CN111713654A - 一种含多糖和鱼骨钙的休闲食品及其制备方法 - Google Patents
一种含多糖和鱼骨钙的休闲食品及其制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111713654A CN111713654A CN202010729866.1A CN202010729866A CN111713654A CN 111713654 A CN111713654 A CN 111713654A CN 202010729866 A CN202010729866 A CN 202010729866A CN 111713654 A CN111713654 A CN 111713654A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- fishbone
- polysaccharide
- calcium
- snack food
- preparing
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 title claims abstract description 52
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 title claims abstract description 51
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 title claims abstract description 51
- 235000013305 food Nutrition 0.000 title claims abstract description 49
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 title claims abstract description 17
- 239000011575 calcium Substances 0.000 title claims abstract description 17
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 16
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title abstract description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 35
- 241000251511 Holothuroidea Species 0.000 claims abstract description 32
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 7
- 238000009777 vacuum freeze-drying Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 25
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims description 20
- 235000011888 snacks Nutrition 0.000 claims description 17
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 15
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 15
- 239000013543 active substance Substances 0.000 claims description 12
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 12
- 206010033546 Pallor Diseases 0.000 claims description 11
- 235000012055 fruits and vegetables Nutrition 0.000 claims description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 238000002791 soaking Methods 0.000 claims description 9
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 claims description 8
- 229920002774 Maltodextrin Polymers 0.000 claims description 7
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 claims description 7
- 238000010411 cooking Methods 0.000 claims description 7
- 239000005913 Maltodextrin Substances 0.000 claims description 6
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 claims description 6
- 229940035034 maltodextrin Drugs 0.000 claims description 6
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 claims description 6
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims description 4
- 238000000227 grinding Methods 0.000 claims description 4
- 241000711573 Coronaviridae Species 0.000 abstract description 19
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 13
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 abstract description 11
- 238000012545 processing Methods 0.000 abstract description 10
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- 229920000855 Fucoidan Polymers 0.000 description 28
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 28
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 26
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 20
- 241001678559 COVID-19 virus Species 0.000 description 17
- 241000512259 Ascophyllum nodosum Species 0.000 description 15
- 241000512260 Ascophyllum Species 0.000 description 14
- MSXHSNHNTORCAW-MPGIDXPLSA-M sodium;(3s,4s,5s,6r)-3,4,5,6-tetrahydroxyoxane-2-carboxylate Chemical group [Na+].O[C@@H]1OC(C([O-])=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O MSXHSNHNTORCAW-MPGIDXPLSA-M 0.000 description 14
- 241001112090 Pseudovirus Species 0.000 description 11
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 10
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 9
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 9
- 101000600434 Homo sapiens Putative uncharacterized protein encoded by MIR7-3HG Proteins 0.000 description 8
- 102100037401 Putative uncharacterized protein encoded by MIR7-3HG Human genes 0.000 description 8
- 241000965254 Apostichopus japonicus Species 0.000 description 7
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 7
- 238000000465 moulding Methods 0.000 description 7
- 235000010352 sodium erythorbate Nutrition 0.000 description 7
- 239000004320 sodium erythorbate Substances 0.000 description 7
- RBWSWDPRDBEWCR-RKJRWTFHSA-N sodium;(2r)-2-[(2r)-3,4-dihydroxy-5-oxo-2h-furan-2-yl]-2-hydroxyethanolate Chemical compound [Na+].[O-]C[C@@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O RBWSWDPRDBEWCR-RKJRWTFHSA-N 0.000 description 7
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 6
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 6
- 235000019688 fish Nutrition 0.000 description 6
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 5
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 5
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 5
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 5
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 5
- 102100031673 Corneodesmosin Human genes 0.000 description 4
- 101710139375 Corneodesmosin Proteins 0.000 description 4
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 4
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 4
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 4
- 229960004793 sucrose Drugs 0.000 description 4
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L sulfate group Chemical group S(=O)(=O)([O-])[O-] QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000000832 Ayote Nutrition 0.000 description 3
- LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M Cetrimonium bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)C LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 235000009854 Cucurbita moschata Nutrition 0.000 description 3
- 235000009804 Cucurbita pepo subsp pepo Nutrition 0.000 description 3
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 244000000626 Daucus carota Species 0.000 description 3
- 235000002767 Daucus carota Nutrition 0.000 description 3
- PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N Fucose Natural products C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 3
- SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N L-fucopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N 0.000 description 3
- 244000070406 Malus silvestris Species 0.000 description 3
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 3
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 3
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 3
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 3
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 3
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 3
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 3
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 3
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 3
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 description 3
- 235000015136 pumpkin Nutrition 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- VZSRBBMJRBPUNF-UHFFFAOYSA-N 2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)-N-[3-oxo-3-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)propyl]pyrimidine-5-carboxamide Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)C(=O)NCCC(N1CC2=C(CC1)NN=N2)=O VZSRBBMJRBPUNF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 4',6-Diamino-2-phenylindol Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(C(N)=N)C=C2N1 FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SQDAZGGFXASXDW-UHFFFAOYSA-N 5-bromo-2-(trifluoromethoxy)pyridine Chemical compound FC(F)(F)OC1=CC=C(Br)C=N1 SQDAZGGFXASXDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001474374 Blennius Species 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 108010059892 Cellulase Proteins 0.000 description 2
- 229920001287 Chondroitin sulfate Polymers 0.000 description 2
- 241000219122 Cucurbita Species 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- 208000000059 Dyspnea Diseases 0.000 description 2
- 206010013975 Dyspnoeas Diseases 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- 241000199919 Phaeophyceae Species 0.000 description 2
- 108010059820 Polygalacturonase Proteins 0.000 description 2
- 229940096437 Protein S Drugs 0.000 description 2
- 101710198474 Spike protein Proteins 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 235000021016 apples Nutrition 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 description 2
- 229940106157 cellulase Drugs 0.000 description 2
- 229940059329 chondroitin sulfate Drugs 0.000 description 2
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 2
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 2
- CBMPTFJVXNIWHP-UHFFFAOYSA-L disodium;hydrogen phosphate;2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O.OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O CBMPTFJVXNIWHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 2
- 108010093305 exopolygalacturonase Proteins 0.000 description 2
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 2
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000003670 luciferase enzyme activity assay Methods 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000003801 milling Methods 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 2
- 230000010355 oscillation Effects 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- 238000007873 sieving Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 238000004879 turbidimetry Methods 0.000 description 2
- HMUNWXXNJPVALC-UHFFFAOYSA-N 1-[4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]piperazin-1-yl]-2-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)ethanone Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)N1CCN(CC1)C(CN1CC2=C(CC1)NN=N2)=O HMUNWXXNJPVALC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-GASJEMHNSA-N 2-amino-2-deoxy-D-galactopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- YLZOPXRUQYQQID-UHFFFAOYSA-N 3-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)-1-[4-[2-[[3-(trifluoromethoxy)phenyl]methylamino]pyrimidin-5-yl]piperazin-1-yl]propan-1-one Chemical compound N1N=NC=2CN(CCC=21)CCC(=O)N1CCN(CC1)C=1C=NC(=NC=1)NCC1=CC(=CC=C1)OC(F)(F)F YLZOPXRUQYQQID-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 208000001528 Coronaviridae Infections Diseases 0.000 description 1
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 1
- 240000004244 Cucurbita moschata Species 0.000 description 1
- AEMOLEFTQBMNLQ-AQKNRBDQSA-N D-glucopyranuronic acid Chemical compound OC1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-AQKNRBDQSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- 238000001712 DNA sequencing Methods 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Natural products O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004566 IR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 244000017020 Ipomoea batatas Species 0.000 description 1
- 235000002678 Ipomoea batatas Nutrition 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 description 1
- 244000038594 Phyllanthus urinaria Species 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 235000014443 Pyrus communis Nutrition 0.000 description 1
- 208000001647 Renal Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 241001622901 Scomberomorus commerson Species 0.000 description 1
- 241000269821 Scombridae Species 0.000 description 1
- 201000003176 Severe Acute Respiratory Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 description 1
- 241000276707 Tilapia Species 0.000 description 1
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 238000007605 air drying Methods 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UBXYXCRCOKCZIT-UHFFFAOYSA-N biphenyl-3-ol Chemical group OC1=CC=CC(C=2C=CC=CC=2)=C1 UBXYXCRCOKCZIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 241001233037 catfish Species 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 229960001927 cetylpyridinium chloride Drugs 0.000 description 1
- YMKDRGPMQRFJGP-UHFFFAOYSA-M cetylpyridinium chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+]1=CC=CC=C1 YMKDRGPMQRFJGP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 238000011033 desalting Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 229960001484 edetic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 229940097043 glucuronic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 235000020640 mackerel Nutrition 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000000643 oven drying Methods 0.000 description 1
- OQUKIQWCVTZJAF-UHFFFAOYSA-N phenol;sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O.OC1=CC=CC=C1 OQUKIQWCVTZJAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004804 polysaccharides Polymers 0.000 description 1
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 1
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 description 1
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- -1 salt ions Chemical class 0.000 description 1
- 235000014102 seafood Nutrition 0.000 description 1
- 208000013220 shortness of breath Diseases 0.000 description 1
- 239000007974 sodium acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000010025 steaming Methods 0.000 description 1
- 125000000185 sucrose group Chemical group 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 1
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 1
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L17/00—Food-from-the-sea products; Fish products; Fish meal; Fish-egg substitutes; Preparation or treatment thereof
- A23L17/65—Addition of, or treatment with, microorganisms or enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L17/00—Food-from-the-sea products; Fish products; Fish meal; Fish-egg substitutes; Preparation or treatment thereof
- A23L17/70—Comminuted, e.g. emulsified, fish products; Processed products therefrom such as pastes, reformed or compressed products
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L19/00—Products from fruits or vegetables; Preparation or treatment thereof
- A23L19/09—Mashed or comminuted products, e.g. pulp, purée, sauce, or products made therefrom, e.g. snacks
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L19/00—Products from fruits or vegetables; Preparation or treatment thereof
- A23L19/10—Products from fruits or vegetables; Preparation or treatment thereof of tuberous or like starch containing root crops
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L19/00—Products from fruits or vegetables; Preparation or treatment thereof
- A23L19/10—Products from fruits or vegetables; Preparation or treatment thereof of tuberous or like starch containing root crops
- A23L19/105—Sweet potatoes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/125—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives containing carbohydrate syrups; containing sugars; containing sugar alcohols; containing starch hydrolysates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L5/00—Preparation or treatment of foods or foodstuffs, in general; Food or foodstuffs obtained thereby; Materials therefor
- A23L5/10—General methods of cooking foods, e.g. by roasting or frying
- A23L5/15—General methods of cooking foods, e.g. by roasting or frying using wave energy, irradiation, electrical means or magnetic fields, e.g. oven cooking or roasting using radiant dry heat
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L5/00—Preparation or treatment of foods or foodstuffs, in general; Food or foodstuffs obtained thereby; Materials therefor
- A23L5/20—Removal of unwanted matter, e.g. deodorisation or detoxification
- A23L5/28—Removal of unwanted matter, e.g. deodorisation or detoxification using microorganisms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Marine Sciences & Fisheries (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明公开了一种含多糖和鱼骨钙的休闲食品及其制备方法,属于食品加工技术领域。本发明提供了一种休闲食品,此休闲食品中添加有岩藻多糖和/或海参多糖,由于岩藻多糖和/或海参多糖均能够显著抑制新冠病毒对细胞的感染,并且,岩藻多糖和/或海参多糖在休闲食品的加工过程中未经高温处理(真空冷冻干燥),活性不会受到影响,因此,此休闲食品也可预防和治疗新型冠状病毒感染。
Description
技术领域
本发明涉及一种含多糖和鱼骨钙的休闲食品及其制备方法,属于食品加工技术领域。
背景技术
新型冠状病毒(2019-nCoV),正式分类命名为严重急性呼吸综合征冠状病毒2(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2),简称新冠病毒(novel coronavirus)。人感染了冠状病毒后常见体征有呼吸道症状、发热、咳嗽、气促和呼吸困难等。在较严重病例中,感染可导致肺炎、严重急性呼吸综合征、肾衰竭,甚至死亡。因此,急需研发可预防和治疗新型冠状病毒感染的产品。
水产品加工是我国渔业经济的主要来源,水产品加工过程中会产生大量鱼头、鱼骨等加工废弃物,其中,鱼骨含有大量的Ca、Fe、Zn、Mg、P及胶原成分极具营养价值,极具开发利用的价值。
随着经济的发展与人民生活水平的提高,人们对休闲食品的需求也日益旺盛。在传统休闲食品的基础上,添加生物活性物质和营养物质以赋予休闲食品一些益生功能和更丰富的营养,有利于满足消费者对休闲食品高品质、高营养的需求,具有广阔的市场前景。
发明内容
[技术问题]
本发明要解决的技术问题是提供一种以鱼骨为原料的,可预防和治疗新型冠状病毒感染的休闲食品。
[技术方案]
为解决本发明的技术问题,本发明提供了一种制备含多糖和鱼骨钙的休闲食品的方法,所述方法为在制备休闲食品的过程中添加活性物质;所述活性物质为岩藻多糖和/或海参多糖。
在本发明的一种实施方式中,所述休闲食品为冻干休闲食品。
在本发明的一种实施方式中,所述方法为取鱼骨,将鱼骨浸泡于酵母溶液中去腥后清洗干净,得到去腥鱼骨;将去腥鱼骨经蒸煮、微波处理、烘干、粉碎,得到鱼骨粉;将水果和/或蔬菜漂烫后进行研磨,得到果蔬泥;将鱼骨粉、果蔬泥、活性物质、糖和麦芽糊精混合,得到混合物;将混合物经成型、干燥,得到休闲食品。
在本发明的一种实施方式中,所述鱼骨为罗非鱼鱼骨、鲅鱼鱼骨、鮰鱼鱼骨和/或金枪鱼鱼骨。
在本发明的一种实施方式中,所述酵母溶液由活性干酵母粉与水混合而得。
在本发明的一种实施方式中,所述酵母溶液中,活性干酵母粉的浓度为5~25g/L。
在本发明的一种实施方式中,所述酵母溶液与鱼骨的质量比为5~15:1。
在本发明的一种实施方式中,所述浸泡的时间为0.5~2.5h。
在本发明的一种实施方式中,所述蒸煮为高压蒸煮。
在本发明的一种实施方式中,所述高压蒸煮的压力为0.1~0.16MPa、温度为121~126℃、时间为25~50min。
在本发明的一种实施方式中,所述微波处理为使用微波炉进行微波处理。
在本发明的一种实施方式中,所述微波处理的功率为300~1300W、时间为30~200s。
在本发明的一种实施方式中,所述烘干为使用烘箱进行烘干。
在本发明的一种实施方式中,所述烘干的温度为80~90℃、时间为2~4h。
在本发明的一种实施方式中,所述粉碎为使用超微粉碎机进行超微粉碎。
在本发明的一种实施方式中,所述超微粉碎的时间为1~5h。
在本发明的一种实施方式中,所述鱼骨粉的粒径为不小于100目。
在本发明的一种实施方式中,所述水果为苹果和/或梨。
在本发明的一种实施方式中,所述蔬菜为胡萝卜、南瓜、紫薯、红薯、玉米和/或番茄。
在本发明的一种实施方式中,所述漂烫为将水果和/或蔬菜添加至烫漂液中,于85~98℃处理2~5min;所述烫漂液为异抗坏血酸钠溶液;所述异抗坏血酸钠溶液中,异抗坏血酸钠的质量占水果和/或蔬菜总质量的0.1~1%。
在本发明的一种实施方式中,所述研磨为用胶体磨进行研磨。
在本发明的一种实施方式中,所述果蔬泥的粒度为5μm。
在本发明的一种实施方式中,所述鱼骨粉、果蔬泥、活性物质、糖和麦芽糊精的质量比为0.25~0.5kg:1kg:4~1000mg:0.1~0.2kg:0.1~0.5kg。
在本发明的一种实施方式中,所述糖为蔗糖、果糖、乳糖和或木糖醇。
在本发明的一种实施方式中,所述成型为使用成型设备或成型模具进行成型。
在本发明的一种实施方式中,所述干燥为真空冷冻干燥。
本发明还提供了一种含多糖和鱼骨钙的休闲食品,所述休闲食品为使用上述方法制备而得。
在本发明的一种实施方式中,所述休闲食品为冻干休闲食品。
[有益效果]
(1)本发明提供了一种休闲食品,此休闲食品中添加有岩藻多糖和/或海参多糖,由于岩藻多糖和/或海参多糖均能够显著抑制新冠病毒对细胞的感染,并且,岩藻多糖和/或海参多糖在休闲食品的加工过程中未经高温处理(真空冷冻干燥),活性不会受到影响,因此,此休闲食品也可预防和治疗新型冠状病毒感染。
(2)本发明提供了一种休闲食品,此休闲食品中添加有鱼骨废弃物制备而得的鱼骨粉,因此,此休闲食品富含鱼骨钙。
(3)本发明提供了一种休闲食品,此休闲食品使用了水产品加工产生的鱼骨废弃物,减少了资源浪费,提高了原料的利用价值。
(4)本发明提供了一种休闲食品,此休闲食品在制备过程中使用了高压蒸煮与微波联合的加工工艺对鱼骨进行熟化,大大提高了鱼骨的酥脆度与风味。
(5)本发明提供了一种休闲食品,此休闲食品在制备过程中使用了真空干燥工艺,有效避免了休闲食品中营养物质的流失。
附图说明
图1:不同浓度的泡叶藻岩藻多糖对新冠病毒的抑制作用,横坐标:泡叶藻岩藻多糖的浓度,纵坐标:感染细胞率(%)=进入细胞的病毒数量/总病毒数量×100。
图2:将SARS-CoV-2病毒与不同浓度的岩藻多糖混合处理后的细胞免疫荧光图。岩藻多糖的浓度为500、250、125、62.5、31.3、15.6μg/mL。阴性对照为空白培养基。
图3:将SARS-CoV-2病毒与不同浓度的海参多糖的混合处理后的细胞免疫荧光图。海参多糖的终浓度为500、250、125、62.5、31.3、15.6、7.8、3.9μg/mL。阴性对照为空白培养基。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行进一步的阐述。
下述实施例中涉及的酵母购自安琪酵母股份有限公司;下述实施例中涉及的蔗糖购自上海甘源实业有限公司;下述实施例中涉及的麦芽糊精购自山西莱克生物科技有限公司;下述实施例中涉及的异抗坏血酸钠购自河北润步生物科技有限公司;下述实施例中涉及的鱼骨购自大连市海鲜市场;下述实施例中涉及的苹果、胡萝卜、南瓜购自大连市乐购超市。
实施例1-1:制备泡叶藻(褐藻)岩藻多糖
泡叶藻岩藻多糖的制备方法如下:
S1、将泡叶藻(Ascophyllum nodosum)洗净、沥干、自然风干、粉碎并过80目筛,得泡叶藻粉A;
S2、将步骤S1所述泡叶藻粉A置于25℃无水乙醇中浸泡4h,纱布过滤取沉淀A,将所述沉淀A置于25℃无水乙醇中搅拌4h,纱布过滤取沉淀B,将所述沉淀B置于25℃无水乙醇中浸泡4h,纱布过滤取沉淀C室温晾干,从而除去脂类及脂溶性小分子,得泡叶藻粉B;其中,所述泡叶藻粉A、沉淀B和本步骤所述无水乙醇的重量体积比均为1:4g/mL;
S3、取步骤S2所述泡叶藻粉B,加入pH=5的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液、纤维素酶、果胶酶和木瓜蛋白酶,搅拌混匀,50℃水浴振荡酶解4h,使岩藻多糖解离,后加热至98℃,保持10分钟以钝化酶活,所得混合物于4500r/min室温离心15min,取上清液;其中,所述泡叶藻粉B和所述磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液的重量体积比为1:30g/mL;所述泡叶藻粉B、纤维素酶(比酶活100units/mg)、果胶酶(比酶活50units/mg)和木瓜蛋白酶(比酶活2units/mg)的重量比为12500:42:6:6;
S4、向步骤S3所述上清液中边搅拌边加入过量的CaCl2,于4500r/min室温离心15min,将褐藻胶沉淀除去,取上清液;使用的步骤S3的上清液和CaCl2体积重量比是20:1mL/g;
S5、向步骤S4所述上清液中加入十六烷基三甲基溴化铵(CTAB),使岩藻多糖沉淀,将所得混合物在4500r/min室温离心15min收集沉淀,将沉淀溶解于3mol/L CaCl2溶液中,再加无水乙醇,4℃放置24h,使岩藻多糖沉淀,4500r/min、4℃离心15min,收集沉淀;使用的步骤S4的上清液和CTAB体积重量比是50:1mL/g;所述沉淀和所述3mol/L CaCl2溶液的重量体积比是1:3g/mL;所述CaCl2溶液和所述无水乙醇的体积比为2:3;
S6、将步骤S5所述沉淀用体积分数为80%的乙醇洗涤3次,再使用体积分数为95%乙醇洗沉淀3次,室温晾干,超纯水溶解,使用分子量3500Da的透析袋自来水流水透析24h,然后使用超纯水作为透析液透析48h,除去岩藻多糖中含有的氯化钙及其它盐离子,其中每2h换透析液,在真空度为1pa和温度为-60℃的条件下冻干72h,得到泡叶藻岩藻多糖(ANP);所述沉淀和所述体积分数为80%的乙醇溶液的重量体积比是1:3g/mL;所述沉淀和所述体积分数为95%的乙醇溶液的重量体积比是1:3g/mL;所述沉淀和所述超纯水的重量体积比是1:150g/mL。
本实施例还可以包括溶液配制、超纯水的制备等前处理步骤。
实施例1-2:确定实施例1-1所制备的泡叶藻岩藻多糖的结构特性和组成
具体方法如下:
采用明胶比浊法进行泡叶藻岩藻多糖硫酸基含量的测定;
采用BCA法进行泡叶藻岩藻多糖蛋白含量的测定;
采用间羟基联苯法进行泡叶藻岩藻多糖糖醛酸含量的测定;
采用苯酚硫酸法进行泡叶藻岩藻多糖总糖含量的测定;
采用凝胶渗透色谱法进行泡叶藻岩藻多糖分子量的测定;
采用高效液相色谱+PMP衍生化法进行泡叶藻岩藻多糖单糖组成的测定;
采用傅里叶红外光谱法进行泡叶藻岩藻多糖官能团的测定。
结果表明,泡叶藻岩藻多糖的分子量为490kDa;糖醛酸含量为2.9~3.2%;蛋白含量为3.8~4.0%;硫酸基含量为28~30%;总糖含量为54%;所述褐藻岩藻多糖的单糖组成为:摩尔比为6.5:1.1:1的岩藻糖、甘露糖和半乳糖;官能团包括羟基、羧基和硫酸基等官能团。
实施例1-3:验证泡叶藻岩藻多糖阻止SARS-CoV-2病毒侵入机体细胞的用途
将编码HCoV-19刺突蛋白的基因的全长序列克隆到pCAGGS载体用于假病毒的生产,所得到的重组载体称为pCAGGS-HCoV-19-S。通过DNA测序确认pCAGGS-HCoV-19-S构建成功。将pCAGGS-HCoV-19-S和pNL4-3的质粒共转染到HEK 293T细胞,培养48h后,收集含有SARS-CoV-2假病毒模型的上清液,并通过感染Huh7细胞确定假病毒的50%组织细胞感染量(TCID50)。
使用该SARS-CoV-2假病毒模型评价泡叶藻岩藻多糖的抗新型冠状病毒的作用,具体步骤如下:
(1)选择生长状态良好的Huh7细胞,胰酶消化后,96孔铺板,培养过夜,至18-24h时细胞达到80-100%;
(2)每孔100TCID50假病毒,与含有泡叶藻岩藻多糖的无血清培养基混合,混合后泡叶藻岩藻多糖的终浓度为0.01mg/mL、0.1mg/mL和1mg/mL,37℃孵育30min。EK1肽作为阳性对照,空白无血清培养基作为阴性对照。
(3)以PBS洗涤Huh7细胞去除血清后,用3倍倍比稀释病毒与泡叶藻岩藻多糖的混合物感染Huh7细胞,每个孔100μL,每个样品设置三个平行孔,4-6h后,补加含有5%FBS血清的培养基100μL。
(4)48h测定Luciferase值。参考Promega公司Luciferase Assay SystemProtocol或Dual Luciferase Reporter Assay System Protocol。具体操作:倒扣96孔板,用PBS洗2遍,确保吸干PBS,然后加入30μL的裂解液,常温裂解30min,吸出10μL于白板上,底物50μL,测定luciferase值。
如下表1所示,泡叶藻岩藻多糖在浓度为0.01mg/mL、0.1mg/mL和1mg/mL时,都能够有效的抑制SARS-CoV-2病毒感染细胞。
表1不同浓度下的泡叶藻岩藻多糖对SARS-CoV-2病毒感染细胞的抑制作用
又进一步采用相同实验方法检测了多个浓度的泡叶藻岩藻多糖对新冠病毒的抑制作用,计算了IC50值。结果如图1所示,泡叶藻岩藻多糖抑制新冠病毒的IC50为0.327mg/mL。
而且,由于所使用的模型为仅具有S蛋白的SARS-CoV-2假病毒,可以推出泡叶藻岩藻多糖的作用靶点为S蛋白。
实施例1-4:购买的商品化岩藻多糖的组成分析与抗新冠病毒研究
参考中华人民共和国水产行业标准SC/T 3404-2012,测得青岛明月海藻集团有限公司的商品化岩藻多糖中硫酸基含量为28.5±0.1%,总糖含量为63.2±2.6%,岩藻糖含量为36.9±3.8%。
将SARS-CoV-2真病毒(来源于第二军医大学)和岩藻多糖用含有5%胎牛血清的DMEM培养基混匀,37℃放置1h,加入提前12h接种Vero E6细胞的96孔板(加入以前吸除原细胞培养液),培养24h,然后用免疫荧光检测病毒蛋白,DAPI染色细胞核。采用免疫荧光显微镜观测了终浓度为500、250、125、62.5、31.3、15.6、7.8μg/mL的岩藻多糖对病毒的抑制作用,结果如图2所示,在浓度范围15.6~500μg/mL浓度范围内,岩藻多糖均能够显著抑制新冠病毒对细胞的感染。
实施例2-1:制备海参多糖的方法
具体方法如下:
将海参(刺参,Stichopusjaponicus)洗净、水煮、沥干、剪成小块,然后冻干。将冻干样品置于4℃丙酮中浸泡24h,室温下晾干。以1g冻干样品为例,加入30mL 0.1mol/L乙酸钠缓冲溶液(pH 6.0)、100mg木瓜蛋白酶(比酶活2units/mg)、48mg乙二胺四乙酸和18mg半胱氨酸,涡旋混合,于60℃水浴振荡酶解24h,将反应混合物离心(6000g,15min,室温),取上清液。向上清液中加入1.6mL 10%氯化十六烷基吡啶溶液,室温下放置24h后,离心(8000g,15min,室温)取沉淀。将沉淀溶解于15mL 3mol/LNaCl-乙醇(100:15v/v))溶液中,再加入30mL 95%乙醇溶液,4℃放置24h,离心(8000g,15min,室温)取沉淀。将沉淀用10mL 80%乙醇洗2至3次后,再用10mL 95%乙醇洗2至3次,室温晾干,蒸馏水溶解,用透析袋(3500Da)进行除盐,冻干,得海参多糖。
本实施例还可以包括溶液配制、超纯水的制备等前处理步骤。
实施例2-2:确定实施例2-1所制备的海参多糖的结构特性和组成
具体方法如下:
采用1H NMR进行海参多糖结构特性和纯度检测;
采用凝胶渗透色谱法进行海参多糖分子量检测;
采用明胶比浊法进行海参多糖硫酸根含量检测;
采用高效液相色谱+PMP衍生化法进行海参多糖单糖组成检测;
采用傅里叶红外进行海参多糖官能团检测。
结果表明,海参多糖含有岩藻聚糖硫酸酯和岩藻糖基化硫酸软骨素,岩藻聚糖硫酸酯分子量>670kDa,岩藻糖基化硫酸软骨素的分子量>179kDa;硫酸根含量为26-28%;岩藻糖、葡萄糖醛酸和氨基半乳糖的摩尔比为9:0.8:1。
实施例2-3:使用假病毒模型评价海参多糖的抗新型冠状病毒的作用
将编码HCoV-19刺突蛋白的基因的全长序列克隆到pCAGGS载体用于假病毒的生产,构建得到的重组载体称为pCAGGS-HCoV-19-S。通过DNA测序确认pCAGGS-HCoV-19-S构建成功。将pCAGGS-HCoV-19-S和pNL4-3质粒共转染到HEK 293T细胞,培养48h后,收集含有SARS-CoV-2假病毒的上清液,并通过感染Huh7细胞确定假病毒的50%组织细胞感染量(TCID50)。
使用该SARS-CoV-2假病毒模型评价海参多糖的抗新型冠状病毒的作用,具体步骤如下:
(1)选择生长状态良好的Huh7细胞,胰酶消化后,96孔铺板,培养过夜,至18-24h时细胞达到80-100%;
(2)每孔100TCID50假病毒,与含有海参多糖的无血清培养基混合,混合后海参多糖的终浓度为0.01mg/mL、0.1mg/mL和1mg/mL,于37℃孵育30min。EK1肽作为阳性对照,空白无血清培养基作为阴性对照。
(3)以PBS洗涤Huh7细胞去除血清后,用3倍倍比稀释病毒与海参多糖的混合物并感染Huh7细胞,每个孔100μL,每个样品设置三个平行孔,4-6h后,补加含有5%FBS血清的培养基100μL。
(4)48h测定Luciferase值。参考Promega公司LuciferaseAssay System Protocol或Dual Luciferase ReporterAssay System Protocol。具体操作:倒扣96孔板,用PBS洗2遍,确保吸干PBS,然后加入30μL的裂解液,常温裂解30min,吸出10μL于白板上,底物50μL,测定luciferase值,结果如下表2所示。
如下表2所示,海参多糖终浓度为0.1mg/mL和1mg/mL时,都能够有效的抑制SARS-CoV-2病毒进入细胞。而且由于所使用的模型为具有S蛋白的SARS-CoV-2假病毒,可以推出海参多糖的作用靶点为S蛋白。
表2不同浓度下的海参多糖对SARS-CoV-2病毒感染细胞的抑制作用
实施例2-4:海参多糖对duSARS-CoV-2真病毒的作用
SARS-CoV-2真病毒(来源于第二军医大学)和海参多糖用含有5%胎牛血清的DMEM培养基混匀,使海参多糖的终浓度为500、250、125、62.5、31.3、15.6、7.8、3.9μg/mL,37℃放置1h,加入提前12h接种Vero E6细胞的96孔板(加入以前吸除原细胞培养液),培养24h,然后用免疫荧光检测病毒蛋白,DAPI染色细胞核。用免疫荧光显微镜观测了500、250、125、62.5、31.3、15.6、7.8、3.9μg/mL八个浓度梯度的海参多糖对病毒的抑制作用,结果如图3所示,在500~3.9μg/mL浓度范围内,海参多糖均能够显著抑制新冠病毒对细胞的感染。
实施例3-1:休闲食品的制备
包括如下步骤:
取鲅鱼鱼骨,去除鱼骨上的碎肉及血污后流水清洗3次,得到预处理后的鱼骨;将鱼骨浸泡于酵母溶液中去腥后用清水冲洗3次,得到去腥鱼骨;将去腥鱼骨先用高压锅进行高压蒸煮,然后用微波炉进行微波处理,再用烘箱进行烘干,接着用超微粉碎机进行粉碎,最后过100目筛,取筛下物,得到鱼骨粉;将苹果、胡萝卜和南瓜挑拣去除杂质,清洗干净,取可食用部分漂烫后用胶体磨研磨至粒度为5μm,得到果蔬泥;将鱼骨粉、果蔬泥、活性物质、蔗糖和麦芽糊精混合,得到混合物;将混合物先用成型设备或成型模具进行成型,然后进行真空冷冻干燥,得到休闲食品;
其中,所述酵母溶液由活性干酵母粉与水混合而得;所述酵母溶液中,活性干酵母粉的浓度为15g/L;所述酵母溶液与鱼骨的质量比为10:1;所述浸泡的时间为2h;所述高压蒸煮的压力为0.15MPa、温度为126℃、时间为35min;所述微波处理的功率为462W、时间为60s;所述烘干的温度为85℃、时间为2h;所述超微粉碎的时间为3h;所述漂烫为将可食用部分添加至烫漂液中,于90℃处理4min;所述烫漂液为异抗坏血酸钠溶液;所述异抗坏血酸钠溶液中,异抗坏血酸钠的质量占可食用部分总质量的0.5%;所述鱼骨粉、果蔬泥、活性物质、蔗糖和麦芽糊精的质量比为0.3kg:1kg:300mg:0.15kg:0.2kg;所述活性物质为岩藻多糖和/或海参多糖(岩藻多糖购自青岛明月海藻集团有限公司,海参多糖的制备方法见实施例2-1)。
此休闲食品中添加有岩藻多糖和/或海参多糖,由于岩藻多糖和/或海参多糖均能够显著抑制新冠病毒对细胞的感染,并且,岩藻多糖和/或海参多糖在休闲食品的加工过程中未经高温处理(真空冷冻干燥),活性不会受到影响,因此,此休闲食品也可预防和治疗新型冠状病毒感染。
此休闲食品中添加有鱼骨废弃物制备而得的鱼骨粉,因此,此休闲食品富含鱼骨钙。
虽然本发明已以较佳实施例公开如上,但其并非用以限定本发明,任何熟悉此技术的人,在不脱离本发明的精神和范围内,都可做各种的改动与修饰,因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。
Claims (10)
1.一种制备含多糖和鱼骨钙的休闲食品的方法,其特征在于,所述方法为在制备休闲食品的过程中添加活性物质;所述活性物质为岩藻多糖和/或海参多糖。
2.如权利要求1所述的一种制备含多糖和鱼骨钙的休闲食品的方法,其特征在于,所述方法为取鱼骨,将鱼骨浸泡于酵母溶液中去腥后清洗干净,得到去腥鱼骨;将去腥鱼骨经蒸煮、微波处理、烘干、粉碎,得到鱼骨粉;将水果和/或蔬菜漂烫后进行研磨,得到果蔬泥;将鱼骨粉、果蔬泥、活性物质、糖和麦芽糊精混合,得到混合物;将混合物经成型、干燥,得到休闲食品。
3.如权利要求2所述的一种制备含多糖和鱼骨钙的休闲食品的方法,其特征在于,所述酵母溶液由活性干酵母粉与水混合而得。
4.如权利要求2或3所述的一种制备含多糖和鱼骨钙的休闲食品的方法,其特征在于,所述酵母溶液中,活性干酵母粉的浓度为5~25g/L。
5.如权利要求2-4任一所述的一种制备含多糖和鱼骨钙的休闲食品的方法,其特征在于,所述酵母溶液与鱼骨的质量比为5~15:1。
6.如权利要求2-5任一所述的一种制备含多糖和鱼骨钙的休闲食品的方法,其特征在于,所述浸泡时间为0.5~2.5h。
7.如权利要求2-6任一所述的一种制备含多糖和鱼骨钙的休闲食品的方法,其特征在于,所述漂烫为将水果和/或蔬菜添加至烫漂液中,于85~98℃处理2~5min。
8.如权利要求2-7任一所述的一种制备含多糖和鱼骨钙的休闲食品的方法,其特征在于,所述鱼骨粉、果蔬泥、活性物质、糖和麦芽糊精的质量比为0.25~0.5kg:1kg:4~1000mg:0.1~0.2kg:0.1~0.5kg。
9.如权利要求2-8任一所述的一种制备含多糖和鱼骨钙的休闲食品的方法,其特征在于,所述干燥为真空冷冻干燥。
10.一种含多糖和鱼骨钙的休闲食品,其特征在于,所述休闲食品为使用权利要求1-9任一所述的方法制备而得。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202010729866.1A CN111713654A (zh) | 2020-07-27 | 2020-07-27 | 一种含多糖和鱼骨钙的休闲食品及其制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202010729866.1A CN111713654A (zh) | 2020-07-27 | 2020-07-27 | 一种含多糖和鱼骨钙的休闲食品及其制备方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN111713654A true CN111713654A (zh) | 2020-09-29 |
Family
ID=72573625
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202010729866.1A Pending CN111713654A (zh) | 2020-07-27 | 2020-07-27 | 一种含多糖和鱼骨钙的休闲食品及其制备方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN111713654A (zh) |
Citations (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101343332A (zh) * | 2008-08-20 | 2009-01-14 | 山东省科学院生物研究所 | 利用海参加工废液提取海参多糖的方法 |
CN102379400A (zh) * | 2011-10-17 | 2012-03-21 | 广西轻工业科学技术研究院 | 一种鱼骨膨化休闲食品及其制备方法 |
CN103087214A (zh) * | 2013-02-18 | 2013-05-08 | 浙江大学 | 低分子量海参岩藻聚糖硫酸酯的制备方法 |
CN103315330A (zh) * | 2013-06-27 | 2013-09-25 | 荣成宏业实业有限公司 | 鱼骨休闲食品的制备方法 |
CN104397768A (zh) * | 2014-12-11 | 2015-03-11 | 青岛德润电池材料有限公司 | 一种鱼骨休闲食品及其制备方法 |
CN104814985A (zh) * | 2015-05-13 | 2015-08-05 | 中国科学院海洋研究所 | 一种海藻多糖的应用 |
CN105831625A (zh) * | 2016-03-31 | 2016-08-10 | 佛山科学技术学院 | 一种即食鳕鱼骨的加工方法 |
CN106046188A (zh) * | 2016-07-04 | 2016-10-26 | 青岛吉海营养科技有限公司 | 一种岩藻多糖的制备方法 |
CN110089614A (zh) * | 2019-04-29 | 2019-08-06 | 浙江万里学院 | 一种食品级鱼蛋白粉及其制备方法 |
-
2020
- 2020-07-27 CN CN202010729866.1A patent/CN111713654A/zh active Pending
Patent Citations (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101343332A (zh) * | 2008-08-20 | 2009-01-14 | 山东省科学院生物研究所 | 利用海参加工废液提取海参多糖的方法 |
CN102379400A (zh) * | 2011-10-17 | 2012-03-21 | 广西轻工业科学技术研究院 | 一种鱼骨膨化休闲食品及其制备方法 |
CN103087214A (zh) * | 2013-02-18 | 2013-05-08 | 浙江大学 | 低分子量海参岩藻聚糖硫酸酯的制备方法 |
CN103315330A (zh) * | 2013-06-27 | 2013-09-25 | 荣成宏业实业有限公司 | 鱼骨休闲食品的制备方法 |
CN104397768A (zh) * | 2014-12-11 | 2015-03-11 | 青岛德润电池材料有限公司 | 一种鱼骨休闲食品及其制备方法 |
CN104814985A (zh) * | 2015-05-13 | 2015-08-05 | 中国科学院海洋研究所 | 一种海藻多糖的应用 |
CN105831625A (zh) * | 2016-03-31 | 2016-08-10 | 佛山科学技术学院 | 一种即食鳕鱼骨的加工方法 |
CN106046188A (zh) * | 2016-07-04 | 2016-10-26 | 青岛吉海营养科技有限公司 | 一种岩藻多糖的制备方法 |
CN110089614A (zh) * | 2019-04-29 | 2019-08-06 | 浙江万里学院 | 一种食品级鱼蛋白粉及其制备方法 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
LEONEL PEREIRA ET AL.: "The COVID 19 novel coronavirus pandemic 2020: seaweeds to the rescue? Why does substantial, supporting research about the antiviral properties of seaweed polysaccharides seemto go unrecognized by the pharmaceutical community in these desperate times?", 《JOURNAL OF APPLIED PHYCOLOGY》, pages 10811 - 020 * |
于广利等: "《糖药物学》", vol. 1, 中国海洋大学出版社, pages: 149 * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Rahimi et al. | Ulvan from green algae Ulva intestinalis: Optimization of ultrasound-assisted extraction and antioxidant activity | |
CN104757252B (zh) | 一种具有抗氧化活性的灰树花蛋白酶解物的制备方法 | |
CN104250285B (zh) | 一种大黄鱼鱼肉抗氧化肽及其制备方法和用途 | |
CN104480162A (zh) | 一种高效提取猴头菇多糖的方法 | |
CN107772076B (zh) | 一种虫草基饲用免疫增强剂及其制备方法 | |
CN115028750B (zh) | 泡叶藻岩藻多糖及其制备方法和应用 | |
Cho et al. | Sulfated polysaccharides from green seaweeds | |
US11130976B2 (en) | Method for preparing high productivity mushroom beta-glucan and products thereof | |
CN111713654A (zh) | 一种含多糖和鱼骨钙的休闲食品及其制备方法 | |
Karnjanapratum et al. | Production of fiber hydrolysate from bamboo shoot with antioxidative properties by enzymatic hydrolysis | |
Chiang et al. | A pilot scale study for banana starch production | |
CN109385098A (zh) | 一种新型可食用性果蔬保鲜膜的制备方法 | |
CN109452607B (zh) | 包含鲍鱼酶法提取物的调味汁及其制备方法 | |
CN105647993A (zh) | 一种液态低聚半乳糖醛酸果胶生产工艺 | |
CN114732835A (zh) | 一种多效性红藻全质提取物及其制备方法和应用 | |
CN111990651A (zh) | 一种含多糖的鱼粉含片及其制备方法 | |
CN111743128A (zh) | 一种含多糖的黑鱼汤产品及其制备方法 | |
CN111789253A (zh) | 一种3d打印制备功能性重组鱼排的方法 | |
CN107674130A (zh) | 一种从海带中提取海藻多糖的方法 | |
CN111838524A (zh) | 一种复配代餐粉及其制备方法 | |
CN111728071A (zh) | 一种含多糖的鱼谷夹心巧克力豆及其制备方法 | |
CN104450843B (zh) | 一种快速从河蚬中分离提取多肽多糖的方法 | |
CN108040939B (zh) | 一种控制贻贝重金属富集的暂养方法 | |
CN111154008A (zh) | 从人参工业生产残渣中提取具有免疫活性多糖的方法 | |
CN111700248A (zh) | 一种含多糖的椰子制品及其制备方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination |