CN111494319A - 雷公藤甲素复方组合物及其制备方法与应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种雷公藤甲素复方组合物及其制备方法与其应用，属于医药技术领域。所述的雷公藤甲素复方组合物具有明显的增效减毒的作用。所述的雷公藤甲素复方组合物，包含雷公藤甲素、甘草酸铵盐磷脂复合物、乳化剂、油、水溶性稳定剂、脂溶性稳定剂、甘油、助乳化剂及水。按重量百分比计，雷公藤甲素0.01％～0.02％、甘草酸铵盐磷脂复合物0.1％～0.9％、油5‑15％、乳化剂0.9％～2.7％、脂溶性稳定剂0.3～0.9％、甘油2.5％、助乳化剂0.05％～0.1％、水溶性稳定剂0％～0.2％，余量为水。本发明将雷公藤甲素与甘草酸铵盐配伍使用，利用甘草酸铵盐保护机体肝、肾等细胞免受雷公藤甲素的损伤，利用甘草酸铵盐特殊的结构制备成磷脂复合物后的强亲脂性提高生物利用度且制剂稳定性增加从而提高治疗效果。

Description

雷公藤甲素复方组合物及其制备方法与应用
技术领域
本发明涉及一种雷公藤甲素复方组合物及其制备方法与其应用，属于医药技术领域。所述的雷公藤甲素复方组合物具有明显的增效减毒的作用。
背景技术
雷公藤甲素(Triptolide，TP)是一种环氧二萜内酯化合物，是卫矛科植物雷公藤(Tripterygium wilfordii Hook.F.)的主要活性成分之一。雷公藤甲素具有多种药理活性，广泛用于治疗类风湿性关节炎、风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、肾炎等多种自身免疫和炎症疾病等。同时，TP对卵巢癌、肝癌、乳腺癌、黑色素瘤、急性白血病等均有明显的疗效。
但雷公藤甲素水溶性差，对各组织和脏器有严重的刺激性和不良反应。例如雷公藤甲素可导致肝细胞氧化应激反应，肝等器官生化指标不同程度异常。还会诱导心脏线粒体功能障碍、细胞凋亡和病理变化。泌尿系统相应细胞损伤及生殖毒性。因此其临床应用受到极大的限制。
王淑娟将雷公藤甲素制备成脂质体使雷公藤甲素缓慢释放，达到降低毒性的目的。但脂质体易氧化、酸败、有机溶剂易残留影响制剂质量。专利CN201810081549.6中雷公藤甲素联合非诺贝特用药，用于降低雷公藤甲素诱导的肝毒性。两种药物同时使用人为因素影响较大，增加患者的经济负担，并会使患者因多次服药产生逆反心理等。CN201811486684.5中制备了一种能够降低雷公藤甲素毒性的肾脏靶向纳米载体，但新剂型制备工艺复杂，制备过程中质量难以控制，不易工业化生产。CN201810460972.7发明一种外用雷公藤甲素脂质纳米粒，该纳米粒无有机溶剂残留、工艺过程易控制，可大规模生产。但仅仅是降低了雷公藤甲素的毒性作用，未有增加疗效的作用。
因此，现有技术中各种降低雷公藤甲素的方法均存在一定的缺陷，所以有待于开发更好的复方组合物，从而增加抗肿瘤活性，并降低药物对机体的损伤，且低成本易工业化生产。
发明内容
针对现有技术中存在的不足，本发明提供了一种增强制剂稳定性，降低机体对制剂的排斥，增加药物吸收达到降低毒性增加治疗效果的口服雷公藤甲素复方组合物。
为实现上述目的，本发明技术方案是：
雷公藤甲素复方组合物，包含雷公藤甲素、甘草酸铵盐磷脂复合物、乳化剂、油、水溶性稳定剂、脂溶性稳定剂、甘油、助乳化剂及水。按重量百分比计，雷公藤甲素0.01％～0.02％、甘草酸铵盐磷脂复合物0.1％～0.9％、油5-15％、乳化剂0.9％～2.7％、脂溶性稳定剂0.3～0.9％、甘油2.5％、助乳化剂0.05％～0.1％、水溶性稳定剂0％～0.2％，余量为水。
进一步地，水溶性稳定剂为0.05％～0.2％。
所述的甘草酸铵盐磷脂复合物通过甘草酸铵盐与磷脂发生反应制备得到。
其中，甘草酸铵盐与磷脂的质量比不大于1：1，优选为1：1-1：1.5。
