
一种治疗肝癌的中药组合物的制备方法,包括以下步骤:
(1)麦冬、莪术、野荞麦根、天葵子、虎杖和甘草的原料处理:将麦冬取芯后,与莪术、野荞麦根、天葵子、虎杖和甘草一起洗净后去杂,50~60℃烘干后放入粉碎机中,在500~600r/min转速下进行粉碎 ,干燥后过50~60目筛,得麦冬、莪术、野荞麦根、天葵子、虎杖和甘草混合粉末;
(2)枣皮、水蛭、人工牛黄、土茵陈、犁头草和野菊花的原料处理:取枣皮、水蛭、人工牛黄、土茵陈、犁头草和野菊花洗净后去杂,沥干后研磨成浆状物备用;
(3)取步骤(1)处理得到的麦冬、莪术、野荞麦根、天葵子、虎杖和甘草混合粉末、以及步骤(2)处理后的枣皮、水蛭、人工牛黄、土茵陈、犁头草和野菊花的浆状物放入砂锅中,加入冷水浸泡并搅拌30~45min;
(4)将装有中药的砂锅加盖后移至明火中煎煮,先大火煎煮至80~90℃后,加入半枝莲和重楼的提取物、以及预处理后的山慈菇,搅拌均匀,然后调小火量保持慢火微沸状态煎煮15~17min后关火,即得治疗肝癌的中药组合物汤剂。
进一步地,所述步骤(3)中加入的冷水量为800~1000mL。
本发明的有益效果在于:
(1)本发明通过特定配方制备的中药组合物,尤其是抗癌药材山慈菇、半枝莲和重楼的配合,对于肝癌细胞有较强的抑制效果,抗癌效果明显;
(2)本发明对山慈菇进行预处理,将山慈菇导入改性蒙脱石内层结构中制成改性蒙脱石复合山慈菇,具有较强的抗氧化性,从而降低毒副作用;
(3)本发明采用不同波长光线照射辅助酶解法对半枝莲和重楼的有效成分进行深度提取,提高了总黄酮、生物碱、多糖和总皂苷的提取率,保留了药效;
(4)枣皮补肾且加强肝的代谢功能,水蛭疏肝通窍,麦冬促进肝的造血功能,人工牛黄解毒可延缓癌细胞生长,莪术散结可缓解肝硬化,土茵陈、天葵子和虎杖能促进肝的蠕动,山慈菇、半枝莲和重楼能够杀死癌细胞,这些药材的组合对于肝癌能够起到全方面治疗的效果。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
实施例1~3
实施例1~3提供了一种治疗肝癌的中药组合物,各药材组成及质量如表1所示:
表 1
下面对实施例1~3这三组实施例做具体描述。
实施例1
本实施例提供了一种治疗肝癌的中药组合物,由表1中各质量份的药材组成,山慈菇的预处理方法为:
(1)山慈菇初提取物制备:
A、取山慈菇原料,洗净干燥后,加入粉碎机中以400r/min的速度进行粉碎,干燥后过40目筛,得山慈菇粉末;
B、将山慈菇粉末加入到5倍的70%乙醇溶液中,在40℃和70W功率下超声提取0.5h,过滤后取滤液,滤渣依次提取3次后,合并滤液蒸发溶剂,即得山慈菇初提取物。
(2)改性蒙脱石的制备:
A、取乳酸亚铁颗粒,在30℃和50W功率的密闭式超微粉碎机中进行粉碎,制得粒径为0.1μm的乳酸亚铁超微粉;
B、取蒙脱石和蒸馏水混合后 ,加入到高剪切分散机中,在60℃和8000r/min转速的条件下分散0.5h,然后升温至90℃在10000r/min的条件下继续分散20min,然后降温至50℃,将上一步骤制得的乳酸亚铁超微粉加入高剪切分散机中,在12000r/min和充氮条件下加速剪切30min后停止,30℃封闭干燥后,在常温70W功率的密闭式超微粉碎机中进行粉碎,制得粒径为0.5μm的改性蒙脱石超微粉。
其中,所述蒙脱石和乳酸亚铁超微粉的质量比为1:0.2。
(3)改性蒙脱石复合山慈菇混悬液制备:
A、按照0.1/1的药料比,将山慈菇初提取物和改性蒙脱石超微粉混合后搅拌均匀,加入到PH为8的氢氧化钾水溶液中;
B、然后在60℃和300r/min的搅拌机中搅拌2h,相同温度下超声振荡15min后,投入高压均质机中,在50℃、40MPa和50W功率下均质1h,即得改性蒙脱石复合山慈菇混悬液。
所述半枝莲和重楼的提取方法为:
(1)分别取半枝莲和重楼,洗净干燥后,在粉碎机中以300r/min的速度进行粉碎,干燥后过30目筛,分别得半枝莲粉末和重楼粉末;
(2)将半枝莲粉末与70%乙醇溶液混合,然后加入复合酶,先在常温下暗期处理并酶解0.5h,然后升温至60℃在蓝光(λ=430nm,功率为2mW/cm3)照射下酶解8min,然后再降温至40℃在绿光(λ=500nm,功率为1mW/cm3)照射下酶解10min;
(3)将重楼粉末加入到步骤(2)获得的溶液中,然后在常温下暗期处理并酶解30min,然后升温至70℃在红光(λ=650nm,功率为4mW/cm3)照射下酶解20min后,趁热过滤,取滤液蒸发溶剂后即得半枝莲和重楼提取物。
其中,所述复合酶占半枝莲粉末和重楼粉末总质量的1%,所述复合酶包括质量比为5:1:8的纤维素酶、果胶酶和半纤维素酶。
本实施例还提供了一种治疗肝癌的中药组合物的制备方法,包括以下步骤:
(1)麦冬、莪术、野荞麦根、天葵子、虎杖和甘草的原料处理:将麦冬取芯后,与莪术、野荞麦根、天葵子、虎杖和甘草一起洗净后去杂,50℃烘干后放入粉碎机中,在500r/min转速下进行粉碎 ,干燥后过50目筛,得麦冬、莪术、野荞麦根、天葵子、虎杖和甘草混合粉末;
(2)枣皮、水蛭、人工牛黄、土茵陈、犁头草和野菊花的原料处理:取枣皮、水蛭、人工牛黄、土茵陈、犁头草和野菊花洗净后去杂,沥干后研磨成浆状物备用;
(3)取步骤(1)处理得到的麦冬、莪术、野荞麦根、天葵子、虎杖和甘草混合粉末、以及步骤(2)处理后的枣皮、水蛭、人工牛黄、土茵陈、犁头草和野菊花的浆状物放入砂锅中,加入800mL冷水浸泡并搅拌30min;
(4)将装有中药的砂锅加盖后移至明火中煎煮,先大火煎煮至80℃后,加入半枝莲和重楼的提取物、以及预处理后的山慈菇,搅拌均匀,然后调小火量保持慢火微沸状态煎煮15min后关火,即得治疗肝癌的中药组合物汤剂。
实施例2
本实施例提供了一种治疗肝癌的中药组合物,由表1中各质量份的药材组成,所述山慈菇的预处理方法为:
(1)山慈菇初提取物制备:
A、取山慈菇原料,洗净干燥后,加入粉碎机中以450r/min的速度进行粉碎,干燥后过50目筛,得山慈菇粉末;
B、将山慈菇粉末加入到7倍的80%乙醇溶液中,在45℃和75W功率下超声提取45min,过滤后取滤液,滤渣依次提取4次后,合并滤液蒸发溶剂,即得山慈菇初提取物。
(2)改性蒙脱石的制备:
A、取乳酸亚铁颗粒,在35℃和65W功率的密闭式超微粉碎机中进行粉碎,制得粒径为0.2μm的乳酸亚铁超微粉;
B、取蒙脱石和蒸馏水混合后 ,加入到高剪切分散机中,在70℃和9000r/min转速的条件下分散45min,然后升温至100℃在11000r/min的条件下继续分散25min,然后降温至55℃,将上一步骤制得的乳酸亚铁超微粉加入高剪切分散机中,在13500r/min和充氮条件下加速剪切35min后停止,35℃封闭干燥后,在常温75W功率的密闭式超微粉碎机中进行粉碎,制得粒径为0.7μm的改性蒙脱石超微粉。
其中,所述蒙脱石和乳酸亚铁超微粉的质量比为1:0.3。
(3)改性蒙脱石复合山慈菇混悬液制备:
A、按照0.12/1的药料比,将山慈菇初提取物和改性蒙脱石超微粉混合后搅拌均匀,加入到PH为9的氢氧化钾水溶液中;
B、然后在65℃和350r/min的搅拌机中搅拌2.5h,相同温度下超声振荡22min后,投入高压均质机中,在55℃、45MPa和55W功率下均质1.5h,即得改性蒙脱石复合山慈菇混悬液。
所述半枝莲和重楼的提取方法为:
(1)分别取半枝莲和重楼,洗净干燥后,在粉碎机中以350r/min的速度进行粉碎,干燥后过35目筛,分别得半枝莲粉末和重楼粉末;
(2)将半枝莲粉末与75%乙醇溶液混合,然后加入复合酶,先在常温下暗期处理并酶解0.5~1h,然后升温至65℃在蓝光(λ=435nm,功率为3mW/cm3)照射下酶解9min,然后再降温至45℃在绿光(λ=510nm,功率为1.5mW/cm3)照射下酶解12min;
(3)将重楼粉末加入到步骤(2)获得的溶液中,然后在常温下暗期处理并酶解35min,然后升温至75℃在红光(λ=680nm,功率为4.5mW/cm3)照射下酶解25min后,趁热过滤,取滤液蒸发溶剂后即得半枝莲和重楼提取物。
其中,所述复合酶占半枝莲粉末和重楼粉末总质量的1.5%,所述复合酶包括质量比为5:1:8的纤维素酶、果胶酶和半纤维素酶。
本实施例还提供了一种治疗肝癌的中药组合物的制备方法,包括以下步骤:
(1)麦冬、莪术、野荞麦根、天葵子、虎杖和甘草的原料处理:将麦冬取芯后,与莪术、野荞麦根、天葵子、虎杖和甘草一起洗净后去杂,55℃烘干后放入粉碎机中,在550r/min转速下进行粉碎 ,干燥后过55目筛,得麦冬、莪术、野荞麦根、天葵子、虎杖和甘草混合粉末;
(2)枣皮、水蛭、人工牛黄、土茵陈、犁头草和野菊花的原料处理:取枣皮、水蛭、人工牛黄、土茵陈、犁头草和野菊花洗净后去杂,沥干后研磨成浆状物备用;
(3)取步骤(1)处理得到的麦冬、莪术、野荞麦根、天葵子、虎杖和甘草混合粉末、以及步骤(2)处理后的枣皮、水蛭、人工牛黄、土茵陈、犁头草和野菊花的浆状物放入砂锅中,加入900mL冷水浸泡并搅拌38min;
(4)将装有中药的砂锅加盖后移至明火中煎煮,先大火煎煮至85℃后,加入半枝莲和重楼的提取物、以及预处理后的山慈菇,搅拌均匀,然后调小火量保持慢火微沸状态煎煮16min后关火,即得治疗肝癌的中药组合物汤剂。
实施例3
本实施例提供了一种治疗肝癌的中药组合物,由表1中各质量份的药材组成,所述山慈菇的预处理方法为:
(1)山慈菇初提取物制备:
