CN111511403A - 脂质运载蛋白型前列腺素d2合成酶产生促进剂 - Google Patents
脂质运载蛋白型前列腺素d2合成酶产生促进剂 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111511403A CN111511403A CN201880084260.8A CN201880084260A CN111511403A CN 111511403 A CN111511403 A CN 111511403A CN 201880084260 A CN201880084260 A CN 201880084260A CN 111511403 A CN111511403 A CN 111511403A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- lipocalin
- pgds
- synthase
- type prostaglandin
- brain
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 68
- 102000048176 Prostaglandin-D synthases Human genes 0.000 title claims abstract description 62
- 108030003866 Prostaglandin-D synthases Proteins 0.000 title claims abstract description 62
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 76
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 71
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims abstract description 47
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 44
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims abstract description 43
- 210000003668 pericyte Anatomy 0.000 claims abstract description 39
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 claims abstract description 37
- 208000010877 cognitive disease Diseases 0.000 claims abstract description 26
- 208000026106 cerebrovascular disease Diseases 0.000 claims abstract description 23
- 206010008118 cerebral infarction Diseases 0.000 claims abstract description 21
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 claims abstract description 16
- 210000004263 induced pluripotent stem cell Anatomy 0.000 claims abstract description 12
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 claims abstract description 12
- 206010046865 Vaccinia virus infection Diseases 0.000 claims abstract description 9
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 claims abstract description 9
- 208000007089 vaccinia Diseases 0.000 claims abstract description 9
- 230000032459 dedifferentiation Effects 0.000 claims abstract description 4
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 claims description 59
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 58
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 30
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 claims description 28
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 25
- BHMBVRSPMRCCGG-UHFFFAOYSA-N prostaglandine D2 Natural products CCCCCC(O)C=CC1C(CC=CCCCC(O)=O)C(O)CC1=O BHMBVRSPMRCCGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 23
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 claims description 21
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 claims description 18
- 102000013455 Amyloid beta-Peptides Human genes 0.000 claims description 15
- 108010090849 Amyloid beta-Peptides Proteins 0.000 claims description 15
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 15
- 238000012216 screening Methods 0.000 claims description 15
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 6
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 6
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 claims description 4
- 239000005723 virus inoculator Substances 0.000 claims description 4
- 230000008021 deposition Effects 0.000 claims description 3
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000000147 hypnotic effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 3
- 102000003960 Ligases Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000364 Ligases Proteins 0.000 claims description 2
- 230000029142 excretion Effects 0.000 claims description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 claims 1
- 102100033279 Prostaglandin-H2 D-isomerase Human genes 0.000 abstract description 122
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 abstract description 8
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 7
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 6
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 4
- 208000019116 sleep disease Diseases 0.000 abstract 1
- 101710145576 Prostaglandin-H2 D-isomerase Proteins 0.000 description 125
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 87
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 23
- 102100029100 Hematopoietic prostaglandin D synthase Human genes 0.000 description 21
- BHMBVRSPMRCCGG-OUTUXVNYSA-N prostaglandin D2 Chemical compound CCCCC[C@H](O)\C=C\[C@@H]1[C@@H](C\C=C/CCCC(O)=O)[C@@H](O)CC1=O BHMBVRSPMRCCGG-OUTUXVNYSA-N 0.000 description 21
- 101000988802 Homo sapiens Hematopoietic prostaglandin D synthase Proteins 0.000 description 20
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 20
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 19
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 17
- 230000006870 function Effects 0.000 description 17
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 17
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 16
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 16
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 15
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 15
- 102000019298 Lipocalin Human genes 0.000 description 14
- 108050006654 Lipocalin Proteins 0.000 description 14
- 230000009471 action Effects 0.000 description 14
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 13
- 238000011532 immunohistochemical staining Methods 0.000 description 12
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 12
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 11
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 10
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 10
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 9
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 9
- 102100024616 Platelet endothelial cell adhesion molecule Human genes 0.000 description 9
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 9
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 9
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 8
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 8
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 8
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 8
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 8
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 8
- 239000002033 PVDF binder Substances 0.000 description 8
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 8
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 8
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 8
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 8
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 8
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 8
- 210000003556 vascular endothelial cell Anatomy 0.000 description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 230000003431 anti-prostaglandin Effects 0.000 description 7
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 7
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 7
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 7
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 description 7
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 7
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 7
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 7
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 6
- FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 4',6-Diamino-2-phenylindol Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(C(N)=N)C=C2N1 FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 6
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 description 6
- 230000003930 cognitive ability Effects 0.000 description 6
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 6
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 6
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- YIBNHAJFJUQSRA-YNNPMVKQSA-N prostaglandin H2 Chemical compound C1[C@@H]2OO[C@H]1[C@H](/C=C/[C@@H](O)CCCCC)[C@H]2C\C=C/CCCC(O)=O YIBNHAJFJUQSRA-YNNPMVKQSA-N 0.000 description 6
- 230000004044 response Effects 0.000 description 6
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 6
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 5
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 5
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 5
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 5
- 239000002771 cell marker Substances 0.000 description 5
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 5
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 5
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 5
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 5
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 5
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 5
- IGAZHQIYONOHQN-UHFFFAOYSA-N Alexa Fluor 555 Chemical compound C=12C=CC(=N)C(S(O)(=O)=O)=C2OC2=C(S(O)(=O)=O)C(N)=CC=C2C=1C1=CC=C(C(O)=O)C=C1C(O)=O IGAZHQIYONOHQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 4
- 102000008730 Nestin Human genes 0.000 description 4
- 108010088225 Nestin Proteins 0.000 description 4
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 4
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 4
- 230000006931 brain damage Effects 0.000 description 4
- 231100000874 brain damage Toxicity 0.000 description 4
- 208000029028 brain injury Diseases 0.000 description 4
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 4
- XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N dinoprostone Chemical compound CCCCC[C@H](O)\C=C\[C@H]1[C@H](O)CC(=O)[C@@H]1C\C=C/CCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N 0.000 description 4
- 229960002986 dinoprostone Drugs 0.000 description 4
- 230000000517 effect on sleep Effects 0.000 description 4
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 4
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 4
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 4
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 4
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 4
- 102000027411 intracellular receptors Human genes 0.000 description 4
- 108091008582 intracellular receptors Proteins 0.000 description 4
- 210000005055 nestin Anatomy 0.000 description 4
- 210000004248 oligodendroglia Anatomy 0.000 description 4
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N prostaglandin E2 Natural products CCCCCC(O)C=CC1C(O)CC(=O)C1CC=CCCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- UQOQENZZLBSFKO-POPPZSFYSA-N prostaglandin J2 Chemical compound CCCCC[C@H](O)\C=C\[C@@H]1[C@@H](C\C=C/CCCC(O)=O)C=CC1=O UQOQENZZLBSFKO-POPPZSFYSA-N 0.000 description 4
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 4
- 239000002516 radical scavenger Substances 0.000 description 4
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 4
- KJDSORYAHBAGPP-UHFFFAOYSA-N 4-(3,4-diaminophenyl)benzene-1,2-diamine;hydron;tetrachloride Chemical compound Cl.Cl.Cl.Cl.C1=C(N)C(N)=CC=C1C1=CC=C(N)C(N)=C1 KJDSORYAHBAGPP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000016192 Demyelinating disease Diseases 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010069381 Platelet Endothelial Cell Adhesion Molecule-1 Proteins 0.000 description 3
- 208000013738 Sleep Initiation and Maintenance disease Diseases 0.000 description 3
- 210000001130 astrocyte Anatomy 0.000 description 3
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 3
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 3
- 210000003710 cerebral cortex Anatomy 0.000 description 3
- 230000001149 cognitive effect Effects 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 239000012156 elution solvent Substances 0.000 description 3
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 3
- 206010022437 insomnia Diseases 0.000 description 3
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 3
- 239000003068 molecular probe Substances 0.000 description 3
- 238000012758 nuclear staining Methods 0.000 description 3
- 150000003180 prostaglandins Chemical class 0.000 description 3
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 3
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 description 3
- VHRUMKCAEVRUBK-GODQJPCRSA-N 15-deoxy-Delta(12,14)-prostaglandin J2 Chemical compound CCCCC\C=C\C=C1/[C@@H](C\C=C/CCCC(O)=O)C=CC1=O VHRUMKCAEVRUBK-GODQJPCRSA-N 0.000 description 2
- LDXJRKWFNNFDSA-UHFFFAOYSA-N 2-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)-1-[4-[2-[[3-(trifluoromethoxy)phenyl]methylamino]pyrimidin-5-yl]piperazin-1-yl]ethanone Chemical compound C1CN(CC2=NNN=C21)CC(=O)N3CCN(CC3)C4=CN=C(N=C4)NCC5=CC(=CC=C5)OC(F)(F)F LDXJRKWFNNFDSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012103 Alexa Fluor 488 Substances 0.000 description 2
- 239000005995 Aluminium silicate Substances 0.000 description 2
- 208000037259 Amyloid Plaque Diseases 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000008035 Back Pain Diseases 0.000 description 2
- BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N Bilirubin Chemical compound N1C(=O)C(C)=C(C=C)\C1=C\C1=C(C)C(CCC(O)=O)=C(CC2=C(C(C)=C(\C=C/3C(=C(C=C)C(=O)N\3)C)N2)CCC(O)=O)N1 BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N 0.000 description 2
- 201000006474 Brain Ischemia Diseases 0.000 description 2
- 206010048962 Brain oedema Diseases 0.000 description 2
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 2
- 206010008120 Cerebral ischaemia Diseases 0.000 description 2
- 206010012305 Demyelination Diseases 0.000 description 2
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 2
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 2
- 102100031181 Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N Guanidine Chemical compound NC(N)=N ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000283986 Lepus Species 0.000 description 2
- 208000008930 Low Back Pain Diseases 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 206010029350 Neurotoxicity Diseases 0.000 description 2
- 101150020237 PTGDS gene Proteins 0.000 description 2
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 102000009389 Prostaglandin D receptors Human genes 0.000 description 2
- 108050000258 Prostaglandin D receptors Proteins 0.000 description 2
- 102100024212 Prostaglandin D2 receptor Human genes 0.000 description 2
- 239000012083 RIPA buffer Substances 0.000 description 2
- 238000011530 RNeasy Mini Kit Methods 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- 206010044221 Toxic encephalopathy Diseases 0.000 description 2
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 2
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 2
- 235000012211 aluminium silicate Nutrition 0.000 description 2
- 230000006933 amyloid-beta aggregation Effects 0.000 description 2
- 230000000202 analgesic effect Effects 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 210000000576 arachnoid Anatomy 0.000 description 2
- 230000003376 axonal effect Effects 0.000 description 2
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 2
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 2
- 208000006752 brain edema Diseases 0.000 description 2
- 201000008247 brain infarction Diseases 0.000 description 2
- 210000000133 brain stem Anatomy 0.000 description 2
- 239000000287 crude extract Substances 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 239000003822 epoxy resin Substances 0.000 description 2
- ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N ethidium bromide Chemical compound [Br-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CC)=C1C1=CC=CC=C1 ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960005542 ethidium bromide Drugs 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000010195 expression analysis Methods 0.000 description 2
- 239000000834 fixative Substances 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 2
- 238000013095 identification testing Methods 0.000 description 2
- NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N kaolin Chemical compound O.O.O=[Al]O[Si](=O)O[Si](=O)O[Al]=O NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 210000003657 middle cerebral artery Anatomy 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 2
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 2
- 210000001178 neural stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 231100000228 neurotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000007135 neurotoxicity Effects 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 229940094443 oxytocics prostaglandins Drugs 0.000 description 2
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 2
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 2
- 210000004786 perivascular cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 2
- 229920000647 polyepoxide Polymers 0.000 description 2
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 2
- 229940043274 prophylactic drug Drugs 0.000 description 2
- 229940127293 prostanoid Drugs 0.000 description 2
- 150000003814 prostanoids Chemical class 0.000 description 2
- 230000002633 protecting effect Effects 0.000 description 2
- 239000003223 protective agent Substances 0.000 description 2
- 239000011251 protective drug Substances 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 2
- 230000004043 responsiveness Effects 0.000 description 2
- 210000004116 schwann cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M sodium periodate Chemical compound [Na+].[O-]I(=O)(=O)=O JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000007711 solidification Methods 0.000 description 2
- 230000008023 solidification Effects 0.000 description 2
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 2
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 2
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 2
- AWSUSADYFDCYML-KUPUPYBPSA-N (z)-7-[(1s,5r)-5-[(e)-oct-1-enyl]-4-oxocyclopent-2-en-1-yl]hept-5-enoic acid Chemical compound CCCCCC\C=C\[C@@H]1[C@@H](C\C=C/CCCC(O)=O)C=CC1=O AWSUSADYFDCYML-KUPUPYBPSA-N 0.000 description 1
- HMUNWXXNJPVALC-UHFFFAOYSA-N 1-[4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]piperazin-1-yl]-2-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)ethanone Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)N1CCN(CC1)C(CN1CC2=C(CC1)NN=N2)=O HMUNWXXNJPVALC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VSRXYLYXIXYEST-KZTWKYQFSA-N 13,14-dihydro-15-ketoprostaglandin D2 Chemical compound CCCCCC(=O)CC[C@@H]1[C@@H](C\C=C/CCCC(O)=O)[C@@H](O)CC1=O VSRXYLYXIXYEST-KZTWKYQFSA-N 0.000 description 1
- WZFUQSJFWNHZHM-UHFFFAOYSA-N 2-[4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]piperazin-1-yl]-1-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)ethanone Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)N1CCN(CC1)CC(=O)N1CC2=C(CC1)NN=N2 WZFUQSJFWNHZHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JQMFQLVAJGZSQS-UHFFFAOYSA-N 2-[4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]piperazin-1-yl]-N-(2-oxo-3H-1,3-benzoxazol-6-yl)acetamide Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)N1CCN(CC1)CC(=O)NC1=CC2=C(NC(O2)=O)C=C1 JQMFQLVAJGZSQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YLZOPXRUQYQQID-UHFFFAOYSA-N 3-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)-1-[4-[2-[[3-(trifluoromethoxy)phenyl]methylamino]pyrimidin-5-yl]piperazin-1-yl]propan-1-one Chemical compound N1N=NC=2CN(CCC=21)CCC(=O)N1CCN(CC1)C=1C=NC(=NC=1)NCC1=CC(=CC=C1)OC(F)(F)F YLZOPXRUQYQQID-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WRPUOFKIGGWQIJ-UHFFFAOYSA-M 3-carboxy-3,5-dihydroxy-5-oxopentanoate;2-hydroxyethyl(trimethyl)azanium Chemical compound C[N+](C)(C)CCO.OC(=O)CC(O)(C([O-])=O)CC(O)=O WRPUOFKIGGWQIJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- CONKBQPVFMXDOV-QHCPKHFHSA-N 6-[(5S)-5-[[4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]piperazin-1-yl]methyl]-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-yl]-3H-1,3-benzoxazol-2-one Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)N1CCN(CC1)C[C@H]1CN(C(O1)=O)C1=CC2=C(NC(O2)=O)C=C1 CONKBQPVFMXDOV-QHCPKHFHSA-N 0.000 description 1
- 238000010174 APPSwe Methods 0.000 description 1
- 238000010175 APPswe/PSEN1dE9 Methods 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- 239000012099 Alexa Fluor family Substances 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 102000004219 Brain-derived neurotrophic factor Human genes 0.000 description 1
- 108090000715 Brain-derived neurotrophic factor Proteins 0.000 description 1
- 239000002126 C01EB10 - Adenosine Substances 0.000 description 1
- 101150043085 COCH gene Proteins 0.000 description 1
- 101000925430 Caenorhabditis elegans Sphingomyelin phosphodiesterase 1 Proteins 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 208000028698 Cognitive impairment Diseases 0.000 description 1
- 238000000018 DNA microarray Methods 0.000 description 1
- 101100532034 Drosophila melanogaster RTase gene Proteins 0.000 description 1
- 101000925662 Enterobacteria phage PRD1 Endolysin Proteins 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 108700039887 Essential Genes Proteins 0.000 description 1
- 101150092680 GBP6 gene Proteins 0.000 description 1
- 101710082112 Hematopoietic prostaglandin D synthase Proteins 0.000 description 1
- 101001135402 Homo sapiens Prostaglandin-H2 D-isomerase Proteins 0.000 description 1
- 241001562081 Ikeda Species 0.000 description 1
- 206010061216 Infarction Diseases 0.000 description 1
- 208000012659 Joint disease Diseases 0.000 description 1
- 239000005909 Kieselgur Substances 0.000 description 1
- 208000028226 Krabbe disease Diseases 0.000 description 1
- 241000283960 Leporidae Species 0.000 description 1
- 241000025416 Lepus brachyurus Species 0.000 description 1
- 241000186781 Listeria Species 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 239000012580 N-2 Supplement Substances 0.000 description 1
- CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N N-methyl-guanidine Natural products CNC(N)=N CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010025020 Nerve Growth Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000007072 Nerve Growth Factors Human genes 0.000 description 1
- 101710089162 Neuroglian Proteins 0.000 description 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 1
- 241000283977 Oryctolagus Species 0.000 description 1
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 1
- 208000000114 Pain Threshold Diseases 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 206010034464 Periarthritis Diseases 0.000 description 1
- 102000018967 Platelet-Derived Growth Factor beta Receptor Human genes 0.000 description 1
- 108010051742 Platelet-Derived Growth Factor beta Receptor Proteins 0.000 description 1
- 102100026547 Platelet-derived growth factor receptor beta Human genes 0.000 description 1
- 101710164680 Platelet-derived growth factor receptor beta Proteins 0.000 description 1
- 206010036376 Postherpetic Neuralgia Diseases 0.000 description 1
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 1
- 208000003251 Pruritus Diseases 0.000 description 1
- 101150034985 Ptgdr2 gene Proteins 0.000 description 1
- 206010039085 Rhinitis allergic Diseases 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000032851 Subarachnoid Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 210000004241 Th2 cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000005448 Trichomonas Infections Diseases 0.000 description 1
- 206010044620 Trichomoniasis Diseases 0.000 description 1
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000024780 Urticaria Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 229960005305 adenosine Drugs 0.000 description 1
- 238000000246 agarose gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 201000010105 allergic rhinitis Diseases 0.000 description 1
- 230000003941 amyloidogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 210000002469 basement membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000003542 behavioural effect Effects 0.000 description 1
- 238000002306 biochemical method Methods 0.000 description 1
- 230000001851 biosynthetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 210000001627 cerebral artery Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 210000002987 choroid plexus Anatomy 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 230000019771 cognition Effects 0.000 description 1
- 230000003920 cognitive function Effects 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 230000001054 cortical effect Effects 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 230000001120 cytoprotective effect Effects 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 229960003964 deoxycholic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000000249 desinfective effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N dimethylaminoamidine Natural products CN(C)C(N)=N SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 230000002518 glial effect Effects 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 description 1
- 239000003326 hypnotic agent Substances 0.000 description 1
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 description 1
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 description 1
- 238000012151 immunohistochemical method Methods 0.000 description 1
- 230000007574 infarction Effects 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 230000037041 intracellular level Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 208000023589 ischemic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 238000006317 isomerization reaction Methods 0.000 description 1
- 210000003140 lateral ventricle Anatomy 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 238000002493 microarray Methods 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 1
- 238000002715 modification method Methods 0.000 description 1
- 230000023105 myelination Effects 0.000 description 1
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 1
- 208000004296 neuralgia Diseases 0.000 description 1
- 210000004498 neuroglial cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003176 neuroleptic agent Substances 0.000 description 1
- 230000000701 neuroleptic effect Effects 0.000 description 1
- 201000001119 neuropathy Diseases 0.000 description 1
- 230000007823 neuropathy Effects 0.000 description 1
- 239000003900 neurotrophic factor Substances 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 108091027963 non-coding RNA Proteins 0.000 description 1
- 102000042567 non-coding RNA Human genes 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 229910052762 osmium Inorganic materials 0.000 description 1
- SYQBFIAQOQZEGI-UHFFFAOYSA-N osmium atom Chemical compound [Os] SYQBFIAQOQZEGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 1
- 230000037040 pain threshold Effects 0.000 description 1
- 208000035824 paresthesia Diseases 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 210000000578 peripheral nerve Anatomy 0.000 description 1
- 208000033808 peripheral neuropathy Diseases 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- KSSNXJHPEFVKHY-UHFFFAOYSA-N phenol;hydrate Chemical compound O.OC1=CC=CC=C1 KSSNXJHPEFVKHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- CMDGQTVYVAKDNA-UHFFFAOYSA-N propane-1,2,3-triol;hydrate Chemical compound O.OCC(O)CO CMDGQTVYVAKDNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003163 prostaglandin D2 derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 150000003176 prostaglandin J2 derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 210000003370 receptor cell Anatomy 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 230000000630 rising effect Effects 0.000 description 1
- 238000005185 salting out Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 1
- 210000002460 smooth muscle Anatomy 0.000 description 1
- FHHPUSMSKHSNKW-SMOYURAASA-M sodium deoxycholate Chemical compound [Na+].C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC([O-])=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 FHHPUSMSKHSNKW-SMOYURAASA-M 0.000 description 1
- 229940083575 sodium dodecyl sulfate Drugs 0.000 description 1
- 235000019333 sodium laurylsulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000004885 tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 108010087967 type I signal peptidase Proteins 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N uroanthelone Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)C(C)C)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 210000000707 wrist Anatomy 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
- G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
- G01N33/5044—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics involving specific cell types
- G01N33/5073—Stem cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/36—Skin; Hair; Nails; Sebaceous glands; Cerumen; Epidermis; Epithelial cells; Keratinocytes; Langerhans cells; Ectodermal cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/44—Vessels; Vascular smooth muscle cells; Endothelial cells; Endothelial progenitor cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/76—Viruses; Subviral particles; Bacteriophages
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/20—Hypnotics; Sedatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6844—Nucleic acid amplification reactions
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/15—Medicinal preparations ; Physical properties thereof, e.g. dissolubility
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0053—Mouth and digestive tract, i.e. intraoral and peroral administration
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/136—Screening for pharmacological compounds
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/005—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from viruses
- G01N2333/01—DNA viruses
- G01N2333/065—Poxviridae, e.g. avipoxvirus
- G01N2333/07—Vaccinia virus; Variola virus
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
- G01N2333/99—Isomerases (5.)
