CN111596068B - Utrophin在POP早期预警、诊断、预后评估中的应用和产品 - Google Patents

Utrophin在POP早期预警、诊断、预后评估中的应用和产品 Download PDF

Info

Publication number
CN111596068B
CN111596068B CN202010493136.6A CN202010493136A CN111596068B CN 111596068 B CN111596068 B CN 111596068B CN 202010493136 A CN202010493136 A CN 202010493136A CN 111596068 B CN111596068 B CN 111596068B
Authority
CN
China
Prior art keywords
leu
utrophin
ser
gln
glu
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202010493136.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN111596068A (zh
Inventor
牛晓宇
王涛
高林波
梅玲
崔陶
陈悦悦
魏冬梅
张月婷
张晓莉
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
West China Second University Hospital of Sichuan University
Original Assignee
West China Second University Hospital of Sichuan University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by West China Second University Hospital of Sichuan University filed Critical West China Second University Hospital of Sichuan University
Priority to CN202010493136.6A priority Critical patent/CN111596068B/zh
Publication of CN111596068A publication Critical patent/CN111596068A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111596068B publication Critical patent/CN111596068B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/46—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans from vertebrates
    • G01N2333/47—Assays involving proteins of known structure or function as defined in the subgroups
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/36—Gynecology or obstetrics
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/52—Predicting or monitoring the response to treatment, e.g. for selection of therapy based on assay results in personalised medicine; Prognosis

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

本发明公开了Utrophin在POP早期预警、诊断、预后评估中的应用和产品，首次将检测Utrophin水平的物质用于制备POP早期预警、诊断、预后评估的产品，操作方法简单，以血液为检测样品，可实现快速、批量的检测，Utrophin水平的表达可通过现有免疫荧光分析法、ELISA、生物芯片法、电化学发光法等方法实现，具有高灵敏度、高特异性、高准确度以及高精确度的特点。

