CN111511739A - 用于治疗和预防乙型肝炎病毒感染的二氢嘧啶基噻唑 - Google Patents

用于治疗和预防乙型肝炎病毒感染的二氢嘧啶基噻唑 Download PDF

Info

Publication number
CN111511739A
CN111511739A CN201880083641.4A CN201880083641A CN111511739A CN 111511739 A CN111511739 A CN 111511739A CN 201880083641 A CN201880083641 A CN 201880083641A CN 111511739 A CN111511739 A CN 111511739A
Authority
CN
China
Prior art keywords
methyl
oxo
tert
phenyl
butyl
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201880083641.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN111511739B (zh
Inventor
韩兴春
江敏
王永光
杨松
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
F Hoffmann La Roche AG
Original Assignee
F Hoffmann La Roche AG
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by F Hoffmann La Roche AG filed Critical F Hoffmann La Roche AG
Publication of CN111511739A publication Critical patent/CN111511739A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111511739B publication Critical patent/CN111511739B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D455/00—Heterocyclic compounds containing quinolizine ring systems, e.g. emetine alkaloids, protoberberine; Alkylenedioxy derivatives of dibenzo [a, g] quinolizines, e.g. berberine
    • C07D455/03—Heterocyclic compounds containing quinolizine ring systems, e.g. emetine alkaloids, protoberberine; Alkylenedioxy derivatives of dibenzo [a, g] quinolizines, e.g. berberine containing quinolizine ring systems directly condensed with at least one six-membered carbocyclic ring, e.g. protoberberine; Alkylenedioxy derivatives of dibenzo [a, g] quinolizines, e.g. berberine
    • C07D455/04—Heterocyclic compounds containing quinolizine ring systems, e.g. emetine alkaloids, protoberberine; Alkylenedioxy derivatives of dibenzo [a, g] quinolizines, e.g. berberine containing quinolizine ring systems directly condensed with at least one six-membered carbocyclic ring, e.g. protoberberine; Alkylenedioxy derivatives of dibenzo [a, g] quinolizines, e.g. berberine containing a quinolizine ring system condensed with only one six-membered carbocyclic ring, e.g. julolidine
    • C07D455/06—Heterocyclic compounds containing quinolizine ring systems, e.g. emetine alkaloids, protoberberine; Alkylenedioxy derivatives of dibenzo [a, g] quinolizines, e.g. berberine containing quinolizine ring systems directly condensed with at least one six-membered carbocyclic ring, e.g. protoberberine; Alkylenedioxy derivatives of dibenzo [a, g] quinolizines, e.g. berberine containing a quinolizine ring system condensed with only one six-membered carbocyclic ring, e.g. julolidine containing benzo [a] quinolizine ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)