A、取山慈菇原料,洗净干燥后,加入粉碎机中以500r/min的速度进行粉碎,干燥后过60目筛,得山慈菇粉末;
B、将山慈菇粉末加入到8倍的90%乙醇溶液中,在50℃和80W功率下超声提取1h,过滤后取滤液,滤渣依次提取5次后,合并滤液蒸发溶剂,即得山慈菇初提取物。
(2)改性蒙脱石的制备:
A、取乳酸亚铁颗粒,在40℃和80W功率的密闭式超微粉碎机中进行粉碎,制得粒径为0.3μm的乳酸亚铁超微粉;
B、取蒙脱石和蒸馏水混合后 ,加入到高剪切分散机中,在80℃和10000r/min转速的条件下分散1h,然后升温至110℃在12000r/min的条件下继续分散30min,然后降温至60℃,将上一步骤制得的乳酸亚铁超微粉加入高剪切分散机中,在15000r/min和充氮条件下加速剪切40min后停止,40℃封闭干燥后,在常温80W功率的密闭式超微粉碎机中进行粉碎,制得粒径为1μm的改性蒙脱石超微粉。
其中,所述蒙脱石和乳酸亚铁超微粉的质量比为1:0.4。
(3)改性蒙脱石复合山慈菇混悬液制备:
A、按照0.15/1的药料比,将山慈菇初提取物和改性蒙脱石超微粉混合后搅拌均匀,加入到PH为10的氢氧化钾水溶液中;
B、然后在70℃和400r/min的搅拌机中搅拌3h,相同温度下超声振荡30min后,投入高压均质机中,在60℃、50MPa和60W功率下均质2h,即得改性蒙脱石复合山慈菇混悬液。
所述半枝莲和重楼的提取方法为:
(1)分别取半枝莲和重楼,洗净干燥后,在粉碎机中以400r/min的速度进行粉碎,干燥后过40目筛,分别得半枝莲粉末和重楼粉末;
(2)将半枝莲粉末与80%乙醇溶液混合,然后加入复合酶,先在常温下暗期处理并酶解1h,然后升温至70℃在蓝光(λ=440nm,功率为4mW/cm3)照射下酶解10min,然后再降温至50℃在绿光(λ=520nm,功率为2mW/cm3)照射下酶解15min;
(3)将重楼粉末加入到步骤(2)获得的溶液中,然后在常温下暗期处理并酶解40min,然后升温至80℃在红光(λ=700nm,功率为5mW/cm3)照射下酶解30min后,趁热过滤,取滤液蒸发溶剂后即得半枝莲和重楼提取物。
其中,所述复合酶占半枝莲粉末和重楼粉末总质量的2%,所述复合酶包括质量比为5:1:8的纤维素酶、果胶酶和半纤维素酶。
本实施例还提供了一种治疗肝癌的中药组合物的制备方法,包括以下步骤:
(1)麦冬、莪术、野荞麦根、天葵子、虎杖和甘草的原料处理:将麦冬取芯后,与莪术、野荞麦根、天葵子、虎杖和甘草一起洗净后去杂,60℃烘干后放入粉碎机中,在600r/min转速下进行粉碎 ,干燥后过60目筛,得麦冬、莪术、野荞麦根、天葵子、虎杖和甘草混合粉末;
(2)枣皮、水蛭、人工牛黄、土茵陈、犁头草和野菊花的原料处理:取枣皮、水蛭、人工牛黄、土茵陈、犁头草和野菊花洗净后去杂,沥干后研磨成浆状物备用;
(3)取步骤(1)处理得到的麦冬、莪术、野荞麦根、天葵子、虎杖和甘草混合粉末、以及步骤(2)处理后的枣皮、水蛭、人工牛黄、土茵陈、犁头草和野菊花的浆状物放入砂锅中,加入1000mL冷水浸泡并搅拌45min;
(4)将装有中药的砂锅加盖后移至明火中煎煮,先大火煎煮至90℃后,加入半枝莲和重楼的提取物、以及预处理后的山慈菇,搅拌均匀,然后调小火量保持慢火微沸状态煎煮17min后关火,即得治疗肝癌的中药组合物汤剂。
对比例1~5
为了对比本发明的中药组合物中的药材配方对抗肝癌效果的影响,提供5组对比例,各原料组成如表2所示:
表 2
其中,对比例1、2与实施例3的不同之处在于,将枣皮、水蛭、麦冬、人工牛黄、莪术、野荞麦根、土茵陈、天葵子、虎杖、甘草、犁头草和野菊花的质量调整在本发明的配方范围之外;对比例3~5与实施例2的不同之处在于将山慈菇、半枝莲和重楼的质量调整在本发明的配方范围之外。
对比例6
本对比例与实施例1的区别在于,中药组合物制备方法改为:
(1)将麦冬取芯后,与莪术、野荞麦根、天葵子、虎杖、甘草、枣皮、水蛭、人工牛黄、土茵陈、犁头草、野菊花、山慈菇、半枝莲和重楼一起洗净后去杂,然后放入砂锅中,加入800mL冷水浸泡并搅拌30min;
(2)将装有中药的砂锅加盖后移至明火中煎煮,先大火煎煮至80℃,然后调小火量保持慢火微沸状态煎煮15min后关火,即得治疗肝癌的中药组合物汤剂。
对比例7
本对比例与实施例1的区别在于,将步骤(1)~(3)改为:将麦冬取芯后,与莪术、野荞麦根、天葵子、虎杖、甘草、枣皮、水蛭、人工牛黄、土茵陈、犁头草和野菊花一起洗净后去杂,50℃烘干后放入粉碎机中,在500r/min转速下进行粉碎 ,干燥后过50目筛,得中药混合粉末,然后将中药混合粉末放入砂锅中,加入800mL冷水浸泡并搅拌30min。
对比例8
