CN111543549A - 一种中药微生态制剂的制备方法及其应用 - Google Patents

一种中药微生态制剂的制备方法及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种中药微生态制剂的制备方法及其应用，属于禽用中药微生态制剂技术领域。海带加水、辅料，灭菌后加入海带降解菌种子液培养发酵，随后以海带发酵液体积为基准，分别加入麦芽汁、红糖、黄芪粉灭菌备用；待发酵罐温度下降后加入5％混合菌种行二次发酵，发酵结束后过滤除渣，得液体制剂，或制成干粉，即得中药微生态制剂。本发明利用海带降解菌进行液态发酵，再加入黄芪粉等由混合菌种行二次液体发酵，有效解决了黄芪单味中药抗菌能力及其他药效低下的缺陷，最终达到显著提升抑菌效果和药物有效成分的效果。经试验证实，由本发明制得的中药微生态制剂相比传统抗生素对家禽禽源致病性大肠杆菌体外抑菌效果更佳，且不会产生耐药性。

Description

一种中药微生态制剂的制备方法及其应用
技术领域
本发明属于禽用中药微生态制剂技术领域，具体涉及一种用于提高SPF鸡生长性能、提升抗病力、成活率的中药微生态制剂，同时还涉及该中药微生态制剂的制备方法。
背景技术
我国中医药博大精深，在中国疾病防治史中占据重要地位。中草药作为天然有机物，具有绿色天然、无残留、不引起细菌耐药性等特点。在动物中使用中药后，能显著提高机体的免疫力，有效地减少养殖动物疾病的发生，且可以不同程度地改善动物制品的风味和肉质。不仅具有保健、治病的功效，而且还可以改善生态环境，中兽药作为饲料添加剂在畜禽养殖中的作用也就愈加重要。然而，由于养殖动物的饲养成本受限，中药材价格高涨，往往用于养殖业的中兽药原料均来自优等中药材的下脚料或次品，临床疗效不能得到很好地反馈。因此，如何以较低成本提高中药材活性成分的释放及药理作用的发挥，在兽医临床至关重要。
中草药发酵技术是在继承中草药炮制法的基础上，吸取微生态学研究成果，结合现代微生物工程而形成的高科技中草药制药新技术，利用生物体的生物转化功能，以提高中草药中活性成分物质含量、改变某一成分或产生一些中草药中不具有的活性成分，从而为活性化合物的筛选提供了新的途径。现代的中药发酵技术摒弃了传统的自然发酵工艺，将来源于人或动物消化道的益生菌作为发酵菌株，模拟体外“胃肠发酵系统”，完成中草药有效成分的转化，直接获得可吸收且具有较强药理活性代谢产物和有效成分的小分子物质。大幅度提高中药活性物质含量，改善中药性味，降低中药毒副作用，去除中药中的大分子杂质。同时，中草药中的某些成分亦能促进益生菌的生长，微生物在发酵中产生大量的有机酸(乳酸、丙酸)、肽类等，对机体免疫系统也起到促进作用。
随着人们对食品安全和卫生健康问题的重视，绿色环保的健康养殖模式是今后畜牧业发展的必然趋势。基于此，研究和开发一种无毒副作用、又能防病促生长的、减抗替抗型、绿色高效的兽用制剂或饲料添加剂，意义重大。
发明内容
本技术方案利用生物技术制备海带发酵液，加入黄芪粉和辅助的营养物质，再接种益生菌进行发酵，制备含海藻多糖、黄芪多糖、海藻寡糖的中药微生态制剂。
为实现上述发明目的，本发明采用下述技术方案为：
一种中药微生态制剂的制备方法，包括：
(1)备料灭菌：海带切片后置入发酵罐内，加入清水和辅料，灭菌备用；
(2)初次发酵：待发酵罐内温度下降至40℃以下，向备料中加入5％海带降解菌种子液培养发酵，得海带发酵液；
(3)二次备料灭菌：将海带发酵液离心，得上清液备用；以上清液体积为基准，分别加入10％麦芽汁(v/v)、10％红糖(m/v)、7％～10％黄芪粉(m/v)灭菌备用；
(4)二次发酵：待发酵罐内温度降至40℃以下，向加入5％混合菌种行二次发酵；
(5)检测：发酵结束后进行检测，经检测符合条件后停止发酵，得发酵产物备用；
(6)制得成品：发酵产物过滤除渣，分装得液体制剂，或经喷雾干燥，制成干粉，即得一种中药微生态制剂。
进一步的，步骤(1)所述海带选自干海带或新鲜海带中任意一种；
所述辅料包括但不限于硫酸铵、氯化钠、磷酸氢二钾、硫酸镁、硫酸亚铁、硫酸锰。
所述灭菌条件为：100℃下灭菌30min。
进一步的，以干海带发酵时，加入50倍量的水；
以新鲜海带发酵时，加入6倍量的水。
进一步的，步骤(2)所述海带降解菌种子液由如下方法制得：
(1)取自然生长的海带样品，按5％(m/v)加入到利用海带、硫酸铵、氯化钠、磷酸氢二钾、硫酸镁、硫酸亚铁、硫酸锰等制备的培养液中，37℃、150rpm转速下培养直至海带90％以上分解；
(2)取一定量的上述海带分解液，按5％(v/v)接种新的利用海带、硫酸铵、氯化钠、磷酸氢二钾、硫酸镁、硫酸亚铁、硫酸锰等制备的培养液中，继续培养至海带分解，连续重复本步骤2～3次；
(3)取一定量最后一次培养的海带分解液，经一系列稀释后涂布牛肉膏蛋白胨平板，37℃培养，待平板上有菌落生长后，挑取单菌落继续在牛肉膏蛋白胨平板上划线，至有单菌落出现，继续挑取单菌落在牛肉膏蛋白胨平板上重复划线2次，待有单菌落生长后即为纯菌株；
(4)挑取上述纯化的单菌落，分别接种在含有海藻酸钠和果胶为唯一碳源的培养基表面，若有菌落生长即为分解海藻酸钠或果胶的菌株，各选取一株分解海藻酸钠和果胶，其中效果最好的菌株和在一起作为种子菌种；
(5)取上述种子菌种接种利用海带、硫酸铵、氯化钠、磷酸氢二钾、硫酸镁、硫酸亚铁、硫酸锰等制备的培养液中，37℃、150rpm转速下培养直至海带90％以上分解，即为原始种子液；
(6)取原始种子液，按5％(v/v)接种于利用海带、硫酸铵、氯化钠、磷酸氢二钾、硫酸镁、硫酸亚铁、硫酸锰等制备培养液中，在37℃、150rpm转速下培养1～2天至90％海
带分解成液体，即为生产种子液。
进一步的，步骤(2)所述发酵终点以90％海带完全分解为止。
进一步的，步骤(3)所述灭菌条件为：121℃下灭菌20min。
进一步的，步骤(4)所述混合菌种由枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、植物乳杆菌按菌数
比例1:1:2混合制成；
所述枯草芽孢杆菌由无锡阿尔宝尔生物工程有限公司提供；
凝结芽孢杆菌由洛阳欧科拜克生物技术股份有限公司提供；
植物乳杆菌由天津市育琪生物技术有限公司提供。
进一步的，步骤(5)所述发酵条件为37℃、pH 6.5-6.8、转速100rpm下发酵48h。
进一步的，步骤(6)所述检测符合条件选自如下任意3个或4个：①pH值≤5.0；②芽孢杆菌数量≥1×108CFU；②乳酸菌数量≥1×109CFU；④总多糖含量比发酵前增加超过30％～50％；
所述总多糖包括黄芪多糖、海藻多糖和海藻寡糖。
本发明还公开了一种如上述任一制备方法制得的中药微生态制剂。
通过上述的技术方案，本发明的有益效果是：
1、本发明采用从海带降解菌种子液对海带进行发酵，解决了传统技术采用酶解陆生植物的复合酶制剂降解效果差的缺陷，使海带中所含的褐藻胶降解率达90％以上。再加入黄芪、混合菌种(益生菌)进行二次液体发酵，有效解决了黄芪单味中药抗菌能力及其他药效低下的缺陷，最终达到显著提升抑菌效果和药物有效成分的效果。
2、本发明两次发酵均采用液体发酵，技术含量高、效果可控，发酵产物彻底、明确，可随时监测。
3、由本发明制得的中药微生态制剂能有效改善传统抗生素对家禽带来的中药微生态制剂对禽源致病性大肠杆菌体外抑菌效果的试验。
4、需要说明的是本发明的技术效果是个工艺步骤及参数相互协同、相互作用的结果，并非简单的工艺的叠加，各工艺的有机结合产生的效果远远超过各单一工艺功能和效果的叠加，具有较好的先进性和实用性。
附图说明
图1为混合菌种发酵前后对黄芪粗多糖含量的影响比较；
图2为混合菌种发酵前后对黄芪总黄酮含量的影响比较；
图3为混合菌种发酵前后对黄芪总皂苷含量的影响比较。
具体实施方式
实施例1
一种中药微生态制剂的制备方法
(1)取贮存的干海带，机器破碎至2cm小片，按干海带1:50加入清水和辅料，称重后装入发酵罐，100℃灭菌30min。
(2)待罐内温度降至40℃以下，加入5％海带降解菌种子液，37℃搅拌150rpm培养2天至90％海带完全分解，发酵终止。
(3)离心获得上清液，备用；同时，准备黄芪、麦芽汁和红糖等发酵原料。黄芪经粉碎并过80目筛子，备用。
(4)上发酵罐：以海带发酵液体积为基准，分别加入麦芽汁10％(v/v)、红糖10％(m/v)、黄芪粉8.5％(m/v)，121℃灭菌20min。
(5)待罐内温度降至40℃以下，加入5％混合菌种(枯草芽孢杆菌:凝结芽孢杆菌:植物乳杆菌＝1:1:2)，在37℃、pH为6.5、搅拌100rpm的条件下培养48h。
(6)48h后检测，当pH值≤5.0、芽孢杆菌数量≥1×108CFU、乳酸菌数量≥1×109CFU、总多糖含量(黄芪多糖、海藻多糖、海藻寡糖)比发酵前增加30％～50％以上时，其中有3个或以上满足条件时停止发酵。
(7)过滤除渣，分装得液体制剂，或经喷雾干燥，制成干粉应用。
实施例2
一种中药微生态制剂的制备方法
(1)取贮存的新鲜海带，机器破碎至3cm小片，按新鲜海带1:6加入清水和辅料，称重后装入发酵罐，100℃灭菌30min。
(2)待罐内温度降至40℃以下，加入5％海带降解菌种子液，37℃搅拌150rpm培养2天至90％海带完全分解，发酵终止。
(3)离心获得上清液，备用；同时，准备黄芪、麦芽汁和红糖等发酵原料，黄芪经粉碎并过80目筛子，备用。
(4)上发酵罐：以海带发酵液体积为基准，分别加入麦芽汁10％(v/v)、红糖10％(m/v)、黄芪粉7％(m/v)，121℃灭菌20min。
(5)待罐内温度降至40℃以下，加入5％混合菌种(枯草芽孢杆菌:凝结芽孢杆菌:植物乳杆菌＝1:1:2)，在37℃、pH为6.5、搅拌100rpm的条件下培养48h。
(6)48h后检测，当pH值≤5.0、芽孢杆菌数量≥1×108CFU、乳酸菌数量≥1×109CFU、总多糖含量(黄芪多糖、海藻多糖、海藻寡糖)比发酵前增加30％～50％以上时，其中有3个或以上满足条件时停止发酵。
(7)过滤除渣，分装得液体制剂，或经喷雾干燥，制成干粉应用。
实施例3
一种中药微生态制剂的制备方法
(1)取贮存的干海带，机器破碎至3cm小片，按干海带1:50加入清水和辅料，称重后装入发酵罐，100℃灭菌30min。
(2)待罐内温度降至40℃以下，加入5％海带降解菌种子液，37℃搅拌150rpm培养2天至90％海带完全分解，发酵终止。
(3)离心获得上清液，备用；同时，准备黄芪、麦芽汁和红糖等发酵原料。黄芪经粉碎并过80目筛子，备用。
(4)上发酵罐：以海带发酵液体积为基准，分别加入麦芽汁10％(v/v)、红糖10％(m/v)、黄芪粉10％(m/v)，121℃灭菌20min。
(5)待罐内温度降至40℃以下，加入5％混合菌种(枯草芽孢杆菌:凝结芽孢杆菌:植物乳杆菌＝1:1:2)，在37℃、pH为6.8、搅拌100rpm的条件下培养48h。
(6)48h后检测，当pH值≤5.0、芽孢杆菌数量≥1×108CFU、乳酸菌数量≥1×109CFU、总多糖含量(黄芪多糖、海藻多糖、海藻寡糖)比发酵前增加30％～50％以上时，其中有3个或以上满足条件时停止发酵。
(7)过滤除渣，分装得液体制剂，或经喷雾干燥，制成干粉应用。
试验例1
混合菌种发酵提高黄芪有效成分含量的试验
研究使用通过混合菌种对黄芪发酵后活性组分的改变。结果如图1-图3所示，采用本发明5％的混合菌种(枯草芽孢杆菌:凝结芽孢杆菌:植物乳杆菌＝1:1:2)对黄芪进行发酵后，黄芪根中粗多糖、总黄酮、总皂苷含量分别增加182.71％、58.67％、66.89％。由此可见，采用混合菌种发酵对黄芪的高效利用有重要价值。
试验例2
中药微生态制剂在樱桃谷鸭无抗养殖试验中的应用
选择樱桃谷鸭作为实验用鸭，对照组(800只)使用抗生素养殖，实施例1组(800只)使用中药微生态制剂(实施例1)养殖。实施例1组在3-20日龄，按每日150g/1000只添加饮水，以4-5小时饮完为宜。实施例1组在20-40日龄，按每日200g/1000只添加饮水，以4-5小时饮完为宜。试验期40d。具体结果如表1所示。
表1中药微生态制剂对樱桃谷鸭生长性能的影响
Figure BDA0002519786610000051
Figure BDA0002519786610000061
根据表1结果显示，采用实施例1制得的中药微生态制剂对樱桃谷鸭进行喂养后，与抗生素组相比，用中药微生态制剂饲养的肉鸭出栏均重增加1.9％，成活率(98％)较抗生素增加了2％，中药微生态制剂饲养的肉鸭料肉比较抗生素组降低2.7％。添加中药微生态制剂组较对照组肉鸭色泽鲜亮、活力更强。同样用清水烹饪的条件下，实施例1组肉鸭腥味明显小于抗生素添加组肉鸭，口感、风味和食品安全显著提升。
试验例3
中药微生态制剂在白羽肉鸡无抗养殖试验中的应用
实验选用白羽肉鸡为实验对象，将同批次雏鸡随机分为42组，每组10只鸡，选择6只作为空白组，6只作为抗生素饲养组，30只作为中药微生态制剂组。中药微生态制剂与水按5种不同比例勾兑后供鸡全天饮用(1:2000，1:1600，1:1200，1:800，1:400)，每组依次标号A、B、C、D、E组，每组各6只，试验周期为42d。
表2中药微生态制剂对白羽肉鸡生长性能的影响
分组 出栏均重(g) 成活率％ 料肉比
空白组 2701 85 1.65
抗生素组 2796 93.33 1.66
中药A组 2980 99 1.6
中药B组 3025 98 1.58
中药C组 3028 99 1.61
中药D组 2966 96.67 1.59
中药E组 2996 96.67 1.63
根据表2结果可知，中药制剂饲养的肉鸡羽毛光泽度高，鸡冠鲜红，肝脏颜色紫红，色泽均匀；抗生素饲养的白羽肉鸡鸡冠色浅，活力一般，羽毛暗淡，肝脏颜色偏黄、偶见黄斑。出栏时，5个中药微生态制剂组的白羽肉鸡组均重均显著高于抗生素组，1:1200中药组增重高于其他中药添加组，5个中药组加权均重较抗生素组提高7.2％。饲养42d时，中药微生态制剂组成活率明显高于抗生素组和空白组，1:1200中药组成活率为99％，5个中药组白羽肉鸡成活率加权均值为97.87％，比西药组增加4.54％。中药微生态制剂饲养的白羽肉鸡料肉比明显低于空白组，加权均值较抗生素组低0.05。
试验例4
含海带液的中药微生态制剂对SPF鸡生长性能与抗病力的研究。
为研究含中药微生态制剂替代抗生素对SPF鸡生长性能和免疫力的作用效果，试验选用150只健康的2日龄SPF鸡，根据体重随机分成5组，1组为对照组基础饲料；2组为抗生素添加组(50g/t基础饲料)，所用抗生素为金霉素；3组为黄芪添加组(100g/t基础饲料)；4组为益生菌添加组(500g/t基础饲料)；5组为含中药微生态制剂(实施例1)组(200g/t)，每组30只，分组后开始给药。实验时间56d。
表3中药微生态制剂对SPF鸡生长性能的影响
组别 平均耗料量g 增重g 耗料增重比 成活率％
1组 2621.77±5.51a 991.1±20.51 2.65±0.03a 94.5
2组 2506.21±5.72c 1002.3±15.51 2.50±0.03b 97.1
3组 2580.2±8.31b 1029.3±12.74 2.51±0.04b 97.8
4组 2566±5.49b 1060.54±13.87 2.42±0.02b 97.5
5组 2531.5±4.57bc 1080.4±10.21 2.34±0.02c 98.2
表4中药微生态制剂对40日龄SPF鸡免疫器官的影响
组别 脾脏指数 法氏囊指数
1组 0.19±0.032a 0.50±0.032a
2组 0.17±0.036a 0.44±0.036a
3组 0.22±0.039a 0.54±0.039a
4组 0.22±0.050a 0.59±0.050b
5组 0.26±0.041b 0.60±0.041b
表5不同处理组鸡免疫新城疫疫苗后的抗体效价
Figure BDA0002519786610000071
结果表明：根据表3结果可知，与抗生素组相比，中药微生态制剂组增重显著提升了7.8％，料肉比显著降低了6.4％，成活率提高了1.1％。根据表4结果可知，中药微生态制剂的脾脏指数、法氏囊指数等均显著高于抗生素组，但与单一的中药组、益生菌组差异不显著。根据表5结果可知，中药微生态制剂提高了鸡新城疫疫苗的抗体滴度。由此可见，采用中药微生态制剂可以显著提高SPF鸡生长性能、提升抗病力、增加成活率。
以上详细描述了本公开的优选实施方式，但是，本公开并不限于上述实施方式中的具体细节，在本公开的技术构思范围内，可以对本公开的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本公开的保护范围。另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合。为了避免不必要的重复，本公开对各种可能的组合方式不再另行说明。此外，本公开的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合，只要其不违背本公开的思想，其同样应当视为本公开所公开的内容。

Claims (10)

1.一种中药微生态制剂的制备方法，包括：
(1)备料灭菌：海带切片后置入发酵罐内，加入清水和辅料，灭菌备用；
(2)初次发酵：待发酵罐内温度下降至40℃以下，向备料中加入5％海带降解菌种子液培养发酵，得海带发酵液；
(3)二次备料灭菌：将海带发酵液离心，得上清液备用；以上清液体积为基准，分别加入10％麦芽汁(v/v)、10％红糖(m/v)、7％～10％黄芪粉(m/v)灭菌备用；
(4)二次发酵：待发酵罐内温度降至40℃以下，向加入5％混合菌种行二次发酵；
(5)检测：发酵结束后进行检测，经检测符合条件后停止发酵，得发酵产物备用；
(6)制得成品：发酵产物过滤除渣，分装得液体制剂，或经喷雾干燥，制成干粉，即得一种中药微生态制剂。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其中：
步骤(1)所述海带选自干海带或新鲜海带中任意一种；
所述辅料包括但不限于硫酸铵、氯化钠、磷酸氢二钾、硫酸镁、硫酸亚铁、硫酸锰。
所述灭菌条件为：100℃下灭菌30min。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其中：
以干海带发酵时，加入50倍量的水；
以新鲜海带发酵时，加入6倍量的水。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其中：
步骤(2)所述海带降解菌种子液由如下方法制得：
(1)取自然生长的海带样品，按5％(m/v)加入到利用海带、硫酸铵、氯化钠、磷酸氢二钾、硫酸镁、硫酸亚铁、硫酸锰等制备的培养液中，37℃、150rpm转速下培养直至海带90％以上分解；
(2)取一定量的上述海带分解液，按5％(v/v)接种新的利用海带、硫酸铵、氯化钠、磷酸氢二钾、硫酸镁、硫酸亚铁、硫酸锰等制备的培养液中，继续培养至海带分解，连续重复本步骤2～3次；
(3)取一定量最后一次培养的海带分解液，经一系列稀释后涂布牛肉膏蛋白胨平板，37℃培养，待平板上有菌落生长后，挑取单菌落继续在牛肉膏蛋白胨平板上划线，至有单菌落出现，继续挑取单菌落在牛肉膏蛋白胨平板上重复划线2次，待有单菌落生长后即为纯菌株；
(4)挑取上述纯化的单菌落，分别接种在含有海藻酸钠和果胶为唯一碳源的培养基表面，若有菌落生长即为分解海藻酸钠或果胶的菌株，各选取一株分解海藻酸钠和果胶，其中效果最好的菌株和在一起作为种子菌种；
(5)取上述种子菌种接种利用海带、硫酸铵、氯化钠、磷酸氢二钾、硫酸镁、硫酸亚铁、硫酸锰等制备的培养液中，37℃、150rpm转速下培养直至海带90％以上分解，即为原始种子液；
(6)取原始种子液，按5％(v/v)接种于利用海带、硫酸铵、氯化钠、磷酸氢二钾、硫酸镁、硫酸亚铁、硫酸锰等制备培养液中，在37℃、150rpm转速下培养1～2天至90％海带分解成液体，即为生产种子液。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其中：
步骤(2)所述发酵终点以90％海带完全分解为止。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其中：
步骤(3)所述灭菌条件为：121℃下灭菌20min。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其中：
步骤(4)所述混合菌种由枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、植物乳杆菌按菌数比例1:1:2混合制成；
所述枯草芽孢杆菌由无锡阿尔宝尔生物工程有限公司提供；
凝结芽孢杆菌由洛阳欧科拜克生物技术股份有限公司提供；
植物乳杆菌由天津市育琪生物技术有限公司提供。
8.根据权利要求1所述的制备方法，其中：
步骤(5)所述发酵条件为37℃、pH 6.5-6.8、转速100rpm下发酵48h。
9.根据权利要求8所述的制备方法，其中：
步骤(6)所述检测符合条件选自如下任意3个或4个：①pH值≤5.0；②芽孢杆菌数量≥1×108CFU；②乳酸菌数量≥1×109CFU；④总多糖含量比发酵前增加超过30％～50％；
所述总多糖包括黄芪多糖、海藻多糖和海藻寡糖。
10.一种如权利要求1～9所述任一制备方法制得的中药微生态制剂。
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Citations (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101283736A (zh) * 2008-05-19 2008-10-15 淮海工学院 利用海洋细菌制备饲用海带营养调节添加剂的方法
WO2011060474A1 (de) * 2009-11-20 2011-05-26 Erber Aktiengesellschaft Verfahren zur herstellung eines futtermittelzusatzes sowie futtermittelzusatz
CN104757276A (zh) * 2015-04-17 2015-07-08 河南牧业经济学院 一种乳酸菌发酵黄芪的微生态制剂及其制备方法和应用
CN104770575A (zh) * 2015-04-17 2015-07-15 河南牧业经济学院 一种黄芪微生态制剂及其制备方法和应用
CN104805155A (zh) * 2015-05-20 2015-07-29 大连大学 具有促进海参生长和抗逆作用的海带寡糖及其制法和应用
CN106036198A (zh) * 2016-05-25 2016-10-26 大连工业大学 一种海参生物发酵饵料的制备方法
CN106591182A (zh) * 2016-12-08 2017-04-26 王丽娟 一种枯草芽孢杆菌发酵黄芪的微生态制剂及其应用
CN106754527A (zh) * 2016-12-29 2017-05-31 清远海贝生物技术有限公司 一种中草药复合微生态制剂及其制备方法和用途
CN106798862A (zh) * 2017-01-16 2017-06-06 河南牧业经济学院 一种用于提高雏鸡免疫力的中药微生态制剂、制备方法及其用法
CN110279037A (zh) * 2019-06-04 2019-09-27 广西康佳龙农牧集团有限公司 一种猪用番茄粉黄芪益生菌保健液及其制备方法

Patent Citations (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101283736A (zh) * 2008-05-19 2008-10-15 淮海工学院 利用海洋细菌制备饲用海带营养调节添加剂的方法
WO2011060474A1 (de) * 2009-11-20 2011-05-26 Erber Aktiengesellschaft Verfahren zur herstellung eines futtermittelzusatzes sowie futtermittelzusatz
CN104757276A (zh) * 2015-04-17 2015-07-08 河南牧业经济学院 一种乳酸菌发酵黄芪的微生态制剂及其制备方法和应用
CN104770575A (zh) * 2015-04-17 2015-07-15 河南牧业经济学院 一种黄芪微生态制剂及其制备方法和应用
CN104805155A (zh) * 2015-05-20 2015-07-29 大连大学 具有促进海参生长和抗逆作用的海带寡糖及其制法和应用
CN106036198A (zh) * 2016-05-25 2016-10-26 大连工业大学 一种海参生物发酵饵料的制备方法
CN106591182A (zh) * 2016-12-08 2017-04-26 王丽娟 一种枯草芽孢杆菌发酵黄芪的微生态制剂及其应用
CN106754527A (zh) * 2016-12-29 2017-05-31 清远海贝生物技术有限公司 一种中草药复合微生态制剂及其制备方法和用途
CN106798862A (zh) * 2017-01-16 2017-06-06 河南牧业经济学院 一种用于提高雏鸡免疫力的中药微生态制剂、制备方法及其用法
CN110279037A (zh) * 2019-06-04 2019-09-27 广西康佳龙农牧集团有限公司 一种猪用番茄粉黄芪益生菌保健液及其制备方法

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