Abstract

本发明提供具有以下通式的新化合物，其中R1、R2、X、Y和A如本文所述，包含所述化合物的组合物和使用所述化合物的方法。

Description

用于治疗和预防乙型肝炎病毒感染的二氢嘧啶基噻唑
本发明涉及可用于哺乳动物的治疗和/或预防的有机化合物，尤其涉及可用于治疗HBV感染的HBsAg(HBV表面抗原)抑制剂和HBV DNA产生抑制剂。
发明领域
本发明涉及具有药物活性的新二氢嘧啶基噻唑、它们的制备、含有它们的药物组合物以及它们作为药物的潜在用途。
本发明涉及式I化合物
Figure BDA0002554226330000011
其中R1、R2、X、Y和A如下面所定义，或其药学上可接受的盐、或对映异构体、或非对映异构体。
许多观察结果表明几种HBV病毒蛋白可以通过干扰病毒识别信号系统并随后干扰干扰素(IFN)的抗病毒活性来抵消最初的宿主细胞反应。其中，HBV空亚病毒颗粒(SVPs，HBsAg)的过度分泌可能参与维持慢性感染患者(CHB)中观察到的免疫耐受状态。持续暴露于HBsAg和其他病毒抗原可导致HBV特异性T细胞缺失或进行性功能损害(Kondo等人，Journal of Immunology(1993)，150，4659–4671；Kondo等人，Journal of MedicalVirology(2004),74,425–433；Fisicaro等，Gastroenterology，(2010)，138，682-93；)。此外，据报道HBsAg通过直接相互作用抑制免疫细胞例如单核细胞、树突状细胞(DC)和自然杀伤(NK)细胞的功能(Op den Brouw等人，Immunology，(2009b)，126，280-9；Woltman等人，PLoS One，(2011)，6，e15324；Shi等人，J Viral Hepat.(2012)，19，e26-33；Kondo等人，ISRN Gasteroenterology，(2013)，文章ID 935295)。
HBsAg定量是慢性乙型肝炎预后和治疗反应的重要生物标志物。但是，在慢性感染的患者中很少观察到HBsAg减少和血清转化的实现，但仍是治疗的最终目标。当前的疗法(例如核苷(酸)类似物)是抑制HBV DNA合成的分子但不降低HBsAg水平。核苷(酸)类似物已证明即使经过长期治疗其HBsAg清除率与自然观察到的相当(-1％-2％之间)(Janssen等，Lancet，(2005)，365，123-9；Marcellin等，N.Engl.J.Med.,(2004),351,1206-17；Buster等，Hepatology,(2007),46,388-94)。因此，对于HBV治疗针对HBsAg的医学需求尚未得到满足(Wieland,S.F.&F.V.Chisari.J Virol,(2005),79,9369-80；Kumar等人，J Virol,(2011),85,987-95；Woltman等人，PLoS One,(2011),6,e15324；；Op den Brouw等人，Immunology,(2009b),126,280-9)。
发明内容
本发明的目的是新的式I化合物、其制备、基于本发明化合物的药物及其生产以及式I化合物作为HBV抑制剂的用途以及用于治疗或预防HBV感染的用途。式I化合物显示出优异的抗HBV活性。
本发明涉及式(I)的化合物，
Figure BDA0002554226330000021
其中
R1是苯基，其是未取代的或被卤素或C1-6烷基取代1或2或3次；
R2是C1-6烷基；
X是-(Cy)0-1-(L1)0-1-(L2)0-1-；其中
Cy是3-20元杂环基；
L1是C1-6烷基或羧基C1-6烷基；
L2是O、S、-N(R3)-或-C(O)-NH-；其中R3是H或C1-6烷基；
Y是键、C1-9烷基、C1-6烷氧基C1-6烷氧基C1-6烷基或羧基C1-9烷基；
A是式(A1)
Figure BDA0002554226330000031
其中
R4是氢或C1-6烷基；
R5是氢或C1-6烷氧基；
或式(A2)
Figure BDA0002554226330000032
其中
R6是氢或卤素；
R7是氢或卤素；
R8是氢或C1-6烷基；
U是键或O；
W是CH或N；
或其药学上可接受的盐。
发明详述
定义
除非另有说明，否则本申请包括说明书和权利要求书中使用的以下术语具有以下给出的定义。必须注意的是，如说明书和所附权利要求书中所使用的，单数形式“一个/一种(a/an)”和“该(the)”包括复数指示物，除非上下文另外明确指出。在一些情况下，连接号(“-”)在定义内可以交换使用(例如，“烷氧基烷基”省略了在等价术语“烷氧基-烷基”中出现的连接号)。
当表示取代数时，术语“1或2或3”是指从一倍到三倍取代数的范围，即一个氢被取代基替换直至所有氢被取代基替换。术语“取代的”表示指定的基团带有一个或多个取代基。在任何基团可以带有多个取代基并且提供了多种可能的取代基的情况下，取代基是独立选择的并且不必相同。术语“未取代的”是指指定的基团不带有取代基。
如本文所用，术语“烷基”表示一个至九个碳原子(C1-C9)的饱和、直链或支链的单价烃基。在另一个实施方案中，术语“C1-9烷基”表示包含1至9个碳原子的饱和、直链或支链烷基。在另一个实施方案中，术语“C1-6烷基”表示包含1-6个碳原子的饱和、直链或支链烷基。在另一个实施方案中，烷基具有1、2、3、4、5或6个碳原子，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、1-丁基、2-丁基、叔丁基、1-戊基、1-己基等。特别的“烷基”基团是乙基、丙基、异丙基、1-丁基、1-戊基和-己基。
如本文所用，“杂环基”是指具有3至20个环原子的任何单环、二环、三环或螺环的、饱和或不饱和、芳族(杂芳基)或非芳族(例如杂环烷基)的环系统，其中环原子是碳，并且环或环系统中的至少一个原子是选自氮、硫或氧的杂原子。如果环状系统的任何环原子是杂原子，则该系统是杂环基，无论环状系统与分子其余部分的连接点如何。在一个实例中，杂环基包含3-11个环原子(“成员”)并且包括单环、二环、三环和螺环环系统，其中环原子是碳，其中该环或环系统中的至少一个原子是选自氮、硫或氧的杂原子。在一个实例中，杂环基包括具有1、2、3或4个选自氮、硫或氧的杂原子的3-至7-元单环。在另一个实例中，杂环基包括具有1、2、3或4个选自氮、硫或氧的杂原子的4-、5-或6-元单环。在一个实例中，杂环基包括具有1、2、3、4、5或6个选自氮、硫或氧的杂原子的8-至12-元二环。在另一个实例中，杂环基包括具有1、2、3、4、5或6个选自氮、硫或氧的杂原子的9元或10元二环。示例性的杂环基是环氧乙烷基、氮杂环丙烷基、环硫乙烷基、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、硫杂环丁烷基、1,2-二硫杂环丁烷基、1,3-二硫杂环丁烷基、吡咯烷基、二氢-1H-吡咯基、二氢呋喃基、四氢呋喃基、二氢噻吩基、四氢噻吩基、咪唑烷基、哌啶基、哌嗪基、异喹啉基、四氢异喹啉基、吗啉基、硫代吗啉基、1,1-二氧代-硫代吗啉基、二氢吡喃基、四氢吡喃基、六氢噻喃基、六氢嘧啶基、噁嗪烷基、噻嗪烷基、氧硫杂环己烷基、高哌嗪基、高哌啶基、氮杂环庚烷基、氧杂环庚烷基、硫杂环庚烷基、氧氮杂
Figure BDA0002554226330000051
基、氧氮杂环庚烷基、二氮杂环庚烷基、1,4-二氮杂环庚烷基、二氮杂
Figure BDA0002554226330000052
基、硫氮杂
Figure BDA0002554226330000053
基、硫氮杂环庚烷基、四氢噻喃基、噁唑烷基、噻唑烷基、异噻唑烷基、1,1-二氧代异噻唑烷酮基、噁唑烷酮基、咪唑烷酮基、噻嗪基、噁嗪基、噻二嗪基、噁二嗪基、二噻嗪基、二噁嗪基、噁噻嗪基、噻三嗪基、噁三嗪基、二噻二嗪基、咪唑啉基、二氢嘧啶基、四氢嘧啶基、1-吡咯啉基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、吲哚啉基、噻喃基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、二噁烷基、1,3-二氧戊环基、吡唑啉基、吡唑烷基、二噻烷基、二硫戊环基、嘧啶二酮基、嘧啶二酮基、嘧啶-2,4-二酮基、哌嗪酮基、哌嗪二酮基、吡唑烷基咪唑啉基、3-氧代-5,6,8,8a-四氢-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪基、3-氮杂二环[3.1.0]己基、3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚基、6-氮杂二环[3.1.1]庚基、3-氮杂二环[3.1.1]庚基、3-氮杂二环[4.1.0]庚基、氮杂二环[2.2.2]己基、2-氮杂二环[3.2.1]辛基、8-氮杂二环[3.2.1]辛基、2-氮杂二环[2.2.2]辛基、8-氮杂二环[2.2.2]辛基、7-氧杂二环[2.2.1]庚烷、氮杂螺[3.5]壬基、氮杂螺[2.5]辛基、氮杂螺[4.5]癸基、1-氮杂螺[4.5]癸-2-酮基、氮杂螺[5.5]十一基、4,5,6,7-四氢[2H]吲唑基、四氢苯并咪唑基、4,5,6,7-四氢苯并[d]咪唑基、1,6-二氢咪唑[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶基、四氢吲哚基、八氢吲哚基、四氢异吲哚基、四氢吲唑基、1,1-二氧代六氢噻喃基。杂环基可任选地被卤素、OH、SH、CN、NH2、NHCH3、N(CH3)2、NO2、N3、C(O)CH3、COOH、CO2CH3、C1-6烷基、C1-6烷氧基、氧代、卤代C1-6烷基、苯基或杂环基取代。
单独或组合使用的术语“烷氧基”表示基团烷基-O-，其中“烷基”如上所定义；例如，甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、2-丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、己氧基等。特别的“烷氧基”是甲氧基、乙氧基和丙氧基。
术语“键”是指两个原子或两个部分之间的化学键，当通过该键连接的原子被认为是较大亚结构的一部分时。一方面，当本文所述的基团为键时，所提及的基团不存在，从而允许在其余指明基团之间形成键。
如本文所用，与化学结构中的键相交的波浪线
Figure BDA0002554226330000061
是指在化学结构片段中波浪形键相交的键与分子或结构式的其余部分的连接点。
如本文中所使用的，跟随有下标整数范围的括号中的基团(例如，L1)的表示(例如，(L1)0-1)意味着该基团可以具有由所述整数范围指定的出现次数。例如，(L1)0-1表示基团L1可以不存在或可以出现一次。
术语“卤素”是指氟、氯、溴或碘。
单独或组合使用的术语“羰基”是指基团-C(O)-。
术语“氧代”是指＝O基团并且可以连接至碳原子或硫原子。
术语“LG”表示离去基团，其是在异裂中带着一对电子离开的分子片段。离去基团可以是阴离子或中性分子，但是在任何一种情况下，至关重要的是离去基团都必须能够稳定由于异裂而产生的额外电子密度。常见的阴离子离去基团是卤化物和磺酸酯，例如卤素、OTf、OTs和OMs。
术语“PG”表示保护基团，其通过官能团的化学修饰被引入分子中以在随后的化学反应中获得化学选择性。典型的保护基是Boc、Cbz和Bn。
根据本发明的化合物可以以其药学上可接受的盐的形式存在。术语“药学上可接受的盐”是指保留式I化合物的生物学有效性和性质并且由合适的无毒有机或无机酸或有机或无机碱形成的常规酸加成盐或碱加成盐。酸加成盐包括例如衍生自无机酸如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸和硝酸的那些，以及衍生自有机酸如对甲苯磺酸、水杨酸、甲磺酸、草酸、琥珀酸、柠檬酸、苹果酸、乳酸、富马酸等的那些。碱加成盐包括衍生自铵、钾、钠和季铵氢氧化物例如氢氧化四甲基铵的那些。将药物化合物化学修饰成盐是药物化学家众所周知的技术，以便获得改善的化合物的物理和化学稳定性、吸湿性、流动性和溶解性。例如在Bastin R.J.等人，Organic Process Research&Development 2000,4,427-435中描述。特别是式I化合物的钠盐。
含有一个或几个手性中心的通式I的化合物可以以外消旋体、非对映体混合物或旋光活性单一异构体的形式存在。可以根据已知方法将外消旋体分离成对映异构体。特别是，通过与旋光活性酸如D-或L-酒石酸、扁桃酸、苹果酸、乳酸或樟脑磺酸反应，由外消旋混合物形成可通过结晶分离的非对映体盐。
HBsAg抑制剂
本发明提供(i)具有通式I的化合物：
式(I)的化合物，
Figure BDA0002554226330000071
其中
R1是苯基，其是未取代的或被卤素或C1-6烷基取代1或2或3次；
R2是C1-6烷基；
X是-(Cy)0-1-(L1)0-1-(L2)0-1-；其中
Cy是3-20元杂环基；
L1是C1-6烷基或羧基C1-6烷基；
L2是O、S、-N(R3)-或-C(O)-NH-；其中R3是H或C1-6烷基；
Y是键、C1-9烷基、C1-6烷氧基C1-6烷氧基C1-6烷基或羧基C1-9烷基；
A是式(A1)
Figure BDA0002554226330000072
其中
R4是氢或C1-6烷基；
R5是氢或C1-6烷氧基；
或式(A2)
Figure BDA0002554226330000081
其中
R6是氢或卤素；
R7是氢或卤素；
R8是氢或C1-6烷基；
U是键或O；
W是CH或N；
或其药学上可接受的盐。
本发明的另一实施方案是(ii)根据实施方案(i)所述的式I化合物，其中
R1是苯基，其被卤素取代1或2或3次；
R2是C1-6烷基；
X是-(Cy)0-1-(L1)0-1-(L2)0-1-；其中
Cy是5-6元单环杂环基或9-10元稠合二环杂环基；
L1是C1-6烷基或羧基C1-6烷基；
L2是O、S、-N(R3)-或-C(O)-NH-；其中R3是H或C1-6烷基；
Y是键、C1-9烷基、C1-6烷氧基C1-6烷氧基C1-6烷基或羧基C1-9烷基；
A是式(A1)，其中R4是C1-6烷基，R5是C1-6烷氧基；或式(A2)，其中R6是氢或卤素，R7是卤素，R8是C1-6烷基，U是键或O，W是CH或N；
或其药学上可接受的盐。
本发明的另一实施方案是(iii)根据实施方案(i)所述的式I化合物,其中R1是氯氟苯基；
R2是甲基或乙基；
X是键；O；-N(CH3)-；哌嗪基；羧基哌嗪基；(氨基羧基)丙基哌嗪基；(甲基氨基)甲基吗啉基；(氨基羰基)吗啉基；3-氧代-5,6,8,8a-四氢-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪基或(氨基羰基)丙基-3-氧代-5,6,8,8a-四氢-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪基；
Y是键、己基、戊基、丁基、丙基、(乙氧基乙氧基)乙基或羧基己基；
A是式(A1)，其中R4是叔丁基，R5是甲氧基；或式(A2)，其中R6是氢或氟，R7是氟，R8是甲基，U是键或O，W是CH或N；
或其药学上可接受的盐。
本发明的另一实施方案是(iv)根据实施方案(i)所述的式I化合物或其药学上可接受的盐，其中R1是苯基，其被卤素取代两次。
本发明的另一实施方案是(v)根据实施方案(i)所述的式I化合物或其药学上可接受的盐，其中R1是氯氟苯基。
本发明的另一实施方案是(vi)根据实施方案(i)所述的式I化合物或其药学上可接受的盐，其中R2是甲基或乙基。
本发明的另一实施方案是(vii)根据实施方案(i)所述的式I化合物或其药学上可接受的盐，其中
X是-(Cy)1-(L1)0-1-(L2)0-1-；其中Cy是哌嗪基、羧基哌嗪基、吗啉基或3-氧代-5,6,8,8a-四氢-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪基。
本发明的另一实施方案是(viii)根据实施方案(i)所述的式I化合物或其药学上可接受的盐，其中
X是哌嗪基；羧基哌嗪基；(氨基羰基)丙基-3-氧代-5,6,8,8a-四氢-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪基。
本发明的另一实施方案是(ix)根据实施方案(i)所述的式I化合物或其药学上可接受的盐，其中Y是键、C1-9烷基或C1-6烷氧基C1-6烷氧基C1-6烷基。
本发明的另一实施方案是(x)根据实施方案(i)所述的式I化合物或其药学上可接受的盐，其中
Y是键；己基；丙基；(乙氧基乙氧基)乙基。
本发明的另一实施方案是(xi)根据实施方案(i)所述的式I化合物或其药学上可接受的盐，其中
A是式(A1)，其中R4是叔丁基，R5是甲氧基；或式(A2)，其中R6是氢或氟，R7是氟，R8是甲基，U是键或O，W是CH或N。
以上实施方案中的任何一个可以被组合。
根据本发明的式I的具体化合物如下：
6-叔丁基-9-[6-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
6-叔丁基-9-[5-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]戊氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
6-叔丁基-9-[4-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]丁氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
6-叔丁基-9-[3-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]丙氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
6-叔丁基-9-[3-[2-羧基-4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]丙氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
6-叔丁基-9-[6-[3-羧基-4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
6-叔丁基-9-[6-[2-羧基-4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
6-叔丁基-9-[6-[7-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]-3-氧代-5,6,8,8a-四氢-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
6-叔丁基-9-[6-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基-甲基-氨基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
6-叔丁基-9-[2-[2-[2-[[(3S)-4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]吗啉-3-羰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
6-叔丁基-9-[2-[2-[2-[2-羧基-4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
6-叔丁基-9-[4-羧基-6-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
6-叔丁基-9-[6-[[(3S)-4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]吗啉-3-羰基]氨基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
6-叔丁基-9-[6-[[4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲氧基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
9-[6-[[3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]-3-氧代-5,6,8,8a-四氢-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酰基]氨基]己氧基]-6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
9-[6-[[4-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]-3-氧代-5,6,8,8a-四氢-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-3,3-二甲基-丁酰基]氨基]己氧基]-6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
(4R)-6-[[(8aS)-2-[4-[6-[2,3-二氟-5-[5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基]苯氧基]己基氨基]-2,2-二甲基-4-氧代-丁基]-3-氧代-5,6,8,8a-四氢-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-7-基]甲基]-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯；
(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-6-[[(3S)-3-[6-[2,3-二氟-5-(5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基)苯氧基]己基氨基甲酰基]吗啉-4-基]甲基]-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯；
(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-6-[[(3R)-3-[[6-[2,3-二氟-5-(5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基)苯氧基]己基-甲基-氨基]甲基]吗啉-4-基]甲基]-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯；
(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-6-[[2,3-二氟-5-(5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基)苯氧基]甲基]-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯；
(2R)-4-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]-2-[6-[2,3-二氟-5-(5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基)苯氧基]己基氨基]丁酸；
4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]-1-[4-氟-6-[5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基]-2-吡啶基]哌嗪-2-甲酸；
或其药学上可接受的盐。
合成
本发明的化合物可以通过任何常规方法制备。在以下流程和实施例中提供了合成这些化合物及其原料的合适方法。除非另有说明，所有取代基，特别是R1、R2和R3如上所定义。此外，除非另有明确说明，否则所有反应、反应条件、缩写和符号具有有机化学领域的普通技术人员众所周知的含义。
流程1
Figure BDA0002554226330000131
其中Z是卤素；LG是卤素；PG是Boc；R9是C1-6烷基。
式II的化合物在碱例如K2CO3的存在下与卤化物III反应，得到式II-1的化合物，然后将其与式IV的化合物反应得到中间体II-2。使式II-2的化合物脱保护，然后在碱例如DIPEA的存在下，在溶剂例如DMF或DCM中与溴化物V反应，得到式VI的化合物，然后将其用碱例如LiOH或NaOH，在合适的溶剂例如THF/H2O或MeOH/H2O中水解，得到式Ia的化合物。
流程2
Figure BDA0002554226330000141
其中R9是C1-6烷基
在碱例如乙酸钠的存在下，式VII的化合物、脒和式VIII的化合物的三组分反应，得到式V-1的化合物，其在碘化钠和碱例如K2CO3存在下与式II的化合物反应，得到式V-2化合物。在合适的溶剂例如THF/H2O或MeOH/H2O中，用碱例如LiOH或NaOH水解式V-2化合物，得到式Ib化合物。
流程3
Figure BDA0002554226330000151
其中Z为卤素；LG是离去基团，例如卤素；PG是保护基团，例如Boc。
在碱例如K2CO3的存在下，酚X与卤化物III反应，得到式X-1的化合物，然后其与式IV的化合物反应，得到式X-2的化合物。使式X-2的化合物脱保护，然后在碱例如DIPEA的存在下、在溶剂例如DMF或DCM中，与溴化物V反应，得到式Ic的化合物。
流程4
Figure BDA0002554226330000161
在碱例如DIPEA的存在下，在溶剂例如DMSO中，将式XI的化合物与哌嗪-1,3-二甲酸O1-叔丁酯O3-甲酯一起加热，得到式XI-1的化合物，然后其用酸如TFA或浓HCl处理，得到化合物XI-2。式XI-2的化合物在碱例如DIPEA的存在下，在溶剂例如DMF或DCM中与溴化物V反应，得到化合物XI-3，其用碱例如LiOH或NaOH，在合适的溶剂例如THF/H2O或MeOH/H2O中水解，得到化合物Id。
流程5
Figure BDA0002554226330000162
在碱如K2CO3的存在下，酚X在合适的溶剂如DMF中与溴化物V反应，得到式Ie化合物。
本发明还涉及一种制备式I化合物的方法，该方法包括以下步骤之一：
(a)在碱存在下水解式(VI)化合物，
Figure BDA0002554226330000171
(b)在碱存在下水解式(V-2)化合物，
Figure BDA0002554226330000172
(c)式(X-2)脱保护并在碱存在下用溴化物(V)取代,
Figure BDA0002554226330000173
(d)在碱存在下水解式(XI-3)化合物,
Figure BDA0002554226330000174
(e)在碱存在下用溴化物(V)取代式(X)，
Figure BDA0002554226330000175
其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8如上所定义；Z是Br或I；LG是卤素；PG是Boc；R9是C1-6烷基；
