CN111491923B - N-(2-环己基乙基)甲酰胺衍生物、其制法与医药上的用途 - Google Patents

N-(2-环己基乙基)甲酰胺衍生物、其制法与医药上的用途 Download PDF

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Abstract

涉及N‑(2‑环己基乙基)甲酰胺衍生物、其制法与医药上的用途。具体地，本发明公开了式(I)化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体或溶剂化合物，及其制备方法和应用。

Description

N-(2-环己基乙基)甲酰胺衍生物、其制法与医药上的用途
技术领域
本发明涉及医药技术领域，特别涉及一种N-(2-环己基乙基)甲酰胺衍生物及其制备方法和作为IDO抑制剂的应用，以及由其制备的药物组合物和药用组合物。
背景技术
吲哚胺2，3-双加氧酶(indoleamine 2，3-dioxygenase，简写IDO)是一种与色氨酸代谢有关的蛋白酶。色氨酸是八种必需氨基酸之一，在体内色氨酸可用来合成蛋白质，色氨酸还可作为前体底物通过甲氧基吲哚代谢途径合成5-羟色胺和褪黑激素(N-乙酰-5-甲氧基色胺)。5-羟色胺和褪黑激素是神经递质和神经内分泌激素，参与体内的多种神经与生理过程的调节。此外，色氨酸还可通过犬尿氨酸代谢途径产生犬尿氨酸等代谢产物。犬尿氨酸代谢途径的第一步是在吲哚胺2，3-双加氧酶或色氨酸2，3-双加氧酶(TDO)的催化作用下，色氨酸L-色氨酸降解为N-甲酰基-犬尿氨酸，N-甲酰基-犬尿氨酸在犬尿氨酸甲酰胺酶的催化作用下形成犬尿氨酸，犬尿氨酸还可被进一步代谢形成3-羟基邻氨基苯甲酸，喹啉酸，吡啶甲酸。喹啉酸具有神经毒性，而吡啶甲酸具有神经保护作用。犬尿氨酸和3-羟基邻氨基苯甲酸参与淋巴细胞活性调节从而引起免疫系統被抑制。
除胎盘组织外，正常健康状况下吲哚胺2，3-双加氧酶在多数组织细胞内基本不表达。在炎症发生区域，干扰素γ等炎性细胞因子可诱导吲哚胺2，3-双加氧酶表达量升高。多方面的实验结果证明，吲哚胺2，3-双加氧酶在组织细胞中的高表达可导致该组织微环境的免疫系統被抑制，或称免疫被抑制或免疫检查点(immune checkpoint)。胎盘组织吲哚胺2，3-双加氧酶的高表达可防止对胎儿的免疫排斥反应。炎症区域吲哚胺2，3-双加氧酶的高表达可防止过度的免疫反应，防止细胞组织受到过度的损伤。导致免疫被抑制的机制之一是吲哚胺2，3-双加氧酶高表达造成局部L-色氨酸耗竭，从而被周围的淋巴细胞通过GCN2等机制感受到，引起CD8+细胞毒性T细胞发生细胞周期停滞或凋亡。导致免疫被抑制的另一种机制是吲哚胺2，3-双加氧酶高表达造成犬尿氨酸升高，犬尿氨酸形成后可离开细胞进入细胞外基质，然后进入附近的淋巴细胞通过结合AHR转录因子对CD8+T细胞和调节性Treg细胞进行调节，CD8+细胞毒性T细胞的活性被抑制，而调节性Treg细胞的数量增多并且被激活，从而导致免疫被抑制。
在很多不同类型的肿瘤中吲哚胺2，3-双加氧酶发生异常高表达，包括血液肿瘤和直结肠癌、肝癌、肺癌、胰腺癌、咽喉癌等实体瘤。吲哚胺2，3-双加氧酶异常高表达与肿瘤不良预后呈正相关。肿瘤细胞逃脱免疫监控是癌变和癌症进一步发展的关键一步，肿瘤中吲哚胺2，3-双加氧酶的异常高表达可能是肿瘤细胞逃脱。
免疫监控的一种主要机制，抑制吲哚胺2，3-双加氧酶的活性有可能激活被抑制的免疫系统，达到抑制肿瘤生长的效果，所以吲哚胺2，3-双加氧酶抑制剂作为一种免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitor)引起了医药界很大的兴趣。吲哚胺2，3-双加氧酶(IDO)有两种，IDO-1和IDO-2，参与上述免疫被抑制的主要是IDO-1，IDO-2在免疫被抑制中的作用还不是很清楚。色氨酸2，3-双加氧酶(TDO)也在很多类型的肿瘤中发生异常高表达，有的肿瘤还呈现IDO和TDO双阳性，所以有人认为也可通过抑制TDO免疫检查点起到肿瘤治疗的目的。因为正常肝脏细胞表达TDO，尚不清楚TDO抑制剂是否会影响肝脏功能和正常的色氨酸代谢，但TDO敲除得小鼠模型未见异常，表明TDO抑制剂可能不会影响肝脏功能和正常的色氨酸代谢。IDO和TDO导致免疫被抑制的机理基本相同，所以IDO/TDO双特异抑制剂也同样引起了医药界的兴趣，IDO/TDO双特异抑制剂将适用于IDO阳性、TDO阳性、IDO/TDO双阳性的病人。
色氨酸的犬尿氨酸代谢途径的很多代谢产物与精神分裂症，抑郁症，神经元退化有关，吲哚胺2，3-双加氧酶抑制剂可能也可用于这些疾病的治疗。犬尿氨酸在犬尿氨酸氨基转移酶的催化作用下可转化为犬尿喹啉酸，犬尿喹啉酸是一种NMDA拮抗剂，在精神分裂症病人的中枢神经中常见到较高的犬尿喹啉酸水平。喹啉酸具有神经毒性，可导致神经细胞凋亡和神经退化。吲哚胺2，3-双加氧酶不仅参与色氨酸代谢，还参与色氨等的代谢，5-羟色胺在吲哚胺2，3-双加氧酶的催化作用下可转化为5-羟吲哚乙酸，5-羟色胺下降可能是导致抑郁症的因素之一。
目前吲哚胺2，3-双加氧酶抑制剂还处于早期研发阶段，在现有基础上开发活性更好毒性更低的IDO抑制剂具有重要的临床意义。
发明内容
本发明的目的是提供一类结构新颖的IDO抑制剂及其制备方法和用途。
本发明第一方面提供了一种式(I)所示的化合物或其立体异构体，或其药学上可接受的盐：
Figure GPA0000290185960000031
式中，
A为4至6元饱和单杂环或5至6元单环杂芳基环；
n为1、2或3；
Z1为N或CR5；Z2为N或CR6；Z3为N或CR7；Z1、Z2和Z3不同时为N；
R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7各自独立地为氢、卤素、C1-10烷基、C1-10烷氧基、卤代C1-10烷基、C3-10环烷基、卤代C1-10烷氧基、NRa0Rb0或-C(O)C1-10烷基；
所述4至6元饱和单杂环或5至6元单环杂芳基环为未取代的或被1、2或3个选自下组的取代基所取代：NRa0Rb0、卤素、氰基、乙酰基、羟基、羟甲基、羟乙基、羧基、C1-8烷基、C1-8烷氧基、卤代C1-8烷基、C3-8环烷基、C3-8环烷氧基、卤代C1-8烷氧基、-C(O)C1-10烷基、-C(O)OC1-10烷基、-OC(O)C1-10烷基、-CONRa0Rb0；Ra0、Rb0各自独立地为氢或C1-8烷基。
在另一优选例中，所述4至6元饱和单杂环选自：氮杂环丁烷、氧杂环丁烷、四氢呋喃、四氢噻吩、四氢吡咯、哌啶、哌嗪、吗啉、硫代吗啉、硫代吗啉-1，1-二氧化物或四氢吡喃。
在另一优选例中，所述4至6元饱和单杂环选自以下结构：
Figure GPA0000290185960000041
Figure GPA0000290185960000042
上述4至6元饱和单杂环任选地被1、2或3个选自A1组的取代基所取代。
在另一优选例中，所述5至6元单环杂芳基环选自：噻吩环、N-烷环吡咯环、呋喃环、噻唑环、咪唑环、噁唑环、吡咯环、吡唑环、三唑环、1，2，3-三唑环、1，2，4-三唑环、1，2，5-三唑环、1，3，4-三唑环、四唑环、异噁唑环、噁二唑环、1，2，3-噁二唑环、1，2，4-噁二唑环、1，2，5-噁二唑环、1，3，4-恶二唑环、噻二唑环、吡啶环、哒嗪环、嘧啶环或吡嗪环。
在另一优选例中，所述5至6元单环杂芳基环选自以下结构：
Figure GPA0000290185960000043
上述5至6元单环杂芳基环任选地被1、2或3个选自A1组的取代基所取代。
在另一优选例中，所述5至6元单环杂芳基环选自以下结构
Figure GPA0000290185960000044
在另一优选例中，A1组的取代基为：卤素、C1-8烷基(优选为C1-6烷基，更优选为C1-3烷基)、C3-8环烷基(优选为C3-6环烷基)、卤代C1-8烷基(优选为卤代C1-6烷基，更优选为卤代C1-3烷基)、-C(O)OC1-6烷基、乙酰基、C1-8烷氧基(优选为C1-6烷氧基，更优选为C1-3烷氧基)、卤代C1-8烷氧基(优选为卤代C1-6烷氧基，更优选为卤代C1-3烷氧基)。
在另一优选例中，n为1或2。
在另一优选例中，Z1、Z2和Z3中的两个不为N。
在另一优选例中，Z1为N；Z2为CR6；Z3为CR7；R6、R7如权利要求1所定义。
