CN111658581A - 包含根系植物混合发酵提取物的皮肤改善用化妆品组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及包含牛蒡、蒲公英、知母、葛根及莲藕混合发酵提取物作为有效成分的具有优秀的皮肤改善效果的化妆品组合物，由于上述牛蒡、蒲公英、知母、葛根及莲藕混合发酵提取物具有优秀的皮肤皱纹改善效果、保湿效果、皮肤再生效果，因此可有效地用作抗老化化妆品。
Description
技术领域
本发明涉及包含根系植物混合发酵提取物作为有效成分的化妆品组合物，具体地，涉及包含作为根系植物的牛蒡、蒲公英、知母、葛根及莲藕混合发酵提取物的具有优秀的皮肤改善效果的化妆品组合物。
背景技术
细胞在作为皮肤表皮的最底层的基底层生成，并渐渐上升达到作为最顶层的角质层后再次脱落，将此过程称为皮肤再生周期，即更新。在一般情况下，皮肤平均每月自然再生一次。皮肤通过自我再生和脱落来换成健康的细胞。儿童的皮肤更新周期为1～2周左右，20～30岁年龄段逐渐增加为3～4周，因此老旧角质可能容易积累。并且，不仅是年龄，而且睡眠不足、饮酒、吸烟等不良习惯也会成为导致皮肤再生减慢的原因。由于各种原因减缓了皮肤再生的过程，从而导致死细胞残留在皮肤表面并阻止新细胞生长。因此，皮肤不能顺利更换新细胞，导致出现因产生黑斑而变得暗沉，或者产生皱纹且弹性下降等皮肤问题。
本发明人在研究具有皮肤改善效果的天然物质的过程中，通过制备牛蒡、蒲公英、知母、葛根及莲藕混合提取物来对其活性进行了研究，此时，牛蒡、蒲公英、知母、葛根及莲藕混合发酵提取物具有优秀的皮肤改善效果，因此可有效地用作化妆品，从而完成了本发明。
现有技术文献
专利文献
专利文献0001：(0001)韩国公开专利第10-2016-0054668号(2016年5月17日)
专利文献0002：(0002)韩国授权专利第10-1308669号(2013年9月13日)
发明内容
本发明的目的在于，提供包含牛蒡、蒲公英、知母、葛根及莲藕混合发酵提取物作为有效成分的具有优秀的皮肤改善效果的化妆品组合物。
为了实现上述目的，在本发明中，提供相对于化妆品组合物总重量，包含0.01～90重量百分比的牛蒡、蒲公英、知母、葛根及莲藕混合发酵提取物的化妆品组合物。
上述混合发酵提取物为通过提取牛蒡、蒲公英、知母、葛根及莲藕的混合物来制备混合提取物后，将酵母菌接种于上述混合提取物并通过发酵制备而成。最优选地，利用酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)进行发酵。
上述混合提取物为牛蒡、蒲公英、知母、葛根及莲藕的热水提取物或者为通过选自由水、碳数为1～4的低级醇、乙酸乙酯、甘油、乙二醇、丙二醇及丁二醇组成的组中的至少一种溶剂的溶剂提取物。更优选地，上述混合提取物为通过水和碳数为1～4的醇的混合溶剂提取的提取物。
上述混合提取物为分别以1～5：1～5：1～5：1～5：1～5的重量比混合牛蒡、蒲公英、知母、葛根及莲藕并提取而成。
上述化妆品组合物的特征在于，用于改善皮肤皱纹、用于皮肤保湿、用于皮肤细胞增殖或用于皮肤再生。
本发明的牛蒡、蒲公英、知母、葛根及莲藕混合发酵提取物的皱纹改善、保湿、皮肤细胞增殖及皮肤再生效果优秀，因此可有效地用作皮肤改善用化妆品。
具体实施方式
以下，进一步详细说明本发明。
本发明涉及包含牛蒡、蒲公英、知母、葛根及莲藕混合发酵提取物作为有效成分的化妆品组合物。
牛蒡(Arctium lappa)是富含糖质的碱性食品，菊粉成分丰富并富含纤维质，从而使血液循环顺畅。牛蒡的皮中含有皂苷，可防止细菌或昆虫，当受伤时具有自我治愈的再生效果。在本发明中使用牛蒡根。
