CN103626694A

CN103626694A - 不饱和环胺衍生物、其制备方法及其医药用途

Info

Publication number: CN103626694A
Application number: CN201210310179.1A
Authority: CN
Inventors: 孙宏斌; 单佳祺; 张秀玲
Original assignee: China Pharmaceutical University
Current assignee: China Pharmaceutical University
Priority date: 2012-08-29
Filing date: 2012-08-29
Publication date: 2014-03-12

Abstract

本发明涉及药物化学领域，具体涉及一系列不饱和环胺衍生物，本发明还公开了上述化合物的制备方法及其医药用途。

Description

不饱和环胺衍生物、其制备方法及其医药用途

技术领域

背景技术

心脑血管血栓性疾病是一种常见的疾病，近年来以冠状血栓和脑血栓为主的血栓栓塞性疾病的发病率呈上升趋势，严重危害人类的健康，因此，对这类疾病的防治研究十分重要。血小板聚集是正常凝血机制中的一个关键环节，但血小板的黏附、聚集也是血栓形成的起始环节。因此，抑制血小板聚集药物在治疗血栓病中发挥着重要作用(Stroke，1999，30：878)。抗血小板凝集药一直是人们研究的热点。

由法国赛诺菲制药公司研制开发的氯吡格雷(Clopidogrel)是目前世界范围内应用最为广泛的抗血小板凝集药物。氯吡格雷是一个前体药物。早期的体内代谢研究表明，氯吡格雷在体内经过肝脏P450酶系的两步氧化，开环代谢产生一饱和环胺结构的活性代谢物(如图1所示)。活性代谢物与血小板表面P2Y₁₂受体形成共价结合，通过拮抗P2Y₁₂受体从而抑制血小板的凝集(Thromb Haemost，2000，84：891)。日本三共制药公司和美国礼来制药公司在氯吡格雷结构基础上开发出了新一代抗血小板药物——普拉格雷(Prasugrel)。普拉格雷也是一个前体药物。早期的体内代谢研究发现，普拉格雷在体内经过酯酶水解和P450酶系的氧化开环，形成一饱和环胺结构的活性代谢物，拮抗血小板P2Y₁₂受体(Drug Metab Dispos，2007，35：1096)。。

2012年，法国研究者发现，氯吡格雷在体内不仅会代谢成饱和环胺结构的活性代谢物，还会通过其他酯酶代谢出少量双键发生转移的不饱和环胺结构的代谢物(如图2所示，ChemRes Toxicol，2012，25：348)。这些不饱和环胺结构的代谢物在体内外的抗血小板活性迄今未见有文献报道。

以饱和环胺代谢物为结构基础，日本三共公司曾申请了多项专利，如W09808811、WO9943648、WO9943648。这些专利保护了一系列饱和环胺结构衍生物并报道了体内外抗血小板活性情况，但是对于具有不饱和环胺结构的衍生物及其抗血小板活性的研究，迄今未见有文献报道。

发明内容

在参照日本三共公司报道的合成路线，合成饱和环胺衍生物的过程中，我们偶然得到了一系列不饱和环胺结构的衍生物。在对这些化合物进行了抗血小板活性测试后我们惊奇地发现，这些不饱和环胺衍生物在动物体内呈现出较普拉格雷更为强大的抗血小板活性。因此，这类不饱和环胺衍生物值得我们进一步的研究与开发。

基于此前文献报道的氯吡格雷和普拉格雷代谢物的结构，本发明首次公开了新型不饱和环胺衍生物、其制备方法及用途，尤其用于治疗动脉粥样硬化疾病、心肌梗死、中风、外周动脉疾病、急性冠脉综合征和抗血管形成手术期间的血栓形成。

本发明公开了一系列通式I化合物、药学上可接受的盐或溶剂化物，所示化合物具有良好的抑制血小板凝聚的作用。

其中，R₁代表1～10个碳的非取代的或X取代的直链或支链烷烃基、烯烃基、炔烃基、苯基或X取代的苯基、苄基或X取代的苄基、萘基或X取代的萘基、1～10个碳的非取代的或X取代的直链或支链烷氧基、3～7个碳的非取代的或X取代的环烷氧基，1～10个碳的非取代的或X取代的直链或支链烷酰基、非取代的或X取代的苯甲酰基，3～7个碳的非取代的或X取代的环烷酰基。

R₂代表氢、1～10个碳的非取代的或X取代的直链或支链烷烃基、苯基或X取代的苯基、苄基或X取代的苄基、萘基或X取代的萘基、3～7个碳的非取代的或X取代的环烷基、1～10个碳的非取代的或X取代的直链或支链烷氧基、3～7个碳的非取代的或X取代的环烷氧基。

R₃代表氢、氟、氯、溴、碘、腈基、硝基、氨基、酰胺基、磺酰胺基、三氟甲基、巯基、羟基、乙酰氧基、甲氧基、乙氧基、羧基、甲氧酰基、乙氧酰基、1～10个碳的直链或支链烷烃基、烯烃基、炔烃基。

X代表氟、氯、溴、碘、腈基、硝基、氨基、酰胺基、磺酰胺基、三氟甲基、巯基、羟基、乙酰氧基、甲氧基、乙氧基、羧基、甲氧酰基、乙氧酰基、芳氧基、苯基或Y取代的苯基；Y为氟、氯、溴、碘、腈基、硝基、氨基、酰胺基、磺酰胺基、三氟甲基、巯基、羟基、乙酰氧基、甲氧基、乙氧基、羧基、甲氧酰基、乙氧酰基，并且Y基团处于苯环的2、3或4位。

本发明式I化合物优选：

R₁代表1～10个碳的非取代的或X取代的直链或支链烷烃、苯基或X取代的苯基、苄基或X取代的苄基、苄基或X取代的苄基、萘基或X取代的萘基、1～10个碳的非取代的或X取代的直链或支链烷酰基、非取代的或X取代的苯甲酰基，3～7个碳的非取代的或X取代的环烷酰基。

R₂代表1～10个碳的非取代的或X取代的直链或支链烷烃、苯基或X取代的苯基、苄基或X取代的苄基、萘基或X取代的萘基、3～7个碳的非取代的或X取代的环烷基。

R₃代表氟、氯、溴、腈基、三氟甲基。

本发明优选的化合物如下：

(S)-2-苯基-2-(3-(2-甲氧基-2-羰乙基)-4-乙酰巯基-二氢哌啶-1-(2H)-基)-乙酸甲酯

(S)-2-(2-氟苯基)-2-(3-(2-甲氧基-2-羰乙基)-4-乙酰巯基-二氢哌啶-1-(2H)-基)-乙酸甲酯

(S)-2-(2-氯苯基)-2-(3-(2-甲氧基-2-羰乙基)-4-乙酰巯基-二氢哌啶-1-(2H)-基)-乙酸甲酯

(S)-2-(2-溴苯基)-2-(3-(2-甲氧基-2-羰乙基)-4-乙酰巯基-二氢哌啶-1-(2H)-基)-乙酸甲酯

(S)-2-苯基-2-(3-(2-乙氧基-2-羰乙基)-4-乙酰巯基-二氢哌啶-1-(2H)-基)-乙酸甲酯

(S)-2-(2-氟苯基)-2-(3-(2-乙氧基-2-羰乙基)-4-乙酰巯基-二氢哌啶-1-(2H)-基)-乙酸甲酯

(S)-2-(2-氯苯基)-2-(3-(2-乙氧基-2-羰乙基)-4-乙酰巯基-二氢哌啶-1-(2H)-基)-乙酸甲酯

(S)-2-(2-溴苯基)-2-(3-(2-乙氧基-2-羰乙基)-4-乙酰巯基-二氢哌啶-1-(2H)-基)-乙酸甲酯

(S)-2-苯基-2-(3-(2-甲氧基-2-羰乙基)-4-丙酰巯基-二氢哌啶-1-(2H)-基)-乙酸甲酯

(S)-2-(2-氟苯基)-2-(3-(2-甲氧基-2-羰乙基)-4-丙酰巯基-二氢哌啶-1-(2H)-基)-乙酸甲酯

(S)-2-(2-氯苯基)-2-(3-(2-甲氧基-2-羰乙基)-4-丙酰巯基-二氢哌啶-1-(2H)-基)-乙酸甲酯

(S)-2-(2-溴苯基)-2-(3-(2-甲氧基-2-羰乙基)-4-丙酰巯基-二氢哌啶-1-(2H)-基)-乙酸甲酯

(S)-2-苯基-2-(3-(2-乙氧基-2-羰乙基)-4-丙酰巯基-二氢哌啶-1-(2H)-基)-乙酸甲酯

(S)-2-(2-氟苯基)-2-(3-(2-乙氧基-2-羰乙基)-4-丙酰巯基-二氢哌啶-1-(2H)-基)-乙酸甲酯

(S)-2-(2-氯苯基)-2-(3-(2-乙氧基-2-羰乙基)-4-丙酰巯基-二氢哌啶-1-(2H)-基)-乙酸甲酯

(S)-2-(2-溴苯基)-2-(3-(2-乙氧基-2-羰乙基)-4-丙酰巯基-二氢哌啶-1-(2H)-基)-乙酸甲酯

本发明提供的式I化合物的光学纯度为70％～100％，优选为90％～100％，更优选为95％～100％，最优选为98％～100％。

本发明的另一个目的是提供了式I化合物的制备方法，如下反应式：

方法(1)

具体包括下列步骤：

(1)式III化合物或其盐与R₂OH在碱存在下反应，得到式II化合物。其中式III化合物的制备可参考专利CN102120744，由式III化合物合成得到式II化合物的合成方法已有文献公开，可以参考文献Chem Res Toxicol，2012，25：348。

(2)式II化合物或其盐与R₁Z在碱存在下反应，得到式I化合物，其中Z代表氟、氯、溴、碘、1～10个碳的非取代的或X取代的直链或支链烷基磺酰基、苯基或X取代的苯磺酰基。所采用的溶剂选自自苯、甲苯、氯仿、正己烷、环己烷、二氯甲烷、1，2-二氯乙烷、甲基叔丁基醚、四氯化碳、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、甲醇、乙醇、丙酮、四氢呋喃、乙醚、乙腈、N，N-二甲基甲酰胺或二甲亚砜中的一种或多种的混合溶剂，优选甲醇、乙醇；所采用的碱选自氢化钠、氢化钾、甲醇钠、甲醇钾、叔丁醇钠、叔丁醇钾、三乙胺、二异丙基乙胺、1，8-二氮杂环[5，4，0]十一烯-7、碳酸钾、碳酸钠、碳酸氢钾或碳酸氢钠，其中优选甲醇钠、碳酸氢钠、碳酸氢钾、碳酸钾、三乙胺；反应温度为0℃至100℃，优选温度为20℃至50℃。

在上述反应中，R₁、R₂、R₃和X如上述式I化合物中定义。

方法(2)

具体包括下列步骤：

(1)参考专利CN1192019，式V化合物经过多步反应得到式Ⅳ化合物，具体合成方法请见实施例。

(2)式Ⅳ化合物与R₁SK反应，得到式I化合物。该步反应的反应条件已由专利CN1192019公开，但在本发明中我们发现使用专利公开的条件可以得到双键发生转移的不饱和环胺化合物。

在上述反应中，R₁、R₂、和R₃如上述式I化合物中定义。

本发明的又一目的是提供了式I化合物在制药中的用途。

药效学研究表明，本发明提供的式I化合物具有显著的抑制血小板聚集作用，且抗血小板聚集作用要好于普拉格雷。

本发明提供的式I化合物、药学上可接受的盐或溶剂化物可用于制备预防或治疗血栓和栓塞相关疾病的药物中的用途。具体地特征在于，用于制备预防或治疗动脉粥样硬化疾病、心肌梗死、中风、缺血性脑血栓、外周动脉疾病、急性冠脉综合症或冠脉介入手术后的血栓形成的药物。

本发明还提供了一种预防或治疗血栓和栓塞相关疾病的药物组合。所述药物组合物中含有治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分和药学上可接受的载体。

附图说明

图1是早期研究下氯吡格雷体内代谢途径及产生的饱和环胺代谢物。

图2是新近报道的氯吡格雷体内代谢途径及产生的饱和和不饱和环胺代谢物。

图3是(S)-2-(2-氯苯基)-2-(3-(2-乙氧基-2-羰乙基)-4-乙酰巯基-二氢哌啶-1-(2H)-基)-乙酸甲酯的核磁共振氢谱。

图4是(S)-2-(2-氯苯基)-2-(3-(2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基-5，6-二氢吡啶-1(2H)-基)-乙酸甲酯的核磁共振氢谱。

图5是(S)-2-(2-氯苯基)-2-(3-(2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯甲基-5，6-二氢吡啶-1(2H)-基)-乙酸甲酯的核磁共振氢谱。

图6是(S)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯甲基-1，2，5，6-四氢吡啶-3-基)-乙酸的核磁共振氢谱。

具体实施方式

下面通过实施例具体说明本发明的内容。在本发明中，以下所述的实施例是为了更好的阐述本发明，并不是用来限制本发明的范围。

实施例1

1-三苯甲基-4-哌啶酮

在4-哌啶酮一水合物盐酸盐40g(0.260mol)和三乙胺109mL(0.78mol)的二甲基甲酰胺550mL的溶液中，60℃搅拌下，一点点地加入氯三苯基甲烷72.5g(0.260mol)后，在该温度下搅拌5h，冷却后，过滤析出的三乙胺盐酸盐。将滤液倒入2500mL水中，边倒边搅，静置后，抽滤，得白色固体77.7g，收率70.2％。

实施例2

E-2-(4-羰基-1-三苯甲基哌啶-3-烯基)-乙酸乙酯

将60g(0.1757mol)1-三苯甲基-4-哌啶酮和吡咯烷15.8mL(0.1933mol)的甲苯溶液600mL，用水分离器，在加热回流下共沸3h，降温后加入乙醛酸乙酯20.2mL(0.1933mol)，接着进行2h的加热回流共沸脱水。冷却后，加入400mL水，用乙酸乙酯萃取，用无水硫酸钠干燥有机层。减压浓缩溶剂，将得到的残渣用硅胶柱色谱精制，得到浅黄色油状物49.35g，收率60.2％。¹H NMR(500MHz，CDCl₃)：d 7.51-7.17(m，15H)，6.59(s，1H)，4.10(q，2H，J＝7.1Hz)，3.71(s，2H)，2.79(t，2H，J＝6.0Hz)，2.65(s，2H)，1.17(t，2H，J＝7.1Hz).ESI-MSm/z 448.1[M+Na]⁺

实施例3

E-2-(4-羟基-1-三苯甲基哌啶-3-烯基)-乙酸乙酯

将22g(0.0517mol)E-2-(4-羰基-1-三苯甲基哌啶-3-烯基)-乙酸乙酯溶于50mL二氯甲烷中，后加入甲醇200mL，在冰冷条件下一点点加入硼氢化钠2.34g(0.0619mol)，后室温下搅拌1h。减压下浓缩反应液后，加入水150mL，用乙酸乙酯萃取，有机层用无水硫酸钠干燥。减压浓缩溶剂，将得到的残渣用硅胶柱色谱精制，得到浅黄色油状物M3-712.8g，收率57.9％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：d 7.45(d，6H，J＝7.3Hz)，7.25-7.11(m，9H)，6.05(s，1H)，4.48(s，1H)，4.14-3.96(m，3H)，2.99(s，1H)，2.30-2.22(m，1H)，2.10-2.03(m，1H)，1.93-1.85(m，3H)，1.12(t，3H，J＝7.1Hz).ESI-MSm/z 426.2[M-H]^-.

实施例4

E-2-(4-羟基哌啶-3-烯基)-乙酸乙酯对甲苯磺酸盐

将8.77g(20.51mmol)E-2-(4-羟基-1-三苯甲基哌啶-3-烯基)-乙酸乙酯溶于100mL四氢呋喃后，加入对甲苯磺酸一水合物5.13g(26.97mmol)，在50℃下搅拌1h后，减压下蒸出溶剂，用甲苯洗涤得到的残渣，静置后倒出上层液，下层油状物用于下一步反应。

实施例5

(2S)-2-(2-氯苯基)-2-((E)-3-(2-乙氧基-2-羰乙烯基)-4-羟基哌啶-1-基)-乙酸甲酯

将E-2-(4-羟基哌啶-3-烯基)-乙酸乙酯对甲苯磺酸盐溶解在100mL乙腈中，进而加入6.86g(17.77mmol)(R)-2-(2-氯苯基)-2-(4-硝基苯磺酰氧基)-乙酸甲酯，碳酸氢钾4.44g(44.42mmol)，氮气保护下反应过夜。抽滤，减压浓缩滤液，将得到的残渣用硅胶柱色谱精制，得到浅黄色油状物3.47g，两步收率46.0％。¹H NMR(500MHz，CDCl₃)：d 7.59-7.53(m，1H)，7.38-7.35(m，1H)，7.27-7.21(m，2H)，5.98-5.97(m，1H)，4.85-4.81(m，1H)，4.59-4.48(m，1H)，4.10-4.05(m，3H)，3.70-3.68(m，3H)，3.24-3.14(m，1H)，2.91-2.87(m，1H)，2.66-2.50(m，1H)，2.31(s，1H)，2.03-1.97(m，1H)，1.81-1.74(m，2H)，1.23-1.95(m，3H).ESI-MSm/z368.1[M+H]⁺.

实施例6

(2S)-2-(2-氯苯基)-2-((E)-3-(2-乙氧基-2-羰乙烯基)-4-溴哌啶-1-基)-乙酸甲酯

在无水二氯甲烷35mL中加入2.08g(5.65mmol)(2S)-2-(2-氯苯基)-2-((E)-3-(2-乙氧基-2-羰乙烯基)-4-羟基哌啶-1-基)-乙酸甲酯，四溴化碳2.25g(6.78mmol)，三苯基膦1.78g(6.78mmol)，在室温下搅拌1h，浓缩反应液，将得到的残渣用硅胶柱色谱精制，得浅黄色油状物的1.9g，收率79.2％。¹H NMR(500MHz，CDCl₃)：d 7.62-7.58(m，1H)，7.40-7.37(m，1H)，7.29-7.23(m，2H)，5.93(d，1H，J＝4.0Hz)，4.89-4.88(m，1H)，4.83(s，1H)，4.65-4.50(m，1H)，4.13-4.05(m，2H)，3.72(d，3H，J＝7.3Hz)，3.65-3.55(m，1H)，3.04-2.87(m，1H)，2.80-2.77(m，1H)，2.31(s，1H)，2.09-2.03(m，1H)，1.24(qd，3H，J＝14.1，6.9Hz).ESI-MSm/z 430.1[M+H]⁺.

实施例7

将2.7g(6.2mmol)(2S)-2-(2-氯苯基)-2-((E)-3-(2-乙氧基-2-羰乙烯基)-4-溴哌啶-1-基)-乙酸甲酯和2.8g(24.5mmol)硫代乙酸钾溶于80mL N，N-二甲基甲酰胺或80mL二甲基亚砜中，40℃下加热搅拌48h后原料全部消失。向反应液中加入大量水，乙酸乙酯萃取水相并用无水硫酸钠干燥过夜。蒸干有机相后过柱分离，得纯品2.1g，收率：78.9％。¹H NMR(500MHz，CDCl₃)：d 7.66(d，1H，J＝7.0Hz)，7.40-7.24(m，3H)，4.86(s，1H)，4.09(q，2H，J＝7.1Hz)，3.71(s，3H)，3.33(ABq，2H，J＝16.5Hz)，3.18(ABq，2H，J＝16.1Hz)，2.79(s，2H)，2.45(s，2H)，2.33(s，3H)，1.22(t，3H，J＝7.1Hz).¹³C NMR(125MHz，CDCl₃)：d 197.6，193.7，170.9，169.7，137.9，134.6，129.9，129.7，129.4，127.1，124.0，67.2，60.8，54.5，52.1，47.6，38.8，32.5，30.3，29.6，14.0.ESI-MSm/z 426.1[M+H]⁺.HRMS calcd for C₂₀H₂₄NO₅SClNa[M+H]⁺m/z 448.0916，found 448.0964.

实施例8

(S)-2-(2-氯苯基)-2-(3-(2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯基-5，6-二氢吡啶-1(2H)-基)-乙酸甲酯

将169mg(0.5mmol)(2S)-2-(2-氧-7，7a-二氢噻吩并[3，2-c]吡啶-5(2H，4H，6H)-基)-2-(2-氯苯基)-乙酸甲酯溶于15mL甲醇中，加入724mg(5mmol)无水碳酸钾。反应液氮气保护，室温下搅拌12小时后原料全部消失，将反应液过滤除去不溶固体后，用2N盐酸调节pH至中性，加入大量水后，用乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤有机相，无水硫酸钠干燥。蒸干有机相后过柱分离，得油状物。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：d 7.65-7.62(m，1H)，7.40-7.38(m，1H)，7.28-7.24(m，2H)，4.79(s，1H)，3.69(s，3H)，3.66(s，3H)，3.24-3.17(m，2H)，3.10(d，2H，J＝15.6Hz)，2.69(t，2H，J＝5.7Hz)，2.57(s，1H)，2.38(s，2H)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃+D₂O)d7.65-7.62(m，1H)，7.40-7.37(m，1H)，7.28-7.24(m，2H)，4.79(s，1H)，3.69(s，3H)，3.66(s，3H)，3.16-3.10(m，2H)，3.12-3.05(m，2H)，2.69(t，2H，J＝5.7Hz)，2.38(s，2H).¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)：d 171.0，170.6，134.6，133.4，129.8，129.7，129.4，127.0，125.1，124.0，67.4，54.4，52.1，47.6，38.3，35.2.ESI-MSm/z 392.1[M+Na]⁺.HRMS calcd for C₁₇H₂₀NO₄NaSCl[M+Na]⁺m/z 392.0699，found 392.0703.

实施例9

(S)-2-(2-氯苯基)-2-(3-(2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯甲基-5，6-二氢吡啶-1(2H)-基)-乙酸甲酯

将338mg(1mmol)(2S)-2-(2-氧-7，7a-二氢噻吩并[3，2-c]吡啶-5(2H，4H，6H)-基)-2-(2-氯苯基)-乙酸甲酯溶于10mL的甲醇中，加入1.38g(10mmol)无水碳酸钾，氮气保护下搅拌12小时后原料全部消失。过滤不溶物后用稀盐酸将反应液调至中性或弱酸性，加入碘甲烷0.18mL(3mmol)搅拌0.5小时。向反应液中加入水并用乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥过夜。蒸干有机相后得粗品，过柱分离得油状物282mg，收率：73.4％。¹H NMR(500MHz，CDCl₃)：d 7.65(d，1H，J＝7.2Hz)，7.39-7.38(m，1H)，7.29-7.23(m，3H)，4.80(s，1H)，3.70(s，4H)，3.66(d，3H，J＝9.3Hz)，3.37(d，1H，J＝15.7Hz)，3.25-3.20(m，2H)，3.11(d，1H，J＝15.8Hz)，2.72(s，2H)，2.42(s，2H)，2.18(s，3H).¹³C NMR(125MHz，CDCl₃)：d 171.1，171.0，134.6，133.5，129.8，129.7，129.3，129.1，127.7，127.0，67.5，54.7，52.0，51.8，47.6，38.0，29.8，14.3.ESI-MSm/z 406.1[M+Na]⁺.HRMS calcd for C₁₈H₂₂NO₄NaSCl[M+Na]⁺m/z406.0856，found 406.0860.

实施例10

(S)-2-(1-(1-(2-氯苯基)-2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯甲基-1，2，5，6-四氢吡啶-3-基)-乙酸

将233mg(0.61mmol)(S)-2-(2-氯苯基)-2-(3-(2-甲氧基-2-羰乙基)-4-巯甲基-5，6-二氢吡啶-1(2H)-基)-乙酸甲酯溶于2mL的甲醇中，加入0.07mL30％氢氧化钠水溶液(0.73mmol)，氮气保护下搅拌4天后原料全部消失。用稀盐酸将反应液调至中性或弱酸性，加入水并用乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥过夜。蒸干有机相后得粗品，过柱分离得油状物102mg，收率：45.4％。¹H NMR(500MHz，CDCl₃)：d 7.65-7.63(m，1H)，7.40-7.38(m，1H)，7.29-7.25(m，2H)，4.84(s，1H)，3.70(s，3H)，3.38(d，1H，J＝16.0Hz)，3.28-3.25(m，2H)，3.13(d，1H，J＝15.8Hz)，2.28-2.75(m，1H)，2.72-2.69(m，1H)，2.43(s，2H)，2.19(s，3H).¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)：d 175.67，171.0，134.7，133.1，129.9，129.7，129.6，129.4，127.3，127.1，67.2，54.6，52.1，47.5，37.9，29.6，14.3.ESI-MS m/z 370.1[M+H]⁺.HRMS calcd forC₁₇H₂1NO₄SCl[M+H]⁺m/z 370.0880，found 370.0881.

实施例11

抗血小板聚集活性试验

药品及制剂：阳性药为普拉格雷，受试化合物为实施例7。阳性药和受试化合物以0.5％CMC-Na配成混悬液供动物给药用。

动物：雄性SD大鼠，体重250g左右，由上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供。动物合格证号：2008001605451许可证号码SCXK(沪)：SCXK(沪)2008-0016。

仪器：离心机，血小板聚集仪等。

方法：参考BORN比浊法(Nature，1962，194：927)，对本发明化合物进行抗血小板聚集的药理活性试验。向富含血小板的血浆(PRP)中加入促凝聚物二磷酸腺苷(ADP)搅拌，使血小板聚集。血小板的聚集引起光密度的变化，可通过分光光度计检测。此实验可以评价受试化合物在体内或体外给药引起的血小板聚集作用。

雄性SD大鼠，经口灌胃给予普拉格雷和受试药物(0.5％CMC-Na的均匀悬浮液，药物浓度为1mg/ml)，剂量为3mg/kg，空白对照组经口灌胃给予同体积的0.5％CMC-Na。2h后，眼眶取血，3.8％枸橼酸钠抗凝，全血与抗凝剂之比为9∶1，1000rpm离心7min，制备富血小板血浆(PRP)。以贫血小板血浆(PPP)调PRP，使血小板计数保持在2x 10⁶个/ml。取PRP加入测试杯中，37℃孵育10min，以PRP调零，PPP调100％，以ADP(终浓度为5μM)为诱导剂，按比浊法用血小板聚集仪测定血小板聚集百分数，以t-检验进行统计学比较，血小板聚集抑制率(％)＝[1-(给药管聚集百分率/对照管聚集百分率)]x 100％。。

结果：通过比浊法测得大鼠口服受试化合物后的血小板聚集率，实验结果如表1所示。结果表明，实施例7化合物显示了比普拉格雷更强的抗血小板聚集活性。

表1大鼠口服普拉格雷与实施例7后的血小板聚集抑制作用。

Claims

1.不饱和环胺衍生物，其特征在于，所述衍生物如式I化合物表示：

2.根据权利要求1的不饱和环胺衍生物，其特征在于，所述式I化合物中

R₃代表氟、氯、溴、腈基、三氟甲基。

3.根据权利要求1的不饱和环胺衍生物，其特征在于，所述衍生物包括下列衍生物：

(S)-2-(2-溴苯基)-2-(3-(2-乙氧基-2-羰乙基)-4-丙酰巯基-二氢哌啶-1-(2H)-基)-乙酸甲酯。

4.如权利要求1所述不饱和环胺衍生物的制备方法，其特征在于，如下反应式：

包括下列步骤：

式II化合物或其盐与R₁Z在碱存在下反应，得到式I化合物。所采用的溶剂选自自苯、甲苯、氯仿、正己烷、环己烷、二氯甲烷、1，2-二氯乙烷、甲基叔丁基醚、四氯化碳、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、甲醇、乙醇、丙酮、四氢呋喃、乙醚、乙腈、N，N-二甲基甲酰胺或二甲亚砜中的一种或多种的混合溶剂，优选甲醇、乙醇；所采用的碱选自氢化钠、氢化钾、甲醇钠、甲醇钾、叔丁醇钠、叔丁醇钾、三乙胺、二异丙基乙胺、1，8-二氮杂环[5，4，0]十一烯-7、碳酸钾、碳酸钠、碳酸氢钾或碳酸氢钠，其中优选甲醇钠、碳酸氢钠、碳酸氢钾、碳酸钾、三乙胺；反应温度为0℃至100℃，优选温度为20℃至50℃。

在上述反应式中，R₁、R₂、R₃、X如上述式I化合物中所定义，Z代表氟、氯、溴、碘、1～10个碳的非取代的或X取代的直链或支链烷基磺酰基、苯基或X取代的苯磺酰基。

5.如权利要求1-3中任一项所述不饱和环胺衍生物在制备预防或治疗血栓和栓塞相关疾病的药物中的用途。

6.如权利要求5的用途，其特征在于，用于制备预防或治疗动脉粥样硬化疾病、心肌梗死、中风、缺血性脑血栓、外周动脉疾病、急性冠脉综合症或冠脉介入手术后的血栓形成的药物。

7.一种预防或治疗血栓和栓塞相关疾病的药物组合，其特征在于，所述药物组合物中含有治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分和药学上可接受的载体。