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2500/00—Screening for compounds of potential therapeutic value
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/28—Neurological disorders
- G01N2800/2814—Dementia; Cognitive disorders
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/28—Neurological disorders
- G01N2800/2864—Sleep disorders
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/28—Neurological disorders
- G01N2800/2871—Cerebrovascular disorders, e.g. stroke, cerebral infarct, cerebral haemorrhage, transient ischemic event
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Neurology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Virology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Anesthesiology (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
Abstract
本发明的目的在于提供脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶(L‑PGDS)产生促进剂、更具体而言提供周细胞或从周细胞脱分化得到的缺血诱导性多能性干细胞(iSC)中的L‑PGDS产生促进剂。本发明中，确认了痘苗病毒接种炎症组织提取物中含有具有L‑PGDS产生促进作用的物质。L‑PGDS产生促进剂作为可以期待由L‑PGDS表达促进所带来的效果的疾病、即、脑梗塞等的脑血管障碍、阿尔茨海默氏病等的认知症或睡眠障碍的预防、治疗或复发预防药物等，有用性高。
Description
技术领域
本发明涉及脂质运载蛋白(lipocalin)型前列腺素D2合成酶(以下，有时记作“L-PGDS”。另外，被称为“脂质运载蛋白型前列腺素D合成酶”的酶也可以包括在本发明中。)的产生促进剂等。
背景技术
前列腺素D2合成酶(PGDS)已知有分布于中枢神经系统、雄性生殖器官、心脏等处的脂质运载蛋白型(L-)PGDS、和分布于肥大细胞和Th2细胞的造血型(H-)PGDS的2种。L-PGDS具有催化从作为前列腺素生物合成的共通中间体的前列腺素H2(PGH2)向前列腺素D2(PGD2)的异构化反应的活性。另一方面，L-PGDS在结构上属于发挥作为脂溶性物质的载体的功能的脂质运载蛋白家族。因此，L-PGDS为具有PGD2生物合成酶和脂溶性载体的两面性的多功能蛋白。
分布于中枢神经系统的L-PGDS在脑脊髓液中也有检出，与其他的脂质运载蛋白相比较，具有巨大的亲油性袋，因此被认为发挥作为脑内的各种脂溶性分子的输送蛋白质和清除剂的作用。作为那样的L-PGDS的脂质运载蛋白的功能的例子，可以列举在蛛网膜下腔出血后，脑内L-PGDS上升，结合成为神经毒性的原因的胆红素，由此避免神经毒性(InuiT.et al.,J.Cereb.Blood Flow Metab.34,1558-1567,2014)；L-PGDS在阿尔茨海默氏病的患者或动物模型中，与淀粉样蛋白β蛋白质(Aβ、老人斑)的低聚物形成所必须的区域牢固地结合，抑制脑脊髓液中的Aβ凝集形成和细胞毒性(Kanekiyo T.et al.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 104,6412-6417,2007)等。
另外，存在如下报道：小鼠的缺血脑中PGD2的产生显著增加，通过L-PGDS和H-PGDS、或PGD2受体DP1的敲除，而缺血后的脑水肿发病重症化(Tanigichi H.et al.,J.Neurosci.27,4303-4312,2007)；通过L-PGDS的敲除，而脑梗塞灶和脑水肿增大(SaleemS.et al.,Neuroscience 160,248-254,2009)。由此可以认为在脑缺血时由L-PGDS或H-PGDS产生的PGD2通过由其受体介导的作用而发挥脑保护的作用。
此外，报道了，半乳糖基神经酰胺酶缺损引起的脱髓鞘疾病克拉伯病的模型小鼠(Twitcher小鼠)中，在对脱髓鞘显示抗性的轴突区被观察到L-PGDS基因表达的上升，如果进一步导入L-PGDS的缺损，则会发生少突胶质细胞的消失引起的脱髓鞘的重症化(TaniikeM.et al.,J.Neurosci.22,4885-4896,2002)。另外报道了，在L-PGDS缺损小鼠中，诱导末梢神经的脱髓鞘，发现作为雪旺氏细胞的PGD2受体的Gpr44对神经髓鞘化是必须的(TrimarcoA.et al.,Nature Neurosci.17,1682-1992,2014)。由这些发现可以认为，少突胶质细胞(中枢神经)或雪旺氏细胞(末梢神经)中的神经轴索髓鞘化及其维持中，L-PGDS及其产物的PGD2是必须的。
此外，还报道了，关于通过L-PGDS的保护作用，不限于神经细胞，作为PGD2的代谢产物的15-脱氧-前列腺素J2也可以避免过氧化应激引起的胃肠道神经胶质细胞的细胞死亡(Abdo H.et al.,J.Physiol.590,2739-2750,2012)。
另外，自古以来已知由L-PGDS合成的脑内PGD2具有睡眠调节作用(Ueno R.etal.,Biochem.Biophys.Res.Commun.109,576-582,1982)。关于其机理，由日本的研究者进行了详细研究，其结果被认为是由于PGD2经由眼底部蛛网膜DP1受体而分泌腺苷，从而刺激睡眠中枢的缘故。L-PGDS对作为酶产物的PGD2具有高的亲和性，因此被推测确保脑脊髓液中的PGD2的稳定性并且将PGD2向附近的受体输送(Urade Y.and Hayaishi O.,Biochim.Biophys.Acta 1482,259-271,2000)，被认为极大参与经由PGD2的睡眠调节。
如上所述，L-PGDS被认为是作为合成PGD2的酶蛋白质发挥作用，并且发挥脑内的各种疏水性低分子的结合、输送和作为清除剂的作用，具有脑内环境调整、脑保护功能和睡眠调节功能等各种功能的蛋白质。因此可以认为，促进L-PGDS的产生使得这些功能有效地发挥，对于L-PGDS相关的疾病的预防、治疗等有用。然而，目前为止，还没有在生物体内促进L-PGDS的产生的物质的报道。
虽然在本发明中，确认了痘苗病毒接种炎症组织提取物(本提取物)具有优异的L-PGDS产生促进作用，但关于本提取物或含有本提取物的制剂已知有非常多的作用、效果。例如作为本提取物对脑的作用、效果，已知有对脑梗塞等缺血性疾病的治疗效果(日本特开2000－16942号公报)和BDNF等的神经营养因子的产生促进作用(国际公开WO2011/162317号公报)，但本提取物具有L-PGDS的产生促进作用目前为止是未知的。
发明内容
发明要解决的技术问题
本发明提供促进具有脑保护作用、睡眠作用等的L-PGDS的产生的物质、以及以L-PGDS产生促进作用为指标的具有脑保护作用、睡眠作用等的药剂的筛选体系等。另外，提供含有该物质作为有效成分的、在脑梗塞等的脑血管障碍、阿尔茨海默氏病等的认知症、失眠症等的L-PGDS参与的疾病的预防、治疗或复发预防中，有效且安全性高的医药品。此外，本发明涉及的L-PGDS产生促进剂具有抑制、缓和脑血管障碍时等的脑的缺血障碍、神经细胞损伤等的作用。此外，本发明中使用的“治疗”包括“减轻”、“改善”、“进展抑制”等的意思。另外，本发明中有时将具有睡眠作用的药剂记作“安眠药”，但被称为“睡眠剂”、“睡眠改善药”、“睡眠导入剂”、“催眠药”的物质也可以包括在本发明中。
用于解决技术问题的技术方案
本发明的发明人由利用小鼠脑梗塞模型(大脑中动脉永久性闭塞模型)的研究，在通过血流的阻断而成熟神经细胞不断死亡的梗塞区域内，发现了能够分化成包括神经细胞、星形胶质细胞、少突胶质细胞等的神经系统细胞在内的各种细胞的干细胞，将其命名为缺血诱导性多能性干细胞(ischemia-induced multipotent stem cells,iSCs)。通过在iSC中强表达的神经干细胞标志物巢蛋白(nestin)在组织化学上分布于脑软膜至大脑皮质的血管周围；另外，iSC表达PDGFRβ(血小板源性生长因子受体β)、NG2(神经胶质抗原2，neuron-glial antigen 2)这样的血管周细胞(周细胞，pericyte)标志物等，因此可以认为iSC的来源是分布于血管周围的周细胞。周细胞与神经细胞、星形胶质细胞、血管内皮细胞一起，构成作为脑的功能性的器质性基本单元的神经血管单元(neurovascular unit，NVU)，被认为发挥参与血脑屏障的形成、维持和神经功能的调节、脑内排出系统(glymphatic system)等的重要作用。表示iSC在缺血等的脑损伤时周细胞被重编程而产生，由于血管内皮细胞等所形成的微小环境而分化成神经细胞。由此可以认为iSC是中风后的血流再建后的神经修复中发挥主要作用的干细胞。
本发明的发明人作为使用iSC的研究的一环，进行了痘苗病毒接种家兔炎症皮肤提取物(本提取物)对iSC的作用的研究。而且，在iSC中添加本提取物培养后，进行了利用约2万8千个基因的DNA芯片的全面的基因表达解析，结果发现本提取物具有选择性表达促进编码L-PGDS的基因PTGDS的作用。另外，在蛋白质水平上，也确认了本提取物促进L-PGDS的产生。此外，通过免疫组织化学方法研究的结果，缺血脑中表达的L-PGDS显示与周细胞标志物共分布。由此可以认为L-PGDS来自于周细胞或从周细胞脱分化的iSC。
如上所述，L-PGDS被认为是发挥作为合成PGD2的酶蛋白质的作用、并且主要在脑内表达、且发挥各种疏水性低分子的结合、输送和作为清除剂的作用、并具有脑内环境调整、脑保护功能和睡眠调节功能等各种功能的蛋白质。由此可以认为L-PGDS产生促进剂作为脑梗塞等的脑血管障碍、阿尔茨海默氏病等的认知症、失眠症等的L-PGDS所参与的疾病的预防、治疗或复发预防药物有用。本提取物被确认具有优异的L-PGDS产生促进作用，使阿尔茨海默型认知症模型小鼠的脑内的L-PGDS量增加，并且使Aβ量减少，进而改善认知功能。因此，本提取物或本提取物中所含有的具有L-PGDS产生促进作用的物质、或含有本提取物的制剂作为L-PGDS产生促进剂非常有用。
另外，本发明的发明人发现以iSC的L-PGDS产生促进作用为指标，作为对L-PGDS所参与的疾病的治疗有用的药剂的筛选方法有用。该筛选方法被认为特别有助于具有脑保护作用或睡眠作用的药剂的开发。另外，本发明提供以iSC的L-PGDS产生促进作用为指标、对本提取物或含有本提取物的制剂进行试验，由此判定或评价本提取物或含有本提取物的制剂的作用、效果，进而确保本提取物或含有本提取物的制剂的药效的方法。本发明的发明人基于以上的发现，完成了本发明。
即，本发明包括例如下述的方案。
(1)一种脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶产生促进剂。
(2)如上述(1)所述的脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶产生促进剂，其含有在痘苗病毒接种炎症组织提取物中。
(3)如上述(1)所述的脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶产生促进剂，其含有痘苗病毒接种炎症组织提取物。
(4)如上述(1)～(3)中任一项所述的脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶产生促进剂，其中，脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶是在周细胞或从周细胞脱分化得到的缺血诱导性多能性干细胞中产生的。
(5)如上述(1)～(4)中任一项所述的脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶产生促进剂，其为脑保护药物。
(6)如上述(5)所述的脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶产生促进剂，其中，脑保护药物的作用是通过对脑内排出系统的增强作用带来的。
(7)如上述(5)或(6)所述的脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶产生促进剂，其中，脑保护药物为脑梗塞的预防、治疗或复发预防药物。
(8)如上述(5)或(6)所述的脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶产生促进剂，其中，脑保护药物为认知症的预防、治疗药物。
(9)如上述(8)所述的脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶产生促进剂，其中，认知症为阿尔茨海默型认知症。
(10)如上述(9)所述的脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶产生促进剂，其具有淀粉样蛋白β沉积的抑制作用。
(11)如上述(1)～(4)中任一项所述的脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶产生促进剂，其为安眠药。
(12)如上述(2)～(11)中任一项所述的脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶产生促进剂，其中，炎症组织为兔的炎症皮肤组织。
(13)如上述(1)～(12)中任一项所述的脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶产生促进剂，其为注射剂。
(14)如上述(1)～(12)中任一项所述的脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶产生促进剂，其为口服剂。