Description

Utrophin在POP早期预警、诊断、预后评估中的应用和产品
技术领域
本发明是属于生物技术和医学领域，具体的说，是Utrophin在POP早期预警、诊断、预后评估中的应用和产品。
背景技术
女性盆底器官脱垂（Pelvic Organ Prolapse，POP）是女性盆底功能障碍性疾病（Pelvic Floor Dysfunction，PFD）中最为常见、危害面最广的类型，常伴盆腔支持组织的结构和功能缺陷，全球发病率高达20%且呈逐年升高趋势。POP的早发现早治疗，能够改善成年女性生命质量和身心健康，对于提高POP流行病学防控效果具有重要的指导意义，是切实践行健康中国2030规划纲要目标的重要举措之一。
目前POP的诊断主要通过临床表型、病史和相关功能性检查，缺乏能反映长期病理过程的功能分子作为早期识别、干预和评价指标和标靶。王凤玫等在“骨形态发生蛋白-1在盆底器官脱垂患者阴道组织中的表达及意义”，《实用妇科杂质》2012年11月第28卷第11期，954-956，中通过手术中获取患者阴道前壁组织，采用免疫印迹方法检测BMP-1的蛋白表达，可以推测出盆底器官脱垂患者阴道组织中BMP-1的含量降低，对前胶原蛋白的剪切能力降低，引起细胞外基质代谢障碍，从而使盆底组织中胶原含量降低，最终引起盆底器官脱垂。但该研究仍存在补足之处，如所取标本仅来源于阴道组织，标本数量较少，还需进一步实验结果验证，另外，标本需进行手术才能获取，无法实现快速判断。我们知道，盆底器官脱垂与多种因素有关，为实现POP的预判和快速诊断，势必需要找一种快速准确的检测指标。
Utrophin是Duchenne肌营养不良（Duchenne musclal dystrophy，DMD）的相关蛋白，陈素秀等在“Utrophin与Duchenne肌营养不良”《医师进修杂质》第2005年10月第28卷第10期上半月，53-54，中揭示了可以通过增加内源Utrophin的表达量来达到对DMD患者治疗的目的，但并未有研究报告Utrophin在POP及其相关产品中的应用。
发明内容
本发明的目的在于提供Utrophin在POP早期预警、诊断、预后评估中的应用，首次将Utrophin的检测指标用于辅助诊断POP及早期预警和预后评估，可实现高灵敏度、高特异性、高准确度、高精确度的检测和判断。
本发明的另一目的在于提供一种用于POP早期预警、诊断、预后评估的产品，通过用于检测Utrophin水平的物质实现POP的批量、快速检测。
本发明通过下述技术方案实现：Utrophin在POP早期预警、诊断、预后评估中的应用，用于检测Utrophin水平的物质在制备POP早期预警、诊断、预后评估产品中的应用。
所述检测是针对受试者的生物样本进行，生物样本选自全血或血浆。
所述用于检测Utrophin水平的物质是用于在蛋白水平上检测Utrophin的物质。
所述物质在蛋白水平上检测Utrophin的方法包括：免疫荧光分析法、ELISA、生物芯片法、电化学发光法。
所述POP早期预警、诊断、预后评估产品包括试剂盒、试纸或其他医学上可实现的产品。
一种用于POP早期预警、诊断、预后评估的产品，包括用于检测Utrophin水平的物质。
所述用于检测Utrophin水平的物质是用于在蛋白水平上检测Utrophin的物质。
所述物质在蛋白水平上检测Utrophin的方法包括：免疫荧光分析法、ELISA、生物芯片法、电化学发光法。
设置检测限为标准值，当检测到的Utrophin水平高于或等于标准值时，判断为阳性，表明患有POP；当检测到的Utrophin水平低于标准值时，判断为阴性，表明未患有POP。
本发明与现有技术相比，具有以下优点及有益效果：
（1）本发明通过研究首次发现，由于POP患者的盆腔肌组织功能障碍，导致女性POP患者血浆中Utrophin水平显著高于健康对照女性，因此，基于这一研究基础，首次将Utrophin作为POP的诊断与预测指标。目前尚未发现以血液样本中的Utrophin含量作为盆底器官脱垂的检测指标的报道，也未发现以血液样本中的Utrophin含量为检测指标的盆底器官脱垂检测试剂盒及其制备方法的相关报道。
（2）本发明方法将检测Utrophin水平的物质用于制备POP早期预警、诊断、预后评估的产品，如检测试剂盒等，操作方法简单，以血液为检测样品，可实现快速、批量的检测，Utrophin水平的表达可通过现有免疫荧光分析法、ELISA、生物芯片法、电化学发光法等方法实现，具有高灵敏度、高特异性、高准确度以及高精确度的特点。
附图说明
图1为实施例2中涉及的A450值- Utrophin浓度标准曲线。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步地详细说明，但本发明的实施方式不限于此。
实施例1：
本实施例是以Utrophin为检测指标的盆底器官脱垂检测试剂盒。主要是将检测Utrophin水平的物质用于制备盆底器官脱垂检测试剂盒，以辅助POP诊断、早期预警和/或预后评估。
具体制备工艺步骤如下：