本对比例与实施例1的区别在于,将步骤(4)改为:将半枝莲和重楼的提取物、以及预处理后的山慈菇倒入砂锅中搅拌均匀,然后砂锅加盖后移至明火中煎煮,先大火煎煮至80℃后,然后调小火量保持慢火微沸状态煎煮15min后关火,即得治疗肝癌的中药组合物汤剂。
实施例1~3和对比例1~8的抗肝癌效果实验
中药组合物汤剂的浓缩处理:将实施例1~3和对比例1~8制得的中药组合物汤剂在常温下蒸发浓缩至相对密度为1.10~1.15。
(1)本发明中药组合物对肝癌细胞的体外生长抑制率试验
取对数生长期的小鼠肝癌细胞H22(活细胞数≥95%),用1%生理盐水调整细胞浓度为2×106/mL,然后分装于96孔板(0.2mL/孔)内,每个孔内加入0.1 mL小鼠肝癌细胞H22液,设置生理盐水对照组和给药组,给药组分别加入1g的实施例1~3和对比例1~8制得的中药组合物浓缩汤剂,每个实验组设5个平行孔。实验组设置好后,置35℃培养48h,实验终止前2h向各孔加入10μL的MTT(3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐)溶液,再培养4h,测试前加入二甲基亚砜(DMSO),待结晶溶解后置于570nm波长的酶联免疫检测仪内,测每个孔板的样品的OD(吸光度)值,再计算得生长抑制率,每个实验组的生长抑制率取5个平行样品的平均值,其结果如下表3所示。
表 3
(2)本发明中药组合物对H22肿瘤的体内作用试验
实验动物选择:取免疫功能缺陷型BALB/c裸鼠共计60只,鼠龄为3~5周,体重为22~28g,雌雄各半。为了试验本发明中药组合物在体内对H22肿瘤的作用,在BALB/c裸鼠中建立恶性腹水模型。
取对数生长期的小鼠肝癌细胞H22(活细胞数≥95%),用1%生理盐水调整细胞浓度为2×106/mL,用注射器抽取0.2mL肝癌细胞接种于裸鼠左侧腹腔内,将60只小鼠随机分成生理盐水对照组和给药组,将给药组中的小鼠分别喂入实施例1~3和对比例1~8制得的中药组合物浓缩汤剂,一日分两次,连续服用30天,观察每组小鼠的状态,每5天记录各只小鼠的体重、腹围和生存期。其结果如下表4~6所示。
表 4 小鼠的生存期记录
表 5 小鼠的体重记录
表 6 小鼠的腹围记录
由表3结果可知,实施例1~3制得的中药组合物对肝癌细胞的体外生长抑制率均高于生理盐水对照组和对比例1~8的效果;由表4~6中对接种肝癌细胞的小鼠的生长情况记录结果可知,与生理盐水对照组和对比例1~8相比,实施例1~3制得的中药组合物可以明显增加小鼠的生存率和生存时间,还可以推迟小鼠的腹水出现时间,体重也比其他实验组要小。说明本发明制得的中药组合物,对肝癌有较好的治疗效果。
为了对比山慈菇的预处理方法对药材的毒性和抗氧化性能的影响,提供16组对比例,具体如下:
对比例9
本对比例与实施例2的区别在于,山慈菇的预处理方法仅包括山慈菇初提取物制备:
A、取山慈菇原料,洗净干燥后,加入粉碎机中以450r/min的速度进行粉碎,干燥后过50目筛,得山慈菇粉末;
B、将山慈菇粉末加入到7倍的80%乙醇溶液中,在45℃和75W功率下超声提取45min,过滤后取滤液,滤渣依次提取4次后,合并滤液蒸发溶剂,即得山慈菇初提取物。
对比例10
本对比例与实施例2的区别在于,不对蒙脱石进行改性,此时步骤(2)改为:取蒙脱石和蒸馏水混合后 ,加入到高剪切分散机中,在70℃和9000r/min转速的条件下分散45min,然后升温至100℃在11000r/min的条件下继续分散25min,然后降温至55℃,在13500r/min和充氮条件下加速剪切35min后停止,35℃封闭干燥后,在常温75W功率的密闭式超微粉碎机中进行粉碎,制得粒径为0.7μm的蒙脱石超微粉。步骤(3)最终得蒙脱石复合山慈菇混悬液。
对比例11
本对比例与实施例2的区别在于,删除步骤(2)中的步骤B,将步骤(2)改为:取乳酸亚铁颗粒,在30℃和50W功率的密闭式超微粉碎机中进行粉碎,制得粒径为0.1μm的乳酸亚铁超微粉。
将步骤(3)改为:A、按照0.12/1的药料比,将山慈菇初提取物和乳酸亚铁超微粉混合后搅拌均匀,加入到PH为9的氢氧化钾水溶液中;
B、然后在65℃和350r/min的搅拌机中搅拌2.5h,相同温度下超声振荡22min后,投入高压均质机中,在55℃、45MPa和55W功率下均质1.5h,即得乳酸亚铁复合山慈菇混悬液。
对比例12
本对比例与实施例2的区别在于,将步骤(1)中的步骤B删除。步骤(3)中的山慈菇初提取物改为山慈菇粉末。
对比例13
本对比例与实施例2的区别在于,将步骤(2)的步骤B改为:取蒙脱石、蒸馏水以及上一步骤制得的乳酸亚铁超微粉混合后 ,加入到高剪切分散机中,在70℃和9000r/min转速的条件下分散45min,然后升温至100℃在11000r/min的条件下继续分散25min,然后降温至55℃,在13500r/min和充氮条件下加速剪切35min后停止,35℃封闭干燥后,在常温75W功率的密闭式超微粉碎机中进行粉碎,制得粒径为0.7μm的改性蒙脱石超微粉。
对比例14
本对比例与实施例2的区别在于,将步骤(2)的步骤B改为:取蒙脱石和蒸馏水混合后 ,加入到高剪切分散机中,在70℃和9000r/min转速的条件下分散45min,然后降温至55℃,将上一步骤制得的乳酸亚铁超微粉加入高剪切分散机中,在13500r/min和充氮条件下加速剪切35min后停止,35℃封闭干燥后,在常温75W功率的密闭式超微粉碎机中进行粉碎,制得粒径为0.7μm的改性蒙脱石超微粉。
对比例15
本对比例与实施例2的区别在于,将步骤(2)的步骤B改为:取蒙脱石和蒸馏水混合后 ,加入到高剪切分散机中,在70℃和9000r/min转速的条件下分散45min,然后升温至100℃在11000r/min的条件下继续分散25min,然后将上一步骤制得的乳酸亚铁超微粉加入高剪切分散机中,在100℃、13500r/min和充氮条件下加速剪切35min后停止,35℃封闭干燥后,在常温75W功率的密闭式超微粉碎机中进行粉碎,制得粒径为0.7μm的改性蒙脱石超微粉。
对比例16
本对比例与实施例2的区别在于,将步骤(2)的步骤B改为:取蒙脱石和蒸馏水混合后 ,加入到高剪切分散机中,在70℃和9000r/min转速的条件下分散45min,然后升温至100℃在11000r/min的条件下继续分散25min,然后降温至55℃,将上一步骤制得的乳酸亚铁超微粉加入高剪切分散机中,在13500r/min条件下加速剪切35min后停止,35℃干燥后,在常温75W功率的超微粉碎机中进行粉碎,制得粒径为0.7μm的改性蒙脱石超微粉。
对比例17
本对比例与实施例2的区别在于,步骤(2)中制得的改性蒙脱石超微粉的粒径为0.3μm。
对比例18
本对比例与实施例2的区别在于,步骤(2)中制得的改性蒙脱石超微粉的粒径为1.2μm。
对比例19
本对比例与实施例2的区别在于,步骤(2)中蒙脱石和乳酸亚铁超微粉的质量比为1:0.1。
对比例20
本对比例与实施例2的区别在于,步骤(2)中蒙脱石和乳酸亚铁超微粉的质量比为1:0.5。
对比例21
本对比例与实施例2的区别在于,步骤(3)中的药料比为0.08/1。
对比例22
本对比例与实施例2的区别在于,步骤(3)中的药料比为0.17/1。
对比例23
本对比例与实施例2的区别在于,步骤(3)中步骤A的氢氧化钾水溶液的PH为7。
对比例24
本对比例与实施例2的区别在于,步骤(3)中步骤A的氢氧化钾水溶液的PH为11。
实施例1~3和对比例9~24急性毒性试验:
取体重23~25g的健康小鼠600只,共设20组,其中包括1个对照组和19个给药组,对照组服用生理盐水,每个给药组按50、500、5000、15000和20000mg(山慈菇)/kg体重给药,将实施例1~3和对比例9~24预处理过的山慈菇,在7天内每隔4~5h给小鼠服用,给药停止后连续观察7天,记录小鼠死亡时间和死亡数目,用Bliss法计算出半数致死量L50值。结果如下表7。
表 7
通过毒性物质划分等级(0级,无毒性,L50<15000 mg/kg;1级,实际无毒性,5000 mg/kg<L50<15000 mg/kg;2级,轻度毒性,500 mg/kg <L50<5000 mg/kg)可知,实施例1~3预处理过的山慈菇属于实际无毒性,对比例9~24中预处理过的山慈菇,有6组属于轻度毒性范围,另外10组虽然属于实际无毒性,但其L50值均低于实施例1~3。可知按照本发明设计的山慈菇的预处理方法,可以明显降低毒性。
实施例1~3和对比例9~24抗氧化性试验:
采用DPPH法对实施例1~3和对比例9~24中预处理过的山慈菇进行抗氧化性能试验,以DPPH(中文名称为1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)溶液中加入等量的无水乙醇溶液作为空白对照组,1.0mg/mL的Vc溶液做阳性对照组,取2mL浓度为0.1mg/mLDPPH溶液,依次加入实施例1~3和对比例9~24中预处理过的山慈菇2mL,形成19个样品组,计算各组的DPPH清除率,并设计平行组取平均值。
采用ABTS法,以ABTS(中文名称为2,2'-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)溶液中加入等量的无水乙醇溶液作为空白对照组,1.0mg/mL的Vc溶液做阳性对照组,测定实施例1~3和对比例9~24中预处理过的山慈菇的ABTS清除率,并设计平行组取平均值。结果如下表8所示