(15)一种具有脑保护作用或睡眠作用的物质的筛选方法，其以脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶的表达促进作用作为指标。
(16)如上述(15)所述的筛选方法，其中，以周细胞或从周细胞脱分化得到的缺血诱导性多能性干细胞中的脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶的表达促进作用作为指标。
(17)如上述(15)或(16)所述的筛选方法，其中，具有脑保护作用的物质为脑梗塞的预防、治疗或者复发预防药物或者认知症的预防、治疗药物。
(18)如上述(17)所述的筛选方法，其中，认知症为阿尔茨海默型认知症。
(19)如上述(15)或(16)所述的筛选方法，其中，具有睡眠作用的物质为安眠药。
(20)通过上述(15)～(19)中任一项所述的筛选方法得到的具有脑保护作用或睡眠作用的物质。
(21)如上述(20)所述的物质，其中，脑保护作用是通过淀粉样蛋白β的排出作用带来的。
(22)痘苗病毒接种炎症组织提取物或含有其的制剂的判定或评价方法，其以脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶的表达促进作用作为指标。
(23)如上述(22)所述的判定或评价方法，其以周细胞或从周细胞脱分化得到的缺血诱导性多能性干细胞中的脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶的表达促进作用作为指标。
(24)如上述(22)或(23)所述的判定或评价方法，其中，炎症组织为兔的炎症皮肤组织。
(25)通过进行上述(22)～(24)中任一项所述的判定或评价来确保痘苗病毒接种炎症组织提取物或含有其的制剂的品质规格的方法。
(26)一种痘苗病毒接种炎症组织提取物或含有其的制剂，其通过进行上述(22)～(24)中任一项所述的判定或评价而确保了品质规格。
(27)一种脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶的产生促进方法，其包括向需要该治疗的患者投予痘苗病毒接种炎症组织提取物的有效量。
(28)如上述(27)所述的脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶的产生促进方法，其中，脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶是在周细胞或从周细胞脱分化得到的缺血诱导性多能性干细胞中产生的。
(29)如上述(27)或(28)所述的脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶的产生促进方法，其中，脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶的产生促进发挥用于脑保护或睡眠导入、改善的作用。
(30)如上述(29)所述的脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶的产生促进方法，其中，脑保护为脑梗塞的预防、治疗或复发预防。
(31)如上述(29)所述的脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶的产生促进方法，其中，脑保护为认知症的预防、治疗。
(32)如上述(31)所述的脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶的产生促进方法，其中，认知症为阿尔茨海默型认知症。
(33)一种痘苗病毒接种炎症组织提取物，其用于脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶的产生促进。
(34)如上述(33)所述的痘苗病毒接种炎症组织提取物，其中，脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶是在周细胞或从周细胞脱分化得到的缺血诱导性多能性干细胞中产生的。
(35)如上述(33)或(34)所述的痘苗病毒接种炎症组织提取物，其中，脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶的产生促进用于脑保护或睡眠导入、改善。
(36)如上述(35)所述的痘苗病毒接种炎症组织提取物，其中，脑保护为脑梗塞的预防、治疗或复发预防。
(37)如上述(35)所述的痘苗病毒接种炎症组织提取物，其中，脑保护为认知症的预防、治疗。
(38)如上述(37)所述的痘苗病毒接种炎症组织提取物，其中，认知症为阿尔茨海默型认知症。
(39)痘苗病毒接种炎症组织提取物在促进脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶的产生的医药的制造中的用途。
(40)如上述(39)所述的用途，其中，脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶是在周细胞或从周细胞脱分化得到的缺血诱导性多能性干细胞中产生的。
(41)如上述(39)或(40)所述的用途，促进脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶的产生的医药为脑保护药物或安眠药。
(42)如上述(41)所述的用途，其中，脑保护药物为脑梗塞的预防、治疗或复发预防药物。
(43)如上述(41)所述的用途，其中，脑保护药物为认知症的预防、治疗药物。
(44)如上述(43)所述的用途，其中，认知症为阿尔茨海默型认知症。
发明的效果
本发明L-PGDS产生促进剂通过增强周细胞或iSC表达的L-PGDS的作为脂质运载蛋白的功能，发挥作为排出脑内的各种疏水性分子的转运蛋白的作用，强烈期待发挥保护脑不受被认为是脑缺血时的损伤或认知症的原因的物质的损害的作用。另外，本发明L-PGDS产生促进剂在脑脊髓液中分泌在细胞内合成的PGD2，通过向脑内的PGD2受体输送，被期待发挥睡眠调节作用等。特别是得知了本提取物在小鼠的缺血脑中促进L-PGDS的产生，此外，确认了通过将本提取物向阿尔茨海默型认知症模型小鼠投予，脑内的L-PGDS量上升，并且Aβ量减少，认知功能改善。这样，本提取物促进L-PGDS的产生并具有优异的药理作用在动物实验中也得到了确认。另外，含有本提取物的制剂作为副作用等问题少的安全性高的药剂被长年使用。因此，本发明的有用性极高。
另外，本提取物是包含数量非常庞大的成分的多成分体系的物质，所以通过单一或多个含有成分的含量等判定或评价其作用、确保药效等极为困难。该点，根据以本发明的L-PGDS的表达促进作用作为指标的本提取物或含有本提取物的制剂的判定或评价方法，能够简便地判定或评价本提取物或含有本提取物的制剂的作用，进而能够用于确保本提取物或含有本提取物的制剂的药效。从这一方面而言，本发明的有用性也高。此外，本发明中的“判定或评价”包括通过试验、检查等调查对象物来确定效果、作用、是否适用等的全部概念。
附图说明
图1是表示通过实时RT-PCR法调查添加受试物质的培养iSC的L-PGDS基因(PTGDS)的表达量的结果的图表。
图2是表示通过经典的RT-PCR法调查添加受试物质的培养iSC的L-PGDS基因(PTGDS)的表达量的结果的电泳图。
图3是表示通过蛋白质印迹法调查添加受试物质的培养iSC的L-PGDS蛋白的表达量的结果的电泳图。
图4是表示通过斑点印迹法调查添加受试物质的培养iSC的L-PGDS蛋白的表达量的结果的PVDF膜。
图5是表示通过ELISA法调查添加受试物质的培养iSC的L-PGDS蛋白的表达量的结果的图表。
图6是表示通过液相色谱质谱法调查添加受试物质的培养iSC的细胞提取液中的前列腺素类量的结果的图表。
图7是表示在添加受试物质的培养iSC的培养上清中添加L-PGDS的底物后，通过液相色谱质谱法调查反应产物量的结果的图表。
图8是通过免疫组织化学染色法比较实施了缺血负荷的小鼠的脑内的L-PGDS、周细胞和血管内皮细胞的分布的结果的图像。
图9是表示通过免疫电子显微镜法观察实施了缺血负荷的小鼠的脑内的L-PGDS的分布的结果的图像。
图10是通过免疫组织化学染色法比较从人脑梗塞灶提取的培养iSC的L-PGDS和神经干细胞标志物巢蛋白的分布的结果的图像。
图11是表示通过免疫组织化学染色法调查投予了受试物质的阿尔茨海默型认知症模型小鼠脑内沉积的淀粉样蛋白β的结果的图像。
图12是表示通过免疫组织化学染色法调查投予了受试物质的阿尔茨海默型认知症模型小鼠脑内的L-PGDS的结果的图像。
图13是表示通过免疫组织化学染色法比较投予了受试物质的阿尔茨海默型认知症模型小鼠脑内的L-PGDS和血管内皮细胞的分布的结果的图像。
图14是表示通过蛋白质印迹法调查投予了受试物质的阿尔茨海默型认知症模型小鼠脑内的淀粉样蛋白β和L-PGDS蛋白的表达量的结果的电泳图。
图15是表示通过经典的RT-PCR法调查添加了受试物质的培养周细胞的L-PGDS基因(PTGDS)的表达量的结果的电泳图。
具体实施方式
本提取物是含有从接种痘苗病毒并发痘的动物的发炎组织提取分离的非蛋白性的活性物质的提取物。本提取物在提取状态下是液体，但也能够通过干燥制成固体。本制剂作为医药品是非常有用的。作为本制剂，在申请人在日本制造并销售的具体的商品中，有“含有接种痘苗病毒的家兔的炎症皮肤的提取液的制剂”(商品名：神经妥乐平/NEUROTROPIN〔注册商标〕)(以下称为“神经妥乐平”。)。神经妥乐平中有注射剂和片剂，都为医疗用医药品(ethical drug)。
神经妥乐平的注射剂的适应症为“腰痛症、颈肩腕综合症、症状性神经痛、伴随皮肤疾病(湿疹、皮炎、荨麻疹)的瘙痒、过敏性鼻炎、亚急性脊髓视神经病(SMON)后遗症状的寒冷感、感觉异常、疼痛”。神经妥乐平的片剂的适应症为“带状疱疹后遗神经痛、腰痛症、颈肩腕综合症、肩周炎、变形性关节症”。本制剂是申请人创制并作为医药品开发出来的，其有效性和安全性上的优异特长受到赞赏，已经销售多年，并已经在日本医药品市场中确立了稳固的地位。
本发明中的痘苗病毒接种炎症组织提取物能够通过如下操作得到：接种痘苗病毒，将发痘的炎症组织破碎，加入提取溶剂，除去组织碎片后，进行除蛋白处理，使其吸附于吸附剂，然后将有效成分洗脱。即，例如为如下的工序。
(A)收集接种痘苗病毒并使其发痘的兔、小鼠等的皮肤组织等，将发痘组织破碎，加入水、苯酚水、生理盐水或苯酚加甘油水等提取溶剂后，通过过滤或离心分离，得到提取液(滤液或上清液)。
(B)将上述提取液调整为酸性的pH并加热，进行除蛋白处理。接着，将除蛋白后的溶液调整为碱性并加热后，进行过滤或离心分离。
(C)使所得到的滤液或上清液成为酸性，使其吸附于活性炭、高岭土等吸附剂。
(D)在上述吸附剂中加入水等提取溶剂，调整为碱性的pH，将吸附成分洗脱，由此能够得到痘苗病毒接种炎症组织提取物。然后，根据希望，适当将洗脱液在减压下蒸发干燥固化或冻结干燥，由此也能够得到干燥固化物。
作为用于接种痘苗病毒得到炎症组织的动物，能够使用兔、牛、马、绵羊、山羊、猴、大鼠、小鼠等感染痘苗病毒的各种动物，作为炎症组织，优选兔的炎症皮肤组织。兔只要是属于兔目即可，可以使用任何兔子。作为例子，有：穴兔(Oryctolagus cuniculus)、家兔(驯养的穴兔)、野兔(日本野兔)、鼠兔、雪兔等。其中，适合使用家兔。在日本，有从过去被饲养的作为家畜或实验用动物而频繁使用的称为家养兔(イエウサギ)的兔，这也是家兔的别称。在家兔中存在多个品种(breed)，能够优选使用称为日本白色种和新西兰白色种(新西兰白)的品种。
痘苗病毒(vaccinia virus)可以是任意株的痘苗病毒。作为例子，可以列举李斯特(Lister)株、大连(Dairen)株、池田(Ikeda)株、EM-63株、纽约市公众卫生局(New YorkCity Board of Health)株等。
关于上述的本提取物的基本的提取工序(A)～(D)，更详细而言，例如，能够作为如下的工序实施。
关于工序(A)
在兔的皮肤中将痘苗病毒进行皮内接种使其发痘，收集炎症皮肤组织。收集的皮肤组织以苯酚溶液等进行清洗、消毒。将该炎症皮肤组织破碎，加入其1至5倍量的提取溶剂。其中，所谓破碎是指使用绞碎机等细细地破碎为肉末状。另外，作为提取溶剂，能够使用蒸馏水、生理盐水、弱酸性至弱碱性的缓冲液等，也可以适当添加苯酚等的杀菌－防腐剂、甘油等的稳定剂、氯化钠、氯化钾、氯化镁等的盐类等。此时，也能够通过冷冻融化、超声波、细胞膜溶解酶或表面活性剂等的处理来破坏细胞组织，使提取变得容易。将得到的悬浮液放置5日至12日。在该期间，可以边适当搅拌或不搅拌边加温到30至45℃。通过对得到的液体进行固液分离(过滤或离心分离等)除去组织碎片，得到粗提取液(滤液或上清液)。
关于工序(B)
对在工序(A)中得到的粗提取液进行除蛋白处理。除蛋白能够由通常进行的公知方法实施，能够应用加热处理、利用蛋白质变性剂(例如酸、碱、脲、胍、丙酮等有机溶剂等)的处理、等电点沉淀、盐析等的方法。接着，利用除去不溶物的通常方法，例如使用滤纸(纤维素、硝酸纤维素等)、玻璃过滤器、硅藻土、塞茨过滤板(Seitz filter)等的过滤、超滤、离心分离等，得到除去了析出的不溶蛋白质的滤液或上清液。
关于工序(C)
将在工序(B)中得到的滤液或上清液调整为酸性、优选调整为pH3.5至5.5，进行向吸附剂的吸附操作。作为能够使用的吸附剂，能够列举活性炭、高岭土等，在提取液中添加吸附剂进行搅拌，或使提取液通过吸附剂填充柱，能够使有效成分吸附于该吸附剂。在提取液中添加吸附剂时，通过过滤或离心分离等除去溶液，能够得到吸附有活性成分的吸附剂。
关于工序(D)
为了使活性成分从工序(C)中得到的吸附剂中洗脱(脱离)，在该吸附剂中加入洗脱溶剂，调整为碱性、优选调整为pH9至12，在室温或适当加热、或者搅拌进行洗脱，以过滤或离心分离等通常的方法除去吸附剂。作为所使用的洗脱溶剂，能够使用碱性溶剂，例如，能够使用调整为碱性pH的水、甲醇、乙醇、异丙醇等或它们的适当的混合溶液，能够优选使用调整为pH9至12的水。洗脱溶剂的量能够适当设定。为了将这样操作得到的洗脱液作为原药使用，能够将pH适当地调整到中性附近等，最终得到接种痘苗病毒的兔炎症皮肤提取物(本提取物)。