（1）制备包被有鼠抗人utrophin单克隆抗体（购自：santa cruz公司，货号：sc-33699）的多孔板。
用pH＝9的碳酸盐缓冲液将鼠抗人utrophin单克隆抗体稀释为浓度10 μg /mL的稀释液，在抗体稀释液中加入无水甲醇，无水甲醇的加入量以其浓度达到3 mL/100 mL为限，然后将所述含甲醇的鼠抗人utrophin单克隆抗体稀释液按100 μL/孔的量加入96孔板的各孔内，在4℃包被12小时；包被时间届满后，将浓度1 g/100 mL的牛血清白蛋白溶液按120 μL/孔的量加入多孔板上的各孔并在37℃进行封闭反应，反应时间为1小时；封闭反应结束后，用pH＝7.2、浓度为0.05 mol/L的磷酸盐缓冲液洗涤多孔板，当多孔板上的未反应物被去除后即获得包被有鼠抗人utrophin单克隆抗体的多孔板，然后将其置于4℃冰箱中保存备用。
（2）制备生物素标记的兔抗人utrophin多克隆抗体（购自：Abcam公司，货号ab244363）（Biotin-utrophinAb）检测液。
以N,N-二甲基甲酰胺为溶剂，生物素酰-N羟基丁二酰亚胺酯为溶质配制浓度为50μg/μL的酰-N羟基丁二酰亚胺酯溶液，以pH＝9.6、浓度为1 mol/L的碳酸盐缓冲液为溶剂、兔抗人utrophin多克隆抗体为溶质配制浓度为24 mg/mL的兔抗人utrophin多克隆抗体溶液，按酰-N羟基丁二酰亚胺酯与兔抗人utrophin多克隆抗体的质量比＝1∶7量取所述酰-N羟基丁二酰亚胺酯溶液和所述兔抗人utrophin多克隆抗体溶液形成混合液，将所述酰-N羟基丁二酰亚胺酯溶液和所述兔抗人utrophin多克隆抗体溶液的混合液在搅拌下（磁力搅拌器，搅拌速度200 转/分）于室温反应4小时，即获得生物素标记的兔抗人utrophin多克隆抗体（Biotin-utrophinAb）；反应结束后，将含生物素标记的兔抗人utrophin多克隆抗体（Biotin-utrophinAb）的反应液装入透析袋中，用pH＝9.2、浓度为0.05 mol/L的磷酸盐缓冲液在4℃进行透析，透析时间为12小时，其间更换透析液3次；继后在透析后的所述反应液中加入牛血清白蛋白，所述牛血清白蛋白的加入量以其浓度达到4 g/100 mL为限。
将上述过程制备的含生物素标记的兔抗人utrophin多克隆抗体（Biotin-utrophinAb）和牛血清白蛋白的透析后反应液与甘油按体积比1∶1计量，在室温下混合均匀即形成生物素标记的兔抗人utrophin多克隆抗体（Biotin-utrophinAb）检测液，其保存温度为－20℃。
（3）每个试剂盒配备亲和素-辣根过氧化物酶12 mL、显色底物3',3',5,5'-四甲基联苯胺12 mL、utrophin蛋白标准品（utrophin的浓度为10 ng/mL）1 mL和样本稀释液30mL，样本稀释液是在浓度0.02 mol/L的三羟甲基氨基甲烷缓冲液（Tris缓冲液，TBS）中加入牛血清白蛋白配制而成，所述牛血清白蛋白的加入量以其浓度达到2 g/100 mL为限；所述亲和素-辣根过氧化物酶与生物素标记的兔抗人utrophin多克隆抗体检测液的体积比为1∶1。
实施例2：
本实施例是以实施例1制备的盆底器官脱垂检测试剂盒对待测样本进行检测。
1、待测样本
（1）标样准备
将实施例1所述试剂盒中配备的Utrophin蛋白标准品设为含Utrophin浓度最高的标样，命名为标样1，其Utrophin的浓度为50 ng/mL，然后用实施例1所述试剂盒中配备的样本稀释液将所述Utrophin蛋白标准品分别稀释成Utrophin浓度为50ng/mL、25ng/mL、12.5ng/mL、6.25ng/mL、3.13ng/mL、1.56ng/mL、0.78ng/mL的标样，依次命名为标样1、标样2、标样3、标样4、标样5、标样6和标样7，共计有7个标样。
（2）试样
以四川大学华西第二医院门诊及住院的女性为实验对象，根据现有诊断方法将实验对象分为盆底脱垂组和健康对照组，收集两组女性的抗凝血样本作为试样，共计40个试样，其中，试样1-20取自于盆底脱垂组，试样21-40取自于健康对照组。
（3）空白对照
实施例1所述试剂盒中配备的样本稀释液——为空白对照。
2、样本检测
（1）检测前将试剂盒的所有试剂、待测样本缓慢均衡至室温（18℃~25℃）；
（2）将步骤1所准备的标样、空白对照、试样分别加入包被有鼠抗人utrophin单克隆抗体的96孔板上的相应加样孔中，各标样、空白对照、试样均设复孔对照；各加样孔中的加样量为100 μL。用胶膜遮盖所述96孔板，并将所述96孔板置于振摇仪上在振摇状态下室温孵育2.5小时，振摇速度为100转/分。
（3）孵育时间届满后，吸尽各加样孔中的液体，在自动洗板机上设置清洗程序，以400 μL/孔洗液（浓度0.02 mol/L的磷酸盐缓冲液或浓度为0.02 mol/L的Tris缓冲液）将每个加样孔清洗两次，每次清洗时，洗液需在孔中停留10秒～15秒；清洗完毕后，将96孔板翻转，使各加样孔孔口向下，在吸水滤纸上轻拍使各加样孔中残留的洗液完全去除。
