CN111670995A - 一种小麦蛋白肽的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于小麦蛋白肽制备技术领域,具体涉及一种小麦蛋白肽的制备方法。本发明小麦蛋白肽的制备方法包括取乳酸和柠檬酸,加水,制得混合液;将小麦谷朊粉粉碎,过筛,将小麦谷朊微粉加入到混合液中,加入保护剂,得混合物料;将混合物料进行辐照处理,过滤,得沉淀物;将沉淀物进行冷冻处理,解冻,将解冻后的沉淀物阴干,研磨成细粉,过筛,得细粉;向细粉中加水,调pH,升温,分三次加入混合酶,酶解,进行酶灭活,冷却至25℃,得酶解液,将酶解液过滤,将滤液浓缩、干燥,得小麦蛋白肽成品。用本发明的方法制得的小麦蛋白肽的分子量分布窄,分子量低,本发明的方法不会破坏小麦蛋白分子链上的活性基团,有利于小麦蛋白肽生理活性的保持。
Description
技术领域
本发明属于小麦蛋白肽制备技术领域,具体涉及一种小麦蛋白肽的制备方法。
背景技术
随着人们对于生活质量要求越来越高,对饮食营养健康更加关注,活性分子肽已成为当代食品及营养学探究的一大热点,活性肽作为一种功能因子具有极其广阔的发展和应用前景。小麦是我国重要的粮食作物,小麦栽培遍及全国,在全国粮食总产值中小麦所占比重仅次于稻谷和玉米,居于第三位,产量和出口量都居世界前列。在众多的禾谷类作物中,小麦中的蛋白质含量十分丰富,约占小麦总质量的13%,高于其他粮种。因此,小麦是人们在日常生活中摄取蛋白质的主要来源之一。小麦蛋白主要由清蛋白、球蛋白、谷蛋白、醇溶蛋白组成。将小麦粉深加工以后能提取一种天然谷物蛋白,主要由麦胶蛋白和麦谷蛋白组成,干燥粉碎后为淡黄色的粉末,蛋白质所占的比重达75%~85%,含有人体必需的15种氨基酸,是一种营养丰富、物美价廉的植物蛋白源。经研究表明,人体摄入的蛋白质经自身消化系统中的酶作用后,并不是以氨基酸的形式被吸收,而更多的是以低肽的形式被吸收。许多蛋白肽不仅能提供人体生长发育所必须的营养与能量,还有着提高机体免疫力、降血压等广泛的生理活性。蛋白水解物或由蛋白水解物制备的活性肽类食品,具有易消化、易吸收、抗过敏性等特点。由于其自身特有的氨基酸组成,使得它的溶解性低,限制了小麦蛋白肽的应用。
目前,现有的制备小麦蛋白肽的方法存在产品分子量分布宽、水溶性差等缺点,影响产品的进一步推广应用。因此,亟需研发出一种可以使制得的产品分子量分布窄、水溶性好的小麦蛋白肽的制备方法。
发明内容
针对现有技术的不足,本发明的目的在于提供一种小麦蛋白肽的制备方法。通过本发明提供的小麦蛋白肽的制备方法所得产品的分子量分布窄,分子量低。且本发明提供的小麦蛋白肽的制备方法不会破坏小麦蛋白分子链上的活性基团,有利于小麦蛋白肽生理活性的保持。
本发明的技术方案是:
一种小麦蛋白肽的制备方法,包括以下步骤:
S1取乳酸和柠檬酸,加入乳酸和柠檬酸总质量10-15倍的水,搅拌均匀,得混合液;
S2将小麦谷朊粉粉碎,过80-120目筛,得小麦谷朊微粉,将小麦谷朊微粉加入到步骤S1所得混合液中,使小麦谷朊微粉的质量浓度为8-12%,搅拌均匀,加入保护剂,保护剂的添加量为S1所得混合液质量的0.1-0.4%,搅拌均匀,得混合物料;
S3将步骤S2所得混合物料置于辐照反应器中,密封,在常温常压下进行辐照处理,过滤,得沉淀物;
S4将步骤S3所得沉淀物进行冷冻处理,冷冻处理两次,第一次冷冻温度为-4℃,冷冻时间为1-3h,第二次冷冻温度为-12℃,冷冻时间为30-40min,解冻,将解冻后的沉淀物阴干,研磨成细粉,过50-60目筛,得细粉;
S5向步骤S4所得细粉中加水,水的添加量为细粉质量的15-20倍,调节pH至6.5-7.5,升温至40-45℃,分三次加入混合酶,每次加入的混合酶的量为细粉质量的0.1-0.2‰,每次酶解时间1h,升温至80℃进行酶灭活10min,冷却至25℃,得酶解液,将酶解液过滤,将滤液浓缩、干燥,得小麦蛋白肽成品。
进一步地,所述步骤S1中乳酸和柠檬酸的质量比为1-2:4-6。
进一步地,所述步骤S1中乳酸和柠檬酸的质量比为1:5。
进一步地,所述步骤S2中所述保护剂由维生素C和D-异抗坏血酸钠按质量比10-12:1-4组成。
进一步地,所述步骤S2中所述保护剂由维生素C和D-异抗坏血酸钠按质量比10:3组成。
进一步地,所述步骤S3中进行辐照处理时所用辐照源为60Co-γ射线,辐照剂量率为0.5kGy/h,辐照剂量为1-3kGy。
进一步地,所述步骤S5所述混合酶由纤维素酶、胃蛋白酶和菠萝蛋白酶按质量比12-15:4-6:1-2组成。
进一步地,所述步骤S5所述混合酶由纤维素酶、胃蛋白酶和菠萝蛋白酶按质量比13:5:2组成。
本发明中,通过将小麦谷朊粉加入到由乳酸和柠檬酸制成的混合液中,经辐照、冷冻等步骤处理后,可以将小麦蛋白的大分子片段打开,促进小麦蛋白的降解,促进可溶性肽的提取,增强小麦蛋白肽的水溶性。本发明中加入的由维生素C和D-异抗坏血酸钠按一定质量比组成的保护剂,可以避免后续辐照过程中对于小麦蛋白分子链上的活性基团的破坏,有利于低分子量小麦蛋白生理活性的保持。
在本发明中,混合液中的乳酸和柠檬酸能够协同作用,能够促进可溶性肽的提取,增强小麦蛋白肽的水溶性。将混合物料经过辐照处理,通过控制辐射源、辐照剂量,可以使小麦蛋白有效平稳地进行,并实现降解产物的分子量及其分布的控制,获得分子量分布窄,分子量低的产品。将辐照后的沉淀物经过两次冷冻处理,不仅有利于小分子量小麦蛋白肽的活性保持,还可以使小麦蛋白的结构由有序向无序转化,趋向于伸展,加速小麦蛋白肽的降解。将冷冻后的沉淀物阴干,研磨后的细粉加入混合酶,通过控制加入混合酶的次数、酶解时间、酶解pH、温度等条件,在有效提高小麦蛋白的断裂效果的同时还可以使反应平稳进行,使产品的分子量分布窄,均一性好。
与现有技术相比,本发明具有以下优势:
(1)通过本发明提供的小麦蛋白肽的制备方法所得产品的分子量分布窄,分子量低。
(2)本发明提供的小麦蛋白肽的制备方法方便,安全,经济,实用,易于产业化实施。
(3)本发明提供的小麦蛋白肽的制备方法不会破坏小麦蛋白分子链上的活性基团,有利于小麦蛋白肽生理活性的保持。
具体实施方式
以下通过具体实施方式的描述对本发明作进一步说明,但这并非是对本发明的限制,本领域技术人员根据本发明的基本思想,可以做出各种修改或改进,但是只要不脱离本发明的基本思想,均在本发明的范围之内。
本发明中所用原料如无特殊说明均为市售。如小麦谷朊粉可购自广州晶富生物工程有限公司,货号:102;纤维素酶可购自南宁庞博生物工程有限公司,货号:PBD-06-1;胃蛋白酶可购自南宁庞博生物工程有限公司,货号:PBD-01-6;菠萝蛋白酶可购自南宁庞博生物工程有限公司,货号:PBD-01-2。
实施例1、一种小麦蛋白肽的制备方法
所述小麦蛋白肽的制备方法包括以下步骤:
S1取乳酸和柠檬酸,乳酸和柠檬酸的质量比为1:6,加入乳酸和柠檬酸总质量10倍的水,搅拌均匀,得混合液;
