CN111700913A - 药醋、美洲大蠊组合物及其制备方法和应用 - Google Patents

药醋、美洲大蠊组合物及其制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种药醋、美洲大蠊组合物及其制备方法和应用。本发明所提供的药醋其制备包括如下步骤：提供待发酵谷物原料、名酒菌系大曲和第一中药，第一中药选自补益药、理气药、疏肝药、清热解毒药、活血化淤药、软坚散结药、温阳补气药中的至少一种；将待发酵谷物原料与名酒菌系大曲混合，并依次进行酒精发酵、酒醪陈醅、醋酸发酵、醋醅陈醅、熏醅、淋醋、冻醋和陈酿，且在酒醪陈醅的步骤中和/或醋醅陈醅的步骤中加入第一中药。酒醪陈醅和/或醋醅陈醅含有丰富的微生物菌落，能够促进第一中药的成分转化，提高第一中药的利用率；同时，第一中药具有抗肿瘤活性，可应用于制备预防或治疗乳腺癌药物。

Description

药醋、美洲大蠊组合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于生物医药领域，具体涉及一种药醋、美洲大蠊组合物及其制备方法和应用。
背景技术
乳腺癌是严重危害女性身心健康的一种恶性肿瘤。随着生活习惯、饮食结构的改变以及晚婚晚育政策的推行，乳腺癌的发病率以年均3％-4％的速度不断增加，并呈年轻化趋势。乳腺癌病因病机复杂，无法根治，且预后较差，为一种难治性疾病。目前，能够有效地预防或治疗乳腺癌的药物仍然较少，手术、放疗和化疗仍然是当前的主要治疗手段，但是这些治疗方法的副作用一般较大，且预后较差。因而，本领域技术人员亟待研发一种副作用少，且具有良好疗效的乳腺癌药物。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的之一在于提供一种药醋，另一目的在于提供一种美洲大蠊组合物及其制备方法，以提供一种新型的乳腺癌药物。
为了实现上述发明目的，本发明一方面，提供了一种药醋，其制备包括如下步骤：
提供待发酵谷物原料、名酒菌系大曲和第一中药，所述第一中药选自补益药、理气药、疏肝药、清热解毒药、活血化淤药、软坚散结药、温阳补气药中的至少一种；
将所述待发酵谷物原料与所述名酒菌系大曲混合，并依次进行酒精发酵、酒醪陈醅、醋酸发酵、醋醅陈醅、熏醅、淋醋、冻醋和陈酿，且在所述酒醪陈醅的步骤中和/或所述醋醅陈醅的步骤中加入所述第一中药。
本发明提供的药醋，在待发酵谷物原料与名酒菌系大曲混合制醋过程中的酒醪陈醅和/或醋醅陈醅加入第一中药进行混合发酵，处于酒醪陈醅和/或醋醅陈醅过程中的发酵物含有丰富的微生物菌落，能够促进第一中药的成分转化，提高第一中药的利用率；同时，第一中药选自补益药、理气药、疏肝药、清热解毒药、活血化淤药、软坚散结药、温阳补气药中的至少一种，旨在通过理气、化湿、化痰、化瘀、解毒、软坚散结等法，促进肿瘤患者尤其是乳腺癌患者的治疗和康复。
另一方面，提供了一种美洲大蠊组合物，其原材料包括：美洲大蠊，以及上述药醋。
又一方面，提供了上述美洲大蠊组合物的制备方法，将所述美洲大蠊与所述药醋混合，进行发酵；
或，以所述药醋作为提取溶剂，将所述药醋与所述美洲大蠊混合并进行成分提取，所述成分提取为搅拌提取、浸泡提取、回流提取、渗漉提取、超声提取中的至少一种。