表 8
由表8中结果可知,实施例1~3预处理过的山慈菇的DPPH清除率和ABTS清除率,虽然稍低于Vc阳性对照组,但是明显强于对比例9~24的抗氧化效果。说明按照本发明中山慈菇预处理的方法,可以增强药材的抗氧化性。
为了对比半枝莲和重楼的提取方法对提取率的影响,提供27组对比例,具体如下:
对比例25
本对比例与实施例3的区别在于,取消光照,此时所述步骤(2)改为:将半枝莲粉末与80%乙醇溶液混合,然后加入复合酶,先在常温下酶解1h,然后升温至70℃酶解10min,然后再降温至50℃酶解15min;
步骤(3)改为:将重楼粉末加入到步骤(2)获得的溶液中,然后在常温下酶解40min,然后升温至80℃酶解30min后,趁热过滤,取滤液蒸发溶剂后即得半枝莲和重楼提取物。
对比例26
本对比例与与实施例3的区别在于,所述步骤(2)改为:将半枝莲粉末、重楼粉末与80%乙醇溶液混合,然后加入复合酶,先在常温下暗期处理并酶解1h,然后升温至70℃在蓝光(λ=440nm,功率为4mW/cm3)照射下酶解10min,然后再降温至50℃在绿光(λ=520nm,功率为2mW/cm3)照射下酶解15min;
此时步骤(3)改为:将步骤(2)获得的溶液,在常温下暗期处理并酶解40min,然后升温至80℃在红光(λ=700nm,功率为5mW/cm3)照射下酶解30min后,趁热过滤,取滤液蒸发溶剂后即得半枝莲和重楼提取物。
对比例27
本对比例与实施例3的区别在于,只用蓝光照射,此时步骤(2)改为:将半枝莲粉末与80%乙醇溶液混合,然后加入复合酶,先在常温下暗期处理并酶解1h,然后升温至70℃在蓝光(λ=440nm,功率为4mW/cm3)照射下酶解10min,然后再降温至50℃酶解15min。
此时步骤(3)改为:将重楼粉末加入到步骤(2)获得的溶液中,然后在常温下暗期处理并酶解40min,然后升温至80℃酶解30min后,趁热过滤,取滤液蒸发溶剂后即得半枝莲和重楼提取物。
对比例28
本对比例与实施例3的区别在于,只用绿光照射,此时步骤(2)改为:将半枝莲粉末与80%乙醇溶液混合,然后加入复合酶,先在常温下暗期处理并酶解1h,然后升温至70℃酶解10min,然后再降温至50℃在绿光(λ=520nm,功率为2mW/cm3)照射下酶解15min。
此时步骤(3)改为:将重楼粉末加入到步骤(2)获得的溶液中,然后在常温下暗期处理并酶解40min,然后升温至80℃酶解30min后,趁热过滤,取滤液蒸发溶剂后即得半枝莲和重楼提取物。
对比例29
本对比例与实施例3的区别在于,只用红光照射,此时步骤(2)改为:将半枝莲粉末与80%乙醇溶液混合,然后加入复合酶,先在常温下暗期处理并酶解1h,然后升温至70℃酶解10min,然后再降温至50℃酶解15min。
对比例30
本对比例与实施例3的区别在于,只用蓝光和绿光照射,此时步骤(3)改为:将重楼粉末加入到步骤(2)获得的溶液中,然后在常温下暗期处理并酶解40min,然后升温至80℃酶解30min后,趁热过滤,取滤液蒸发溶剂后即得半枝莲和重楼提取物。
对比例31
本对比例与实施例3的区别在于,只用蓝光和红光照射,此时步骤(2)改为:将半枝莲粉末与80%乙醇溶液混合,然后加入复合酶,先在常温下暗期处理并酶解1h,然后升温至70℃在蓝光(λ=440nm,功率为4mW/cm3)照射下酶解10min,然后再降温至50℃酶解15min。
对比例32
本对比例与实施例3的区别在于,只用绿光和红光照射,此时步骤(2)改为:将半枝莲粉末与80%乙醇溶液混合,然后加入复合酶,先在常温下暗期处理并酶解1h,然后升温至70℃酶解10min,然后再降温至50℃在绿光(λ=520nm,功率为2mW/cm3)照射下酶解15min。
对比例33
本对比例与实施例3的区别在于,光照顺序改为绿光-蓝光-红光,此时步骤(2)改为:将半枝莲粉末与80%乙醇溶液混合,然后加入复合酶,先在常温下暗期处理并酶解1h,然后升温至70℃在绿光(λ=520nm,功率为2mW/cm3)照射下酶解10min,然后再降温至50℃在蓝光(λ=440nm,功率为4mW/cm3)照射下酶解15min。
对比例34
本对比例与实施例3的区别在于,光照顺序改为绿光-红光-蓝光,此时步骤(2)改为:将半枝莲粉末与80%乙醇溶液混合,然后加入复合酶,先在常温下暗期处理并酶解1h,然后升温至70℃在绿光(λ=520nm,功率为2mW/cm3)照射下酶解10min,然后再降温至50℃在红光(λ=700nm,功率为5mW/cm3)照射下酶解15min。
此时步骤(3)改为:将重楼粉末加入到步骤(2)获得的溶液中,然后在常温下暗期处理并酶解40min,然后升温至80℃在蓝光(λ=440nm,功率为4mW/cm3)照射下酶解30min后,趁热过滤,取滤液蒸发溶剂后即得半枝莲和重楼提取物。