（4）向96孔板上的各加样孔中分别加入100 μL生物素标记的鼠抗人utrophin单克隆抗体（Biotin-utrophinAb）检测液，然后用胶膜遮盖所述96孔板，并将所述96孔板置于振摇仪上在振摇状态下室温孵育1.5小时，振摇速度为100转/分；孵育时间届满后，吸尽各加样孔中的液体，按步骤（3）所述方法清洗所述96孔板。
（5）向所述96孔板上的各加样孔中分别加入100 μL亲和素-辣根过氧化物酶，然后用胶膜遮盖所述96孔板，并将所述96孔板置于振摇仪上在振摇状态下室温孵育1.5小时，振摇速度为100转/分；孵育时间届满后，吸尽各加样孔中的液体，按步骤（3）所述方法清洗所述96孔板。
（6）向所述96孔板上的各加样孔中分别加入100 μL 3',3',5,5'-四甲基联苯胺，然后在室温避光孵育10分钟，孵育时间届满后，向各加样孔中分别加入100 μL终止液，所述终止液为硫酸和亚硫酸钠配制的水溶液，硫酸的浓度为2 mol/L，亚硫酸钠的浓度为0.1mol/L。
（7）将所述96孔板放置在酶标仪中，用酶标仪测各孔的A450值（光密度值或吸光度值），所测结果见下表（表中的A450值为两孔的加权平均值）。空白对照的A450值为0.1355。
表1：标样的A450值
Figure DEST_PATH_IMAGE001
表2：试样1～20的A450值
Figure 954205DEST_PATH_IMAGE002
表3：试样21～40的A450值
Figure DEST_PATH_IMAGE003
（8）根据各标样的A450值与各标样中Utrophin的浓度，制作A450值- Utrophin浓度标准曲线（见图1），并得到计算公式y=((max/(x-min)-1)^(-1/Hillslope))*EC50（见表6），式中，y为被测样品的A450值，x为被测样品中Utrophin的含量。
（9）根据所测各试样的A450值，用公式y=((max/(x-min)-1)^(-1/Hillslope))*EC50（见表6）计算各试样中Utrophin的浓度，计算结果见下表：
表4：试样1～20的计算结果（Utrophin浓度单位：ng/mL）
Figure 74607DEST_PATH_IMAGE004
表5：试样21～40的计算结果（Utrophin浓度单位：ng/mL）
Figure DEST_PATH_IMAGE005
表6四参数法的公式与参数
Figure 526449DEST_PATH_IMAGE006
计算表4中试样1～20的Utrophin平均浓度，其计算结果为47.30±47.86 ng/mL。计算表5中试样21-40的Utrophin平均浓度，其计算结果为1.83±1.97ng/mL。从计算结果可以看出，取自于盆底脱垂组的试样1～20中的Utrophin平均浓度与取自于健康对照组的试样21～40中的Utrophin平均浓度的差异具有统计学意义。
根据健康对照组的均数±2×标准差的计算结果设为检测限，因此，本发明所述试剂盒设置的Utrophin检测限为6.235 ng/mL，即待测样本中 Utrophin浓度高于或等于6.235ng/mL判定为阳性（即患有女性盆底器官脱垂）， Utrophin浓度低于6.235ng/mL判定为阴性（即未患女性有盆底器官脱垂）。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例，并非对本发明做任何形式上的限制，凡是依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化，均落入本发明的保护范围之内。
SEQUENCE LISTING
<110> 四川大学华西第二医院
<120> Utrophin在POP早期预警、诊断、预后评估中的应用和产品
<130> 2020
<160> 1
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 988
<212> PRT
<213> Utrophin
<400> 1
Met Gln Ile Leu Arg Cys Leu Gln Lys Cys Gly Lys Leu Lys Met Met
1 5 10 15
Ala Val Val Arg Thr Ser Leu Gln Lys Val Val Val Leu Leu His Arg
20 25 30
Leu Gln Arg Met Ala Val Ser Ser Pro Arg Tyr Gln Lys Leu Cys Lys
35 40 45
Asp Ile Gln Ala Glu Ile Asp Ala His Asn Asp Ile Phe Lys Ser Ile
50 55 60
Asp Gly Asn Arg Gln Lys Met Val Lys Ala Leu Gly Asn Ser Glu Glu
65 70 75 80
Ala Thr Met Leu Gln His Arg Leu Asp Asp Met Asn Gln Arg Trp Asn