步骤(a)、(b)或(d)中的碱可以是例如LiOH或NaOH；
步骤(c)中的碱可以是例如DIPEA；
步骤(e)中的碱可以是例如K2CO3；
根据上述方法制备的式I化合物也是本发明的目的。
本发明的化合物还显示出良好的安全性和PK曲线。
药物组合物和施用
本发明还涉及用作治疗活性物质的式I化合物。
另一个实施方案提供了含有本发明的化合物和治疗惰性的载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物或药物，以及使用本发明的化合物制备此类组合物和药物的方法。在一个实例中，式(I)的化合物可以通过在环境温度下在适当的pH下并以期望的纯度与生理上可接受的载体混合来配制，所述生理上可接受的载体即在盖伦施用形式使用的剂量和浓度下对接受者无毒的载体。制剂的pH主要取决于化合物的具体用途和浓度，但优选在约3至约8的范围内。在一个实例中，式(I)的化合物在pH 5的乙酸盐缓冲液中配制。在另一个实施方案中，式(I)的化合物是无菌的。化合物可以例如以固体或无定形组合物、冻干制剂或水溶液形式存储。
以与良好医学实践一致的方式配制、计量和施用组合物。在此情况下考虑的因素包括正在治疗的特定疾病、正在治疗的特定哺乳动物、个体患者的临床状况、疾病的原因、药物的递送部位、施用方法、施用时间表以及医学从业人员已知的其他因素。化合物的“有效量”将由此类考虑决定，并且是抑制HBsAg所需的最小量。例如，该量可以低于对正常细胞或整个哺乳动物有毒的量。
在一实例中，每剂肠胃外施用的本发明化合物的药物有效量为每天约0.01至100mg/kg患者体重，或者约0.01至100mg/kg患者体重，通常最初使用的化合物范围为0.3至15mg/kg/天。在另一个实施方案中，口服单位剂型，例如片剂和胶囊剂，优选含有约0.1至约1000mg的本发明化合物。
本发明的化合物可以通过任何合适的方式施用，包括口服、局部(包括颊和舌下)、直肠、阴道、经皮、肠胃外、皮下、腹膜内、肺内、皮内、鞘内和硬膜外以及鼻内施用，如果需要的话，对于局部治疗，病灶内施用。肠胃外输注包括肌内、静脉内、动脉内、腹膜内或皮下施用。
本发明的化合物可以以任何方便的施用形式施用，例如片剂、散剂、胶囊剂、溶液剂、分散剂、混悬剂、糖浆剂、喷雾剂、栓剂、凝胶剂、乳剂、贴剂等。此类组合物可以含有药物制剂中常用的组分，例如稀释剂、载体、pH调节剂、甜味剂、填充剂和其他活性剂。
通过混合本发明的化合物和载体或赋形剂来制备典型的制剂。合适的载体和赋形剂是本领域技术人员众所周知的。所述制剂还可以包含一种或多种缓冲剂、稳定剂、表面活性剂、润湿剂、润滑剂、乳化剂、助悬剂、防腐剂、抗氧化剂、避光剂、助流剂、加工助剂、着色剂、甜味剂、加香剂、矫味剂、稀释剂和其他已知的添加剂以提供优雅的药物外观(即本发明的化合物或其药物组合物)或有助于药物产品(即药物)的生产。
合适的口服剂型的实例是含有约0.1至1000mg本发明化合物以及约0至2000mg无水乳糖、约0至2000mg交联羧甲基纤维素钠、约0至2000mg聚乙烯吡咯烷酮(PVP)K30和约0至2000毫克的硬脂酸镁的片剂。首先将粉状成分混合在一起，然后与PVP溶液混合。可以将所得的组合物干燥、制粒，与硬脂酸镁混合并使用常规设备压制成片剂形式。气雾剂制剂的实例可以如下制备：将例如0.1至1000mg的本发明的化合物溶解在合适的缓冲溶液，例如磷酸盐缓冲液中，加入张力调节剂，例如盐例如氯化钠，如果需要的话。可以例如使用0.2微米的过滤器过滤溶液，以除去杂质和污染物。
因此，一个实施方案包括包含式I化合物或其立体异构体或药学上可接受的盐的药物组合物。在另一个实施方案中，包括药物组合物，其包含式I的化合物或其立体异构体或药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体或赋形剂。
适应症和治疗方法
本发明的化合物可以抑制HBsAg的产生或分泌，并抑制HBV基因的表达。因此，本发明的化合物可用于治疗或预防HBV感染。
本发明涉及式I化合物用于抑制HBsAg产生或分泌的用途。
本发明涉及式I化合物用于抑制HBV DNA产生的用途。
本发明涉及式I化合物用于抑制HBV基因表达的用途。
本发明涉及式I化合物用于治疗或预防HBV感染的用途。
式I化合物用于制备可用于治疗或预防与HBV感染有关的疾病的药物的用途是本发明的一个目的。
本发明特别涉及式I化合物在制备用于治疗或预防HBV感染的药物中的用途。
另一个实施方案包括用于治疗或预防HBV感染的方法，该方法包括施用有效量的式I化合物、立体异构体、互变异构体、前药、缀合物或其药学上可接受的盐。
实施例
通过参考以下实施例将更充分地理解本发明。但是，它们不应被解释为限制本发明的范围。
本文使用的缩写如下：
DIPEA：N,N-二异丙基乙胺
NBS N-溴代琥珀酰亚胺
TEA三乙胺
THF四氢呋喃
DMAP 4-二甲氨基吡啶
HATU O-(7-氮杂-1H-苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓六氟磷酸盐
CDI N,N'-羰基二咪唑
DMF：二甲基甲酰胺
DMSO-d6：氘代二甲基亚砜
EtOAc：乙酸乙酯
h：小时
IC50：半数最大抑制浓度
HPLC：高效液相色谱
LC/MS：液相色谱/质谱
MeOH：甲醇
甲醇-d4：氘代甲醇
M：摩尔浓度
MHz：兆赫
min：分钟
MS(ESI)：质谱(电子喷雾电离)
NMR：核磁共振
obsd.观测到的
rt：室温
prep-HPLC：制备型高效液相色谱
TFA：三氟乙酸
δ：化学位移
一般实验条件
使用以下仪器之一通过快速色谱法纯化中间体和最终化合物：i)Biotage SP1系统和Quad 12/25Cartridge模块。ii)ISCO组合快速色谱仪。硅胶品牌和孔径：i)KP-SIL
Figure BDA0002554226330000211
粒度：40-60μm；ii)CAS登记号：硅胶：63231-67-4，粒度：47-60微米硅胶；iii)青岛海洋化学有限公司(Qingdao Haiyang Chemical Co.,Ltd)的ZCX，孔径：200-300或300-400。
使用X BridgeTM Perp C18(5μm,OBDTM 30×100mm)柱或SunFireTM Perp C18(5μm,OBDTM 30×100mm)柱在反相柱上通过制备型HPLC纯化中间体和最终化合物。
使用Acquity Ultra Performance LC-3100质量检测器或Acquity UltraPerformance LC-SQ检测器获得LC/MS谱。标准LC/MS条件如下(运行时间3分钟)：
酸性条件：A：0.1％甲酸的H2O溶液；B：0.1％甲酸的乙腈溶液；
碱性条件：A：0.05％NH3·H2O的H2O溶液；B：乙腈；
中性条件：A：H2O；B：乙腈。
质谱(MS)：通常只报告表示母体质量的离子，除非另有说明，否则所引用的质量离子为正质量离子(M+H)+。
微波辅助反应在Biotage Initiator Sixty或CEM Discover中进行。
使用Bruker Avance 400MHz获得NMR波谱。
所有涉及对空气敏感的试剂的反应均在氩气气氛下进行。除非另有说明，否则试剂按购自商业供应商原样使用，未经进一步纯化。
制备实施例
通过参考以下实施例将更充分地理解本发明。但是，它们不应被解释为限制本发明的范围。
中间体I-1
6-叔丁基-9-羟基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯
Figure BDA0002554226330000221
根据US20150210682的实施例141制备中间体I-1。
中间体I-2
(4R)-6-(溴甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯
Figure BDA0002554226330000231
根据下面的流程制备标题化合物:
Figure BDA0002554226330000232
(4R)-6-(溴甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(中间体I-2)的制备
向搅拌的(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-6-甲基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(0.37g,1.0mmol,根据WO2016016196制备)的CCl4(5mL)溶液中分次加入NBS(0.20g,1.1mmol)。将反应混合物在室温搅拌1小时后，在减压下除去溶剂并将残留物通过柱色谱法纯化，得到中间体I-2，为黄色固体。MS oms.(ESI+)[(M+H)+]:444.
中间体I-3
3-氧代-1,2,5,6,8,8a-六氢咪唑并[1,5-a]吡嗪-7-甲酸叔丁酯
Figure BDA0002554226330000233
根据下面的流程制备标题化合物:
Figure BDA0002554226330000241
步骤1:4-氨基甲酰基哌嗪-1,3-二甲酸O1-叔丁酯O3-甲酯(化合物I-3b)的制备
向哌嗪-1,3-二甲酸1-叔丁酯3-甲酯(化合物I-3a,1.22g,5mmol)的无水CH2Cl2(15mL)溶液中加入三甲基硅基异氰酸酯(634mg,5.5mmol)。将得到的混合物在室温搅拌64h。将反应混合物在减压下直接浓缩，得到粗的4-氨基甲酰基哌嗪-1,3-二甲酸O1-叔丁酯O3-甲酯(1.51g)，为浅黄色泡沫状物，其没有进一步纯化直接用于下面的步骤。MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:288.
步骤2:1,3-二氧代-5,6,8,8a-四氢咪唑并[1,5-a]吡嗪-7-甲酸叔丁酯(化合物I-3c)的制备
向4-氨基甲酰基哌嗪-1,3-二甲酸O1-叔丁酯O3-甲酯(化合物I-3b,1.51g,4.99mmol)的THF(20mL)溶液中加入叔丁醇钠(144mg,1.5mmol)。将得到的混合物在室温搅拌40h。将反应混合物用水稀释并且用1M HCl酸化至pH＝4～5，然后用EtOAc和CH2Cl2萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，并在减压下浓缩，得到1,3-二氧代-5,6,8,8a-四氢咪唑并[1,5-a]吡嗪-7-甲酸叔丁酯(1.23g)，为灰白色固体，其没有进一步纯化直接用于下面的步骤。MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:256.
步骤3:3-氧代-1,2,5,6,8,8a-六氢咪唑并[1,5-a]吡嗪-7-甲酸叔丁酯的制备
将3-氧代-1,2,5,6,8,8a-六氢咪唑并[1,5-a]吡嗪-7-甲酸叔丁酯(1.23g,4.82mmol)和硼烷四氢呋喃复合物溶液(24.1mL,24.1mmol)的混合物在室温搅拌过夜。将反应用甲醇小心淬灭，然后加入NaOH水溶液，并在室温搅拌1h，然后用EtOAc萃取三次，将合并的有机层用盐水洗涤，干燥，浓缩，得到一些粗产物。将粗产物通过从EtOAc和己烷中沉淀来纯化，得到3-氧代-1,2,5,6,8,8a-六氢咪唑并[1,5-a]吡嗪-7-甲酸叔丁酯(中间体I-2,512mg)，为白色固体,其没有进一步纯化直接用于下一步骤.MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:242.
中间体I-4
4-(3-叔丁氧基羰基-6-氯-己基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0002554226330000251
根据下面的流程制备标题化合物:
Figure BDA0002554226330000252
步骤1:4-(4-叔丁氧基-4-氧代-丁基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物I-4c)的制备
向哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物I-4a,931mg,5mmol)和TEA(607mg,6mmol)的THF(5mL)溶液中加入4-溴丁酸叔丁酯(化合物I-4b,1.34g,6mmol)和碘化钠(75mg,0.5mmol)。将反应混合物在50℃加热24h。冷却至室温后，将反应混合物过滤，并在减压下浓缩滤液，得到粗的4-(4-叔丁氧基-4-氧代-丁基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物I-4c,1.86g)，其没有进一步纯化直接用于下面的步骤。MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:329.
步骤2:4-(3-叔丁氧基羰基-6-氯-己基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备
在-78℃向4-(4-叔丁氧基-4-氧代-丁基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(99mg,0.3mmol)的THF(1mL)溶液中滴加加入LDA(0.3mL,0.6mmol)并在0℃搅拌1h。将混合物冷却至-78℃，然后在-78℃滴加加入1-氯-3-碘丙烷(123mg,0.6mmol)的THF(0.5mL)溶液。将得到的混合物在-78℃搅拌2h，然后用sat.NH4Cl水溶液淬灭并用CH2Cl2萃取。将有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到粗的4-(3-叔丁氧基羰基-6-氯-己基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间体I-4,129mg)，为黄色油状物。MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:405.
中间体I-5
4-(6-氯己氧基)-3-氧代-丁酸乙酯
Figure BDA0002554226330000261
根据下面的流程制备标题化合物:
Figure BDA0002554226330000262
4-(6-氯己氧基)-3-氧代-丁酸乙酯(中间体I-5)的制备
将6-氯己-1-醇(273mg,2mmol)滴加加入用冰浴冷却的NaH(160mg,4mmol)的THF(2mL)混悬液中。然后移除冰浴并将混合物搅拌1h。然后，加入4-氯-3-氧代丁酸乙酯(165mg,1mmol)，并将得到的混合物在室温搅拌16h。将反应用水淬灭，然后将混合物在减压下浓缩。将残留物用水稀释。将得到的混合物用1M HCl酸化并用EtOAc萃取。将有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到4-(6-氯己氧基)-3-氧代-丁酸乙酯(中间体I-5,452mg)，为黄色油状物。MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:265.
中间体I-6
(3S)-3-甲酰基吗啉-4-甲酸叔丁酯
Figure BDA0002554226330000271
根据下面的流程制备标题化合物:
Figure BDA0002554226330000272
步骤1:(3R)-3-(羟基甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯的制备
在0℃向(S)-4-(叔丁氧基羰基)吗啉-3-甲酸(3g,13mmol)的THF(50mL)溶液中滴加加入硼烷-四氢呋喃复合物(64.9mL,64.9mmol)。将混合物升温至室温并搅拌16小时。将反应混合物用2M HCl溶液萃取，然后在室温搅拌1小时。将混合物用水稀释并且在DCM中萃取。将有机层用无水Na2SO4干燥并浓缩，得到化合物I-6a(2.82g)。
步骤2:(3S)-3-甲酰基吗啉-4-甲酸叔丁酯(中间体I-6)的制备
在0℃向粗的(R)-3-(羟基甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯(化合物I-6a,500mg)的DCM(20mL)溶液中分次加入戴斯-马丁氧化剂(Dess-Martin periodinane)(1.46g,3.45mmol)。将混合物升温至室温并搅拌16小时。将反应用NaHCO3和Na2S2O4饱和水溶液萃取。将混合物用DCM萃取。将有机层用无水Na2SO4干燥。将有机层浓缩，得到(3S)-3-甲酰基吗啉-4-甲酸叔丁酯(中间体I-6,495mg).
中间体I-7
6-[2,3-二氟-5-(5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基)苯氧基]己醛
Figure BDA0002554226330000281
根据下面的流程制备标题化合物:
Figure BDA0002554226330000282
步骤1:6-[2,3-二氟-5-(5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基)苯氧基]己-1-醇的制备
向2,3-二氟-5-(5-甲基-2-(嘧啶-2-基)-7,8-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-6(5H)-基)苯酚(化合物20a,700mg,1.97mmol)的DMF(10mL)溶液中加入6-氯己-1-醇(350mg,2.56mmol)和碳酸钾(545mg,3.94mmol)。将混合物在100℃搅拌3小时，然后冷却至室温并在DCM和盐水间分配。将有机层用无水Na2SO4干燥并浓缩。将残留物通过柱色谱法纯化，得到6-[2,3-二氟-5-(5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基)苯氧基]己-1-醇(化合物I-7a,678mg).
步骤2:6-[2,3-二氟-5-(5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基)苯氧基]己醛的制备
向6-(2,3-二氟-5-(2-(嘧啶-2-基)-7,8-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-6(5H)-基)苯氧基)己-1-醇(化合物I-7a,200mg,453μmol)的DCM(5mL)溶液中加入戴斯-马丁氧化剂(288mg,680μmol)。将混合物在室温搅拌15小时，然后过滤。将滤液用饱和NaHCO3溶液和Na2S2O3溶液洗涤，用无水Na2SO4干燥并浓缩，得到粗的6-[2,3-二氟-5-(5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基)苯氧基]己醛(中间体I-7,172mg).
中间体I-8
(2R)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-4-氧代-丁酸
Figure BDA0002554226330000291
根据下面的流程制备标题化合物:
Figure BDA0002554226330000292
步骤1:(2R)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-4-羟基-丁酸(化合物I-8a)的制备
向(R)-2-氨基-4-羟基丁酸(500mg,4.2mmol)的二氧六环(5mL)和水(10mL)溶液中加入碳酸氢钠(705mg,8.39mmol)。将混合物冷却至-10℃，然后滴加加入Boc2O(1.01g,4.62mmol)的二氧六环(5mL)溶液。将混合物升温至室温并在室温搅拌16小时，然后用1MHCl酸化并在中EtOAc萃取。将有机层用无水Na2SO4干燥并在减压下浓缩，得到(2R)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-4-羟基-丁酸(化合物I-8a,0.9g).
步骤2:(2R)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-4-氧代-丁酸(中间体I-8)的制备
在0℃向(2R)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-4-羟基-丁酸(化合物I-8a,500mg,2.28mmol)的DCM(10mL)溶液中分次加入戴斯-马丁氧化剂(1.45g)。将混合物升温至室温并搅拌15小时。将混合物过滤并将滤液在减压下浓缩，得到粗的中间体I-8(0.9g)，其没有进一步纯化直接使用。
实施例1
6-叔丁基-9-[6-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
Figure BDA0002554226330000301
根据下面的流程制备标题化合物:
Figure BDA0002554226330000302
Figure BDA0002554226330000311
步骤1:6-叔丁基-9-(6-氯己氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(化合物1b)的制备
向6-叔丁基-9-羟基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(中间体I-1,223mg,0.6mmol,根据US20150210682制备)的DMF(4mL)溶液中加入碳酸钾(166mg,1.2mmol)，将混合物在室温搅拌1h。然后加入1-溴-6-氯己烷(359mg,1.8mmol)并在60℃搅拌5h。冷却至室温后，将混合物用EtOAc和水稀释，然后用EtOAc萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，并浓缩。将残留物用石油醚洗涤，得到6-叔丁基-9-(6-氯己氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(化合物1b,299mg)，为黑色固体，其没有进一步纯化直接用于下一步骤.MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:490.
步骤2:9-[6-(4-叔丁氧基羰基哌嗪-1-基)己氧基]-6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(化合物1c)的制备
向粗的6-叔丁基-9-(6-氯己氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(299mg,0.61mmol)和哌嗪-1-甲酸叔丁酯(114mg,0.61mmol)的DMF(4mL)溶液中加入碘化钠(91.5mg,0.61mmol)，随后加入碳酸钾(169mg,1.22mmol)。将反应混合物在80℃加热16h。冷却至室温后，将混合物用EtOAc和水稀释。将水层用EtOAc萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，并浓缩，得到粗的9-[6-(4-叔丁氧基羰基哌嗪-1-基)己氧基]-6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(化合物1c,428mg)，为黑色油状物，其没有进一步纯化直接用于下一步骤.MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:640.
步骤3:6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-9-(6-哌嗪-1-基己氧基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯盐酸盐(化合物1d)的制备
将粗的9-[6-(4-叔丁氧基羰基哌嗪-1-基)己氧基]-6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(428mg,0.6mmol)和1M氯化氢的EtOAc溶液(8mL,8mmol)的溶液在室温搅拌1h。在减压下除去过量溶剂后，获得粗的6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-9-(6-哌嗪-1-基己氧基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯盐酸盐(化合物1d,435mg)，为棕色固体，其没有进一步纯化直接用于下面的步骤。MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:540.
步骤4:6-叔丁基-9-[6-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(化合物1e)的制备
向(4R)-6-(溴甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(269mg,0.6mmol)和粗的6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-9-(6-哌嗪-1-基己氧基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯盐酸盐(435mg,0.6mmol)的CH2Cl2(8mL)混合物中加入DIPEA(234mg,1.80mmol)。将反应混合物在室温搅拌4h。将混合物用水和CH2Cl2稀释。将水层用CH2Cl2萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，并浓缩，得到粗的6-叔丁基-9-[6-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(化合物1e,508mg)，为棕色油状物，其没有进一步纯化直接用于下面的步骤。MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:903.
步骤5:6-叔丁基-9-[6-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸的制备
Figure BDA0002554226330000321
将粗的6-叔丁基-9-[6-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(508mg,0.56mmol)和氢氧化锂水合物(189mg,4.5mmol)的THF(8mL)和H2O(2mL)混合物在室温搅拌3h。将反应混合物用水稀释并且用乙酸酸化至pH～3，然后用CH2Cl2萃取三次。将合并的有机层用水洗涤，用无水Na2SO4干燥，并浓缩。将残留物通过快速色谱法纯化，得到6-叔丁基-9-[6-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(实施例1,70mg)，为黄色固体。MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:875.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝9.69(s,1H),8.72(s,1H),8.01(d,1H),7.94(d,1H),7.49-7.34(m,4H),7.17(dt,1H),7.06(s,1H),6.04(s,1H),4.56(d,1H),4.11-3.99(m,2H),3.96-3.81(m,5H),3.52(s,3H),3.42-3.21(m,2H),2.53-2.49(m,6H),1.82-1.70(m,2H),1.51-1.22(m,8H),0.73(s,9H)