所述的甘草酸铵盐包括甘草酸铵、甘草酸二铵其中之一或其混合物；
进一步地，所述的甘草酸铵盐磷脂复合物为甘草酸二铵磷脂复合物；
其中，雷公藤甲素与甘草酸二铵的重量比为：1：1-1：45；优选为1：1-1：22.5；
所述磷脂选为卵磷脂(大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂)、脑磷脂、磷脂酰甘油、磷酯酰丝氨酸、鞘磷脂、二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)、二棕榈酰磷脂乙醇胺(DPPE)、二硬脂酰磷脂酰胆碱(DSPC)中的其中一种或其混合物。优选为卵磷脂，进一步优选为蛋黄卵磷脂。
所述乳化剂选为卵磷脂(大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂)、脑磷脂、磷脂酰甘油、磷酯酰丝氨酸、鞘磷脂、二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)、二棕榈酰磷脂乙醇胺(DPPE)、二硬脂酰磷脂酰胆碱(DSPC)中的其中一种或其混合物。优选为卵磷脂，进一步优选为蛋黄卵磷脂。
且乳化剂和油的质量比为0.9～2.7:10。
所述的油选自长链甘油酸三酯LCT(大豆油、红花油、麻油、玉米油)，中链甘油酸三酯MCT。优选为大豆油和MCT，进一步优选为MCT。
所述的脂溶性稳定剂选为油酸、亚油酸、棕榈酸、胆酸等的其中一种或其混合物，优选为油酸；
所述的水溶性稳定剂为：油酸钠、亚油酸钠、棕榈酸钠、胆酸钠，优选为：油酸钠。
所述助乳化剂选为脂肪酸山梨坦、聚山梨酯、聚氧乙烯脂肪酸酯类、聚氧乙烯脂肪醇醚类、聚氧乙烯聚氧丙烯共聚物类、蔗糖脂肪酸酯类和单硬脂酸甘油酯，优选为pluronicF68。
所述的水选为蒸馏水、去离子水、纯水、超纯水，优选为超纯水。
本发明还提供一种减毒增效的雷公藤甲素复方乳剂的制备方法，包括如下步骤：
(1)将处方量的雷公藤甲素/甘草酸铵盐磷脂复合物/乳化剂溶于有机溶剂中，转移至含有脂溶性稳定剂的油中，磁力搅拌，除去有机溶剂，得到均匀分散的油相；
(2)量取适量的水，加入处方量甘油/助乳化剂/水溶性稳定剂，水浴中磁力搅拌，得到均匀分散的水相；
(3)在高速搅拌剪切机以一定转速下，将水相快速的加入到油相中，剪切，得到初乳；
(4)终乳：初乳冷却至室温，纯化水补足至100ml，转移至高压均质机中，进行均质，得到终乳；
(5)得到的终乳用pH调节剂调节pH。室温下采用微孔滤膜过滤除菌，分装于西林瓶中。
其中，步骤(1)所述的有机溶剂为甲醇、乙醇、氯仿、乙酸乙酯、氯仿等其中一种或其混合物，优选为乙醇。
步骤(5)中所述的pH调节剂为氢氧化钠溶液/盐酸溶液，调节pH值为6.8-7。
本发明中，能够起到减毒增效作用的为甘草酸铵盐，其可通过影响解毒酶CYP450促进毒性药物的代谢，调节肝等组织的生化指标维持其正常状态或降低氧化应激反应等，有效保护雷公藤甲素对肝、肾等组织的损伤。甘草酸铵盐具有羧酸基团和氨基基团，制备成乳剂可增强稳定性。肿瘤细胞膜表面带负电荷，故带有负电荷的制剂通常会产生排斥现象，而正电荷制剂会对机体产生毒性作用，因此选择近中性的制剂是非常有必要的。磷脂复合物其较强的亲脂性能够促进雷公藤甲素机体吸收，进而提高治疗肿瘤的能力。其次，由于乳剂粒径较小，易被网状内皮系统摄取，增加对脾等器官的靶向性。因此乳剂选择性聚集于靶向部位，降低非靶向组织的药物蓄积，达到减毒增效的效果。本发明制备的复方组合物能够降低药物对机体产生的毒性，增强抗肿瘤作用。同时制备工艺简单、成本低、质量稳定可控、易工业化生产。
本发明与现有技术相比较，其具有以下有益效果：
1、本发明将雷公藤甲素与甘草酸铵盐配伍使用，利用甘草酸铵盐保护机体肝、肾等细胞免受雷公藤甲素的损伤，利用甘草酸铵盐特殊的结构制备成磷脂复合物后的强亲脂性提高生物利用度且制剂稳定性增加，利用复方制剂的电荷近中性特性促进药物吸收，提高治疗效果。
2、本分明充分利用复方乳剂粒径小，具有被动靶向性强，能选择性将药物聚集于靶向部位，降低非靶向部位的药物浓度，保护其他组织免受雷公藤甲素的损害，达到减毒增效的效果。
3、本发明采用高压均质-两步乳化法制备复方乳，只需要将水相、油相溶解，在强大的机械力的作用下剪切得到制剂，该方法乳化效果好稳定性强、粒径均匀、质量可控。且处方及工艺参数稳定。高压均质机的使用可使物料暴露少，时间短，有利于无菌保证，适于产业化生产。
4、本发明可用于多种癌症疾病的治疗。
以下列举数个实施案例结合实验数据对本发明技术方案作进一步说明。
附图说明
图1为给药后大鼠体内TP药时曲线。
具体实施方式
实施例1
甘草酸二铵磷脂复合物的制备：
称取适量甘草酸二铵与磷脂(质量比为1：1)置于250mL圆底烧瓶中，加入适量的反应溶剂无水乙醇，在温度为60℃条件下，加热磁力搅拌使其充分反应，时间为30min，减压除去反应溶剂。于50℃条件下真空干燥2小时，残留物加入适量氯仿，充分溶解，过滤，氯仿多次洗涤沉淀物，回收沉淀物。将滤液及洗涤液合并，减压除去氯仿，剩余物60℃真空干燥得到甘草酸二铵磷脂复合物。
称取处方量的雷公藤甲素10mg，甘草酸二铵磷脂复合物0.9g，蛋黄卵磷脂1.5g溶于乙醇中，将上述药物加入含10g MCT及0.6g油酸中，80℃磁力搅拌30min，除去有机溶剂，得到均匀分散的油相。量取适量的纯化水，加入2.25g甘油，0.1g F68，0.05g油酸钠，80℃水浴中磁力搅拌30min，得到均匀分散的水相。在高速搅拌剪切机以10000rpm的转速下，将水相快速的加入到油相中，剪切5min，得到初乳；初乳冷却至室温，纯化水补足至100mL，转移至高压剪切机中，在压力为800bar的条件下进行高剪切，剪切循环次数为10次。室温下采用0.22μm微孔滤膜过滤除菌，分装于西林瓶中。
检测方法
外观
将所制备的甘草酸二铵磷脂复合物-雷公藤甲素复方脂肪乳用纯化水稀释至100倍，观察其外观性状。外观为白色或类白色均匀乳状液体，稀释后有淡蓝色乳光。
包封率检测
精密吸取0.2mL甘草酸二铵磷脂复合物-雷公藤甲素复方脂肪乳溶液上样于填充好的Sephadex G-50微型柱上，于离心机中离心(2000rpm)2min，用0.2mL蒸馏水洗脱3次，离心(2000rpm)2min，收集洗脱液，收集的洗脱液用甲醇定容至10mL，于218nm处测定其吸光度值A1。另精密吸取0.2mL雷公藤甲素-甘草酸二铵复方脂肪乳溶液，用甲醇定容至10mL，按上法操作，测定其吸光度值A2。则包封率可以按下式计算：EE％＝A1/A2*100％。制剂包封率为85％。
粒径检测
将所制备的甘草酸二铵磷脂复合物-雷公藤甲素复方脂肪乳用纯化水稀释500倍后，Nano Zeta Sizer测定粒径、电位，乳剂的平均粒径为170nm，电位为+0.2012mv。
实施例2：
称取适量甘草酸二铵与磷脂(质量比为1：1)置于250mL圆底烧瓶中，加入适量的反应溶剂无水乙醇，在温度为50℃条件下，加热磁力搅拌使其充分反应，时间为30min，减压除去反应溶剂。于40℃条件下真空干燥2小时，残留物加入适量氯仿，充分溶解，过滤，氯仿多次洗涤沉淀物，回收沉淀物。将滤液及洗涤液合并，减压除去氯仿，剩余物60℃真空干燥得到甘草酸二铵磷脂复合物。称取处方量的雷公藤甲素10mg，甘草酸二铵磷脂复合物0.45g，蛋黄卵磷脂2.7g溶于乙醇中，将上述药物加入含10g MCT及0.6g油酸中，80℃磁力搅拌30min，除去有机溶剂，得到均匀分散的油相。量取适量的纯化水，加入2.25g甘油，0.1gF68，0.05g油酸钠，80℃水浴中磁力搅拌30min，得到均匀分散的水相。在高速搅拌剪切机以10000rpm的转速下，将水相快速的加入到油相中，剪切5min，得到初乳；初乳冷却至室温，纯化水补足至100mL，转移至高压剪切机中，在压力为800bar的条件下进行高剪切，剪切循环次数为10次。室温下采用0.22μm微孔滤膜过滤除菌，分装于西林瓶中。
检测方法
外观
将所制备的甘草酸二铵磷脂复合物-雷公藤甲素复方脂肪乳用纯化水稀释至100倍，观察其外观性状。外观为白色或类白色均匀乳状液体，稀释后有淡蓝色乳光。
包封率检测
精密吸取0.2mL甘草酸二铵磷脂复合物-雷公藤甲素复方脂肪乳溶液上样于填充好的Sephadex G-50微型柱上，于离心机中离心(2000rpm)2min，用0.2mL蒸馏水洗脱3次，离心(2000rpm)2min，收集洗脱液，收集的洗脱液用甲醇定容至10mL，于218nm处测定其吸光度值A1。另精密吸取0.2mL雷公藤甲素-甘草酸二铵复方脂肪乳溶液，用甲醇定容至10mL，按上法操作，测定其吸光度值A2。则包封率可以按下式计算：EE％＝A1/A2*100％。制剂包封率为89％。
粒径检测
将所制备的甘草酸二铵磷脂复合物-雷公藤甲素复方脂肪乳用纯化水稀释500倍后，Nano Zeta Sizer测定粒径、电位，乳剂的平均粒径为182nm，电位为-0.0210mv。
实施例3：
称取适量甘草酸二铵与磷脂(质量比为1：1.5)置于250mL圆底烧瓶中，加入适量的反应溶剂无水乙醇，在温度为60℃条件下，加热磁力搅拌使其充分反应，时间为30min，减压除去反应溶剂。于40℃条件下真空干燥2小时，残留物加入适量氯仿，充分溶解，过滤，氯仿多次洗涤沉淀物，回收沉淀物。将滤液及洗涤液合并，减压除去氯仿，剩余物60℃真空干燥得到甘草酸二铵磷脂复合物。称取处方量的雷公藤甲素10mg，甘草酸二铵磷脂复合物0.6g，蛋黄卵磷脂1.5g溶于乙醇中，将上述药物加入含10g MCT及0.6g油酸中，80℃磁力搅拌30min，除去有机溶剂，得到均匀分散的油相。量取适量的纯化水，加入2.25g甘油，0.1gF68，0.05g油酸钠，80℃水浴中磁力搅拌30min，得到均匀分散的水相。在高速搅拌剪切机以10000rpm的转速下，将水相快速的加入到油相中，剪切5min，得到初乳；初乳冷却至室温，纯化水补足至100mL，转移至高压剪切机中，在压力为800bar的条件下进行高剪切，剪切循环次数为10次。室温下采用0.22μm微孔滤膜过滤除菌，分装于西林瓶中。
检测方法
外观
将所制备的甘草酸二铵磷脂复合物-雷公藤甲素复方脂肪乳用纯化水稀释至100倍，观察其外观性状。外观为白色或类白色均匀乳状液体，稀释后有淡蓝色乳光。
包封率检测
精密吸取0.2mL甘草酸二铵磷脂复合物-雷公藤甲素复方脂肪乳溶液上样于填充好的Sephadex G-50微型柱上，于离心机中离心(2000rpm)2min，用0.2mL蒸馏水洗脱3次，离心(2000rpm)2min，收集洗脱液，收集的洗脱液用甲醇定容至10mL，于218nm处测定其吸光度值A1。另精密吸取0.2mL雷公藤甲素-甘草酸二铵复方脂肪乳溶液，用甲醇定容至10mL，按上法操作，测定其吸光度值A2。则包封率可以按下式计算：EE％＝A1/A2*100％。制剂包封率为87％。
粒径检测
将所制备的甘草酸二铵磷脂复合物-雷公藤甲素复方脂肪乳用纯化水稀释500倍后，Nano Zeta Sizer测定粒径、电位，乳剂的平均粒径为176nm，电位为-0.0012mv。
实施例4：
称取适量甘草酸二铵与磷脂(质量比为1：1)置于250mL圆底烧瓶中，加入适量的反应溶剂无水乙醇，在温度为60℃条件下，加热磁力搅拌使其充分反应，时间为20min，减压除去反应溶剂。于40℃条件下真空干燥2小时，残留物加入适量氯仿，充分溶解，过滤，氯仿多次洗涤沉淀物，回收沉淀物。将滤液及洗涤液合并，减压除去氯仿，剩余物60℃真空干燥得到甘草酸二铵磷脂复合物。
称取处方量的雷公藤甲素10mg，甘草酸二铵磷脂复合物0.2g，蛋黄卵磷脂1.5g溶于乙醇中，将上述药物加入含10g MCT及0.6g油酸中，80℃磁力搅拌30min，除去有机溶剂，得到均匀分散的油相。量取适量的纯化水，加入2.25g甘油，0.1g F68，0.05g油酸钠，80℃水浴中磁力搅拌30min，得到均匀分散的水相。在高速搅拌剪切机以10000rpm的转速下，将水相快速的加入到油相中，剪切5min，得到初乳；初乳冷却至室温，纯化水补足至100mL，转移至高压剪切机中，在压力为800bar的条件下进行高剪切，剪切循环次数为10次。室温下采用0.22μm微孔滤膜过滤除菌，分装于西林瓶中。
检测方法
外观
将所制备的甘草酸二铵磷脂复合物-雷公藤甲素复方脂肪乳用纯化水稀释至100倍，观察其外观性状。外观为白色或类白色均匀乳状液体，稀释后有淡蓝色乳光。
包封率检测
精密吸取0.2mL甘草酸二铵磷脂复合物-雷公藤甲素复方脂肪乳溶液上样于填充好的Sephadex G-50微型柱上，于离心机中离心(2000rpm)2min，用0.2mL蒸馏水洗脱3次，离心(2000rpm)2min，收集洗脱液，收集的洗脱液用甲醇定容至10mL，于218nm处测定其吸光度值A1。另精密吸取0.2mL雷公藤甲素-甘草酸二铵复方脂肪乳溶液，用甲醇定容至10mL，按上法操作，测定其吸光度值A2。则包封率可以按下式计算：EE％＝A1/A2*100％。制剂包封率为88％。
粒径检测
将所制备的甘草酸二铵磷脂复合物-雷公藤甲素复方脂肪乳用纯化水稀释500倍后，Nano Zeta Sizer测定粒径、电位，乳剂的平均粒径为183nm，电位为-0.0112mv。
效果实施例
雷公藤甲素-甘草酸二铵复方脂肪乳(雷公藤甲素：甘草酸二铵分别为1：1，1：22.5，1：45，相当于雷公藤甲素：甘草酸铵盐磷脂复合物为1：2，1：45，1：90)的药代动力学研究
取12只SD大鼠，随机分成4组。给药前禁食12h，实验期间自由饮水。每组大鼠眼眶取血0.4mL空白后，按表1给药，分别于给药后2min、5min、10min、30min、1h、1.5h、2h、3h、4h、6h、8h大鼠眼眶取血0.4mL，4000rpm离心10min，分离血浆取上清液置于1.5mLEP管中，-80℃冰箱保存待测。采用LC-MS/MS方法测定血浆中雷公藤甲素的浓度，结果见表2。绘制药时曲线，结果见图1。用统计矩分析药物口服各组制剂体内过程，其计算主要依据药时曲线下面积，不受数学模型的限制，适用于任何隔室。以DAS 2.0程序中的统计矩参数部分，分析相关参数，结果见表3。同时按以下计算公式计算其相对生物利用度。
Figure BDA0002540225460000091
通过数据表3可以看出，大鼠口服给药各组制剂后，雷公藤甲素复方脂肪乳相比原料药混悬剂的生物利用度有不同程度的提高，说明甘草酸二铵能够促进雷公藤甲素的吸收。随着甘草酸二铵的含量升高，雷公藤甲素吸收的越好，但甘草酸二铵的含量不是越多越好，初步判断质量比为雷公藤甲素：甘草酸二铵＝1:22.5效果最佳。即甘草酸二铵能够改善TP在大鼠体内的药物动力学过程，有效地提高了TP的口服生物利用度，即达到增效的效果。其次，同等给药剂量下，雷公藤甲素复方脂肪乳的吸收明显高于雷公藤甲素与甘草酸二铵的，因此，适当降低药物给药剂量，仍能达到与雷公藤甲素脂肪乳相同的的AUC，易可降低雷公藤甲素对动物机体的毒性。
表1给药方式及给药剂量
Figure BDA0002540225460000092
Figure BDA0002540225460000101
表2给药后大鼠体内TP血浆浓度(n＝3)
Figure BDA0002540225460000102
表3给药后大鼠体内TP药代动力学参数(n＝3)
Figure BDA0002540225460000103
Figure BDA0002540225460000111
上述实施例仅是为阐明本发明技术方案内容而举例的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质和原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化、劣化技术方案或手段，均应视为本发明技术方案的等同或置换方式，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.雷公藤甲素复方组合物，其特征在于，包含雷公藤甲素、甘草酸铵盐磷脂复合物、乳化剂、油、水溶性稳定剂、脂溶性稳定剂、甘油、助乳化剂及水，按重量百分比计，雷公藤甲素0.01％～0.02％、甘草酸铵盐磷脂复合物0.1％～0.9％、油5-15％、乳化剂0.9％～2.7％、脂溶性稳定剂0.3～0.9％、甘油2.5％、助乳化剂0.05％～0.1％、水溶性稳定剂0％～0.2％，余量为水。
2.根据权利要求1所述的雷公藤甲素复方组合物，其特征在于：所述的甘草酸铵盐磷脂复合物通过甘草酸铵盐与磷脂发生反应制备得到。
3.根据权利要求2所述的雷公藤甲素复方组合物，其特征在于：甘草酸铵盐与磷脂的质量不大于1：1，优选为1：1-1：1.5。
4.根据权利要求2或3所述的雷公藤甲素复方组合物，其特征在于：所述的甘草酸铵盐为甘草酸二铵。
5.根据权利要求4所述的雷公藤甲素复方组合物，其特征在于，雷公藤甲素与甘草酸二铵的重量比为1：1-1：45；优选为1：1-1：22.5。
6.根据权利要求1所述的雷公藤甲素复方组合物，其特征在于：所述的乳化剂选为卵磷脂、脑磷脂、磷脂酰甘油、磷酯酰丝氨酸、鞘磷脂、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂乙醇胺、二硬脂酰磷脂酰胆碱中的其中一种或其混合物，优选为卵磷脂，进一步优选为蛋黄卵磷脂；
所述的油选自长链甘油酸三酯LCT，中链甘油酸三酯MCT的其中一种或其混合物；
所述的脂溶性稳定剂为油酸、亚油酸、棕榈酸、胆酸等的其中一种或其混合物；
所述的水溶性稳定剂为油酸钠、亚油酸钠、棕榈酸钠、胆酸钠等的其中一种或其混合物；
所述的助乳化剂为脂肪酸山梨坦、聚山梨酯、聚氧乙烯脂肪酸酯类、聚氧乙烯脂肪醇醚类、聚氧乙烯聚氧丙烯共聚物类、蔗糖脂肪酸酯类或单硬脂酸甘油酯。
7.根据权利要求1所述的雷公藤甲素复方组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)将处方量的雷公藤甲素/甘草酸铵盐磷脂复合物/乳化剂溶于有机溶剂中，转移至含有油的稳定剂中，磁力搅拌，除去有机溶剂，得到均匀分散的油相；
(2)量取适量的水，加入处方量甘油/助乳化剂/水溶性稳定剂，水浴中磁力搅拌，得到均匀分散的水相；
(3)在高速搅拌剪切机以一定转速下，将水相快速的加入到油相中，剪切，得到初乳；
(4)终乳：初乳冷却至室温，纯化水补足至100mL，转移至高压均质机中，进行均质，得到终乳；
(5)得到的终乳用pH调节剂调节pH，室温下采用微孔滤膜过滤除菌，分装于西林瓶中。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，
其中，步骤(1)所述的有机溶剂为甲醇、乙醇、氯仿、乙酸乙酯、氯仿等其中一种或其混合物，优选为乙醇。
步骤(5)中所述的pH调节剂为氢氧化钠/盐酸溶液，调节pH值为6.8-7。
9.权利要求1-6任何一项所述的雷公藤甲素复方组合物在降低雷公藤毒性中的应用。
10.权利要求1-6任何一项所述的雷公藤甲素复方组合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114480312A (zh) * 2022-01-19 2022-05-13 首都医科大学附属北京世纪坛医院 一种松香烷型三环二萜类化合物c-14位羟化酶

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1594332A (zh) * 2004-06-23 2005-03-16 江苏正大天晴药业股份有限公司 甘草酸及其盐的磷脂复合物及其制备方法
CN103690482A (zh) * 2013-12-24 2014-04-02 杭州市西溪医院 以磷脂复合物为中间体的甘草酸自乳化制剂用浓缩液及制备方法
CN105263475A (zh) * 2013-03-15 2016-01-20 制药创源有限公司 雷公藤甲素静脉注射乳剂用作免疫调制剂和抗癌药
FR3031900A1 (fr) * 2015-01-22 2016-07-29 Pf Medicament Triptolide et ses derives dans le traitement des tumeurs et pathologies pre-cancereuses cutanees
CN108635338A (zh) * 2018-05-15 2018-10-12 复旦大学附属肿瘤医院 一种外用雷公藤甲素脂质纳米粒及制备方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1594332A (zh) * 2004-06-23 2005-03-16 江苏正大天晴药业股份有限公司 甘草酸及其盐的磷脂复合物及其制备方法
CN105263475A (zh) * 2013-03-15 2016-01-20 制药创源有限公司 雷公藤甲素静脉注射乳剂用作免疫调制剂和抗癌药
CN103690482A (zh) * 2013-12-24 2014-04-02 杭州市西溪医院 以磷脂复合物为中间体的甘草酸自乳化制剂用浓缩液及制备方法
FR3031900A1 (fr) * 2015-01-22 2016-07-29 Pf Medicament Triptolide et ses derives dans le traitement des tumeurs et pathologies pre-cancereuses cutanees
CN108635338A (zh) * 2018-05-15 2018-10-12 复旦大学附属肿瘤医院 一种外用雷公藤甲素脂质纳米粒及制备方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
LI ET AL.: "Pharmacokinetics and tissue distribution study in mice of triptolide-loaded lipid emulsion and accumulation effect on pancreas", 《DRUG DELIVERY》 *
李雪 等: "雷公藤甲素脂肪乳的制备及其体外性质研究", 《中国药剂学杂志》 *
郑恒 等: "雷公藤甲素-甘草次酸复方微乳的制备及其理化性质和体外释药特性研究", 《中国药房》 *
马哲: "雷公藤配伍甘草减毒增效研究", 《中国优秀博硕士学位论文全文数据库(博士)医药卫生科技辑》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114480312A (zh) * 2022-01-19 2022-05-13 首都医科大学附属北京世纪坛医院 一种松香烷型三环二萜类化合物c-14位羟化酶
CN114480312B (zh) * 2022-01-19 2024-04-16 首都医科大学附属北京世纪坛医院 一种松香烷型三环二萜类化合物c-14位羟化酶

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