85 90 95
Asp Leu Lys Ala Lys Ser Ala Ser Ile Arg Ala His Leu Glu Ala Ser
100 105 110
Ala Glu Lys Trp Asn Arg Leu Leu Met Ser Leu Glu Glu Leu Ile Lys
115 120 125
Trp Leu Asn Met Lys Asp Glu Glu Leu Lys Lys Gln Met Pro Ile Gly
130 135 140
Gly Asp Val Pro Ala Leu Gln Leu Gln Tyr Asp His Cys Lys Ala Leu
145 150 155 160
Arg Arg Glu Leu Lys Glu Lys Glu Tyr Ser Val Leu Asn Ala Val Asp
165 170 175
Gln Ala Arg Val Phe Leu Ala Asp Gln Pro Ile Glu Ala Pro Glu Glu
180 185 190
Pro Arg Arg Asn Leu Gln Ser Lys Thr Glu Leu Thr Pro Glu Glu Arg
195 200 205
Ala Gln Lys Ile Ala Lys Ala Met Arg Lys Gln Ser Ser Glu Val Lys
210 215 220
Glu Lys Trp Glu Ser Leu Asn Ala Val Thr Ser Asn Trp Gln Lys Gln
225 230 235 240
Val Asp Lys Ala Leu Glu Lys Leu Arg Asp Leu Gln Gly Ala Met Asp
245 250 255
Asp Leu Asp Ala Asp Met Lys Glu Ala Glu Ser Val Arg Asn Gly Trp
260 265 270
Lys Pro Val Gly Asp Leu Leu Ile Asp Ser Leu Gln Asp His Ile Glu
275 280 285
Lys Ile Met Ala Phe Arg Glu Glu Ile Ala Pro Ile Asn Phe Lys Val
290 295 300
Lys Thr Val Asn Asp Leu Ser Ser Gln Leu Ser Pro Leu Asp Leu His
305 310 315 320
Pro Ser Leu Lys Met Ser Arg Gln Leu Asp Asp Leu Asn Met Arg Trp
325 330 335
Lys Leu Leu Gln Val Ser Val Asp Asp Arg Leu Lys Gln Leu Gln Glu
340 345 350
Ala His Arg Asp Phe Gly Pro Ser Ser Gln His Phe Leu Ser Thr Ser
355 360 365
Val Gln Leu Pro Trp Gln Arg Ser Ile Ser His Asn Lys Val Pro Tyr
370 375 380
Tyr Ile Asn His Gln Thr Gln Thr Thr Cys Trp Asp His Pro Lys Met
385 390 395 400
Thr Glu Leu Phe Gln Ser Leu Ala Asp Leu Asn Asn Val Arg Phe Ser
405 410 415
Ala Tyr Arg Thr Ala Ile Lys Ile Arg Arg Leu Gln Lys Ala Leu Cys
420 425 430
Leu Asp Leu Leu Glu Leu Ser Thr Thr Asn Glu Ile Phe Lys Gln His
435 440 445
Lys Leu Asn Gln Asn Asp Gln Leu Leu Ser Val Pro Asp Val Ile Asn
450 455 460
Cys Leu Thr Thr Thr Tyr Asp Gly Leu Glu Gln Met His Lys Asp Leu
465 470 475 480
Val Asn Val Pro Leu Cys Val Asp Met Cys Leu Asn Trp Leu Leu Asn
485 490 495
Val Tyr Asp Thr Gly Arg Thr Gly Lys Ile Arg Val Gln Ser Leu Lys
500 505 510
Ile Gly Leu Met Ser Leu Ser Lys Gly Leu Leu Glu Glu Lys Tyr Arg
515 520 525
Tyr Leu Phe Lys Glu Val Ala Gly Pro Thr Glu Met Cys Asp Gln Arg