实施例2
6-叔丁基-9-[5-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]戊氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
Figure BDA0002554226330000331
类似于实施例1的制备通过使用1,5-二溴戊烷代替1-溴-6-氯己烷(步骤1,实施例1)制备标题化合物。获得实施例2(59mg)，为黄色固体。MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:861.1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝9.69(s,1H),8.71(s,1H),8.19(s,1H),8.01(d,1H),7.94(d,1H),7.48-7.34(m,4H),7.17(dt,1H),7.06(s,1H),6.03(s,1H),4.56(d,1H),4.14-3.98(m,2H),3.95-3.80(m,5H),3.52(s,3H),3.42-3.20(m,2H),2.60-2.39(m,6H),2.33(t,2H),1.84-1.71(m,2H),1.57-1.39(m,4H),1.31-1.20(m,2H),0.72(s,9H)
实施例3
6-叔丁基-9-[4-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]丁氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
Figure BDA0002554226330000341
类似于实施例1的制备通过使用1,4-二溴丁烷代替1-溴-6-氯己烷(步骤1,实施例1)制备标题化合物。获得实施例3(57mg)，为黄色固体。MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:847.1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝9.69(br s,1H),8.71(s,1H),8.18(s,1H),8.01(d,1H),7.94(d,1H),7.50-7.33(m,4H),7.17(dt,1H),7.05(s,1H),6.03(s,1H),4.56(d,1H),4.15-4.00(m,2H),3.95-3.78(m,5H),3.51(s,3H),3.43-3.19(m,2H),2.60-2.39(m,6H),2.40(t,2H),1.83-1.73(m,2H),1.65-1.54(m,2H),1.31-1.21(m,2H),0.73(s,9H).
实施例4
6-叔丁基-9-[3-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]丙氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
Figure BDA0002554226330000342
类似于实施例1的制备通过使用1-溴-3-氯丙烷代替1-溴-6-氯己烷(步骤1,实施例1)制备标题化合物。获得实施例4(30mg)，为黄色固体。MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:833.1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝9.70(br s,1H),8.71(s,1H),8.29-7.90(m,3H),7.51-7.35(m,4H),7.23-7.05(m,2H),6.03(s,1H),4.56(d,1H),4.15-4.05(m,2H),3.97-3.81(m,5H),3.51(s,3H),3.31-3.22(m,2H),2.65-2.30(m,8H),1.99-1.89(m,2H),1.33-1.19(m,2H),0.73(s,9H)
实施例5
6-叔丁基-9-[3-[2-羧基-4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]丙氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
Figure BDA0002554226330000351
类似于实施例1的制备通过使用1-溴-3-氯丙烷代替1-溴-6-氯己烷(步骤1,实施例1)以及哌嗪-1,3-二甲酸1-叔丁酯3-甲酯代替哌嗪-1-甲酸叔丁酯(步骤2,实施例1)制备标题化合物。获得实施例5(30mg)，为黄色固体。MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:877.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝8.73(s,1H),8.10-8.00(m,2H),7.53-7.40(m,4H),7.23-7.15(m,1H),7.05(s,1H),6.02(s,1H),4.57(d,1H),4.18-4.08(m,4H),3.86(s,3H),3.55(s,3H),3.45-3.18(m,4H),2.19-1.94(m,3H),1.24(br s,3H),0.73(s,9H).
实施例6
6-叔丁基-9-[6-[3-羧基-4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
Figure BDA0002554226330000352
类似于实施例1的制备通过使用哌嗪-1,2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯代替哌嗪-1-甲酸叔丁酯(步骤2,实施例1)制备标题化合物。获得实施例6(22mg)，为黄色固体。MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:919.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝9.69(s,1H),8.72(s,1H),8.05-7.90(m,2H),7.54-7.31(m,4H),7.24-7.02(m,3H),6.04(s,1H),4.57(d,1H),4.21-4.01(m,2H),3.87(s,3H),3.52(s,3H),3.30-3.05(m,7H),1.78-1.65(m,3H),1.53-1.33(m,4H),1.30-1.21(m,2H),0.73(s,9H).
实施例7
6-叔丁基-9-[6-[2-羧基-4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
Figure BDA0002554226330000361
类似于实施例1的制备通过使用哌嗪-1,3-二甲酸1-叔丁酯3-甲酯代替哌嗪-1-甲酸叔丁酯(步骤2,实施例1)制备标题化合物。获得实施例7(130mg)，为黄色固体。MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:919.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝8.73(s,1H),8.07-7.98(m,2H),7.50-7.39(m,4H),7.23-7.14(m,1H),7.06(s,1H),6.03(s,1H),4.57(d,1H),4.25-3.99(m,4H),3.86(s,3H),3.54(s,3H),3.42-3.21(m,5H),1.83-1.59(m,4H),1.50-1.33(m,4H),0.73(s,9H).
实施例8
6-叔丁基-9-[6-[7-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]-3-氧代-5,6,8,8a-四氢-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
Figure BDA0002554226330000371
类似于实施例1的制备通过使用中间体I-2代替哌嗪-1-甲酸叔丁酯(步骤2,实施例1)制备标题化合物。获得实施例8(130mg)，为黄色固体。MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:930.1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝8.72(s,1H),8.15-8.02(m,2H),7.54-7.41(m,4H),7.29-7.17(m,1H),7.06(s,1H),6.02(d,1H),4.62-4.39(m,3H),4.15-3.95(m,2H),3.86(s,3H),3.57(s,3H),3.50-3.05(m,4H),1.76(br s,2H),1.55-1.20(m,8H),0.73(s,9H).
实施例9
6-叔丁基-9-[6-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基-甲基-氨基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
Figure BDA0002554226330000372
根据下面的流程制备标题化合物:
Figure BDA0002554226330000373
Figure BDA0002554226330000381
步骤1:9-[6-[叔丁氧基羰基(甲基)氨基]己氧基]-6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸甲酯(化合物9b)的制备
在0℃向9-[6-(叔丁氧基羰基氨基)己氧基]-6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(化合物9a,71mg,0.1mmol,根据US20150210682制备)的DMF(1mL)溶液中加入NaH(12mg,0.3mmol)。将混合物在0℃搅拌30min，然后加入碘甲烷(141mg,0.9mmol)。将混合物升温至rt并搅拌过夜。将混合物用EtOAc和水稀释，然后将水层用EtOAc萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥并浓缩，得到粗的9-[6-[叔丁氧基羰基(甲基)氨基]己氧基]-6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸甲酯(79mg)，为黄色油状物，其没有进一步纯化直接用于下面的步骤。MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:571.
步骤2:6-叔丁基-10-甲氧基-9-[6-(甲基氨基)己氧基]-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸甲酯盐酸盐(化合物9c)的制备
将粗的9-[6-[叔丁氧基羰基(甲基)氨基]己氧基]-6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸甲酯(化合物9b,79mg,0.097mmol)和1M氯化氢的EtOAc溶液(5mL,5mmol)的混合物在室温搅拌2h。在减压下除去过量溶剂后,获得粗的6-叔丁基-10-甲氧基-9-[6-(甲基氨基)己氧基]-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸甲酯盐酸盐(66mg)，为黄色油状物，其没有进一步纯化直接用于下面的步骤。MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:471.
步骤3:6-叔丁基-9-[6-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基-甲基-氨基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸甲酯(化合物9d)的制备
向粗的(4R)-6-(溴甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(中间体I-2,43mg,0.098mmol)和6-叔丁基-10-甲氧基-9-[6-(甲基氨基)己氧基]-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸甲酯盐酸盐(化合物9c,66mg,0.098mmol)的CH2Cl2(3mL)混合物中加入DIEA(75.7mg,0.59mmol)。将得到的混合物在室温搅拌过夜，然后用水稀释并用CH2Cl2萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥并在减压下浓缩，得到粗的6-叔丁基-9-[6-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基-甲基-氨基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸甲酯(91mg)，为黄色油状物，其没有进一步纯化直接用于下面的步骤。MSobsd.(ESI+)[(M+H)+]:834.
步骤4:6-叔丁基-9-[6-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基-甲基-氨基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(实施例9)的制备
向粗的6-叔丁基-9-[6-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基-甲基-氨基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸甲酯(化合物9d,91mg,0.09mmol)的THF(2mL)和H2O(0.5mL)溶液中加入氢氧化锂水合物(31mg,0.74mmol)。将得到的混合物在室温搅拌3h。将反应混合物用水稀释并且用HOAc酸化至pH～3。将得到的混合物用CH2Cl2萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩。将残留物通过制备HPLC纯化，得到6-叔丁基-9-[6-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基-甲基-氨基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(实施例9,18mg)，为黄色固体。MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:820.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝9.69(s,1H),8.71(s,1H),8.03-7.86(m,2H),7.49-7.31(m,4H),7.16(dt,1H),6.99(s,1H),6.03(s,1H),4.55(d,1H),4.06-3.77(m,7H),3.51(s,3H),3.25-3.15(m,1H),2.48-2.44(m,1H),2.32(s,3H),1.76-1.18(m,10H),0.71(s,9H).
实施例10
6-叔丁基-9-[2-[2-[2-[[(3S)-4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]吗啉-3-羰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
Figure BDA0002554226330000401
根据下面的流程制备标题化合物:
Figure BDA0002554226330000402
Figure BDA0002554226330000411
步骤1:6-叔丁基-9-[2-[2-(2-羟基乙氧基)乙氧基]乙氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(化合物10a)的制备
将6-叔丁基-9-羟基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(中间体I-1,743mg,2mmol)、2-(2-(2-氯乙氧基)乙氧基)乙醇(405mg,2.4mmol)、碳酸钾(553mg,4mmol)和碘化钠(300mg,2mmol)的DMF(10mL)混合物加热至110℃反应24h。冷却至室温后，将反应混合物在CH2Cl2和水间分配。将分离的水层用CH2Cl2萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到粗的6-叔丁基-9-[2-[2-(2-羟基乙氧基)乙氧基]乙氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(化合物10a,0.99g)，为棕色油状物，其没有进一步纯化直接用于下面的步骤。MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:503.
步骤2:6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-9-[2-[2-[2-(p-甲苯基磺酰基氧基)乙氧基]乙氧基]乙氧基]-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(化合物10b)的制备
在氩气气氛下在0℃向粗的6-叔丁基-9-[2-[2-(2-羟基乙氧基)乙氧基]乙氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(0.91g,1.81mmol)、三乙基胺(549mg,5.42mmol)和DMAP(22.1mg,0.181mmol)的CH2Cl2(8mL)混合物中滴加加入4-甲基苯-1-磺酰氯(517mg,2.71mmol)的CH2Cl2(5mL)溶液。将混合物升温至rt并在rt搅拌过夜。将反应混合物在CH2Cl2和水间分配，并将分离的水层用CH2Cl2萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩。将残留物通过快速色谱法纯化，得到粗的6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-9-[2-[2-[2-(p-甲苯基磺酰基氧基)乙氧基]乙氧基]乙氧基]-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(化合物10b,620mg)，为棕色油状物，其没有进一步纯化直接用于下一步骤。MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:658.
步骤3:6-叔丁基-9-[2-[2-(2-碘乙氧基)乙氧基]乙氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(化合物10c)的制备
将6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-9-[2-[2-[2-(p-甲苯基磺酰基氧基)乙氧基]乙氧基]乙氧基]-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(554mg,0.84mmol)和碘化钠(1.26g,8.4mmol)的丙酮(10mL)混合物回流20h。冷却至室温后，将反应混合物在EtOAc和水间分配，然后用EtOAc萃取三次。将合并的有机层用饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤，干燥并浓缩，得到粗的6-叔丁基-9-[2-[2-(2-碘乙氧基)乙氧基]乙氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(化合物10c,512mg)，为棕色油状物，其没有进一步纯化直接用于下面的步骤。MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:614.
步骤4:6-叔丁基-9-[2-[2-[2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)乙氧基]乙氧基]乙氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(化合物10d)的制备
将粗的6-叔丁基-9-[2-[2-(2-碘乙氧基)乙氧基]乙氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(123mg,0.2mmol)和邻苯二甲酰亚胺钾(45mg,0.24mmol)的DMF(1mL)混合物在90℃加热16h。冷却至室温后，将反应混合物在EtOAc和水间分配，然后用EtOAc萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到粗的6-叔丁基-9-[2-[2-[2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)乙氧基]乙氧基]乙氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(化合物10d,135mg)，为棕色油状物，其没有进一步纯化直接用于下面的步骤。MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:633.
步骤5:9-[2-[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]乙氧基]-6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(化合物10e)的制备
向粗的6-叔丁基-9-[2-[2-[2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)乙氧基]乙氧基]乙氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(135mg,0.19mmol)的EtOH(1mL)溶液中加入10M NaOH水溶液(0.58mL,5.8mmol)。将得到的混合物在110℃加热72h。冷却至室温后，将反应混合物用HOAc酸化，然后在CH2Cl2和水间分配。将分离的水层用CH2Cl2萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到粗的9-[2-[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]乙氧基]-6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(化合物10e,62mg)，为棕色油状物,，其没有进一步纯化直接用于下面的步骤。MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:475.
步骤6:9-[2-[2-[2-[[(3S)-4-叔丁氧基羰基吗啉-3-羰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]-6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(化合物10f)的制备
将粗的(3S)-4-叔丁氧基羰基吗啉-3-甲酸(23mg,0.1mmol)、HATU(38mg,0.1mmol)和DIPEA(64mg,0.5mmol)的CH2Cl2(1mL)混合物在室温搅拌1h。然后加入粗的9-[2-[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]乙氧基]-6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(47mg,0.1mmol)的CH2Cl2(1mL)溶液并在室温搅拌5h。将得到的混合物在CH2Cl2和水间分配。将分离的水层用CH2Cl2萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到粗的9-[2-[2-[2-[[(3S)-4-叔丁氧基羰基吗啉-3-羰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]-6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(化合物10f,59mg)，为棕色油状物，其没有进一步纯化直接用于下面的步骤。MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:688.
步骤7:6-叔丁基-9-[2-[2-[2-[[(3S)-4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]吗啉-3-羰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(实施例10)的制备
将粗的9-[2-[2-[2-[[(3S)-4-叔丁氧基羰基吗啉-3-羰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]-6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(59mg,85.8μmol)和TFA(0.3mL)的CH2Cl2(3mL)混合物在室温搅拌2h。在减压下除去过量溶剂后将残留物溶解在DMF(2mL)中。向得到的溶液中加入碘化钠(12mg,0.81mmol)、DIPEA(105mg,8.1mmol)和(4R)-6-(溴甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(中间体I-2,36mg,0.81mmol)。将得到的混合物在55℃搅拌2h。冷却至室温后，将反应混合物在CH2Cl2和水间分配，将分离的水层用CH2Cl2萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥，浓缩，得到一些粗产物，将粗产物通过制备HPLC纯化，得到6-叔丁基-9-[2-[2-[2-[[(3S)-4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]吗啉-3-羰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(实施例10,13mg)，为黄色固体。MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:951.1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝8.40(br s,1H),7.87(br s,2H),7.54(br s,1H),7.34-7.24(m,1H),7.07(d,3H),6.90(s,1H),6.70(s,1H),6.12(br s,1H),4.38(d,1H),4.26-4.06(m,3H),4.02-3.89(m,2H),3.84(s,3H),3.80-3.70(m,2H),3.69-3.59(m,2H),3.51(s,3H),3.50-3.41(m,3H),3.39-2.91(m,4H),0.74(br s,9H)
实施例11
6-叔丁基-9-[2-[2-[2-[2-羧基-4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
Figure BDA0002554226330000441
根据下面的流程制备标题化合物:
Figure BDA0002554226330000451
步骤1:4-[2-[2-[2-[(6-叔丁基-3-乙氧基羰基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-9-基)氧基]乙氧基]乙氧基]乙基]哌嗪-1,3-二甲酸O1-叔丁酯O3-甲酯(化合物11a)的制备
将粗的6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-9-[2-[2-[2-(p-甲苯基磺酰基氧基)乙氧基]乙氧基]乙氧基]-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(化合物10b,65.8mg,0.1mmol)、哌嗪-1,3-二甲酸1-叔丁酯3-甲酯(29mg,0.12mmol)、碳酸钾(28mg,0.2mmol)和碘化钠(15mg,0.1mmol)的乙腈(1mL)混合物在90℃加热20h。冷却至室温后，将反应混合物在CH2Cl2和水间分配，然后用CH2Cl2萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到粗的4-[2-[2-[2-[(6-叔丁基-3-乙氧基羰基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-9-基)氧基]乙氧基]乙氧基]乙基]哌嗪-1,3-二甲酸O1-叔丁酯O3-甲酯(化合物11a,85mg)，为棕色油状物，其没有进一步纯化直接用于下一步骤.MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:730.
步骤2:6-叔丁基-9-[2-[2-[2-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]-2-甲氧基羰基-哌嗪-1-基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(化合物11b)的制备
向粗的4-[2-[2-[2-[(6-叔丁基-3-乙氧基羰基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-9-基)氧基]乙氧基]乙氧基]乙基]哌嗪-1,3-二甲酸O1-叔丁酯O3-甲酯(85mg,0.093mmol)的CH2Cl2(3mL)溶液中加入TFA(0.5mL)。将得到的混合物在室温搅拌3h，然后在减压下浓缩。将残留物溶解在CH2Cl2(3mL)中。向溶液中加入DIPEA(109mg,0.085mmol)和(4R)-6-(溴甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(中间体I-2,38mg,0.085mmol)。将得到的混合物在室温搅拌16h，然后在CH2Cl2和水之间分配。将分离的水层用CH2Cl2萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到粗的6-叔丁基-9-[2-[2-[2-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]-2-甲氧基羰基-哌嗪-1-基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(化合物11b,97mg)，为黄色油状物，其没有进一步纯化直接用于下面的步骤。MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:993.
步骤3:6-叔丁基-9-[2-[2-[2-[2-羧基-4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(实施例11)的制备
向粗的6-叔丁基-9-[2-[2-[2-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]-2-甲氧基羰基-哌嗪-1-基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(97mg,0.078mmol)的THF(3mL)和H2O(1mL)溶液中加入氢氧化锂水合物(66mg,1.56mmol)。将得到的混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物用HOAc酸化，然后在CH2Cl2和水之间分配。将分离的水层用CH2Cl2萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩。将残留物通过制备HPLC纯化，得到6-叔丁基-9-[2-[2-[2-[2-羧基-4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(实施例11,18mg)，为黄色粉末。MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:951.1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝8.40(s,1H),7.78(s,1H),7.50(s,1H),7.28-7.19(m,1H),7.10-6.98(m,3H),6.93-6.82(m,2H),6.70(s,1H),6.06(d,1H),4.39-4.08(m,4H),4.04-3.94(br s,1H),3.88-3.05(m,21H),0.71(s,9H)
实施例12
6-叔丁基-9-[4-羧基-6-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
Figure BDA0002554226330000471
根据下面的流程制备标题化合物:
Figure BDA0002554226330000481
步骤1:9-[4-叔丁氧基羰基-6-(4-叔丁氧基羰基哌嗪-1-基)己氧基]-6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(化合物12a)的制备
向6-叔丁基-9-羟基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(中间体I-1,106mg,0.29mmol)和4-(3-叔丁氧基羰基-6-氯-己基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间体I-4,129mg,0.29mmol)的DMF(2mL)混合物中加入碳酸钾(119mg,0.87mmol)和碘化钠(43mg,0.29mmol)。将混合物在60℃加热16h，然后在EtOAc和水之间分配。将分离的水层用EtOAc萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到粗的9-[4-叔丁氧基羰基-6-(4-叔丁氧基羰基哌嗪-1-基)己氧基]-6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(化合物12a,151mg)，为棕色油状物，其没有进一步纯化直接用于下面的步骤。MSobsd.(ESI+)[(M+H)+]:740.
步骤2:9-[4-叔丁氧基羰基-6-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]己氧基]-6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(化合物12b)的制备
将9-[4-叔丁氧基羰基-6-(4-叔丁氧基羰基哌嗪-1-基)己氧基]-6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(化合物12a,151mg,0.2mmol)和1M氯化氢的乙酸乙酯溶液(5mL,5mmol)的混合物在室温搅拌2h。在减压下除去过量溶剂后，将残留物溶解在DMF(2mL)中。向溶液中加入DIPEA(121mg,0.94mmol)和(4R)-6-(溴甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(中间体I-2,83mg,0.19mmol)。将混合物在室温搅拌20h。将另外的(4R)-6-(溴甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(83mg,0.19mmol)和碘化钠(28mg,0.19mmol)加入到反应混合物中。将得到的混合物在50℃加热5h，然后用CH2Cl2和水稀释。将水层用CH2Cl2萃取三次。将合并的有机层用水和盐水洗涤，干燥并浓缩，得到粗的9-[4-叔丁氧基羰基-6-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]己氧基]-6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(化合物12b,303mg)，为棕色油状物，其没有进一步纯化直接用于下面的步骤。MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:1003.
步骤3:6-叔丁基-9-[4-羧基-6-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(实施例12)的制备
将粗的9-[4-叔丁氧基羰基-6-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]己氧基]-6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(化合物12b,303mg,0.3mmol)和氢氧化锂水合物(127mg,3mmol)的THF(3mL)和H2O(1mL)混合物在室温搅拌1h。将反应混合物用HOAc酸化，用CH2Cl2和水分配，然后用CH2Cl2萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩。向残留物中加入TFA(3mL)，然后将得到的混合物在室温搅拌1h。在减压下除去过量溶剂后，将残留物通过制备HPLC纯化，得到6-叔丁基-9-[4-羧基-6-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(实施例12,15mg)，为黄色固体。MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:919.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝9.68(s,1H),8.71(s,1H),8.06-7.89(m,2H),7.50-7.32(m,4H),7.23-6.98(m,3H),6.80-6.70(m,1H),6.03(s,1H),4.56(d,1H),4.13-3.98(m,2H),3.95-3.80(m,6H),3.51(s,3H),3.42-3.18(m,2H),2.35(br d,J＝6.8Hz,2H),1.83-1.53(m,6H),0.72(s,9H)
实施例13
6-叔丁基-9-[6-[[(3S)-4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]吗啉-3-羰基]氨基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
Figure BDA0002554226330000501
根据下面的流程制备标题化合物:
Figure BDA0002554226330000511
步骤1:9-[6-[[(3S)-4-叔丁氧基羰基吗啉-3-羰基]氨基]己氧基]-6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(化合物13b)的制备
将(3S)-4-叔丁氧基羰基吗啉-3-甲酸(23mg,0.1mmol)、9-(6-氨基己氧基)-6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸盐酸盐(化合物13a,48mg,0.1mmol,根据US20150210682制备)、HATU(38mg,0.1mmol)和DIPEA(52mg,0.4mmol)的DMF(1mL)溶液在室温搅拌1h。将混合物用水稀释并且用CH2Cl2萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到粗的9-[6-[[(3S)-4-叔丁氧基羰基吗啉-3-羰基]氨基]己氧基]-6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸((化合物13b,62mg)，为黄色油状物，其没有进一步纯化直接用于下面的步骤。MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:656.
步骤2:6-叔丁基-9-[6-[[(3S)-4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]吗啉-3-羰基]氨基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(实施例13)的制备
将粗的9-[6-[[(3S)-4-叔丁氧基羰基吗啉-3-羰基]氨基]己氧基]-6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(62mg,0.95mmol)和1M氯化氢的EtOAc溶液(5mL,5mmol)的混合物在室温搅拌2h。在减压下除去过量溶剂后将残留物溶解在DMF(2mL)中。向溶液中加入(4R)-6-(溴甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(中间体I-2,57.8mg,0.13mmol)、DIPEA(84mg,0.65mmol)和碘化钠(29mg,0.19mmol)。将混合物在55℃加热2h，然后用水稀释并用CH2Cl2萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩。将残留物通过制备HPLC纯化，得到6-叔丁基-9-[6-[[(3S)-4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]吗啉-3-羰基]氨基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(实施例13,17mg)，为黄色固体。MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:919.1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δ＝8.69(s,1H),7.98(d,1H),7.74(d,1H),7.45-7.38(m,2H),7.29(s,1H),7.22(dd,1H),7.05(dt,1H),6.98(s,1H),6.11(s,1H),4.43(d,1H),4.16-4.03(m,3H),3.98-3.69(m,8H),3.58(s,3H),3.51-3.42(m,1H),3.30-3.18(m,3H),3.07-2.98(m,1H),2.64-2.55(m,1H),1.86-1.76(m,2H),1.59-1.45(m,4H),1.44-1.28(m,3H),0.84(s,9H)
实施例14
6-叔丁基-9-[6-[[4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲氧基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
Figure BDA0002554226330000521
根据下面的流程制备标题化合物:
Figure BDA0002554226330000531
步骤1:4-(2-氯-4-氟-苯基)-6-(6-氯己氧基甲基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸乙酯(化合物14a)的制备
将2-氯-4-氟苯甲醛(157mg,0.99mmol)、4-(6-氯己氧基)-3-氧代-丁酸乙酯(中间体I-5,452mg,0.99mmol)、噻唑-2-甲脒盐酸盐(162mg,0.99mmol)和乙酸钠(162mg,1.98mmol)的EtOH(5mL)混合物在80℃加热40h。冷却至室温后，将混合物用水稀释并且用EtOAc萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到4-(2-氯-4-氟-苯基)-6-(6-氯己氧基甲基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸乙酯(化合物14a,692mg)，为黄色油状物。MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:514.
步骤2:6-叔丁基-9-[6-[[4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲氧基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(化合物14b)的制备
将6-叔丁基-9-羟基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(中间体I-1,581mg,1.56mmol)和碳酸钾(432mg,3.13mmol)的DMF(3mL)混合物在80℃搅拌30min。然后将4-(2-氯-4-氟-苯基)-6-(6-氯己氧基甲基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸乙酯(化合物14a,551mg,0.78mmol)的DMF(3mL)加至反应混合物，随后加入碘化钠(234mg,1.56mmol)。将得到的混合物在80℃搅拌16h。冷却至室温后，将反应混合物用水稀释，用EtOAc萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到粗的6-叔丁基-9-[6-[[4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲氧基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(化合物14b,1.05g)，为棕色油状物，其没有进一步纯化直接用于下面的步骤。MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:849.
步骤3:6-叔丁基-9-[6-[[4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲氧基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(实施例14)的制备
将粗的6-叔丁基-9-[6-[[4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲氧基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(化合物14b,1.05g,1.24mmol)、氢氧化锂水合物(415mg,9.89mmol)的THF(6mL)和H2O(2mL)混合物在室温搅拌2h。将反应混合物用水稀释，用1M HCl酸化至pH～3并用CH2Cl2萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩。将残留物通过制备HPLC纯化，得到6-叔丁基-9-[6-[[4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲氧基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(实施例14,90mg)，为黄色固体。MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:821.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝9.11(s,1H),8.71(s,1H),8.01-7.89(m,2H),7.49-7.38(m,4H),7.18(dt,1H),7.01(d,1H),6.03(d,1H),4.88-4.72(m,2H),4.55(d,1H),4.11-3.91(m,4H),3.86(s,3H),3.68-3.55(m,2H),3.40-3.33(m,1H),3.26-3.15(m,1H),1.84-1.24(m,6H),1.04(t,J＝7.1Hz,3H),0.71(s,9H)
实施例15
9-[6-[[3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]-3-氧代-5,6,8,8a-四氢-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酰基]氨基]己氧基]-6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
Figure BDA0002554226330000551
根据下面的流程制备标题化合物:
Figure BDA0002554226330000552
在0℃向3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]-3-氧代-5,6,8,8a-四氢-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸(化合物15a,30mg,48.5μmol,根据US20160083383,实施例19中的方法制备)的DCM(2mL)溶液中加入CDI(9.43mg,58.1μmol)。将混合物搅拌1小时，然后加入三乙胺(14.7mg,20.3μL,145μmol)和9-((6-氨基己基)氧基)-6-(叔丁基)-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢-2H-吡啶并[2,1-a]异喹啉-3-甲酸盐酸盐(化合物13a,23.2mg,48.5μmol)。将反应混合物升温至室温并搅拌16小时。将反应混合物在减压下浓缩。将残留物通过制备HPLC纯化，得到9-[6-[[3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]-3-氧代-5,6,8,8a-四氢-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酰基]氨基]己氧基]-6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(实施例15,17mg).MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:1043.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝9.65(s,1H),8.72(s,1H),8.37(s,1H),8.03(d,1H),7.95(d,1H),7.66-7.58(m,1H),7.43-7.22(m,4H),7.02(s,1H),6.04(s,1H),4.61-4.50(m,1H),4.06-3.88(m,6H),3.83(s,3H),3.75-3.56(m,3H),3.26-3.09(m,5H),3.05-2.73(m,6H),2.18–2.09(m,1H),2.07-1.97(m,1H),1.77-1.68(m,2H),1.34-1.22(m,6H),1.10-0.96(m,9H),0.72(s,9H).
实施例16
9-[6-[[4-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]-3-氧代-5,6,8,8a-四氢-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-3,3-二甲基-丁酰基]氨基]己氧基]-6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
Figure BDA0002554226330000561
根据下面的流程制备标题化合物:
Figure BDA0002554226330000571
在0℃向4-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]-3-氧代-5,6,8,8a-四氢-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-3,3-二甲基-丁酸(化合物16a,30mg,48.5μmol,根据US20160083383,实施例55中的方法制备)的DCM(2mL)溶液中加入CDI(9.43mg,58.1μmol)。将混合物搅拌1小时，然后将三乙基胺(14.7mg,20.3μL,145μmol)和9-((6-氨基己基)氧基)-6-(叔丁基)-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢-2H-吡啶并[2,1-a]异喹啉-3-甲酸盐酸盐(化合物13a,23.2mg,48.5μmol)加至溶液中。将混合物升温至室温并搅拌16小时。将反应混合物在减压下浓缩。将残留物通过制备HPLC纯化，得到9-[6-[[4-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]-3-氧代-5,6,8,8a-四氢-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-3,3-二甲基-丁酰基]氨基]己氧基]-6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(实施例16,14mg).MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:1043.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝9.71(s,1H),8.72(s,1H),8.03(d,1H),7.96(d,2H),7.48-7.37(m,4H),7.23-7.13(m,1H),7.05(s,1H),6.04(s,1H),4.61-4.52(m,1H),4.08-3.98(m,3H),3.95-3.88(m,2H),3.86(s,3H),3.76-3.68(m,1H),3.69-3.62(m,1H),3.52(s,3H),3.53-3.50(m,1H),3.46-3.36(m,2H),3.28-3.22(m,1H),3.11-2.94(m,4H),2.90-2.78(m,3H),2.24-2.13(m,1H),2.13-2.05(m,1H),2.01-1.93(m,2H),1.79-1.70(m,2H),1.46-1.20(m,6H),0.91(d,6H),0.73(s,9H).
实施例17
(4R)-6-[[(8aS)-2-[4-[6-[2,3-二氟-5-[5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基]苯氧基]己基氨基]-2,2-二甲基-4-氧代-丁基]-3-氧代-5,6,8,8a-四氢-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-7-基]甲基]-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯
Figure BDA0002554226330000581
根据下面的流程制备标题化合物:
Figure BDA0002554226330000591
向4-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]-3-氧代-5,6,8,8a-四氢-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-3,3-二甲基-丁酸(化合物16a,60mg,96.9μmol)的DMF(3mL)溶液中加入三乙胺(19.6mg,27μL,194μmol)和HATU(55.3mg,145μmol)。将混合物在室温搅拌10分钟，然后加入6-(2,3-二氟-5-(5-甲基-2-(嘧啶-2-基)-7,8-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-6(5H)-基)苯氧基)己-1-胺(化合物17a,44mg,96.9μmol,根据WO2016177655,实施例59制备)。将混合物在室温搅拌14小时，然后通过制备HPLC纯化，得到(4R)-6-[[(8aS)-2-[4-[6-[2,3-二氟-5-[5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基]苯氧基]己基氨基]-2,2-二甲基-4-氧代-丁基]-3-氧代-5,6,8,8a-四氢-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-7-基]甲基]-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(实施例17,70mg).MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:1055.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝9.70(s,1H),8.99(d,2H),8.84(s,1H),8.02(d,1H),7.95-7.94(m,2H),7.63(t,1H),7.46-7.37(m,2H),7.21-7.11(m,1H),6.65-6.57(m,2H),6.03(s,1H),5.33-5.23(m,1H),4.09(t,2H),3.98-3.86(m,3H),3.73-3.67(m,1H),3.67-3.61(m,1H),3.51(s,3H),3.48-3.40(m,3H),3.3(s,2H),3.15-2.94(m,5H),2.89-2.78(m,4H),2.23-2.15(m,1H),2.12-2.04(m,1H),2.01-1.90(m,2H),1.78-1.69(m,2H),1.47-1.29(m,7H),0.90(d,6H).
实施例18
(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-6-[[(3S)-3-[6-[2,3-二氟-5-(5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基)苯氧基]己基氨基甲酰基]吗啉-4-基]甲基]-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯
Figure BDA0002554226330000601
根据下面的流程制备标题化合物:
Figure BDA0002554226330000602
类似于实施例13的制备通过使用化合物17a代替化合物13a制备标题化合物。获得实施例18(115mg)，为固体。MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:931.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝9.96(s,1H),8.99(d,2H),8.83(d,1H),8.17-8.09(m,1H),8.02(d,1H),7.91(d,1H),7.64(t,1H),7.44-7.34(m,2H),7.20-7.12(m,1H),6.65-6.57(m,2H),5.99(s,1H),5.33-5.25(m,1H),4.07(t,2H),4.03-3.68(m,5H),3.61-3.52(m,2H),3.48(s,3H),3.45-3.39(m,1H),3.27-3.24(m,1H),3.16-3.01(m,2H),3.01-2.92(m,2H),1.76-1.66(m,2H),1.45-1.24(m,11H).
实施例19
(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-6-[[(3R)-3-[[6-[2,3-二氟-5-(5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基)苯氧基]己基-甲基-氨基]甲基]吗啉-4-基]甲基]-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯
Figure BDA0002554226330000611
＝根据下面的流程制备标题化合物:
Figure BDA0002554226330000612
步骤1:(3R)-3-[[6-[2,3-二氟-5-(5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基)苯氧基]己基-甲基-氨基]甲基]吗啉-4-甲酸叔丁酯的制备
向6-(2,3-二氟-5-(5-甲基-2-(嘧啶-2-基)-7,8-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-6(5H)-基)苯氧基)己-1-胺(化合物17a,300mg,660μmol)的MeOH(5mL)溶液中加入甲醛(19.8mg,660μmol)。将混合物在室温搅拌5小时，然后加入氰基硼氢化钠(124mg,1.98mmol)。将混合物在室温搅拌12小时，然后加入粗的(S)-3-甲酰基吗啉-4-甲酸叔丁酯(中间体I-6,284mg)。将得到的混合物再搅拌12小时，然后用2M NaOH水溶液淬灭。将混合物用水稀释并且用DCM萃取。将有机层浓缩，得到化合物19a(470mg)，没有进一步纯化将其直接用于下一步骤。
步骤2:(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-6-[[(3R)-3-[[6-[2,3-二氟-5-(5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基)苯氧基]己基-甲基-氨基]甲基]吗啉-4-基]甲基]-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯的制备
向(3R)-3-[[6-[2,3-二氟-5-(5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基)苯氧基]己基-甲基-氨基]甲基]吗啉-4-甲酸叔丁酯(化合物19a,470mg)的MeOH(5mL)溶液中加入浓盐酸(3mL)。将混合物在室温搅拌5小时，然后用NaHCO3水溶液碱化。将得到的混合物用DCM萃取。将有机层用无水Na2SO4干燥并浓缩。将残留物溶解在DMF(3mL)中，随后加入DIPEA(45.5mg,61.5μL)、碘化钾(29.2mg,176μmol)和(R)-6-(溴甲基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(中间体I-2,150mg)。将混合物在50℃搅拌3小时，然后通过制备HPLC纯化，得到(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-6-[[(3R)-3-[[6-[2,3-二氟-5-(5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基)苯氧基]己基-甲基-氨基]甲基]吗啉-4-基]甲基]-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(实施例19,37mg).MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:931.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝8.99(d,2H),8.83(s,1H),8.07(s,1H),8.02(t,1H),7.97-7.92(m,1H),7.64(t,1H),7.45-7.36(m,2H),7.17-7.12(m,1H),6.67-6.57(m,2H),6.04(s,1H),5.35-5.26(m,1H),4.15-4.01(m,3H),3.95-3.60(m,5H),3.52(s,3H),3.49-3.40(m,2H),3.22-2.93(m,5H),2.92-2.77(m,2H),2.54(s,3H),1.83-1.60(m,4H),1.58-1.16(m,9H).
实施例20
(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-6-[[2,3-二氟-5-(5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基)苯氧基]甲基]-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯
Figure BDA0002554226330000631
根据下面的流程制备标题化合物:
Figure BDA0002554226330000632
向2,3-二氟-5-(5-甲基-2-(嘧啶-2-基)-7,8-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-6(5H)-基)苯酚(化合物20a,24mg,67.5μmol,根据WO2016177655,实施例44制备)的DMF溶液中加入碳酸钾(18.7mg,135μmol)。将混合物在80℃搅拌1小时。然后将混合物冷却至室温并加入(R)-6-(溴甲基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(30mg,67.5μmol)。将混合物在55℃搅拌2小时。将混合物冷却至室温并过滤。将滤液通过制备HPLC纯化，得到(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-6-[[2,3-二氟-5-(5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基)苯氧基]甲基]-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(实施例20,32mg).MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:719.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝9.81(s,1H),8.99(d,2H),8.72(s,1H),7.96-7.79(m,2H),7.64(t,1H),7.33(dd,2H),7.00(s,1H),6.80(s,1H),6.75-6.56(m,1H),6.00(s,1H),5.50-5.25(m,2H),5.23-5.12(m,1H),3.92-3.78(m,1H),3.53(s,3H),3.47-3.37(m,1H),3.13-2.96(m,2H),1.34(d,3H).
实施例21
(2R)-4-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]-2-[6-[2,3-二氟-5-(5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基)苯氧基]己基氨基]丁酸
Figure BDA0002554226330000641
根据下面的流程制备标题化合物:
Figure BDA0002554226330000642
步骤1:(4R)-6-[(4-叔丁氧基羰基哌嗪-1-基)甲基]-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(化合物21a)的制备
向(R)-6-(溴甲基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(中间体I-2,100mg,225μmol)的DMF(1mL)溶液中加入哌嗪-1-甲酸叔丁酯(41.9mg,225μmol)、DIPEA(78.5μl,450μmol)和碘化钾(74.7mg,450μmol)。将混合物在50℃搅拌3小时，然后冷却至室温并在减压下浓缩。将残留物通过柱色谱法纯化，得到化合物21a(97mg).
步骤2:(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-6-(哌嗪-1-基甲基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(化合物21b)的制备
向(4R)-6-[(4-叔丁氧基羰基哌嗪-1-基)甲基]-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(化合物21a,97mg,176μmol)的MeOH(5mL)溶液中加入浓盐酸盐(2mL)。将混合物在室温搅拌1小时，然后用饱和碳酸氢钠水溶液碱化。将混合物用DCM萃取。将有机层用无水Na2SO4干燥并浓缩，得到(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-6-(哌嗪-1-基甲基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(化合物21b,75mg)。
步骤3:(2R)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-4-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]丁酸(化合物21c)的制备
向(4R)-6-[(4-叔丁氧基羰基哌嗪-1-基)甲基]-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(化合物21b,80mg,178μmol)的MeOH(5mL)溶液中加入粗的(2R)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-4-氧代-丁酸(中间体I-8,129mg)。将混合物在室温搅拌2小时，然后加入氰基硼氢化钠(22.3mg,356μmol)。将得到的混合物在室温搅拌16小时，然后在K2CO3水溶液和DCM间分配。将有机层在减压下浓缩。将残留物通过柱色谱法纯化，得到(2R)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-4-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]丁酸(化合物21c,128mg).
步骤4:(2R)-2-氨基-4-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]丁酸(化合物21d)的制备
向(2R)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-4-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]丁酸(化合物21c,128mg,197μmol)的MeOH(5mL)溶液中加入浓盐酸(2mL)。将混合物在室温搅拌5小时，然后用氨水溶液碱化并用DCM萃取。将有机层在减压下浓缩，得到(2R)-2-氨基-4-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]丁酸(化合物21d,112mg).
步骤5:(2R)-4-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]-2-[6-[2,3-二氟-5-(5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基)苯氧基]己基氨基]丁酸(实施例21)的制备
向(2R)-2-氨基-4-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]丁酸(化合物21d,80mg,116μmol)的MeOH(5mL)溶液中加入粗的6-[2,3-二氟-5-(5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基)苯氧基]己醛(中间体I-7,55mg)。将混合物在室温搅拌6小时，然后加入氰基硼氢化钠(14.6mg,232μmol)。将得到的混合物在室温搅拌15小时，然后通过制备HPLC纯化，得到(2R)-4-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]-2-[6-[2,3-二氟-5-(5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基)苯氧基]己基氨基]丁酸(实施例21,4.5mg).MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:988.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝9.66(s,1H),8.99(d,2H),8.84(s,1H),8.01(s,1H),7.94(s,1H),7.63(,1H),7.43-7.34(m,2H),7.23-7.12(m,1H),6.61(d,2H),6.02(s,1H),5.35-5.25(m,1H),4.14-4.05(m,2H),3.98-3.78(m,3H),3.49(s,3H),3.14-2.73(m,7H),2.63-2.52(m,8H),1.96-1.52(m,8H),1.50-1.16(m,7H).
实施例22
4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]-1-[4-氟-6-[5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基]-2-吡啶基]哌嗪-2-甲酸
Figure BDA0002554226330000671
根据下面的流程制备标题化合物:
Figure BDA0002554226330000672
步骤1:4-[4-氟-6-[5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基]-2-吡啶基]哌嗪-1,3-二甲酸O1-叔丁酯O3-甲酯(化合物22b)的制备
向6-(4,6-二氟-2-吡啶基)-5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶(化合物22a,60mg,176μmol,根据WO2016177655,实施例151制备)的DIPEA(2mL)和DMSO(0.5mL)溶液中加入哌嗪-1,3-二甲酸O1-叔丁酯O3-甲酯(56mg,229μmol)。将混合物在120℃搅拌48小时，然后在减压下浓缩。将残留物通过柱色谱法纯化，得到4-[4-氟-6-[5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基]-2-吡啶基]哌嗪-1,3-二甲酸O1-叔丁酯O3-甲酯(化合物22b,15mg)。
步骤2:1-[4-氟-6-[5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基]-2-吡啶基]哌嗪-2-甲酸甲酯盐酸盐(化合物22c)的制备
向4-[4-氟-6-[5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基]-2-吡啶基]哌嗪-1,3-二甲酸O1-叔丁酯O3-甲酯(化合物22b,15mg)的MeOH(5mL)混合物中加入浓盐酸(1mL)溶液中。将混合物在室温搅拌2小时，然后在减压下浓缩，得到粗的1-[4-氟-6-[5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基]-2-吡啶基]哌嗪-2-甲酸甲酯盐酸盐(化合物22c,16.2mg).
步骤3:4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]-1-[4-氟-6-[5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基]-2-吡啶基]哌嗪-2-甲酸的制备
向1-[4-氟-6-[5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基]-2-吡啶基]哌嗪-2-甲酸甲酯盐酸盐(化合物22c,16.2mg,32.3μmol的DMF(3mL)溶液中加入(R)-6-(溴甲基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(中间体I-2,14.4mg,32.3μmol)、DIPEA(12.5mg,96.9μmol)和碘化钾(10.7mg,64.6μmol)。将混合物在50℃搅拌3小时，然后冷却至室温。向混合物中加入水(1mL)和氢氧化锂单水合物(15mg)。将得到的混合物在室温搅拌2小时，然后用6M HCl酸化并通过制备HPLC纯化，得到4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]-1-[4-氟-6-[5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基]-2-吡啶基]哌嗪-2-甲酸(实施例22,5mg).MS obsd.(ESI+)[(M+H)+]:814.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝8.99(d,2H),8.91(s,1H),7.99(d,1H),7.92(d,1H),7.63(t,1H),7.46-7.38(m,2H),7.22-7.14(m,2H),6.14(s,1H),6.04(s,1H),5.89(s,1H),5.73-5.66(m,1H),4.50-4.40(m,1H),4.16-4.10(m,1H),3.51(s,3H),3.47-3.36(m,3H),3.32-3.28(m,2H),3.17-2.89(m,6H),1.50(d,3H).
生物实施例
实施例23：HepG2.2.15细胞的初筛试验
材料和方法
HBV细胞系
在补充有10％胎牛血清(Invitrogen)和G418(Invitrogen)的DMEM+Glutamax-I培养基(Invitrogen,Carlsbad,CA,USA)中培养组成型HBV表达细胞系HepG2.2.15细胞(Acs等人Proc Natl Acad Sci U S A,84,(1987),4641-4)，终浓度为200mg/L，并在37℃下保持在5％CO2中。
HBsAg测定
将HepG2.2.15细胞一式两份以1.5×104个细胞/孔的量接种到白色的96孔板中。用在DMSO中的化合物的三倍连续稀释系列处理细胞。在所有孔中的最终DMSO浓度为1％，并且DMSO用作无药物对照。
HBsAg化学发光免疫分析(CLIA)试剂盒(Autobio Diagnostics Co.,郑州,中国，目录号：CL0310-2)用于半定量测定分泌的HBV抗原水平。为了进行检测，使用了50μL/孔的培养上清液，并使用HBsAg化学发光免疫分析(CLIA)试剂盒(Autobio Diagnostics Co.,郑州,中国，目录号：CL0310-2)对HBsAg进行了定量，将50μL上清液转移至CLIA测定板并将50μL酶结合试剂添加到每个孔中。将板密封并在室温下轻轻搅拌1小时。丢弃上清液-酶混合物，并用300μL PBS洗涤孔6次。通过将CLIA板右侧向下铺在吸收性薄纸上除去残留的液体。向每个孔中加入25μL底物A和B。孵育10分钟后，使用发光计(Mithras LB 940多模式微孔板读数(Multimode Microplate Reader))测量亮度。通过使用E-WorkBook Suite(IDBusiness Solutions Ltd.,Guildford,UK)生成剂量响应曲线并推算IC50值。IC50定义为与无药物对照组相比，HBsAg分泌减少50％的化合物浓度(或条件培养基对数稀释)。
如本文所述测试本发明的化合物抑制HBsAg的能力。在上述测定法中对实施例进行了测试，发现IC50低于10μM。发现具体的式I化合物的IC50低于1.0μM。表1给出了HBsAg测定的结果。
表1：本发明化合物的活性数据
Figure BDA0002554226330000701

