CN111647515A - 一种甜瓜枯萎病病菌的分离方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种甜瓜枯萎病病菌的分离方法，属于微生物技术领域。所述分离方法包括：收集田间发病的甜瓜枯萎病发病的新鲜植株，取植株叶片；分离获得所述植株叶片的叶脉维管束，清洗干燥后将叶脉维管束置于固体培养基中培养；待长出菌丝后挑取菌丝至固体培养基中后，再倒入一层尚未凝固的固体培养基进行培养，分离得到病原菌。该方法能够快速准确地分离获得该病病原菌，从而排除其他杂菌的干扰，且无需使用链霉素等抗生素，有效提高分离纯化效率，因此具有良好的实际应用之价值。

Description

一种甜瓜枯萎病病菌的分离方法
技术领域
本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种甜瓜枯萎病病菌的分离方法。
背景技术
公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
甜瓜枯萎病是一种维管束病害，发病突然，症状包括严重的点斑、凋萎或叶、花、果、茎或整株植物的死亡。生长迅速的甜瓜的幼嫩组织常被侵袭。其病原菌为尖镰孢菌甜瓜专化型(Fusarium oxysporum f.sp.melonis)。虽然甜瓜枯萎病在甜瓜中发病较为严重，但是对该病的研究仍然有限，特别是在病原学方面研究较少，而分离纯化该病病原菌获得其纯培养物是开展相关研究的基础。
目前，甜瓜枯萎病病菌等枯萎病病原菌的分离多采用活体根部、茎杆切断直接进行分离，通常是取植株茎杆病健交界处的维管束组织分离纯化。然而，由于甜瓜枯萎病常与甜瓜蔓枯病等病害混发，且显症茎杆中通常含有大量其他腐生菌，因此该方法分离纯化效率较低，常分离到多种其他非目标微生物。有报道采用添加链霉素等抗生素的方法抑制杂菌的生长。但是发明人发现，大量链霉素的使用，会导致一些细菌产生抗药性甚至产生变异菌株，导致部分细菌仍能生长的情况。如此，也不容易得到完全纯化的枯萎病病菌的菌株。此外，链霉素的过量使用会引起环境污染，威胁生态平衡和人类健康。目前急需探讨既能有效解决杂菌污染、提高菌落纯化效率，同时又环保可靠得到甜瓜枯萎病病菌的方法。
发明内容
针对目前现有技术的不足，本发明提供一种甜瓜枯萎病病菌的分离方法，该方法能够快速准确地分离获得该病病原菌，从而排除其他杂菌的干扰，且无需使用链霉素等抗生素，有效提高分离纯化效率，因此具有良好的实际应用之价值。
为了实现上述技术目的，本发明的技术方案如下：
本发明的第一个方面，提供一种甜瓜枯萎病病菌的分离方法，所述分离方法包括：收集田间发病的甜瓜枯萎病发病的新鲜植株，取植株叶片；分离获得所述植株叶片的叶脉维管束，清洗干燥后将叶脉维管束置于固体培养基中培养；待长出菌丝后挑取菌丝至固体培养基中后，再倒入一层尚未凝固的固体培养基进行培养，分离得到病原菌。
本发明的第二个方面，提供上述分离方法获得甜瓜枯萎病病菌。
本发明的第三个方面，提供上述分离方法和/或甜瓜枯萎病病菌在防治甜瓜枯萎病中的应用。
以上一个或多个技术方案的有益技术效果：
上述技术方案充分考虑了性能、经济、环保等多方面的需求，能够快速准确地分离获得甜瓜枯萎病病原菌，从而排除其他杂菌的干扰，且无需使用链霉素等抗生素，分离纯化率可达到90％以上。
上述技术方案设计合理，高效、准确、环保可靠，可操作性强，方便后续开展生物学研究，为防治甜瓜枯萎病奠定了良好的基础。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。
图1为本发明实施例1分离得到的尖镰孢菌甜瓜专化型和甜瓜枯萎病病菌侵染叶片图，其中，A为尖镰孢菌甜瓜专化型平板图，B为甜瓜枯萎病病菌侵染叶片图。
图2为本发明实施例1中感染甜瓜枯萎病的甜瓜植株实地栽培图。
具体实施方式
应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本发明提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本发明的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。应理解，本发明的保护范围不局限于下述特定的具体实施方案；还应当理解，本发明实施例中使用的术语是为了描述特定的具体实施方案，而不是为了限制本发明的保护范围。
如前所述，目前，甜瓜枯萎病病菌等枯萎病病原菌的分离多采用活体根部、茎杆切断直接进行分离，通常是取植株茎杆病健交界处的维管束组织分离纯化。然而，由于甜瓜枯萎病常与甜瓜蔓枯病等病害混发，且显症茎杆中通常含有大量其他腐生菌，因此该方法分离纯化效率较低，常分离到多种其他非目标微生物。而采用添加链霉素等抗生素的方法抑制杂菌的生长会导致一些细菌产生抗药性甚至产生变异菌株，导致部分细菌仍能生长的情况，也不容易得到完全纯化的枯萎病病菌的菌株。此外，链霉素的过量使用会引起环境污染，威胁生态平衡和人类健康。
有鉴于此，本发明的一个具体实施方式中，提供一种甜瓜枯萎病病菌的分离方法，所述分离方法包括：收集田间发病的甜瓜枯萎病发病的新鲜植株，取植株叶片；分离获得所述植株叶片的叶脉维管束，清洗干燥后将叶脉维管束置于固体培养基中培养；待长出菌丝后挑取菌丝至固体培养基中后，再倒入一层尚未凝固的固体培养基进行培养，分离得到病原菌。
由于甜瓜枯萎病病株发病症状通常是自下部叶片开始，自下而上逐次萎蔫。发病叶色逐渐由绿变淡，由黄到枯黄进而转为褐色。发明人研究中发现，在植株整体叶片尚无明显变化，但叶片的叶脉出现褪绿、明化(透明化)和/或黄化现象的叶脉维管束中更易分离获得单一的枯萎病病菌，此时叶片的叶脉维管束组织为枯萎病病菌向植株地上部分扩散的尖端，菌种相对较为单一，因此对枯萎病病菌的选择性更强，从而使得分离纯化速度更快，效率更高。
分离获得所述植株叶片的叶脉维管束具体方法为：
去除植株叶片除叶柄之外的组织，切取获得叶柄基部的叶脉维管束。
其中，叶脉维管束切取长度为2-4cm。
所述清洗干燥具体方法为：采用无菌水冲洗2～3次后，使用无菌吸水纸吸干表面水分；
所述固体培养基为马铃薯葡萄糖培养基(PDA)，所述PDA培养基配方为：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂15～20g，水1000ml，pH自然。
本发明的又一具体实施方式中，所述“待长出菌丝后挑取菌丝至固体培养基”的步骤中，挑取菌丝优选为真菌菌落边缘白色菌丝，从而进一步减少杂菌的污染。
本发明的又一具体实施方式中，所述“再倒入一层尚未凝固的固体培养基进行培养”步骤中，所述固体培养基为PDA培养基，控制其温度为40～45℃，此时，培养基尚未凝固，同时又不会因培养基温度过高导致分离目标菌的死亡。
本发明的又一具体实施方式中，控制上层固体培养基厚度为2～3mm，同时控制培养条件为：23-25℃光照8h和18-21℃黑暗16h交替培养4～5天，发明人研究发现，在此培养条件下，能够显著促进甜瓜枯萎病病菌生长而抑制大部分杂菌生长，同时，由于此时是将菌丝夹在两层培养基之间，快速生长的甜瓜枯萎病病菌可迅速生长穿透培养基，从而在上层培养基表面形成菌落，从而快速分离获得目标菌纯培养物。
本发明的又一具体实施方式中，所述方法还包括对上层培养基获得的真菌菌落进行鉴定，待鉴定完成后可进行保藏，用于后续研究。
本发明的又一具体实施方式中，提供上述分离方法获得甜瓜枯萎病病菌。
本发明的又一具体实施方式中，提供上述分离方法和/或甜瓜枯萎病病菌在防治甜瓜枯萎病中的应用。
以下通过实施例对本发明做进一步解释说明，但不构成对本发明的限制。应理解这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。以下各实施例中，马铃薯葡萄糖培养基(PDA)培养基配方为：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂15～20g，水1000ml，pH自然。
实施例1
一种甜瓜枯萎病病菌的分离方法，所述分离方法包括：收集田间发病的甜瓜枯萎病的新鲜植株带回实验室，选取植株叶片进行后续研究，所选取叶片整体无明显变化，未发生褪绿、萎蔫、变黄，但叶片叶脉呈现明化、黄化现象。
去除植株叶片除叶柄之外的组织，采用灭菌刀片切取获得叶柄基部的叶脉维管束，叶脉维管束切取长度为4cm，采用无菌水冲洗3次后，使用无菌吸水纸吸干其表面水分。
将叶脉维管束置于PDA固体培养基中在28℃条件下培养；待长出白色菌丝后挑取真菌菌落边缘菌丝至PDA固体培养基中后，再倒入一层尚未凝固的PDA固体培养基进行培养，分离得到病原菌，所述病原菌经鉴定并保藏。
其中，倾倒尚未凝固的PDA培养基时控制其温度为45℃，控制上层固体培养基厚度为3mm，同时控制培养条件为：25℃光照8h和20℃黑暗16h交替培养4天即得。
经鉴定，本实验从南昌市一甜瓜产区采集的10份病样中成功分离获得10份甜瓜枯萎病病菌，分离纯化成功率为100.00％。
实施例2
一种甜瓜枯萎病病菌的分离方法，所述分离方法包括：收集田间发病的甜瓜枯萎病的新鲜植株带回实验室，选取植株叶片进行后续研究，所选取叶片整体无明显变化，未发生褪绿、萎蔫、变黄，但叶片叶脉呈现明化、黄化现象。
去除植株叶片除叶柄之外的组织，采用灭菌刀片切取获得叶柄基部的叶脉维管束，叶脉维管束切取长度为3cm，采用无菌水冲洗3次后，使用无菌吸水纸吸干其表面水分。
将叶脉维管束置于PDA固体培养基中在28℃条件下培养；待长出白色菌丝后挑取真菌菌落边缘菌丝至PDA固体培养基中后，再倒入一层尚未凝固的PDA固体培养基进行培养，分离得到病原菌，所述病原菌经鉴定并保藏。
其中，倾倒尚未凝固的PDA培养基时控制其温度为42℃，控制上层固体培养基厚度为3mm，同时控制培养条件为：24℃光照8h和19℃黑暗16h交替培养4天即得。
经鉴定，本实验从南昌市一甜瓜产区采集的10份病样中成功分离获得10份甜瓜枯萎病病菌，分离纯化成功率为100.00％。
实施例3
一种甜瓜枯萎病病菌的分离方法，所述分离方法包括：收集田间发病的甜瓜枯萎病的新鲜植株带回实验室，选取植株叶片进行后续研究，所选取叶片整体无明显变化，未发生褪绿、萎蔫、变黄，但叶片叶脉呈现明化、黄化现象。
去除植株叶片除叶柄之外的组织，采用灭菌刀片切取获得叶柄基部的叶脉维管束，叶脉维管束切取长度为4cm，采用无菌水冲洗3次后，使用无菌吸水纸吸干其表面水分。
将叶脉维管束置于PDA固体培养基中在28℃条件下培养；待长出白色菌丝后挑取真菌菌落边缘菌丝至PDA固体培养基中后，再倒入一层尚未凝固的PDA固体培养基进行培养，分离得到病原菌，所述病原菌经鉴定并保藏。
其中，倾倒尚未凝固的PDA培养基时控制其温度为45℃，控制上层固体培养基厚度为3mm，同时控制培养条件为：24℃光照8h和21℃黑暗16h交替培养4天即得。
经鉴定，本实验从南昌市一甜瓜产区采集的10份病样中成功分离获得9份甜瓜枯萎病病菌，分离纯化成功率为90.00％。
对比例1
一种甜瓜枯萎病病菌的分离方法，所述分离方法包括：收集田间发病的甜瓜枯萎病的新鲜植株带回实验室，选取植株叶片进行后续研究，所选取叶片整体无明显变化，未发生褪绿、萎蔫、变黄，但叶片叶脉呈现明化、黄化现象。
去除植株叶片除叶柄之外的组织，采用灭菌刀片切取获得叶柄基部的叶脉维管束，叶脉维管束切取长度为4cm，采用无菌水冲洗3次后，使用无菌吸水纸吸干其表面水分。
将叶脉维管束置于PDA固体培养基中在28℃条件下培养；待长出白色菌丝后挑取真菌菌落边缘菌丝至PDA固体培养基中后，再倒入一层尚未凝固的PDA固体培养基进行培养，分离得到病原菌，所述病原菌经鉴定并保藏。
其中，倾倒尚未凝固的PDA培养基时控制其温度为45℃，控制上层固体培养基厚度为3mm，同时控制培养条件为：25℃黑暗培养6天。
经鉴定，本实验从南昌市一甜瓜产区采集的10份病样中成功分离获得8份甜瓜枯萎病病菌，分离纯化成功率为80.00％。
对比例2
一种甜瓜枯萎病病菌的分离方法，所述分离方法包括：收集田间发病的甜瓜枯萎病的新鲜植株带回实验室，选取植株叶片进行后续研究，所选取叶片整体无明显变化，未发生褪绿、萎蔫、变黄，但叶片叶脉呈现明化、黄化现象。
去除植株叶片除叶柄之外的组织，采用灭菌刀片切取获得叶柄基部的叶脉维管束，叶脉维管束切取长度为4cm，采用无菌水冲洗3次后，使用无菌吸水纸吸干其表面水分。
将叶脉维管束置于PDA固体培养基中在28℃条件下培养；待长出白色菌丝后挑取真菌菌落边缘菌丝至PDA固体培养基中后，再倒入一层尚未凝固的PDA固体培养基进行培养，分离得到病原菌，所述病原菌经鉴定并保藏。
其中，倾倒尚未凝固的PDA培养基时控制其温度为45℃，控制上层固体培养基厚度为3mm，同时控制培养条件为：25℃光照培养7天。
经鉴定，本实验从南昌市一甜瓜产区采集的10份病样中成功分离获得9份甜瓜枯萎病病菌，分离纯化成功率为90.00％。
对比例3
一种甜瓜枯萎病病菌的分离方法，所述分离方法包括：收集田间发病的甜瓜枯萎病的新鲜植株带回实验室，选取植株叶片进行后续研究，所选取叶片明显萎蔫、变黄。
去除植株叶片除叶柄之外的组织，采用灭菌刀片切取获得叶柄基部的叶脉维管束，叶脉维管束切取长度为4cm，采用无菌水冲洗3次后，使用无菌吸水纸吸干其表面水分。
将叶脉维管束置于PDA固体培养基中在28℃条件下培养；待长出白色菌丝后挑取真菌菌落边缘菌丝至PDA固体培养基中后，再倒入一层尚未凝固的PDA固体培养基进行培养，分离得到病原菌，所述病原菌经鉴定并保藏。
其中，倾倒尚未凝固的PDA培养基时控制其温度为45℃，控制上层固体培养基厚度为3mm，同时控制培养条件为：25℃光照8h和20℃黑暗16h交替培养4天。
经鉴定，本实验从南昌市一甜瓜产区采集的10份病样中成功分离获得7份甜瓜枯萎病病菌，分离纯化成功率为70.00％。
对比例4
一种甜瓜枯萎病病菌的分离方法，所述分离方法包括：收集田间发病的甜瓜枯萎病发病的新鲜植株带回实验室，取发病甜瓜茎部发生明显褐变流胶的病健交界处茎杆，采用75％酒精消毒4min后切取获得髓部维管束组织。采用无菌水冲洗3次后，使用无菌吸水纸吸干其表面水分。
将髓部维管束组织置于PDA固体培养基中在28℃条件下培养；待长出白色菌丝后挑取真菌菌落边缘菌丝至PDA固体培养基中后，再倒入一层尚未凝固的PDA固体培养基进行培养，分离得到病原菌，所述病原菌经鉴定并保藏。
其中，倾倒尚未凝固的PDA培养基时控制其温度为45℃，控制上层固体培养基厚度为3mm，同时控制培养条件为：25℃光照8h和20℃黑暗16h交替培养4天。
经鉴定，本实验从南昌市一甜瓜产区采集的10份病样中成功分离获得6份甜瓜枯萎病病菌，分离纯化成功率为60.00％。
应注意的是，以上实例仅用于说明本发明的技术方案而非对其进行限制。尽管参照所给出的实例对本发明进行了详细说明，但是本领域的普通技术人员可根据需要对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围。

Claims (10)

1.一种甜瓜枯萎病病菌的分离方法，其特征在于，所述方法包括：收集田间发病的甜瓜枯萎病发病的新鲜植株，取植株叶片；分离获得所述植株叶片的叶脉维管束，清洗干燥后将叶脉维管束置于固体培养基中培养；待长出菌丝后挑取菌丝至固体培养基中后，再倒入一层尚未凝固的固体培养基进行培养，分离得到病原菌。
2.如权利要求1所述的分离方法，其特征在于，所述植株叶片整体叶片无明显变化，但叶片的叶脉出现褪绿、明化和/或黄化现象。
3.如权利要求1所述的分离方法，其特征在于，分离获得所述植株叶片的叶脉维管束具体方法为：
去除植株叶片除叶柄之外的组织，切取获得叶柄基部的叶脉维管束。
4.如权利要求3所述的分离方法，其特征在于，叶脉维管束切取长度为2-4cm。
5.如权利要求1所述的分离方法，其特征在于，所述清洗干燥具体方法为：采用无菌水冲洗2～3次后，使用无菌吸水纸吸干表面水分。
6.如权利要求1所述的分离方法，其特征在于，所述“待长出菌丝后挑取菌丝至固体培养基”的步骤中，挑取菌丝为真菌菌落边缘白色菌丝。
7.如权利要求1所述的分离方法，其特征在于，所述“再倒入一层尚未凝固的固体培养基进行培养”步骤中，所述固体培养基为PDA培养基，控制其温度为40～45℃。
8.如权利要求1所述的分离方法，其特征在于，控制上层固体培养基厚度为2～3mm，同时控制培养条件为：23-25℃光照8h和18-21℃黑暗16h交替培养3～5天；
优选的，所述方法还包括对上层培养基获得的真菌菌落进行鉴定，待鉴定完成后进行保藏。
9.权利要求1-8任一项所述分离方法获得甜瓜枯萎病病菌。
10.权利要求1-8任一项所述分离方法和/或权利要求9所述的甜瓜枯萎病病菌在防治甜瓜枯萎病中的应用。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110343648A (zh) * 2019-08-20 2019-10-18 云南省烟草农业科学研究院 一种简易分离烟草青枯病菌的方法
CN113736670A (zh) * 2021-09-24 2021-12-03 福建省农业科学院植物保护研究所 一种玉米真菌性病原菌的分离方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105132336A (zh) * 2015-10-10 2015-12-09 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所 一株解淀粉芽孢杆菌及其菌剂和应用
CN110343648A (zh) * 2019-08-20 2019-10-18 云南省烟草农业科学研究院 一种简易分离烟草青枯病菌的方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105132336A (zh) * 2015-10-10 2015-12-09 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所 一株解淀粉芽孢杆菌及其菌剂和应用
CN110343648A (zh) * 2019-08-20 2019-10-18 云南省烟草农业科学研究院 一种简易分离烟草青枯病菌的方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
JOHN F. LESLIE等: "《The Fusarium Laboratory Manual》", 31 December 2006, BLACKWELL PUBLISHING *
ZHANG YUSHU等: "Controlling Fusarium Wilt Disease in Melon（Cucumis Melo L.） Using Tillered Onin Bulb Extract", 《PAK.J.BOT.》 *
关峰 等: "江西省苦瓜枯萎病菌的分离、鉴定及苦瓜种质抗性的评价", 《江西农业大学学报》 *
赵杰 等: "甜瓜枯萎病菌的生物学特性及防治药剂的室内筛选", 《上海农业学报》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110343648A (zh) * 2019-08-20 2019-10-18 云南省烟草农业科学研究院 一种简易分离烟草青枯病菌的方法
CN113736670A (zh) * 2021-09-24 2021-12-03 福建省农业科学院植物保护研究所 一种玉米真菌性病原菌的分离方法

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