对比例35
本对比例与实施例3的区别在于,光照顺序改为红光-蓝光-绿光,此时步骤(2)改为:将半枝莲粉末与80%乙醇溶液混合,然后加入复合酶,先在常温下暗期处理并酶解1h,然后升温至70℃在红光(λ=700nm,功率为5mW/cm3)照射下酶解10min,然后再降温至50℃在蓝光(λ=440nm,功率为4mW/cm3)照射下酶解15min。
此时步骤(3)改为:将重楼粉末加入到步骤(2)获得的溶液中,然后在常温下暗期处理并酶解40min,然后升温至80℃在绿光(λ=520nm,功率为2mW/cm3)照射下酶解30min后,趁热过滤,取滤液蒸发溶剂后即得半枝莲和重楼提取物。
对比例36
本对比例与实施例3的区别在于,光照顺序改为红光-绿光-蓝光,此时步骤(2)改为:将半枝莲粉末与80%乙醇溶液混合,然后加入复合酶,先在常温下暗期处理并酶解1h,然后升温至70℃在红光(λ=700nm,功率为5mW/cm3)照射下酶解10min,然后再降温至50℃在绿光(λ=520nm,功率为2mW/cm3)照射下酶解15min。
此时步骤(3)改为:将重楼粉末加入到步骤(2)获得的溶液中,然后在常温下暗期处理并酶解40min,然后升温至80℃在蓝光(λ=440nm,功率为4mW/cm3)照射下酶解30min后,趁热过滤,取滤液蒸发溶剂后即得半枝莲和重楼提取物。
对比例37
本对比例与实施例3的区别在于,所述复合酶占半枝莲粉末和重楼粉末总质量的0.8%。
对比例38
本对比例与实施例3的区别在于,所述复合酶占半枝莲粉末和重楼粉末总质量的2.2%。
对比例39
本对比例与实施例3的区别在于,所述复合酶包括质量比为5:1的纤维素酶和果胶酶。
对比例40
本对比例与实施例3的区别在于,所述复合酶包括质量比为1:8的果胶酶和半纤维素酶。
对比例41
本对比例与实施例3的区别在于,所述复合酶包括质量比为5:8的纤维素酶和半纤维素酶。
对比例42
本对比例与实施例3的区别在于,所述复合酶包括质量比为4:1:9的纤维素酶、果胶酶和半纤维素酶。
对比例43
本对比例与实施例3的区别在于,所述复合酶包括质量比为6:1:7的纤维素酶、果胶酶和半纤维素酶。
对比例44
本对比例与实施例3的区别在于,步骤(2)改为:将半枝莲粉末与80%乙醇溶液混合,然后加入复合酶,先在常温下暗期处理并酶解1h,然后升温至70℃在蓝光(λ=440nm,功率为4mW/cm3)照射下酶解10min,然后相同温度下再在绿光(λ=520nm,功率为2mW/cm3)照射下酶解15min。
对比例45
本对比例与实施例3的区别在于,步骤(2)中蓝光照射温度改为55℃。
对比例46
本对比例与实施例3的区别在于,步骤(2)中蓝光照射温度改为75℃。
对比例47
本对比例与实施例3的区别在于,步骤(2)中绿光照射温度改为35℃。
对比例48
本对比例与实施例3的区别在于,步骤(2)中绿光照射温度改为55℃。
对比例49
本对比例与实施例3的区别在于,步骤(3)中红光照射温度改为65℃。
对比例50
本对比例与实施例3的区别在于,步骤(3)中红光照射温度改为85℃。
对比例51
本对比例与实施例3的区别在于,将半枝莲和重楼分开进行光照辅助酶解,最终分别得到半枝莲提取物和重楼提取物。
对实施例1~3和对比例25~50制得的半枝莲和重楼提取物,用紫外可见分光光度计,分别在510nm、490nm、416nm和202.5nm处测定吸光度,通过线性回归方程计算得各有效成分的提取率,结果如下表9。
表9
由表9中结果可知,本发明实施例1~3半枝莲和重楼提取物中有效成分的提取率均高于对比例25~51的效果,可知按照本发明设计的半枝莲和重楼的提取方法,能够显著提高有效成分的提取率。
本发明的有益效果在于:本发明提供了一种治疗肝癌的中药组合物及其制备方法,通过特定的配方和药材处理,既具有显著的抗肝癌效果,同时又能较好地保留中药药材的有效成分,降低毒性,提高药效。
最后应说明的是,以上所述仅为本发明的优选实施例而已,并不用于限制本发明,尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明,对于本领域的技术人员来说,其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种治疗肝癌的中药组合物,其特征在于:所述中药组合物的组分及其重量份数为:枣皮10~15份、水蛭6~10份、麦冬10~15份、人工牛黄3~5份、莪术8~12份、野荞麦根13~15、土茵陈18~22份、天葵子8~10份、虎杖8~12份、甘草2~4份、山慈菇8~12份、半枝莲10~14份、重楼10~14份、犁头草10~15份、野菊花10~15份,所述山慈菇的预处理方法为将山慈菇导入改性蒙脱石内层结构中制成改性蒙脱石复合山慈菇,所述半枝莲和重楼的提取方法为不同波长光线照射辅助酶解法。
2.根据权利要求1所述的治疗肝癌的中药组合物,其特征在于:所述山慈菇的预处理方法为:
(1)山慈菇初提取物制备:
A、取山慈菇原料,洗净干燥后,加入粉碎机中以400~500r/min的速度进行粉碎,干燥后过40~60目筛,得山慈菇粉末;
B、将山慈菇粉末加入到5~8倍的70~90%乙醇溶液中,在40~50℃和70~80W功率下超声提取0.5~1h,过滤后取滤液,滤渣依次提取3~5次后,合并滤液蒸发溶剂,即得山慈菇初提取物;
(2)改性蒙脱石的制备:
A、取乳酸亚铁颗粒,在30~40℃和50~80W功率的密闭式超微粉碎机中进行粉碎,制得粒径为0.1~0.3μm的乳酸亚铁超微粉;
B、取蒙脱石和蒸馏水混合后,加入到高剪切分散机中,在60~80℃和8000~10000r/min转速的条件下分散0.5~1h,然后升温至90~110℃在10000~12000r/min的条件下继续分散20~30min,然后降温至50~60℃,将上一步骤制得的乳酸亚铁超微粉加入高剪切分散机中,在12000~15000r/min和充氮条件下加速剪切30~40min后停止,30~40℃封闭干燥后,在常温70~80W功率的密闭式超微粉碎机中进行粉碎,制得粒径为0.5~1μm的改性蒙脱石超微粉;
(3)改性蒙脱石复合山慈菇混悬液制备:
A、按照(0.1~0.15)/1的药料比,将山慈菇初提取物和改性蒙脱石超微粉混合后搅拌均匀,加入到PH为8~10的氢氧化钾水溶液中;
B、然后在60~70℃和300~400r/min的搅拌机中搅拌2~3h,相同温度下超声振荡15~30min后,投入高压均质机中,在50~60℃、40~50MPa和50~60W功率下均质1~2h,即得改性蒙脱石复合山慈菇混悬液。
3.根据权利要求2所述的治疗肝癌的中药组合物,其特征在于:所述蒙脱石和乳酸亚铁超微粉的质量比为1:(0.2~0.4)。
4.根据权利要求1所述的治疗肝癌的中药组合物,其特征在于:所述半枝莲和重楼的提取方法为:
(1)分别取半枝莲和重楼,洗净干燥后,在粉碎机中以300~400r/min的速度进行粉碎,干燥后过30~40目筛,分别得半枝莲粉末和重楼粉末;
(2)将半枝莲粉末与70~80%乙醇溶液混合,然后加入复合酶,先在常温下暗期处理并酶解0.5~1h,然后升温至60~70℃,在λ=430~440nm、功率为2~4mW/cm3的蓝光照射下酶解8~10min,然后再降温至40~50℃,在λ=500~520nm、功率为1~2mW/cm3的绿光照射下酶解10~15min;
(3)将重楼粉末加入到步骤(2)获得的溶液中,然后在常温下暗期处理并酶解30~40min,然后升温至70~80℃,在λ=650~700nm、功率为4~5mW/cm3的红光照射下酶解20~30min后,趁热过滤,取滤液蒸发溶剂后即得半枝莲和重楼提取物。
5.根据权利要求4所述的治疗肝癌的中药组合物,其特征在于:所述复合酶占半枝莲粉末和重楼粉末总质量的1~2%,所述复合酶包括质量比为5:1:8的纤维素酶、果胶酶和半纤维素酶。
6.根据权利要求1~5任一所述的治疗肝癌的中药组合物的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:
(1)麦冬、莪术、野荞麦根、天葵子、虎杖和甘草的原料处理:将麦冬取芯后,与莪术、野荞麦根、天葵子、虎杖和甘草一起洗净后去杂,50~60℃烘干后放入粉碎机中,在500~600r/min转速下进行粉碎 ,干燥后过50~60目筛,得麦冬、莪术、野荞麦根、天葵子、虎杖和甘草混合粉末;
(2)枣皮、水蛭、人工牛黄、土茵陈、犁头草和野菊花的原料处理:取枣皮、水蛭、人工牛黄、土茵陈、犁头草和野菊花洗净后去杂,沥干后研磨成浆状物备用;
(3)取步骤(1)处理得到的麦冬、莪术、野荞麦根、天葵子、虎杖和甘草混合粉末、以及步骤(2)处理后的枣皮、水蛭、人工牛黄、土茵陈、犁头草和野菊花的浆状物放入砂锅中,加入冷水浸泡并搅拌30~45min;
(4)将装有中药的砂锅加盖后移至明火中煎煮,先大火煎煮至80~90℃后,加入半枝莲和重楼的提取物、以及预处理后的山慈菇,搅拌均匀,然后调小火量保持慢火微沸状态煎煮15~17min后关火,即得治疗肝癌的中药组合物汤剂。
7.根据权利要求6所述的治疗肝癌的中药组合物的制备方法,其特征在于:所述步骤(3)中加入的冷水量为800~1000mL。
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