在另一优选例中，Z1为CR5；Z2为N；Z3为CR7；R5、R7如权利要求1所定义。
在另一优选例中，Z1为CR5；Z2为CR6；Z3为N；R5、R6如权利要求1所定义。
在另一优选例中，A为噻吩环；所述噻吩环为未取代的或被1、2或3个选自下组的取代基所取代：NRa0Rb0、卤素、氰基、乙酰基、羟基、羟甲基、羟乙基、羧基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷基、C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、卤代C1-3烷氧基、-C(O)C1-3烷基、-C(O)OC1-3烷基、-OC(O)C1-3烷基、-CONRa0Rb0；Ra0、Rb0各自独立地为氢或C1-3烷基。
在另一优选例中，A为噻吩环；所述噻吩环为未取代的或被1、2或3个(较佳地1个)选自下组的取代基所取代：卤素(较佳地Cl)、氰基。
在另一优选例中，R1为氢或卤素；R2、R3、R4为氢。
在另一优选例中，R5、R6、R7各自独立地为氢、卤素、C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷基、C3-6环烷基、卤代C1-3烷氧基、NRa0Rb0或-C(O)C1-3烷基。
在另一优选例中，
Figure GPA0000290185960000051
为下组结构：
Figure GPA0000290185960000052
在另一优选例中，
Figure GPA0000290185960000053
为下组结构：/>
Figure GPA0000290185960000054
在另一优选例中，式(I)化合物为式(II)或式(III)所示结构：
Figure GPA0000290185960000055
式中，m为0或1；A、Z1、Z2、Z3、R1、R2、R3、R4如权利要求1所定义。
在另一优选例中，A为噻吩环；所述噻吩环为未取代的或被1、2或3个选自下组的取代基所取代：NRa0Rb0、卤素、氰基、乙酰基、羟基、羟甲基、羟乙基、羧基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷基、C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、卤代C1-3烷氧基、-C(O)C1-3烷基、-C(O)OC1-3烷基、-OC(O)C1-3烷基、-CONRa0Rb0；Ra0、Rb0各自独立地为氢或C1-3烷基。
在另一优选例中，R1为氢或卤素；R2、R3、R4为氢。
在另一优选例中，Z1为N；Z2为CR6；Z3为CR7；R6、R7各自独立地为氢、卤素、C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷基、C3-6环烷基、卤代C1-3烷氧基、NRa0Rb0或-C(O)C1-3烷基。
在另一优选例中，
Figure GPA0000290185960000061
为下组结构：/>
Figure GPA0000290185960000062
且A为噻吩环。
在另一优选例中，式(I)化合物选自A组的结构。
在另一优选例中，A组结构选自：
Figure GPA0000290185960000063
本发明第二方面提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括本发明第一方面所述的化合物或其立体异构体，或其药学上可接受的盐；以及药学可接受的载体。
本发明第三方面提供了如本发明第一方面所述的化合物或其立体异构体，或其药学上可接受的盐、或如本发明第二方面所述药物组合物在制备药物中的应用，所述药物用于抑制吲哚胺2，3-双加氧酶的活性或者用于抑制患者的免疫抑制。
在另一优选例中，所述药物用于治疗或预防患者的癌症或肿瘤、病毒感染、抑郁症、神经变性病症、创伤、年龄相关的白内障、器官移植排斥或自身免疫疾病；优选的，其中所述癌症或肿瘤选自肺癌、骨癌、胃癌、胰腺癌、皮肤癌、头颈癌、子宫癌、卵巢癌、睾丸癌、子宫癌、输卵管癌、子宫内膜癌、子宫颈癌、阴道癌、外阴癌、直肠癌、结肠癌、肛门区癌、乳腺癌、食管癌、小肠癌、内分泌系统癌、甲状腺癌、甲状旁腺癌、肾上腺癌、尿道癌、阴茎癌、前列腺癌、胰腺癌、脑癌、睾丸癌、淋巴癌、移行细胞癌、膀胱癌、肾癌或输尿管癌、肾细胞癌、肾盂癌、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、软组织肉瘤、儿童实体瘤、淋巴细胞性淋巴瘤、中枢神经系统(CNS)肿瘤、原发性中枢神经系统淋巴瘤、肿瘤血管生成、脊柱肿瘤、脑干神经胶质瘤、垂体腺瘤、黑素瘤、卡波西肉瘤、表皮样癌、鳞状细胞癌、T细胞淋巴瘤、慢性或急性白血病和所述癌的组合。
在另一优选例中，所述的应用是指将治疗有效剂量的前述的式(I)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐、或前述药物组合物与抗CTLA-4抗体、抗PD-1抗体、抗PD-L1抗体、抗病毒剂、化疗剂、免疫抑制剂、辐射、抗肿瘤疫苗、抗病毒疫苗、细胞因子疗法或酪氨酸激酶抑制剂进行联合用药；优选的，所述细胞因子优选IL-2、IL-3、IL-4或IL-5，所述化疗剂优选细胞毒性剂，所述抗PD-1抗体优选Keytruda抗体。
本发明第四方面提供了一种调节吲哚胺2，3-双加氧酶活性的方法，包括将治疗有效剂量的前述式(I)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐、或前述药物组合物与吲哚胺2，3-双加氧酶接触。优选的，所述调节优选为抑制作用。
本发明第五方面提供了一种抑制患者的免疫抑制的方法，所述方法包括将治疗有效剂量的前述式(I)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐、或前述药物组合物给予患者。
本发明第六方面提供一种治疗癌症的方法，该方法包括向患者施用治疗有效剂量的本发明的通式(I)所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐。
在另一优选例中，所述癌症或肿瘤选自肺癌、骨癌、胃癌、胰腺癌、皮肤癌、头颈癌、子宫癌、卵巢癌、睾丸癌、子宫癌、输卵管癌、子宫内膜癌、子宫颈癌、阴道癌、外阴癌、直肠癌、结肠癌、肛门区癌、乳腺癌、食管癌、小肠癌、内分泌系统癌、甲状腺癌、甲状旁腺癌、肾上腺癌、尿道癌、阴茎癌、前列腺癌、胰腺癌、脑癌、睾丸癌、淋巴癌、移行细胞癌、膀胱癌、肾癌或输尿管癌、肾细胞癌、肾盂癌、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、软组织肉瘤、儿童实体瘤、淋巴细胞性淋巴瘤、中枢神经系统(CNS)肿瘤、原发性中枢神经系统淋巴瘤、肿瘤血管生成、脊柱肿瘤、脑干神经胶质瘤、垂体腺瘤、黑素瘤、卡波西肉瘤、表皮样癌、鳞状细胞癌、T细胞淋巴瘤、慢性或急性白血病和所述癌的组合。
应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。
具体实施方式
本发明人经过长期而深入的研究，意外地发现了一类N-(2-环己基乙基)甲酰胺衍生物，其具有更好的抑制活性和更低的毒性。
术语定义
如本文所用，“烷基”指直链和支链的饱和的脂族烃基，C1-10烷基为包含1至10个碳原子的烷基，可优选为C1-8烷基，更优选C1-6烷基，最优选C1-3烷基，定义类似；烷基非限制性的例子包括：甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1，1-二甲基丙基、1，2-二甲基丙基、2，2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1，1，2-三甲基丙基、1，1-二甲基丁基、1，2-二甲基丁基、2，2-二甲基丁基、1，3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2，3-二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2，3-二甲基戊基、2，4-二甲基戊基、2，2-二甲基戊基、3，3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2，3-二甲基己基、2，4-二甲基己基、2，5-二甲基己基、2，2-二甲基己基、3，3-二甲基己基、4，4-二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2-乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基、正壬基、2-甲基-2-乙基己基、2-甲基-3-乙基己基、2，2-二乙基戊基、正癸基、3，3-二乙基己基、2，2-二乙基己基，及其各种支链异构体等。