本提取物在制成时为液体，因此也能够通过适当浓缩、稀释制成所希望浓度的提取物。从本提取物制造制剂时，优选实施加热灭菌处理。为了制成注射剂，例如，能够加入氯化钠等配制与生理盐水等渗的溶液。另外，也能够通过以液体或凝胶等的状态口服给药，也能够通过对本提取物进行适当的浓缩干燥固化等的操作，制造片剂等的口服用固体制剂。从本提取物制造这样的口服用固体制剂的具体方法记载于日本专利第3818657号和日本专利第4883798号的说明书中。这样操作得到的注射剂或口服用制剂等是本制剂的例子。
作为向患者的给药方法，没有特别限定，可以根据治疗目的适当选择。例如除了口服给药以外，还可以列举皮下、肌肉内、静脉内给药、经皮给药等，给药量可以根据痘苗病毒接种炎症组织提取物的种类适当设定。关于市售的制剂中确认的给药量，基本上以内服时为1天16NU，注射剂时1天投予3.6至7.2NU的方式作为医疗用医药品进行了表示，但可以根据疾病的种类、重症度、患者的个人差异、给药方法、给药期间等适当增减(NU：神经妥乐平单位。神经妥乐平单位是使用疼痛阈值比正常动物低的慢性应激动物的SART应激小鼠，根据炎症足加压(Randall-Selitto)改良法进行试验，以镇痛效力的ED50值进行规定的。1NU为表示ED50值为100mg/kg时的神经妥乐平制剂的含有镇痛活性的成分1mg的活性。)。
以下，表示本提取物的制造方法的例子、以及本提取物的关于新型的药理作用、L-PGDS产生促进作用的药理试验结果，但本发明不受这些实施例的记载的任何限制。
实施例
实施例1本提取物的制造
在健康的成熟家兔的皮肤中皮内接种痘苗病毒，切下并采集发痘的皮肤。将采集的皮肤以苯酚溶液进行清洗、消毒后，除去多余的苯酚溶液，进行破碎，加入苯酚溶液混合，放置3～7日后，进而边搅拌3～4天，边加温至35～40℃。然后，利用盐酸将固液分离得到的提取液调整为pH4.5～5.2，以90～100℃加热处理30分钟后，过滤除去蛋白。再利用氢氧化钠将滤液调整为pH9.0～9.5，以90～100℃加热处理15分钟后，进行固液分离。
利用盐酸将所得到的除蛋白液调整为pH4.0～4.3，加入除蛋白液质量的2％量的活性炭，搅拌2小时后，进行固液分离。在采集的活性炭中加水，利用氢氧化钠调整为pH9.5～10，以60℃搅拌90～100分钟后，进行离心分离得到上清液。向通过离心分离而沉淀的活性炭再加入水，之后利用氢氧化钠调整为pH10.5～11，以60℃搅拌90～100分钟，之后进行离心分离，得到上清液。合并两上清液，利用盐酸中和，得到本提取物。
实施例2药理试验
接着，表示使用上述实施例1中得到的本提取物作为受试物质的关于L-PGDS产生促进作用的药理试验的方法和结果。此外，在下述的药理试验中，关于脑梗塞向C.B-17小鼠的导入、从该脑梗塞灶的iSC的分离培养，根据Nakagomi,T.et al.Eur.J.Neurosci.,29,1842_1852,2009中记载的方法进行。
试验例1：受试物质处理iSC中的综合基因表达解析
对C.B-17小鼠(3只)实施大脑中动脉闭塞造成的缺血负荷，在第3天由梗塞巢分离3株iSC。对于添加了各个培养iSC(2％胎牛血清(FBS)、20ng/mL成纤维细胞增殖因子(FBS)、20ng/mL上皮生长因子(EGF)和1％N2添加剂(supplement)的Dulbecco改良的Eagle培养基F12(2％FBS DMEM/F12 F/E/N)、
)添加受试物质(50、1000mNU/mL)或生理盐水(对照)，在培养第4天通过RNeasy〔注册商标、以下同样〕Mini Kit(QIAGEN公司)回收总RNA(全部9个培养)。在综合基因表达解析中，使用小鼠用的基因芯片SurePrint G3Mouse GE微阵列8×60K(24,321种RNA和4,576种非编码RNA、GE公司)，通过受试物质的添加，筛选3株均在两个浓度下显示相同方向1/2以下的降低或2倍以上的表达变化的基因。结果作为所筛选的各基因相对于对照的表达量比来表示(3株的平均值±标准误差)。将结果的一例表示于表1。
[表1]
上述解析的结果，如表1所示，筛选到显示表达减少的COCH基因以及显示表达上升的GBP6基因和PTGDS基因的合计3个基因。它们之中，编码L-PGDS的PTGDS基因的表达量对于受试物质显示强的用量依赖性。
试验例2－1：对L-PGDS基因表达的评价(实时RT-PCR法)
与试验例1同样，对培养iSC(不含FBS的DMEM/F12 F/-/-、
)添加受试物质(50、500mNU/mL)或生理盐水(对照)(n＝1)，培养7天后，通过Isogen II〔注册商标〕按照制造商(Nippon Gene公司)的手册回收RNA。以260nm和280nm的吸光度为指标检验RNA纯度后，在随机引物存在下通过SuperScript〔注册商标、以下同样〕IV RTase(Invitrogen公司)进行逆转录反应，得到对总RNA的单链cDNA。对所得到的cDNA，通过使用PTGDS特异性引物的定量PCR法(Prism〔注册商标〕7900HT、Applied Biosystems公司)，以持家基因β-肌动蛋白为标准进行转录产物的定量(阈值再循环比较法)。其中，使用的PTGDS和β-肌动蛋白用引物的序列如下〔PTGDS：5'-gactctgaaggacgagctgaag-3'(序列编号1)、5'-tcttgaatgcacttatccggttgg-3'(序列编号2)、·-肌动蛋白：5'-tacagcttcaccaccacagc-3'(序列编号3)、5'-aaggaaggctggaaaagagc-3'(序列编号4)〕。结果以对照为1时的PTGDS相对于·-肌动蛋白的表达量比来表示。将结果的一例表示于表2和图1。
[表2]
从表2和图1可知，与试验例1所示的结果同样，确认到受试物质在iSC中用量依赖性地促进L-PGDS基因(PTGDS)的表达。
试验例2－2：对L-PGDS基因表达的评价(经典的RT-PCR法)
在0(对照；生理盐水)、1、5、50、100mNU/mL的各用量的受试物质存在下，用含有FGF的培养基(DMEM/F12 F/-/-)或不含FGF的培养基(DMEM/F12-/-/-)对iSC培养4天。对通过RNeasy Mini Kit(QIAGEN公司)回收得到的总RNA，通过使用SuperScript III One-StepRT-PCR System with Platinum(Invitrogen公司)的经典的RT-PCR法对L-PGDS基因(PTGDS)的表达量进行半定量(35个循环)。将PCR产物用2％琼脂糖凝胶电泳分离，将PTGDS和GAPDH的条带用溴乙锭染色并可视地进行检测。其中，所使用的PTGDS和GAPDH用引物的序列如下〔PTGDS：5'-cctccaactcaagctggttc-3'(序列编号5)、5'-atagttggcctccaccactg-3'(序列编号6)、GAPDH：5'-atcactgccacccagaagac-3'(序列编号7)、5'-cacattgggggtaggaacac-3'(序列编号8)〕。将结果的一例表示于图2。
关于iSC中的L-PGDS基因(PTGDS)表达促进作用，用更细致的受试物质的用量进行调查，结果如图2所示，受试物质与培养基是否含有FGF无关，用量依赖性地使L-PGDS基因的表达量增加。
试验例3－1：对L-PGDS蛋白的表达的评价(蛋白质印迹法)
将iSC在血清非存在下添加受试物质(0、1、5、50、100mNU/mL)培养4天(DMEM/F12F/-/-、
)后回收，用磷酸缓冲液清洗后，通过RIPA缓冲液(4℃、50mMTris盐酸缓冲液(pH 7.6)、150mM氯化钠、1％Nonidet〔注册商标〕P-40(NP-40)、0.5％脱氧胆酸钠和0.1％十二烷基硫酸钠)溶解，进行匀浆。调整使得总蛋白量均一后，将匀浆液用SDS-PAGE(BIO-RAD Any kD(商标))分离，转印到聚偏二氟乙烯(PVDF)膜(Immun-Blot PVDF膜、BIO-RAD公司)，用Bloking One(nacalai tesque公司)封闭后，通过使用特异性抗体的蛋白质印迹法，检测L-PGDS(抗前列腺素D合酶(脂质运载蛋白)抗体(anti-ProstaglandinD Synthase(Lipocalin)antibody)[EP12357]、Abcam公司、1﹕2000)和β-肌动蛋白(β-肌动蛋白单克隆抗体(Monoclonal anti-β-Actin)[A1978]、Sigma公司、1﹕100000)。检测使用高灵敏度化学发光法(Chemi-Lumi One L,nacalai tesque公司)。将结果的一例表示于图3。
从图3可知，确认到受试物质促进iSC细胞内的L-PGDS蛋白的表达。
试验例3－2：对L-PGDS蛋白的表达的评价(斑点印迹法)
将由受试物质(0、1、10、50、100mNU/mL)培养了4天(DMEM/F12F/-/-、
)的iSC的培养上清500μL点样到PVDF膜(Immun-Blot PVDF膜、BIO-RAD公司)上，用Bloking One(nacalai tesque公司)封闭后，通过使用抗L-PGDS抗体(抗前列腺素D合酶(脂质运载蛋白)抗体[EP12357]、Abcam公司、1﹕2000)的斑点印迹法，检测L-PGDS。将结果的一例表示于图4。
L-PGDS在其N末端具有典型的分泌信号序列和信号肽酶识别序列，因此被认为分泌到细胞外。因此，测定添加了受试物质的iSC的培养上清中的L-PGDS蛋白，结果如图4可知，确认了培养上清中(细胞外)的L-PGDS蛋白量也依赖于受试物质的添加用量而增加。
试验例3－3：对L-PGDS蛋白质的表达的评价(ELISA法)
将由受试物质(0〔对照〕、1、10、50、100、1000mNU/mL)处理了4天的iSC的培养(DMEM/F12 F/-/-、
)的上清回收。离心分离(1500rpm、10分钟、4℃)后，使用特异性ELISA法(人L-PGDS用ELISA试剂盒(Prostaglandin D Synthase 21kDa(Brain)、型号：SEA724Hu、Cloud-Clone Corp.)按照制造者的手册测定培养上清中的L-PGDS量。将结果的一例表示于表3和图5。
[表3]
由表3和图5可知，与试验例3－2同样，在由受试物质处理了的iSC的培养上清(细胞外)中，确认到了L-PGDS蛋白量增加。由试验例3的结果可以确认到受试物质在iSC中不仅在基因水平，而且在蛋白水平上都促进L-PGDS的产生，进而确认到使所产生的L-PGDS分泌。
试验例4：对L-PGDS的酶活性的评价(液相色谱(HPLC)质谱法)
L-PGDS是以PGH2作为底物而生物合成PGD2的酶(EC5.3.99.2)。为了确认在iSC中由受试物质促进产生的L-PGDS通过其酶活性进而产生PGD2，对iSC的A：细胞内和B：细胞外，PGD2及其代谢产物、以及与PGD2同样以PGH2作为底物所产生的PGE2等的前列腺素类进行了全面的分析。
A：iSC细胞内酶活性的评价
从添加受试物质(0、10、50mNU/mL)培养3天(不含FBS的DMEM/F12 F/-/-、
)的iSC中，通过RIPA缓冲液处理(4℃、20min)制备细胞提取液。通过HPLC质谱法，分别测定细胞内提取液中的前列腺素类(PGD2、PGJ2、15-脱氧-Δ12,14-PGJ2、13,14-二氢-15-酮-PGD2和PGE2)的浓度。HPLC分离使用AQUITY UPLC HSS T3色谱柱(Waters公司)，作为检测器和质谱仪分别使用API4000 LC/MS/MS系统和TripleQuadrupole(均为AB Sciex公司)。将结果的一例表示于表4和图6。
[表4]
〔n＝3〕
如表4和图6所示，PGD2及其非酶代谢产物PGJ2的细胞内水平随着添加受试物质而用量依赖性地增加。进而，在添加50mNU/mL的受试物质时，还确认到了PGJ2的非酶代谢产物的15-脱氧-Δ12,14-PGJ2的产生。此外，15-脱氧-Δ12,14-PGJ2的非酶代谢产物13,14-二氢-15-酮-PGD2在检测极限以下。另一方面，关于由与PGD2共通的底物PGH2产生的PGE2，没能观察到依赖于受试物质添加的用量的产生响应。B：iSC细胞外酶活性的评价
使L-PGDS的底物PGH2和谷胱甘肽(GSH)作用于将iSC添加受试物质(0、50、100、1000mNU/mL)培养3天(不含FBS的DMEM/F12 F/-/-、
)后的培养上清(反应条件：100mM Tris-HCl(pH8.0)、1mM GSH、10mM PGH2、37℃、5min)。与上述A.同样，通过HPLC质谱法，分别测定反应液中的前列腺素类(PGD2、PGJ2、15-脱氧-Δ12,14-PGJ2、13,14-二氢-15-酮-PGD2和PGE2)的浓度。将结果的一例表示于表5和图7。
[表5]
〔n＝1〕
如表5和图7所示，受试物质在100mNU/mL以上的浓度时使反应液中的PGD2及其非酶代谢产物PGJ2、15-脱氧-Δ12,14-PGJ2的浓度上升，因此确认到在iSC培养上清中存在L-PGDS活性。另外，关于15-脱氧-Δ12,14-PGJ2的非酶代谢产物13,14-二氢-15-酮-PGD2，通过添加到100mNU/mL为止的浓度范围的受试物质，观察到了用量依赖性地产生，但在1000mNU/mL时低于检测极限。
已知L-PGDS是分泌型酶，但由上述A.和B.的结果确认到iSC向细胞外释放具有酶活性的L-PGDS，通过添加受试物质，促进其产生和释放。
试验例5－1：小鼠脑内的L-PGDS产生细胞的研究(免疫组织化学染色法)
制作实施了由大脑中动脉闭塞带来的缺血负荷的C.B-17小鼠(缺血3天后)的脑切片，使用对L-PGDS(图片(panel)B、绿；抗前列腺素D合酶(脂质运载蛋白)抗体[EP12357]、Abcam公司、1﹕1000)、周细胞标志物α-SMA(图片C、红；抗肌动蛋白、平滑肌、克隆ASM-1、Millipore公司、1﹕1000)和血管内皮细胞标志物CD31(图片D、红；抗小鼠CD31(PECAM-1)单克隆抗体(anti-mouse CD31(PECAM-1)monoclonal antibody)、550274、BD Pharmingen公司、1﹕1000)的特异性抗体，进行利用共聚焦激光显微镜的免疫组织化学研究。通过多重染色法，分别用标记了不同的荧光色素的特异性抗体检测L-PGDS(图片B)和周细胞标志物(图片C)或L-PGDS(图片B)和血管内皮细胞标志物(图片D)，将图像重叠，对L-PGDS和周细胞标志物或L-PGDS和血管内皮细胞标志物的分布进行比较(图片A1、图片A2)。将结果的一例表示于图8。