Claims (18)

1.式(I)化合物，
Figure FDA0002554226320000011
其中
R1是苯基，其是未取代的或被卤素或C1-6烷基取代1或2或3次；
R2是C1-6烷基；
X是-(Cy)0-1-(L1)0-1-(L2)0-1-；其中
Cy是3-20元杂环基；
L1是C1-6烷基或羧基C1-6烷基；
L2是O、S、-N(R3)-或-C(O)-NH-；其中R3是H或C1-6烷基；
Y是键、C1-9烷基、C1-6烷氧基C1-6烷氧基C1-6烷基或羧基C1-9烷基；
A是式(A1)
Figure FDA0002554226320000012
其中
R4是氢或C1-6烷基；
R5是氢或C1-6烷氧基；
或式(A2)
Figure FDA0002554226320000021
其中
R6是氢或卤素；
R7是氢或卤素；
R8是氢或C1-6烷基；
U是键或O；
W是CH或N，
或其药学上可接受的盐。
2.根据权利要求1所述的化合物，其中
R1是苯基，其被卤素取代1或2或3次；
R2是C1-6烷基；
X是-(Cy)0-1-(L1)0-1-(L2)0-1-；其中
Cy是5-6元单环杂环基或9-10元稠合二环杂环基；
L1是C1-6烷基或羧基C1-6烷基；
L2是O、S、-N(R3)-或-C(O)-NH-；其中R3是H或C1-6烷基；
Y是键、C1-9烷基、C1-6烷氧基C1-6烷氧基C1-6烷基或羧基C1-9烷基；
A是式(A1)，其中R4是C1-6烷基，R5是C1-6烷氧基；
或式(A2)，其中R6是氢或卤素，R7是卤素，R8是C1-6烷基，U是键或O，W是CH或N；
或其药学上可接受的盐。
3.根据权利要求2所述的化合物，其中
R1是氯氟苯基；
R2是甲基或乙基；
X是键；O；-N(CH3)-；哌嗪基；羧基哌嗪基；(氨基羧基)丙基哌嗪基；(甲基氨基)甲基吗啉基；(氨基羰基)吗啉基；3-氧代-5,6,8,8a-四氢-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪基或(氨基羰基)丙基-3-氧代-5,6,8,8a-四氢-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪基；
Y是键、己基、戊基、丁基、丙基、(乙氧基乙氧基)乙基或羧基己基；
A是式(A1)，其中R4是叔丁基，R5是甲氧基；或式(A2)，其中R6是氢或氟，R7是氟，R8是甲基，U是键或O，W是CH或N；
或其药学上可接受的盐。
4.根据权利要求2所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1是苯基，其被卤素取代两次。
5.根据权利要求4所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1是氯氟苯基。
6.根据权利要求4所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中X是-(Cy)1-(L1)0-1-(L2)0-1-；其中Cy是哌嗪基、羧基哌嗪基、吗啉基或3-氧代-5,6,8,8a-四氢-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪基。
7.根据权利要求6所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中X是哌嗪基；羧基哌嗪基；(氨基羰基)丙基-3-氧代-5,6,8,8a-四氢-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪基。
8.根据权利要求6所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中Y是键、C1-9烷基或C1-6烷氧基C1-6烷氧基C1-6烷基。
9.根据权利要求8所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中Y是键、己基、丙基、(乙氧基乙氧基)乙基。
10.根据权利要求1-3中任何一项所述的化合物，其选自
6-叔丁基-9-[6-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
6-叔丁基-9-[5-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]戊氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
6-叔丁基-9-[4-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]丁氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
6-叔丁基-9-[3-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]丙氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
6-叔丁基-9-[3-[2-羧基-4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]丙氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
6-叔丁基-9-[6-[3-羧基-4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
6-叔丁基-9-[6-[2-羧基-4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
6-叔丁基-9-[6-[7-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]-3-氧代-5,6,8,8a-四氢-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
6-叔丁基-9-[6-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基-甲基-氨基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
6-叔丁基-9-[2-[2-[2-[[(3S)-4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]吗啉-3-羰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
6-叔丁基-9-[2-[2-[2-[2-羧基-4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
6-叔丁基-9-[4-羧基-6-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
6-叔丁基-9-[6-[[(3S)-4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]吗啉-3-羰基]氨基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
6-叔丁基-9-[6-[[4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲氧基]己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
9-[6-[[3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]-3-氧代-5,6,8,8a-四氢-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酰基]氨基]己氧基]-6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
9-[6-[[4-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]-3-氧代-5,6,8,8a-四氢-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-3,3-二甲基-丁酰基]氨基]己氧基]-6-叔丁基-10-甲氧基-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
(4R)-6-[[(8aS)-2-[4-[6-[2,3-二氟-5-[5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基]苯氧基]己基氨基]-2,2-二甲基-4-氧代-丁基]-3-氧代-5,6,8,8a-四氢-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-7-基]甲基]-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯；
(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-6-[[(3S)-3-[6-[2,3-二氟-5-(5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基)苯氧基]己基氨基甲酰基]吗啉-4-基]甲基]-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯；
(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-6-[[(3R)-3-[[6-[2,3-二氟-5-(5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基)苯氧基]己基-甲基-氨基]甲基]吗啉-4-基]甲基]-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯；
(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-6-[[2,3-二氟-5-(5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基)苯氧基]甲基]-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯；
(2R)-4-[4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]哌嗪-1-基]-2-[6-[2,3-二氟-5-(5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基)苯氧基]己基氨基]丁酸；和
4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢嘧啶-6-基]甲基]-1-[4-氟-6-[5-甲基-2-嘧啶-2-基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基]-2-吡啶基]哌嗪-2-甲酸；
或其药学上可接受的盐。
11.制备根据权利要求1-10中任何一项所述的化合物或其药学上可接受的盐的方法，其包括以下步骤中的任何一步：
(a)在碱存在下水解式(VI)化合物，
Figure FDA0002554226320000061
(b)在碱存在下水解式(V-2)化合物，
Figure FDA0002554226320000062
(c)脱保护并在碱存在下用溴化物(V)取代式(X-2)，
Figure FDA0002554226320000063
(d)在碱存在下水解式(XI-3)化合物，
Figure FDA0002554226320000071
(e)在碱存在下用溴化物(V)取代式(X)，
Figure FDA0002554226320000072
其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7和R8如权利要求1-9中任何一项所定义；Z是卤素；LG是卤素；PG是Boc；R9是C1-6烷基。
12.根据权利要求1至10中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其用作治疗活性物质。
13.药物组合物，其包含根据权利要求1至10中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐和治疗惰性载体。
14.根据权利要求1至10中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐用于治疗或预防HBV感染的用途。
15.根据权利要求1至10中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗或预防HBV感染的药物中的用途。
16.根据权利要求1至10中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗或预防HBV感染。
17.根据权利要求1至10中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其根据权利要求11的方法制备。
18.一种用于治疗或预防HBV感染的方法，该方法包括施用有效量的如权利要求1至10中任一项所定义的化合物或其药学上可接受的盐。
CN201880083641.4A 2017-12-28 2018-12-21 用于治疗和预防乙型肝炎病毒感染的二氢嘧啶基噻唑 Active CN111511739B (zh)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNPCT/CN2017/119319 2017-12-28
CN2017119319 2017-12-28
CN2018109334 2018-10-08
CNPCT/CN2018/109334 2018-10-08
PCT/EP2018/086473 WO2019129681A1 (en) 2017-12-28 2018-12-21 Dihydropyrimidinylthiazole for the treatment and prophylaxis of hepatitis b virus infection

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111511739A true CN111511739A (zh) 2020-08-07
CN111511739B CN111511739B (zh) 2023-09-15

Family

ID=65009724

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201880083641.4A Active CN111511739B (zh) 2017-12-28 2018-12-21 用于治疗和预防乙型肝炎病毒感染的二氢嘧啶基噻唑

Country Status (5)

Country Link
US (1) US11447489B2 (zh)
EP (1) EP3732177B1 (zh)
JP (1) JP7256810B2 (zh)
CN (1) CN111511739B (zh)
WO (1) WO2019129681A1 (zh)

Families Citing this family (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10738035B2 (en) 2015-05-13 2020-08-11 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis B antiviral agents
KR102398439B1 (ko) 2016-03-07 2022-05-16 이난타 파마슈티칼스, 인코포레이티드 B형 간염 항바이러스제
CN110066278B (zh) * 2017-06-01 2021-06-08 广东东阳光药业有限公司 稠合三环类化合物及其在药物中的应用
EP3675637A4 (en) 2017-08-28 2021-05-19 Enanta Pharmaceuticals, Inc. ANTIVIRAL AGENTS AGAINST HEPATITIS B
US11058678B2 (en) 2018-01-22 2021-07-13 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Substituted heterocycles as antiviral agents
WO2019191166A1 (en) 2018-03-29 2019-10-03 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis b antiviral agents
EP3852751A4 (en) 2018-09-21 2022-06-15 Enanta Pharmaceuticals, Inc. FUNCTIONALIZED HETEROCYCLES USEFUL AS ANTIVIRAL AGENTS
JP2022507724A (ja) 2018-11-21 2022-01-18 エナンタ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 抗ウイルス剤としての官能化複素環
WO2020247444A1 (en) 2019-06-03 2020-12-10 Enanta Pharmaceuticals, Inc, Hepatitis b antiviral agents
US11760755B2 (en) 2019-06-04 2023-09-19 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis B antiviral agents
WO2020247575A1 (en) 2019-06-04 2020-12-10 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis b antiviral agents
US11738019B2 (en) 2019-07-11 2023-08-29 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Substituted heterocycles as antiviral agents
WO2021055425A2 (en) 2019-09-17 2021-03-25 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Functionalized heterocycles as antiviral agents
CN114450277A (zh) * 2019-09-30 2022-05-06 豪夫迈·罗氏有限公司 用于治疗和预防乙型肝炎病毒感染的经取代的嘧啶
WO2021188414A1 (en) 2020-03-16 2021-09-23 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Functionalized heterocyclic compounds as antiviral agents

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20150210682A1 (en) * 2014-01-30 2015-07-30 Hoffmann-La Roche Inc. Novel dihydroquinolizinones for the treatment and prophylaxis of hepatitis B virus infection
WO2017064156A1 (en) * 2015-10-16 2017-04-20 F. Hoffmann-La Roche Ag Novel 6-fused and 2-heteroaryldihydropyrimidines for the treatment and prophylaxis of hepatitis b virus infection
WO2017076791A1 (en) * 2015-11-03 2017-05-11 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy of an hbv capsid assembly inhibitor and an interferon
US20170298067A1 (en) * 2014-12-30 2017-10-19 Hoffmann-La Roche Inc. Novel tetrahydropyridopyimidines and tetrahydropridopyridopyridines for the treatment and prophylaxis of hepatitis b virus infection

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SG11201500377UA (en) 2012-09-10 2015-02-27 Hoffmann La Roche 6-amino acid heteroaryldihydropyrimidines for the treatment and prophylaxis of hepatitis b virus infection
RS58384B1 (sr) 2014-03-07 2019-04-30 Hoffmann La Roche Novi 6-fuzionisani heteroarildihidropirimidini za lečenje i profilaksu infekcije virusom hepatitisa b
WO2016016196A1 (en) 2014-07-31 2016-02-04 F. Hoffmann-La Roche Ag Novel chiral resolution of 4-aryl-2-thiazol-2-yl-1,4-dihydropyrimidine-5-carboxylic acid esters
WO2016177655A1 (en) 2015-05-04 2016-11-10 F. Hoffmann-La Roche Ag Tetrahydropyridopyrimidines and tetrahydropyridopyridines as inhibitors of hbsag (hbv surface antigen) and hbv dna production for the treatment of hepatitis b virus infections
WO2017108630A1 (en) * 2015-12-21 2017-06-29 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy of an hbsag inhibitor and an hbv capsid assembly inhibitor

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20150210682A1 (en) * 2014-01-30 2015-07-30 Hoffmann-La Roche Inc. Novel dihydroquinolizinones for the treatment and prophylaxis of hepatitis B virus infection
US20170298067A1 (en) * 2014-12-30 2017-10-19 Hoffmann-La Roche Inc. Novel tetrahydropyridopyimidines and tetrahydropridopyridopyridines for the treatment and prophylaxis of hepatitis b virus infection
WO2017064156A1 (en) * 2015-10-16 2017-04-20 F. Hoffmann-La Roche Ag Novel 6-fused and 2-heteroaryldihydropyrimidines for the treatment and prophylaxis of hepatitis b virus infection
WO2017076791A1 (en) * 2015-11-03 2017-05-11 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy of an hbv capsid assembly inhibitor and an interferon

Also Published As

Publication number Publication date
EP3732177B1 (en) 2021-11-17
CN111511739B (zh) 2023-09-15
WO2019129681A1 (en) 2019-07-04
US11447489B2 (en) 2022-09-20
US20210061801A1 (en) 2021-03-04
JP2021508712A (ja) 2021-03-11
EP3732177A1 (en) 2020-11-04
JP7256810B2 (ja) 2023-04-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN111511739B (zh) 用于治疗和预防乙型肝炎病毒感染的二氢嘧啶基噻唑
US11566020B1 (en) Pyridazinones as PARP7 inhibitors
CN109311880B (zh) 用于治疗和预防乙型肝炎病毒感染的新的四氢吡啶并嘧啶类化合物
EP3318565B1 (en) Pyrrolo[2,3-d]pyrimidinyl, pyrrolo[2,3-b]pyrazinyl and pyrrolo[2,3-d]pyridinyl acrylamides
EP2997032B1 (en) 6-bridged heteroaryldihydropyrimidines for the treatment and prophylaxis of hepatitis b virus infection
TW201938555A (zh) Kras g12c抑制劑
EA030115B1 (ru) Новые 6-конденсированные гетероарилдигидропиримидины для лечения и профилактики заражения вирусом гепатита b
AU2018351400A1 (en) Dihydropyrimidine compounds and uses thereof in medicine
CN112142735A (zh) 一类稠和氰基吡啶类化合物、制备方法和用途
AU2018269743A1 (en) Kinase inhibitors and uses thereof
WO2020156437A1 (zh) Akt抑制剂
CN112094269B (zh) 一类饱和六元环并杂环类化合物、制备方法和用途
TW202112768A (zh) 二取代吡唑化合物
CN115867346A (zh) 激酶抑制剂
CN114423747A (zh) 用于治疗自身免疫性疾病的新型喹啉化合物
CN112638901A (zh) 用于治疗自身免疫性疾病的新型吡咯烷基酰胺化合物
CN113429427A (zh) 杂环化合物及其制备方法和药物用途
KR102662205B1 (ko) 신규 plk1 분해 유도 화합물
CN114805361A (zh) 一类氨基取代的芳香杂环并吡唑类化合物、制备方法和用途
CN114667286A (zh) 用于治疗自身免疫性疾病的三氮杂三环类化合物
JP2023505485A (ja) Ａｔｍキナーゼ阻害剤及び組成物並びにそれらの使用の方法
CN113874015B (zh) Ripk2的噻吩并吡啶抑制剂
CN115485276A (zh) 氘代akt激酶抑制剂
CN113874015A (zh) Ripk2的噻吩并吡啶抑制剂
WO2023006013A1 (zh) 新型parp7抑制剂及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: DE

Ref document number: 40033065

Country of ref document: HK

GR01 Patent grant
GR01 Patent grant