CN111748002B - 一种脱氧葡萄糖修饰的叶酸衍生物及其合成与应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种脱氧葡萄糖修饰的叶酸衍生物及其合成与应用，所述衍生物是将叶酸和脱氧葡萄糖通过化学键的方式结合在一起，形成的一种新型化合物——FA‑2‑DG。所述衍生物中，叶酸和脱氧葡萄糖之间以氨基乙醇做为连接臂，叶酸的羧基和氨基乙醇的氨基相连，形成酰胺键；氨基乙醇的羟基和脱氧葡萄糖的羟基相连，生成糖苷键。这样的连接方式既不破坏叶酸和脱氧葡萄糖本身的结构和功能，不影响叶酸受体对叶酸的识别，同时引入的两个碳原子的连接臂也能增大叶酸和脱氧葡萄糖两个分子之间的距离，更适宜糖苷酶的水解，释放出具有抗肿瘤活性的脱氧葡萄糖。所述衍生物FA‑2‑DG基于其结构的特征，可以作为药质体用来载药。

Description

一种脱氧葡萄糖修饰的叶酸衍生物及其合成与应用
技术领域
本发明属于生物医药领域，特别涉及到一种脱氧葡萄糖修饰的叶酸衍生物及其合成与应用。
背景技术
恶性肿瘤是当今危害人类健康的复杂疾病，每年造成的人类死亡人数仅次于心脑血管疾病。叶酸受体高表达的肿瘤在女性群体中有较高的发病率，开发基于叶酸识别的靶向抗肿瘤药物一直是肿瘤药物研发的热点内容之一。目前，基于叶酸开发的多种靶向抗肿瘤药物已多有报道，大多是用叶酸修饰大分子PEG(聚乙二醇)，然后制备具有靶向功能的脂质体运载抗肿瘤药物，这种治疗策略制备的脂质体的粒径不均一，运载抗肿瘤药物的效率较低，疗效较差且修饰之后的大分子在体内也容易引起免疫反应。
发明内容
针对上述问题，本发明的目的是提供一种脱氧葡萄糖修饰的叶酸衍生物及其合成与应用，在研究两亲性小分子药物的基础上，应用具有抗肿瘤活性的小分子脱氧葡萄糖修饰叶酸，制备出具有靶向抗肿瘤功能，且能够自组装形成纳米结构，运载抗肿瘤药物的新型叶酸衍生物。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的：
一种脱氧葡萄糖修饰的叶酸衍生物，所述叶酸衍生物(FA-2-DG)由脱氧葡萄糖和叶酸经由氨基乙醇连接形成，其中叶酸的羧基和氨基乙醇的氨基相连，形成酰胺键，氨基乙醇的羟基和脱氧葡萄糖的羟基相连，形成糖苷键。
所述脱氧葡萄糖修饰的叶酸衍生物的合成方法，包括以下步骤：
1)制备(4R，5S，6R)-6-(乙酰氧甲基)-四氢-2，4，5-三乙酰氧基-吡喃
将2-脱氧葡萄糖溶解于无水吡啶中形成溶液，冰浴搅拌条件下将乙酸酐滴加入溶液中，滴加完毕后撤掉冰浴，室温下搅拌24小时，然后旋蒸除掉溶剂，加入乙酸乙酯溶解剩余固体，然后用柠檬酸水溶液，碳酸氢钠水溶液，饱和氯化钠水溶液各萃洗三次，之后乙酸乙酯用无水硫酸钠干燥过夜，过滤之后减压除去乙酸乙酯，用柱层析法纯化，得到的产物乙酰基保护羟基的脱氧葡萄糖，即(4R，5S，6R)-6-(乙酰氧甲基)-四氢-2，4，5-三乙酰氧基-吡喃，简称化合物2；
2)制备(2R，3S，4R)-2-(乙酰氧甲基)-6-(2-溴乙基氧基)四氢-3，4-二乙酰氧基-吡喃
将化合物2溶解于二氯甲烷中，加入2-溴乙醇，冰浴下再滴加入三氟化硼乙醚，滴加完毕后撤除冰浴，室温下反应，然后加入冷却过的饱和碳酸氢钠水溶液终止反应，分离出二氯甲烷层，并用二氯甲烷萃取水相两次，合并二氯甲烷，用饱和氯化钠水溶液萃洗三次之后用无水硫酸钠干燥过夜；过滤之后减压除去二氯甲烷，剩余油状物用硅胶柱层析纯化，洗脱液为石油醚∶乙酸乙酯，从10∶1洗脱至5∶1，得到黄色油状物，即(2R，3S，4R)-2-(乙酰氧甲基)-6-(2-溴乙基氧基)四氢-3，4-二乙酰氧基-吡，简称化合物3；
3)制备(2R，3S，4R)-2-(乙酰氧甲基)-6-(2-叠氮乙氧基)四氢-3，4-二乙酰氧基-吡喃
将化合物3和叠氮化钠溶解于二甲基甲酰胺中，加热条件下搅拌，反应后加入冰水终止反应，然后用乙酸乙酯萃取两次，合并有机相，用饱和氯化钠水溶液萃洗三次之后用无水硫酸钠干燥过夜；过滤之后减压除去乙酸乙酯，得到黄色油状物，即(2R，3S，4R)-2-(乙酰氧甲基)-6-(2-叠氮乙氧基)四氢-3，4-二乙酰氧基-吡喃，简称化合物4；
4)制备(2R，3S，4R)-2-(乙酰氧甲基)-6-(2-氨基乙氧基)四氢-3，4-二乙酰氧基-吡喃
林德拉催化剂和对甲基苯磺酸先后加入到溶解有化合物4的乙醇溶液中，然后在氢气氛围下，室温反应8小时，之后过滤，减压除去乙醇之后得到无色泡状固体，即(2R，3S，4R)-2-(乙酰氧甲基)-6-(2-氨基乙氧基)四氢-3，4-二乙酰氧基-吡喃，简称化合物5；