如本文所用，“环烷基”指饱和或部分不饱和单环环状烃基，“C3-10环烷基”是指包含3至10个碳原子的环烃基，可优选为C3-8环烷基，更优选C3-6环烷基，定义类似；环烷基的非限制性实施例包括环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基、环庚基、环庚三烯基、环辛基等，优选环丙基、环戊基、环己烯基。
如本文所用，“C1-10烷氧基”指-O-(C1-10烷基)，其中烷基的定义如上所述。优选C1-8烷氧基，更优选C1-6烷氧基，最优选C1-3烷氧基。非限制性实施例包含甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、叔丁氧基、异丁氧基、戊氧基等。
如本文所用，“C3-8环烷氧基”指-O-(C3-8环烷基)，其中环烷基的定义如上所述。优选C3-6环烷氧基。非限制性实施例包含环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基、环己氧基等。
如本文所用，“C6-10芳基”指具有共轭的π电子体系的全碳单环或稠合多环(也就是共享毗邻碳原子对的环)基团，指含有6至10个碳原子的芳基；优选苯基和萘基，最优选苯基。
如本文所用，“一个键”指由其连接的两个基团通过一个共价键连接。
如本文所用，“卤素”指氟、氯、溴或碘。
如本文所用，“卤代”指基团中一个或多个(如1、2、3、4或5个)氢被卤素所取代。
例如，“卤代C1-8烷基”指烷基被一个或多个(如1、2、3、4或5个)卤素取代，其中烷基的定义如上所述。选为卤代C1-6烷基，更优选为卤代C1-3烷基。卤代C1-8烷基的例子包括(但不限于)一氯甲基、二氯甲基、三氯甲基、一氯乙基、1，2-二氯乙基、三氯乙基、一溴乙基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、一氟乙基、二氟乙基、三氟乙基等。
又例如，“卤代C1-8烷氧基”指烷氧基被一个或多个(如1、2、3、4或5个)卤素取代，其中烷氧基的定义如上所述。优选为卤代C1-6烷氧基，更优选为卤代C1-3烷氧基。卤代C1-8烷氧基的例子包括(但不限于)三氟甲氧基、三氟乙氧基、一氟甲氧基、一氟乙氧基、二氟甲氧基、二氟乙氧基等。
又例如，“卤代C3-8环烷基”指环烷基被一个或多个(如1、2、3、4或5个)卤素取代，其中环烷基的定义如上所述。优选为卤代C3-6环烷基。卤代C3-8环烷基的例子包括(但不限于)三氟环丙基、一氟环丙基、一氟环己基、二氟环丙基、二氟环己基等。
如本文所用，“氘代C1-8烷基”指烷基被一个或多个(如1、2、3、4或5个)氘原子取代，其中烷基的定义如上所述。优选为氘代C1-6烷基，更优选为氘代C1-3烷基。氘代C1-8烷基的例子包括(但不限于)单氘代甲基、单氘代乙基、二氘代甲基、二氘代乙基、三氘代甲基、三氘代乙基等。
如本文所用，“氨基”指NH2，“氰基”指CN，“硝基”指NO2，“苄基”指-CH2-苯基，“氧代基”指＝O，“羧基”指-C(O)OH，“乙酰基”指-C(O)CH3，“羟甲基”指-CH2OH，“羟乙基”指-CH2CH2OH，“羟基”指-OH，“硫醇”指SH，“亚环丙基”结构为：
Figure GPA0000290185960000091
如本文所用，“杂芳基环”与“杂芳基”可互换使用，是指具有5到10个环原子，优选5或6元单环杂芳基或8至10元双环杂芳基；环阵列中共享6、10或14个π电子；且除碳原子外还具有1到5个杂原子的基团。“杂原子”是指氮、氧或硫。
如本文所用，“4至6元饱和单环”是指含4至6个环原子的饱和或部分不饱和的全碳单环。3至6元饱和或部分不饱和单环的实例包括(但不限于)：环丙基环、环丁基环、环戊基环、环戊烯基环、环己基环、环己烯基环、环己二烯基环、环庚基环、环庚三烯基环、环辛基环等。
如本文所用，“4至6元饱和单杂环”是指4至6元单环中的1、2或3个碳原子被选自氮、氧或S(O)t(其中t是整数0至2)的杂原子所取代，但不包括-O-O-、-O-S-或-S-S-的环部分，其余环原子为碳；优选4至6元，更优选5至6元。4至6元饱和单杂环的实例包括(但不限于)氮杂环丁烷、氧杂环丁烷、四氢呋喃、四氢噻吩、四氢吡咯、哌啶、吡咯啉、噁唑烷、哌嗪、二氧戊环、二氧六环、吗啉、硫代吗啉、硫代吗啉-1，1-二氧化物、四氢吡喃等。
如本文所用，“5至6元单环杂芳基环”是指含5至6个环原子的单杂芳基环，例如包括(但不限于)：噻吩环、N-烷环吡咯环、呋喃环、噻唑环、咪唑环、噁唑环、吡咯环、吡唑环、三唑环、1，2，3-三唑环、1，2，4-三唑环、1，2，5-三唑环、1，3，4-三唑环、四唑环、异噁唑环、噁二唑环、1，2，3-噁二唑环、1，2，4-噁二唑环、1，2，5-噁二唑环、1，3，4-恶二唑环、噻二唑环、吡啶环、哒嗪环、嘧啶环或吡嗪环等。
如本文所用，“8至10元双环杂芳基环”是指含8至10个环原子的双杂芳基环，例如包括(但不限于)：苯并呋喃、苯并噻吩、吲哚、异吲哚、喹啉、异喹啉、吲唑、苯并噻唑、苯并咪唑、喹唑啉、喹喔啉、噌啉、酞嗪。
如本文所用，“取代的”指基团中的一个或多个氢原子，优选为1～5个氢原子彼此独立地被相应数目的取代基取代，更优选为1～3个氢原子彼此独立地被相应数目的取代基取代。不言而喻，取代基仅处在它们的可能的化学位置，本领域技术人员能够在不付出过多努力的情况下确定(通过实验或理论)可能或不可能的取代。例如，具有游离氢的氨基或羟基与具有不饱和(如烯属)键的碳原子结合时可能是不稳定的。
如本文所用，上述任一基团可以是取代的或未取代的。上述基团为取代时，取代基优选为1至5个以下基团，独立地选自NRa0Rb0、卤素、氰基、乙酰基、羟基、羟甲基、羟乙基、羧基、C1-8烷基、C1-8烷氧基、卤代C1-8烷基、C3-8环烷基、C3-8环烷氧基、卤代C1-8烷氧基、-C(O)C1-10烷基、-C(O)OC1-10烷基、-OC(O)C1-10烷基、-CONRa0Rb0；Ra0、Rb0各自独立地为氢或C1-8烷基。
本文以上所述的各类取代基团其自身也是可以被本文所描述的基团取代。
本文所述的4至6元饱和单杂环被取代时，取代基的位置可处在它们可能的化学位置，示例性的单杂环的代表性的取代情况如下所示：
Figure GPA0000290185960000101
其中“Sub”各自独立地表示本文所述的各类取代基；
Figure GPA0000290185960000103
表示与其他原子的连接。
本文所述的环烷基被取代时，取代基的位置可处在它们可能的化学位置，示例性的单杂环的代表性的取代情况如下所示：
Figure GPA0000290185960000102
其中“Sub”各自独立地表示本文所述的各类取代基；/>
Figure GPA0000290185960000104
表示与其他原子的连接。
如本文所用，式(I)化合物可以存在于一种或多种晶型，本发明的活性化合物包括各种晶型及其混合物。
所述“药学上可接受的盐”包括药学可接受的酸加成盐和药学可接受的碱加成盐。
“药学上可接受的酸加成盐”是指能够保留游离碱的生物有效性而无其他副作用的，与无机酸或有机酸所形成的盐。
“药学可接受的碱加成盐”，包括但不限于无机碱的盐如钠盐，钾盐，钙盐和镁盐等。包括但不限于有机碱的盐，比如铵盐，三乙胺盐，赖氨酸盐，精氨酸盐等。
本发明中提及的“溶剂化物”是指本发明的化合物与溶剂形成的配合物。它们或者在溶剂中反应或者从溶剂中沉淀析出或者结晶出来。例如，一个与水形成的配合物称为“水合物”。式(I)化合物的溶剂化物属于本发明范围之内。
本发明式(I)、式(II)或(III)所示的化合物可以含有一个或多个手性中心，并以不同的光学活性形式存在。当化合物含有一个手性中心时，化合物包含对映异构体。本发明包括这两种异构体和异构体的混合物，如外消旋混合物。对映异构体可以通过本专业已知的方法拆分，例如结晶以及手性色谱等方法。当式(I)、式(II)或(III)化合物含有多于一个手性中心时，可以存在非对映异构体。本发明包括拆分过的光学纯的特定异构体以及非对映异构体的混合物。非对映异构体可由本专业已知方法拆分，比如结晶以及制备色谱。