530 535 540
Gln Leu Gly Leu Leu Leu His Asp Ala Ile Gln Ile Pro Arg Gln Leu
545 550 555 560
Gly Glu Val Ala Ala Phe Gly Gly Ser Asn Ile Glu Pro Ser Val Arg
565 570 575
Ser Cys Phe Gln Gln Asn Asn Asn Lys Pro Glu Ile Ser Val Lys Glu
580 585 590
Phe Ile Asp Trp Met His Leu Glu Pro Gln Ser Met Val Trp Leu Pro
595 600 605
Val Leu His Arg Val Ala Ala Ala Glu Thr Ala Lys His Gln Ala Lys
610 615 620
Cys Asn Ile Cys Lys Glu Cys Pro Ile Val Gly Phe Arg Tyr Arg Ser
625 630 635 640
Leu Lys His Phe Asn Tyr Asp Val Cys Gln Ser Cys Phe Phe Ser Gly
645 650 655
Arg Thr Ala Lys Gly His Lys Leu His Tyr Pro Met Val Glu Tyr Cys
660 665 670
Ile Pro Thr Thr Ser Gly Glu Asp Val Arg Asp Phe Thr Lys Val Leu
675 680 685
Lys Asn Lys Phe Arg Ser Lys Lys Tyr Phe Ala Lys His Pro Arg Leu
690 695 700
Gly Tyr Leu Pro Val Gln Thr Val Leu Glu Gly Asp Asn Leu Glu Thr
705 710 715 720
Pro Ile Thr Leu Ile Ser Met Trp Pro Glu His Tyr Asp Pro Ser Gln
725 730 735
Ser Pro Gln Leu Phe His Asp Asp Thr His Ser Arg Ile Glu Gln Tyr
740 745 750
Ala Thr Arg Leu Ala Gln Met Glu Arg Thr Asn Gly Ser Phe Leu Thr
755 760 765
Asp Ser Ser Ser Thr Thr Gly Ser Val Glu Asp Glu His Ala Leu Ile
770 775 780
Gln Gln Tyr Cys Gln Thr Leu Gly Gly Glu Ser Pro Val Ser Gln Pro
785 790 795 800
Gln Ser Pro Ala Gln Ile Leu Lys Ser Val Glu Arg Glu Glu Arg Gly
805 810 815
Glu Leu Glu Arg Ile Ile Ala Asp Leu Glu Glu Glu Gln Arg Asn Leu
820 825 830
Gln Val Glu Tyr Glu Gln Leu Lys Asp Gln His Leu Arg Arg Gly Leu
835 840 845
Pro Val Gly Ser Pro Pro Glu Ser Ile Ile Ser Pro His His Thr Ser
850 855 860
Glu Asp Ser Glu Leu Ile Ala Glu Ala Lys Leu Leu Arg Gln His Lys
865 870 875 880
Gly Arg Leu Glu Ala Arg Met Gln Ile Leu Glu Asp His Asn Lys Gln
885 890 895
Leu Glu Ser Gln Leu His Arg Leu Arg Gln Leu Leu Glu Gln Pro Glu
900 905 910
Ser Asp Ser Arg Ile Asn Gly Val Ser Pro Trp Ala Ser Pro Gln His
915 920 925
Ser Ala Leu Ser Tyr Ser Leu Asp Pro Asp Ala Ser Gly Pro Gln Phe
930 935 940
His Gln Ala Ala Gly Glu Asp Leu Leu Ala Pro Pro His Asp Thr Ser
945 950 955 960
Thr Asp Leu Thr Glu Val Met Glu Gln Ile His Ser Thr Phe Pro Ser
965 970 975
Cys Cys Pro Asn Val Pro Ser Arg Pro Gln Ala Met
980 985

