CN111588738A - 一种可缓解或治疗旅行性腹泻的益生菌组合物及其应用 - Google Patents
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Abstract
本申请公开了一种可缓解或治疗旅行性腹泻的益生菌组合物及其应用。所述益生菌组合物包括乳双歧杆菌Probio‑M8和植物乳杆菌。本申请通过跟踪检测旅行性人群的肠道中有效微生物含量，证实了该益生菌组合物，如益生菌复合固体饮料能够平衡肠道微生态，进而达到缓解腹泻的效果，尤其对旅行性腹泻的缓解和治疗产生积极作用。
Description
技术领域
本申请涉及生物技术领域，特别涉及一种可缓解或治疗旅行性腹泻的益生菌组合物及其应用。
背景技术
腹泻俗称“拉肚子”，是指排便次数明显超过日常习惯的频率，粪质稀薄，水分增加，每日排便量超过200g，或含未消化食物或脓血、黏液。腹泻在临床上常伴有排便急迫感、肛门不适、失禁等症状。通常情况下，感染细菌、病毒或寄生虫等病原体是发生腹泻的最主要原因，这部分腹泻又被称为感染性腹泻或胃肠炎，感染性腹泻的发生与传播被认为是卫生条件较差的结果。随着社会的发展，旅行或出差是与每个人必相关的生活方式之一。有研究表明，旅行引起的“水土不服”，伴随而来的腹泻症状并不是因为对旅行地的水土不耐受。究其原因，绝大部分都是感染性腹泻，是其一种特殊类型。病原体90％以上都是细菌，这些细菌主要来自于污染的水和食物，当进入体内后，可潜伏数小时到数日再发病。旅行性腹泻较一般腹泻，治疗难度更大，不定性因素更多。目前市面上治疗旅行性腹泻即细菌感染性腹泻最常见的办法是抗生素治疗，据中国药学会统计数据显示，我国每年出现腹泻症状患者的抗生素平均使用率达84％，抗生素的使用会大量破坏患者肠道正常菌群的平衡，容易发生致命的二重感染。
发明内容
本申请的目的在于提供一种可缓解或治疗旅行性腹泻的益生菌组合物及其应用，以解决采用抗生素治疗腹泻破坏肠道正常菌群的平衡，发生二重感染的问题。
第一方面，提供一种可缓解或治疗旅行性腹泻的益生菌组合物，包括：乳双歧杆菌Probio-M8(Bifidobacterium lactis Probio-M8，Probio-M8)和植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。所述乳双歧杆菌Probio-M8保藏于在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.18610；分类命名为乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)；保藏时间：2019年09月20日；保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；该菌株的检测结果为存活。所述植物乳杆菌保藏于在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.11446。分类命名为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)；保藏时间：2015年09月24日；保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；该菌株的检测结果为存活。该菌株已在授权公告号CN105779350B的专利中公开。
第二方面，提供所述的益生菌组合物在缓解或治疗旅行性腹泻中的应用。
第三方面，提供一种可缓解或治疗旅行性腹泻的益生菌产品，包括所述的乳双歧杆菌Probio-M8和所述植物乳杆菌。
进一步地，所述益生菌产品包括直投式发酵剂和功能性益生菌发酵乳制品和保健品。
进一步地，所述益生菌产品包括使用所述乳双歧杆菌Probio-M8和所述植物乳杆菌的发酵剂生产得到的豆制品、乳制品或果蔬制品。
进一步地，所述益生菌产品包括药品，所述药品包括乳双歧杆菌Probio-M8和植物乳杆菌，以及，药物载体和/或药用辅料。
第四方面，提供一种可缓解或治疗旅行性腹泻的益生菌固体饮料，包括所述的乳双歧杆菌Probio-M8和所述植物乳杆菌。
由以上技术方案可知，本申请实施例公开一种可缓解或治疗旅行性腹泻的益生菌组合物及其应用。所述益生菌组合物包括乳双歧杆菌Probio-M8和植物乳杆菌。本申请通过跟踪检测旅行性人群的肠道中有效微生物含量，证实了该益生菌组合物，如益生菌复合固体饮料能够平衡肠道微生态，进而达到缓解腹泻的效果，尤其对旅行性腹泻的缓解和治疗产生积极作用。
附图说明
为了更清楚地说明本申请实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本申请的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为受试者排便频率结果。
具体实施方式
本申请提供一种可缓解或治疗旅行性腹泻的益生菌组合物，包括：乳双歧杆菌Probio-M8(Bifidobacterium lactis Probio-M8，Probio-M8)和植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。
所述乳双歧杆菌Probio-M8分离自健康妇女母乳，是一株具有良好的胃肠液和胆盐耐受性的益生菌菌株。所述乳双歧杆菌Probio-M8保藏于在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.18610；分类命名为乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)；保藏时间：2019年09月20日；保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；该菌株的检测结果为存活。
所述植物乳杆菌可以抗肠炎沙门氏菌感染，具有较好的耐酸耐胆盐特性，对肠炎沙门氏菌的生长有显著的抑制作用。所述植物乳杆菌保藏于在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.11446。分类命名为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)；保藏时间：2015年09月24日；保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；该菌株的检测结果为存活。该菌株已在授权公告号CN105779350B的专利中公开。
本申请实施例提供所述的益生菌组合物在缓解或治疗旅行性腹泻中的应用。
本申请实施例提供一种可缓解或治疗旅行性腹泻的益生菌产品，包括所述的乳双歧杆菌Probio-M8和所述植物乳杆菌。
进一步地，所述益生菌产品包括直投式发酵剂和功能性益生菌发酵乳制品和保健品。
进一步地，所述益生菌产品包括使用所述乳双歧杆菌Probio-M8和所述植物乳杆菌的发酵剂生产得到的豆制品、乳制品或果蔬制品。
进一步地，所述益生菌产品包括药品，所述药品包括乳双歧杆菌Probio-M8和植物乳杆菌，以及，药物载体和/或药用辅料。
本申请实施例提供一种可缓解或治疗旅行性腹泻的益生菌固体饮料，包括所述的乳双歧杆菌Probio-M8和所述植物乳杆菌。
本申请为了证明含有所述的乳双歧杆菌Probio-M8和所述植物乳杆菌的益生菌固体饮料可缓解或治疗旅行性腹泻，做了以下实验。
实验例1益生菌固体饮料干预旅行性腹泻人群临床实验建立
1.益生菌乳双歧杆菌Probio-M8和植物乳杆菌干预治疗旅行性腹泻人体试验，在完全符合伦理道德的情况下，对志愿者进行治疗研究，实验共分为A、B、C、G四组，其中G组为安慰剂组，A、B、C为实验组。具体人体实验志愿者筛选标准如表1所示，具体分组明细如表2所示。
2.供试益生菌固体饮料服用方法：将益生菌固体饮料溶于温水、牛奶或直接口服，每日饭后服用1次(1.0×1011CFU/次)，连续服用21天。
3.固体饮料中，安慰剂组和实验组均含有成分麦芽糊精、苹果粉。其中实验组固体饮料添加乳双歧杆菌Probio-M8和植物乳杆菌(乳双歧杆菌Probio-M8和植物乳杆菌等比例混合，1.0×1011CFU/次，每日一次)。
4.分别于试验开始和结束时进行两次临床数据收集，采用SAS软件进行ANOVA分析。
表1.人体实验筛选标准
表2.具体分组明细
实施例2益生菌固体饮料干预治疗旅行性腹泻人体实验排便频率记录
益生菌乳双歧杆菌Probio-M8和植物乳杆菌干预治疗旅行性腹泻人体试验评价标准，具体的，腹泻患者纳入标准参考肠易激综合症(IBS)罗马Ⅲ标准，如表3所示。
经统一培训的记录者每3d询问并记录患者排便频率和粪便形态，然后按下述公式计数出周排便频率，粪便形态的描述与表3相对应。
周排便频率(次/周)＝3/7×排便次数(3d内)
表3.罗马标准Ⅲ和IBS亚型分类
受试期间，分别于0、7、14、21、28d询问并记录受试者的排便频率和粪便形态。结果如图1显示，在服用益生菌固体饮料期间受试者平均排便频率均有显著变化(P＜0.01)，其中实验组A、B、C与健康组G组均出现显著差异，受试者在服用益生菌固体饮料后排便频率明显下降，连续服用21d后，平均排便频率已经达到每周正常指标，且粪便状态基本为表3所述健康人群粪便状态，实验期间所有受试者未发现任何不适症状。其中，在旅行开始前一周服用益生菌固体饮料时，受试者平均排便频率显著低于前一周未服用益生菌固体饮料的实验组(B组)，且随旅途一直服用益生菌固体饮料的实验组(C组)相比较于只在旅途开始前一周服用益生菌固体饮料的实验组(A组)在受试后期更接近健康对照组(G组)，显而易见，在旅行前一周干预且随旅程一直服用益生菌固体饮料可有效缓解旅行性人群腹泻。
实施例3益生菌固体饮料干预治疗旅行性腹泻人体实验肠道菌群检测
分别于试验前后取患者粪便2～5g，置于密闭厌氧罐中，冷藏条件下立即送实验室检测双歧杆菌、大肠杆菌、肠球菌、类球菌、产气芽孢杆菌的活菌数量。取粪便1g，加PBS缓冲液9mL后，再加无菌玻璃珠充分振荡作为1:10的待检液，再做连续10倍稀释(10-2～10-9)。取合适浓度的含菌液100μL涂布于适合双歧杆菌、大肠杆菌、肠球菌、类球菌、产气芽孢杆菌生长的选择性培养基，每个稀释度做3个平行。在需氧或厌氧条件下培养48h(其中大肠杆菌、肠球菌培养24h)，选择菌落数在30～300间的培养基计数，并在计数前对细菌进行镜检鉴定，肠道菌群选择性培养基及其培养条件见表4。
表4.肠道菌群选择培养基及培养条件
便秘腹泻患者在服用益生菌固体饮料前和连续服用21d后，对粪便中双歧杆菌、大肠杆菌、肠球菌、类球菌、产气芽孢杆菌进行活菌计数，同时以健康人群肠道菌群活菌数的平均值作为对照进行数据分析。实验结果由表5可知，旅行性腹泻患者肠道菌群数量与健康人群相比较有显著差异(P＜0.01)，最显著的是双歧杆菌数量明显低于健康人群，在连续21d服用益生菌固体饮料后(1.0×1010CFU/g)，旅行性腹泻患者肠道菌群结构有明显变化，其中旅行性腹泻患者肠道中双歧杆菌活菌数由旅行开始并连续服用21d后(B组)，活菌数由4.99±1.57(Lg CFU/g)增加至7.51±1.02(Lg CFU/g)，当提前七天干预且随旅行一直服用21d后，活菌数由5.01±1.00(Lg CFU/g)增加至9.34±1.30(Lg CFU/g)，数据表明提前七天干预旅行性受试者并且随旅途一直服用，可使受试者体内双歧杆菌数量显著高于健康对照组和其他实验组。另外，大肠杆菌、肠球菌类球菌、产气芽孢杆菌数量均有不同程度的增加。
表5.益生菌固体饮料干预旅行性腹泻人群肠道菌群微生物活菌数变化情况(x±s)
注：表中“开始”意为“开始旅行”，数字肩字母代表显著性水平，设置为P＝0.05
综上所述，旅行性人群在旅途开始前一周并随旅途一直服用益生菌固体饮料，效果最为显著，乳双歧杆菌Probio-M8和植物乳杆菌具有调节肠道菌群的作用，对腹泻患者治疗效果显著。
由以上技术方案可知，本申请实施例提供一种可缓解或治疗旅行性腹泻的益生菌组合物及其应用。所述益生菌组合物包括乳双歧杆菌Probio-M8和植物乳杆菌。本申请通过跟踪检测旅行性人群的肠道中有效微生物含量，证实了该益生菌组合物，如益生菌复合固体饮料能够平衡肠道微生态，进而达到缓解腹泻的效果，尤其对旅行性腹泻的缓解和治疗产生积极作用。
本领域技术人员在考虑说明书及实践这里公开的申请后，将容易想到本申请的其它实施方案。本申请旨在涵盖本申请的任何变型、用途或者适应性变化，这些变型、用途或者适应性变化遵循本申请的一般性原理并包括本申请未公开的本技术领域中的公知常识或惯用技术手段。说明书和实施例仅被视为示例性的，本申请的真正范围和精神由下面的权利要求指出。
应当理解的是，本申请并不局限于上面已经描述并在附图中示出的精确结构，并且可以在不脱离其范围进行各种修改和改变。本申请的范围仅由所附的权利要求来限制。
Claims (7)
1.一种可缓解或治疗旅行性腹泻的益生菌组合物，其特征在于，包括：乳双歧杆菌Probio-M8(Bifidobacterium lactis Probio-M8，Probio-M8)和植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)，所述乳双歧杆菌Probio-M8的保藏编号为CGMCC No.18610，所述植物乳杆菌的保藏编号为CGMCC No.11446。
2.权利要求1所述的益生菌组合物在缓解或治疗旅行性腹泻中的应用。
3.一种可缓解或治疗旅行性腹泻的益生菌产品，其特征在于，包括权利要求1所述的乳双歧杆菌Probio-M8和所述植物乳杆菌。
4.根据权利要求3所述的益生菌产品，其特征在于，所述益生菌产品包括直投式发酵剂和功能性益生菌发酵乳制品和保健品。
5.根据权利要求3所述的益生菌产品，其特征在于，所述益生菌产品包括使用所述乳双歧杆菌Probio-M8和所述植物乳杆菌的发酵剂生产得到的豆制品、乳制品或果蔬制品。
6.根据权利要求3所述的益生菌产品，其特征在于，所述益生菌产品包括药品，所述药品包括乳双歧杆菌Probio-M8和植物乳杆菌，以及，药物载体和/或药用辅料。
7.一种可缓解或治疗旅行性腹泻的益生菌固体饮料，其特征在于，包括权利要求1所述的乳双歧杆菌Probio-M8和所述植物乳杆菌。
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