CN111513156B - 一种具有dpph自由基清除作用的花茶配方及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于天然食品技术领域，公开了一种具有DPPH自由基清除作用的花茶配方及其制备方法。该花茶配方由质量比为60:20:15:5:1的绿茶、木棉花、金银花、鸡蛋花和维生素C组成，可以制成袋泡茶。制备方法包括以下步骤：将绿茶、木棉花、金银花、鸡蛋花和维生素C分别进行研磨，过40目筛得到各种原料粉状物，按配比将各种原料粉状物混合均匀，干燥，灭菌后分装，得到具有DPPH自由基清除作用的花茶配方。本发明配方合理，加工制作简单，使用方便，综合利用了绿茶、木棉花、金银花、鸡蛋花和维生素C对DPPH自由基清除作用的各自效果，经实验验证对DPPH自由基清除作用效果非常明显。
Description
技术领域
本发明属于天然食品技术领域，特别涉及一种具有DPPH自由基清除作用的花茶配方及其制备方法。
背景技术
花茶又称“熏花茶”、“香花茶”等，为中国独有的一个茶叶品类。明朝(1592年)程荣已经在《茶谱》中望记述花茶。花茶是我国特有的加香型再加工茶叶，它融茶叶爽口浓醇之味、鲜花纯清馥郁之香于一体，深得国人喜爱。茶不仅成为生活中的休闲饮品，还成为人们日常生活中的保健品。根据自由基衰老学说，人体的衰老与自由基的形成有关，当前，随着人们生活节奏加快、压力增加、环境污染、吸烟及喝酒，引发产生人体大量的自由基，并诱发许多疾病。现代研究表明，茶叶中的许多化学成分可以清除自由基，延缓人体衰老，花茶作为一种特殊的茶类，其食用与保健功效越来越受到人们的喜爱和认可。但是现有技术中的花茶多只提供制作配方，没有从清除自由基等层面来说明其作用机制，有效机理不明确，缺乏理论依据。
发明内容
为了克服现有技术的缺点与不足，本发明的首要目的在于提供一种具有DPPH自由基清除作用的花茶配方。
本发明的另一目的在于提供一种上述具有DPPH自由基清除作用的花茶配方的制备方法。
本发明的目的通过下述技术方案实现：
一种具有DPPH自由基清除作用的花茶配方，所述花茶配方由质量比为60:20:15:5:1的绿茶、木棉花、金银花、鸡蛋花和维生素C组成。
所述具有DPPH自由基清除作用的花茶配方制成袋泡茶。
上述的一种具有DPPH自由基清除作用的花茶配方的制备方法，包括以下操作步骤：将绿茶、木棉花、金银花、鸡蛋花和维生素C分别进行研磨，过40目筛得到各种原料粉状物，按配比将各种原料粉状物混合均匀，干燥，灭菌后分装，得到具有DPPH自由基清除作用的花茶配方。
本配方选用的绿茶去湿，具有安定情绪、消除神经紧张、去除口臭、防治腹痛、慢性胃炎、提神解郁、润肠通便、美容、调整荷尔蒙分泌、明目的功效；木棉花具有清热除湿，具有治菌痢、肠炎、胃痛等功效；金银花具有清热解毒、通经活络，具有治外感发热、咳嗽、肺炎、肠炎、痢疾、麻疹、腮腺炎、咽喉肿痛、疮疗中毒、败血症、阑尾炎的功效；鸡蛋花具有清热解暑、润肺润喉咙的功效；维生素C具有促进抗体形成、促进铁的吸收、促进四氢叶酸形成、美白祛斑等功效。现有技术中尚未有将这几种原料混合在一起使用的记载，更没有关于其混合后具有协同增效DPPH自由基清除作用的记载，而自由基与人体疾病、衰老和死亡直接相关。
本发明相对于现有技术具有如下的优点及有益效果：
(1)本发明配方合理，综合利用了绿茶、木棉花、金银花、鸡蛋花和维生素C对DPPH自由基清除作用的各自效果，经实验验证对DPPH自由基清除作用效果非常明显；
(2)加工制作简单，使用方便，为自由基清除提供了一种理想的保健美容花茶。
附图说明
图1为Vc对DPPH自由基的清除作用图。
图2为复合花茶对DPPH自由基的清除作用图。
具体实施方式
下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
实施例1：
1.1材料
实验用各种花茶和茶叶，均为市售，木棉花、金银花、鸡蛋花和绿茶符合GB2762、GB2763标准，袋泡茶专用包装纸符合GB11680食品包装纸卫生标准。
1.2方法
1.2.1花茶提取液的制备
将木棉花、金银花、鸡蛋花和绿茶研磨，过40目筛，根据不同的配比，准确称取2.00g，装入袋泡茶专用包装纸，密封。根据袋泡茶的常规冲泡方法，将茶袋放入杯中，加入煮沸开水100mL，浸提5min，弃去茶袋，茶汤冷却，15000×g常温离心5min，取上清备用。
1.2.2花茶提取物的DPPH自由基清除能力测定
采用比色法测定。测定原理：DPPH自由基因具有单电子而使其在525nm处有一极强的吸收(呈深紫色)，当有自由基清除剂存在时，由于与其单电子配对而使吸收渐渐消失，退色程度与其所接收的电子数成定量关系，因而可以用分光光度法进行定量分析。
方法：取2.0mL 120μmol/L DPPH自由基溶液加入到20μL待测试样中，以相同剂量的双蒸水代替试样加入相同体积的DPPH自由基溶液作为对照(A0)，用2.0mL 50％乙醇代替DPPH自由基溶液调零，25℃放置20min后，测定DPPH自由基混合溶液在520nm处的吸光值(A样)，清除能力以清除率表示，重复3次，根据以下公式计算：
DPPH自由基清除率rs％＝(A0-A样)×100/A0
1.2.3花茶的优化配比
以DPPH自由基清除能力为指标，选取绿茶、木棉花、金银花和鸡蛋花为原料，以绿茶和木棉花为主，金银花和鸡蛋花为辅，以袋泡茶每袋定量2.00g为标准，每种材料设计了四个水平，即绿茶占80％，70％，60％，50％；木棉花占20％，15％，10％，5％；金银花占25％，20％，15％，10％；鸡蛋花占20％，15％，10％，5％。分别将4种花茶研磨，过40目筛，根据L16(45)正交表，准确称取各正交组合的质量数，装入袋泡茶专用包装纸，密封。将茶放入杯中，加入煮沸开水100ml，浸提5min，弃去茶袋，茶汤冷却，15000×g常温离心5min，取上清备用。
1.2.4花茶的增效作用
将最佳优化配方花茶与Vc按一定比例均匀混合，定量为2.00g，装入袋泡茶专用包装纸，密封，提取液制备的方法同1.2.1，测定其单独和混合后对DPPH自由基的清除能力，对比它们的增效或减效作用，清除率测定值计算同1.2.2，清除率期望值为将混合物单个抗氧化值相加，如果相加值大于100％，则以100％计算。
1.2.5数据分析
应用概率统计方法和SPSS V22进行正交实验方差分析。
2结果与分析
2.1花茶的最佳复合配比
花茶配比的正交实验方案如表1，考察指标是各提取液对DPPH自由基清除能力。
表1正交实验方案
正交实验结果表明，如表2，A3B1C3D4配方提取物对DPPH自由基清除率(rs％)达到65.47％，比其他配比对DPPH自由基清除率(rs％)高，达到显著水平(P<0.05)。
表2正交实验结果
| 序号 | 1 | 2 | 3 | 4 | DPPH自由基清除率(rs％) |
| 1 | A1 | B1 | C1 | D1 | 59.56 |
| 2 | A1 | B2 | C2 | D2 | 56.13 |
| 3 | A1 | B3 | C3 | D3 | 54.66 |
| 4 | A1 | B4 | C4 | D4 | 50.71 |
| 5 | A2 | B1 | C2 | D3 | 45.66 |
| 6 | A2 | B2 | C1 | D4 | 47.28 |
| 7 | A2 | B3 | C4 | D1 | 48.53 |
| 8 | A2 | B4 | C3 | D2 | 53.61 |
| 9 | A3 | B1 | C3 | D4 | 65.47 |
| 10 | A3 | B2 | C4 | D3 | 63.32 |
| 11 | A3 | B3 | C1 | D2 | 58.86 |
| 12 | A3 | B4 | C2 | D1 | 60.17 |
| 13 | A4 | B1 | C4 | D2 | 41.36 |
| 14 | A4 | B2 | C3 | D1 | 43.51 |
| 15 | A4 | B3 | C2 | D4 | 38.62 |
| 16 | A4 | B4 | C1 | D3 | 39.41 |
| K1 | 221.06 | 195.08 | 247.82 | 162.90 | T＝826.86 |
| K2 | 212.05 | 210.24 | 200.67 | 203.90 | |
| K3 | 205.11 | 200.58 | 217.25 | 203.92 | |
| K4 | 211.77 | 209.96 | 203.05 | 202.08 | |
| R | 21.23 | 2.85 | 4.17 | 2.42 |
K为各因素同一水平之和
2.2方差分析
正交实验方差分析结果表明，四个因素对提取效果的影响大小顺序为A>C>B>D，即绿茶的含量影响最大，其次为金银花，再次为木棉花，鸡蛋花最小，其中绿茶含量的影响达到显著水平(P<0.05)(表3)。
表3方差分析
| 变异来源SV | 自由度df | 平方和S | 均方SS | F | 显著性 |
| 修正的模型 | 12 | 1066.473a | 88.873 | 6.989 | 0.068 |
| 绿茶 | 3 | 987.632 | 329.211 | 25.890 | 0.012 |
| 木棉花 | 3 | 21.339 | 7.113 | 0.559 | 0.677 |
| 金银花 | 3 | 39.753 | 13.251 | 1.042 | 0.487 |
| 鸡蛋花 | 3 | 17.750 | 5.917 | 0.465 | 0.727 |
| 实验误差 | 3 | 383147 | 12.716 | ||
| 总变异 | 15 | 1104.620 |
a.R平方＝0.965(调整的R平方＝0.827)
2.3花茶的增效作用
2.3.1Vc对DPPH自由基的清除作用
将0.5mg/mL的Vc溶液分别吸取5μg、10μg、15μg、20μg、25μg，测定DPPH自由基的清除率，结果如图1。
根据Vc对DPPH自由基的清除趋势方程，计算Vc的IC50＝12.48μg。
2.3.2复合花茶对DPPH自由基的清除作用
将复合花茶浸出物干燥，配制成0.5mg/mL的溶液分别吸取5μg、10μg、15μg、20μg、25μg，测定DPPH自由基的清除率，结果如图2。
根据复合花茶对DPPH自由基的清除趋势方程，计算复合花茶的IC50＝20.88μg。
2.3.2花茶与Vc之间的相互作用
绿茶与Vc之间相互作用的结果如表4，花茶与Vc之间相互作用的结果如表5。
表4绿茶和Vc的相互作用
| Vc占绿茶的质量分数(％) | DPPH自由基清除率(测定值,％) | DPPH自由基清除率(期望值,％) |
| 0.5 | 72.51 | 69.35 |
| 1 | 78.74 | 76.82 |
| 1.5 | 82.47 | 84.31 |
| 2 | 85.36 | 91.81 |
| 2.5 | 86.13 | 99.31 |
注：每包袋泡茶重量为2.00g，期望值等于相同浓度条件下单个绿茶和Vc的抗氧化值相加
表5复合花茶和Vc的相互作用
| Vc占花茶的质量分数(％) | DPPH自由基清除率(测定值,％) | DPPH自由基清除率(期望值,％) |
| 0.5 | 78.61 | 75.61 |
| 1 | 85.46 | 83.08 |
| 1.5 | 86.64 | 90.57 |
| 2 | 88.41 | 98.07 |
| 2.5 | 88.92 | 100 |
注：每包袋泡茶重量为2.00g，期望值等于相同浓度条件下单个花茶和Vc的抗氧化值相加，相加值大于100％，则以100％计
从绿茶和Vc的相互作用、复合花茶和Vc的相互作用结果可以看出，在Vc用量小于质量分数1％时对绿茶和复合花茶都产生了增效作用，且对复合花茶的增效作用优于对绿茶的增效作用，当Vc用量大于质量分数1％时，产生了减效作用，但复合花茶与Vc相互作用的减效作用较弱，说明Vc用量并非越多越好。
3.结论
DPPH自由基(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)是一种很稳定的自由基，常用于活性物质的体外抗氧化性评价。袋泡茶的特点是体积小，利于贮藏，便于携带，使用方便，本发明使用全生料型方法将部分原材料(含茶叶)粉碎成粗粉，经干燥，灭菌后，分装入滤袋中。干茶浸提茶汁采用冲泡法，袋泡茶每袋定量为2g/袋，其中水温、浸提时间和茶水比例三个因子影响着浸出物的数量和质量。袋泡茶要求茶叶内含物质被高效、高速地浸出。水温标准为100℃时，一般红茶和绿茶的冲泡时间为5min，冲泡法中茶水比例是用1:50。实验结果得到复合花茶的优化配比为A3B1C3D4，即绿茶:木棉花:金银花:鸡蛋花＝60:20:15:5。维生素C无毒无害，能够捕获自由基，增强免疫，预防像癌症、动脉硬化、风湿病等疾病。Vc用量为复合花茶质量分数的1％时对复合花茶DPPH自由基清除率具有明显的增效作用，因此本实验优化后的配方为绿茶:木棉花:金银花:鸡蛋花：Vc＝60:20:15:5:1。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
Claims (3)
1.一种具有DPPH自由基清除作用的花茶，其特征在于：所述花茶由质量比为 60:20:15:5:1的绿茶、木棉花、金银花、鸡蛋花和维生素C组成。
2.根据权利要求1所述的一种具有DPPH自由基清除作用的花茶，其特征在于：将所述具有DPPH自由基清除作用的花茶制成袋泡茶。
3. 根据权利要求1所述的一种具有DPPH自由基清除作用的花茶的制备方法，其特征在于包括以下操作步骤：将绿茶、木棉花、金银花、鸡蛋花和维生素C分别进行研磨，过40 目筛得到各种原料粉状物，按配比将各种原料粉状物混合均匀，干燥，灭菌后分装，得到具有DPPH自由基清除作用的花茶。
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| CN102246878A (zh) * | 2011-05-23 | 2011-11-23 | 华南理工大学 | 一种五花茶及其制备方法和抗氧化值的检测方法 |
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Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 16种花茶对DPPH~·的清除能力及其优化配比研究;曾佑炜等;《天然产物研究与开发》;20080415(第02期);全文 * |
| 20种市售凉茶类植物饮料抗氧化性的比较研究;何秋彤;余以刚;李聪聪;李经桐;吴晖;;食品科学(07);全文 * |
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