Claims (3)

1.用于检测Utrophin水平的物质在制备POP诊断产品中的应用，其特征在于：针对受试者的全血或血浆，在蛋白水平上检测其Utrophin水平。
2.根据权利要求1所述的用于检测Utrophin水平的物质在制备POP诊断产品中的应用，其特征在于：所述检测的方法包括：免疫荧光分析法、ELISA、生物芯片法、电化学发光法。
3.根据权利要求1所述的用于检测Utrophin水平的物质在制备POP诊断产品中的应用，其特征在于：所述产品包括试剂盒、试纸或其他医学上可实现的产品。
CN202010493136.6A 2020-06-03 2020-06-03 Utrophin在POP早期预警、诊断、预后评估中的应用和产品 Active CN111596068B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010493136.6A CN111596068B (zh) 2020-06-03 2020-06-03 Utrophin在POP早期预警、诊断、预后评估中的应用和产品

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010493136.6A CN111596068B (zh) 2020-06-03 2020-06-03 Utrophin在POP早期预警、诊断、预后评估中的应用和产品

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111596068A CN111596068A (zh) 2020-08-28
CN111596068B true CN111596068B (zh) 2021-07-23

Family

ID=72186047

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010493136.6A Active CN111596068B (zh) 2020-06-03 2020-06-03 Utrophin在POP早期预警、诊断、预后评估中的应用和产品

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111596068B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115148330B (zh) * 2022-05-24 2023-07-25 中国医学科学院北京协和医院 Pop治疗方案形成方法及系统

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1618881A1 (en) * 2004-07-20 2006-01-25 Santhera Pharmaceuticals (Schweiz) GmbH Use of non-glucocorticoid steroids for the treatment of muscular dystrophy

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
骨形态发生蛋白-1在盆底器官脱垂患者阴道组织中的表达及意义;王凤玫;《实用发产科杂志》;20121130;第28卷(第11期);全文 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN111596068A (zh) 2020-08-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101377492B (zh) 胱抑素c测定试剂盒
Doumas et al. Measurement of direct bilirubin by use of bilirubin oxidase.
WO2021185124A1 (zh) 维生素d结合蛋白作为标志物在精神疾病抑郁症诊断中的应用
CN102175871A (zh) 双胶乳法测定血清或尿液中游离轻链的液体双试剂试剂盒
CN108613977B (zh) 一种n末端脑钠肽前体检测试剂盒
CN106018829A (zh) 一种血清淀粉样蛋白a的测定试剂及其制备方法
CN111856038A (zh) Unc45a在pop早期预警、诊断、预后评估中的应用和产品
CN111596068B (zh) Utrophin在POP早期预警、诊断、预后评估中的应用和产品
CN112014572A (zh) 一种用于检测kl-6的乳胶颗粒制备方法及其应用
CN111856037B (zh) Unc45a与hsp10的比值在pop早期预警、诊断、预后评估中的应用和产品
CN111596069B (zh) Hsp10在pop早期预警、诊断、预后评估中的应用和产品
CN103389385A (zh) 一种乳胶包被的肌钙蛋白检测试剂盒
CN108133754B (zh) 一种溶栓后出血风险的预测系统
CN106546729B (zh) 一种去除干式免疫荧光定量法检测中血清基质效应的新工艺方法
CN105021827B (zh) 检测血清血管生成素样蛋白2含量的物质在制备检测肝脏炎症和纤维化程度产品中的应用
CN111596067B (zh) Zc3h8在pop早期预警、诊断、预后评估中的应用和产品
CN115097138A (zh) 一种缓冲液在pgp 9.5检测试剂盒中的应用
CN114966055A (zh) 一种缓冲液在胶质纤维酸性蛋白检测试剂盒中的应用
Ekunwe et al. Proteinuria and Blood Pressure Profile of Lagos School Children.
CN111855572A (zh) 一种用于糖尿病肾脏疾病的检测试剂盒及检测方法
CN111521821A (zh) 血管钙化的生物标志物及其应用
Wang et al. Clinical evaluation of immunochemical assay of lactate dehydrogenase isoenzyme 1 in early detection of acute myocardial infarction.
Ozdemir et al. An evaluation of both serum Klotho/FGF-23 and apelin-13 for detection of diabetic nephropathy
CN117590006B (zh) 生物标志物在制备诊断Vogt-小柳原田综合征的产品中的应用
Ratzmann et al. Further evidence for tubular dysfunction in insulin dependent diabetes

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant