CN111484446A

CN111484446A - 氯吡格雷代谢活性体二硫衍生物、其制备方法及医药用途

Info

Publication number: CN111484446A
Application number: CN202010262896.6A
Authority: CN
Inventors: 姜海业; 张晓峰
Original assignee: Beijing Yifang Biological Technology Co ltd
Current assignee: Beijing Yifang Biological Technology Co ltd
Priority date: 2020-04-02
Filing date: 2020-04-02
Publication date: 2020-08-04

Abstract

本发明涉及药物化学领域，提供一系列氯吡格雷代谢活性体二硫衍生物、药学上可接受的盐或溶剂化物。这些化合物与氯吡格雷相比，具有更优的代谢特征，能够绕过人体内P450系统，具备很好的成药性。本发明还公开了上述化合物的制备方法及其在医药领域尤其是心脑血管血栓或栓塞性疾病药物领域的用途。

Description

氯吡格雷代谢活性体二硫衍生物、其制备方法及医药用途

技术领域

本发明涉及药物化学领域，具体涉及一系列氯吡格雷代谢活性体二硫衍生物，本发明还公开了上述化合物的制备方法及其医药用途。

背景技术

心脑血管血栓性疾病是一种常见的疾病，近年来以冠状动脉血栓和脑血栓为主的血栓栓塞性疾病的发病率呈上升趋势，严重危害人类的健康，因此，对这类疾病的防治研究十分重要。血小板聚集是正常凝血机制中的一个关键环节，但血小板的黏附、聚集也是血栓形成的起始环节。因此，抑制血小板聚集药物在治疗血栓病中发挥着重要作用(Stroke，1999，30：878)。抗血小板凝集药一直是人们研究的热点。

由法国赛诺菲制药公司研制开发的氯吡格雷(Clopidogrel)是目前世界范围内应用最为广泛的抗血小板凝集药物。氯吡格雷是一个前体药物。早期的体内代谢研究表明，氯吡格雷在体内经过肝脏P450酶系的两步氧化，开环代谢产生一不饱和环胺结构的活性代谢物。氯吡格雷的活性代谢物与血小板表面P2Y12受体形成共价结合，通过拮抗P2Y12受体从而抑制血小板的凝集(Thromb Haemost，2000，84：89D。日本三共制药公司和美国礼来制药公司在氯吡格雷结构基础上开发出了新一代抗血小板药物普拉格雷(Prasugrel)。普拉格雷也是一个前体药物。早期的体内代谢研究发现，普拉格雷在体内经过酯酶水解和P450酶系的氧化开环，形成一饱和环胺结构的活性代谢物，拮抗血小板P2Y12受体(Drug MetabDispos，2007，35：1096)。

2012年，法国研究者发现，氯吡格雷在体内不仅会代谢成饱和环胺结构的活性代谢物，还会通过其他酯酶代谢出少量双键发生转移的不饱和环胺结构的代谢物，这些不饱和环胺结构的代谢物在体内外的抗血小板活性迄今未见有文献报道(Chem Res Toxicol，2012，25：348)。

以饱和环胺代谢物为结构基础，日本三共公司曾申请了多项专利，如WO98088H、WO9943648、WO9943648。这些专利保护了一系列饱和环胺结构衍生物并报道了体内外抗血小板活性情况，但是未见对于具有氯吡格雷代谢活性体二硫结构的衍生物及其抗血小板活性的研究文献报道。

发明内容

在合成不饱和环胺衍生物的过程中，我们偶然得到了一系列氯吡格雷代谢活性体二硫结构的衍生物。在对这些化合物进行了抗血小板活性测试后我们惊奇地发现，这些氯吡格雷代谢活性体二硫衍生物在动物体内呈现出较普拉格雷更为强大的抗血小板活性。因此，这类不饱和环胺二硫衍生物值得我们进一步的研究与开发。

基于此前文献报道的氯吡格雷和普拉格雷代谢物的结构，本发明首次公开了新型氯吡格雷代谢活性体不饱和环胺二硫衍生物、其制备方法及用途，尤其用于治疗动脉粥样硬化疾病、心肌梗死、中风、外周动脉疾病、急性冠脉综合征和抗血管形成手术期间的血栓形成。S-氧氯吡格雷参照US8,536,337 B2提供的的方法进行合成；通式I、VI化合物最后一步二硫化合物的制备参照文献进行(Tetrahedron Lett.，2005，46，3583-85；Tetrahedron，2011，67，8895-8901；J.Org.Chem.，2015，80，7019-32；WO2014/059884；US6610708；CN1298389；CN103626694；有机化学，2003，23(9)：1019-1021.)。本发明提供的化合物，其显著特征是在代谢过程中不需要细胞色素P450系统的参与，以目标化合物之一为例，代谢过程对比如图1.

本发明的目的在于提供一种如下化学式I和化学式VI的化合物、药学上可接受的盐或溶剂化物。包括Z式手性异构体化合物如结构式II、III、IV、V、XIII、XIV；所述衍生物反式异构体如式VII或XII所示，包括E式手性异构体化合物如结构式VIII、IX、X、XI、XV、XVI所示：

其中，R₁代表氢、1-10个碳的非取代的或X取代的直链或支链烷烃基、苯基或X取代的苯基、苄基或X取代的苄基、萘基或X取代的萘基、3-7个碳的非取代的或X取代的环烷基、1-10个碳的非取代的或X取代的直链或支链烷氧基、3-7个碳的非取代的或X取代的环烷氧基、特戊酰氧基甲基、碳酸异丙酯甲基。

R₂代表氢、氟、氯、溴、碘、腈基、硝基、氨基、酰胺基、磺酰胺基、三氟甲基、巯基、羟基、乙酰氧基、甲氧基、乙氧基、羧基、甲氧酰基、乙氧酰基、1-10个碳的直链或支链烷烃基、烯烃基、炔烃基。R₃代表1-10个碳的非取代的或X取代的直链或支链烷烃基、烯烃基、炔烃基、苯基或X取代的苯基、苄基或X取代的苄基、萘基或X取代的萘基、1-10个碳的非取代的或X取代的直链或支链烷氧基、3-7个碳的非取代的或X取代的环烷氧基，1-10个碳的非取代的或X取代的直链或支链烷酰基、非取代的或X取代的苯甲酰基，3-7个碳的非取代的或X取代的环烷酰基。X代表氟、氯、溴、碘、腈基、硝基、氨基、酰胺基、磺酰胺基、三氟甲基、巯基、羟基、乙酰氧基、甲氧基、乙氧基、羧基、甲氧酰基、乙氧酰基、芳氧基、苯基或Y取代的苯基；Y为氟、氯、溴、碘、腈基、硝基、氨基、酰胺基、磺酰胺基、二氟甲基、巯基、羟基、乙酰氧基、甲氧基、乙氧基、羧基、甲氧酰基、乙氧酰基，并且Y基团处于苯环的2、3或4位。

优选的，本发明所述式I所示的化合物、药学上可接受的盐或溶剂化物。

R₁代表氢、1-10个碳的非取代的或X取代的直链或支链烷烃基、苯基或X取代的苯基、苄基或X取代的苄基、萘基或X取代的萘基、3-7个碳的非取代的或X取代的环烷基、1-10个碳的非取代的或X取代的直链或支链烷氧基、3-7个碳的非取代的或X取代的环烷氧基、特戊酰氧基甲基、碳酸异丙酯甲基。

R₂代表氢、氟、氯、溴、碘、腈基、硝基、氨基、酰胺基、磺酰胺基、三氟甲基、巯基、羟基、乙酰氧基、甲氧基、乙氧基、羧基、甲氧酰基、乙氧酰基、1-10个碳的直链或支链烷烃基、烯烃基、炔烃基。

R₃代表1-10个碳的非取代的或X取代的直链或支链烷烃基、烯烃基、炔烃基、苯基或X取代的苯基、苄基或X取代的苄基、萘基或X取代的萘基、1-10个碳的非取代的或X取代的直链或支链烷氧基、3-7个碳的非取代的或X取代的环烷氧基，1-10个碳的非取代的或X取代的直链或支链烷酰基、非取代的或X取代的苯甲酰基，3-7个碳的非取代的或X取代的环烷酰基。X代表氟、氯、溴、碘、腈基、硝基、氨基、酰胺基、磺酰胺基、三氟甲基、巯基、羟基、乙酰氧基、甲氧基、乙氧基、羧基、甲氧酰基、乙氧酰基、芳氧基、苯基或Y取代的苯基；Y为氟、氯、溴、碘、腈基、硝基、氨基、酰胺基、磺酰胺基、二氟甲基、巯基、羟基、乙酰氧基、甲氧基、乙氧基、羧基、甲氧酰基、乙氧酰基，并且Y基团处于苯环的2、3或4位。

进一步优选的本发明所述的化合物选自：氯吡格雷代谢活性体二硫结构的衍生物分为以下几类化合物：

Z式：(1)7位和4位都无手性；(2)7位为S，4位消旋；(3)7位为R，4位消旋；(4)7位为S，4位为R；(5)7位为S，4位为S；(6)7位为R，4位为R；(7)7位为R，4位为S；

E式：(1)7位和4位都无手性；(2)7位为S，4位消旋；(3)7位为R，4位消旋；(4)7位为S，4位为R；(5)7位为S，4位为S；(6)7位为R，4位为R；(7)7位为R，4位为S；

二-(Z)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸；

二-(Z)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸甲酯；

二-(Z)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸乙酯；

二-(Z)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸异丙酯；

二-(Z)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸叔丁酯；

二-(Z)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸特戊酰氧基甲酯；

二-(Z)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸吡呋酯；

二-(Z)-(7S，4R)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸；

二-(Z)-(7S，4R)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸甲酯；

二-(Z)-(7S，4R)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸乙酯；

二-(Z)-(7S，4R)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸异丙酯；

二-(Z)-(7S，4R)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸叔丁酯；

二-(Z)-(7S，4R)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸特戊酰氧基甲酯；

二-(Z)-(7S，4R)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸吡呋酯；

二-(Z)-(7S，4S)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸；

二-(Z)-(7S，4S)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸甲酯；

二-(Z)-(7S，4S)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸乙酯；

二-(Z)-(7S，4S)-2(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸异丙酯；

二-(Z)-(7S，4S)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸叔丁酯；

二-(Z)-(7S，4S)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸特戊酰氧基甲酯；

二-(Z)-(7S，4S)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸吡呋酯；

二-(Z)-(7R，4R)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸；

二-(Z)-(7R，4R)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸甲酯；

二-(Z)-(7R，4R)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸乙酯；

二-(Z)-(7R，4R)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸异丙酯；

二-(Z)-(7R，4R)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸叔丁酯；

二-(Z)-(7R，4R)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸特戊酰氧基甲酯；

二-(Z)-(7R，4R)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸吡呋酯；

二-(Z)-(7R，4S)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸；

二-(Z)-(7R，4S)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸甲酯；

二-(Z)-(7R，4S)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸乙酯；

二-(Z)-(7R，4S)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸异丙酯；

二-(Z)-(7R，4S)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸叔丁酯；

二-(Z)-(7R，4S)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸特戊酰氧基甲酯；

二-(Z)-(7R，4S)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸吡呋酯；

二-(E)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸；

二-(E)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸甲酯；

二-(E)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸乙酯；

二-(E)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸异丙酯；

二-(E)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸叔丁酯；

二-(E)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸特戊酰氧基甲酯；

二-(E)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸吡呋酯；

二-(E)-(7S，4R)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸；

二-(E)-(7S，4R)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸甲酯；

二-(E)-(7S，4R)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸乙酯；

二-(E)-(7S，4R)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸异丙酯；

二-(E)-(7S，4R)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸叔丁酯；

二-(E)-(7S，4R)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸特戊酰氧基甲酯；

二-(E)-(7S，4R)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸吡呋酯；

二-(E)-(7S，4S)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸；

二-(E)-(7S，4S)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸甲酯；

二-(E)-(7S，4S)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸乙酯；

二-(E)-(7S，4S)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸异丙酯；

二-(E)-(7S，4S)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸叔丁酯；

二-(E)-(7S，4S)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸特戊酰氧基甲酯；

二-(E)-(7S，4S)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸吡呋酯；

二-(E)-(7R，4R)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸；

二-(E)-(7R，4R)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸甲酯；

二-(E)-(7R，4R)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸乙酯；

二-(E)-(7R，4R)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸异丙酯；

二-(E)-(7R，4R)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸叔丁酯；

二-(E)-(7R，4R)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸特戊酰氧基甲酯；

二-(E)-(7R，4R)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸吡呋酯；

二-(E)-(7R，4S)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸；

二-(E)-(7R，4S)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸甲酯；

二-(E)-(7R，4S)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸乙酯；

二-(E)-(7R，4S)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸异丙酯；

二-(E)-(7R，4S)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸叔丁酯；

二-(E)-(7R，4S)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸特戊酰氧基甲酯；

二-(E)-(7R，4S)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸吡呋酯；

本发明提供的式I、VI、VI和VII、XIII、XII化合物的光学纯度为70％-100％，优选为90％-100％，更优选为95％-100％，最优选为98％-100％。

本发明所述的式I、VI、VI和VII、XIII、XII所示的化合物、药学上可接受的盐或溶剂化物，其中，所述盐选自式I、VI、VI和VII、XIII、XII所示的化合物与硫酸、盐酸、氢溴酸、磷酸、酒石酸、富马酸、马来酸、柠檬酸、乙酸、甲酸、甲磺酸、对甲苯磺酸、草酸或琥珀酸形成的盐。

本发明的另一个目的在于提供式I、VI、VI和VII、XIII、XII化合物的制备方法。

发酵法

图1中式VIII所示化合物或其盐与R₃Z在P450氧化合成酶存在下反应，得到本专利文本中式I或VI化合物，其中，Z代表氟、氯、溴、碘、1-10个碳的非取代的或X取代的直链或支链烷基磺酰基、苯基或X取代的苯磺酰基。

其中，反应过程中所用的溶剂选自：水、DMSO、Tris、甲醇、乙醇、丙酮、四氢呋喃、N，N-二甲基甲酰胺中的一种或多种的混合溶剂，优选水、乙醇；

碱选自：氢化钠、氢化钾、甲醇钠、甲醇钾、叔丁醇钠、叔丁醇钾、三乙胺、二异丙基乙胺、1，8-二氮杂环[5，4，0]十一烯-7、碳酸钾、碳酸钠、碳酸氢钾或碳酸氢钠，优选氢氧化钠、碳酸钠、碳酸钾；

反应参数：PH值为6.0-8.5，优选为PH值为7.3-7.5；温度为15-40℃，优选温度为29-31℃；转速为60-250转/min，优选转速为180-200转/min；反应时间为1-4h，优选反应时间为1.5-2.5h；乙醇梯度洗脱的浓度为10-80％和80-100％，优选乙醇梯度洗脱的浓度为25-35％和90-100％。

在上述反应中，R₁、R₂、R₃和X如上述式I、VI和VII、XII化合物中定义。

本发明所述的制备方法，包括以下具体的步骤：

(1)制备G₆PDH脱氢酶和P450氧化合成酶；

(2)氧氯吡格雷和G₆PDH脱氢酶和P450氧化合成酶反应；

(3)树脂柱分离得粗品；

(4)液相制备得精制品

(5)式IX化合物或其盐与R₂OH在脱氢酶的存在下反应，得到式VIII化合物；式IX化合物的7位包括消旋、S和R构型。其中，式IX化合物的制备可参考专利CN102120744，由式IX化合物合成得到式VIII化合物的合成方法己有文献公开，可以参考文献Chem ResToxicol，2012，25：348。

(6)式VIII化合物或其盐与R₁Z在合成酶的存在下反应，得到式I、VI和VII、XII化合物，其中Z代表氟、氯、溴、碘、1-10个碳的非取代的或X取代的直链或支链烷基磺酰基、苯基或X取代的苯磺酰基。在上述反应中，R₁、R₂、R₃和X如上述式I、VI和VII、XII化合物中的定义。

化学法一，以哌啶酮盐酸盐为起始原料：

本说明书附图2描述了以哌啶酮盐酸为起始原料的合成路线。

化学法二，以2-溴-(2-氧苯基)-乙酸甲酯为起始原料：

合成路线参考附图3和附图4，具体包括下列步骤：

(1)参考专利CN1192019，式X化合物经过多步反应得到式XI化合物，具体合成方法请见实施例。

(2)式XI化合物与R₃SK反应，得到式VII化合物，然后异构化得化合物I。

合成过程中，可用(R)-2-(2-氯苯基)-2-(4-硝基苯磺酰氧基)-乙酸甲酯或2-(2-氯苯基)-2-(4-硝基苯磺酰氧基)-乙酸甲酯作为手性和非手性试剂来引导最终产物。

该步反应的反应条件己由专利CN1192019公开，但在本发明中我们发现使用专利公开的条件可以得到双键发生转移的不饱和环胺化合物。

在上述反应中，R₁、R₂、和R₃如上述式I、VI、VI和VII、XIII、XII化合物中定义。

本发明的另一个目的在于提供式I、VI和VII、XII所示的化合物在制药中的用途。

药效学研究表明，本发明提供的式I、VI和VII、XII化合物具有显著的抑制血小板聚集作用，且抗血小板聚集作用要好于氯吡格雷和普拉格雷。

本发明提供的式I、VI和VII、XII化合物、药学上可接受的盐或溶剂化物可用于制备预防或治疗血栓和栓塞相关疾病的药物中的用途。具体的，用于制备预防或治疗动脉粥样硬化疾病、心肌梗死、中风、缺血性脑血栓、外周动脉疾病、急性冠脉综合症或冠脉介入手术后的血栓形成的药物。

本发明的另一个目的在于提供一种药物组合物，以式I、VI和VII、XII所示的化合物、药学上可接受的盐或溶剂化物为活性成分。

本发明的药物组合物，式I、VI和VII、XII所示的化合物、药学上可接受的盐或溶剂化物所占重量百分比可以是0.1-99.9％，其余为药物可接受的载体。

本发明的药物组合物可以制备成任何可药用的剂型，这些剂型包括：片剂、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射剂、栓剂、软膏剂、硬膏剂、霜剂、喷雾剂、滴剂、贴剂。本发明的制剂，优选的是口服剂型，如：胶囊剂、片剂、口服液、颗粒剂、丸剂、散剂、丹剂、膏剂等。最优选的是胶囊剂。

本发明的药物组合物，其口服给药的制剂可含有常用的赋形剂，诸如粘合剂、填充剂、稀释剂、压片剂、润滑剂、崩解剂、着色剂、调味剂和湿润剂，必要时可对片剂进行包衣。

适用的填充剂包括纤维素、甘露糖醇、乳糖和其它类似的填充剂。适宜的崩解剂包括淀粉、聚乙烯吡咯烷酮和淀粉衍生物，例如羟基乙酸淀粉钠。适宜的润滑剂包括，例如硬脂酸镁。适宜的药物可接受的湿润剂包括十二烷基硫酸钠。

可通过混合，填充，压片等常用的方法制备固体口服组合物。进行反复混合可使活性物质分布在整个使用大量填充剂的那些组合物中。

口服液体制剂的形式例如可以是水性或油性悬浮液、溶液、乳剂、糖浆剂或酏剂，或者可以是一种在使用前可用水或其它适宜的载体复配的干燥产品。这种液体制剂可含有常规的添加剂，诸如悬浮剂，例如山梨醇、糖浆、甲基纤维素、明胶、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素、硬脂酸铝凝胶或氢化食用脂肪，乳化剂，例如卵磷脂、脱水山梨醇一油酸酯或阿拉伯胶；非水性载体(它们可以包括食用油)，例如杏仁油、分馏椰子油、诸如甘油的酯的油性酯、丙二醇或乙醇；防腐剂，例如对羟基苯甲酯或对羟基苯甲酸丙酯或山梨酸，并且如果需要，可含有常规的香味剂或着色剂。

对于注射剂，制备的液体单位剂型含有本发明的活性物质和无菌载体。根据载体和浓度，可以将此化合物悬浮或者溶解。溶液的制备通常是通过将活性物质溶解在一种载体中，在将其装入一种适宜的小瓶或安瓿前过滤消毒，然后密封。辅料例如一种局部麻醉剂、防腐剂和缓冲剂也可以溶解在这种载体中。为了提高其稳定性，可在装入小瓶以后将这种组合物冰冻，并在真空下将水除去。

本发明的中药制剂，在制备成药剂时可选择性的加入适合的药物可接受的载体，所述药物可接受的载体选自：甘露醇、山梨醇、焦亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、盐酸半胱氨酸、巯基乙酸、蛋氨酸、维生素C、EDTA二钠、EDTA钙钠，一价碱金属的碳酸盐、醋酸盐、磷酸盐或其水溶液、盐酸、醋酸、硫酸、磷酸、氨基酸、氯化钠、氯化钾、乳酸钠、木糖醇、麦芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、硅衍生物、纤维素及其衍生物、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、土温80、琼脂、碳酸钙、碳酸氢钙、表面活性剂、聚乙二醇、环糊精、β-环糊精、磷脂类材料、高岭土、滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁等。

本发明相对于现有产品氯吡格雷和普拉格雷而言，不需要经过细胞色素P450系统，也就避免了P450多态性对代谢的影响，由于亚洲人种氧化脱氢酶的缺失，这对约40％的亚洲人种来说，完全能弥补代谢上的不足，其药效是氯吡格雷的60-70倍。同时，由于经过P450系统的代谢效率低下，只有约5％的初始化合物可以代谢为活性成分。新化合物既提高了原型药物转化效率，保证了在不同患者体内药效的均一性。

附图说明

图1.以7-(±)-氧氯吡格雷、7S-氧氯吡格雷、7R-氧氯吡格雷为起始原料，在G₆PDH脱氢酶和P450氧化酶的作用下，得到目标化合物I。

图2.以盐酸哌啶酮为起始原料，经过氨基保护、克莱森缩合、氢化、脱保护、缩合、拆分、卤代、硫代乙酸置换、水解、酯化、顺反式转换、偶联得到目标化合物I。

图3。以2-溴-(2-氯苯基)-乙酸甲酯为起始原料，经过缩合、加成、Dess Martin氧化、Wittig反应、水解、得目标化合物I。

图4.以盐酸哌啶酮为起始原料，经过氨基保护、克莱森缩合、氢化、脱保护、缩合、拆分、卤代、硫代乙酸置换、水解、酯化得反式化合物XII；然后顺反式转换、偶联得到目标化合物I。

图5.氯吡格雷体内代谢与不饱和环胺二硫衍生物的代谢对比。氯吡格雷要经过P450氧化脱氢酶、P450氧化合成酶、水解开环、脱GSH等五步反应得到氯吡格雷活性体，水解率约为15％；而不饱和环胺二硫衍生物一步水解成氯吡格雷活性体，水解率大于90％。

图6.实施例21所得产品的氢谱图。

图7.实施例21所得产品的质谱图。

具体实施方式

下面通过具体实施例对本发明作进一步的说明，以下所述的实施例是为了更好的阐述本发明，并不是用来限制本发明的范围。

实施例1

酶法制备氯吡格雷代谢活性体二硫衍生物

在750L反应釜中加入700L水，开启搅拌，设定搅拌转速为186转/min；取14L纯化水，加入KH₂PO₄和NaOH，搅拌溶解，用5.5-9.0的PH试纸测PH值为7.4，加入MgCl₂.6H₂O，搅拌溶解后加入反应罐中；将温度设置为30℃加热，待温度达到28℃时停止加热，温度自动升到30℃。取14L纯化水加入D-葡萄糖，搅拌溶解后加入反应罐中；加入NADP+和G₆PDH脱氢酶液，设定转速为200转/min，温度30℃开始反应，15min后取样检测紫外340nm值。向反应罐通空气，把氧氯吡格雷用DMSO和Tris溶解加入反应罐中，加入70L P450氧化合成酶开始反应。设定搅拌转速186转/min，温度30±0.5℃反应0.5h，反应毕，加入6MHCl，测PH值，放料，加入硫酸铵搅拌5min，静置2h，过滤，上树脂柱。分别用30％和95％乙醇洗脱，减压浓缩得粗品。然后经过制备色谱，得(Z)-2(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸；26.6g，收率：10％；HPLC：99.7％。¹HNMR(500MHz，CDCl3)：d7.15-7.13(m，2H)，7.01-7.02(m，4H)，7.00-7.01(m，2H)，4.74(s，1H)，3.67(s，3H)，2.90(s，4H)，2.83(s，4H)，2.45(d，4H，J＝16.0Hz)，2.07-2.05(m，4H)，2.13(d，2H，J＝15.8Hz)，2.，08-2.05(m，2H)，2.02-1.96(m，2H)。¹³CNMR(75MHz，CDCl3)：d 171.7，171.6，136.2，135.4，135.1，131.2，129.3，129.0，127.3，127.1，122.8，6，5.8，51.9，51.1，42.7，35.2，34.1。ESI-MS m/z709.11，[M+H]⁺。HRMS calcd forC32H34C12N208S2，[M+H]m/z709.1880，found 709.1881。

酯化；得甲酯，乙酯，异丙酯，叔丁酯，特戊酰氧基甲酯，吡呋酯；

拆分或液相制备：得4个光学异构体，7S，4R；7R，4S；7S，4S；7R，4R；

巯基偶联：常见的偶联方法有以下6种：(1)、DDQ，0℃，10min；(2)、在乙腈水溶液中，加I₂偶联2h；(3)、用K₃PO₃，25-37℃，在乙腈水溶液中偶联2h；(4)、用Ph₃P，三光气，65℃下，在氯仿溶液中偶联6h；(5)、活性体做成银盐；(6)、P450合成酶。

实施例2

酶法制备氯吡格雷代谢活性体手性二硫衍生物：用7S-氧氯吡格雷代替消旋的氧氯吡格雷，得(7S，4R)和(7S，4S)氯吡格雷代谢活性体二硫衍生物。

在750L反应釜中加入700L水，开启搅拌，设定搅拌转速为186转/min；取14L纯化水，加入KH₂PO₄和NaOH，搅拌溶解，用5.5-9.0的PH试纸测PH值为7.4，加入MgCl₂.6H₂O，搅拌溶解后加入反应罐中；将温度设置为30℃加热，待温度达到28℃时停止加热，温度自动升到30℃。取14L纯化水加入D-葡萄糖，搅拌溶解后加入反应罐中；加入NADP+和G₆PDH脱氢酶液，设定转速为200转/min，温度30℃开始反应，15min后取样检测紫外340nm值。向反应罐通空气，把S-氧氯吡格雷用DMSO和Tris溶解加入反应罐中，加入70L P450氧化合成酶开始反应。设定搅拌转速186转/min，温度30±0.5℃反应0.5h，反应毕，加入6MHCl，测PH值，放料，加入硫酸铵搅拌5min，静置2h，过滤，上树脂柱。分别用30％和95％乙醇洗脱，减压浓缩得粗品。然后经过制备色谱，得(Z)-2(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸；26.6g，收率：10％；HPLC：99.7％。¹HNMR(500MHz，CDCl3)：d7.15-7.13(m，2H)，7.01-7.02(m，4H)，7.00-7.01(m，2H)，4.74(s，1H)，3.67(s，3H)，2.90(s，4H)，2.83(s，4H)，2.45(d，4H，J＝16.0Hz)，2.07-2.05(m，4H)，2.13(d，2H，J＝15.8Hz)，2.，08-2.05(m，2H)，2.02-1.96(m，2H)。¹³CNMR(75MHz，CDCl3)：d 171.7，171.6，136.2，135.4，135.1，131.2，129.3，129.0，127.3，127.1，122.8，6，5.8，51.9，51.1，42.7，35.2，34.1。ESI-MS m/z709.11，[M+H]⁺。HRMS calcd forC32H34C12N208S2，[M+H]m/z709.1880，found 709.1881。

酯化：得甲酯，乙酯，异丙酯，叔丁酯，特戊酰氧基甲酯，吡呋酯；拆分或液相制备：得2个光学异构体，7S，4R；7S，4S；P450合成酶偶联后得目标产物。

实施例3

酶法制备氯吡格雷代谢活性体手性二硫衍生物：用7R-氧氯吡格雷代替消旋的氧氯吡格雷，得(7R，4R)和(7R，4S)氯吡格雷代谢活性体二硫衍生物。

在750L反应釜中加入700L水，开启搅拌，设定搅拌转速为186转/min；取14L纯化水，加入KH₂PO₄和NaOH，搅拌溶解，用5.5-9.0的PH试纸测PH值为7.4，加入MgCl₂.6H₂O，搅拌溶解后加入反应罐中；将温度设置为30℃加热，待温度达到28℃时停止加热，温度自动升到30℃。取14L纯化水加入D-葡萄糖，搅拌溶解后加入反应罐中；加入NADP+和G₆PDH脱氢酶液，设定转速为200转/min，温度30℃开始反应，15min后取样检测紫外340nm值。向反应罐通空气，把R-氧氯吡格雷用DMSO和Tris溶解加入反应罐中，加入70L P450氧化合成酶开始反应。设定搅拌转速186转/min，温度30±0.5℃反应0.5h，反应毕，加入6MHCl，测PH值，放料，加入硫酸铵搅拌5min，静置2h，过滤，上树脂柱。分别用30％和95％乙醇洗脱，减压浓缩得粗品。然后经过制备色谱，得(Z)-2(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸；26.6g，收率：10％；HPLC：99.7％。¹HNMR(500MHz，CDCl3)：d7.15-7.13(m，2H)，7.01-7.02(m，4H)，7.00-7.01(m，2H)，4.74(s，1H)，3.67(s，3H)，2.90(s，4H)，2.83(s，4H)，2.45(d，4H，J＝16.0Hz)，2.07--2.05(m，4H)，2.13(d，2H，J＝15.8Hz)，2.，08-2.05(m，2H)，2.02-1.96(m，2H)。¹³CNMR(75MHz，CDCl3)：d 171.7，171.6，136.2，135.4，135.1，131.2，129.3，129.0，127.3，127.1，122.8，6，5.8，51.9，51.1，42.7，35.2，34.1。ESI-MS m/z709.11，[M+H]⁺。HRMS calcd forC32H34C12N208S2，[M+H]m/z709.1880，found 709.1881。

酯化：得甲酯，乙酯，异丙酯，叔丁酯，特戊酰氧基甲酯，吡呋酯；

拆分或液相制备：得2个光学异构体，7R，4R；7R，4S；P450合成酶偶联后得目标产物。

实施例4

合成1-三苯甲基-4-哌啶酮

在4-哌啶酮-水合物盐酸盐40g(0.260mol)和三乙胺109mL(0.78mol)的二甲基甲酰胺550mL的溶液中，60℃搅拌下，一点点地加入三苯基氯甲烷72.5g(0.260mol)后，在该温度下搅拌5h，冷却后，过滤析出的三乙胺盐酸盐。将滤液倒入2500mL水中，边倒边搅，静置后，抽滤，得白色固体77.7g，收率70.2％。¹HNMR(500MHz，CDCl₃)：d 7.86-7.06(m，15H，J＝6.5Hz)，2.64(dd，4H，J＝7.1Hz)，2.55(dd，4H，J＝7.1Hz).ESI-MS m/z 364.45[M+Na]⁺

实施例5

合成E-2-(4-羰基-1-三苯甲基哌啶-3-烯基)-乙酸乙酯

将60g(0.1757mol)1-三苯甲基-4-哌啶酮和吡咯烷15.8mL(0.1933mol)的甲苯溶液600mL，用水分离器，在加热回流下共沸3h，降温后加入乙醛酸乙酯20.2mL(0.1933mol)，接着进行2h的加热回流共沸脱水。冷却后，加入400mL水，用乙酸乙酯萃取，用无水硫酸钠干燥有机层。减压浓缩溶剂，将得到的残渣用硅胶柱色谱精制，得到浅黄色油状物49.35g，收率60.2％。¹HNMR(500MHz，CDCl₃)：d 7.51-7.17(m，15H)，6.59(s，1H)，4.10(q，2H，J＝7.1Hz)，3.71(s，2H)，2.79(t，2H，J＝6.0Hz)，2.65(s，2H)，1.17(t，2H，J＝7.1Hz).ESI-MSm/z 448.1[M+Na]⁺

实施例6

E-2-(4-羟基-1-三苯甲基哌啶-3-烯基)-乙酸乙酯的合成

将22g(0.0517mol)E-2-(4-羰基-1-三苯甲基哌啶-3-烯基)-乙酸乙酯溶于50mL二氯甲烷中后，加入甲醇200mL，在冰冷条件下一点点加入硼氢化钠2.34g(0.0619mol)后，室温下搅拌1h。减压下浓缩反应液后，加入水150mL，用乙酸乙酯萃取，有机层用无水硫酸钠干燥。减压浓缩溶剂，将得到的残渣用硅胶柱色谱精制，得到浅黄色油状物M3-7，12.8g，收率57.9％，¹HNMR(300MHz，CDCl₃)：d 7.45(d，6H，J＝7.3Hz)，7.25-7.11(m，9H)，6.05(s，1H)，4.48(s，1H)，4.14-3.96(m，3H)，2.99(s，1H)，2.30-2.22(m，1H)，2.10-2.03(m，1H)，1.93-1.85(m，3H)，1.12(t，3H，J＝7.1Hz)。ESI-MS m/z426.2[M-H]^-。

实施例7

E-2-(4-羟基哌啶-3-烯基)-乙酸乙酯对甲苯磺酸盐的合成

将8.77g(20.51mmol)E-2-(4-羟基-1-三苯甲基哌啶-3-烯基)-乙酸乙酯溶于100mL四氢呋喃后，加入对甲苯磺酸一水合物5.13g(26.97mmol)，在50℃下搅拌1h后，减压下蒸出溶剂，用甲苯洗涤得到的残渣，静置后倒出上层液，下层油状物用于下一步反应。

实施例8

(2S)-2-(2-氯苯基)-2-((E)-3-(2-乙氧基-2-羰乙烯基)-4-羟基哌啶-1-基)-乙酸甲酯的合成

将E-2-(4-羟基哌啶-3-烯基)-乙酸乙酯对甲苯磺酸盐溶解在100mL乙腈中，进而加入6.86g(17.77mmol)(R)-2-(2-氯苯基)-2-(4-硝基苯磺酰氧基)-乙酸甲酯，碳酸氢钾4.44g(44.42mmol)，氮气保护下反应过夜。抽滤，减压浓缩滤液，将得到的残渣用硅胶柱色谱精制，得到浅黄色油状物3.47g，两步收率46.0％。比旋度：[α]_D ²⁰＝5.7°(c＝5，溶于乙醇中)。¹HNMR(500MHz，CDCl₃)：d 7.59-7.53(m，1H)，7.38-7.35(m，1H)，7.27-7.21(m，2H)，5.98-5.97(m，1H)，4.85-4.81(m，1H)，4.59-4.48(m，1H)，4.10-4.05(m，3H)，3.70-3.68(m，3H)，3.24-3.14(m，1H)，2.91-2.87(m，1H)，2.66-2.50(m，1H)，2.31(s，1H)，2.03-1.97(m，1H)，1.81-1.74(m，2H)，1.23-1.95(m，3H)，ESI-MS m/z 368.1[M+H]⁺。

实施例9

(2S)-2-(2-氯苯基)-2-((E)-3-(2-乙氧基-2-羰乙烯基)-4-溴哌啶-1-基)-乙酸甲酯的合成

在无水二氯甲烷35mL中加入2.08g(5.65mmol)(2S)-2-(2-氯苯基)-2-((E)-3-(2-乙氧基-2-羰乙烯基)-4-羟基哌啶-1-基)-乙酸甲酯，四溴化碳2.25g(6.78mol)，三苯基膦1.78g(6.78mmol)，在室温下搅拌1h，浓缩反应液，将得到的残渣用硅胶柱色谱精制，得浅黄色油状物的1.9g，收率79.2％。比旋度：[α]_D ²⁰＝10.5°(c＝5，溶于乙醇中)。¹HNMR(500MHz，CDCl₃)：d 7.62-7.58(m，1H)，7.40-7.37(m，1H)，7.29-7.23(m，2H)，5.93(d，1H，J＝4.0Hz)，4.89-4.88(m，1H)，4.83(s，1H)，4.65-4.50(m，1H)，4.13-4.05(m，2H)，3.72(d，3H，J＝7.3Hz)，3.65-3.55(m，1H)，3.04-2.87(m，1H)，2.80-2.77(m，1H)，2.31(s，1H)，2.09-2.03(m，1H)，1.24(qd，3H，J＝14.1，6.9Hz)，ESI-MS m/z 430.1，[M+H]⁺。

实施例10

(2S)-2-(2-氯苯基)-2-((E)-3-(2-乙氧基-2-羰乙烯基)-4-乙酰巯基哌啶-1-基)-乙酸甲酯的合成

将2.7g(6.2mmol)(2S)-2-(2-氯苯基)-2-((E)-3-(2-乙氧基-2-羰乙烯基)-4-溴哌啶-1-基)-乙酸甲酯和2.8g(24.5mmol)硫代乙酸钾溶于80mL N，N-二甲基甲酰胺或80mL二甲基亚砜中，40℃下加热搅拌48h后原料全部消失。向反应液中加入大量水，乙酸乙酯萃取水相并用无水硫酸钠干燥过夜。蒸干有机相后过柱分离，得纯品2.1g，收率：78.9％，比旋度：[α]_D ²⁰＝15.8°(c＝5，溶于乙醇中)。¹HNMR(500MHz，CDCl₃)：δ7.15(d，1H，J＝7.0Hz)，7.02-7.00(m，3H)，5.84(s，1H)，4.74(s，1H)，4.19(q，2H，J＝6.8Hz)，3.67(s，3H)，3.48(dd，1H，J＝7.1Hz)，3.08-2.98(s，2H)，2.41-2.31(ABq，2H，J＝16.5Hz)，2.33(s，3H)，2.18-1.93(ABq，2H，J＝16.1Hz)；1.30(t，3H，J＝6.8Hz)；¹³CNMR(125MHz，CDCl₃)：d 197.6，193.7，170.9，169.7，137.9，134.6，129.9，129.7，129.4，127.1，124.0，67.2，60.8，54.5，52.1，47.6，38.8，32.5，30.3，29.6，14.0.ESI-MS m/z 426.1[M+H]⁺；HRMS calcd forC20H24N05SC1Na[M+H]⁺m/z 448.0916，found 448.0964。

实施例11

(E)-2-(4-乙酰巯基)-1-((s)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸的合成

将2.1g(4.9mmol)(E)-2-(4-乙酰巯基)-1-((s)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸乙酯溶于20mL的甲醇中，加入0.7mL30％氢氧化钠水溶液(7.3mmol)，氮气保护下搅拌4天后原料全部消失。用稀盐酸将反应液调至中性或弱酸性，加入水并用乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥过夜。蒸干有机相后得粗品，过柱分离得油状物1.1g，收率：46.4％。比旋度：[α]_D ²⁰＝23.6°(c＝5，溶于乙醇中)。¹HNMR(500MHz，CDCl3)：δ11.0(w，1H)，7.15(d，1H，J＝7.0Hz)，7.02-7.00(m，3H)，6.01(s，1H)，4.74(s，1H)，3.67(s，3H)，3.48(dd，1H，J＝7.1Hz)，3.08-2.98(s，2H)，2.41-2.31(ABq，2H，J＝16.5Hz)，2.33(s，3H)，2.18-1.93(ABq，2H，J＝16.1Hz)；¹³CNMR(75MHz，CDCl3)：d 175.67，171.0，134.7，133.1，129.9，129.7，129.6，129.4，127.3，127.1，67.2，54.6，52.1，47.5，37.9，29.6，14.3。ESI-MS m/z398.9，[M+H]⁺。HRMS calcd forC18H20N05SC1，[M+H]m/z 398.87，found 397.88。

实施例12

(E)-2-(4-巯基)-1-((s)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸的合成

将3.7g(10mmol)(E)-2-(4-乙酰巯基)-1-((s)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸溶于乙酸乙酯(20ml)，冷却至-5℃，缓慢滴加6％氯化氢的乙酸乙酯溶液(25ml)，滴毕，控温在15℃反应10h，TLC[展开剂：二氯甲烷∶甲醇＝8∶1]显示反应完全。加入乙酸乙酯(20ml)，析出大量固体，过滤，滤饼用乙酸乙酯(30ml×3)洗涤，35℃减压干燥，得深黄色固体2.7g，收率75.0％。比旋度：[α]_D ²⁰＝30.2°(c＝5，溶于乙醇中)。¹HNMR(500MHz，CDCl3)：δ11.0(w，1H)，7.15(d，1H，J＝5.8Hz)，7.02-7.01(m，2H，J＝5.8Hz)，7.00(d，1H，J＝5.8Hz)，5.90(s，1H)，4.74(s，1H)，3.67(s，3H)，3.23(m，1H，J＝16.0Hz)，3.08-2.98(s，2H)，2.41-2.31(dd，2H，J＝15.8Hz)，1.82-1.57(m，2H，J＝15.8Hz)，，1.5(d，1H)。¹³CNMR(75MHz，CDCl3)：d 171.6，170.6，158.8，135.4，135.1，131.2，129.3，129.0，127.3，113.0，65.8，56.1，51.9，48.9，38.3，33.2。ESI-MS m/z 356.8，[M+H]⁺。HRMS calcd forC16H18N04SC1，[M+H]m/z 356.84，found 356.88。

实施例13

(Z)-2-(4-巯基)-1-((s)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸的合成

将2.7g(8.2mmol)(E)-2-(4-巯基)-1-((s)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸溶于乙腈∶水＝1∶1(V/V)(30ml)中，在25℃下，用32W低压汞灯照射反应2h，TLC[展开剂：二氯甲烷∶甲醇＝8∶1]显示反应完全。减压浓缩，加入乙酸乙酯(20ml)，析出大量固体，过滤，滤饼用乙酸乙酯(10ml×3)洗涤，45℃减压干燥，得深黄色固体2.3g，收率85.0％。比旋度：[α]_D ²⁰＝32.1°(c＝5，溶于乙醇中)。¹HNMR(500MHz，CDCl3)：δ11.0(w，1H)，7.15(d，1H，J＝5.8Hz)，7.02-7.01(m，2H，J＝5.8Hz)，7.00(d，1H，J＝5.8Hz)，5.90(s，1H)，4.74(s，1H)，3.67(s，3H)，3.23(m，1H，J＝16.0Hz)，3.08-2.98(s，2H)，2.41-2.31(dd，2H，J＝15.8Hz)，1.82-1.57(m，2H，J＝15.8Hz)，，1.5(d，1H)。¹³CNMR(75MHz，CDCl3)：d 171.6，170.6，158.8，135.4，135.1，131.2，129.3，129.0，127.3，113.0，65.8，56.1，51.9，48.9，38.3，33.2。ESI-MS m/z 356.8，[M+H]⁺。HRMS calcd forC16H18N04SC1，[M+H]m/z 356.84，found 356.88。

实施例14

(Z)-2-(4-巯基)-1-((s)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸的拆分合成

在250mL三口烧瓶中加入3.6g(10mmol)(Z)-2-(4-巯基)-1-((s)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸，溶于50ml乙酸乙酯中加热溶解，于60～70℃下滴加2.4g(10mmol)S-(+)-樟脑-10-磺酸和10ml乙醇的溶液，搅拌保温30分钟后，冷却0～10℃析晶6小时，过滤，用10ml乙酸乙酯淋洗，用碳酸钠溶液解析后结晶，55±5℃鼓风干燥4小时，分别各得(7S，4R)和(7S，4S)1.5g深黄色固体。收率：80.1％。(7S，4R)的比旋度：[α]_D ²⁰＝14.5°(c＝1，溶于6M HCl中)；(7S，4S)的比旋度：[α]_D ²⁰＝-15.45°(c＝1，溶于6M HCl中)。¹HNMR(500MHz，CDCl3)：δ11.0(w，1H)，7.15(d，1H，J＝5.8Hz)，7.02-7.01(m，2H，J＝5.8Hz)，7.00(d，1H，J＝5.8Hz)，5.90(s，1H)，4.74(s，1H)，3.67(s，3H)，3.23(m，1H，J＝16.0Hz)，3.08-2.98(s，2H)，2.41-2.31(dd，2H，J＝15.8Hz)，1.82-1.57(m，2H，J＝15.8Hz)，，1.5(d，1H)。¹³CNMR(75MHz，CDCl3)：d 171.6，170.6，158.8，135.4，135.1，131.2，129.3，129.0，127.3，113.0，65.8，56.1，51.9，48.9，38.3，33.2。ESI-MS m/z 356.8，[M+H]⁺。HRMS calcdforC16H18N04SC1，[M+H]m/z 356.84，found 356.88。

实施例15

(Z)-2-(4-巯基)-1-((s)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸甲酯的合成

将3.7g(10mmol)(Z)-2-(4-巯基)-1-((s)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸溶于甲醇(60ml)中，加入15ml氯化亚砜，在65℃下，反应回流4h，应完全。减压浓缩，加入乙酸乙酯(20ml)，析出大量固体，过滤，滤饼用乙酸乙酯(10ml×3)洗涤，45℃减压干燥，得深黄色固体3.2g，收率87.0％。比旋度：[α]_D ²⁰＝36.3°(c＝5，溶于乙醇中)。¹HNMR(500MHz，CDCl3)：δ7.15(d，1H，J＝5.8Hz)，7.02-7.01(m，2H，J＝5.8Hz)，7.00(d，1H，J＝5.8Hz)，5.90(s，1H)，4.74(s，1H)，3.76(s，3H)，3.67(s，3H)，3.23(m，1H，J＝16.0Hz)，3.08-2.98(s，2H)，2.41-2.31(dd，2H，J＝15.8Hz)，1.82-1.57(m，2H，J＝15.8Hz)，，1.5(d，1H)。¹³CNMR(75MHz，CDCl3)：d 171.6，170.6，158.8，135.4，135.1，131.2，129.3，129.0，127.3，113.0，65.8，56.1，51.9，51.7，48.9，38.3，33.2。ESI-MS m/z 370.8，[M+H]⁺。HRMS calcdforC17H20N04SC1，[M+H]m/z 370.84，found 370.88。

实施例16

(Z)-2-(4-巯基)-1-((s)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸乙酯的合成

将3.8g(10mmol)(Z)-2-(4-巯基)-1-((s)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸溶于乙醇(60ml)中，加入15ml氯化亚砜，在80℃下，反应回流4h，应完全。减压浓缩，加入乙酸乙酯(20ml)，析出大量固体，过滤，滤饼用乙酸乙酯(10ml×3)洗涤，45℃减压干燥，得深黄色固体3.3g，收率86.0％。比旋度：[α]_D ²⁰＝29.4°(c＝5，溶于乙醇中)。¹HNMR(500MHz，CDCl3)：δ7.15(d，1H，J＝5.8Hz)，7.02-7.01(m，2H，J＝5.8Hz)，7.00(d，1H，J＝5.8Hz)，5.90(s，1H)，4.74(s，1H)，4.19(q，2H，J＝10.8Hz)，3.67(s，3H)，3.23(m，1H，J＝16.0Hz)，3.08-2.98(s，2H)，2.41-2.31(dd，2H，J＝15.8Hz)，1.82-1.57(m，2H，J＝15.8Hz)，1.5(d，1H)，，1.30(t，3H，J＝10.8Hz)。¹³CNMR(75MHz，CDCl3)：d 171.6，170.6，158.8，135.4，135.1，131.2，129.3，129.0，127.3，113.0，65.8，61.4，56.1，51.9，48.9，38.3，33.2，14.2。ESI-MS m/z 384.8，[M+H]⁺。HRMS calcd forC18H22N04SC1，[M+H]m/z 384.89，found383.88。

实施例17

(Z)-2-(4-巯基)-1-((s)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸异丙酯的合成

将3.9g(10mmol)(Z)-2-(4-巯基)-1-((s)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸溶于异丙醇(60ml)中，加入15ml氯化亚砜，在80℃下，反应回流4h，应完全。减压浓缩，加入乙酸乙酯(20ml)，析出大量固体，过滤，滤饼用乙酸乙酯(10ml×3)洗涤，45℃减压干燥，得深黄色固体3.4g，收率86.0％。比旋度：[α]_D ²⁰＝38.1°(c＝5，溶于乙醇中)。¹HNMR(500MHz，CDCl3)：δ7.15(d，1H，J＝5.8Hz)，7.02-7.01(m，2H，J＝5.8Hz)，7.00(d，1H，J＝5.8Hz)，5.90(s，1H)，4.74(s，1H)，4.31(m，1H，J＝10.8Hz)，3.67(s，3H)，3.23(m，1H，J＝16.0Hz)，3.08-2.98(s，2H)，2.41-2.31(dd，2H，J＝15.8Hz)，1.82-1.57(m，2H，J＝15.8Hz)，1.5(d，1H)，1.35(d，6H，J＝10.8Hz)。¹³CNMR(75MHz，CDCl3)：d 171.6，170.6，158.8，135.4，135.1，131.2，129.3，129.0，127.3，113.0，69.6，65.8，56.1，51.9，48.9，38.3，33.2，24.2。ESI-MS m/z 398.9，[M+H]⁺。HRMS calcd forC19H24N04SC1，[M+H]m/z 398.92，found397.88。

实施例18

(Z)-2-(4-巯基)-1-((s)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸叔丁酯的合成

将4.1g(10mmol)(Z)-2-(4-巯基)-1-((s)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸溶于叔丁醇(60ml)中，加入15ml氯化亚砜，在80℃下，反应回流4h，应完全。减压浓缩，加入乙酸乙酯(20ml)，析出大量固体，过滤，滤饼用乙酸乙酯(10ml×3)洗涤，45℃减压干燥，得深黄色固体3.6g，收率85.0％。比旋度：[α]_D ²⁰＝39.2°(c＝5，溶于乙醇中)。¹HNMR(500MHz，CDCl3)：δ7.15(d，1H，J＝5.8Hz)，7.02-7.01(m，2H，J＝5.8Hz)，7.00(d，1H，J＝5.8Hz)，5.90(s，1H)，4.74(s，1H)，3.67(s，3H)，3.23(m，1H，J＝16.0Hz)，3.08-2.98(s，2H)，2.41-2.31(dd，2H，J＝15.8Hz)，1.82-1.57(m，2H，J＝15.8Hz)，1.5(d，1H)，1.4(s，9H，)。¹³CNMR(75MHz，CDCl3)：d 171.6，170.6，158.8，135.4，135.1，131.2，129.3，129.0，127.3，113.0，82.2，65.8，56.1，51.9，48.9，38.3，33.2，28.9。ESI-MS m/z 412.9，[M+H]⁺。HRMS calcd forC20H26N04SC1，[M+H]m/z 412.94，found 411.92。

实施例19

(Z)-2-(4-巯基)-1-((s)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸特戊酰氧基甲酯的合成

将4.7g(10mmol)(Z)-2-(4-巯基)-1-((s)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸溶于特戊酸氯甲酯(60ml)中，加入15ml氯化亚砜，在80℃下，反应回流4h，应完全。减压浓缩，加入乙酸乙酯(20ml)，析出大量固体，过滤，滤饼用乙酸乙酯(10ml×3)洗涤，45℃减压干燥，得深黄色固体4.2g，收率87.0％。比旋度：[α]_D ²⁰＝42.8°(c＝5，溶于乙醇中)。¹HNMR(500MHz，CDCl3)：δ7.15(d，1H，J＝5.8Hz)，7.02-7.01(m，2H，J＝5.8Hz)，7.00(d，1H，J＝5.8Hz)，6.94(s，2H)，5.90(s，1H)，4.74(s，1H)，3.67(s，3H)，3.23(m，1H，J＝16.0Hz)，3.08-2.98(s，2H)，2.41-2.31(dd，2H，J＝15.8Hz)，1.82-1.57(m，2H，J＝15.8Hz)，1.5(d，1H)，1.24(s，9H，)。¹³CNMR(75MHz，CDCl3)：d 175.9，171.6，170.6，158.8，135.4，135.1，131.2，129.3，129.0，127.3，113.0，80.0，65.8，56.1，51.9，48.9，38.5，38.3，33.2，27.4。ESI-MS m/z 470.9，[M+H]⁺。HRMS calcd forC22H28N06SC1，[M+H]m/z 470.98，found469.92。

实施例20

(Z)-2-(4-巯基)-1-((s)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸吡呋酯的合成

将4.7g(10mmol)(Z)-2-(4-巯基)-1-((s)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸溶于氯甲基碳酸异丙酯(60ml)中，加入15ml氯化亚砜，在80℃下，反应回流4h，应完全。减压浓缩，加入乙酸乙酯(20ml)，析出大量固体，过滤，滤饼用乙酸乙酯(10ml×3)洗涤，45℃减压干燥，得深黄色固体4.2g，收率87.0％。比旋度：[α]_D ²⁰＝43.0°(c＝5，溶于乙醇中)。¹HNMR(500MHz，CDCl3)：δ7.15(d，1H，J＝5.8Hz)，7.02-7.01(m，2H，J＝5.8Hz)，7.00(d，1H，J＝5.8Hz)，7.02(s，2H)，5.90(s，1H)，4.74(s，1H)，4.31(m，1H，J＝10.8Hz)，3.67(s，3H)，3.23(m，1H，J＝16.0Hz)，3.08-2.98(s，2H)，2.41-2.31(dd，2H，J＝15.8Hz)，1.82-1.57(m，2H，J＝15.8Hz)，1.35(d，6H，J＝10.8Hz)，1.5(d，1H)。¹³CNMR(75MHz，CDCl3)：d 171.6，170.6，158.8，155.5，135.4，135.1，131.2，129.3，129.0，127.3，113.0，，83.5，73.6，65.8，56.1，51.9，48.9，38.3，33.2，23.6。ESI-MS m/z 472.9，[M+H]⁺。HRMS calcdforC21H26N07SC1，[M+H]m/z 472.95，found 471.92。

实施例21

二-(Z)-2-(4-巯基)-1-((s)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸的合成

氮气保护下，在一只装有回流冷凝管、搅拌器和滴液漏斗的50mL口烧瓶中，加入15mL干燥的氯仿和0.262g(1mmol)三苯基膦，冰浴冷却至0℃，然后将0.1g双(三氯甲基)碳酸酯溶解在1mL干燥的氯仿中用注射器分批加入。在0℃下搅拌10min.，将0.3mL三乙胺加入，温度保持在0-5℃，随后加入2mmol硫酚(VIII)，搅拌1h后，混合物加热到65℃搅拌5-7h。减压蒸去反应混合物中溶剂，粗产品用硅胶进行柱层析，展开剂为环己烷∶乙酸乙酯＝10∶1，过柱分离得油状物670mg，用乙醇重结晶得亮黄色固体493mg，收率：65.8％。比旋度：[α]_D ²⁰＝16.8°(c＝5，溶于乙醇中)。¹HNMR(500MHz，CDCl3)：¹HNMR(400MHz，CDCl3)：δ8.48(d，2H)，7.46-7.44(m，2H)，7.39-7.35(m，4H)，6.58(s，4H)，5.70(s，2H)，4.30(d，2H)，4.03(d，2H)，3.78(d，2H)，3.66(s，6H)，3.13-3.08(m，2H，J＝16.0Hz)，2.97--2.89(m，2H)，2.54-2.49(m，2H，J＝15.8Hz)，2.42-2.33(m，2H)。¹³CNMR(75MHz，CDCl3)：d 171.7，171.6，136.2，135.4，135.1，131.2，129.3，129.0，127.3，127.1，122.8，6，5.8，51.9，51.1，42.7，35.2，34.1。ESI-MS m/z730.11，[M+Na]⁺。HRMS calcd forC32H34C12N208S2，[M+H]m/z709.1880，found 708.1881。

实施例22

二-(Z)-2-(4-巯基)-1-((s)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸甲酯的合成

将7.4g(10mmol)(Z)-2-(4-巯基)-1-((s)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸甲酯溶于乙腈∶水＝1∶1(V/V)(100ml)溶液中，加入20g(0.1mol)亚磷酸钾，在25-37℃下，反应偶联4h，应完全。减压浓缩，加入乙酸乙酯(100ml)，析出大量固体，过滤，滤饼用乙酸乙酯(10ml×3)洗涤，45℃减压干燥，得深黄色固体13.2g，收率89.0％。比旋度：[α]_D ²⁰＝19.1°(c＝5，溶于乙醇中)。¹HNMR(500MHz，CDCl3)∶δ7.15(d，1H，J＝5.8Hz)，7.02-7.01(m，2H，J＝5.8Hz)，7.00(d，1H，J＝5.8Hz)，5.90(s，1H)，4.74(s，1H)，3.76(s，3H)，3.67(s，3H)，3.23(m，1H，J＝16.0Hz)，3.08-2.98(s，2H)，2.41-2.31(dd，2H，J＝15.8Hz)，1.82-1.57(m，2H，J＝15.8Hz)。¹³CNMR(75MHz，CDCl3)：d 171.6，170.6，158.8，135.4，135.1，131.2，129.3，129.0，127.3，113.0，65.8，56.1，51.9，51.7，48.9，38.3，33.2。ESI-MSm/z738.7，[M+H]⁺。HRMS calcd forC34H38N208S2C12，[M+H]m/z 738.74，found 737.71。

实施例23

二-(Z)-2-(4-巯基)-1-((s)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸乙酯的合成

将8.0g(20mmol)(Z)-2-(4-巯基)-1-((s)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸乙酯溶于乙腈∶水＝1∶1(V/V)(100ml)溶液中，加入20g(0.1mol)亚磷酸钾，在25-37℃下，反应偶联4h，应完全。减压浓缩，加入乙酸乙酯(100ml)，析出大量固体，过滤，滤饼用乙酸乙酯(10ml×3)洗涤，45℃减压干燥，得深黄色固体13.2g，收率89.0％。比旋度：[α]_D ²⁰＝24.7°(c＝5，溶于乙醇中)。

实施例24

二-(Z)-2-(4-巯基)-1-((s)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸异丙酯的合成

将8.0g(20mmol)(Z)-2-(4-巯基)-1-((s)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸异丙酯溶于乙腈∶水＝1∶1(V/V)(100ml)溶液中，加入20g(0.1mol)亚磷酸钾，在25-37℃下，反应偶联4h，应完全。减压浓缩，加入乙酸乙酯(100ml)，析出大量固体，过滤，滤饼用乙酸乙酯(10ml×3)洗涤，45℃减压干燥，得深黄色固体7.2g，收率90.0％。比旋度：[α]_D ²⁰＝26.8°(c＝5，溶于乙醇中)。

实施例25

二-(Z)-2-(4-巯基)-1-((s)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸叔丁酯的合成

将8.2g(20mmol)(Z)-2-(4-巯基)-1-((s)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸叔丁酯溶于乙腈∶水＝1∶1(V/V)(100ml)溶液中，加入20g(0.1mol)亚磷酸钾，在25-37℃下，反应偶联4h，应完全。减压浓缩，加入乙酸乙酯(100ml)，析出大量固体，过滤，滤饼用乙酸乙酯(10ml×3)洗涤，45℃减压干燥，得深黄色固体7.4g，收率91.0％。比旋度：[α]_D ²⁰＝28.3°(c＝5，溶于乙醇中)。

实施例26

二-(Z)-2-(4-巯基)-1-((s)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸叔戊酸甲酯的合成

将9.1g(20mmol)(Z)-2-(4-巯基)-1-((s)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸叔戊酸甲酯溶于乙腈∶水＝1∶1(V/V)(100ml)溶液中，加入20g(0.1mol)亚磷酸钾，在25-37℃下，反应偶联4h，应完全。减压浓缩，加入乙酸乙酯(100ml)，析出大量固体，过滤，滤饼用乙酸乙酯(10ml×3)洗涤，45℃减压干燥，得深黄色固体8.2g，收率90.0％。比旋度：[α]_D ²⁰＝32.6°(c＝5，溶于乙醇中)。

实施例27

二-(Z)-2-(4-巯基)-1-((s)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸吡呋酯的合成

将9.0g(20mmol)(Z)-2-(4-巯基)-1-((s)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸吡呋酯溶于乙腈∶水＝1∶1(V/V)(100ml)溶液中，加入20g(0.1mol)亚磷酸钾，在25-37℃下，反应偶联4h，应完全。减压浓缩，加入乙酸乙酯(100ml)，析出大量固体，过滤，滤饼用乙酸乙酯(10ml×3)洗涤，45℃减压干燥，得深黄色固体8.0g，收率91.0％。比旋度：[α]_D ²⁰＝30.7°(c＝5，溶于乙醇中)。

实施例28

二-(Z)-2-(4-巯基)-1-((R)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸的合成

氮气保护下，在一只装有回流冷凝管、搅拌器和滴液漏斗的50mL口烧瓶中，加入15mL干燥的氯仿和0.262g(1mmol)三苯基膦，冰浴冷却至0℃，然后将0.1g双(三氯甲基)碳酸酯溶解在1mL干燥的氯仿中用注射器分批加入。在0℃下搅拌10min.，将0.3mL三乙胺加入，温度保持在0-5℃，随后加入2mmol R-硫酚，搅拌1h后，混合物加热到65℃搅拌5-7h。减压蒸去反应混合物中溶剂，粗产品用硅胶进行柱层析，展开剂为环己烷∶乙酸乙酯＝10∶1，过柱分离得油状物670mg，用乙醇重结晶得亮黄色固体493mg，收率：65.8％。比旋度：[α]_D ²⁰＝3.8°(c＝5，溶于乙醇中)。¹HNMR(400MHz，CDCl3)：δ8.48(d，2H)，7.46-7.44(m，2H)，7.39-7.35(m，4H)，6.58(s，4H)，5.70(s，2H)，4.30(d，2H)，4.03(d，2H)，3.78(d，2H)，3.66(s，6H)，3.13-3.08(m，2H，J＝16.0Hz)，2.97--2.89(m，2H)，2.54-2.49(m，2H，J＝15.8Hz)，2.42-2.33(m，2H)。¹³CNMR(75MHz，CDCl3)：d 171.7，171.6，136.2，135.4，135.1，131.2，129.3，129.0，127.3，127.1，122.8，6，5.8，51.9，51.1，42.7，35.2，34.1。ESI-MS m/z730.11，[M+Na]⁺。HRMS calcd forC32H34C12N208S2，[M+H]m/z709.1880，found 708.1881。

实施例29

二-(Z)-2-(4-巯基)-1-((R)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸甲酯的合成

将7.4g(10mmol)(Z)-2-(4-巯基)-1-((R)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸甲酯溶于乙腈∶水＝1∶1(V/V)(100ml)溶液中，加入20g(0.1mol)亚磷酸钾，在25-37℃下，反应偶联4h，应完全。减压浓缩，加入乙酸乙酯(100ml)，析出大量固体，过滤，滤饼用乙酸乙酯(10ml×3)洗涤，45℃减压干燥，得深黄色固体13.2g，收率89.0％。比旋度：[α]_D ²⁰＝-10.1°(c＝5，溶于乙醇中)。¹HNMR(500MHz，CDCl3)：δ7.15(d，1H，J＝5.8Hz)，7.02-7.01(m，2H，J＝5.8Hz)，7.00(d，1H，J＝5.8Hz)，5.90(s，1H)，4.74(s，1H)，3.76(s，3H)，3.67(s，3H)，3.23(m，1H，J＝16.0Hz)，3.08-2.98(s，2H)，2.41-2.31(dd，2H，J＝15.8Hz)，1.82-1.57(m，2H，J＝15.8Hz)。¹³CNMR(75MHz，CDCl3)：d 171.6，170.6，158.8，135.4，135.1，131.2，129.3，129.0，127.3，113.0，65.8，56.1，51.9，51.7，48.9，38.3，33.2。ESI-MS m/z738.7，[M+H]⁺。HRMS calcd forC34H38N208S2C12，[M+H]m/z 738.74，found 737.71。

实施例30

二-(Z)-2-(4-巯基)-1-((R)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸乙酯的合成

将8.0g(20mmol)(Z)-2-(4-巯基)-1-((R)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸乙酯溶于乙腈∶水＝1∶1(V/V)(100ml)溶液中，加入20g(0.1mol)亚磷酸钾，在25-37℃下，反应偶联4h，应完全。减压浓缩，加入乙酸乙酯(100ml)，析出大量固体，过滤，滤饼用乙酸乙酯(10ml×3)洗涤，45℃减压干燥，得深黄色固体13.2g，收率89.0％。比旋度：[α]_D ²⁰＝-12.5°(c＝5，溶于乙醇中)。

实施例31

二-(Z)-2-(4-巯基)-1-((R)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸异丙酯的合成

将8.0g(20mmol)(Z)-2-(4-巯基)-1-((R)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸异丙酯溶于乙腈∶水＝1∶1(V/V)(100ml)溶液中，加入20g(0.1mol)亚磷酸钾，在25-37℃下，反应偶联4h，应完全。减压浓缩，加入乙酸乙酯(100ml)，析出大量固体，过滤，滤饼用乙酸乙酯(10ml×3)洗涤，45℃减压干燥，得深黄色固体7.2g，收率90.0％。比旋度：[α]_D ²⁰＝-16.2°(c＝5，溶于乙醇中)。

实施例32

二-(Z)-2-(4-巯基)-1-((R)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸叔丁酯的合成

将8.2g(20mmol)(Z)-2-(4-巯基)-1-((R)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸叔丁酯溶于乙腈∶水＝1∶1(V/V)(100ml)溶液中，加入20g(0.1mol)亚磷酸钾，在25-37℃下，反应偶联4h，应完全。减压浓缩，加入乙酸乙酯(100ml)，析出大量固体，过滤，滤饼用乙酸乙酯(10ml×3)洗涤，45℃减压干燥，得深黄色固体7.4g，收率91.0％。比旋度：[α]_D ²⁰＝-18.3°(c＝5，溶于乙醇中)。

实施例33

二-(Z)-2-(4-巯基)-1-((R)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸叔戊酸甲酯的合成

将9.1g(20mmol)(Z)-2-(4-巯基)-1-((R)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸叔戊酸甲酯溶于乙腈∶水＝1∶1(V/V)(100ml)溶液中，加入20g(0.1mol)亚磷酸钾，在25-37℃下，反应偶联4h，应完全。减压浓缩，加入乙酸乙酯(100ml)，析出大量固体，过滤，滤饼用乙酸乙酯(10ml×3)洗涤，45℃减压干燥，得深黄色固体8.2g，收率90.0％。比旋度：[α]_D ²⁰＝-20.1°(c＝5，溶于乙醇中)。

实施例34

二-(Z)-2-(4-巯基)-1-((R)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸吡呋酯的合成

将9.0g(20mmol)(Z)-2-(4-巯基)-1-((R)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸吡呋酯溶于乙腈∶水＝1∶1(V/V)(100ml)溶液中，加入20g(0.1mol)亚磷酸钾，在25-37℃下，反应偶联4h，应完全。减压浓缩，加入乙酸乙酯(100ml)，析出大量固体，过滤，滤饼用乙酸乙酯(10ml×3)洗涤，45℃减压干燥，得深黄色固体8.0g，收率91.0％。比旋度：[α]_D ²⁰＝-20.7°(c＝5，溶于乙醇中)。

4位手性化合物的二硫衍生物通过拆分或手性柱制备得到。

实施例35

参照实施例20的合成路线，合成如下代表性化合物I-3。

实施例36

参照实施例20的合成路线，合成如下代表性化合物I-4。

实施例37

参照实施例20的合成路线，合成如下代表性化合物I-5。

实施例38

参照实施例20的合成路线，合成如下代表性化合物I-6。

实施例39

参照实施例20的合成路线，合成如下代表性化合物I-7。

实施例40

参照实施例20的合成路线，合成如下代表性化合物I-8。

实施例41

参照实施例20的合成路线，合成如下代表性化合物I-9。

实施例42

参照实施例20的合成路线，合成如下代表性化合物I-10。

实施例43

参照实施例20的合成路线，合成如下代表性化合物I-11。

实施例44

参照实施例20的合成路线，合成如下代表性化合物I-12。

实施例45

参照实施例20的合成路线，合成如下代表性化合物I-13。

实施例46

参照实施例20的合成路线，合成如下代表性化合物I-14。

实施例47

参照实施例20的合成路线，合成如下代表性化合物I-15。

实施例48

参照实施例20的合成路线，合成如下代表性化合物I-16。

实施例49

参照实施例20的合成路线，合成如下代表性化合物I-17。

实施例50

参照实施例20的合成路线，合成如下代表性化合物I-18。

实施例51

参照实施例20的合成路线，合成如下代表性化合物I-19。

实施例52

参照实施例20的合成路线，合成如下代表性化合物I-20。

实施例53

参照实施例20的合成路线，合成如下代表性化合物I-21。

实施例54

参照实施例20的合成路线，合成如下代表性化合物I-22。

实施例55

参照实施例20的合成路线，合成如下代表性化合物I-23。

实施例56

参照实施例20的合成路线，合成如下代表性化合物I-24。

实施例57

参照实施例20的合成路线，合成如下代表性化合物I-25。

实施例58

参照实施例20的合成路线，合成如下代表性化合物I-26。

实施例59

参照实施例20的合成路线，合成如下代表性化合物I-27。

实施例60

参照实施例20的合成路线，合成如下代表性化合物I-28。

实施例61

2-(4-(乙酰巯基)-3-羟基哌啶-1-基)-2-(2-氯苯基)乙酸甲酯的合成

在1L三口瓶中加入450ml二氯甲烷和双氧水6ml(95mmol)，冷却至0℃，N₂保护下加入三氟乙酸酐26.3ml(190mmol)，搅拌反应1.5h；将2-(2-氯苯基)-2-(5，6-二氢吡啶-1(2H)-基)醋酸甲酯加入三氟乙酸14.5ml的二氯甲烷75ml的溶液中，在此温度下搅拌反应0.5h。反应毕倒入亚硫酸钠的饱和溶液中，用1M碳酸钠中和，二氯甲烷萃取，有机相用无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩得粗品。在lL三口瓶中加入375ml乙醚，三氧化二铝3.85g(37.8mmol)和硫代乙酸14.35g(188.5mmol)，搅拌10min，加入以上粗品的乙醚15ml溶液，搅拌反应16h，过滤，滤液用碳酸氢钠溶液洗涤，有机相浓缩，用展开剂Pet∶EtOAc＝1∶1进行柱层析，得9.0g浅灰色油状物。收率：66％。¹HNMR(500MHz，CDCl₃)：δ7.15(d，1H，J＝7.0Hz)，7.02-7.00(m，3H)，4.74(s，1H)，3.67(s，3H)，3.42(ddd，1H，J＝7.1Hz)，2.89(ddd，1H，J＝7.1Hz)，2.52-2.27(ABq，2H，J＝16.5Hz)，2.29-2.19(ABq，2H，J＝16.1Hz)；2.26-2.01(ABq，2H，J＝16.1Hz)；2.30(s，3H)；2.0(w，1H)；¹³CNMR(125MHz，CDCl₃)：d 195.0，171.6，135.4，135.1，131.2，129.3，129.0，127.3，69.2，65.7，56.1，51.9，48.6，41.6，30.8，23.7.ESI-MSm/z 358.85[M+H]⁺；HRMS calcd for C16H20N04SC1Na[M+H]⁺m/z 381.916，found 357.85。

实施例62

2-(4-(乙酰巯基)-3-羰基哌啶-1-基)-2-(2-氯苯基)乙酸甲酯的合成

在250mL三口瓶中加入2-(4-(乙酰巯基)-3-羟基哌啶-1-基)-2-(2-氯苯基)乙酸甲酯2.0g(5.6mmol)和50ml二氯甲烷，N₂保护下，室温滴加Dess-Martin试剂3.09g(7.3mmol)，搅拌反应3h；过滤，浓缩物用闪柱分离，得粗品2.3g浅灰色固体，收率：100％。¹HNMR(500MHz，CDCl₃)：δ7.15(d，1H，J＝7.0Hz)，7.02-7.00(m，3H)，4.74(s，1H)，3.67(s，3H)，3.66(dd，1H，J＝7.8Hz)，3.57-3.47(s，2H)，2.42-2.17(ABq，2H，J＝16.5Hz)，2.41-2.31(ABq，2H，J＝16.1Hz)；2.30(s，3H)；¹³CNMR(125MHz，CDCl₃)：d 207.1，195.0，171.6，135.4，135.1，131.2，129.3，129.0，127.3，64.9，58.8，54.5，51.9，48.8，30.5，29.8.ESI-MSm/z 356.84[M+H]⁺；HRMS calcd for C16H20N04SC1Na[M+H]⁺m/z 356.84，found 355.84。

实施例63

2-(2-氯苯基)-2-(3-(2-甲氧基-2-羰乙基)-4-乙酰巯基-5-吡啶基)-乙烯酸甲酯的合成

在250mL三口瓶中加入2-(4-(乙酰巯基)-3-羟基哌啶-1-基)-2-(2-氯苯基)乙酸甲酯2.0g(5.6mmol)和50ml二氯甲烷，N₂保护下，室温滴加Wittig试剂3.09g(7.3mmol)，搅拌反应3h；过滤，浓缩物用闪柱分离，得粗品2.3g浅灰色固体，收率：100％。δ7.15(d，1H，J＝7.0Hz)，7.02-7.00(m，3H)，5.84(s，1H)，4.74(s，1H)，3.76(s，3H)，3.67(s，3H)，3.48(dd，1H，J＝7.1Hz)，3.08-2.98(s，2H)，2.41-2.31(ABq，2H，J＝16.5Hz)，2.30(s，3H)，2.18-1.93(ABq，2H，J＝16.5Hz)；¹³CNMR(125MHz，CDCl₃)：d 195.0，171.6，166.5，154.5，135.4，135.1，131.2，129.3，129.0，127.3，115.5，65.8，56.6，52.0，51.9，49.4，38.8，33.7，30.9。ESI-MSm/z 412.9[M+H]⁺；HRMS calcd for C19H22N05SC1Na[M+H]⁺m/z 412.916，found412.964。

实施例64

二-(Z)-2-(4-巯基)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸的合成

氮气保护下，在一只装有回流冷凝管、搅拌器和滴液漏斗的50mL口烧瓶中，加入15mL干燥的二氯甲烷和25mg(1mmol)二氧化锰，冰浴冷却至0℃，加入20mg(0.06mmol)硫酚(VIII)，搅拌1h后，混合物自然升温到25℃搅拌3h。过滤，减压蒸去反应混合物中溶剂，粗产品用硅胶进行柱层析，展开剂为环己烷∶乙酸乙酯＝10∶1，过柱分离得油状物17mg，用乙醇重结晶得亮黄色固体15mg，收率：75.8％。¹HNMR(400MHz，CDCl3)：δ8.48(d，2H)，7.46-7.44(m，2H)，7.39-7.35(m，4H)，6.58(s，4H)，5.70(s，2H)，4.30(d，2H)，4.03(d，2H)，3.78(d，2H)，3.66(s，6H)，3.13-3.08(m，2H，J＝16.0Hz)，2.97--2.89(m，2H)，2.54-2.49(m，2H，J＝15.8Hz)，2.42-2.33(m，2H)。¹³CNMR(75MHz，CDCl3)：d 171.7，171.6，136.2，135.4，135.1，131.2，129.3，129.0，127.3，127.1，122.8，6，5.8，51.9，51.1，42.7，35.2，34.1。ESI-MS m/z730.11，[M+Na]⁺。HRMS calcd forC32H34C12N208S2，[M+H]m/z709.1880，found708.1881。

实施例65

二-(Z)-2-(4-巯基)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸甲酯的合成

将6mg(0.017mmol)二-(Z)-2-(4-巯基)-1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基哌啶-3-乙烯酸溶于HCl∶CH₃OH＝3∶10(V/V)(100ml)溶液中，在25-37℃下，反应1h，回流反应3h，反应完全。减压浓缩，加入乙酸乙酯(10ml)，析出大量固体，过滤，滤饼用乙酸乙酯(2ml×3)洗涤，45℃减压干燥，得深黄色固体5.2g，收率89.0％。¹HNMR(500MHz，CDCl3)：δ7.15(d，1H，J＝5.8Hz)，7.02-7.01(m，2H，J＝5.8Hz)，7.00(d，1H，J＝5.8Hz)，5.90(s，1H)，4.74(s，1H)，3.76(s，3H)，3.67(s，3H)，3.23(m，1H，J＝16.0Hz)，3.08-2.98(s，2H)，2.41-2.31(dd，2H，J＝15.8Hz)，1.82-1.57(m，2H，J＝15.8Hz)。¹³CNMR(75MHz，CDCl3)：d 171.6，170.6，158.8，135.4，135.1，131.2，129.3，129.0，127.3，113.0，65.8，56.1，51.9，51.7，48.9，38.3，33.2。ESI-MS m/z 738.7，[M+H]⁺。HRMS calcd forC34H38N208S2C12，[M+H]m/z 738.74，found737.71。

实施例66

Z-(s)-2-(2-氯苯基)-2-(3-(2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基-5-吡啶基)-乙烯酸甲酯的合成

将169mg(0.5mmoI)(2S)-2-(2-氧-7，7a-二氢噻吩并[3，2-c]吡啶-5(2H，4H，6H)-基)-2-(2-氯苯基)-乙酸甲酯溶于15mL甲醇中，加入724mg(5mmol)无水碳酸钾。反应液氮气保护，室温下搅拌12小时后原料全部消失，将反应液过滤除去不溶固体后，用2N盐酸调节pH至中性，加入大量水后，用乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤有机相，无水硫酸钠干燥。蒸干有机相后过柱分离，得油状物。比旋度：[α]_D ²⁰＝35.8°(c＝5，溶于乙醇中)。¹HNMR(300MHz，CDCl₃)：d 7.65-7.62(m，1H)，7.40-7.38(m，1H)，7.28-7.24(m，2H)，4.79(s，1H)，3.69(s，3H)，3.66(s，3H)，3.24-3.17(m，2H)，3.10(d，2H，J＝15.6Hz)，2.69(t，2H，J＝5.7Hz)，2.57(s，1H)，2.38(s，2H)；1HNMR(300MHz，CDCl₃+D₂O)d 7.65-7.62(m，1H)，7.40-7.37(m，1H)，7.28-7.24(m，2H)，4.79(s，1H)，3.69(s，3H)，3.66(s，3H)，3.16-3.10(m，2H)，3.12-3.05(m，2H)，2.69(t，2H，J＝5.7Hz)，2.38(s，2H)。¹³CNMR(75MHz，CDCl₃)：d 171.0，170.6，134.6，133.4，129.8，129.7，129.4，127.0，125.1，124.0，67.4，54.4，52.1，47.6，38.3，35.2。ESI-MS m/z 392.1[M+Na]⁺。HRMS calcd for C17H20N04NaSC1[M+Na]⁺m/z 392.0699，found392.0703。

实施例67

(s)-2-(2-氯苯基)-2-(3-(2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯甲基-5-吡啶基)-乙烯酸甲酯的合成

将338mg(1mmol)(2S)-2-(2-氧-7，7a-二氢噻吩并[3，2-c]吡啶-5(2H，4H，6H)-基)-2-(2-氯苯基)-乙酸甲酯溶于10mL的甲醇中，加入1.38g(10mmol)无水碳酸钾，氮气保护下搅拌12小时后原料全部消失。过滤不溶物后用稀盐酸将反应液调至中性或弱酸性，加入碘甲烷0.18mL(3mmol)搅拌0.5小时。向反应液中加入水并用乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥过夜。蒸干有机相后得粗品，过柱分离得油状物282mg，收率：73.4％。比旋度：[α]_D ²⁰＝37.4°(c＝5，溶于乙醇中)。¹HNMR(500MHz，CDCl₃)：d 7.65(d，1H，J＝7.2Hz)，7.39-7.38(m，1H)，7.29-7.23(m，3H)，4.80(s，1H)，3.70(s，4H)，3.66(d，3H，J--9.3Hz)，3.37(d，1H，J＝15.7Hz)，3.25-3.20(m，2H)，3.11(d，1H，J＝15.8Hz)，2.72(s，2H)，2.42(s，2H)，2.18(s，3H)。¹³CNMR(125MHz，CDCl₃)：d 171.1，171.0，134.6，133.5，129.8，129.7，129.3，129.1，127.7，127.0，67.5，54.7，52.0，51.8，47.6，38.0，29.8，14.3。ESI-MS m/z 406.1[M+Na]⁺。HRMS calcd for C18H22N04NaSC1[M+Na]⁺：m/z 406.0856，found 406.0860。

实施例68

(s)-2-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯甲基-哌啶-3-基)-乙烯酸的合成

将233mg(0.61mmol)(s)-2-(2-氯苯基)-2-(3-(2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯甲基-哌啶-1-基)-乙烯酸甲酯溶于2mL的甲醇中，加入0.07mL30％氢氧化钠水溶液(0.73mmol)，氮气保护下搅拌4天后原料全部消失。用稀盐酸将反应液调至中性或弱酸性，加入水并用乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥过夜。蒸干有机相后得粗品，过柱分离得油状物102mg，收率：45.4％。比旋度：[α]_D ²⁰＝33.6°(c＝5，溶于乙醇中)。¹HNMR(500MHz，CDCl3)：d11.0(w，1H)，7.65-7.63(m，1H)，7.40-7.38(m，1H)，7.29-7.25(m，2H)，4.84(s，1H)，3.70(s，3H)，3.38(d，1H，.J＝16.0Hz)，3.28-3.25(m，2H)，3.13(d，1H，J＝15.8Hz)，2.28-2.75(m，1H)，2.72-2.69(m，1H)，2.43(s，2H)，2.19(s，3H)。¹³CNMR(75MHz，CDCl3)：d 175.67，171.0，134.7，133.1，129.9，129.7，129.6，129.4，127.3，127.1，67.2，54.6，52.1，47.5，37.9，29.6，14.3。ESI-MS m/z 370.1，[M+H]⁺。HRMS calcd forC17H21N04SC1，[M+H]m/z370.0880，found 370.0881。

实施例69

二-(s)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲(乙、丙、异丙、丁、特戊酸甲基、吡呋基)氧基-2-羰乙基)-4-巯基-哌啶-3-基)-乙烯酸甲酯的合成

氮气保护下，在一只装有回流冷凝管、搅拌器和滴液漏斗的50mL口烧瓶中，加入15mL干燥的氯仿和0.262g(1mmol)三苯基膦，冰浴冷却至0℃，然后将0.1g双(三氯甲基)碳酸酯溶解在1mL干燥的氯仿中用注射器分批加入。在0℃下搅拌10min.，将0.3mL三乙胺加入，温度保持在0-5℃，随后加入2mmol硫酚(VIII)，搅拌1h后，混合物加热到65℃搅拌5-7h。减压蒸去反应混合物中溶剂，粗产品用硅胶进行柱层析，展开剂为环己烷∶乙酸乙酯＝10∶1，过柱分离得油状物670mg，用乙醇重结晶得亮黄色固体。

实施例70.抗血小板聚集活性试验

药品及制剂：阳性药为普拉格雷，受试化合物为实施例11。阳性药和受试化合物以0.5％CMC-Na配成混悬液供动物给药用。

动物：雄性SD大鼠，体重250g左右。

仪器：离心机，血小板聚集仪等。

方法：参考BORN比浊法(Nature，1962，194：927)，对本发明化合物进行抗血小板聚集的药理活性试验。向富含血小板的血浆(PRP)中加入促凝聚物二磷酸腺苷(ADP)搅拌，使血小板聚集。血小板的聚集引起光密度的变化，可通过分光光度计检测。此实验可以评价受试化合物在体内或体外给药引起的血小板聚集作用。

雄性SD大鼠，经口灌胃给予普拉格雷和受试药物(0.5％CMC-Na的均匀悬浮液，药物浓度为1g/ml)，剂量为3mg/kg，空白对照组经口灌胃给予同体积的0.5％CMC-Na。2h后，眼眶取血，3.8％枸橼酸钠抗凝，全血与抗凝剂之比为9∶1，1000rpm离心7min，制备富血小板血浆(PRI))。以贫血小板血浆(PPP)调PRI)，使血小板计数保持在2x 10⁶个/ml。取PRI)加入测试杯中，37℃孵育10min，以PRI)调零，PPP调100％，以ADP(终浓度为5uM)为诱导剂，按比浊法用血小板聚集仪测定血小板聚集百分数，以t-检验进行统计学比较，血小板聚集抑制率(％)＝[1-(给药管聚集百分率/对照管聚集百分率)]×100％。

结果：通过比浊法测得大鼠口服受试化合物后的血小板聚集率，实验结果如表一所示。结果表明，实施例11化合物显示了比普拉格雷更强的抗血小板聚集活性。

表.大鼠口服普拉格雷与按照本发明实施例制备的化合物后的血小板聚集抑制作用

Claims

1.一种氯吡格雷代谢活性体二硫衍生物，其特征在于所述衍生物顺式结构如式I或VI表示，包括Z式手性异构体化合物如结构式II、III、IV、V、XIII、XIV；所述衍生物反式异构体如式VII或XII所示，包括E式手性异构体化合物如结构式VIII、IX、X、XI、XV、XVI所示：

上述化学式中，R1代表氢、1-10个碳的非取代的或X取代的直链或支链烷烃基、苯基或X取代的苯基、苄基或X取代的苄基、萘基或X取代的萘基、3-7个碳的非取代的或X取代的环烷基、1-10个碳的非取代的或X取代的直链或支链烷氧基、3-7个碳的非取代的或x取代的环烷氧基；特戊酰氧基甲基；碳酸异丙酯甲基。

R2代表氢、氟、氯、溴、碘、腈基、硝基、氨基、酰胺基、磺酰胺基、三氟甲基、巯基、羟基、乙酰氧基、甲氧基、乙氧基、羧基、甲氧酰基、乙氧酰基、1-10个碳的直链或支链烷烃基、烯烃基、炔烃基；

X代表氟、氯、溴、碘、腈基、硝基、氨基、酰胺基、磺酰胺基、三氟甲基、巯基、羟基、乙酰氧基、甲氧基、乙氧基、羧基、甲氧酰基、乙氧酰基、芳氧基、苯基或Y取代的苯基；Y为氟、氯、溴、碘、腈基、硝基、氨基、酰胺基、磺酰胺基、一氟甲基、巯基、羟基、乙酰氧基、甲氧基、乙氧基、羧基、甲氧酰基、乙氧酰基，并且Y基团处于苯环的2、3或4位；

R₃代表1-10个碳的非取代的或X取代的直链或支链烷烃基、烯烃基、炔烃基、苯基或X取代的苯基、苄基或X取代的苄基、萘基或X取代的萘基、1-10个碳的非取代的或X取代的直链或支链烷氧基、3-7个碳的非取代的或X取代的环烷氧基，1-10个碳的非取代的或X取代的直链或支链烷酰基、非取代的或X取代的苯甲酰基，3-7个碳的非取代的或X取代的环烷酰基。

3位羧基酯化时，可用SOCl₂/CH₃OH、HCl/CH₃OH、H₂SO₄/CH₃OH、Me₂SO₄、MeI，优先使用SOCl₂/CH₃OH，然后依次按顺序使用。

2.根据权利要求1的氯吡格雷代谢活性体二硫衍生物，其特征在于，所述式I和VI化合物中：

R1代表1-10个碳的非取代的或X取代的直链或支链烷烃、苯基或X取代的苯基、苄基或X取代的苄基、萘基或X取代的萘基、3-7个碳的非取代的或X取代的环烷基；；特戊酰氧基甲基；碳酸异丙酯甲基。

R2代表氟、氯、溴、腈基、一氟甲基；

X代表氟、氯、溴、碘、腈基、硝基、氨基、酰胺基、磺酰胺基、三氟甲基、巯基、羟基、乙酰氧基、甲氧基、乙氧基、羧基、甲氧酰基、乙氧酰基、芳氧基、苯基或Y取代的苯基；Y为氟、氯、溴、碘、腈基、硝基、氨基、酰胺基、磺酰胺基、三氟甲基、巯基、羟基、乙酰氧基、甲氧基、乙氧基、羧基、甲氧酰基、乙氧酰基，并且Y基团处于苯环的2、3或4位；

3.根据权利要求1的氯吡格雷代谢活性体二硫衍生物，其特征在于包含Z式和E式，其中Z式包括(1)7位和4位无手性；(2)7位为S，4位消旋；(3)7位为R，4位消旋；(4)7位为S，4位为R；(5)7位为S，4位为S；(6)7位为R，4位为R；(7)7位为R，4位为S；其中E式包括(1)7位和4位无手性；(2)7位为S，4位消旋；(3)7位为R，4位消旋；(4)7位为S，4位为R；(5)7位为S，4位为S；(6)7位为R，4位为R；(7)7位为R，4位为S；所述Z式和E式化合物包括但不限于以下具体化合物：

二-(E)-(7R，4S)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基哌啶基-3-烯基-乙酸吡呋酯。

4.一种如权利要求1所述氯吡格雷代谢活性体二硫衍生物的酶法制备方法，其特征在于包含如下步骤：

1)由氧氯吡格雷、NADP+、G₆PDH脱氢酶和P450氧化合成酶等四种主要物质组成反应体系；

2)反应参数：PH值为6.0-8.5；温度为15-40℃；搅拌转速为60-250转/min；反应时间为1-4h；

3)采用非极性树脂进行吸附，并采用乙醇洗脱，乙醇梯度洗脱的浓度为10-80％和80-100％；

4)酯化，包括但不限于甲酯，乙酯，异丙酯，叔丁酯，特戊酰氧基甲酯，吡呋酯；

5)异构化：E式异构体在乙腈和水(V/V＝1∶1)中，32W低压汞灯照射2h，得Z式异构体；

6)巯基偶联：偶联的方法采用但不限于(1)、DDQ，0℃，10min；或(2)、在乙腈水溶液中，加I₂偶联2h；或(3)、用K₃PO₃，25-37℃，在乙腈水溶液中偶联2h；或(4)、用Ph₃P，三光气，65℃下，在氯仿溶液中偶联6h；或(5)、活性体做成银盐；

7)拆分，得4个Z式异构体(7S，4R)、(7R，4S)、(7S，4S)、(7R，4R)，以及4个E式异构体(7S，4R)、(7R，4S)、(7S，4S)、(7R，4R)；所述手性试剂拆分可用但不限于二苯甲酰酒石酸、苹果酸、扁桃酸、樟脑磺酸、麻黄碱和伪麻黄碱，优选使用S-(+)-樟脑-10-磺酸进行4位的拆分。

5.一种如权利要求1所述氯吡格霄代谢活性体二硫衍生物的制备方法-化学法一，其特征在于：以盐酸哌啶酮为起始原料，包括以下主要步骤：

1)氨基保护：常用可选的氨基保护有：Boc、Trt、Cbz、Fmoc、Tfa、PMB、Bn，优选使用Boc和Trt，更优选使用三苯基氯甲烷(Trt)；其反应温度为20-100℃，优选反应温度为60℃；反应时间为1-10h，优选反应时间为5h；

2)克莱森缩合：1-三苯甲基-4-哌啶酮和乙醛酸乙酯进行克莱森(Claisen)缩合，其反应温度为60-120℃，优选反应温度为100℃；反应脱水时间为1-6h，优选反应脱水时间为3h；

3)还原：常用可选的还原剂有：LiAlH₄、NaBH₄、KBH₄、Na₂S₂O₄、FeSO₄、Red-Al、DIBAL-H、Pa/C、PaO₂、Pt(OH)₂、Li、Na、Zn、Fe、Ni、Raney-Ni、Na-Hg、Zn-Hg，优选使用LiAlH₄、NaBH₄和KBH₄，更优选使用NaBH₄和KBH₄；其反应温度为10-60℃，优选反应温度为30℃；反应时间为0.1-10h，优选反应时间为1h；

4)脱保护：常用可选的脱保护剂有：HCl、H₂SO₄、HF、CF₃COOH、TsOH、BF₃.OEt₂，优选使用HCl、TsOH和BF₃.OEt₂，更优选使用TsOH；其反应温度为20-100℃，优选反应温度为50℃；反应时间为0.1-10h，优选反应时间为1h；

5)缩合：常用可选的缚酸剂有：Na₂CO₃、NaHCO₃、K₂CO₃、KHCO₃、DMAP、Et₃N、Py、DIPEA，优选使用KHCO₃、DMAP和Et₃N，更优选使用KHCO₃；其反应温度为10-60℃，优选反应温度为30℃；反应时间为1-24h，优选反应时间为12h；

6)拆分：常用可选的拆分剂有：D-二苯甲酰酒石酸、D-二对甲基苯甲酰酒石酸、L-二苯甲酰酒石酸、L-二对甲基苯甲酰酒石酸、酒石酸二乙酯、苹果酸、扁桃酸、樟脑磺酸、麻黄碱和伪麻黄碱、S-(+)-D-樟脑-10-磺酸、R-(-)-L-樟脑-10-磺酸；优选使用D-二苯甲酰酒石酸和D-樟脑磺酸，更优选使用S-(+)-樟脑-10-磺酸进行4位的拆分；其溶解温度为10-100℃，优选溶解温度为60-70℃；溶解时间为0.1-5h，优选反应时间为0.5h；其结晶温度为-10-40℃，优选结晶温度为2-10℃；结晶时间为1-24h，优选反应时间为6h；

7)卤素取代：常用可选的卤素取代试剂有：MsCl/HCl、TsCl/PBr₃、SOCl₂、PCl₃、PCl₅、Cl₂、Br₂、I₂、CBr₄/Ph₃P，优选使用CBr₄/Ph₃P、MsCl/HCl、TsCl/PBr₃和SOCl₂，更优选使用CBr₄/Ph₃P和MsCl/HCl；其反应温度为10-60℃，优选反应温度为30℃；反应时间为0.1-10h，优选反应时间为1h；

8)硫代乙酸置换：常用可选的硫代乙酸取代试剂有：CH₃COSLi、CH₃COSNa和CH₃COSK，优选使用CH₃COSNa和CH₃COSK，更优选使用CH₃COSK；其反应温度为20-100℃，优选反应温度为40℃；反应时间为24-72h，优选反应时间为48h；

9)酸解或碱解皂化：常用可选的酸解或碱解皂化试剂有：HCl/EtOAc、HCl/CH₃OH、HCl/EtOH、NaOH(aq.)和KOH(ag.)；优选使用HCl/EtOAc、HCl/CH₃OH和NaOH(aq.)，更优选使用HCl/EtOAc；其反应温度为-20～+50℃，优选反应温度为-5～+15℃；反应时间为2-24h，优选反应时间为10h；

10)酯化反应：常用可选的酯化试剂有：HCl/ROH、SOCl₂和浓H₂SO₄；优选使用HCl/ROH和SOCl₂，更优选使用SOCl₂；其反应温度为30-100℃，优选反应温度为80℃；反应时间为1-10h，优选反应时间为4h；

11)顺反式的转换：常用可选的顺反式转换试剂有：Wittig试剂、林德拉催化剂(Lindlar Cat.)、40％NaOH/100℃和物理方法汞灯光照；优选使用物理方法汞灯光照和Wittig试剂，更优选使用汞灯光照法；其反应温度为10-50℃，优选反应温度为25℃；反应时间为0.1-10h，优选反应时间为2h；

12)偶联：常用可选的偶联试剂和方法有：DDQ、I₂、K₃PO₃、Ph₃P，三光气、MnO₂和活性体做成银盐；优选使用K₃PO₃、Ph₃P，三光气和MnO₂，更优选使用K₃PO₃和MnO₂；其反应温度为10-60℃，优选反应温度为25-37℃；反应时间为1-12h，优选反应时间为4h。

6.又一种如权利要求1所述氯吡格雷代谢活性体二硫衍生物的制备方法，化学法二，其特征在于：以2-溴-(2-氯苯基)-乙酸甲酯为起始原料，经过脱卤和以下主要反应步骤，得氯吡格雷代谢活性体二硫化物；

1)加成：用硫代乙酸对2-(2-氯苯基)-2-(5，6-二氢吡啶-1(2H)-基)醋酸甲酯进行加成反应，其反应温度为-10-60℃，优选反应温度为0-5℃；反应时间为6-36h，优选反应时间为16h；

2)羟基的氧化：常用可选羟基氧化醛酮的试剂和方法有：Jones Reagent Cr03-Ac20、Sarett Reagent Cr03-2Py、Swern Reaction DMSO-草酰氯、Pfitzner-Moffatt ReactionDMSO-DCC、Dess-Martin Reagent(DMP)；优选使用Pfitzner-Moffatt Reaction DMSO-DCC和Dess-Martin Reagent(DMP高价碘)，更优选使用Dess-Martin Reagent(DMP高价碘)；其反应温度为10-60℃，优选反应温度为20-35℃；反应时间为1-12h，优选反应时间为3h；

3)Wittig反应制备顺式烯烃：常用可选制备顺式烯烃的试剂和方法有：LindlarCatalyst Pd-CaCO₃-PbO、Pd-BaSO₄-喹啉、Wittig试剂，优选使用Lindlar Catalyst Pd-BaSO4-喹啉和Wittig试剂，更优选使用Wittig试剂；其反应温度为10-60℃，优选反应温度为25℃；反应时间为1-12h，优选反应时间为3h。

7.如权利要求5和权利要求6所述氯吡格雷代谢活性体二硫衍生物的制备方法，其特征在于，合成路线中含有如下反应式和反应条件：

反应式：

在上述反应式中，R₁、R₂、R₃、X如上述式I和VII化合物中所定义，Z代表氟、氯、溴、碘、1-10个碳的非取代的或X取代的直链或支链烷基磺酰基、苯基或X取代的苯磺酰基。

反应条件：

2倍的式VIII化合物或其盐在碱存在下反应，得到式I、VII化合物。所采用的溶剂选自苯、甲苯、氯仿、正己烷、环己烷、二氯甲烷、1，2一二氯乙烷、甲基叔丁基醚、四氯化碳、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、甲醇、乙醇、丙酮、四氢呋喃、乙醚、乙腈、N，N一二甲基甲酰胺或二甲亚砜中的一种或多种的混合溶剂，优选甲醇、乙醇；所采用的碱选自氢化钠、氢化钾、甲醇钠、甲醇钾、叔丁醇钠、叔丁醇钾、三乙胺、二异丙基乙胺、1，8-二氮杂环[5，4，0]十一烯-7、碳酸钾、碳酸钠、碳酸氢钾或碳酸氢钠，其中优选甲醇钠、碳酸氢钠、碳酸氢钾、碳酸钾、三乙胺；反应温度为0℃至100℃，优选温度为20℃至50℃。

8.一种预防或治疗血栓和栓塞相关疾病的药物组合，其特征在于：所述药物组合物中含有治疗有效量的式I或VII化合物及它们在药学上可接受的盐作为活性成分，同时还可含有药学上可接受的载体。

9.如权利要求1、2、3和5中任一项所述氯吡格雷代谢活性体二硫衍生物及药物组合物在制备预防或治疗动脉粥样硬化疾病、心肌梗死、中风、缺血性脑血栓、外周动脉疾病、急性冠脉综合症或冠脉介入手术后的血栓形成等血栓和栓塞相关疾病的药物中的用途。