本发明包括上述化合物的前药。前药包括已知的氨基保护基和羧基保护基，在生理条件下被水解或经由酶反应释放得到母体化合物。具体的前药制备方法可参照(Saulnier，M.G.；Frennesson，D.B.；Deshpande，M.S.；Hansel，S.B and Vysa，D.M.Bioorg.Med.Chem Lett.1994，4，1985-1990；和Greenwald，R.B.；Choe，Y.H.；Conover，C.D.；Shum，K.；Wu，D.；Royzen，M.J.Med.Chem.2000，43，475.)。
通常，本发明化合物或其药学可接受的盐、或其溶剂化物、或其立体异构体、或前药可以与一种或多种药用载体形成适合的剂型施用。这些剂型适用于口服、直肠给药、局部给药、口内给药以及其他非胃肠道施用(例如，皮下、肌肉、静脉等)。例如，适合口服给药的剂型包括胶囊、片剂、颗粒剂以及糖浆等。这些制剂中包含的本发明的化合物可以是固体粉末或颗粒；水性或非水性液体中的溶液或是混悬液；油包水或水包油的乳剂等。上述剂型可由活性化合物与一种或多种载体或辅料经由通用的药剂学方法制成。上述的载体需要与活性化合物或其他辅料兼容。对于固体制剂，常用的无毒载体包括但不限于甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、纤维素、葡萄糖、蔗糖等。用于液体制剂的载体包括水、生理盐水、葡萄糖水溶液、乙二醇和聚乙二醇等。活性化合物可与上述载体形成溶液或是混悬液。
本发明的组合物以符合医学实践规范的方式配制，定量和给药。给予化合物的“治疗有效量”由要治疗的具体病症、治疗的个体、病症的起因、药物的靶点以及给药方式等因素决定。
如本文所用，“治疗有效量”是指将引起个体的生物学或医学响应，例如降低或抑制酶或蛋白质活性或改善症状、缓解病症、减缓或延迟疾病进程或预防疾病等的本发明化合物的量。
本发明的药物组合物中含有的本发明化合物或其药学上可接受的盐、或其溶剂化物、或其立体异构体的治疗有效量优选为0.1mg-5g/kg(体重)。
如本文所用，“药学可接受的载体”是指无毒、惰性、固态、半固态的物质或液体灌装机、稀释剂、封装材料或辅助制剂或任何类型辅料，其与患者相兼容，最好为哺乳动物，更优选为人，其适合将活性试剂输送到目标靶点而不终止试剂的活性。
如本文所用，“患者”是指一种动物，最好为哺乳动物，更好的为人。术语“哺乳动物”是指温血脊椎类哺乳动物，包括如猫、狗、兔、熊、狐狸、狼、猴子、鹿、鼠、猪和人类。
如本文所用，“治疗”是指减轻、延缓进展、衰减、预防，或维持现有疾病或病症(例如癌症)。治疗还包括将疾病或病症的一个或多个症状治愈、预防其发展或减轻到某种程度。
制备方法
本发明提供了式(I)化合物的制备方法，本发明中的化合物可以通过多种合成操作制备，这些化合物的示例性制备方法可以包括(但不限于)下文所述的流程。
较佳地，本发明式(I)化合物可以通过以下方案及实施例中所述的示例性方法以及本领域技术人员所用的相关公开文献操作完成。
在具体操作过程中，可以根据需要对方法中的步骤进行扩展或合并。
路线1
Figure GPA0000290185960000121
步骤：式(I-1)和式(I-2)化合物进行酰胺化反应生成式(I)化合物，酰胺的合成可使用活性酯法，碳二亚胺类缩合剂法，鎓盐类缩合剂法和有机磷类缩合剂等方法，所使用的缩合剂包括但不限于：碳二亚胺型缩合剂(如N，N′-二环己基碳二亚胺DCC，二异丙基碳二亚胺DIC，1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亚胺EDCI等)与活化剂HOSu，HOBt，HOAt，HOOBt等的组合，碳鎓盐类缩合剂(如TBTU，HCTU，HBTU，TNTU，HATU，HAPyU，HBPyU，TSTU等)，磷鎓盐类缩合剂(如BOP，PyBOP，PyAOP等)，有机磷类缩合剂(如DPP-Cl、DECP、DPPA、MPTA、BOP-Cl等)，三苯基磷-多卤代甲烷，三苯基磷-六氯丙酮，三苯基磷-NBS等。
路线2
Figure GPA0000290185960000122
步骤：式(I-3-1)化合物转化为相应的环己基化合物(I-3-2)可在酸性条件下，用金属(可以是但不限于铁粉，锌粉)或者氯化亚锡进行还原；或者在钯碳催化下，加氢还原。式(I-3-2)化合物转化为相应的伯胺化合物(I-3)可采用AlCl3/LiAlH4，NaBH4/CoCl2.6H2O，Raney Ni/NH2NH2.HCOOH，I2/NaBH4等还原剂进行反应。
路线3
Figure GPA0000290185960000131
步骤：式(I-1-1)化合物在对甲基苯磺酰甲基异腈的存在下通过Tosmic反应转化为式(I-1-2)化合物，式(I-1-2)化合物在还原剂NiCl和NaBH4的存在下还原得到式(I-1-3)化合物，最后在酸存在下脱Boc得式(I-1)化合物。
路线中原料式(I-1-1)和式(I-3-1)化合物可根据具体结构的不同通过市购，或通过本领域技术人员已知的方法制备得到。
以上各步骤中的反应均是本领域技术人员已知的常规反应。如无特殊说明，合成路线中所使用的试剂和原料化合物均可市购得到，或本领域技术人员根据所设计的不同化合物结构参考已知方法制备得到。
与现有技术相比，本发明的主要优点在于具有更好的IDO抑制活性和更低的毒性。
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数按重量计算。除非另行定义，本文所用的术语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或同等的方法及材料皆可应用于本发明中。
如本文所用，室温是指约为20-25℃。
如本文所用，DMB为2，4-二甲氧基苄基，THF为四氢呋喃，EA为乙酸乙酯，PE为石油醚，Ac2O为乙酸酐，NBS为N-溴代琥珀酰亚胺，DCM为二氯甲烷，AIBN为偶氮二异丁腈，Pd(dPPf)Cl2为1，1′-双(二苯基磷)二茂铁]二氯化钯，TFA为三氟乙酸，TBSCl为叔丁基二甲基氯硅烷，NCS为N-氯代丁二酰亚胺，DHP为二氢四氢吡喃，LiAlH4为氢化铝锂，PMB为对甲氧基苄基，LiHMDS为二(三甲基硅基)氨基锂，Pd2(dba)3为三(二亚苄基丙酮)二钯，RuPhos为2-二环己基磷-2′，6′-二异丙氧基-1，1′-联苯，DMAP为4-二甲氨基吡啶，THP为四氢四氢吡喃，n-BuLi为正丁基锂，TMsOTf为三氟甲磺酸三甲基硅酯，TEBAC为三乙基苄基氯化铵，HATU为2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯，DMF为二甲基甲酰胺，DMSO为二甲基亚砜，DIEA为N，N-二异丙基乙胺，BINAP为(2R，3S)-2，2′-双二苯膦基-1，1′-联萘。TosMic为对甲苯磺酰基异腈。
实施例1
Figure GPA0000290185960000141
步骤1：化合物1.1(6.74g，38.04mmol)、THF(60.00mL)与DMPU(13.28g，103.74mmol)的溶液，在0℃条件下分批加入NaH(1.45g，36.31mmol，60％纯度)与化合物1-1(5.40g，34.58mmol)。混合物在氮气保护下室温搅拌15h，LC-MS监测反应完成。向体系中加水，混合物经EA萃取，有机层经饱和NaHCO3溶液洗涤，无水Na2SO4干燥后浓缩得化合物1-2(6.10g，34.04mmol)。
步骤2：化合物1-2(1.40g，7.72mmol)与吡啶对甲苯磺酸盐(3.88g，15.44mmol)的H2O(15.00mL)、丙酮(15.00mL)溶液，混合物室温搅拌15h。TLC跟踪反应至完全.EA与水加入体系，水层经EA萃取，有机层合并后经饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，浓缩得化合物1-3(950.00mg，6.93mmol)。
