CN111643669A - 谷氨酰胺酶抑制剂在制备治疗银屑病的药物中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开谷氨酰胺酶抑制剂在制备治疗银屑病的药物中的应用。本发明通过体外细胞实验证实了谷氨酰胺酶抑制剂可以抑制角质细胞代谢谷氨酰胺、抑制miR‑31诱导上调的角质细胞线粒体呼吸、抑制miR‑31诱导的mTOR通路、降低细胞活性并促进细胞凋亡以及具有抗炎作用；以及通过动物实验证实了谷氨酰胺酶抑制剂可以有效治疗咪喹莫特诱导的小鼠银屑病样病理改变，包括：显著降低皮损的Baker评分、有效减轻表皮肥厚程度、显著减少表皮下微血管数量、显著减少表皮层Ki67阳性细胞数和降低表皮GLS的表达。因此，谷氨酰胺酶抑制剂可用于制备治疗银屑病的药物。

Description

谷氨酰胺酶抑制剂在制备治疗银屑病的药物中的应用
技术领域
本发明属于医药技术领域，涉及谷氨酰胺酶抑制剂的用途，具体涉及谷氨酰胺酶抑制剂在制备治疗银屑病的药物中的应用。
背景技术
银屑病是以皮肤红斑、丘疹、鳞屑为主要临床表现的慢性炎症性皮肤病，全球发病率约为1-3％。银屑病以皮损表皮过度增殖、局部炎症细胞浸润为主要病理特征，并且局部皮损代谢谱发生改变，发病机制复杂，涉及遗传、免疫-炎症、血管异常等多个方面，容易反复发作，迁延难愈。目前用于治疗银屑病的药物主要包括糖皮质激素、维A酸类药物、维生素D3衍生物、地蒽酚、细胞毒性药物等，其中，他扎罗汀、中效与强效的糖皮质激素、卡泊三醇为目前银屑病局部治疗的一线药物。虽然目前银屑病的药物治疗方案较多，但其治疗效果仍未能完全令人满意，现有技术中仍缺少一种疗效显著、副作用小的治疗银屑病的药物。
CB-839(CAS:1439399-58-2)是一种谷氨酰胺酶1(GLS1)抑制剂，可通过靶向抑制GLS1酶活性调控细胞代谢过程，其分子量为571.574，分子式为C26H24F3N7O3S，结构式如下：
Figure BDA0002562291970000011
廖英等发表的论文表明CB-839对三阴性乳腺癌、神经胶质瘤和多发性骨髓等多种肿瘤细胞均具有抗增殖活性；对耐药小细胞肺癌细胞在极低浓度作用下即存在强杀死作用；此外，CB-839的抗肿瘤作用在肾上皮细胞、软组织肉瘤等中也得到了证实(详见：廖英，冀林华，崔森.谷氨酰胺酶新型抑制剂及其抗肿瘤活性研究进展[J].中国肿瘤临床,2019,46(7):366-369.)
发明内容
本发明的目的在于提供谷氨酰胺酶抑制剂在制备治疗银屑病的药物中的应用。
根据本发明的一个方面，提供了谷氨酰胺酶抑制剂在制备治疗银屑病的药物中的应用。
在一些实施方式中，谷氨酰胺酶抑制剂可以选自阿西维辛(Acivicin，CAS:42228-92-2)、化合物968(CAS:311795-38-7)、BPTES(CAS:314045-39-1)、CB-839中的一种或多种。
在一些实施方式中，谷氨酰胺酶抑制剂可以为CB-839。CB-839为GLS抑制剂，可以通过抑制谷氨酰胺转化为谷氨酸的生化过程，从而阻断细胞以谷氨酰胺作为原料生产能量和氨基酸等基本物质。
在一些实施方式中，在治疗银屑病的药物中，CB-839的重量百分含量可以为2％-8％。
在一些实施方式中，CB-839可以作为单一活性成分或与其他药学上可接受的成分一起用于制备治疗银屑病的药物。
在一些实施方式中，药学上可接受的成分可以包括与CB-839没有拮抗作用的药物活性成分和/或药学上可接受的一种或多种辅料。
在一些实施方式中，治疗银屑病的药物的给药方式可以为注射、口服或透皮给药。
在一些实施方式中，治疗银屑病的药物的给药方式可以为局部透皮给药。
在一些实施方式中，治疗银屑病的药物的剂型可以为软膏剂、凝胶剂、贴膏剂、膏药、洗剂、涂膜剂、糊剂、气雾剂或喷雾剂。
本发明的有益效果在于：
(1)发现了谷氨酰胺酶(glutaminase,GLS)是靶向代谢治疗银屑病的重要靶标，提供了谷氨酰胺酶抑制剂(包括CB-839和BPTES等)在制备治疗银屑病药物中的用途。
(2)通过体外细胞实验证实了CB-839可以：1)显著抑制角质细胞代谢谷氨酰胺；2)显著抑制miR-31诱导上调的角质细胞线粒体呼吸；3)显著抑制miR-31诱导的mTOR通路；4)显著降低细胞活性并促进细胞凋亡，特别是促进高表达miR-31的角质细胞凋亡；5)下调一系列miR-31和/或TNF-α诱导的促炎因子的表达，特别是GM-CSF和TGF-β1。
(3)进一步通过动物实验证明了外涂CB-839可有效治疗咪喹莫特(IMQ)诱导的小鼠银屑病样病理改变，包括：1)显著降低皮损的Baker评分；2)有效减轻表皮肥厚程度；3)显著减少表皮下微血管数量；4)显著减少表皮层Ki67阳性细胞数；5)显著降低表皮GLS的表达。
附图说明
图1表示CB-839干预12h过程中角质细胞对谷氨酰胺的总摄取量，图中，***表示与所标记组相比，P<0.001；
图2表示CB-839干预12h过程中角质细胞分泌的谷氨酸的总分泌量，图中，***表示与所标记组相比，P<0.001；
图3-9依次表示CB-839干预后角质细胞中谷氨酰胺、天冬氨酸、α-酮戊二酸、琥珀酸、延胡索酸和苹果酸的代谢水平随时间的变化情况；
图10表示不同处理组，miR-31诱导的角质细胞细胞氧消耗率的变化情况，图中，***表示同一时间点miR-31组与miR-31+CB839组之间的统计学差异P<0.001，ns表示两者无显著统计学差异；
图11表示不同处理组细胞中mTOR通路下游分子4EBP1、S6、p70S的磷酸化水平；
图12表示不同处理组角质细胞的生长曲线，图中，同一时间点，*表示与Ctrl组相比，P<0.05；***表示与Ctrl组相比，P<0.001；
图13表示不同浓度CB-839干预的角质细胞的克隆形成情况；
图14-15依次表示CB-839对miR-31、TNF-α两种方法诱导的角质细胞的促炎因子的表达的抑制作用；
图16表示给药期间各组小鼠的体重变化；
图17表示各组小鼠第8天的皮损情况；
图18表示各组小鼠皮损组织H&E染色结果；
图19表示各组小鼠皮损部位皮肤的Baker评分结果，图中，**表示与所标记组相比，P<0.01；***表示与所标记组相比，P<0.001；
图20表示各组小鼠皮损组织表皮厚度，图中，*表示与所标记组相比，P<0.05；***表示与所标记组相比，P<0.001；****表示与所标记组相比，P<0.0001；
图21表示各组小鼠皮损组织的皮下微血管的计数结果，图中，*表示与所标记组相比，P<0.05；***表示与所标记组相比，P<0.001；
图22-23表示各组小鼠皮损组织的表皮层Ki67阳性细胞的增殖情况，图24中，**表示与所标记组相比，P<0.01；***表示与所标记组相比，P<0.001；
图24-25表示各组小鼠皮损组织中GLS酶的表达与分布情况，图26中，*表示与所标记组相比，P<0.05；***表示与所标记组相比，P<0.001；
图26表示银屑病患者皮损组织中特异表达的细胞代谢基因表达谱；
图27-28表示miR-31在银屑病皮损,和正常人皮肤中的染色结果和定量分析结果，图29中，***表示与所标记组相比，P<0.001；
图29表示过表达miR-31后利用代谢组学技术检测代谢物的水平的结果；
图30表示表达miR-31后，角质细胞和非角质细胞上细胞代谢相关基因蛋白的表达水平；
图31为图27-30的结果的总结图。
具体实施方式
下面结合具体实施例和附图对本发明作进一步详细的说明。如无特殊说明，实施例中所用试剂均为市售，所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。
本发明发明人在长期的银屑病的作用及机制研究过程中，通过相关研究发现：
银屑病病理进程与miR-31参与诱导的角质细胞代谢重组密不可分，具体表现为受累基底层角质细胞首先过表达葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)和谷氨酰胺酶(GLS)而提高糖酵解和谷氨酰胺代谢途径，从而为其快速增殖和分化提供足够的能量和基础物质。随后，基底层角质细胞向表层分化，而分化的角质细胞通过上调miR-31而抑制GLUT1并维持细胞高表达GLS，最终致使棘层和颗粒层的角质细胞依旧可以依赖谷氨酰胺代谢途径和激活的mTOR通路维持细胞生存并参与其他病理改变。由此可见GLS在银屑病皮损角质细胞代谢重组中的扮演着关键角色。基于上述发现，完成本发明。
实施例1CB-839抑制角质细胞谷氨酰胺的摄取和代谢实验
将10μM的CB-839(CB-839组)和等体积的DMSO(Ctrl组)分别添加到角质细胞HaCaT细胞的培养液中，干预12h后，收集细胞培养液，利用靶向代谢组学的方法检测收集到的细胞培养液中谷氨酰胺(glutamine)和谷氨酸(glutamate)的含量，并通过与新鲜的培养液对比，计算出不同干预条件下细胞摄取的谷氨酰胺的量(即谷氨酰胺的消耗量)和分泌到细胞培养液中的谷氨酸的量(即谷氨酸的分泌量)，结果如图1-2所示。由图1-2的结果可知，CB-839可以显著抑制角质细胞摄取谷氨酰胺(P<0.001)，以及减少角质细胞分泌到培养液中的谷氨酸的量(P<0.001)。
收集培养液后，往细胞中添加新鲜的培养液继续对细胞进行培养，并每隔一段时间收集细胞，同样采用靶向代谢组学的方法检测细胞样品中多个谷氨酰胺代谢途径下游的代谢物的含量。结果如图3-9所示。
由图3-9的结果可知，除谷氨酰胺外，CB-839可以明显抑制角质细胞内包括谷氨酸、天冬氨酸(Aspartate)、α-酮戊二酸(alpha-KG)、琥珀酸(succinate)、延胡索酸(fumarate)和苹果酸(malate)的水平，说明CB-839能阻断角质细胞对谷氨酰胺的代谢，降低包括多个三羧酸循环途径中代谢物的水平，从而对角质细胞的物质和能量代谢产生影响。
实施例2 CB-839抑制miR-31诱导的角质细胞线粒体呼吸能力
Oxygen consumption rate(OCR)是细胞氧消耗率，为线粒体呼吸能力指标。耗氧量的检测原理：在加oligo之前显示的数值，代表的是细胞的基础耗氧量，包括线粒体氧化磷酸化及质子漏耗氧，即质子在线粒体膜通过呼吸链形成电势能后，一部分质子回流可以通过ATP合酶形成ATP，将势能转化为ATP中的能量。一部分通过线粒体膜但是只是发生氧化，势能转化为热量，但是没有用于合成ATP。oligo是ATP合酶抑制剂，加入此药后减少的耗氧代表的是机体用于ATP合成的耗氧量，间接显示此时细胞的ATP产量。FCCP是一种解偶联剂，作为一种质子载体使得大量质子回流，大量耗氧，但是这种质子回流不能形成ATP，FCCP后耗氧的增加，代表线粒体的最大耗氧能力，间接显示最大的呼吸能力，而其相对与基础值的高值代表其还具有的呼吸潜力。最后加入是抗霉素A和寡霉素(R+A)，二者是呼吸链抑制剂，完全阻止线粒体耗氧。
HaCaT细胞转染对照miRNA mimic(ThermoFisher Scientific,4464059)或miR-31mimic(ThermoFisher Scientific,4464067)24小时后各给予DMSO和10μM CB-839干预；其中，转染对照miRNA mimic 24小时后给予DMSO干预的记为Ctrl组，转染miR-31mimic 24小时后给予DMSO干预的记为miR-31组，转染对照miRNA mimic 24小时后给予10μM CB-839干预的记为CB839组，转染miR-31mimic 24小时后给予10μM CB-839干预的记为miR-31+CB839组。干预24h后检测OCR的水平。基础培养基为低糖(1mM)含谷氨酰胺(2mM)培养基。结果如图10所示。
由图10的结果可知，miR-31组细胞基础水平OCR和激发的最高OCR水平都显著高于miR-31+CB839组(P<0.001)，说明CB839可显著抑制miR-31诱导的角质细胞高水平的OCR。
实施例3 CB-839抑制miR-31诱导的mTOR通路的Western Blotting实验
Western Blotting实验可以检测目的蛋白的表达。HaCaT细胞转染对照miRNAmimic或miR-31mimic 24小时后各给予DMSO和10μM CB-839干预；其中，转染对照miRNAmimic 24小时后给予DMSO干预的记为Ctrl-mimic组，转染miR-31mimic 24小时后给予DMSO干预的记为miR-31mimic组，转染对照miRNA mimic 24小时后给予10μM CB-839干预的记为CB839组，转染miR-31mimic 24小时后给予10μM CB-839干预的记为miR-31+CB839组。另取HaCaT细胞转染对照siRNA(ThermoFisher Scientific,AM4635)和GS-siRNA(ThermoFisherScientific,AM16708)24小时后各给予DMSO干预作为对照，分别记为Ctrl-siRNA组和GS-siRNA组。干预24h后收集细胞提取细胞总蛋白进行Western Blotting实验，检测mTOR通路下游分子4EBP1、S6、p70S的磷酸化水平。结果如图11所示。
图11结果表明，过表达miR-31和抑制GS(谷氨酰胺合成酶)基因的表达水平均可以显著提高4EBP1、S6、p70S的磷酸化水平，而CB839可以显著抑制miR-31诱导的mTOR通路下游分子4EBP1、S6、p70S的磷酸化水平的提高。
实施例4CB-839降低角质细胞活性并促进细胞凋亡的实验
1、MTS实验检测细胞活性
MTS(CAS：138169-43-4)是一种四唑类化合物，可被活细胞线粒体中的多种脱氢酶还原成有色的甲瓒产物，其颜色深浅与活细胞数在一定范围内高度相关。
具体步骤包括：
(1)HaCaT细胞转染对照miRNA mimic、miR-31mimic或miR-31inhibitor(ThermoFisher Scientific,4464084)24小时后各给予不同浓度的CB-839干预16h；分别记为Ctrl组、miR-31+组和miR-31-组；
(2)接种细胞：用胰蛋白酶消化各种细胞，然后用含10％胎小牛血清的培养液配成单个细胞悬液，以每孔1000个细胞接种到96孔板，每孔体积100μL；
(3)呈色：每孔加MTS溶液20μL继续孵育2～4h；
(4)比色：选择490nm波长，在酶联免疫监测仪上测定各孔光吸收值，记录结果，以时间为横坐标，吸光值为纵坐标绘制细胞生长曲线。结果如图12所示。
由图12的结果可知，CB-839对角质细胞活性具有显著抑制作用，对miR-31过表达角质细胞的抑制作用最明显。
2、Colony Forming(细胞集落形成)实验
将角质形成细胞Hacat细胞培养于5％FBS MEM培养基，80％铺满培养皿后用胰蛋白酶消化种板，每孔800细胞/6孔板。次日细胞贴壁后换液，应用不同浓度的CB-839干预刺激7天，然后去培养基行结晶紫染色液染色，镜下计数拍照，采集数据。结果如图13所示。
由图13的结果可知，随着CB-839浓度的增加，其对细胞克隆形成的抑制作用越明显。
实施例5CB-839可下调一系列miR-31或TNF-α诱导的促炎因子的表达
分别通过转染miR-31mimic 48h(miR-31组)或加入TNF-α20ng/mL刺激16h(TNF-α组)两种方法诱导角质细胞的炎症模型，然后给予10μMCB-839治疗过夜，转染对照miRNAmimic或加入DMSO、不给予CB-839干预为Ctrl组，最后收集细胞培养液，通过Luminex检测一系列细胞因子的表达。结果如图14-15所示，其中，miR-31-、CB-839-表示转染对照miRNAmimic但不给予CB-839干预，miR-31+、CB-839-表示转染miR-31mimic但不给予CB-839干预，miR-31+、CB-839+表示转染miR-31mimic且给予CB-839干预；TNF-α-、CB-839-表示加入DMSO但不给予CB-839干预，TNF-α+、CB-839-表示加入TNF-α但不给予CB-839干预，TNF-α+、CB-839+表示加入TNF-α且给予CB-839干预。
图14-15结果表明两种不同造模方式均可以诱导不同促炎因子的产生，即造模成功，而CB-839在不同的模型上表现出对不同的抑制作用，其中对GM-CSF、IL-1β、sCD163和TGF-β的抑制作用最稳定，说明CB-839具有一定的抗炎作用。
实施例6谷氨酰胺酶抑制剂CB-839对IMQ诱导的银屑病模型小鼠的治疗实验
1、药物准备：取适量的CB-839粉末，溶于DMSO溶剂中，分别制备2mg/mL、6mg/mL、18mg/mL的CB-839溶液，备用。
2、实验过程：采用SPF级雄性BALB/c小鼠，随机分配成6组，每组4-5只。组别及相应处理分别是：
空白组(Ctrl组)，不给予咪喹莫特外涂，每日上午给予凡士林外涂，下午给予DMSO溶剂100μL外涂。
模型组(IMQ组)，每日上午给予咪喹莫特(咪喹莫特乳膏，四川明欣药业有限责任公司生产)50mg外涂，下午给予DMSO溶剂100μL外涂。
CB-839低剂量组(CB-839L组)，每日上午给予咪喹莫特50mg外涂，下午给予2mg/mLCB-839 100μL外涂。
CB-839中剂量组(CB-839M组)，每日上午给予咪喹莫特50mg外涂，下午给予6mg/mLCB-839 100μL外涂。
CB-839高剂量组(CB-839H组)，每日上午给予咪喹莫特50mg外涂，下午给予18mg/mL CB-839 100μL外涂。
卡泊三醇倍他米松凝胶组(Xamiol组)，每日上午给予咪喹莫特50mg外涂，下午给予卡泊三醇倍他米松凝胶(赛美尔)40μL外涂。
给药前先对所有小鼠后背约2×3cm大小皮肤进行剪毛、脱毛，使其后背皮肤暴露。第1-7天给药，第8天实验结束并取材。第0、2、4、6、8天记录小鼠体重，每天对小鼠后背皮肤拍照。
3、实验结果：
3.1、CB-839治疗对IMQ诱导的银屑病模型小鼠的体重的影响
结果如图16所示。由图16的结果可知，给予IMQ诱导第二天可使小鼠体重明显减轻(体重损失约10％)，第4天体重开始回升，而CB-839低、中、高剂量组的小鼠体重变化，在IMQ给药期间均较为平稳。
3.2、CB-839治疗对IMQ诱导的银屑病模型小鼠皮损的影响
图17表示的是实验第8天的小鼠的后背皮肤，由图17的结果可知，每天给予50mg咪喹莫特诱导之后小鼠皮肤出现红斑、丘疹和鳞屑。相对于模型组，各CB-839剂量组的小鼠皮损组织均出现不同层度的改善，红斑减少，丘疹和鳞屑有所减少，且改善效果优于卡泊三醇倍他米松凝胶组。说明CB-839可显著改善IMQ诱导的小鼠皮肤银屑病样改变。
3.3、CB-839治疗后IMQ诱导的银屑病模型小鼠的皮损组织病理评价(1)H&E染色
取各组小鼠皮损部位的皮肤，固定后制备石蜡切片，并进行H&E染色，结果如图18所示。由图18的结果可知，相对于空白组，模型组小鼠表皮明显增生，局部炎症细胞浸润，血管生成增多，表皮角质层过度角化伴角化不全，与银屑病皮损病理相类似。而给予CB-8396mg/mL浓度药物外涂后，小鼠皮损明显好转，棘层肥厚减轻，炎症浸润减少，血管生成减少。说明CB-839对银屑病小鼠模型具有治疗作用。
(2)Baker评分
银屑病的组织病理观察主要采用Baker评分，具体标准如表1所示：
表1银屑病的Baker评分标准
Figure BDA0002562291970000081
利用显微镜观察H&E染色后的各组小鼠皮损部位的皮肤的结构，并进行Baker评分，结果如图19所示。由图19的结果可知，相对于对照组，咪喹莫特诱导模型组小鼠Baker评分显著增加(P＜0.0001)。CB-839治疗组Baker评分有所改善，其中，中剂量(6mg/mL)治疗组Baker改善具有统计学意义(P＜0.01)。说明CB-839治疗对咪喹莫特诱导银屑病模型小鼠皮损组织的炎症具有一定的抑制作用。
(3)皮损组织表皮厚度
表皮厚度反应基底层细胞增殖的快慢，也是银屑病病理特征之一。
各组小鼠皮损组织表皮厚度的结果如图20所示。由图20的结果可知，给予咪喹莫特诱导后各组小鼠皮损组织表皮平均厚度均有所增加。相对于模型组，CB-839不同剂量组治疗小鼠的表皮厚度都有所改善，差异具有统计学意义。
(4)微血管分布
对各组小鼠皮损组织的微血管进行计数，结果如图21所示。由图21的结果可知，模型组小鼠皮损组织的微血管数量显著增多。相对于模型组，CB-839治疗组小鼠的微血管数量均显著减少，其中以中剂量的CB-839给药组微血管数量减少最为明显(P＜0.001)。
3.4、CB-839对IMQ诱导的银屑病模型小鼠皮损组织角质细胞增殖的影响
通过免疫组化法分析各组小鼠皮损组织中Ki67阳性细胞的增殖情况，结果如图22和图23所示。由图22和图23的结果可知，模型组小鼠表皮基底层Ki67阳性细胞数显著高于空白组小鼠(P＜0.001)。而经过CB-839中剂量(6mg/mL)治疗后，小鼠Ki67阳性细胞数显著降低(P＜0.01)，说明CB-839对IMQ诱导的银屑病模型小鼠具有抗角质细胞过度增殖的作用。
3.5、CB-839对IMQ诱导的银屑病模型小鼠皮损组织GLS酶表达的影响
通过免疫组化法分析各组小鼠皮损组织中GLS酶的表达与分布，结果如图24和图25所示。由图24和图25的结果可知，相对于空白组小鼠，模型组小鼠皮损组织GLS表达水平显著升高(P＜0.001)。CB-839中剂量(6mg/mL)治疗组小鼠GLS酶表达水平显著降低(P＜0.05)，说明CB-839对IMQ诱导的银屑病模型小鼠皮损组织GLS酶的表达具有抑制作用。
实施例7生信手段分析证实银屑病患者皮损组织具有特异的细胞代谢基因表达谱
通过生物信息学技术与数据挖掘方法，从Pubmed数据库下载GSE13355和GSE30999研究数据。这两项研究均使用相同基因芯片技术检测银屑病患者皮损(PL)、非皮损(PN)和健康人皮肤(HC)组织中基因的表达。共提取164个参与糖酵解通路、谷氨酰胺代谢通路、三羧酸循环、磷酸戊糖代谢途径、脂肪酸代谢以及代谢物转运蛋白的基因表达数据，通过主成分分析(图26a)发现PL标本聚集一起并与HC和(或)PN标本分离，说明PL标本代谢酶的基因表达谱明显与HC和PN不同。
通过比较PL与HC各代谢基因的表达，鉴定了在PL组织中特异表达的一系列基因，其中上调基因12个，下调基因6个。在上调基因中，包括了参与糖酵解的GLUT1、HK2,、PGM2和SLC16A1；也包括了参与谷氨酰胺代谢途径的GOT1、GOT2和GS(图26b)。糖酵解途径和谷氨酰胺代谢途径是快速增殖细胞合成能量和物质的重要来源，以上结果提示在银屑病皮损细胞的快速增殖与其亢进的糖酵解和谷氨酰胺代谢相关。
实施例8 miR-31在银屑病皮损特异高表达且参与皮损角质细胞的代谢重组
通过原位杂交技术检测银屑病患者或健康志愿者皮肤中的miR-31表达情况；通过细胞实验与代谢组学实验检测关键代谢酶的表达。
图27-28依次为miR-31在银屑病皮损(Ps组)和正常人皮肤(HC组)中的染色结果和定量分析结果，结果表明：(1)miR-31高表达于银屑病皮损组织；(2)miR-31主要分布于棘层和颗粒层，而非基底层。
图29为过表达miR-31后利用代谢组学技术检测代谢物的水平，结果发现miR-31显著影响包括糖代谢和氨基酸代谢相关的代谢物。
下图30为氨基酸标记蛋白质组学的结果，在该实验中，通过在角质细胞株(HaCaT)和非角质细胞株(HEK 293T)中过表达miR-31，然后利用代谢组检测在两种细胞上细胞代谢相关基因蛋白的表达水平，结果显示miR-31参与多个代谢酶的表达调控。
图31为总结图，说明了miR-31具有介导细胞代谢重组的作用。
以上所述的仅是本发明的一些实施方式。对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明创造构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。

Claims (9)

1.谷氨酰胺酶抑制剂在制备治疗银屑病的药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述谷氨酰胺酶抑制剂选自阿西维辛、化合物968、BPTES、CB-839中的一种或多种。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述谷氨酰胺酶抑制剂为CB-839。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述治疗银屑病的药物中，CB-839的重量百分含量为2％-18％。
5.根据权利要求3或4所述的应用，其特征在于，所述CB-839作为单一活性成分或与其他药学上可接受的成分一起用于制备治疗银屑病的药物。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述药学上可接受的成分包括与CB-839没有拮抗作用的药物活性成分和/或药学上可接受的一种或多种辅料。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述治疗银屑病的药物的给药方式为注射、口服或透皮给药。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述治疗银屑病的药物的给药方式为局部透皮给药。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述治疗银屑病的药物的剂型为软膏剂、凝胶剂、贴膏剂、膏药、洗剂、涂膜剂、糊剂、气雾剂或喷雾剂。
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