5)制备N2-{4-[(2-氨基-4-羟基蝶啶-6-甲基)氨基]苯甲酰基}-N5-{2-[(2s，4r，5s，6r)-4，5-二乙酰氧基-6-(乙酰氧基甲基)四氢吡喃]-氧乙基}-L-谷氨酰胺
叶酸溶解于无水二甲基亚砜中，然后加入DCC，再加入化合物5，最后加入吡啶，避光室温反应，然后减压尽可能除去多余的吡啶，残留物用甲基叔丁基醚磨洗之后得到化合物6，经柱层析纯化后得到橙色固体，即N2-{4-[(2-氨基-4-羟基蝶啶-6-甲基)氨基]苯甲酰基}-N5-{2-[(2s，4r，5s，6r)-4，5-二乙酰氧基-6-(乙酰氧基甲基)四氢吡喃]-氧乙基}-L-谷氨酰胺，简称化合物6；
6)制备N2-{4-[(2-氨基-4-羟基蝶啶-6-甲基)氨基]苯甲酰基}-N5-{2-[(2s，4r，5s，6r)-4，5-二羟基-6-(羟甲基)四氢吡喃]-氧乙基}-L-谷氨酰胺
将化合物6溶解于甲醇中，然后在冰浴下滴加入甲醇钠，滴加完毕后撤掉冰浴，室温下反应，然后用酸性树脂调节pH值至6，然后过滤除去树脂，滤液减压除去之后得到粗品，粗品用制备级HPLC纯化，得到上述的叶酸衍生物(FA-2-DG)。
本发明的另一方面：
所述脱氧葡萄糖修饰的叶酸衍生物的应用，所述叶酸衍生物可应用于制备抗肿瘤药物。
进一步的，所述肿瘤为叶酸受体高表达肿瘤；所述肿瘤包括乳腺癌、卵巢癌和宫颈癌。
一种具有靶向抗肿瘤功能的纳米颗粒，所述纳米颗粒由如上述的叶酸衍生物，通过化学键、配位键或氢键与肿瘤药物相互作用而形成。
进一步的，所述纳米颗粒由上述的叶酸衍生物与抗肿瘤药物顺铂，通过配位键连接，形成含顺铂的靶向抗肿瘤纳米颗粒。
本发明相比现有技术的有益效果为：
1、本发明所述的脱氧葡萄糖修饰的叶酸衍生物(FA-2-DG)，脱氧葡萄糖能够抑制肿瘤细胞的糖酵解，并能够逆转肿瘤细胞在体内的转移；叶酸能够特异性的识别某些肿瘤细胞表面高表达的叶酸受体，肿瘤细胞对2-DG的高摄取率及其抑制肿瘤糖酵解的活性，使其成为抗肿瘤药物研发中的优良候选物；以叶酸和脱氧葡萄糖为原料，经六步即合成了FA-2-DG，所有的化合物均经过红外、质谱和核磁共振氢谱及碳谱的确证，证实了最终合成的化合物结构正确；
2、本发明合成得到的FA-2-DG在水中的溶解度比叶酸高800倍，并且FA-2-DG分子之间存在着氢键相互作用，因此在水溶液中可以发生自组装，并且临界胶束浓度为7.12μmol/L；动态光散射技术证实FA-2-DG在水溶液中能形成纳米颗粒，浓度为8μmol/L的FA-2-DG的水溶液中的粒径在72.5nm，随着浓度的增加，粒径会逐渐变大，并且在0.5％BSA水溶液中，FA-2-DG的自组装依然稳定存在；另外，原子力显微镜，透射电子显微镜和扫描电子显微镜这些形态学表征技术也都证实FA-2-DG本身能够自组装形成纳米颗粒；
3、本发明合成得到的FA-2-DG，能够通过化学键、配位键或氢键与肿瘤药物相互作用，形成具有靶向抗肿瘤功能的纳米颗粒，载药能力强、效果好；
4、本发明所述含顺铂的靶向抗肿瘤纳米颗粒(FA-2-DG-Pt)，可以自组装形成纳米结构；所述FA-2-DG-Pt的抗肿瘤抑制率高于顺铂、2-DG和FA-2-DG，抗肿瘤活性高；并且，以FA-2-DG纳米颗粒装载顺铂，靶向给药能够降低顺铂的毒副作用。
附图说明
图1为本发明所述叶酸衍生物的化学结构式；
图2为所述叶酸衍生物合成路线示意图；其中，(I)醋酸酐，无水吡啶；(II)，溴乙醇，二氯甲烷；(III)叠氮化钠，二甲基甲酰胺；(IV)对甲苯磺酸，氢气，乙醇；(V)叶酸，二甲基亚砜；(VI)甲醇钠，甲醇；
图3为不同稀释倍数的FA-2-DG和叶酸饱和溶液的紫外吸收光谱图；其中，A：FA-2-DG饱和溶液稀释2000倍；B：叶酸饱和溶液稀释2倍；C：FA-2-DG饱和溶液稀释4000倍；D：叶酸饱和溶液稀释5倍；E：叶酸饱和溶液稀释10倍；
图4为FA-2-DG在水溶液中的临界胶束浓度测试结果图；其中，A：以280nm处的紫外吸光度对浓度的对数值作图；B：以280nm激发波长，442nm处的荧光发射强度对浓度的对数值作图；
图5为所述含顺铂的靶向抗肿瘤纳米颗粒(FA-2-DG-Pt)的化学结构式；
图6为所述含顺铂的靶向抗肿瘤纳米颗粒(FA-2-DG-Pt)的高分辨质谱图。
具体实施方式
为了进一步阐述本发明，下面给出一系列实施例。这些实施例完全是例证性的，它们仅用来对本发明进行具体描述，不应当理解为对本发明的限制。
实施例1
本实施例提供了一种脱氧葡萄糖修饰的叶酸衍生物，所述叶酸衍生物(FA-2-DG)由脱氧葡萄糖和叶酸经由氨基乙醇连接形成，其中叶酸的羧基和氨基乙醇的氨基相连，形成酰胺键，氨基乙醇的羟基和脱氧葡萄糖的羟基相连，形成糖苷键。所述FA-2-DG的化学结构式如图1所示。
脱氧葡萄糖有多个羟基，在反应过程中，羟基的反应活性较高，因此需要用乙酰基保护，再进行反应。乙酰基保护的反应由脱氧葡萄糖和乙酸酐在无水的吡啶中发生。氨基乙醇的氨基在反应过程中也会有比较高的反应活性，因此在反应过程中不直接用氨基乙醇，而是选用2-溴乙醇先和乙酰脱氧葡萄糖反应，这一步的反应需要三氟化硼的催化，生成糖苷键。产物和叠氮化钠在DMF中反应之后，溴原子继续被叠氮基团取代，然后叠氮基团被对甲苯磺酸和林德尔催化剂催化还原，生成氨基苯磺酸盐，继续和叶酸反应生成酰胺键，完成糖基保护的目标物的合成，脱除糖基上的乙酰基保护，完成FA-2-DG的合成。
如图2所示，所述FA-2-DG的合成方法具体包括以下步骤：
(1)制备(4R，5S，6R)-6-(乙酰氧甲基)-四氢-2，4，5-三乙酰氧基-吡喃(化合物2)
将5.0g(30.5mmol)的2-脱氧葡萄糖溶解于25mL无水吡啶中，冰浴搅拌条件下将23.8g(233mmol)的乙酸酐滴加入溶液中，滴加完毕后撤掉冰浴，室温下搅拌16h，然后旋蒸除掉溶剂，加入100mL乙酸乙酯溶解剩余固体，然后用5％柠檬酸水溶液，5％碳酸氢钠水溶液，饱和氯化钠水溶液各萃洗三次，之后乙酸乙酯用无水硫酸钠干燥过夜。过滤之后减压除去乙酸乙酯，用柱层析法纯化，得到的产物乙酰基保护羟基的脱氧葡萄糖9.1g(27.39mmol)，产率为89.9％。1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ/ppm＝5.77(dd，J＝10.0，2.20Hz，1H)，5.08-4.97(m，2H)，4.31-4.26(m，1H)，4.01-4.03(m，1H)，3.74-3.70(m，1H)，2.35-2.29m，1H)，2.09-1.90(m，12H).13C-NMR(100MHz，CDCl3)：δ/ppm＝170.71，170.10，169.76，168.79，91.08，72.87，70.15，68.26，61.95，34.73，20.96，20.86，20.77，20.71.HRMS(m/z)：calcd for C14H20O9[M+Na]+：355.0999，found：355.1008。
(2)制备(2R，3S，4R)-2-(乙酰氧甲基)-6-(2-溴乙基氧基)四氢-3，4-二乙酰氧基-吡喃(化合物3)
将化合物2(5.0g，15mmol)溶解于二氯甲烷中，加入2-溴乙醇(2.3g，18mmol，1.3mL)，冰浴下再滴加入三氟化硼乙醚(2.6g，18mmol，2.2mL)，滴加完毕后撤除冰浴，室温下反应2h，然后加入冷却过的饱和碳酸氢钠水溶液(60mL)终止反应，分离出二氯甲烷层，并用50mL二氯甲烷萃取水相两次，合并二氯甲烷，用饱和氯化钠水溶液40mL萃洗三次之后用无水硫酸钠干燥过夜。过滤之后减压除去二氯甲烷，剩余油状物用硅胶柱层析纯化，洗脱液为石油醚∶乙酸乙酯，从10∶1洗脱至5∶1，得到化合物3(4.6g，10.4mmol，69.3％产率)为黄色油状物。1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ/ppm＝5.33-5.26(m，1H)，5.01-4.95(m，2H)，4.28-4.24(m，1H)，4.08-4.04(m，2H)，3.94-3.88(m，1H)，3.82-3.76(m，1H)，3.48(t，J＝0.8Hz，2H)，2.29-2.25(m，1H)，2.11-2.98(m，9H)，1.85-1.76(m，1H).13C-NMR(100MHz，CDCl3)：δ/ppm＝170.71，170.18，169.93，97.25，69.24，68.91，68.31，67.97，62.33，34.88，30.09，20.98，20.78，20.75.HRMS(m/z)：calcd for C14H21BrO8[M+Na]+：419.0312，found：419.0324。
(3)制备(2R，3S，4R)-2-(乙酰氧甲基)-6-(2-叠氮乙氧基)四氢-3，4-二乙酰氧基-吡喃(化合物4)
将化合物3(4.5g，11.3mmol)和叠氮化钠(1.11g，16.9mmol)溶解于35mL二甲基甲酰胺中，60℃加热条件下搅拌，反应16h后加入冰水300mL终止反应，然后用乙酸乙酯(100mL)萃取两次，合并有机相，用饱和氯化钠水溶液40mL萃洗三次之后用无水硫酸钠干燥过夜。过滤之后减压除去乙酸乙酯，得到化合物4(3.9g，粗品)为黄色油状物。1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ/ppm＝5.23-5.21(m，1H)，4.92(brs 2H)，4.23-4.19(m，1H)，3.99-3.92(m，2H)，3.77-3.73(m，1H)，3.60-3.51(m，1H)，3.36-3.35(m，2H)，2.23-2.19(m，1H)，2.01-2.91(m，9H)，1.79-1.72(m，1H).13C-NMR(100MHz，CDCl3)：δ/ppm＝170.71，170.12，169.93，97.27，69.22，68.83，68.18，66.55，62.35，50.44，34.82，20.96，20.77，20.74.HRMS(m/z)：calcd for C14H21N3O8[M+Na]+：382.1221，found：382.1211。
(4)制备(2R，3S，4R)-2-(乙酰氧甲基)-6-(2-氨基乙氧基)四氢-3，4-二乙酰氧基-吡喃(化合物5)
林德拉催化剂(0.6g，0.3mmol，10.0％纯度)和对甲基苯磺酸(0.19g，1.1mmol)先后加入到溶解有化合物4(3.0g，9.2mmol)的乙醇溶液中，然后在氢气(15psi)氛围下，室温反应16h。之后过滤，减压除去乙醇之后得到化合物5(2.82g，91.9％)，为无色泡状固体。1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ/ppm＝7.71(d，J＝8.0Hz，1H)，7.11(d，J＝8.0Hz，1H)，6.38(brs，2H)，5.28-5.19(m，1H)，4.95-4.86(m，2H)，4.22(m，1H)，3.96-3.89(m，1H)，3.77-3.66(m，2H)，3.53-3.44(m，1H)，3.12-3.01(m，2H)，2.34(s，3H)，2.21(m，1H)，2.10-1.92(m，9H)，1.69-1.62(m，1H).13C-NMR(100MHz，CDCl3)：δ/ppm＝170.77，170.29，169.81，97.39，69.07，68.83，68.18，66.55，62.35，50.44，34.82，20.96，20.77，20.74.HRMS(m/z)：calcdfor C14H24NO8[M+H]+：334.1496，found：334.1506。
(5)制备N2-{4-[(2-氨基-4-羟基蝶啶-6-甲基)氨基]苯甲酰基}-N5-{2-[(2s，4r，5s，6r)-4，5-二乙酰氧基-6-(乙酰氧基甲基)四氢吡喃]-氧乙基}-L-谷氨酰胺(化合物6)
叶酸(1.25g，2.88mmol)溶解于100mL无水二甲基亚砜中，然后加入DCC(1.5g，7.2mmol)，再加入化合物5(1.75g，3.5mmol)，最后加入吡啶(20g，0.25mol，21mL)，避光室温反应16h，然后减压尽可能除去多余的吡啶，残留物用甲基叔丁基醚磨洗之后得到化合物6(2.4g，粗品)，经柱层析纯化后得到橙色固体(1.8g，82.6％)。1H-NMR(400MHz，DMSO)：δ/ppm＝11.44(s，1H)，8.64(s，1H)，7.95(m，1H)，7.66(d，J＝8Hz，1H)，7.19(s，1H)，7.13(s，1H)，7.07(s，1H)，6.93(s，1H)，6.63(t，J＝8Hz，1H)，5.14(m，1H)，4.93(s，1H)，4.82(m，1H)，4.48(s，1H)，4.35(m，1H)，4.16(m，1H)，3.97-3.91(m，2H)，3.56(m，1H)，3.42(m，1H)，3.28(m，1H)，2.54(s，1H)，2.26(m，1H)，2.08(m，1H)，2.01(s，6H)，1.98(s，3H).13C-NMR(100MHz，DMSO)：δ/ppm＝174.52，172.38，170.58，170.15，169.87，166.68，158.13，151.23，148.99，129.51，128.41，121.82，118.56，117.06，112.86，111.59，96.66，69.43，68.98，67.76，66.27，63.89，62.48，53.23，46.38，42.58，38.93，34.82，30.98，27.45，21.12，20.97，20.91.HRMS(m/z)：calcd for C33H40N8O13[M+H]+：757.2788，found：757.2799。
(6)制备N2-{4-[(2-氨基-4-羟基蝶啶-6-甲基)氨基]苯甲酰基}-N5-{2-[(2s，4r，5s，6r)-4，5-二羟基-6-(羟甲基)四氢吡喃]-氧乙基}-L-谷氨酰胺(目标物)