步骤3：化合物1-3(950.00mg，6.93mmol)的DCM(10.00mL)溶液，0℃条件下加入2，4，6-三甲基吡啶(3.36g，27.72mmol)，混合物在0℃搅拌20分钟后，化合物1.2(3.91g，13.86mmol)加入体系.混合物在氮气保护下室温搅拌1h，TLC跟踪至反应完全。加入DCM，混合物分别经水与饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，浓缩得化合物1-4(1.80g，6.69mmol)。
步骤4：化合物1-4(1.80g，6.69mmol)、1，4-二氧六环(15.00mL)和醋酸钾(1.89g，20.07mmol)的溶液，先后加入Pd(dppf)Cl2(489.04mg，669.00umol)与化合物1.3(3.40g，13.38mmol).混合物在氮气保护下于80℃搅拌15h，TLC跟踪至反应完全。混合物浓缩后经硅胶柱相色谱(EA∶PE＝1∶15)纯化得化合物1-5(1.20g，4.86mmol，72.58％产率)。
步骤5：化合物1-5(500.00mg，2.02mmol)、1，4-二氧六环(9.98mL)和Pd(dppf)Cl2(147.66mg，202.00umol)的溶液中，先后加入Na2CO3(642.36mg，6.06mmol)、化合物1.4(630.39mg，3.03mmol)和H2O(525.26uL).混合物在氮气保护下于80℃搅拌15h，LC-MS跟踪至反应完全。混合物浓缩，加入DCM后浓缩并经硅胶柱相色谱(EA∶PE＝1∶5)纯化得化合物1-6(450.00mg，1.81mmol，89.71％产率)。
步骤6：化合物1-6(450.00mg，1.81mmol)，Pd/C(43.97mg，362.00umol)的乙酸乙酯溶液在氢气氛围下室温搅拌3h，LC-MS跟踪至反应完全。混合物过滤，滤饼用乙酸乙酯洗涤3次，有机层浓缩得化合物1-7(440.00mg，1.76mmol)。
步骤7：化合物1-7(440.00mg，1.76mmol)，Ni(20.66mg，352.00umol)、氨水(204.08uL)的乙酸乙酯(10.00mL)溶液在氢气氛围下室温搅拌15h。LC-MS跟踪至反应完全。混合物过滤，滤饼用乙酸乙酯洗涤3次，有机层浓缩得化合物1-8(440.00mg，1.73mmol)。
步骤8：化合物1a(147.01mg，904.19umol)、DCM(10.00mL)、HATU(343.59mg，904.19umol)的溶液中加入DIPEA(116.86mg，904.19umol)。混合物室温搅拌30min后加入化合物1-8(230.00mg，904.19umol)。混合物室温搅拌2h，LC-MS跟踪至反应完全。反应液浓缩后柱相色谱(PE∶EA＝1∶1)纯化得化合物z-1，经prep-HPLC(H2O/CH3CN 30％-40％-20min)纯化得Z-1(27.2mg，66.07umol，3.82％产率)。MS(ESI)m/z：399(M+H)+.1H NMR(400MHz，DMSO)δ9.12(d，J＝5.2Hz，1H)，8.64(dd，J＝12.4，7.2Hz，1H)，8.49(d，J＝8.4Hz，1H)，8.22(d，J＝8.4Hz，1H)，8.02(t，J＝7.6Hz，1H)，7.87(dt，J＝17.4，6.0Hz，2H)，7.66(d，J＝4.0Hz，1H)，7.18(d，J＝4.0Hz，1H)，3.58(d，J＝28.8Hz，1H)，3.33-3.28(m，2H)，1.96-1.51(m，11H)。
实施例2化合物Z-2的制备
Figure GPA0000290185960000151
制备方法同化合物Z-1，不同的是将Z-1制法中步骤5中的化合物1.4换成化合物3-溴喹啉，得化合物Z-2。MS(ESI)m/z：399(M+1)+.1H NMR(400MHz，DMSO)δ9.26-9.24(m，1H)，8.61(s，1H)，8.07(d，J＝8.4Hz，1H)，7.91(t，J＝8.0Hz，1H)，7.75-7.59(m，4H)，7.19(d，J＝4.0Hz，1H)，3.32-3.27(m，2H)，2.89-2.68(m，1H)，2.00-1.91(m，2H)，1.75-1.42(m，8H)，1.19-1.10(m，1H)。
实施例3化合物Z-3的制备
Figure GPA0000290185960000152
制备方法同化合物Z-1，不同的是将Z-1制法中步骤5中的化合物1.4换成化合物4-溴异喹啉，得化合物Z-3。MS(ESI)m/z：399(M+1)+.1H NMR(400MHz，DMSO)δ9.16(s，1H)，8.60(s，1H)，8.43(d，1H)，8.16(dd，2H)，7.83-7.79(m，1H)，7.69-7.64(m，2H)，7.18(d，1H)，3.30(s，2H)，3.07-3.05(m，1H)，1.94(d，2H)，1.87-1.65(m，6H)，1.62(d，1H)，1.51(d，1H)，1.29(s，1H)。
实施例4化合物Z-4的制备
Figure GPA0000290185960000153
制备方法同化合物Z-1，不同的是将Z-1制法中步骤5中的化合物1.4换成化合物1-溴异喹啉，得化合物Z-4。MS(ESI)m/z：399(M+1)+。1H NMR(400MHz，DMSO)δ＝8.60(t，1H)，8.42(m，1H)，8.31(d，1H)，7.94(d，1H)，7.74(dd，1H)，7.70-7.65(m，0.7H)，7.66-7.59(m，2H)，7.17(d，1H)，3.67(m，1H)，3.30-3.22(m，2H)，2.09-1.45(m，10H)。
实施例5化合物Z-5的制备
Figure GPA0000290185960000161
化合物Z-1(350.00mg，877.30umol)，Pd/C(35.00mg，877.30umol)的乙酸乙酯(10.00mL)溶液在氢气氛围下室温搅拌2h。LC-MS跟踪至反应完全。混合物过滤，滤饼用乙酸乙酯洗涤3次，有机层浓缩后经perp-TLC(EA∶PE＝1∶1)纯化得化合物Z-5(28.00mg，73.05umol，8.33％产率)。MS(ESI)m/z 365(M+H)+.1H NMR(400MHz，DMSO)δ9.17-9.16(m，1H)，8.57-8.51(m，2H)，8.26(d，H)，8.07(t，1H)，7.92-7.86(m，2H)，7.78-7.72(m，2H)，7.15-7.13(m，1H)，3.63-3.60(m，1H)，3.36-3.29(m，2H)，1.92-1.61(m，10H)，1.55-1.48(m，1H)。
实施例6化合物Z-6的制备
Figure GPA0000290185960000162
制备方法同化合物Z-5，不同的是将Z-5制法中的化合物Z-1换成化合物Z-2，得化合物Z-6。MS(ESI)m/z 365(M+H)+.1H NMR(400MHz，DMSO)δ8.85(dd，1H)，8.48(d，1H)，8.17(dd，1H)，8.01-7.90(m，2H)，7.75(ddt，2H)，7.69(ddt，1H)，7.58(ddd，1H)，7.15(ddd，1H)，3.34-3.26(m，2H)，2.97-2.64(m，1H)，1.94(d，2H)，1.85-1.58(m，6H)，1.57-1.42(m，2H)，1.16(dd，1H)。
实施例13化合物Z-13的制备
Figure GPA0000290185960000163
步骤1：制备方法同化合物1-8，不同的是将1-8制法中化合物1-7换成化合物13-1。
步骤2：制备方法同化合物Z-1，不同的是将Z-1制法中的化合物1-8换成化合物13-2。
步骤3：化合物13-3(372.91mg，1.00mmol)、TFA(6.00mL)与DCM(6.00mL)的溶液室温搅拌2h，TLC跟踪至反应结束.混合物减压浓缩得化合物13-4(380.00mg，1.39mmol)直接用于下一步反应。
步骤4：化合物13-4(365.54mg，1.34mmol)的甲苯(10.00mL)溶液，在室温下加入Pd2(dba)3(61.32mg，67umol)，BINAP(83.43mg，134umol)，Cs2CO3(1.31g，4.02mmol)和化合物13.1(278.79mg，1.34mmol).混合物在氮气氛围下于100℃搅拌15h。LC-MS跟踪至反应结束。反应液浓缩后经prep-TLC(DCM∶MEOH＝15∶1)和prep-HPLC(H2O/CH3CN22％-32％-20min)纯化得化合物Z-13(93.40mg，15.61％产率)。MS(ESI)m/z 400(M+H)+。1H NMR(400MHz，DMSO)δ8.65(d，1H)，8.60(t，1H)，8.16(s，1H)，7.98(d，1H)，7.93(d，1H)，7.77-7.59(m，2H)，7.58-7.47(m，1H)，7.18(d，1H)，6.95(d，1H)，3.53(d，2H)，3.33(dd，2H)，2.79(t，2H)，1.89(d，2H)，1.55(m，5H)。
实施例15化合物Z-15的制备
Figure GPA0000290185960000171
步骤1：制备方法同化合物1-6，不同的是将1-6制法中化合物1-5和化合物1.4换成化合物15.1和化合物15-1。经combiflash纯化得油状化合物15-2(3.6g，92％产率)，MS m/z(ESI)：286[M+H]+。
步骤2：制备方法同化合物1-7，不同的是将1-7制法中化合物1-6换成化合物15-2。MS m/z(ESI)：288[M+H]+。
步骤3：化合物15-3(3.1g，10.80mmol)的THF(10mL)溶液加入浓盐酸(2M，20mL)，混合物室温搅拌1h。LCMS跟踪至反应结束。反应液加饱和碳酸氢钠调pH至8后，加乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得化合物15-4。MS m/z(ESI)：244[M+H]+。
步骤4：化合物15.2(1.36g，7.70mmol)的THF(50mL)溶液加入DMPU(2.7g，21.0mmol)，冰浴下加入NaH(336mg，8.4mmol)，混合物继续在冰浴下搅拌30min。化合物15-4(1.7g，7.0mmol)的THF(20mL)溶液在冰浴下逐滴加入混合物体系中，混合物冰浴下搅拌1h后升至室温搅拌1h。LCMS跟踪至反应结束。体系中加水并经EA萃取，有机层浓缩得化合物15-5。MS m/z(ESI)：267[M+H]+。
步骤5：制备方法同化合物1-7，不同的是将1-7制法中化合物1-6换成化合物15-5。MS m/z(ESI)：269[M+H]+。
步骤6：化合物15-6的THF(50mL)溶液在-10℃下加入LiH4Al(623mg，16.42mmol)。混合物继续在-10℃搅拌1h后升至0℃搅拌3h。LCMS跟踪至反应结束。向体系中加入10H2O·Na2SO4，室温下搅拌1h后过滤，浓缩得化合物15-7。MS m/z(ESI)：273[M+H]+。
步骤7：化合物15-7(0.96g，3.53mmol)的DCM(15mL)溶液加入Et3N(1.43g，14.12mmol)与化合物15.3(0.7g，3.88mmol)。混合物在室温下搅拌1h。LCMS跟踪至反应结束。混合物浓缩后经prep-HPLC纯化得化合物Z-15(381.25mg，26％产率)。MS m/z(ESI)：417[M+H]+。
实施例16化合物Z-16的制备
Figure GPA0000290185960000181
步骤1：化合物TosMic(603mg，3.09mmol)的DMF(100mL)溶液中加入叔丁醇钾(629.4mg，5.15mmol)和甲醇(1mL)，混合物室温搅拌1h，化合物15-4(500mg，2.06mmol)加入反应体系中并继续室温搅拌过夜。LCMS跟踪至反应结束。混合物减压浓缩后经combiflash纯化得200mg油状化合物16-1。MS m/z(ESI)：255.2[M+H]+。
步骤2：化合物16-1(200mg，0.8mmol)的甲醇(50mL)溶液加入(Boc)2O(349.2mg，1.6mmol)，NiCl(311mg，2.4mmol)和NaBH4(152mg，4mmol)。混合物室温搅拌2h。LCMS跟踪至反应结束。混合物减压浓缩后经combiflash纯化得200mg化合物16-2。MS m/z(ESI)：359.3[M+H]+。
步骤3：制备方法同化合物8-4，不同的是将8-4制法中化合物8-3换成化合物16-2。MS m/z(ESI)：259.3[M+H]+。
步骤4：制备方法同化合物Z-15，不同的是将Z-15制法中化合物15-7换成化合物16-3。经prep-HPLC纯化得化合物Z-16(54mg，40.6％产率)。MS m/z(ESI)：403.1[M+H]+。将所得化合物Z-16经过柱AY-H(250*4.6mm 5um)分离(流动相：己烷(0.1％DEA)：乙醇(0.1％DEA)＝80∶20)分别得到4.89mg化合物Z-27和4.56mg化合物Z-28。
实施例17化合物Z-17的制备
Figure GPA0000290185960000182
步骤1：将4-氯-6-氟喹啉(2.50g，13.81mmol)，1，4-二氧杂-螺[4，5]癸-7-烯-8-硼酸频哪醇酯(4.00g，15.19mmol)，[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(1.0g，1.38mmol)和碳酸钠(4.20g，41.43mmol)溶解于二氧六环(60mL)和水(15mL)的混合溶液中，然后将反应液加热到100℃，搅拌18小时。当反应结束，将反应冷却到室温，过滤除去不溶解的物质，将溶液减压蒸干，通过柱层析(DCM∶MeOH＝0-7％)得到油状产物(3.60g，92％)。MS(ESI)286.1[M+H]+；1H NMR(400MHz，dmso)δ8.78(d，J＝4.4Hz，1H)，8.09-8.01(m，1H)，7.67-7.57(m，2H)，7.30(d，J＝4.4Hz，1H)，5.69-5.62(m，1H)，3.93(d，J＝3.3Hz，4H)，2.48-2.44(m，2H)，2.41(d，J＝3.1Hz，2H)，1.86(t，J＝6.4Hz，2H).
步骤2：将6-氟-4-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸-7-烯-8-基)喹啉(3.10g，10.88mmol)溶解于THF(60mL)中，再加入钯炭(10％，50％w/w，600mg)，反应液在氢气下搅拌过夜，过滤除去不溶解的物质，将滤液减压蒸干得到油状粗产物(3.10g，100％)。MS(ESI)288.1[M+H]+.
步骤3：将6-氟-4-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)喹啉(3.10g，10.80mmol)溶解于THF(10mL)中，再加入盐酸(2M，20mL，40mmol)，反应液在室温下搅拌1小时，然后将反应液用饱和碳酸氢钠水溶液调节Ph＝8，用乙酸乙酯萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，将滤液减压蒸干得到油状粗产物(2.70g，100％)。MS(ESI)244.1[M+H]+.
步骤4：将2-乙甲氧基磷酰基乙腈(1.36g，7.70mmol)溶解于THF(50mL)中，加入N，N-二甲基丙烯基脲(2.70g，21.00mmol)，再将反应液降温到0℃，将NaH(60％，336mg，8.40mmol)分批加入，并在0℃搅拌30分钟，最后将4-(6-氟-4-喹啉基)-环己酮(1.70g，7.00mmol)的THF(20mL)溶液滴加到0℃的反应液中，滴加完毕，反应液在0℃搅拌1小时，然后升到室温再反应1小时。当原料反应完全，将反应液倒入冰水(70mL)中，用乙酸乙酯萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，将滤液减压蒸干得到油状粗产物(2.10g，100％)。MS(ESI)267.0[M+H]+.
步骤5：将2-(4-(6-氟喹啉-4-基)亚环己基)乙腈(2.10g，7.89mmol)和钯炭(10％，50％w/w，500mg)加入到甲醇(20mL)和乙酸(10mL)的混合溶液中，并将此反应液在氢气下搅拌9小时，然后将反应液过滤，滤液用饱和碳酸氢钠水溶液调节Ph＝8，用乙酸乙酯萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，将滤液减压蒸干得到油状粗产物(2.10g，100％)。
MS(ESI)269.1[M+H]+.
步骤6：将2-(4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)乙腈(1.10g，4.10mmol)溶解于THF(50mL)中，将反应液降到-10℃，分批加入氢化铝锂(623mg，16.42mmol)，然后将反应液在-10℃搅拌1小时，再升到0℃搅拌3小时，当原料反应完全，将十水硫酸钠分批加入到反应液中，直到没有气泡产生，再将混合液搅拌1小时，过滤除去不溶解的物质，滤液通过减压蒸干得到油状粗产物(1.07g，96％)。MS(ESI)273.3[M+H]+.
步骤7：将2-(4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)乙基-1-胺(50mg，0.18mmol)和二异丙基乙胺(71mg，0.55mmol)溶解于二氯甲烷(10mL)中，再将3-氯苯甲酰氯(38mg，0.22mmol)加入到反应液中并在室温搅拌1小时，当原料反应完全，将反应液减亚蒸干，通过高效液相制备得到白色的固体产物Z-17(6.2mg，8％)。MS(ESI)411.2[M+H]+；1H NMR(400MHz，DMSO)δ8.80(d，J＝4.6Hz，1H)，8.60(t，J＝5.4Hz，1H)，8.09(dd，J＝9.2，5.8Hz，1H)，7.98(dd，J＝11.0，2.7Hz，1H)，7.90(t，J＝1.7Hz，1H)，7.83(d，J＝7.8Hz，1H)，7.70-7.63(m，1H)，7.63-7.57(m，1H)，7.51(t，J＝7.8Hz，1H)，7.44(d，J＝4.6Hz，1H)，3.31-3.14(m，3H)，1.91(s，4H)，1.64-1.40(m，5H)，1.39-1.20(m，2H).
实施例18化合物Z-18的制备
Figure GPA0000290185960000201
步骤1：将Boc-D-脯氨酸(95mg，0.44mmol)和二异丙基乙胺(142mg，1.10mmol)溶解于二氯甲烷(10mL)中，再加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(168mg，0.44mmol)并在室温搅拌1小时，最后加入2-(4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)乙基-1-胺(100mg，0.37mmol)并在室温中搅拌2小时，当原料反应完全，将反应液用二氯甲烷(30mL)稀释，再分别用水(10mL)和饱和食盐水(10mL)洗涤有机相，最后有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，将滤液减压蒸干得到油状粗产物(312mg)。MS(ESI)470.2[M+H]+.
步骤2：将上步粗产物(R)-2-((2-(4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)乙基)甲酰胺)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(312mg，0.67mmol)溶解于二氯甲烷(5mL)中，在室温下加入盐酸的二氧六环溶液(4M，5mL，20mmol)并搅拌1小时，当原料反应完全，将反应液减压蒸干并通过高效液相制备得到白色的固体产物HY803183(14mg，10％，两步)。MS(ESI)370.2[M+H]+；1H NMR(400MHz，DMSO)δ9.03(s，2H)，8.55(s，1H)，8.46(t，J＝5.3Hz，1H)，8.27-8.12(m，2H)，7.87(s，1H)，7.73(d，J＝10.1Hz，1H)，4.15-4.05(m，1H)，3.51(s，1H)，3.38-3.06(m，4H)，2.35-2.22(m，1H)，2.02-1.20(m，14H).
实施例20化合物Z-20的制备
Figure GPA0000290185960000202
将1-甲基吡唑-4-甲酸(56mg，0.44mmol)和二异丙基乙胺(142mg，1.10mmol)溶解于二氯甲烷(10mL)中，再加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(168mg，0.44mmol)并在室温搅拌1小时，最后加入2-(4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)乙基-1-胺(100mg，0.37mmol)并在室温中搅拌2小时，当原料反应完全，将反应液减压蒸干并通过高效液相制备得到白色的固体产物HY803185(20mg，14％)。MS(ESI)381.3[M+H]+；1H NMR(400MHz，DMSO)δ8.84(t，J＝4.2Hz，1H)，8.12(dd，J＝15.5，8.1Hz，2H)，8.06-7.96(m，2H)，7.84(s，1H)，7.70(td，J＝8.8，2.7Hz，1H)，7.50(dd，J＝18.2，4.6Hz，1H)，3.85(d，J＝4.1Hz，3H)，3.44-3.20(m，3H)，1.90(d，J＝10.5Hz，3H)，1.70(d，J＝7.0Hz，3H)，1.62-1.38(m，3H)，1.31(dd，J＝22.7，10.6Hz，2H).
化合物Z-19、Z-21至Z-25、Z-29至Z-30参照化合物Z-20的方法制备。化合物Z-26、Z-31、Z-32、Z-33和Z-40参照化合物Z-17的方法制备。Z-34、Z-35、Z-41和Z-42参照化合物Z-17的方法制备，得到的消旋产物通过高压液相制备。
Figure GPA0000290185960000211
/>
Figure GPA0000290185960000221
/>
Figure GPA0000290185960000231
实施例36-37化合物Z-36/Z-37的制备
Figure GPA0000290185960000232
将2-(4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)乙基-1-胺(0.96g，3.53mmol)和三乙胺(1.43g，14.12mmol)溶解于二氯甲烷(35mL)中，再加5-氯-2-酰氯噻吩(0.70g，3.88mmol)并在室温搅拌1小时，当原料反应完全，将反应液减压蒸干并通过高效液相制备得到两个白色的固体产物，反式产物为化合物Z-36(213mg，14％)。MS(ESI)417.1[M+H]+；1H NMR(400MHz，dmso)δ8.77(d，J＝4.5Hz，1H)，8.52(s，1H)，8.05(dd，J＝9.2，5.8Hz，1H)，7.94(dd，J＝11.0，2.7Hz，1H)，7.67-7.58(m，2H)，7.41(d，J＝4.5Hz，1H)，7.15(d，J＝4.0Hz，1H)，3.25(s，2H)，1.87(d，J＝11.3Hz，4H)，1.42(ddd，J＝76.8，20.2，12.1Hz，8H).顺式产物为化合物Z-37(168mg，11％)。MS(ESI)417.1[M+H]+；1H NMR(400MHz，dmso)δ8.81(d，J＝4.5Hz，1H)，8.57(t，J＝5.6Hz，1H)，8.08(dd，J＝9.2，5.9Hz，1H)，7.96(dd，J＝11.0，2.8Hz，1H)，7.69-7.61(m，2H)，7.48(d，J＝4.5Hz，1H)，7.18(d，J＝4.0Hz，1H)，3.34(d，J＝4.2Hz，1H)，3.30-3.25(m，2H)，1.91-1.64(m，11H).
实施例38-39化合物Z-38/Z-39的制备
Figure GPA0000290185960000241
/>
2-((1r，4r)-4-(喹啉-4-基)环己基)乙基-1-胺和2-((1s，4s)-4-(喹啉-4-基)环己基)乙基-1-胺的制备
Figure GPA0000290185960000242
将2-(4-(喹啉-4-基)环己基)乙腈(1.60g，6.40mmol)溶解于THF(70mL)中，将反应液降到-10℃，分批加入氢化铝锂(973mg，25.60mmol)，然后将反应液在-10℃搅拌1小时，再升到0℃搅拌3小时，当原料反应完全，将十水硫酸钠分批加入到反应液中，直到没有气泡产生，再将混合液搅拌1小时，过滤除去不溶解的物质，滤液通过减压蒸干得到油状粗产物，再将粗产物通过高压液相制备得到两个白色固体产物，反式产物2-((1r，4r)-4-(喹啉-4-基)环己基)乙基-1-胺(270mg，11％)。MS(ESI)255.3[M+H]+；1H NMR(400MHz，DMSO)δ8.84(d，J＝4.5Hz，1H)，8.44(s，2H)，8.22(d，J＝8.3Hz，1H)，8.03(d，J＝8.4Hz，1H)，7.80-7.70(m，1H)，7.68-7.59(m，1H)，7.43(d，J＝4.5Hz，1H)，3.43(s，1H)，2.88-2.75(m，2H)，1.94-1.54(m，11H).顺式产物为2-((1s，4s)-4-(喹啉-4-基)环己基)乙基-1-胺(140mg，6％)。MS(ESI)255.3[M+H]+；1H NMR(400MHz，DMSO)δ8.84(d，J＝4.5Hz，1H)，8.38(s，2H)，8.22(d，J＝8.4Hz，1H)，8.03(d，J＝8.3Hz，1H)，7.79-7.71(m，1H)，7.67-7.58(m，1H)，7.42(d，J＝4.5Hz，1H)，3.52-3.33(m，1H)，2.88-2.76(m，1H)，2.04-1.39(m，12H).
化合物Z-38的制备
Figure GPA0000290185960000243
将2-((1r，4r)-4-(喹啉-4-基)环己基)乙基-1-胺(270mg，.1.06mmol)和三乙胺(429mg，4.25mmol)溶解于二氯甲烷(15mL)中，再加5-氯-2-酰氯噻吩(230mg，1.28mmol)并在室温搅拌1小时，当原料反应完全，将反应液减压蒸干并通过高效液相制备得到反式产物Z-38(117mg，28％)。MS(ESI)399.2[M+H]+；1H NMR(400MHz，dmso)δ8.78(d，J＝4.5Hz，1H)，8.53(t，J＝5.4Hz，1H)，8.18(d，J＝8.0Hz，1H)，7.98(dd，J＝8.4，0.9Hz，1H)，7.71(ddd，J＝8.3，6.9，1.3Hz，1H)，7.63-7.56(m，2H)，7.36(d，J＝4.6Hz，1H)，7.15(d，J＝4.0Hz，1H)，3.32(dd，J＝23.6，9.2Hz，3H)，1.89(d，J＝10.5Hz，4H)，1.63-1.15(m，7H).
化合物Z-39的制备
Figure GPA0000290185960000251
将2-((1s，4s)-4-(喹啉-4-基)环己基)乙基-1-胺(140mg，0.55mmol)和三乙胺(223mg，2.20mmol)溶解于二氯甲烷(12mL)中，再加5-氯-2-酰氯噻吩(119mg，0.66mmol)并在室温搅拌1小时，当原料反应完全，将反应液减压蒸干并通过高效液相制备得到顺式产物Z-39(51mg，23％)。MS(ESI)399.1[M+H]+；1H NMR(400MHz，dmso)δ8.79(d，J＝4.5Hz，1H)，8.54(t，J＝5.5Hz，1H)，8.18(d，J＝8.1Hz，1H)，7.98(dd，J＝8.4，0.9Hz，1H)，7.71(ddd，J＝8.3，6.9，1.2Hz，1H)，7.65-7.54(m，2H)，7.40(d，J＝4.6Hz，1H)，7.14(d，J＝4.0Hz，1H)，3.39(s，1H)，3.27-3.21(m，2H)，1.91-1.60(m，11H).
测试例1 Hela细胞的抑制活性测试
试剂
Hela细胞来自ATCC；DMEM无酚红细胞培养基来自Gibco，产品编号：21063-029；INF-γ来自Life Technologies，产品编号：PHC4031 100ug；胎牛血清来自Gibco，产品编号：10099-141；0.25％胰蛋白酶来自GIBCO，产品编号：25200-072；磷酸缓冲液来自Hyclone，产品编号：SH30256.01B；6.1N三氯乙酸来自Sigma，产品编号：T0699；对二甲氨基苯甲醛(pDMAB)来自Sigma，产品编号：15647-7；左旋色氨酸来自Sigma，产品编号：T0254-25G；DMSO来自Sigma，产品编号：D5879-1L；96孔细胞培养板来自BD Falcon，产品编号：353072。
试剂准备
1、1克pDMAB溶解于50ml醋酸中(避光，现配现用)；
2、用PBS配置左旋色氨酸至浓度200ug/ml备用；
3、用无酚红培养基配置INF-γ至250ng/ml备用；
实验步骤
1、第一天，以4E3个细胞每孔将Hela细胞种植于细胞培养板中，体积为每孔70ul，置细胞培养箱孵育24小时；
2、第二天，每一孔分别加入10ul浓度10X的待测化合物、10ul左旋色氨酸和10ulINF-γ，DMSO反应浓度为0.5％，左旋色氨酸反应浓度为20ug/ml，INF-γ反应浓度为25ng/ml；
3、细胞培养板置细胞培养箱培养48小时；
4、第四天，取上清70ul细胞培养上清与另一块反应板中，每孔加入5ul 6.1N三氯乙酸，置50℃反应30分钟；
5、反应板2500rpm离心10分钟，每孔取50ul上清至一新的反应板；加入50ul pDMAB(2％)置摇床轻轻摇匀；用酶标仪读取480nm吸光度，使用XLfit软件计算化合物IC50值。测试结果如表1所示。
表1本发明示例化合物对Hela细胞的抑制活性
化合物编号 Hela/μM 化合物编号 Hela/μM
Z-1 0.011 Z-5 0.024
Z-15 0.013 Z-16 0.025
Z-17 0.684 Z-18 11.035
Z-19 0.903 Z-20 0.508
Z-21 0.330 Z-22 0.394
Z-23 0.381 Z-24 0.523
Z-25 0.573 Z-27 0.449
Z-28 0.024 Z-29 0.441
Z-30 0.162 Z-31 0.433
Z-32 0.220 Z-36 0.198
Z-37 0.006 Z-38 0.393
Z-39 0.008 Z-40 0.162
Z-41 0.064 Z-42 0.504
*化合物Z-27和Z-28为由化合物z-16分离得到的一对对映异构体，化合物Z-36和Z-37为由化合物z-15分离得到的一对对映异构体，化合物Z-38和Z-39为由化合物z-1分离得到的一对对映异构体。
由表1中可以看出，本发明的化合物对Hela细胞具有优异的抑制活性，可达50nM以下。尤其是当Z1为N，Z2、Z3为CH，且R1为F，R2、R3、R4同为氢，A为噻吩环时，本发明化合物的同侧构型的异构体的活性甚至可以达到10nM以下。
测试例2 HEK293-hIDO1细胞的抑制活性测试
试剂
HE293-hIDO1-7稳转细胞系来自TGZ0172；DMEM无酚红细胞培养基来自Gibco，产品编号：21063-029；胎牛血清来自Gibco，产品编号：10099-141；0.25％胰蛋白酶来自Gibco，产品编号：25200-072；磷酸缓冲液来自Hyclone，产品编号：SH30256.01B；6.1N三氯乙酸来自Sigma，产品编号：T0699；对二甲氨基苯甲醛(pDMAB)来自Sigma，产品编号：15647-7；左旋色氨酸来自Sigma，产品编号：T0254-25G；DMSO来自Sigma，产品编号：D5879-1L；96孔细胞培养板来自BD Falcon，产品编号：353072。
试剂准备
1、1克pDMAB溶解于50ml醋酸中(避光，现配现用)；
2、用PBS配置左旋色氨酸至浓度200ug/ml备用；
实验步骤
1、第一天，以4E4个细胞每孔种植293-hIDO1细胞种植于细胞培养板中，体积为每孔80ul；
2、每一孔加入10ul浓度10X的待测化合物和10ul左旋色氨酸，DMSO终浓度为0.5％，左旋色氨酸终浓度为20ug/ml；
3、细胞培养板置细胞培养箱培养48小时；
4、第三天，取上清70ul细胞培养上清与另一块反应板中，每孔加入5ul 6.1N三氯乙酸，置50℃反应30分钟；
5、反应板2500rpm离心10分钟，每孔取50ul上清至一新的反应板；加入50ul pDMAB(2％)置摇床轻轻摇匀；用酶标仪读取480nm吸光度，使用XLfit软件计算化合物IC50值。测试结果如表2所示。
表2本发明示例化合物对HEK-293细胞的抑制活性
化合物编号 HEK-293/μM 化合物编号 HEK-293/μM
Z-28 0.021 Z-30 0.034
Z-32 0.265 Z-33 0.052
Z-34 0.062 Z-35 0.046
Z-36 0.114 Z-37 0.004
Z-38 0.300 Z-39 0.004
从表1和2可以看出，本发明示例化合物对Hela和HEK-293细胞具有较好的抑制活性。
在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

Claims (3)

1.一种化合物，或其药学上可接受的盐，所述化合物选自A组的结构，其中A组结构为：
Figure QLYQS_1
Figure QLYQS_2
。
2.一种药物组合物，所述药物组合物包括权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐；以及药学可接受的载体。
3.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐、或如权利要求2所述的药物组合物在制备药物中的应用，所述药物用于抑制吲哚胺2,3-双加氧酶的活性。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106999450A (zh) * 2014-11-05 2017-08-01 弗莱塞斯生物科学公司 免疫调节剂
CN107427499A (zh) * 2014-11-05 2017-12-01 弗莱塞斯生物科学公司 免疫调节剂
WO2017192840A1 (en) * 2016-05-04 2017-11-09 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
WO2017192844A1 (en) * 2016-05-04 2017-11-09 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use

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