CN111534521A - 一种调控杨树不定根发育的基因PeFBL3及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开发了一种调控杨树不定根发育的基因PeFBL3，该基因来源于南林895杨，本发明通过农杆菌介导技术将PeFBL3基因转入山新杨中得到转基因山新杨，转基因山新杨的不定根结果显示，其生根速度明显慢于未转基因植株，且侧根数目明显减少，二级侧根发育正常。
Description
技术领域
本发明涉及植物基因工程领域，具体涉及一种调控杨树不定根发育的基因PeFBL3及其应用。
背景技术
根是植物吸收营养和水分，以及支撑地上部分的重要器官，根系生长的情况直接关系着植物生长状态。林木因其生长周期长而更适宜通过扦插进行无性繁殖，扦插不仅简单易行、效高价廉，而且能保持母株的优良性状、提早开花结实。无性繁殖过程中需要促进不定根的生长，因而生根性状在林木无性繁殖和插干造林中发挥关键作用，也是鉴别无性系适应性和抗逆性的主要参考指标。
不定根是在植物下胚轴、茎和叶等地上器官上形成的根，一般有两种发生方式：直接器官发生(生根)和间接器官发生(根再生)。扦插、微扦插过程中从插条(茎、枝条、叶等)直接形成不定根属于直接器官发生。不定根的形成是一个非常复杂的生物学过程，国内外学者对其机理进行了大量研究，但这些工作多集中于解剖学和生理学领域，对不定根发生的分子机理的认识和了解比较缺乏。因此，解析林木不定根形成机制有助于促进林木无性繁殖过程中不定根的形成，加速良种或优良无性系的推广应用。
发明内容
发明目的：本发明提供了一种调控杨树不定根发育的基因PeFBL3；本发明进一步地提供了含一种调控杨树不定根发育的基因PeFBL3的载体、重组农杆菌或重组植物，本发明更进一步地提供了将调控杨树不定根发育的基因PeFBL3的转入植物中从而调控其不定根发育的应用。
技术方案：为解决上述技术问题，本发明提供如下技术方案：
一种调控杨树不定根发育的基因PeFBL3，该基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
PeFBL3属于F-box蛋白基因家族成员。该蛋白家族的共同特征是含有F-box结构域，是生长素受体，广泛参与植物的生长素信号转导途径中调控生长素介导的信号转导，在植物的生长发育过程中有着重要的作用。研究表明，如F-box蛋白基因家族成员在拟南芥中调控侧根和不定根发育，在水稻中影响根长度。
以南林895杨cDNA为模板，设计引物进行PCR扩增PeFBL3基因的ORF序列；所述引物包括：
PeFBL3-F：5’–ATGAATTATTTCCCTGATGAAG-3’
PeFBL3-R：5’-TAAAGTCCACACGAACTCTGG-3’
扩增得到SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。
本发明进一步公开了含有权利要求1所述调控杨树不定根发育的基因PeFBL3的表达载体。
本发明进一步公开了含有权利要求1所述调控杨树不定根发育的基因PeFBL3的重组细胞。
所述重组细胞为农杆菌，优选农杆菌菌株LBA4404。
本发明进一步公开了含有权利要求1所述调控杨树不定根发育的基因PeFBL3的转基因植物。
作为优选，所述转基因植物为转基因山新杨。
上述含有调控杨树不定根发育的基因PeFBL3的转基因植物的构建方法，包括如下步骤：
(1)将PeFBL3基因克隆到入门载体中，得到重组入门载体；
(2)连接重组载体和表达载体，得到重组表达载体；
(3)将重组表达载体载体转化农杆菌菌株，通过农杆菌介导技术将PeFBL3基因转入目的植物，得到有调控杨树不定根发育的基因PeFBL3的转基因植物。
具体的构建方法如下：
(1a)扩增PeFBL3基因的ORF序列，将该序列克隆至入门载体p2GWF7.0中，得到p2GW7.0-PeFBL3；
(2a)将p2GW7.0-PeFBL3与表达载体35S-pBI121-GUS连接，得到p35S-pBI121-PeFBL3载体。p35S-pBI121-PeFBL3载体组装KanR基因，作为转基因植物的筛选标记，用卡那霉素进行转基因植株的筛选；还组装LB和RB序列，促使组装于其间的PeFBL3基因表达框架和筛选标记基因KanR整合至植物受体细胞染色体中。
步骤(1)中，所述的入门载体为p2GWF7.0；
步骤(2)中，所述的表达载体为35S-pBI121-GUS；
步骤(3)中，所述的农杆菌菌株为农杆菌菌株LBA4404。
步骤(3)中，所述的目的植物为山新杨。
本发明更进一步地提供所述调控杨树不定根发育的基因PeFBL3在转基因植物中调控其不定根发育的应用。转基因植株生根速度明显慢于未转基因植株，且侧根数目明显减少，抑制二级侧根的形成。
有益效果：
本发明通过农杆菌介导技术将PeFBL3基因转入山新杨中得到转基因山新杨，转基因山新杨的不定根结果显示，其生根速度明显慢于未转基因植株，且侧根数目明显减少，二级侧根发育正常。
附图说明
图1为p35S-pBI121-PeFBL3表达载体的结构示意图；
图2为将PeFBL3基因转入山新杨不定根发育情况图；(CK：对照，未转基因山新杨；其余为PeFBL3转基因株系)
具体实施方式
实施例1：克隆PeFBL3基因ORF
以南林895杨cDNA为材料，使用Oligo 7软件设计引物，扩增PeFBL3基因ORF序列，高保真PCR反应体系见表1。其中，引物包括：正向引物：5’ATGAATTATTTCCCTGATGAAG3’；反向引物：5’TAAAGTCCACACGAACTCTGG3’。其中，使用天根生化科技(北京)有限公司RNAprepPure植物总RNA提取试剂盒(DP432)提取南林895杨的总RNA。采用用天根生化科技(北京)有限公司FastKing一步法除基因组cDNA第一链合成预混试剂(KR118)反转录cDNA。
表1 高保真PCR反应体系
反应条件如下：(1)预变性94℃3min；(2)94℃30s－60℃30s－72℃2min)×38个循环；(3)72℃10min。对扩增产物测序，得PeFBL3基因序列(1713bp)，如SEQ ID No:1所示。
实施例2 p35S-pBI121-PeFBL3载体构建
(1)碱裂解法小量提取p2GW7.0-PeFBL3入门载体；碱裂解法小量提取35S-pBI121-GUS表达载体；将p2GW7.0-PeFBL3入门载体和35S-pBI121-GUS表达载体，使用LR ClonaseTMII Plus enzyme mix连接，25℃反应2h，加入蛋白酶K 0.5μl，轻柔混匀后置于37℃反应10min灭火酶，得到p35S-pBI121-PeFBL3载体。LR克隆反应体系如表3。
其中，p2GW7.0-PeFBL3入门载体(BP克隆)的制备步骤如下：将实施例1PCR扩增得到的PeFBL3进行琼脂糖凝胶电泳，使用回收试剂盒(薄型琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒、GK2043-50、上海捷瑞生物工程有限公司)纯化回收目的产物；将回收的目的产物与入门载体p2GWF7.0(BP ClonaseTM II Plus enzyme mix、11789020、Invitrogen)按照反应体系进行混合，22℃反应40min，加入蛋白酶K 0.5μl，轻柔混匀后置于37℃反应10min灭火酶。BP克隆反应体系如表2。
所述p35S-pBI121-PeFBL3载体的结构见图1，含有35S启动子和PeFBL3基因。
表2 BP克隆反应体系
(2)将p2GW7.0-PeFBL3入门载体和35S-pBI121-GUS表达载体，使用LR ClonaseTMII Plus enzyme mix连接，25℃反应2h，加入蛋白酶K 0.5μl，轻柔混匀后置于37℃反应10min灭火酶，得到35S-pBI121-PeFBL3载体。LR克隆反应体系如表3。
表3 LR克隆反应体系
(3)通过PCR检测及测序验证，确认载体构建成功，命名为p35S-pBI121-PeFBL3，该载体在CaMV35S启动子的3’端组装PeFBL3基因，其编码的PeFBL3，能调控植物不定根的发育。
实施例3 PeFBL3基因调控植物不定根发育
通过电击转化法(Bio-Rad MicroPulser伯乐电转仪；电击杯：Bio-Rad伯乐电击杯1652086；电击条件：输出范围200-3000v、精度10v，使用电压2.5kv，时间常数1.0ms、精度0.1ms，使用温度：室温；抗性：利福平Rif)将所构建的p35S-pBI121-PeFBL3转入农杆菌菌株LBA4404(Invitrogen)，通过农杆菌介导技术(何光源.植物基因工程实验手册[M].北京:清华大学出版社，2007)将PeFBL3基因转入山新杨。PeFBL3转基因植株继代4周左右观察其不定根发育情况。转基因植株其生根速度明显慢于未转基因植株，且侧根数目明显减少。与转PeMIR393a基因相比较，PeFBL3转基因植株二级侧根的发育正常。因此，本发明提供的PeFBL3基因可应用在植物基因工程中，调控植物不定根发育。
序列表
<110> 南京林业大学
<120> 一种调控杨树不定根发育的基因PeFBL3及其应用
<160> 3
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1713
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
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gacaggaact cagtgtctca agtgtgtaaa ccatggtaca aaatcgaaag tactagcagg 120
caaaaggttt ttgtagggaa ttgttatgca attagtcctg agagagtgat tgagaggttt 180
ccaggtttga aatctatcac tttgaaagga aagcctcatt ttgctgattt taatttggtt 240
cctcatgatt ggggaggctt tgtttatcca tggattgaag cttttgcaag gaataatatg 300
gggttagagg agctcaagtt gaagaggatg ataatatccg atgagtgctt ggagctgatt 360
tcaaggtctt ttgccaattt caagtccttg gttcttgtta gttgtgaagg cttcagcact 420
gatggccttg ctgctattgc ttctaattgt aggtttctga gggagctgga cctgcaagaa 480
aatgatgtcg aggatcatag aggccattgg cttagcttct ttcctgacac ttgtacatct 540
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gtctttcctt ctgatccatt tgttgggaat gcagctgtga ctgaagtggg cttggttgct 1080
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<211> 22
<212> DNA
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<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 3
taaagtccac acgaactctg g 21
Claims (9)
1.一种调控杨树不定根发育的基因PeFBL3，其特征在于，该基因的核苷酸序列如SEQID NO.1所示。
2.含有权利要求1所述调控杨树不定根发育的基因PeFBL3的表达载体。
3.含有权利要求1所述调控杨树不定根发育的基因PeFBL3的重组细胞。
4.根据权利要求3所述的含有调控杨树不定根发育的基因PeFBL3的重组细胞，其特征在于，该重组细胞为农杆菌。
5.含有权利要求1所述调控杨树不定根发育的基因PeFBL3的转基因植物。
6.权利要求5所述含有调控杨树不定根发育的基因PeFBL3的转基因植物，其特征在于，所述转基因植物为转基因山新杨。
7.权利要求5所述含有调控杨树不定根发育的基因PeFBL3的转基因植物的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)将PeFBL3基因ORF序列克隆到入门载体中，得到重组入门载体；
(2)连接重组载体和表达载体，得到重组表达载体；
(3)将重组表达载体载体转化农杆菌菌株，通过农杆菌介导技术将PeFBL3基因转入目的植物，得到有调控杨树不定根发育的基因PeFBL3的转基因植物。
8.根据权利要求7所述含有调控杨树不定根发育的基因PeFBL3的转基因植物的构建方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的入门载体为p2GWF7.0；
步骤(2)中，所述的表达载体为35S-pBI121-GUS；
步骤(3)中，所述的农杆菌菌株为农杆菌菌株LBA4404。
9.根据权利要求5所述含有调控杨树不定根发育的基因PeFBL3的转基因植物的构建方法，其特征在于，步骤(3)中，所述的目的植物为山新杨。
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Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20030188330A1 (en) * | 2002-03-18 | 2003-10-02 | Jacqueline Heard | Genes for modifying plant traits xi |
| CA2714364A1 (en) * | 2010-09-03 | 2012-03-03 | The Governors Of The University Of Alberta | Auxin receptors |
| US20120060236A1 (en) * | 2010-09-03 | 2012-03-08 | The Governors Of The University Of Alberta | Auxin receptors |
| WO2013011426A1 (en) * | 2011-07-19 | 2013-01-24 | Basf Plant Science Company Gmbh | Plants having enhanced yield-related traits and a method for making the same |
| CN103757031A (zh) * | 2014-01-27 | 2014-04-30 | 南京林业大学 | 一种调控杨树根系构型的转录因子基因PeSHR2及其应用 |
| CN104975029A (zh) * | 2015-07-06 | 2015-10-14 | 中国林业科学研究院林业研究所 | 一种调控杨树不定根发育的生长素响应因子基因及其应用 |
| CN109295073A (zh) * | 2018-10-17 | 2019-02-01 | 江西省科学院生物资源研究所 | 一种亚美马褂木lhfb1基因的分离克隆及应用 |
| CN110029112A (zh) * | 2019-03-14 | 2019-07-19 | 南京林业大学 | 一种调控杨树不定根发育的基因PeMIR393a及其应用 |
| CN110760515A (zh) * | 2019-12-02 | 2020-02-07 | 南京林业大学 | 一种lncRNA lnc12及其在调控杨树不定根发育中的应用 |
-
2020
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Patent Citations (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20030188330A1 (en) * | 2002-03-18 | 2003-10-02 | Jacqueline Heard | Genes for modifying plant traits xi |
| CA2714364A1 (en) * | 2010-09-03 | 2012-03-03 | The Governors Of The University Of Alberta | Auxin receptors |
| US20120060236A1 (en) * | 2010-09-03 | 2012-03-08 | The Governors Of The University Of Alberta | Auxin receptors |
| WO2013011426A1 (en) * | 2011-07-19 | 2013-01-24 | Basf Plant Science Company Gmbh | Plants having enhanced yield-related traits and a method for making the same |
| CN103814133A (zh) * | 2011-07-19 | 2014-05-21 | 巴斯夫植物科学有限公司 | 具有增强的产量相关性状的植物和其生产方法 |
| US20140298545A1 (en) * | 2011-07-19 | 2014-10-02 | BASF Plants Science Company GmbH | Plants Having Enhanced Yield-Related Traits and a Method for Making the Same |
| CN103757031A (zh) * | 2014-01-27 | 2014-04-30 | 南京林业大学 | 一种调控杨树根系构型的转录因子基因PeSHR2及其应用 |
| CN104975029A (zh) * | 2015-07-06 | 2015-10-14 | 中国林业科学研究院林业研究所 | 一种调控杨树不定根发育的生长素响应因子基因及其应用 |
| CN109295073A (zh) * | 2018-10-17 | 2019-02-01 | 江西省科学院生物资源研究所 | 一种亚美马褂木lhfb1基因的分离克隆及应用 |
| CN110029112A (zh) * | 2019-03-14 | 2019-07-19 | 南京林业大学 | 一种调控杨树不定根发育的基因PeMIR393a及其应用 |
| CN110760515A (zh) * | 2019-12-02 | 2020-02-07 | 南京林业大学 | 一种lncRNA lnc12及其在调控杨树不定根发育中的应用 |
Non-Patent Citations (10)
| Title |
|---|
| DNA DATA BANK OF JAPAN: ""Populus trichocarpa clone POP018-D02, complete sequence"", 《DDBJ》 * |
| DONG,X.等: ""Populus tomentosa auxin-responsive factor TIR1-like protein (TIR1) mRNA, complete cds"", 《EMBL》 * |
| GENBANK DATABASE: ""PREDICTED: Populus trichocarpa protein AUXIN SIGNALING F-BOX2（LOC7495822），mRNA"", 《NCBI》 * |
| MADHUMITA DASH等: "A systems biology approach identifies new regulators of poplar root development under low nitrogen", 《THE PLANT JOURNAL : FOR CELL AND MOLECULAR BIOLOGY》 * |
| SHU, WB等: "A Populus TIR1 gene family survey reveals differential expression patterns and responses to 1-naphthaleneacetic acid and stress treatments", 《WEB OF SCIENCE》 * |
| 房丹: "南林895杨抗虫转基因研究", 《万方》 * |
| 舒文波等: "生长素信号转导途径对林木根系的影响", 《世界林业研究》 * |
| 舒文波等: "超量表达FBL1对84K杨根系和生长量影响研究", 《林业科学研究》 * |
| 董秀春: "毛白杨生长素信号转导因子基因的分离与功能的初步分析", 《万方数据》 * |
| 郑唐春: "小黑杨PsnCYCD1；1基因参与细胞分裂及次生生长作用机理研究", 《万方数据》 * |
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Application publication date: 20200814 Assignee: Nanjing Baikang Biotechnology Co.,Ltd. Assignor: NANJING FORESTRY University Contract record no.: X2022980022991 Denomination of invention: A Gene PeFBL3 Regulating Adventitious Root Development of Poplar and Its Application Granted publication date: 20220930 License type: Common License Record date: 20221128 |
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