S2将小麦谷朊粉粉碎,过80目筛,得小麦谷朊微粉,将小麦谷朊微粉加入到步骤S1所得混合液中,使小麦谷朊微粉的质量浓度为8%,搅拌均匀,加入保护剂,所述保护剂由维生素C和D-异抗坏血酸钠按质量比10:4组成,保护剂的添加量为S1所得混合液质量的0.1%,搅拌均匀,得混合物料;
S3将步骤S2所得混合物料置于辐照反应器中,密封,在常温常压下进行辐照处理,进行辐照处理时所用辐照源为60Co-γ射线,辐照剂量率为0.5kGy/h,辐照剂量为1kGy,过滤,得沉淀物;
S4将步骤S3所得沉淀物进行冷冻处理,冷冻处理两次,第一次冷冻温度为-4℃,冷冻时间为1h,第二次冷冻温度为-12℃,冷冻时间为30min,解冻,将解冻后的沉淀物阴干,研磨成细粉,过50目筛,得细粉;
S5向步骤S4所得细粉中加水,水的添加量为细粉质量的15倍,调节pH至6.5,升温至40℃,分三次加入混合酶,所述混合酶由纤维素酶、胃蛋白酶和菠萝蛋白酶按质量比12:6:2组成,每次加入的混合酶的量为细粉质量的0.1‰,每次酶解时间1h,升温至80℃进行酶灭活10min,冷却至25℃,得酶解液,将酶解液过滤,将滤液浓缩、干燥,得小麦蛋白肽成品。
实施例2、一种小麦蛋白肽的制备方法
所述小麦蛋白肽的制备方法包括以下步骤:
S1取乳酸和柠檬酸,乳酸和柠檬酸的质量比为2:4,加入乳酸和柠檬酸总质量15倍的水,搅拌均匀,得混合液;
S2将小麦谷朊粉粉碎,过120目筛,得小麦谷朊微粉,将小麦谷朊微粉加入到步骤S1所得混合液中,使小麦谷朊微粉的质量浓度为12%,搅拌均匀,加入保护剂,所述保护剂由维生素C和D-异抗坏血酸钠按质量比12:1组成,保护剂的添加量为S1所得混合液质量的0.4%,搅拌均匀,得混合物料;
S3将步骤S2所得混合物料置于辐照反应器中,密封,在常温常压下进行辐照处理,进行辐照处理时所用辐照源为60Co-γ射线,辐照剂量率为0.5kGy/h,辐照剂量为3kGy,过滤,得沉淀物;
S4将步骤S3所得沉淀物进行冷冻处理,冷冻处理两次,第一次冷冻温度为-4℃,冷冻时间为3h,第二次冷冻温度为-12℃,冷冻时间为40min,解冻,将解冻后的沉淀物阴干,研磨成细粉,过60目筛,得细粉;
S5向步骤S4所得细粉中加水,水的添加量为细粉质量的20倍,调节pH至7.5,升温至45℃,分三次加入混合酶,所述混合酶由纤维素酶、胃蛋白酶和菠萝蛋白酶按质量比15:4:1组成,每次加入的混合酶的量为细粉质量的0.2‰,每次酶解时间1h,升温至80℃进行酶灭活10min,冷却至25℃,得酶解液,将酶解液过滤,将滤液浓缩、干燥,得小麦蛋白肽成品。
实施例3、一种小麦蛋白肽的制备方法
所述小麦蛋白肽的制备方法包括以下步骤:
S1取乳酸和柠檬酸,乳酸和柠檬酸的质量比为1:5,加入乳酸和柠檬酸总质量13倍的水,搅拌均匀,得混合液;
S2将小麦谷朊粉粉碎,过110目筛,得小麦谷朊微粉,将小麦谷朊微粉加入到步骤S1所得混合液中,使小麦谷朊微粉的质量浓度为9%,搅拌均匀,加入保护剂,所述保护剂由维生素C和D-异抗坏血酸钠按质量比10:3组成,保护剂的添加量为步骤S1所得混合液质量的0.2%,搅拌均匀,得混合物料;
S3将步骤S2所得混合物料置于辐照反应器中,密封,在常温常压下进行辐照处理,进行辐照处理时所用辐照源为60Co-γ射线,辐照剂量率为0.5kGy/h,辐照剂量为1.5kGy,过滤,得沉淀物;
S4将步骤S3所得沉淀物进行冷冻处理,冷冻处理两次,第一次冷冻温度为-4℃,冷冻时间为2h,第二次冷冻温度为-12℃,冷冻时间为34min,解冻,将解冻后的沉淀物阴干,研磨成细粉,过60目筛,得细粉;
S5向步骤S4所得细粉中加水,水的添加量为细粉质量的18倍,调节pH至7.0,升温至42℃,分三次加入混合酶,所述混合酶由纤维素酶、胃蛋白酶和菠萝蛋白酶按质量比13:5:2组成,每次加入的混合酶的量为细粉质量的0.12‰,每次酶解时间1h,升温至80℃进行酶灭活10min,冷却至25℃,得酶解液,将酶解液过滤,将滤液浓缩、干燥,得小麦蛋白肽成品。
对比例1、一种小麦蛋白肽的制备方法
所述小麦蛋白肽的制备方法包括以下步骤:
S1取乳酸和柠檬酸,乳酸和柠檬酸的质量比为1:1,加入乳酸和柠檬酸总质量13倍的水,搅拌均匀,得混合液;
S2将小麦谷朊粉粉碎,过110目筛,得小麦谷朊微粉,将小麦谷朊微粉加入到步骤S1所得混合液中,使小麦谷朊微粉的质量浓度为9%,搅拌均匀,加入保护剂,所述保护剂由维生素C和D-异抗坏血酸钠按质量比10:3组成,保护剂的添加量为步骤S1所得混合液质量的0.2%,搅拌均匀,得混合物料;
S3将步骤S2所得混合物料置于辐照反应器中,密封,在常温常压下进行辐照处理,进行辐照处理时所用辐照源为60Co-γ射线,辐照剂量率为0.5kGy/h,辐照剂量为1.5kGy,过滤,得沉淀物;
S4将步骤S3所得沉淀物进行冷冻处理,冷冻处理两次,第一次冷冻温度为-4℃,冷冻时间为2h,第二次冷冻温度为-12℃,冷冻时间为34min,解冻,将解冻后的沉淀物阴干,研磨成细粉,过60目筛,得细粉;
S5向步骤S4所得细粉中加水,水的添加量为细粉质量的18倍,调节pH至7.0,升温至42℃,分三次加入混合酶,所述混合酶由纤维素酶、胃蛋白酶和菠萝蛋白酶按质量比13:5:2组成,每次加入的混合酶的量为细粉质量的0.12‰,每次酶解时间1h,升温至80℃进行酶灭活10min,冷却至25℃,得酶解液,将酶解液过滤,将滤液浓缩、干燥,得小麦蛋白肽成品。
所述小麦蛋白肽的制备方法与实施例3类似。
与实施例3的不同在于,所述步骤S1乳酸和柠檬酸的质量比为1:1。
对比例2、一种小麦蛋白肽的制备方法
所述小麦蛋白肽的制备方法包括以下步骤:
S1取柠檬酸,加入柠檬酸质量13倍的水,搅拌均匀,得溶液;
S2将小麦谷朊粉粉碎,过110目筛,得小麦谷朊微粉,将小麦谷朊微粉加入到步骤S1所得溶液中,使小麦谷朊微粉的质量浓度为9%,搅拌均匀,加入保护剂,所述保护剂由维生素C和D-异抗坏血酸钠按质量比10:3组成,保护剂的添加量为步骤S1所得溶液质量的0.2%,搅拌均匀,得混合物料;
S3将步骤S2所得混合物料置于辐照反应器中,密封,在常温常压下进行辐照处理,进行辐照处理时所用辐照源为60Co-γ射线,辐照剂量率为0.5kGy/h,辐照剂量为1.5kGy,过滤,得沉淀物;
S4将步骤S3所得沉淀物进行冷冻处理,冷冻处理两次,第一次冷冻温度为-4℃,冷冻时间为2h,第二次冷冻温度为-12℃,冷冻时间为34min,解冻,将解冻后的沉淀物阴干,研磨成细粉,过60目筛,得细粉;
S5向步骤S4所得细粉中加水,水的添加量为细粉质量的18倍,调节pH至7.0,升温至42℃,分三次加入混合酶,所述混合酶由纤维素酶、胃蛋白酶和菠萝蛋白酶按质量比13:5:2组成,每次加入的混合酶的量为细粉质量的0.12‰,每次酶解时间1h,升温至80℃进行酶灭活10min,冷却至25℃,得酶解液,将酶解液过滤,将滤液浓缩、干燥,得小麦蛋白肽成品。
所述小麦蛋白肽的制备方法与实施例3类似。
与实施例3的不同在于,所述步骤S1未加入乳酸。
对比例3、一种小麦蛋白肽的制备方法
所述小麦蛋白肽的制备方法包括以下步骤:
S1取乳酸和柠檬酸,乳酸和柠檬酸的质量比为1:5,加入乳酸和柠檬酸总质量13倍的水,搅拌均匀,得混合液;
S2将小麦谷朊粉粉碎,过110目筛,得小麦谷朊微粉,将小麦谷朊微粉加入到步骤S1所得混合液中,使小麦谷朊微粉的质量浓度为9%,搅拌均匀,得混合物料;
S3将步骤S2所得混合物料置于辐照反应器中,密封,在常温常压下进行辐照处理,进行辐照处理时所用辐照源为60Co-γ射线,辐照剂量率为0.5kGy/h,辐照剂量为1.5kGy,过滤,得沉淀物;
S4将步骤S3所得沉淀物进行冷冻处理,冷冻处理两次,第一次冷冻温度为-4℃,冷冻时间为2h,第二次冷冻温度为-12℃,冷冻时间为34min,解冻,将解冻后的沉淀物阴干,研磨成细粉,过60目筛,得细粉;
S5向步骤S4所得细粉中加水,水的添加量为细粉质量的18倍,调节pH至7.0,升温至42℃,分三次加入混合酶,所述混合酶由纤维素酶、胃蛋白酶和菠萝蛋白酶按质量比13:5:2组成,每次加入的混合酶的量为细粉质量的0.12‰,每次酶解时间1h,升温至80℃进行酶灭活10min,冷却至25℃,得酶解液,将酶解液过滤,将滤液浓缩、干燥,得小麦蛋白肽成品。
所述小麦蛋白肽的制备方法与实施例3类似。
与实施例3的不同在于,所述步骤S2未加入保护剂。
对比例4、一种小麦蛋白肽的制备方法
所述小麦蛋白肽的制备方法包括以下步骤:
S1取乳酸和柠檬酸,乳酸和柠檬酸的质量比为1:5,加入乳酸和柠檬酸总质量13倍的水,搅拌均匀,得混合液;
S2将小麦谷朊粉粉碎,过110目筛,得小麦谷朊微粉,将小麦谷朊微粉加入到步骤S1所得混合液中,使小麦谷朊微粉的质量浓度为9%,搅拌均匀,加入保护剂,所述保护剂由维生素C和D-异抗坏血酸钠按质量比10:3组成,保护剂的添加量为步骤S1所得混合液质量的0.2%,搅拌均匀,得混合物料;
S3将步骤S2所得混合物料置于辐照反应器中,密封,在常温常压下进行辐照处理,进行辐照处理时所用辐照源为60Co-γ射线,辐照剂量率为0.5kGy/h,辐照剂量为1.5kGy,过滤,得沉淀物;
S4将步骤S3所得沉淀物阴干,研磨成细粉,过60目筛,得细粉;
S5向步骤S4所得细粉中加水,水的添加量为细粉质量的18倍,调节pH至7.0,升温至42℃,分三次加入混合酶,所述混合酶由纤维素酶、胃蛋白酶和菠萝蛋白酶按质量比13:5:2组成,每次加入的混合酶的量为细粉质量的0.12‰,每次酶解时间1h,升温至80℃进行酶灭活10min,冷却至25℃,得酶解液,将酶解液过滤,将滤液浓缩、干燥,得小麦蛋白肽成品。
所述小麦蛋白肽的制备方法与实施例3类似。
与实施例3的不同在于,未对步骤S3所得沉淀物进行冷冻处理。
对比例5、一种小麦蛋白肽的制备方法
所述小麦蛋白肽的制备方法包括以下步骤:
S1取乳酸和柠檬酸,乳酸和柠檬酸的质量比为1:5,加入乳酸和柠檬酸总质量13倍的水,搅拌均匀,得混合液;
S2将小麦谷朊粉粉碎,过110目筛,得小麦谷朊微粉,将小麦谷朊微粉加入到步骤S1所得混合液中,使小麦谷朊微粉的质量浓度为9%,搅拌均匀,加入保护剂,所述保护剂由维生素C和D-异抗坏血酸钠按质量比10:3组成,保护剂的添加量为步骤S1所得混合液质量的0.2%,搅拌均匀,得混合物料;
S3将步骤S2所得混合物料置于辐照反应器中,密封,在常温常压下进行辐照处理,进行辐照处理时所用辐照源为60Co-γ射线,辐照剂量率为0.5kGy/h,辐照剂量为1.5kGy,过滤,得沉淀物;
S4将步骤S3所得沉淀物进行冷冻处理,冷冻处理两次,第一次冷冻温度为-4℃,冷冻时间为2h,第二次冷冻温度为-12℃,冷冻时间为34min,解冻,将解冻后的沉淀物阴干,研磨成细粉,过60目筛,得细粉;
S5向步骤S4所得细粉中加水,水的添加量为细粉质量的18倍,调节pH至7.0,升温至42℃,加入混合酶,所述混合酶由纤维素酶和胃蛋白酶按质量比13:5组成,加入的混合酶的量为细粉质量的0.36‰,酶解时间3h,升温至80℃进行酶灭活10min,冷却至25℃,得酶解液,将酶解液过滤,将滤液浓缩、干燥,得小麦蛋白肽成品。
所述小麦蛋白肽的制备方法与实施例3类似。
与实施例3的不同在于,所述步骤S5中一次性加入混合酶,所述混合酶由纤维素酶和胃蛋白酶按质量比13:5组成。
试验例一、分子量、分散度的测定
1、试验材料:实施例3、对比例4、对比例5制备的小麦蛋白肽。
2、试验方法:
用高效液相色谱仪测定实施例3、对比例4、对比例5制备的小麦蛋白肽的分子量。用高效液相色谱法测分子量,色谱条件:色谱柱为TSK G3000PW凝胶色谱柱;测定条件:其流动相为乙腈/水/三氟乙酸(体积比:10:90:0.1),流速为0.5mL/min,柱温为30℃,进样量10μL。
3、试验结果:
试验结果如表1和表2所示。
表1:分子量测定结果
组别 | 实施例3 | 对比例4 | 对比例5 |
分子量 | 462 | 738 | 1524 |
由表1可以看出,本发明实施例3制备的小麦蛋白肽的分子量明显低于对比例4、对比例5制备的小麦蛋白肽的分子量。由此可见,通过本发明提供的小麦蛋白肽的制备方法得到的小麦蛋白肽的分子量较低。
表2:分散度测定结果
组别 | 实施例3 | 对比例4 | 对比例5 |
分散度 | 1.03 | 1.07 | 1.33 |
由表2可以看出,本发明实施例3制备的小麦蛋白肽的分散度明显低于对比例4、对比例5制备的小麦蛋白肽的分散度。这说明,通过本发明提供的小麦蛋白肽的制备方法得到的小麦蛋白肽的分子量分布窄。
试验例二、溶解度的测定
1、试验材料:实施例3、对比例1、对比例2制备的小麦蛋白肽。
2、试验方法:
采用福林酚试剂法测定制得的小麦蛋白肽的溶解度。分别称取0.50g实施例3、对比例1、对比例2制备的小麦蛋白肽于50mL不同pH(2~12)的溶液中,磁力搅拌30min,在10000r/min下离心15min,采用福林酚法测其溶解度。溶解度的计算公式为:溶解度(%)=[蛋白质含量(μg·mL-1)×上清液体积(mL)×10-6×稀释倍数]/(W×样品中粗蛋白质含量(湿基%))×100%。
3、试验结果:
试验结果如表3所示。
表3:溶解度测定结果
由表3可以看出,本发明实施例3制备的小麦蛋白肽在pH2~12范围内均具有良好的溶解度。采用本发明制备的小麦蛋白肽的溶解度明显高于对比例1、对比例2制备的小麦蛋白肽的溶解度。这说明,通过本发明提供的小麦蛋白肽的制备方法得到的小麦蛋白肽具有优异的溶解性。
试验例三、抗疲劳试验
1、试验材料:实施例3、对比例3、对比例4制备的小麦蛋白肽。
2、试验对象:健康雄性昆明系小鼠40只,2月龄,体重20g。
3、试验方法:
将40只小鼠随机分成四组,每组10只,分别为空白对照组、实施例3组、对比例3组、对比例4组。实施例3组、对比例3组、对比例4组每天给小鼠摄入98%基础饲料+2%小麦蛋白肽,空白对照组每天给小鼠摄入基础饲料,连续喂养七周。末次灌胃10h后,对各组小鼠分别称重,然后每只尾部系体重9%的负重,放入水深40cm、水温27℃水池中进行游泳测验,记录小鼠在水中持续游泳的时间(至小鼠头部沉入水面以下7s后不再上浮为准)。
4、试验结果:
试验结果如表4所示。
表4:抗疲劳试验结果
组别 | 空白对照组 | 实施例3组 | 对比例3组 | 对比例4组 |
游泳时间(min) | 2.42 | 4.36 | 3.45 | 3.21 |
由表4可以看出,与对比例3组、对比例4组相比,实施例3组的小鼠的游泳时间明显较高。由此可见,通过本发明提供的小麦蛋白肽的制备方法得到的小麦蛋白肽具有显著的抗疲劳作用。
Claims (8)
1.一种小麦蛋白肽的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1取乳酸和柠檬酸,加入乳酸和柠檬酸总质量10-15倍的水,搅拌均匀,得混合液;
S2将小麦谷朊粉粉碎,过80-120目筛,得小麦谷朊微粉,将小麦谷朊微粉加入到步骤S1所得混合液中,使小麦谷朊微粉的质量浓度为8-12%,搅拌均匀,加入保护剂,保护剂的添加量为S1所得混合液质量的0.1-0.4%,搅拌均匀,得混合物料;
S3将步骤S2所得混合物料置于辐照反应器中,密封,在常温常压下进行辐照处理,过滤,得沉淀物;
S4将步骤S3所得沉淀物进行冷冻处理,冷冻处理两次,第一次冷冻温度为-4℃,冷冻时间为1-3h,第二次冷冻温度为-12℃,冷冻时间为30-40min,解冻,将解冻后的沉淀物阴干,研磨成细粉,过50-60目筛,得细粉;
S5向步骤S4所得细粉中加水,水的添加量为细粉质量的15-20倍,调节pH至6.5-7.5,升温至40-45℃,分三次加入混合酶,每次加入的混合酶的量为细粉质量的0.1-0.2‰,每次酶解时间1h,升温至80℃进行酶灭活10min,冷却至25℃,得酶解液,将酶解液过滤,将滤液浓缩、干燥,得小麦蛋白肽成品。
2.如权利要求1所述的小麦蛋白肽的制备方法,其特征在于,所述步骤S1中乳酸和柠檬酸的质量比为1-2:4-6。
3.如权利要求2所述的小麦蛋白肽的制备方法,其特征在于,所述步骤S1中乳酸和柠檬酸的质量比为1:5。
4.如权利要求1所述的小麦蛋白肽的制备方法,其特征在于,所述步骤S2中所述保护剂由维生素C和D-异抗坏血酸钠按质量比10-12:1-4组成。
5.如权利要求4所述的小麦蛋白肽的制备方法,其特征在于,所述步骤S2中所述保护剂由维生素C和D-异抗坏血酸钠按质量比10:3组成。
6.如权利要求1所述的小麦蛋白肽的制备方法,其特征在于,所述步骤S3中进行辐照处理时所用辐照源为60Co-γ射线,辐照剂量率为0.5kGy/h,辐照剂量为1-3kGy。
7.如权利要求1所述的小麦蛋白肽的制备方法,其特征在于,所述步骤S5所述混合酶由纤维素酶、胃蛋白酶和菠萝蛋白酶按质量比12-15:4-6:1-2组成。
8.如权利要求7所述的小麦蛋白肽的制备方法,其特征在于,所述步骤S5所述混合酶由纤维素酶、胃蛋白酶和菠萝蛋白酶按质量比13:5:2组成。
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