本发明提供的美洲大蠊组合物，其原材料包括：美洲大蠊，以及上述药醋。将美洲大蠊复配药醋，可使得本发明的美洲大蠊组合物具有良好的抗肿瘤活性，尤其是抑制乳腺癌生长和增殖的活性。在此基础上，本发明提供了该美洲大蠊组合物的制备方法，通过将美洲大蠊和药醋混合发酵，将该药醋作为发酵体系，促进了美洲大蠊的物质转化，提高了美洲大蠊的利用率，且由此得到的美洲大蠊组合物成分丰富；或，采用该药醋作为提取溶剂对美洲大蠊进行成分提取，以促进美洲大蠊活性成分的溶出，提高美洲大蠊活性成分的提取效率，并可通过提高活性成分的溶出来降低美洲大蠊的使用剂量，从而减小本发明美洲大蠊组合物的副作用。
又一方面，本发明还提供了，前述药醋在制备预防或治疗乳腺癌药物中的应用；或
上述美洲大蠊组合物在制备预防或治疗乳腺癌药物中的应用；或
上述制备方法得到的美洲大蠊组合物在制备预防或治疗乳腺癌药物中的应用。
经过药理活性筛选实验检测，本发明提供的药醋、美洲大蠊组合物，以及由上述制备方法得到的美洲大蠊组合物均具有良好的抑制乳腺癌活性，可应用于制备预防或治疗乳腺癌药物。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
本发明实施例说明书中所提到的各组分的质量不仅仅可以指代各组分的具体含量，也可以表示各组分间质量的比例关系，因此，只要是按照本发明实施例说明书组合物各组分的含量按比例放大或缩小均在本发明实施例说明书公开的范围之内。具体地，本发明实施例说明书中所述的质量可以是μg、mg、g、kg等医药领域公知的重量单位。
一方面，本发明实施例提供了一种药醋，其制备包括如下步骤：
S01、提供待发酵谷物原料、名酒菌系大曲和第一中药，所述第一中药选自补益药、理气药、疏肝药、清热解毒药、活血化淤药、软坚散结药、温阳补气药中的至少一种；
S02、将所述待发酵谷物原料与所述名酒菌系大曲混合，并依次进行酒精发酵、酒醪陈醅、醋酸发酵、醋醅陈醅、熏醅、淋醋、冻醋和陈酿，且在所述酒醪陈醅的步骤中和/或所述醋醅陈醅的步骤中加入所述第一中药。
本发明提供的药醋，在待发酵谷物原料与名酒菌系大曲混合制醋过程中的酒醪陈醅的步骤中和/或醋醅陈醅的步骤中加入第一中药进行混合发酵，处于酒醪陈醅和/或醋醅陈醅过程中的发酵物含有丰富的微生物菌落，能够促进第一中药的成分转化，提高第一中药的利用率；同时，第一中药选自补益药、理气药、疏肝药、清热解毒药、活血化淤药、软坚散结药、温阳补气药中的至少一种，旨在通过理气、化湿、化痰、化瘀、解毒、软坚散结等法，促进肿瘤患者尤其是乳腺癌患者的治疗和康复。
具体的，在步骤S01中，所述待发酵谷物原料为谷物原料用水浸润，并进行焖料后得到的产物。在一实施例中，所述谷物原料选为高粱。
所述名酒菌系大曲的“名酒”指的是中国1952年以来五次全国评酒会获得名酒称号的各种香型白酒，包括但不限于：茅台、五粮液、泸州老窖、剑南春、汾酒、洋河大曲、郎酒、古井贡酒、董酒、西凤酒、双沟大曲等，均在名酒产地环境下进行制备或者直接从当地的大曲制造商处购得。在一实施例中，所述名酒菌系大曲选为泸州中温大曲或茅台高温大曲，其微生物种类丰富。
所述第一中药选自补益药、理气药、疏肝药、清热解毒药、活血化淤药、软坚散结药、温阳补气药中的至少一种，具有补中益气、疏肝解郁、清热解毒、活血化淤、软坚散结、温阳补气等功效。中医学角度认为，肿瘤之发生多由身体内虚、六淫邪毒、饮食失调、内伤七情致身体机能失调，日久渐积而成。其常耗损正气、累及五脏、气血阴阳俱衰，故肿瘤的治疗原则应以扶正祛邪为主，攻补兼施。在实际应用过程中，可根据病理分型辩证，并依据中医治疗肿瘤疾病的疏肝理气法、活血化瘀法、健脾益肾法、软坚散结法、清热解毒法和益气养血法之一的治则进行“祛邪”，并辅以补中益气、健脾养胃、滋阴养血、补益肝肾以“扶正”。
作为优选，所述第一中药选自黄芪、党参、当归、茯苓、陈皮、白术、香附、柴胡、郁金、山茱萸、白花蛇舌草、夏枯草、蒲公英、穿山甲、贝母、王不留行、川芎、当归、附子、人参、美洲大蠊、穿山甲鳞片、土鳖虫、蜂房、水蛭、地龙、僵蚕、冬虫夏草、蝼蛄、海马、蛤蚧和生牡蛎中的至少一种。例如，采用健脾益肾法时，选择具有补中益气功效的中药，包括但不限于黄芪、党参和当归中的一种或多种；或选择具有理气健脾功效的中药，包括但不限于茯苓、陈皮和白术中的一种或多种。采用疏肝理气法时，选择具有疏肝解郁功效的中药，包括但不限于茯苓、陈皮和白术中的一种或多种。采用祛痰软坚法时，选择具有软坚散结功效的中药，包括但不限于穿山甲、贝母、王不留行中的一种或多种。采用清热解毒法时，选择具有清热解毒功效的中药，包括但不限于白花蛇舌草、夏枯草、蒲公英中的一种或多种。采用益气养血法时，选择具有温阳补气功效的中药，包括但不限于附子、人参中的一种或多种；或选择具有活血功效的中药，包括但不限于川芎、当归中的一种或多种。
在一实施例中，所述第一中药选为等量的黄芪、当归和人参，以及穿山甲鳞片；且黄芪和穿山甲鳞片的质量比为(2-3):(1-2)。黄芪补中益气，当归活血，人参养气，穿山甲鳞片软坚散结，旨在通过益气、养血、软坚来治疗由于正气亏虚引起邪客于乳络而导致的乳腺癌。
在另一实施例中，所述第一中药选为等量的白术、柴胡、山茱萸。白术理气健脾，柴胡疏肝解郁，山茱萸补益肝肾，旨在通过健脾、疏肝、补肾来调整恢复肝、脾、肾等正常功能。
具体的，在步骤S02中，将所述待发酵谷物原料依次进行酒精发酵、酒醪陈醅、醋酸发酵、醋醅陈醅、熏醅、淋醋、冻醋和陈酿为常规的制醋过程。在本实施例中，将待发酵谷物原料与名酒菌系大曲混合发酵，并在所述酒醪陈醅的步骤中和/或所述醋醅陈醅的步骤中加入所述第一中药，处于酒醪陈醅、醋醅陈醅过程中的发酵物含有丰富的微生物菌落，可为第一中药的发酵提供一个良好的发酵环境，促进第一中药的成分转化，提高第一中药的利用率，使得制备得到的药醋营养成分丰富。
在一实施例中，在所述酒醪陈醅的步骤中加入的所述第一中药为所述待发酵谷物原料总质量的3％-8％；
在所述醋醅陈醅的步骤中加入的所述第一中药为所述待发酵谷物原料总质量的1％-5％。
作为优选的实施方式，所述药醋的具体制备过程包括如下步骤：
1)在谷物原料中加水进行浸润，使其充分吸水，得浸润后的谷物原料；
2)在浸润后的所述谷物原料于100℃左右蒸料100-150min；然后，将蒸好的谷物原料加入所述谷物原料重量100％-240％的水，焖料15min-80min，得到所述待发酵谷物原料；
3)将所述谷物原料重量20％-70％的名酒菌系大曲加入所述待发酵原料中，混匀，再加入所述谷物原料总重量40％-70％的水，在28℃-35℃下发酵60天以上，得到酒醪；取所述酒醪，加入所述谷物原料总质量的3％-8％的第一中药，混合，进行酒醪陈醅至少1年；
4)加入所述谷物原料重量100％-300％的粮食加工皮类物质作为疏松材料，混匀，加入所述谷物原料重量5％-15％的发酵6-8天的醋醅进行醋酸发酵，发酵8-360天，得到醋醅；取所述醋醅，加入所述谷物原料总质量的1％-5％的第一中药，混合，进行醋醅陈醅至少3个月；
5)取25％-75％步骤4)得到的产物，于60℃-80℃下熏醅4-8天，得熏醅产物；
6)将剩余的所述醋醅中加入冷水和所述淋醋的淡醋液，使得总重量增加至原重量的2-3倍，浸泡12h以上，淋出醋液，得到第一醋液；将所述第一醋液加热至80℃-90℃，加入熏醅产物，浸泡10h以上，再次淋出醋液，得到第二醋液；
7)将步骤6)的第二醋液置于冷冻环境中进行冷冻，使其成为固态的醋块；然后，将所述醋块置于0-20℃的环境中，使其缓慢融化，收集流下的浓稠醋液；
8)将步骤7)收集的浓稠醋液放入陈酿缸中，露天陈酿至少12个月，得到九曲香酯醋。其中，陈酿缸底部的半固态或固态部分为醋膏，上部液态部分为醋液。
经过药理活性筛选，通过上述方法制得的所述药醋具有一定的抗乳腺癌活性，可作为一种新型的、药食同源的预防或治疗乳腺癌药物。同时，该药醋的酸度在6.0g/100mL以上，其酸度较高，具有良好的防腐效果，无需额外添加防腐剂，绿色健康。
另一方面，本发明还提供了一种美洲大蠊组合物，其原材料包括：美洲大蠊，以及上述药醋。
具体的，美洲大蠊具有散瘀解毒、抗菌消肿、保肝利水、增强免疫及抗肿瘤等功效，并能抑制肿瘤细胞的生长扩散，将该美洲大蠊与上述具有抗乳腺癌活性的药醋复配，使得本发明实施例的美洲大蠊组合物具有良好的抗肿瘤活性。其中，在本发明实施例中，所述美洲大蠊为美洲大蠊全体，或为鲜活虫体，或为干燥虫体，或为粉碎虫体。
在一实施例中，所述美洲大蠊为鲜活的美洲大蠊全体，也就是，利用美洲大蠊的全体入药，充分利用美洲大蠊的任一组成部分。进一步的，选择的美洲大蠊为经过饥饿处理一段时间，胃肠道几乎不含食物或粪便的美洲大蠊活体，以避免美洲大蠊所携带的外源性物质影响到发酵效果。更为具体的，在将美洲大蠊与药醋进行混合之前，对美洲大蠊依次进行清洗、灭活。例如，取停止喂食10-15天后的美洲大蠊成虫，然后使用清水喷淋清洗，沥干水分；对清洗干净的大蠊，使用上述药醋进行喷淋，降低美洲大蠊的活动能力。
在另一实施例中，所述美洲大蠊与所述药醋的重量比为(8-40):10。其中，所述美洲大蠊的重量为活体重量，所述药醋的种类优选为密度范围为1.2-1.3g/mL。在该比重范围内，所述美洲大蠊与所述药醋合理配伍，利于诱导美洲大蠊应激反应，产生特殊药用成分，达到最佳的药效。
具体的，上述药醋实质上为一种营养成分丰富的原浆醋，其酸度较高，可促进中药抗肿瘤活性成分的溶出，并通过增加活性成分的溶出减少美洲大蠊的使用剂量，减少大剂量用药带来的毒副作用；同时，从中医的角度来看，醋还可兼顾脾胃运健顾护、增强机体免疫力，确保气血生化有源，有效应对复杂病情，达到综合治疗目的。药醋与美洲大蠊协同作用，多靶点发挥药效，共同增强本发明实施例美洲大蠊组合物的抗乳腺癌活性。
在一实施例中，所述药醋的酸度在6.0g/100mL以上。食醋酸度较高，利于美洲大蠊活性成分的溶出，提高美洲大蠊活性成分的提取效率，且酸主收涩，可调和诸药，减少毒副作用。
作为优选的实施方式，本发明实施例的美洲大蠊组合物还包括：第二中药，所述第二中药与所述第一中药相同或各不相同；
所述第二中药选自补益药、理气药、疏肝药、清热解毒药、活血化淤药、软坚散结药、温阳补气药中的至少一种。
进一步的，所述第二中药选自黄芪、党参、当归、茯苓、陈皮、白术、香附、柴胡、郁金、山茱萸、白花蛇舌草、夏枯草、蒲公英、穿山甲、贝母、王不留行、川芎、当归、附子、人参、美洲大蠊、穿山甲鳞片、土鳖虫、蜂房、水蛭、地龙、僵蚕、冬虫夏草、蝼蛄、海马、蛤蚧和生牡蛎中的至少一种。
在一实施例中，所述美洲大蠊与所述第二中药的质量比为(1-3):(1-3)。在该质量比例范围内，各原料相须相使，科发挥最佳的药效。
在另一实施例中，所述第二中药过100目筛，利于与美洲大蠊、药醋等进行充分混合。
作为一优选的实施方式，所述第二中药选为等量的黄芪、当归和人参，以及穿山甲鳞片；且黄芪和穿山甲鳞片的质量比为(2-3):(1-2)。黄芪补中益气，当归活血，人参养气，穿山甲鳞片软坚散结，旨在通过益气、养血、软坚来治疗由于正气亏虚引起邪客于乳络而导致的乳腺癌。
作为另一优选的实施方式，所述第二中药选为等量的白术、柴胡、山茱萸。白术理气健脾，柴胡疏肝解郁，山茱萸补益肝肾，旨在通过健脾、疏肝、补肾来调整恢复肝、脾、肾等正常功能。
进一步的，本发明实施例所述的美洲大蠊组合物可以制成药学上可接受的剂型，包括但不限于水剂、丸剂、颗粒剂、片剂、粉末制剂、胶囊剂或栓剂。
在上述实施例的基础上，进一步的，本发明实施例的美洲大蠊组合物还包括药学上可接受的辅料。本发明实施例所述药学上可接受的辅料没有严格限制，可以根据制成的不同剂型进行调整，包括但不限于，稳定剂、粘合剂、润滑剂和崩解剂。作为优选，所述辅料为甘油、聚山梨酯、聚乙二醇、黄原胶、卡拉胶、蔗糖、乳糖、糊精、羧甲基纤维素钠、微晶纤维素、羟丙基甲基纤维素、交联聚维酮、聚丙烯酸树脂类聚合物、炼蜜、泊洛沙姆、硬脂酸镁中的至少一种。
经成分检测，在本发明实施例提供的美洲大蠊组合物中，多肽含量不低于8.0g/100g，氨基酸总量不低于4.0g/100g，总黄酮含量不低于400mg/100g。经过药理活性检测，本发明实施例的所述美洲大蠊组合物具有良好的抗肿瘤活性，抗乳腺癌效果明显。
在上述美洲大蠊组合物的基础上，本发明实施例还提供了一种该美洲大蠊组合物的制备方法，将所述美洲大蠊与所述药醋混合，进行发酵。
所述美洲大蠊组合物的制备方法，通过将美洲大蠊和药醋混合发酵，所述药醋作为发酵体系，促进了美洲大蠊的物质转化，提高了美洲大蠊的利用率，且由此得到的美洲大蠊组合物成分丰富。一方面，所述药醋可作为菌种来源，无需在发酵时额外加入其它微生物菌种参与发酵，简化操作；另一方面，其酸度较高，无需严格控制无菌环境，操作简便，可大规模生产。又一方面，所述药醋含有一定的醋酸，使得在发酵的同时还进行了成分提取，使得该美洲大蠊组合物的营养成分较为丰富，抗乳腺癌活性增强。
在一实施例中，所述发酵为厌氧发酵，例如，在密封环境下进行发酵，且其发酵的时间为至少一个月。在厌氧发酵过程中，容易激活发酵体系中的微生物或酶，进行非常规代谢途径，例如美洲大蠊肠道微生物产甲烷古菌的增值，经微弱的甲基化反应，产生支链脂肪酸，从而丰富发酵产物中的物质成分，提高药效。发酵时间的长短对发酵效果和药效均存在着较大的影响，发酵时间的增长利于提高发酵产物中活性物质的种类和提高药效，其中，发酵时间以1个月以上为最佳。
在另一实施例中，进行发酵之后，还对发酵产物进行匀浆均质。在一实施例中，所述匀浆采用超高压均质机。在另一实施例中，匀浆的转速优选为2000-4000rpm，并以10min为单位，连续匀浆1-3次。
作为优选，所述制备方法还包括：加入第二中药，所述第二中药选自补益药、理气药、疏肝药、清热解毒药、活血化淤药、软坚散结药、温阳补气药中的至少一种，且所述第二中药于所述混合与所述发酵之间和/或所述发酵之后加入。
进一步的，所述第二中药选自黄芪、党参、当归、茯苓、陈皮、白术、香附、柴胡、郁金、山茱萸、白花蛇舌草、夏枯草、蒲公英、穿山甲、贝母、王不留行、川芎、当归、附子、人参、美洲大蠊、穿山甲鳞片、土鳖虫、蜂房、水蛭、地龙、僵蚕、冬虫夏草、蝼蛄、海马、蛤蚧和生牡蛎中的至少一种。
在一实施例中，第二中药于所述混合与所述发酵之间加入，并与所述美洲大蠊和所述药醋混合发酵，之后进行匀浆均质，再加入适量的辅料成型。
在另一实施例中，发酵后进行匀浆均质，之后加入过100目筛的第二中药，混匀，加入适量的辅料成型；或
发酵后匀浆均质，再加入过100目筛的第二中药，混匀，密封炮制发酵一段时间，例如至少30天，收集发酵产物并再次进行匀浆均质；之后，加入适量的辅料成型；或
在又一实施例中，进行匀浆均质之后，加入过100目筛的第二中药，混匀，密封炮制发酵一段时间，例如至少30天，过滤，取滤液加入适量的辅料成型。
在上述美洲大蠊组合物的基础上，本发明实施例还提供了另一种该美洲大蠊组合物的制备方法，以所述药醋作为提取溶剂，将所述药醋与所述美洲大蠊混合并进行成分提取，所述成分提取为搅拌提取、浸泡提取、回流提取、渗漉提取、超声提取中的至少一种。
所述美洲大蠊组合物的制备方法，采用该药醋作为提取溶剂对美洲大蠊进行成分提取，以促进美洲大蠊活性成分的溶出，提高美洲大蠊活性成分的提取效率，并可通过提高活性成分的溶出来降低美洲大蠊的使用剂量，从而减小本发明美洲大蠊组合物的副作用。
又一方面，本发明还提供了，前述药醋在制备预防或治疗乳腺癌药物中的应用；或
上述美洲大蠊组合物在制备预防或治疗乳腺癌药物中的应用；或
上述制备方法得到的美洲大蠊组合物在制备预防或治疗乳腺癌药物中的应用。
通过进行人乳腺癌MCF-7细胞生长活性抑制试验，显示上述药醋、美洲大蠊组合物均具有良好的抗乳腺癌活性，能够抑制乳腺癌细胞的生长和增殖。
为使本发明上述实施细节和操作能清楚地被本领域技术人员理解，以及本发明实施例美洲大蠊提取物的制备方法和中药制剂及其应用的进步性能显著地体现，以下通过实施例对本发明的实施进行举例说明。
实施例1
本实施例提供了一种药醋，其制备过程包括如下步骤：
将高粱用水浸润，焖料，得到待发酵原料；然后，将该待发酵原料依次进行酒精发酵、酒醪陈醅、醋酸发酵、醋醅陈醅、熏醅、淋醋、冻醋和陈酿；
在酒醪陈醅时，加入高粱总质量6％的中药组合物，该中药组合物包括等量的黄芪、当归和穿山甲鳞片；
在醋醅陈醅时，加入高粱总质量3％的中药组合物，该中药组合物包括等量的黄芪、当归和穿山甲鳞片。
经过检测，该步骤制得的药醋的多肽含量为5.8g/100g，氨基酸总量3.4g/100g，总黄酮含量300mg/100g，且其总酸在6.0g/100mL以上。
实施例2
本实施例提供了一种美洲大蠊组合物，其制备包括如下步骤：
1)取停止喂食10-15天后的美洲大蠊成虫，使用清水喷淋清洗，沥干水分；对清洗干净的大蠊，使用实施例1的药醋进行喷淋，降低美洲大蠊的活动能力；将灭活的美洲大蠊放入发酵罐中，轻微压实，不留空隙。
2)取实施例1的药醋，然后将该药醋加入轻微压实有美洲大蠊的发酵罐中，至少使得药醋能够没过发酵罐内的美洲大蠊；其中，发酵罐中的美洲大蠊与药醋的混合质量比为1:1。
3)将发酵罐进行密封发酵1个月，取出发酵产物，采用超高压匀浆机进行匀浆均质，转速设为3000rpm。
经检测，在本实施例的美洲大蠊组合物中，多肽含量为7.8g/100g，氨基酸总量5.4g/100g，总黄酮含量460mg/100g。
实施例3
本实施例与实施例2的区别在于：在所述步骤3)匀浆均质之后，加入经过粉碎处理并过100目筛的黄芪、当归、人参和穿山甲鳞片，混匀，并加入适量蜂蜜等其他辅料，制成丸剂；其中，以匀浆均质产物100g计算，黄芪5g，当归5g，人参6g，穿山甲鳞片2g。
其余地方与实施例2基本相同，此处不再一一赘述。
经检测，在本实施例的组合制剂中，多肽含量为12.8g/100g，氨基酸总量6.5g/100g，总黄酮含量940mg/100g。
实施例4
本实施例提供了一种美洲大蠊组合物，其剂型为口服液。
本实施例与实施例2的区别在于：在所述步骤3)匀浆均质之后，加入经过粉碎处理并过100目筛的黄芪、当归、人参和穿山甲鳞片，混匀，再加入适量实施例1的药醋和适量其他辅料；其中，以匀浆均质产物100g计算，黄芪5g，当归5g，人参6g，穿山甲鳞片2g，药醋118g。
经检测，在本实施例的组合制剂中，多肽含量为12.0g/100g，氨基酸总量5.5g/100g，总黄酮含量1200mg/100g。
实施例5
本实施例与实施例2的区别在于：在所述步骤3)匀浆均质之后，加入经过粉碎处理并过100目筛的白术、柴胡和山茱萸，混匀，再于常温下密封静置30天；其中，以匀浆均质产物100g计算，白术5g，柴胡5g，山茱萸5g。
经检测，在本实施例的组合制剂中，多肽含量为10.0g/100g，氨基酸总量6.0g/100g，总黄酮含量780mg/100g。
测试例1
1、实验方法
(1)人乳腺癌MCF-7细胞培养
将装有人乳腺癌细胞株MCF-7细胞的冻存管置入37℃水中速溶，使细胞复苏，随机加入DMEM培养基，混匀，离心半径为13cm、800-1000r/min离心5分钟，弃上清，加入培养瓶，置入37℃、5％二氧化碳细胞培养箱中，次日对培养液进行更换，继续培养，通过显微镜观察其生长情况，见细胞呈对数生长时更换培养基，去除死亡细胞。采用胰蛋白酶对细胞进行消化处理，得到细胞混悬液，移至15ml离心管中，离心半径为13.5cm、1000r/min离心5分钟，去除上清液，加入1ml冻存液，吹打，使MCF-7细胞均匀悬浮于冻存液，标记后依次置入4℃保鲜柜1小时、-20℃冰箱3小时、-80℃冰箱6小时，取出后保存于-196℃液氮中。
(2)人乳腺癌MCF-7细胞复苏与计数
取出MCF-7细胞冻存管，快速置入37℃恒温水浴箱，晃动，使冻存液融化，吸出含有细胞的冻存液，置入15ml离心管，加入9ml完全培养基，吹打，离心半径为13.5cm、1000r/min离心5分钟，去除上清液，加入适量完全培养基，于培养瓶中接种，细胞浓度控制为(5～8)×105/ml。细胞计数公式为：细胞个数(ml)＝(四大格细胞总数/4)×2×104。
(3)实验方法
1)细胞接种：采用0.25％胰酶对人乳腺癌MCF-7细胞进行消化处理，在96个孔板中接种，1×104个/孔，置入37℃、5％CO2的培养箱培养24小时。
2)分组及药物干预：以生理盐水(0.15mol/L)为阴性对照组，以紫杉醇(0.15mol/L)为阳性对照组，以实施例3的美洲大蠊组合物(0.15mol/L)为实验组1，以实施例5的美洲大蠊组合物(0.15mol/L)为实验组2，以实施例1的美洲大蠊组合物(0.15mol/L)为实验组3，以实施例2的美洲大蠊组合物(0.15mol/L)为实验组4，以实施例4的美洲大蠊组合物(0.15mol/L)为实验组5。各组设置3次重复实验，48小时后测定450nm处的吸光度(A)。
2、实验结果测定
1)细胞抑制率公式：细胞抑制率(％)＝1-(实验组-空白组)/(对照组-空白组)。
2)细胞周期分布情况：选择1×105～1×106个细胞，接种于2ml离心管中，加入1ml生理盐水，离心半径为13.5cm、1200r/min离心5分钟，重复3次。加入50μl碘化丙锭，获得浓度为65μg/ml的混悬液，4℃环境下孵育染液30分钟，采用流式细胞仪测定细胞周期。
3、结果
1)三组细胞抑制率比较
实验组1的细胞抑制率为(73.02±0.89)％，实验组2的细胞抑制率为(71.02±0.56)％，显著高于紫杉醇组(57.82±2.75)％。
2)三组细胞周期分布情况比较
如表1结果所示，实验组1、实验组2的G1期细胞比例显著高于紫杉醇组(P均＜0.05)，而S期、G2期细胞比例均显著低于紫杉醇组(P均＜0.05)。
表1
Figure BDA0001997863260000141
Figure BDA0001997863260000151
注：与紫杉醇组比较，*P＜0.05；#P＜0.05
测试例2
成某，女，48岁，湖南张家界市人，职业：餐饮服务员，2016年8月确诊为乳腺癌，2017年5月，由于现有药物治疗无效，手术干预，2018年1月，复发，心情郁闷，病情加重，出现扩散。2018年4月份，经好友推荐服用本发明实施例2的制剂，早晚各1次，1月后，检查发现癌细胞未继续扩散，食用3月后，胸透发现癌变区域明显减少，精神状态明显好转，5个疗程后，以基本痊愈，现仍在服用九曲香酯醋。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种药醋，其特征在于，其制备包括如下步骤：
提供待发酵谷物原料、名酒菌系大曲和第一中药，所述第一中药选自补益药、理气药、疏肝药、清热解毒药、活血化淤药、软坚散结药、温阳补气药中的至少一种；
将所述待发酵谷物原料与所述名酒菌系大曲混合，并依次进行酒精发酵、酒醪陈醅、醋酸发酵、醋醅陈醅、熏醅、淋醋、冻醋和陈酿，且在所述酒醪陈醅的步骤中和/或所述醋醅陈醅的步骤中加入所述第一中药。
2.根据权利要求1所述的药醋，其特征在于，所述第一中药选自黄芪、党参、当归、茯苓、陈皮、白术、香附、柴胡、郁金、山茱萸、白花蛇舌草、夏枯草、蒲公英、穿山甲、贝母、王不留行、川芎、当归、附子、人参、美洲大蠊、穿山甲鳞片、土鳖虫、蜂房、水蛭、地龙、僵蚕、冬虫夏草、蝼蛄、海马、蛤蚧和生牡蛎中的至少一种。
3.根据权利要求1所述的药醋，其特征在于，在所述酒醪陈醅的步骤中加入的所述第一中药为所述待发酵谷物原料总质量的3％-8％；
在所述醋醅陈醅的步骤中加入的所述第一中药为所述待发酵谷物原料总质量的1％-5％。
4.一种美洲大蠊组合物，其特征在于，其原材料包括：美洲大蠊，以及权利要求1至3任一项所述药醋。
5.根据权利要求4所述的美洲大蠊组合物，其特征在于，所述美洲大蠊与所述药醋的重量比为(8-40):10；和/或
所述药醋的酸度在6.0g/100mL以上。
6.根据权利要求4或5所述的美洲大蠊组合物，其特征在于，其原材料还包括：第二中药，所述第二中药与所述第一中药相同或不相同；
所述第二中药选自补益药、理气药、疏肝药、清热解毒药、活血化淤药、软坚散结药、温阳补气药中的至少一种。
7.根据权利要求6所述的美洲大蠊组合物，其特征在于，所述美洲大蠊与所述第二中药的质量比为(1-3):(1-3)；和/或
所述第二中药选自黄芪、党参、当归、茯苓、陈皮、白术、香附、柴胡、郁金、山茱萸、白花蛇舌草、夏枯草、蒲公英、穿山甲、贝母、王不留行、川芎、当归、附子、人参、美洲大蠊、穿山甲鳞片、土鳖虫、蜂房、水蛭、地龙、僵蚕、冬虫夏草、蝼蛄、海马、蛤蚧和生牡蛎中的至少一种。
8.一种权利要求4至7任一项所述美洲大蠊组合物的制备方法，其特征在于，将所述美洲大蠊与所述药醋混合，进行发酵。
9.一种权利要求4至7任一项所述美洲大蠊组合物的制备方法，其特征在于，以所述药醋作为提取溶剂，将所述药醋与所述美洲大蠊混合并进行成分提取，所述成分提取为搅拌提取、浸泡提取、回流提取、渗漉提取、超声提取中的至少一种。
10.权利要求1至3任一项所述的药醋在制备预防或治疗乳腺癌药物中的应用；或
权利要求4至7任一项所述的美洲大蠊组合物在制备预防或治疗乳腺癌药物中的应用；或
权利要求8或9所述的制备方法得到的美洲大蠊组合物在制备预防或治疗乳腺癌药物中的应用。
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