蒲公英(Taraxacum Officinale)为干燥菊科的蒲公草(Taraxacum platycarpumH.Dahlstedt)或同属植物的全草得到的药草，这是由蒲公用它来治疗肿疮见效而起的名。当受伤或具有肿疮时，将其熬制服用或捣汁涂抹在患处时具有很好的功效，并具有防止细菌感染的效果。并且，由于具有解毒功效，因此可应用于各种炎症性疾病。
知母(Anemarrhena asphodeloide)属于百合科的多年生草本，将根茎用作药材，在中医药中配方中用于清热、糖尿、消炎等。并且，由于可以降火并增强阴气，因此当发烧时有效地使用于皮肤疾病。
葛(Pueraria thunbergiana)为豆科的多年生落叶蔓藤树木，在中医药中将其根称为葛根。在韩国内山区随处可见的葛的藤茂盛且根部深入地下，具有强大的生命力，大多数茎即使在冬天也不会冻结而可存活的生命力极强的植物。葛根中含有糖分、纤维质、蛋白质等，已知吸水的能力极强，且具有抗氧化、皱纹缓解等效果。
莲花(Nelumbo Nucifera)为莲花科的植物，生存在沼泽或池塘的多年生草，将莲花的根称为莲藕(莲根)。莲花即使在污浊且肮脏的泥泞中扎根生长，也保持清洁的状态并具有净化泥土的强大的自洁能力。莲藕中含有多种生理活性成分，如粘蛋白、粘液、膳食纤维。
在本发明中，提供包含牛蒡、蒲公英、知母、葛根及莲藕混合发酵提取物作为有效成分的皮肤改善化妆品组合物。牛蒡、蒲公英、知母、葛根及莲藕混合提取物本身具有优秀的皮肤改善活性，但是确认了它们的混合发酵提取物具有更优秀的皮肤改善活性。
上述发酵提取物为通过混合牛蒡、蒲公英、知母、葛根及莲藕来提取后，或者提取的同时进行发酵来制备而成。作为发酵菌株使用酵母菌，更优选地使用酿酒酵母。上述发酵提取物具有优秀的皱纹改善、皮肤保湿、皮肤细胞增殖及皮肤再生活性。
在本发明一具体例中，首先，分别以1～5：1～5：1～5：1～5：1～5的重量比混合牛蒡、蒲公英、知母、葛根及莲藕来制备混合物。利用选自由水、碳数为1～4的低级醇、乙酸乙酯、甘油、乙二醇、丙二醇及丁二醇组成的组中的至少一种溶剂，优选地，利用水和碳数为1～4的醇的混合溶剂提取上述混合物来制备混合提取物。
在上述混合提取物中接种酿酒酵母，并在22～28℃的温度下发酵3～5天。灭菌后通过过滤浓缩制备混合发酵提取物。分别以1：2：1：2：1的重量比混合牛蒡、蒲公英、知母、葛根及莲藕来进行提取，并利用酿酒酵母来进行发酵的情况下，在其收率或皱纹改善、保湿、皮肤细胞增殖及皮肤再生效果方面，示出最好的效果。
相对于化妆品组合物总重量，包含0.01～90重量百分比的由此制备的牛蒡、蒲公英、知母、葛根及莲藕混合发酵提取物作为有效成分。
由此制备的牛蒡、蒲公英、知母、葛根及莲藕混合发酵提取物通过基于混合的协同效应和基于发酵的效果的提高，而具有更优秀的皱纹相关因子表达增加效果(试验例1)、保湿相关因子表达增加效果(试验例2)、皮肤细胞增殖效果(试验例3)及皮肤细胞再生效果(试验例4)。
包含本发明的牛蒡、蒲公英、知母、葛根及莲藕混合发酵提取物的化妆品组合物，可制备成常规制备的任何剂型，作为其例可列举化妆水、乳霜、乳液、洗面奶、卸妆水、面膜、身体乳、身体油、身体凝胶、洗发水、护发素、护发精、发胶、粉底、口红、睫毛膏、隔离霜、面膜贴、防晒产品、香皂等。
实施例
以下，通过下述实施例和试验例详细说明本发明，但是本发明并不限定于此。
实施例1：制备牛蒡、蒲公英、知母、葛根及莲藕混合发酵提取物
分别准备干燥的牛蒡、蒲公英、知母、葛根及莲藕各30g，利用纯净水清洗后，干燥混合，并与比例为7：3(w/w)的乙醇和纯净水的混合溶剂500g进行混合。将其混合物沉淀3天，在配备有冷凝器的提取器于100℃的温度下煮沸8小时来提取。在提取物中接种酿酒酵母后，在25℃的温度下发酵3天后，在95℃的温度下灭菌1小时，然后利用滤纸(定性滤纸NO.2(Qualitive Filter Papers NO.2))过滤后以滤液状态获得。
实施例2～10：制备根据混合比例的牛蒡、蒲公英、知母、葛根及莲藕混合发酵提取物
将干燥的牛蒡、蒲公英、知母、葛根及莲藕的重量比调成如下述表1所示，并以与实施例1相同的方法制备混合发酵提取物。
表1
| 区分 | 混合比例 | 收率(％) |
| 实施例2 | 牛蒡：蒲公英：知母：葛根：莲藕＝1：2：1：1：1 | 73 |
| 实施例3 | 牛蒡：蒲公英：知母：葛根：莲藕＝1：1：1：2：1 | 83 |
| 实施例4 | 牛蒡：蒲公英：知母：葛根：莲藕＝1：2：1：2：1 | 98 |
| 实施例5 | 牛蒡：蒲公英：知母：葛根：莲藕＝2：2：1：1：1 | 72 |
| 实施例6 | 牛蒡：蒲公英：知母：葛根：莲藕＝2：3：1：1：1 | 60 |
| 实施例7 | 牛蒡：蒲公英：知母：葛根：莲藕＝2：2：1：3：1 | 57 |
| 实施例8 | 牛蒡：蒲公英：知母：葛根：莲藕＝3：1：1：2：1 | 72 |
| 实施例9 | 牛蒡：蒲公英：知母：葛根：莲藕＝3：2：1：1：1 | 50 |
| 实施例10 | 牛蒡：蒲公英：知母：葛根：莲藕＝4：1：1：1：1 | 48 |
比较例1：牛蒡发酵提取物的制备
利用纯净水清洗150g的干燥的牛蒡之后干燥，并与比例为7：3(w/w)的乙醇和纯净水的混合溶剂500g进行了混合。将其混合物沉淀3天，在配备有冷凝器的提取器于100℃的温度下煮沸8小时来提取。在提取物中接种酿酒酵母后，在25℃的温度下发酵3天后，在95℃的温度下灭菌1小时，然后利用滤纸(Qualitive Filter Papers NO.2)过滤后以滤液状态获得。
比较例2：蒲公英发酵提取物的制备
除了使用150g的干燥的蒲公英之外，以与上述比较例1相同的方法制备了蒲公英发酵提取物。
比较例3：知母发酵提取物的制备
除了使用150g的干燥的知母之外，以与上述比较例1相同的方法制备了知母发酵提取物。
比较例4：葛根发酵提取物的制备
除了使用150g的干燥的葛根之外，以与上述比较例1相同的方法制备了葛根发酵提取物。
比较例5：莲藕发酵提取物的制备
除了使用150g的干燥的莲藕之外，以与上述比较例1相同的方法制备了莲藕发酵提取物。
比较例6：制备牛蒡、蒲公英、知母、葛根及莲藕混合提取物
准备干燥的牛蒡、蒲公英、知母、葛根及莲藕并利用纯净水清洗后干燥，并以示出最高收率的上述实施例4的比例进行混合，与比例为7：3(w/w)的乙醇和纯净水的混合溶剂500g进行了混合。将其混合物沉淀3天，在配备有冷凝器的提取器于100℃的温度下煮沸8小时来提取。除了不用酵母发酵之外，以与上述实施例4的方法相同的方法来制备。
比较例7：制备牛蒡、蒲公英、知母、葛根及莲藕乳酸菌发酵混合提取物
除了在实施例4的方法中使用乳酸菌(Lactobacillus plantarum)代替酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)来进行发酵之外，以与实施例4的方法相同的方法进行，从而制备了乳酸菌发酵牛蒡、蒲公英、知母、葛根及莲藕混合发酵提取物。
比较例8：制备牛蒡、蒲公英、知母、葛根及莲藕醋精发酵混合提取物
在以与实施例4的方法相同的方式混合干燥的牛蒡、蒲公英、知母、葛根及莲藕的试样中加入900g的含1％的糙米醋(韩国不倒翁(OTTOGI)公司出品，总酸度为6～7％)的纯净水并使其浸泡在溶液中，由此在室温下浸渍1天。随后，利用滤纸(Qualitive FilterPapers NO.2)过滤后以滤液状态获得，从而制备了醋精发酵牛蒡、蒲公英、知母、葛根及莲藕混合醋精发酵提取物。
试验例1：确认皱纹相关因子表达增加
利用添加低血清生长补充剂(Low Serum Growth Supplement，LSGS)的Medium106培养基将成纤维细胞(HDFa)调至5×106细胞/孔(cell/well)后，接种于6孔板(wellplate)并培养了24小时。培养后，处理上述实施例及比较例的试样并培养了48小时。在培养的细胞中提取核糖核酸(RNA)并通过逆转录聚合酶链反应(Reverse transcriptionpolymerase chain reaction，RT-PCR)确认了胶原蛋白(collagen)的表达增加率。胶原表达增加率通过下式来计算，其结果如下述表2所示。作为对照组使用了棕榈酸酯(retinolpalmitate)。
胶原蛋白表达率(％)＝(试样胶原蛋白表达量/对照组胶原蛋白表达量)×100
表2
| 试样名称 | 处理浓度(w/v％) | 胶原表达率(％) |
| 实施例1 | 0.5 | 85.1 |
| 实施例4 | 0.5 | 93.4 |
| 比较例1 | 0.5 | 75.2 |
| 比较例2 | 0.5 | 78.6 |
| 比较例3 | 0.5 | 73.5 |
| 比较例4 | 0.5 | 80.2 |
| 比较例5 | 0.5 | 81.3 |
| 比较例6 | 0.5 | 86.5 |
| 比较例7 | 0.5 | 88.3 |
| 比较例8 | 0.5 | 87.1 |
| 棕榈酸酯 | 0.5 | 84.5 |
如上述表2中所确认，当以相同的浓度处理时，相对于作为各个发酵提取物的比较例1～5、作为未发酵的混合提取物的比较例6、作为乳酸菌发酵提取物的比较例7、作为醋精发酵提取物的比较例8，本发明实施例的混合发酵提取物示出高胶原蛋白表达率。相对于对照组也示出更高的表达率。
试验例2：确认皮肤保湿相关因此表达增加
利用添加低血清生长补充剂的Medium106培养基将成纤维细胞调至5×106细胞/孔后，接种于6孔板并培养了24小时。培养后，将紫外线B(UVB)照射到细胞后，处理上述实施例及比较例的试样并培养了48小时。在培养的细胞中提核糖核酸并通过逆转录聚合酶链反应确认了透明质酸合成酶-2(Hyaluronan synthase-2，HAS-2)的表达抑制率。透明质酸合成酶-2表达抑制率通过下式来计算，其结果如下述表3所示。作为对照组使用了透明质酸(Hyaluronic Acid)。
透明质酸合成酶-2表达率(％)＝(试样透明质酸合成酶-2表达量/对照组透明质酸合成酶-2表达量)×100
表3
| 试样名称 | 处理浓度(w/v％) | 透明质酸合成酶-2表达率(％) |
| 实施例1 | 0.5 | 84.3 |
| 实施例4 | 0.5 | 93.5 |
| 比较例1 | 0.5 | 83.2 |
| 比较例2 | 0.5 | 82.1 |
| 比较例3 | 0.5 | 82.5 |
| 比较例4 | 0.5 | 83.6 |
| 比较例5 | 0.5 | 84.0 |
| 比较例6 | 0.5 | 88.6 |
| 比较例7 | 0.5 | 87.2 |
| 比较例8 | 0.5 | 86.2 |
| 透明质酸 | 0.01 | 85.4 |
如上述表3中所确认，当以相同的浓度处理时，相对于对照组或作为各个发酵提取物的比较例1～5、作为未发酵的混合提取物的比较例6、作为乳酸菌发酵提取物的比较例7、作为醋精发酵提取物的比较例8，本发明实施例的混合发酵提取物示出高透明质酸合成酶-2表达率，相对于实施例4的混合提取物具有更高的表达率。
试验例3：确认皮肤细胞增殖效果
利用添加人角质形成细胞生长补充剂(Human Keratinocyte GrowthSupplement，HKGK)的Medium154培养基将角质形成细胞(HEKa)调至1×105细胞/孔后，接种于96孔板并培养了24小时。在培养的细胞处理上述实施例及比较例的试样并培养了18小时后，为了比较细胞存活率，添加3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐溶液(MTTsolution)(5mg/mL)，细胞存活率通过利用酶联免疫检测仪(ELISA READER)在570nm下测定了吸光度，将以对照组的细胞增殖为100％来计算细胞增值率。
细胞存活率(％)＝(试样细胞存活率/对照组细胞存活率)×100
表4
| 试样名称 | 处理浓度(w/v％) | 细胞存活率(％) |
| 实施例1 | 0.5 | 109.3 |
| 实施例4 | 0.5 | 132.5 |
| 比较例1 | 0.5 | 102.3 |
| 比较例2 | 0.5 | 104.5 |
| 比较例3 | 0.5 | 102.8 |
| 比较例4 | 0.5 | 109.2 |
| 比较例5 | 0.5 | 105.5 |
| 比较例6 | 0.5 | 110.2 |
| 比较例7 | 0.5 | 108.7 |
| 比较例8 | 0.5 | 111.7 |
| 棕榈酸酯 | 0.5 | 110.4 |
如上述表4中所确认，当以相同的浓度处理时，相对于对照组，本发明实施例的混合发酵提取物高，相对于比较例具有更高的细胞增值率。
试验例4：确认皮肤再生效果
为了确认皮肤再生效果，进行了伤口愈合试验(wound healing assay)。利用添加人角质形成细胞生长补充剂的Medium154培养基将角质形成细胞调至1×106细胞/孔后，接种于96孔板并培养了18小时。刮掉一部分细胞后，处理上述实施例及比较例的试样并培养了8小时。皮肤再生率通过测定伤口间隙(wound gap)并利用下式来计算，其结果如下述表5所示。作为对照组使用了羟基积雪草苷(madecassoside)。
皮肤再生率(％)＝(试样细胞再生率/对照组细胞再生率)×100
表5
| 试样名称 | 处理浓度(w/v％) | 皮肤再生率(％) |
| 实施例1 | 0.5 | 87.2 |
| 实施例4 | 0.5 | 90.5 |
| 比较例1 | 0.5 | 83.2 |
| 比较例2 | 0.5 | 81.5 |
| 比较例3 | 0.5 | 81.4 |
| 比较例4 | 0.5 | 82.0 |
| 比较例5 | 0.5 | 80.3 |
| 比较例6 | 0.5 | 84.2 |
| 比较例7 | 0.5 | 86.5 |
| 比较例8 | 0.5 | 88.7 |
| 棕榈酸酯 | 0.5 | 88.6 |
如上述表5中所确认，当以相同的浓度处理时，相对于对照组或作为各个发酵提取物的比较例1～5、作为未发酵的混合提取物的比较例6、作为乳酸菌发酵提取物的比较例7、作为醋精发酵提取物的比较例8，本发明实施例的混合发酵提取物示出高皮肤再生率，在实施例4的混合提取物中示出最高的皮肤再生效果。
实施例11：制备含有混合发酵提取物的乳液
以下述表6的组成及含量根据常规的方法制备含有上述实施例4中制备的混合发酵提取物的乳液。
表6
Claims (6)
1.一种化妆品组合物，其特征在于，相对于上述化妆品组合物的总重量，包含0.01～90重量百分比的牛蒡、蒲公英、知母、葛根及莲藕混合发酵提取物。
2.根据权利要求1所述的化妆品组合物，其特征在于，上述混合发酵提取物为通过提取牛蒡、蒲公英、知母、葛根及莲藕的混合物来制备混合提取物后，将酵母菌接种于上述混合提取物并通过发酵制备而成。
3.根据权利要求2所述的化妆品组合物，其特征在于，上述混合提取物为分别以1～5：1～5：1～5：1～5：1～5的重量比混合牛蒡、蒲公英、知母、葛根及莲藕并提取而成。
4.根据权利要求1所述的化妆品组合物，其特征在于，上述化妆品组合物用于改善皮肤皱纹。
5.根据权利要求1所述的化妆品组合物，其特征在于，上述化妆品组合物用于皮肤保湿。
6.根据权利要求1所述的化妆品组合物，其特征在于，上述化妆品组合物用于皮肤再生。
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