CN111514369A - 一种止血粉末及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种止血粉末及其制备方法，其以碳酸盐、多酚为原料制备多酚掺杂碳酸钙颗粒，再通过与凝血酶溶液孵育，用超纯水洗涤、离心、冻干，制得止血粉末。本发明制得的止血粉末，其粒径为0.5‑15μm的微米球状颗粒，生物相容性良好，用于外科手术的止血过程，止血效果快速，而且本发明的原材料简单易得，工艺简便，生产成本低，适合于工业化生产，具有广阔的应用前景。

Description

一种止血粉末及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种止血粉末及其制备方法，属于医药技术领域。
背景技术
战争时期与和平时期的软组织创伤，无法控制的大血管出血和创伤组织广泛性渗血是伤员死亡的重要原因之一。及时有效的急救止血，能够为伤员赢得宝贵时间，降低伤员死亡率和致残率。因此，开发出一种高效可快速吸收，并且在较短时间内有效完成止血是目前止血材料的研发热点。
研究直至现在，已经开发出许多止血材料，包括基于纤维蛋白的胶和密封剂，沸石散基，交联明胶机制等。但它们在应用中都有各自的局限性，如纤维蛋白的产品成本高且机械强度低、沸石矿物容易引起严重的灼伤并不可被降解，只有当与高剂量的凝血酶结合时，交联明胶基质才能在几分钟内止血。凝血酶是一种主动止血材料，其止血的原理是激活体内生理凝血级联反应的终末阶段，形成纤维蛋白凝块进而促进血液凝固。它是一种从人体或动物血液中提取的凝血酶原的蛋白水解酶，能够直接作用于血浆中的纤维蛋白原，促进纤维蛋白原转化为纤维蛋白，加速伤口表面血液凝固，从而起到止血的作用。目前，凝血酶止血已经广泛用于包括外科、消化道及妇产科出血等引起的出血状况。但仍存在以下问题：(1)粘附性能较弱，在动脉出血或较大面积创伤出血的情况下，凝血酶容易被血流冲刷掉，很难快速完成止血过程；(2)凝血酶需要冷冻保存，具有潜在的病毒源性；(3)使用过程中容易引起局部或全身血管栓塞。
作为一种有效的止血材料，凝血酶需要与其他材料相结合方可更好的发挥其作为主动止血材料可迅速止血的优点。碳酸钙是一种非常重要的新型无机材料，具有材料来源易得、价格低廉、安全无毒、无臭无味、环境友好、应用广泛，材料分散性良好等优点。因此，制备出一种碳酸钙多孔材料和凝血酶相结合将得到一种可迅速止血、可自然降解，使用安全和高吸水性的止血材料。
发明内容
本发明的一个目的是提供一种可快速止血的止血粉末，其组分包括有多酚、碳酸钙和凝血酶。该粉末具有生物相容性好，安全可降解，在一分钟内高效完成止血的止血粉末。
进一步设置是该止血粉末的粒径为0.5-15μm。
进一步设置是所述多酚为单宁酸、原花青素、表没食子儿茶素没食子酸酯或没食子酸中的一种或多种组合。
本发明的另外一个目的是提供一种可快速止血粉末的制备方法。
具体包括有以下步骤：
(1)将浓度为0.1～1M的钙盐溶液与浓度为2～50mg/mL的多酚溶液在0～40℃温度条件下混合并搅拌均匀，之后置于剧烈搅拌或超声摇晃条件下，快速加入与钙盐溶液等摩尔量的碳酸盐溶液，继续搅拌或超声30～60s后将溶液静置10～30min，经过离心、超纯水洗涤三遍，收集得多酚掺杂碳酸钙颗粒；
(2)再将步骤(1)所得颗粒移至离心管内，在温度为0～10℃条件下，加入0.1～10kU凝血酶溶液，并孵育0.5～12h，再经过离心、超纯水洗涤三遍，冻干，得到止血粉末。
进一步设置是所述步骤(1)中钙盐、多酚和碳酸盐的溶液体积比为：(0.5～1.5)：(1～3)：(2～4)。
进一步设置是所述步骤(1)中的钙盐为氯化钙或硝酸钙；碳酸盐为碳酸氢铵、碳酸钠或碳酸钾。
进一步设置是所述步骤(1)中剧烈搅拌速度为450～1500rpm/min；超声频率的频率为20～60kHz。
本发明提供的一种止血粉末，其生物相容性良好，用于外科手术的止血过程，止血效果快速，具有广阔的应用前景。同时，本发明制备方法的原材料简单易得、工艺步骤简单，适合于工业化生产。
下面结合说明书附图和具体实施方式对本发明做进一步介绍。
附图说明
图1是实施例1中止血粉末的扫描电镜图。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明进行具体的描述，只用于对本发明进行进一步说明，不能理解为对本发明保护范围的限定，该领域的技术工程师可根据上述发明的内容对本发明做出一些非本质的改进和调整。
实施例1
在20℃条件下，将1mL浓度为1M的氯化钙溶液和2mL浓度为5mg/mL的单宁酸溶液利用搅拌器搅拌均匀，调节转速为450rpm/min后，在混合溶液中快速加入3mL浓度为0.33M碳酸钠溶液，继续搅拌30s后静置10min，经过800×g离心5min，超纯水洗涤三次，可得到单宁酸掺杂的碳酸钙颗粒。
将得到的颗粒移至15mL离心管中，加入10mL的0.02kU凝血酶溶液，在2℃条件下孵育4h后，再经过800×g离心5min，超纯水洗涤三次，冻干，得到止血粉末。将其粉末在场发射扫描电子显微镜(FESEM,SU8010 HITACHI)进行形貌观察，如图1所示，测量粉末颗粒粒径并统计，显示其平均粒径约为14μm。
实施例2
在5℃条件下，将1mL浓度为1M的硝酸钙溶液和2mL浓度为50mg/mL的原花青素溶液利用搅拌器搅拌均匀混合，调节转速为650rpm/min后，在混合溶液中快速加入3mL浓度为0.33M的碳酸钾溶液，搅拌60s后静置30min，经800×g离心5min，超纯水洗涤三次，得到原花青素掺杂的碳酸钙颗粒。
将其颗粒移至15mL离心管中，加入10mL的0.8kU的凝血酶溶液，在8℃条件下孵育0.5h，再经过800×g离心5min，超纯水洗涤三次，冻干，得到止血粉末。
实施例3
在10℃条件下，将1mL浓度为1M的硝酸钙溶液和2mL浓度为50mg/mL的表没食子儿茶素没食子酸酯溶液利用搅拌器搅拌均匀混合，调节转速为900rpm/min后，在混合溶液中快速加入3mL浓度为0.33M的碳酸钾溶液，搅拌60s后静置30min，经过800×g离心5min，超纯水洗涤三次，得到表没食子儿茶素没食子酸酯掺杂的碳酸钙颗粒。
将其颗粒移至15mL离心管中，加入10mL的0.4kU凝血酶溶液，在8℃条件下孵育0.5h，再经过800×g离心5min，超纯水洗涤三次，冻干，得到止血粉末。
实施例4
在40℃条件下，将1mL浓度为0.1M的氯化钙和2mL浓度为2mg/mL的没食子酸溶液利用搅拌器混合均匀，调节转速为1200rpm/min后，在混合溶液中快速加入3mL浓度为0.033M碳酸氢铵溶液，搅拌40s后静置20min，经过800×g离心5min，超纯水洗涤三次，得到没食子酸掺杂的碳酸钙颗粒。
将得到的颗粒移至15mL离心管中，加入10mL的0.1kU凝血酶溶液，在4℃条件下孵育12h，再经过800×g离心5min，超纯水洗涤三次，冻干，得到止血粉末。
止血试验
(1)体外止血试验：试验分为4组，每组采用7个5mL离心管，预先加入新鲜的新西兰兔血200μL，37℃水浴中孵育5min，每组分别加入实施例1-4所制备的止血粉末各10mg，迅速摇晃均匀，并分别记录血液凝固时间。
试验结果显示，各组血液凝固时间均在一分钟内，止血粉末表现出快速的凝血效果。
(2)体内止血试验：
采用新西兰兔耳缘动脉出血模型，试验分为4组，每组选用7只新西兰兔，取每组平均数据为最终止血时间。记录实施例1-4制备的止血粉末20mg的止血时间。
测试得到实施例1获得的止血粉末的平均止血时间为65秒，实施例2获得的止血粉末的平均止血时间为25秒，实施例3获得的止血粉末的平均止血时间为37秒，实施例4获得的止血粉末的平均止血时间为51秒。
综上，本发明的方法所生产的止血粉末具有良好的止血时间，具有快速的止血效果。
本发明可用其他的不违背本发明的精神和主要特征的具体形式来概述。因此，无论从哪一点开看，本发明的上述试验方案都只能认为是对本发明的说明，权利要求指出了本发明的范围，而上述的说明并未指出发明的范围。因此，在与本发明的权利要求说明书相当的含义和范围内的任何变化，都应认为是包括在权利要求书的范围内。

Claims (7)

1.一种止血粉末，其特征在于：包括有以下组分：多酚、碳酸钙和凝血酶。
2.根据权利要求1所述的止血粉末，其特征在于：该止血粉末的粒径为0.5-15μm。
3.根据权利要求1或2所述的止血粉末，其特征在于：所述多酚为单宁酸、原花青素、表没食子儿茶素没食子酸酯或没食子酸中的一种或多种组合。
4.一种止血粉末的制备方法，其特征在于：包括有以下步骤：
(1)将浓度为0.1～1M的钙盐溶液与浓度为2～50mg/mL的多酚溶液在0～40℃温度条件下混合并搅拌均匀，之后置于剧烈搅拌或超声摇晃条件下，快速加入与钙盐溶液等摩尔量的碳酸盐溶液，继续搅拌或超声30～60s后将溶液静置10～30min，经过离心、超纯水洗涤三遍，收集得多酚掺杂碳酸钙颗粒；
(2)再将步骤(1)所得颗粒移至离心管内，在温度为0～10℃条件下，加入0.1～10kU凝血酶溶液，并孵育0.5～12h，再经过离心、超纯水洗涤三遍，冻干，得到止血粉末。
5.根据权利要求4所述的止血粉末制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中钙盐、多酚和碳酸盐的溶液体积比为：(0.5～1.5)：(1～3)：(2～4)。
6.根据权利要求4所述的止血粉末制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中的钙盐为氯化钙或硝酸钙；碳酸盐为碳酸氢铵、碳酸钠或碳酸钾。
7.根据权利要求4所述的止血粉末制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中剧烈搅拌速度为450～1500rpm/min；超声频率的频率为20～60kHz。
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