将化合物6(1.5g，2mmol)溶解于甲醇中，然后在冰浴下滴加入甲醇钠NaOMe(3.13g，14.3mmol，25.0％purity of MeOH)，滴加完毕后撤掉冰浴，室温下反应1h。然后用酸性树脂调节pH值至6，然后过滤除去树脂。滤液减压除去之后得到粗品。粗品用制备级HPLC纯化，(色谱柱：Agela Durashell(博纳艾吉尔，天津，中国)10μm，250×50mm；流动相：[water(10mM NH4HCO3)-ACN]；B％：0-15.0％，20min)，之后得到终产物FA-2-DG(0.94g，75％)，为橙色固体。1H-NMR(400MHz，DMSO)：δ/ppm＝8.97(s，1H)，8.58(d，J＝20Hz，2H)，7.95(d，J＝10.6Hz，1H)，7.85(s，1H)，7.68-7.46(m，4H)，6.90(s，1H)，6.78(s，1H)，6.61(dd，J＝19.0，8.0Hz，2H)，4.78(s，1H)，4.46(s，1H)，4.34(s，1H)，4.20(s，1H)，4.06(s，1H)，3.64-3.21(m，11H)，3.02-2.98(m，1H)，2.19-2.11(m，2H)，1.98(s，1H)，1.39(t，J＝12.4Hz，1H).13C-NMR(100MHz，DMSO)：δ/ppm＝172.81，166.64，162.19，156.88，155.29，151.01，148.83，129.48，128.91，128.41，121.99，111.81，97.19，73.62，72.21，68.38，65.73，65.52，61.47，54.43，46.43，38.91，38.31，33.01，32.69，29.08，27.73.HRMS(m/z)：calcdfor C27H34N8O10[M+H]+：631.2471，found：631.2473。
(一)FA-2-DG在水中溶解度的测定：
制备FA-2-DG的饱和水溶液，然后按10，100，1000，2000，4000和8000的倍数逐级稀释，得到一系列不同浓度的溶液，待测。同时制备叶酸的饱和水溶液，按照2，5，10，20和50的倍数稀释，得到一系列不同浓度的溶液，待测。
用紫外分光光度计(UV-2600，岛津)对以上制得的样本进行测试，波长扫描范围185-500nm，扫描速度：中速，扫描间隔：1nm，为保证测试的准确性，所有样品的测试温度均为37℃，用仪器自带的UV-probe软件记录并分析数据。
FA-2-DG饱和溶液的稀释溶液和叶酸饱和溶液的稀释溶液的紫外吸收光谱测试见图3所示。图中的B、D和E谱线代表的是叶酸饱和溶液稀释2倍，5倍和10倍的紫外吸收光谱，图中的A和C代表的是FA-2-DG稀释2000倍和4000倍的紫外吸收光谱，根据紫外吸收光谱的测试结果，FA-2-DG饱和溶液稀释2000倍的溶液和叶酸饱和溶液稀释2倍的溶液谱线有部分重合，如图中的A和B所示，在最大吸收波长280nm处，FA-2-DG饱和溶液稀释2000倍的溶液吸光度稍高于叶酸饱和溶液稀释2倍的溶液。FA-2-DG饱和溶液稀释4000倍的溶液和叶酸饱和溶液稀释5倍的溶液谱线在280nm处的最大吸收波长处重合，从这个结果来看，在结构中引入脱氧葡萄糖使得叶酸在水中的溶解度提升了800倍。
(二)FA-2-DG临界胶束浓度的测定
制备FA-2-DG的水溶液，浓度为19nmol/L，47.5nmol/L，95nmol/L，190nmol/L，475nmol/L，950nmol/L，1.9μmol/L，4.75μmol/L，9.5μmol/L，19μmol/L，47.5μmol/L，63μmol/L。在紫外最大吸收波长280nm处测试各个浓度溶液的吸光度。测试温度37℃，用仪器自带的UV-probe软件记录吸光度数据。以溶液的吸光度对浓度的对数值作图，得到吸光度随浓度变化的趋势，从而找到临界胶束浓度。
在紫外测试的基础上，由于FA-2-DG有荧光性质，在280nm激发光照射下，在442nm处发射荧光，测试荧光发射的强度，以荧光发射强度对浓度的对数值作图，得到荧光强度随浓度变化的趋势，从而找到临界胶束浓度。
应用紫外吸收光谱和荧光发射光谱测定不同浓度下的样品的紫外吸光度和荧光发射强度，分别对样品浓度的对数值做图，得到如图4所示的结果。图中A为紫外吸收的测定结果，可以看到有明显的两条趋势线，线段的交叉点在x轴上的值为-5.2左右，换算成浓度约为6.31μmol/L，图中B为荧光发射光谱的测定结果，也有两条与紫外吸收光谱测得结果一致的趋势线，线段的交叉点在x轴上的值为-5.1左右，换算成浓度值约为7.94μmol/L，根据两种方法计算的临界胶束浓度，求算平均值，可得FA-2-DG在水溶液中的临界胶束浓度为7.12μmol/L。
由上述测定得到的结果可知，FA-2-DG在水溶液中的临界胶束浓度为7.12μmol/L，因此为评估FA-2-DG聚集之后的颗粒的纳米粒径分布，用动态光散射的方法测定FA-2-DG在水溶液中的粒径，同时为了评估浓度对组装的影响，特配制三个不同浓度的溶液，分别为8μmol/L，14μmol/L，和47μmol/L的三个溶液，测定它们的粒径大小，在8μmol/L的浓度条件下，FA-2-DG组装的颗粒粒径为72.5nm，当浓度为14μmol/L时，粒径增大到146.8nm，浓度为47μmol/L时，粒径进一步增大，达到269.1nm，说明化合物的聚集程度与浓度呈正相关，浓度越大，聚集的程度越严重，聚集的颗粒也越大。0.5％的BSA对FA-2-DG的组装并未产生影响，浓度为9.5μmol/L的FA-2-DG水溶液中的粒径为82.1nm，当把溶剂换成0.5％BSA水溶液时，粒径并没有发生明显的变化，为83.8nm。
(三)FA-2-DG的红外光谱测定
采用傅里叶变换红外光谱仪对FA-2-DG的红外吸收进行测定，同时分别测定叶酸和脱氧葡萄糖以及叶酸混合脱氧葡萄糖的红外光谱，判断结构中引入脱氧葡萄糖之后分子之间的相互作用。测试仪器型号为美国Thermo Fisher公司生产的Nicolet iS5型傅里叶变换红外光谱仪进行测试，选择衰减全反射(Attenuated Total Reflection，ATR)的模式测试。
(四)FA-2-DG纳米形态表征测定
分别利用原子力显微镜、透射电子显微镜和扫描电子显微镜测定FA-2-DG及FA-2-DG在溶液中的纳米粒度表征。
原子力显微镜的结果显示，FA-2-DG形成规则的纳米线状结构，在纳米线的末端，有粒径约为20nm的纳米颗粒形成。透射电子显微镜下FA-2-DG可以看到很多纳米线绕在一起成团状，这些纳米线的宽度约为5-20nm不等。FA-2-DG从扫描电子显微镜观察到成比较薄的层状结构，在边缘断裂处还有少许的卷曲，推测是由纳米线结合在一起形成的纳米薄膜结构，由于薄膜的韧性较差，可以看到薄膜断裂形成的小块膜状结构。
实施例2
本实施例提供了一种靶向抗肿瘤纳米颗粒，所述纳米颗粒由上述的叶酸衍生物与抗肿瘤药物顺铂，通过配位键连接。制备FA-2-DG和顺铂的配合物，将相同浓度的顺铂和FA-2-DG的水溶液混合后室温搅拌，两小时后得到顺铂和FA-2-DG形成了如图5所示的配位化合物(FA-2-DG-Pt)。将混合溶液注入HPLC-MS分析，证实了配合物生成。质谱结果见图6。
原子力显微镜，透射电子显微镜和扫描电子显微镜这些形态学表征技术都证实FA-2-DG本身能够自组装形成纳米颗粒，和顺铂形成配位键，载药之后得到FA-2-DG-Pt的也可以自组装形成纳米结构。
(一)对FA-2-DG-Pt进行体外抗肿瘤活性评价：
1)受试样品
实施例1制备的FA-2-DG，本实施例制备的FA-2-DG-Pt和脱氧葡萄糖用PBS配制成所需浓度，顺铂为阳性对照品，用PBS配制成所需浓度。
2)细胞株
人卵巢癌细胞系SKOV-3，人乳腺癌细胞系MCF-7，人宫颈癌细胞系Hela，3株肿瘤细胞均购自中科院上海细胞库。
3)试验方法
分别将生长状态良好、处于对数生长期的SKOV-3、MCF-7和Hela细胞按照2×105个/mL的密度接种于96孔板，每孔200μL。3株细胞按预设的浓度梯度加入待测、经灭菌处理的化合物溶液，每孔25μl，对照孔加入等体积的PBS。在37℃、5％CO2培养箱中培养48小时，每孔加入25μl浓度为5mg/mL的MTT溶液，继续置于37℃、5％CO2培养箱中培养4小时。离心4分钟(3000rpm/min)。小心吸出上清液，每孔加入100μl DMSO溶解紫色残留物(甲瓒)，平板振荡10分钟使沉淀全部溶解，于570nm酶标仪上测定O.D.值(吸光度)，波长570nm。
按照公式“相对生存率＝(D含药-D空白)/(D对照-D空白)×100％”计算每一个样品浓度下的样品对肿瘤细胞的抑制率。
4)实验结果
本实验各个化合物的体外抗肿瘤效果如表1所示。
表1 不同化合物体外抗肿瘤细胞增殖的IC50值(μM)
Figure BSA0000203850670000111
a)2-DG代表2-脱氧葡萄糖，IC50的浓度为mM。
(二)对FA-2-DG-Pt进行体内抗肿瘤评价
1)实验材料
受试化合物：2-DG，FA-2-DG，FA-2-DG-Pt；
阳性对照：顺铂；
实验动物：6周龄的Balb/c裸鼠，体重约为18g；
肿瘤细胞：SKOV-3人卵巢癌细胞，密度为每毫升2.5×108个细胞。
2)剂量设置
按照临床治疗剂量设置顺铂的给药剂量为1.5mg/kg，按此剂量设置FA-2-DG-Pt中铂的含量与顺铂的剂量一致，即装载顺铂的剂量为1.5mg/kg；FA-2-DG的给药剂量与FA-2-DG-Pt中载体的摩尔浓度一致，为6.34mg/kg；2-DG的剂量与FA-2-DG的摩尔浓度一致，为1.63mg/kg。所有药物均使用生理盐水配制。
3)给药方案
按照给药剂量，每只小鼠给药0.2mL，腹腔给药，在实验开始第一天给药，从第二次开始每隔两天给药，共给药6次，实验持续17天。
4)动物模型的建立
选用6周龄的Balb/c裸鼠，SPF级，体重约为18g，动物饲养在屏障系统内静置一日后，在背部右侧上方接种肿瘤细胞，细胞密度为每毫升2.5×108个细胞，接种之前细胞可用低密度的Matrixgel基质胶按1∶1的比例混合，以保证接种成功率。接种量为0.2mL/只，细胞接种数量为每只动物5×107个细胞。接种时选用1.0mL规格的无菌注射器吸取肿瘤细胞，左手抓取动物，用医用酒精在小鼠右侧背部靠近前肢的部位消毒，然后右手拿起吸好瘤液的注射器进行注射，先将针尖刺入皮肤，挑起并继续刺入，左右稍晃动针尖，然后打入细胞液，针尖稍转动后轻轻拔出。以和小鼠头尾平行的方向为长L，以和小鼠头尾垂直的方向为宽W，计算小鼠的肿瘤体积的公式为：
Tumor Volume＝L×W^2/2
肿瘤接种约两周后，选取肿瘤体积在120mm3左右的动物随机分组，分组之后静养一天给药，给药方式为腹腔注射。
5)抑瘤率的计算
本实验采用肿瘤体积和瘤重两种考察指标，在实验第17天，用游标卡尺测量肿瘤的体积，然后断颈处死动物，手术取出肿瘤及内脏，用天平称取肿瘤重量。
肿瘤体积的增长率为考察抑瘤率的第一个指标，增长率计算方法为小鼠第17天的肿瘤体积除以第一天的肿瘤体积，体积增长倍数小的抑制肿瘤增长的效果较好。
肿瘤重量抑制率为第二个考察指标，计算方法为：
瘤重抑制率％＝(1-给药组瘤重/空白组瘤重)×100％。
统计方法：本实验数据统计均采用t检验和方差分析。
6)实验结果
本实验各个给药组的体内抗肿瘤活性如表2所示。
表2.不同化合物体内抗肿瘤活性
Figure BSA0000203850670000121

Claims (1)

1.一种具有靶向抗卵巢肿瘤功能的纳米颗粒，其特征在于，所述纳米颗粒由脱氧葡萄糖修饰的叶酸衍生物，通过配位键与肿瘤药物顺铂相互作用而形成；
所述叶酸衍生物由脱氧葡萄糖和叶酸经由氨基乙醇连接形成，其中叶酸的羧基和氨基乙醇的氨基相连，形成酰胺键，氨基乙醇的羟基和脱氧葡萄糖的羟基相连，形成糖苷键；
所述方法的步骤为：
1)制备(4R，5S，6R)-6-(乙酰氧甲基)-四氢-2，4，5-三乙酰氧基-吡喃
将2-脱氧葡萄糖溶解于无水吡啶中形成溶液，冰浴搅拌条件下将乙酸酐滴加入溶液中，滴加完毕后撤掉冰浴，室温下搅拌24小时，然后旋蒸除掉溶剂，加入乙酸乙酯溶解剩余固体，然后用柠檬酸水溶液，碳酸氢钠水溶液，饱和氯化钠水溶液各萃洗三次，之后乙酸乙酯用无水硫酸钠干燥过夜，过滤之后减压除去乙酸乙酯，用柱层析法纯化，得到的产物乙酰基保护羟基的脱氧葡萄糖，即(4R，5S，6R)-6-(乙酰氧甲基)-四氢-2，4，5-三乙酰氧基-吡喃，简称化合物2；
2)制备(2R，3S，4R)-2-(乙酰氧甲基)-6-(2-溴乙基氧基)四氢-3，4-二乙酰氧基-吡喃
将化合物2溶解于二氯甲烷中，加入2-溴乙醇，冰浴下再滴加入三氟化硼乙醚，滴加完毕后撤除冰浴，室温下反应，然后加入冷却过的饱和碳酸氢钠水溶液终止反应，分离出二氯甲烷层，并用二氯甲烷萃取水相两次，合并二氯甲烷，用饱和氯化钠水溶液萃洗三次之后用无水硫酸钠干燥过夜；过滤之后减压除去二氯甲烷，剩余油状物用硅胶柱层析纯化，洗脱液为石油醚∶乙酸乙酯，从10∶1洗脱至5∶1，得到黄色油状物，即(2R，3S，4R)-2-(乙酰氧甲基)-6-(2-溴乙基氧基)四氢-3，4-二乙酰氧基-吡，简称化合物3；
3)制备(2R，3S，4R)-2-(乙酰氧甲基)-6-(2-叠氮乙氧基)四氢-3，4-二乙酰氧基-吡喃
将化合物3和叠氮化钠溶解于二甲基甲酰胺中，加热条件下搅拌，反应后加入冰水终止反应，然后用乙酸乙酯萃取两次，合并有机相，用饱和氯化钠水溶液萃洗三次之后用无水硫酸钠干燥过夜；过滤之后减压除去乙酸乙酯，得到，为黄色油状物，即(2R，3S，4R)-2-(乙酰氧甲基)-6-(2-叠氮乙氧基)四氢-3，4-二乙酰氧基-吡喃，简称化合物4；
4)制备(2R，3S，4R)-2-(乙酰氧甲基)-6-(2-氨基乙氧基)四氢-3，4-二乙酰氧基-吡喃
林德拉催化剂和对甲基苯磺酸先后加入到溶解有化合物4的乙醇溶液中，然后在氢气氛围下，室温反应，之后过滤，减压除去乙醇之后得到无色泡状固体，即(2R，3S，4R)-2-(乙酰氧甲基)-6-(2-氨基乙氧基)四氢-3，4-二乙酰氧基-吡喃，简称化合物5；
5)制备N2-{4-[(2-氨基-4-羟基蝶啶-6-甲基)氨基]苯甲酰基)-N5-{2-[(2s，4r，5s，6r)-4，5-二乙酰氧基-6-(乙酰氧基甲基)四氢吡喃]-氧乙基)-L-谷氨酰胺
叶酸溶解于无水二甲基亚砜中，然后加入DCC，再加入化合物5，最后加入吡啶，避光室温反应，然后减压尽可能除去多余的吡啶，残留物用甲基叔丁基醚磨洗之后得到化合物6，经柱层析纯化后得到橙色固体，即N2-{4-[(2-氨基-4-羟基蝶啶-6-甲基)氨基]苯甲酰基)-N5-{2-[(2s，4r，5s，6r)-4，5-二乙酰氧基-6-(乙酰氧基甲基)四氢吡喃]-氧乙基)-L-谷氨酰胺，简称化合物6；
6)制备N2-{4-[(2-氨基-4-羟基蝶啶-6-甲基)氨基]苯甲酰基)-N5-{2-[(2s，4r，5s，6r)-4，5-二羟基-6-(羟甲基)四氢吡喃]-氧乙基)-L-谷氨酰胺
将化合物6溶解于甲醇中，然后在冰浴下滴加入甲醇钠，滴加完毕后撤掉冰浴，室温下反应，然后用酸性树脂调节pH值至6，然后过滤除去树脂，滤液减压除去之后得到粗品，粗品用制备级HPLC纯化，得到所述的叶酸衍生物。
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Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103251595A (zh) * 2013-04-19 2013-08-21 东北林业大学 一种超临界co2抗溶剂法制备叶酸-葡聚糖-喜树碱复合纳米粒子的工艺
CN103349783A (zh) * 2013-06-29 2013-10-16 深圳先进技术研究院 一种以两亲性多糖-叶酸偶联物为载体的纳米光敏药物及其制备方法
CN103732563A (zh) * 2011-08-22 2014-04-16 默克及其合伙人公司 18f-糖-叶酸类
JP2018070459A (ja) * 2016-10-25 2018-05-10 啓 大西 医薬複合物、ポリマー担体、それらの製造方法、及び癌、リウマチ又は炎症の治療剤
CN108135885A (zh) * 2015-09-09 2018-06-08 目标实验室有限责任公司 用于靶向治疗癌症的光动力治疗剂的合成和组合物

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103732563A (zh) * 2011-08-22 2014-04-16 默克及其合伙人公司 18f-糖-叶酸类
CN103251595A (zh) * 2013-04-19 2013-08-21 东北林业大学 一种超临界co2抗溶剂法制备叶酸-葡聚糖-喜树碱复合纳米粒子的工艺
CN103349783A (zh) * 2013-06-29 2013-10-16 深圳先进技术研究院 一种以两亲性多糖-叶酸偶联物为载体的纳米光敏药物及其制备方法
CN108135885A (zh) * 2015-09-09 2018-06-08 目标实验室有限责任公司 用于靶向治疗癌症的光动力治疗剂的合成和组合物
JP2018070459A (ja) * 2016-10-25 2018-05-10 啓 大西 医薬複合物、ポリマー担体、それらの製造方法、及び癌、リウマチ又は炎症の治療剤

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Novel Targeted Anti-Tumor Nanoparticles Developed from Folic Acid-Modified 2-Deoxyglucose;Shaoming Jin，等;《Int. J. Mol. Sci.》;20190206;第20卷;第697页 *
Shaoming Jin，等.Novel Targeted Anti-Tumor Nanoparticles Developed from Folic Acid-Modified 2-Deoxyglucose.《Int. J. Mol. Sci.》.2019,第20卷第697（1-12）页. *
叶酸修饰的纳米材料在肿瘤靶向治疗中的应用研究进展;刘日钊，等;《中国医药生物技术》;20150831;第10卷(第4期);第297-302页 *

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