在图8上段，图片B的绿色荧光表示L-PGDS的分布，图片C的红色荧光表示周细胞标志物的分布，但在将两者重叠的图片A1中，L-PGDS(绿色荧光)与周细胞标志物(红色荧光)的分布局部一致(200倍)。另外，在图8下段，图片B的绿色荧光表示L-PGDS的分布，图片D的红色荧光表示血管内皮细胞标志物的分布，在将两者重叠的图片A2中，L-PGDS(绿色荧光)尽管分布于血管内皮细胞标志物(红色荧光)的附近，但是没有得到显示共分布的观察(200倍)。
L-PGDS是主要分布于中枢神经系统的蛋白，存在于蛛网膜、软膜和侧脑室的脉络丛等，被认为分泌到脑脊髓液中(Urade Y.et al.,J Lipid Mediat.Cell Signal.14,71-82,1996)，但关于脑内产生细胞并未充分解明。本发明的发明人通过免疫组织化学的方法进行了有关L-PGDS的脑内分布的研究，结果C.B-17小鼠的正常脑中的表达微弱，但在上述试验例4－1中，在该小鼠中导入大脑中动脉的永久性结扎，则在脑梗塞灶确认到明显的L-PGDS表达(图8的图片B)。另外，在血管内皮细胞的标志物CD31的周围确认到L-PGDS的分布，但两者的分布不重合(图8的图片A2)。另一方面，得知L-PGDS显示与周细胞的标志物α-SMA的一部分共分布(图8的图片A1)。由以上的结果可以认为在脑梗塞灶中被表达诱导的L-PGDS来自于周细胞(或者iSC)。这可以通过如下事实得到验证：通过后述的试验例4－2的免疫电子显微镜法也确认到L-PGDS阳性产物在与血管内皮细胞和基底膜接触存在的周细胞的细胞质内作为电子密度高的结构物(图9的图片A和B)。由这些结果可以想象作为缺血响应中的周细胞或iSC的生理学的作用，包括L-PGDS的表达诱导。
试验例5－2：小鼠脑内的L-PGDS产生细胞的研究(免疫电子显微镜法)
制作实施了通过大脑中动脉闭塞带来的缺血负荷的C.B-17小鼠(缺血3天后)的脑切片，通过使用对L-PGDS(抗前列腺素D合酶(脂质运载蛋白)抗体[EP12357]、Abcam公司、1﹕1000)的特异性抗体的免疫电子显微镜法，观察L-PGDS的表达部位。具体而言，用振动切片机(Vibratome)制作2μm厚的脑切片，使用亲和素-生物素辣根过氧化物酶(HRP)复合物试剂盒(Vector Laboratories)和3,3'-二氨基联苯胺四盐酸盐(3,3'-diaminobenzidinetetrahydrochloride)(DAB)的反应后，进行锇处理，环氧树脂(EPON)包埋后，制作超薄切片进行电子显微镜观察。将结果的一例表示于图9。
在图9的图片A和B的任一图中，在对L-PGDS的免疫电子显微镜法中，在与血管内皮细胞和基底膜接触存在的血管周细胞(周细胞)的细胞质内，都确认到电子密度高的区域。
试验例6：人脑内的L-PGDS产生细胞的研究(免疫组织化学染色法)
根据Tatebayashi K.et al.,Stem Cells and Develop.26,787-797,2017中记载的方法，在从人脑梗塞灶(坏死组织)提取的培养iSC中，使用对L-PGDS(图片B、绿；抗前列腺素D合酶(脂质运载蛋白)抗体[EP12357]、Abcam公司、1﹕1000)和神经干细胞标志物巢蛋白(图片C、红；anti-巢蛋白、clone 10C2、Millipore公司、1﹕1000)的特异性抗体进行免疫组织化学的研究。细胞与Alexa Fluor〔注册商标、以下同样〕488-偶联抗体或Alexa Fluor555-偶联抗体(1﹕500；Molecular Probes、Eugene)反应后，进行利用4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole)(DAPI；1﹕1000；Kirkegaard&Perry Laboratories公司)的核染色。用荧光显微镜(Fluorescent microscope)(BX60；Olympus，Japan)进行荧光观察，将L-PGDS(图片B)和巢蛋白(图片C)的图像重叠，对L-PGDS和巢蛋白的分布进行比较(图片A)。将结果的一例表示于图10。
在图10中，图片B的绿色荧光表示L-PGDS的分布，图片C的红色荧光表示nesitin的分布，但在将两者重叠的图片A中，L-PGDS(绿色荧光)与巢蛋白(红色荧光)的分布一致(200倍)。即，确认到L-PGDS在表达巢蛋白的几乎所有iSC中都表达。由上可以认为L-PGDS不仅在小鼠脑中，而且在人脑中都在iSC或周细胞中产生。
试验例7：对阿尔茨海默型认知症模型动物的脑内淀粉样蛋白β沉积和L-PGDS表达
的评价
(1)关于认知能力的行动学解析和样品制备
将APPswe/PS1dE9(APP/PS1)小鼠(雌性3月龄)以各组体重均等的方式分为受试物质投予组和对照组(各组10～11只)，在约3个月里分别将受试物质(100NU/kg体重)或生理盐水每周2次尾静脉注射。最终投予后，进行关于认知能力的行动学解析(Y字迷宫试验、新奇物体识别试验和莫里斯水迷宫试验)。在各试验中，A：Y字迷宫试验中测定交替行动率(％)，B：新奇物体识别试验中测定对新奇物体的接触频度(％)，以及在C：莫里斯水迷宫试验中测定到学习期间的结束时的4天(第6～9天)发现平台所需的平均时间(秒)，对每个个体计算综合得分(A×B÷C)。将各组每2个个体的测定结果表示于表6。
[表6]
由表6可知，观察到了由受试物质投予组得到的认知能力的改善作用，该作用在组间在统计学上有显著差异。
关于认知能力的行动学解析后(最终投予24小时后)，在受试物质投予组和对照组中，在麻醉下断头，采集脑，将左半球用液氮浴急速冻结。另外，剩下的右半球通过(A)包含戊二醛的固定液(0.05％戊二醛、4％多聚甲醛、0.1M磷酸缓冲液)或(B)PLP固定液(0.01M偏高碘酸钠、0.075M赖氨酸、2％多聚甲醛)固定(4℃)。从固定组织标本通过低温恒温器(cryostats)(Leica CM1850)制作包含大脑皮质的冠状面切片(厚度20μm)。
(2)对大脑皮质中的淀粉样蛋白β沉积的评价(免疫组织化学染色法)
对上述(1)中制作的受试物质投予组和对照组的冠状面切片，进行利用抗淀粉样蛋白β抗体(抗β淀粉样蛋白(anti-β-amyloid)、1-16、[SIG-39300]、BioLegend公司、1﹕1000)的免疫组织化学染色。淀粉样蛋白β与Alexa Fluor 488偶联抗体(1﹕500；MolecularProbes、Eugene)反应后，进行利用4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI；1﹕1000；Kirkegaard&Perry Laboratories)的核染色，用荧光显微镜(BX60；Olympus,Japan)进行荧光观察。将结果的一例表示于图11。
如图11所示，在由受试物质投予确认了认知能力的改善的个体中，与对照组相比，脑淀粉样蛋白斑的数量和表面积降低。
(3)对大脑皮质中的L-PGDS表达的评价(免疫组织化学染色法)
对上述(1)中制作的受试物质投予组和对照组的冠状面切片，进行利用抗L-PGDS抗体(抗前列腺素D合酶(脂质运载蛋白)抗体[EP12357]、Abcam公司、1﹕1000)的免疫组织化学染色。L-PGDS使用亲和素-生物素辣根过氧化物酶(HRP)复合物试剂盒(VectorLaboratories公司)和3,3'-二氨基联苯胺四盐酸盐(DAB)的反应进行检测。将结果的一例表示于图12。
如图12所示，在受试物质投予组的脑中，在血窦(血管膣)附近确认到L-PGDS的特异染色(图片B的箭头部分)，相对于此，在对照组的脑中，没有确认到L-PGDS的特异染色(图片A)。
另外，对上述(1)中制作的受试物质投予组的冠状面切片，使用对L-PGDS(抗前列腺素D合酶(脂质运载蛋白)抗体[EP12357]、Abcam公司、1﹕1000)和血管内皮细胞标志物CD31(抗小鼠CD31(PECAM-1)单克隆抗体、550274、BD Pharmingen公司、1﹕1000)的特异性抗体进行免疫组织化学的研究。在结合了上述的一次抗体的切片中，在与Alexa Fluor 488-偶联抗体或Alexa Fluor 555-偶联抗体(1﹕500；Molecular Probes、Eugene)反应后，进行利用4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI；1﹕000；Kirkegaard&Perry Laboratories公司)的核染色，用共聚焦激光显微镜(LSM780；Carl Zeiss、Jena,Germany)进行荧光观察。通过多重染色法，将L-PGDS(图片B)和CD31(图片C)的图像重叠，对L-PGDS和CD31的分布进行比较(图片A)。将结果的一例表示于图13。
如图13所示，在受试物质投予组的脑中，确认到L-PGDS(绿色荧光)分布于血管内皮细胞标志物CD31(红色荧光)的周围。由此，可以认为在响应受试物质的投予、以覆盖血管内皮细胞的方式存在的周细胞(或iSC)中，L-PGDS的表达上升。
(4)对脑内淀粉样蛋白β沉积和L-PGDS表达的评价(蛋白质印迹法)
将上述(1)采集后急速冻结的左半球脑用Potter型匀浆器匀浆而提取的蛋白用SDS-PAGE(BIO-RAD Any kD(商标))分离，转印于PVDF膜(Immun-Blot PVDF膜、BIO-RAD公司)。用Bloking One(nacalai tesque公司)封闭后，通过利用特异性抗体的蛋白质印迹法，检测淀粉样蛋白β(anti-β-amyloid、1-16、[SIG-39300]、BioLegend公司、1﹕1000)和L-PGDS(抗前列腺素D合酶(脂质运载蛋白)抗体[EP12357]、Abcam公司、1﹕2000)。检测使用高灵敏度化学发光法(Chemi-Lumi One L,nacalai tesque公司)。将结果的一例表示于图14。
如图14的图片A※标记部分所示，关于脑内淀粉样蛋白β量，可以认为在通过受试物质投予确认到认知能力的改善的受试物质投予组的小鼠(个体编号4、29)中，与对照组的小鼠(个体编号14、30)相比减少。该结果与在试验例7(2)的免疫组织化学染色法(图11)中，相对于对照组，在投予受试物质时，脑内淀粉样蛋白β抗体阳性产物的数量和表面积尺寸被抑制的结果相关。另外，如图14的图片B＊标记部分所示，在受试物质投予组中脑内L-PGDS量与对照组相比增加，因此，可以认为受试物质增强了脑内L-PGDS产生。从上述试验例7的一系列的结果，通过受试物质使L-PGDS的脑内表达量增加，可以认为具有抑制脑内淀粉样蛋白β的沉积、进而改善认知功能的可能性。
试验例8：对来自人的周细胞中的L-PGDS表达促进原因的研究(经典的RT-PCR法)
如上所述，确认到对受试物质的响应性的iSC被认为来自于脑周细胞，因此在市售的来自人的周细胞株Human brain vascular pericytes(ScienCell公司)中，在不同的氧和/或葡萄糖浓度的条件下，调查受试物质的L-PGDS表达能力。具体而言，在0、50、500mNU/mL的各用量的受试物质存在下，分别在(1)iSC显示反应性的条件(4.5g/L葡萄糖和20％O2)、(2)低葡萄糖条件(90mg/L葡萄糖和20％O2)以及(3)低氧-低葡萄糖条件(90mg/L葡萄糖和1％O2)下，将iSC培养4天(不含FBS的DMEM培养基F/-/-)。对用RNeasy Mini Kit(QIAGEN公司)回收的总RNA，通过使用SuperScript III One-Step RT-PCR System with Platinum(Invitrogen公司)的经典的RT-PCR法，对L-PGDS基因(PTGDS)的表达量进行半定量(35个循环)。将PCR产物用2％琼脂糖凝胶电泳分离，用溴乙锭对PTGDS和β-肌动蛋白的条带进行染色而可视化检出。此外，PTGDS和β-肌动蛋白用引物使用与上述试验例2－1中使用的相同的引物。将结果的一例表示于图15。
如图15所示，虽然能够检测到条件(1)下培养的细胞的L-PGDS基因的转录，但没有观察到对受试物质的响应性。而在低氧(1％)且低葡萄糖浓度(90mg/L)的条件(3)下培养的细胞中，观察到了对受试物质明显的响应性。低氧-低葡萄糖条件被认为是模拟脑内的缺血状态，因此在这样的病理状态时可以认为周细胞(或者iSC)获得了对外界刺激的响应性，将L-PGDS这样的细胞保护性蛋白游离。
产业上的可利用性
L-PGDS主要在脑内表达，发挥着作为各种疏水性低分子的结合、输送和清除剂的作用，被认为是具有脑内环境调整、脑保护功能和睡眠调节功能等各种功能的蛋白质，因此本发明L-PGDS产生促进剂作为脑梗塞等的脑血管障碍、阿尔茨海默氏病等的认知症、失眠症等的L-PGDS参与的疾病的预防、治疗或复发预防药物有用。特别是本提取物和含有本提取物的制剂为优异的L-PGDS产生促进剂，并且作为副作用等问题少的安全性高的药剂，有用性高。另外，以周细胞或从周细胞脱分化得到的iSC中的L-PGDS产生促进作用作为指标，对L-PGDS参与的疾病的预防、治疗或复发预防有用的物质、特别是具有脑保护作用或睡眠作用的物质的本发明筛选方法是有助于开发新的治疗药物的非常有用的方法。
序列表
<110> 学校法人兵库医科大学
日本脏器制药株式会社
<120> 脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶产生促进剂
<130> FP-961
<160> 8
<210> 1
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<220>
<223> 发明人: 松山知弘; 中込隆之; 福田有
<400> 1
gactctgaag gacgagctga ag 22
<210> 2
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 2
tcttgaatgc acttatccgg ttgg 24
<210> 3
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 3
tacagcttca ccaccacagc 20
<210> 4
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 4
aaggaaggct ggaaaagagc 20
<210> 5
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 5
cctccaactc aagctggttc 20
<210> 6
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 6
atagttggcc tccaccactg 20
<210> 7
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 7
atcactgcca cccagaagac 20
<210> 8
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 8
cacattgggg gtaggaacac 20
Claims (24)
1.一种脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶产生促进剂。
2.如权利要求1所述的脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶产生促进剂，其特征在于：
在痘苗病毒接种炎症组织提取物中含有。
3.如权利要求1所述的脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶产生促进剂，其特征在于：
含有痘苗病毒接种炎症组织提取物。
4.如权利要求1～3中任一项所述的脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶产生促进剂，其特征在于：
脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶是在周细胞或从周细胞脱分化得到的缺血诱导性多能性干细胞中产生的。
5.如权利要求1～4中任一项所述的脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶产生促进剂，其特征在于：
其为脑保护药物。
6.如权利要求5所述的脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶产生促进剂，其特征在于：
脑保护药物的作用是通过对脑内排出系统的增强作用带来的。
7.如权利要求5或6所述的脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶产生促进剂，其特征在于：
脑保护药物为脑梗塞的预防、治疗或复发预防药物。
8.如权利要求5或6所述的脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶产生促进剂，其特征在于：
脑保护药物为认知症的预防、治疗药物。
9.如权利要求8所述的脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶产生促进剂，其特征在于：
认知症为阿尔茨海默型认知症。
10.如权利要求9所述的脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶产生促进剂，其特征在于：
具有淀粉样蛋白β沉积的抑制作用。
11.如权利要求1～4中任一项所述的脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶产生促进剂，其特征在于：
其为安眠药。
12.如权利要求2～11中任一项所述的脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶产生促进剂，其特征在于：
炎症组织为兔的炎症皮肤组织。
13.如权利要求1～12中任一项所述的脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶产生促进剂，其特征在于：
其为注射剂。
14.如权利要求1～12中任一项所述的脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶产生促进剂，其特征在于：
其为口服剂。
15.一种具有脑保护作用或睡眠作用的物质的筛选方法，其特征在于：以脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶的表达促进作用作为指标。
16.如权利要求15所述的筛选方法，其特征在于：
以周细胞或从周细胞脱分化得到的缺血诱导性多能性干细胞中的脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶的表达促进作用作为指标。
17.如权利要求15或16所述的筛选方法，其特征在于：
具有脑保护作用的物质为脑梗塞的预防、治疗或复发预防药物或者认知症的预防、治疗药物。
18.一种具有脑保护作用或睡眠作用的物质，其特征在于：
其是通过权利要求15～17中任一项所述的筛选方法得到的。
19.如权利要求18所述的物质，其特征在于：
脑保护作用是通过淀粉样蛋白β的排出作用带来的。
20.一种痘苗病毒接种炎症组织提取物或含有其的制剂的判定或评价方法，其特征在于：
以脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶的表达促进作用作为指标。
21.如权利要求20所述的判定或评价方法，其特征在于：
以周细胞或从周细胞脱分化得到的缺血诱导性多能性干细胞中的脂质运载蛋白型前列腺素D2合成酶的表达促进作用作为指标。
22.如权利要求20或21所述的判定或评价方法，其特征在于：
炎症组织为兔的炎症皮肤组织。
23.一种确保痘苗病毒接种炎症组织提取物或含有其的制剂的品质规格的方法，其特征在于：
通过进行权利要求20～22中任一项所述的判定或评价来确保痘苗病毒接种炎症组织提取物或含有其的制剂的品质规格。
24.一种痘苗病毒接种炎症组织提取物或含有其的制剂，其特征在于：其通过进行权利要求20～22中任一项所述的判定或评价而确保了品质规格。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202310272473.6A CN116270743A (zh) | 2017-12-28 | 2018-12-27 | 脂质运载蛋白型前列腺素d2合成酶产生促进剂 |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2017-253170 | 2017-12-28 | ||
| JP2017253170 | 2017-12-28 | ||
| PCT/JP2018/048141 WO2019131879A1 (ja) | 2017-12-28 | 2018-12-27 | リポカリン型プロスタグランジンｄ２合成酵素産生促進剤 |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202310272473.6A Division CN116270743A (zh) | 2017-12-28 | 2018-12-27 | 脂质运载蛋白型前列腺素d2合成酶产生促进剂 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN111511403A true CN111511403A (zh) | 2020-08-07 |
Family
ID=67067534
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201880084260.8A Pending CN111511403A (zh) | 2017-12-28 | 2018-12-27 | 脂质运载蛋白型前列腺素d2合成酶产生促进剂 |
| CN202310272473.6A Pending CN116270743A (zh) | 2017-12-28 | 2018-12-27 | 脂质运载蛋白型前列腺素d2合成酶产生促进剂 |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202310272473.6A Pending CN116270743A (zh) | 2017-12-28 | 2018-12-27 | 脂质运载蛋白型前列腺素d2合成酶产生促进剂 |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US20200338135A1 (zh) |
| EP (1) | EP3733205A4 (zh) |
| JP (2) | JP6607655B1 (zh) |
| KR (1) | KR20200103647A (zh) |
| CN (2) | CN111511403A (zh) |
| AU (1) | AU2018394182A1 (zh) |
| CA (1) | CA3087018A1 (zh) |
| TW (1) | TWI814760B (zh) |
| WO (1) | WO2019131879A1 (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2023184470A1 (zh) * | 2022-04-01 | 2023-10-05 | 星相生物技术有限公司 | 痘苗病毒致炎兔皮提取物治疗阿尔兹海默病的用途 |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2022521125A (ja) * | 2019-01-30 | 2022-04-06 | ジュン リウ | 脳内の炎症の抑制又は軽減剤 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6479657A (en) * | 1987-09-22 | 1989-03-24 | Nippon Zoki Pharmaceutical Co | Vital decision of medicine |
| JP2000016942A (ja) * | 1998-04-27 | 2000-01-18 | Nippon Zoki Pharmaceut Co Ltd | 虚血性疾患治療剤 |
| JP2001103869A (ja) * | 1999-10-06 | 2001-04-17 | Japan Science & Technology Corp | リポカリン型プロスタグランジンｄ合成酵素トランスジェニック動物とこれを用いた試験方法 |
| US20100251394A1 (en) * | 2007-09-20 | 2010-09-30 | The Johns Hopkins University | Treatment and prevention of ischemic brain injury |
| JP2012508192A (ja) * | 2008-11-11 | 2012-04-05 | バンワールド ファーマシューティカル（ルガオ） カンパニー リミテッド | ワクシニアウイルスによって炎症を起こしたウサギ皮膚由来の抽出物の、急性脳血管疾患の治療用医薬の製造における使用 |
| CN103110663A (zh) * | 2012-10-10 | 2013-05-22 | 日本脏器制药株式会社 | 提取物和制剂 |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU2729400A (en) * | 1999-01-19 | 2000-08-07 | James Daly | Application of a viral complement inhibitory protein in the treatment and diagnosis of alzheimer's disease |
| JP3752219B2 (ja) * | 2000-07-21 | 2006-03-08 | マルハ株式会社 | 痴呆性疾患の鑑別方法 |
| JP2007284351A (ja) * | 2004-07-27 | 2007-11-01 | Osaka Bioscience Institute | アミロイド蛋白質の凝集を抑制する物質とその作用 |
| JP3818657B2 (ja) | 2004-12-01 | 2006-09-06 | 日本臓器製薬株式会社 | 乾燥物及びその製造方法 |
| CN100542543C (zh) | 2005-06-17 | 2009-09-23 | 日本脏器制药株式会社 | 干燥物及其制造法 |
| JP5903044B2 (ja) | 2010-06-25 | 2016-04-13 | 日本臓器製薬株式会社 | 被検物質の判定又は評価方法 |
| US9835621B2 (en) * | 2011-07-14 | 2017-12-05 | University Of Kentucky Research Foundation | Process for detection of alzheimer's disease from a serum sample |
| CN105163746A (zh) * | 2013-04-30 | 2015-12-16 | 日本脏器制药株式会社 | 提取物和含有该提取物的制剂 |
| CN110381966A (zh) * | 2017-03-06 | 2019-10-25 | 刘军 | Aβ-诱导的损伤的抑制或减轻药剂 |
-
2018
- 2018-12-27 JP JP2019530517A patent/JP6607655B1/ja active Active
- 2018-12-27 AU AU2018394182A patent/AU2018394182A1/en active Pending
- 2018-12-27 US US16/958,962 patent/US20200338135A1/en not_active Abandoned
- 2018-12-27 WO PCT/JP2018/048141 patent/WO2019131879A1/ja unknown
- 2018-12-27 KR KR1020207015608A patent/KR20200103647A/ko unknown
- 2018-12-27 EP EP18895831.8A patent/EP3733205A4/en active Pending
- 2018-12-27 CN CN201880084260.8A patent/CN111511403A/zh active Pending
- 2018-12-27 CN CN202310272473.6A patent/CN116270743A/zh active Pending
- 2018-12-27 CA CA3087018A patent/CA3087018A1/en active Pending
- 2018-12-28 TW TW107147748A patent/TWI814760B/zh active
-
2019
- 2019-10-18 JP JP2019190666A patent/JP7411175B2/ja active Active
-
2023
- 2023-07-20 US US18/355,925 patent/US20240000853A1/en active Pending
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6479657A (en) * | 1987-09-22 | 1989-03-24 | Nippon Zoki Pharmaceutical Co | Vital decision of medicine |
| JP2000016942A (ja) * | 1998-04-27 | 2000-01-18 | Nippon Zoki Pharmaceut Co Ltd | 虚血性疾患治療剤 |
| JP2001103869A (ja) * | 1999-10-06 | 2001-04-17 | Japan Science & Technology Corp | リポカリン型プロスタグランジンｄ合成酵素トランスジェニック動物とこれを用いた試験方法 |
| US20100251394A1 (en) * | 2007-09-20 | 2010-09-30 | The Johns Hopkins University | Treatment and prevention of ischemic brain injury |
| JP2012508192A (ja) * | 2008-11-11 | 2012-04-05 | バンワールド ファーマシューティカル（ルガオ） カンパニー リミテッド | ワクシニアウイルスによって炎症を起こしたウサギ皮膚由来の抽出物の、急性脳血管疾患の治療用医薬の製造における使用 |
| CN103110663A (zh) * | 2012-10-10 | 2013-05-22 | 日本脏器制药株式会社 | 提取物和制剂 |
Non-Patent Citations (7)
| Title |
|---|
| KEIKO,ET AL: "Preventive Effect of Soybean on Brain Aging and Amyloid-beta Accumulation:Comprehensive Analysis of Brain Gene Expression", RECENT PATENTS ON FOOD, NUTRITION & AGRICULTURE, vol. 7, no. 2, pages 83 - 91 * |
| KIMURA HIROSHI,ET AL: "A pilot study for clinical application of Neurotropin to senile patients with dementia", 《薬理と治療》 * |
| KIMURA HIROSHI,ET AL: "A pilot study for clinical application of Neurotropin to senile patients with dementia", 《薬理と治療》, vol. 15, no. 10, 31 October 1987 (1987-10-31), pages 4235 - 4251, XP009521902 * |
| S.SALEEM ET AL: "LIPOCALIN-PROSTAGLANDIN D SYNTHASE IS A CRITICAL BENEFICIAL FACTOR IN TRANSIENT AND PERMANENT FOCAL CEREBRAL ISCHEMIA", 《NEUROSCIENCE》 * |
| S.SALEEM ET AL: "LIPOCALIN-PROSTAGLANDIN D SYNTHASE IS A CRITICAL BENEFICIAL FACTOR IN TRANSIENT AND PERMANENT FOCAL CEREBRAL ISCHEMIA", 《NEUROSCIENCE》, vol. 160, 31 December 2009 (2009-12-31), pages 248 - 254, XP026036090, DOI: 10.1016/j.neuroscience.2009.02.039 * |
| Y.YAN,ET AL: "Protection mechanisms against Abeta42 aggregation", 《CURR ALZHEIMER RES》 * |
| Y.YAN,ET AL: "Protection mechanisms against Abeta42 aggregation", 《CURR ALZHEIMER RES》, vol. 5, no. 6, 31 December 2008 (2008-12-31), pages 548 - 554, XP009530103, DOI: 10.2174/156720508786898460 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2023184470A1 (zh) * | 2022-04-01 | 2023-10-05 | 星相生物技术有限公司 | 痘苗病毒致炎兔皮提取物治疗阿尔兹海默病的用途 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN116270743A (zh) | 2023-06-23 |
| CA3087018A1 (en) | 2019-07-04 |
| JP7411175B2 (ja) | 2024-01-11 |
| TW201932130A (zh) | 2019-08-16 |
| EP3733205A1 (en) | 2020-11-04 |
| TWI814760B (zh) | 2023-09-11 |
| JP6607655B1 (ja) | 2019-11-20 |
| JP2020007376A (ja) | 2020-01-16 |
| AU2018394182A1 (en) | 2020-07-16 |
| US20240000853A1 (en) | 2024-01-04 |
| KR20200103647A (ko) | 2020-09-02 |
| US20200338135A1 (en) | 2020-10-29 |
| JPWO2019131879A1 (ja) | 2020-01-16 |
| WO2019131879A1 (ja) | 2019-07-04 |
| EP3733205A4 (en) | 2021-12-08 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Chen et al. | FGF21 protects the blood–brain barrier by upregulating PPARγ via FGFR1/β-klotho after traumatic brain injury | |
| Wang et al. | Extracellular vesicles mediate the communication of adipose tissue with brain and promote cognitive impairment associated with insulin resistance | |
| Hou et al. | Keratinocyte expression of calcitonin gene-related peptide β: implications for neuropathic and inflammatory pain mechanisms | |
| Wang et al. | Regulatory role of NADPH oxidase 2 in the polarization dynamics and neurotoxicity of microglia/macrophages after traumatic brain injury | |
| Chang et al. | Bone marrow mesenchymal stem cell-derived exosomal microRNA-125a promotes M2 macrophage polarization in spinal cord injury by downregulating IRF5 | |
| EP2587265B1 (en) | Method for determination or evaluation of test substance | |
| Wu et al. | Astrocytic YAP protects the optic nerve and retina in an experimental autoimmune encephalomyelitis model through TGF-β signaling | |
| Kataria et al. | Small molecule agonists of cell adhesion molecule L1 mimic L1 functions in vivo | |
| US20240000853A1 (en) | Lipocalin-type prostaglandin d2 synthase production promoting agent | |
| Garbelli et al. | PDGFRβ+ cells in human and experimental neuro-vascular dysplasia and seizures | |
| Xiao et al. | Reduction of lactoferrin aggravates neuronal ferroptosis after intracerebral hemorrhagic stroke in hyperglycemic mice | |
| Shang et al. | CXCL1 promotes the proliferation of neural stem cells by stimulating the generation of reactive oxygen species in APP/PS1 mice | |
| Yu et al. | Neuronal and astroglial TGFβ-Smad3 signaling pathways differentially regulate dendrite growth and synaptogenesis | |
| Wang et al. | Inhibition of elevated hippocampal CD24 reduces neurogenesis in mice with traumatic brain injury | |
| Zhang et al. | Recombinant osteopontin provides protection for cerebral infarction by inhibiting the NLRP3 inflammasome in microglia | |
| Gouel et al. | Whole and fractionated human platelet lysate biomaterials-based biotherapy induces strong neuroprotection in experimental models of amyotrophic lateral sclerosis | |
| CN113433324B (zh) | Nck1蛋白作为标志物在诊断脊髓损伤中的应用 | |
| Yu et al. | mfat‐1 transgene protects cultured adult neural stem cells against cobalt chloride‐mediated hypoxic injury by activating Nrf2/ARE pathways | |
| Lee et al. | Effect of dihydroferulic acid obtained from fermented rice bran extract on neuroprotection and behavioral recovery in an ischemic rat model | |
| Hong et al. | Effects of rice bran extracts fermented with Lactobacillus plantarum on neuroprotection and cognitive improvement in a rat model of ischemic brain Injury | |
| KR102276059B1 (ko) | 알츠하이머병 모델 동물의 제조방법 및 그에 의해 제조된 알츠하이머병 모델 동물 | |
| KR20230075371A (ko) | 직접교차분화 유도된 줄기세포 | |
| Zhang et al. | The protective effect of fluoxetine on hippocampal oligodendrocytes in AD mice: a potential mechanism involving S100B | |
| US7879568B2 (en) | Method for the diagnosis and prognosis of demyelinating diseases | |
| Malik | Cell-type specific responses to antidepressants-the epigenetic makeup of the glia-neuron interface |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |