CN111386333A - 抗粘附培养基 - Google Patents

抗粘附培养基 Download PDF

Info

Publication number
CN111386333A
CN111386333A CN201880076104.7A CN201880076104A CN111386333A CN 111386333 A CN111386333 A CN 111386333A CN 201880076104 A CN201880076104 A CN 201880076104A CN 111386333 A CN111386333 A CN 111386333A
Authority
CN
China
Prior art keywords
microalgae
flocculant
microorganism
culture medium
microorganisms
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201880076104.7A
Other languages
English (en)
Inventor
P·布迪耶
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Fermentalg SA
Original Assignee
Fermentalg SA
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Fermentalg SA filed Critical Fermentalg SA
Publication of CN111386333A publication Critical patent/CN111386333A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M39/00—Means for cleaning the apparatus or avoiding unwanted deposits of microorganisms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/0018—Culture media for cell or tissue culture
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M21/00—Bioreactors or fermenters specially adapted for specific uses
    • C12M21/02—Photobioreactors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/10—Protozoa; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/12—Unicellular algae; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
    • C12N2500/05—Inorganic components
    • C12N2500/10—Metals; Metal chelators
    • C12N2500/20—Transition metals
    • C12N2500/22—Zinc; Zn chelators
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
    • C12N2500/05—Inorganic components
    • C12N2500/10—Metals; Metal chelators
    • C12N2500/20—Transition metals
    • C12N2500/24—Iron; Fe chelators; Transferrin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2533/00—Supports or coatings for cell culture, characterised by material
    • C12N2533/30—Synthetic polymers

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)

Abstract

本发明涉及一种用于培养微生物，特别是原生生物的方法，该方法以防止所述微生物与进行培养的反应器的壁粘附的方式进行。

Description

抗粘附培养基
发明领域
本发明涉及一种培养微生物，特别是原生生物的方法，该方法以防止所述微生物与进行培养的反应器的壁粘附的方式进行。
发明背景
在长期培养(数天至数月)期间，微生物倾向于粘附在壁上。这种现象被称为结垢(fouling)，是众所周知的。它对培养物的生产率和必须定期清洗的设备的寿命都具有非常有害的影响。粘附至生物反应器壁的细胞降低穿透内部的光的量，它们可因缺乏资源(营养物质、氧气等)而死亡，从而导致食尸生物体的发展。
某些材料比其他材料产生更少的粘附力，但是它们均不能克服上述缺点。
微生物在其中循环的培养基的盐度和含有培养基的壁的性质可影响微生物对壁的粘附。例如，已经表明氯化铁的添加促进了小球藻属的微藻对玻璃壁的粘附(Nordin J.等,1967)。
有所谓的主动表面处理方法，例如机械刮刀型系统(Wet Labs/Sea-BirdBioWiper)、加压喷水器、超声波、抗微生物剂(诸如氯或溴(Alconox))、用于手动洗涤的阴离子型去垢剂、紫外线辐射。
可以建造一个集成的抗结垢壁(YSI C-Spray)。这可以是由抗微生物剂组成的表面，该抗微生物剂逐渐将生物膜的中和元素释放到培养基中。这些带有抗微生物剂的系统通常由铜盐组成，它会释放Cu2+，这会干扰膜上的酶，阻止其分裂(YSI 6-系列抗结垢试剂盒)。
这些方法难以实施，因为很难根据生长情况释放正确量的产物，而存在生物膜发展过快的风险。一旦生物膜已经形成，产物不太有效。而且，这些化学技术的有效性是基于微藻的死亡，因此对它们的生长不利。
仍然需要一种避免在反应器中生长的微生物聚集同时保持或甚至改善这些微生物的生长特性和生物学活性的方法。
发明内容
为了解决此技术问题，本发明涉及在微生物培养期间絮凝剂在培养基中使用絮凝剂，以防止所述微生物与进行培养的反应器的壁粘附。
本发明还涉及在适于微生物生长的培养基中培养所述微生物的方法，其特征在于所述培养基包含适量的絮凝剂以防止所述微生物与进行培养的反应器的壁粘附。
附图简述
图1显示在不同浓度的氯化铁情况下的微藻的生存力。
图2显示在不同浓度的氯化锌情况下的微藻的生存力。
图3显示在不同浓度的淀粉情况下的微藻的生存力。
图4显示在有和没有絮凝剂FeCl3的两种条件下相同微藻的生物质产量。温度、pH、光度条件相同。
图5显示用作反应器的透明柱的壁上的点，用于测量光穿过柱的能力。
图6显示三种絮凝剂的效力。这些絮凝剂是两种无机元素FeCl3和ZnCl2，一种有机元素马铃薯淀粉。
发明详述
本发明涉及微生物的培养。这些用于培养微生物的方法和培养的微生物是本领域技术人员众所周知的。
这些包括细菌、酵母和原生生物，尤其是微藻。根据本发明的特定且优选的实施方案，培养的微生物是原生生物。
“原生生物”是指所有真核单细胞微生物。微藻(绿藻纲植物，诸如小球藻(Chlorella)、栅列藻(Senedesmus)、四爿藻(Tetraselmis)、红球藻(Haematococcus)；轮藻(Charophytes)、金藻(chrysophytes)，包括Galdieria,；微拟球藻(Nannochloropsis)；裸藻(Euglenophyte)诸如裸藻(Euglena)、裸扁藻(Phacus)；内生菌(Rodophytes)包括(Galdieria)等)，单细胞真菌(拟杆菌属(Thrautochytrids)诸如裂殖壶菌(Schizochytrium)、金膜壶菌(Aurantiochytrium)等)，蓝藻(项圈藻(Anabaena)、念珠藻(Nostoc)、Microcistis、节旋藻(Arthrospira)、螺旋藻(Spirulina)等)或异养鞭毛虫(隐甲藻(Crypthecodinium)等)属于原生生物组。
当微藻属于小球藻属(Chlorella)时，它们可选自以下种：C.acuminata、窄椭圆球藻(C.angustoellipsoidea)、无硝小球藻(C.anitrata)、南极小球藻(C.antarctica)、黄绿小球藻(C.aureoviridis)、金绿小球藻(C.autotrophica)、葡萄状小球藻(C.botryoides)、C.caldaria、卡氏小球藻(C.candida)、包囊小球藻(C.capsulata)、拟绿小球藻(C.chlorelloides)、C.cladoniae、脱水小球藻(C.coelastroides)、C.colonialis、C.communis、C.conductrix、团集小球藻(C.conglomerata)、C.desiccata、椭圆小球藻(C.ellipsoidea)、长小球藻(C.elongata)、浮水小球藻(C.emersonii)、C.faginea、淡褐小球藻(C.fusca)、谷氏小球藻(C.glucotropha)、C.homosphaera、水溪小球藻(C.infusionum)、凯氏小球藻(C.kessleri)、C.koettlitzii、C.lacustris、C.lewinii、C.lichina、分叶小球藻(C.lobophora)、黄绿异小球藻(C.luteo-viridis)、C.marina、C.miniata、C.minor、微小小球藻(C.minutissima)、C.mirabilis、C.mucosa、突变小球藻(C.mutabilis)、夜间小球藻(C.nocturna)、C.nordstedtii、C.oblonga、C.oocystoides、C.ovalis、C.paramecii、C.parasitica、巴夫氏小球藻(C.parva)、C.peruviana、嗜光小球藻(C.photophila)、C.pituita、普氏小球藻(C.pringsheimii)、原始小球藻(C.protothecoides)、C.pulchelloides、蛋白核销球藻(C.pyrenoidosa)、规则小球藻(C.regularis)、瑞氏小球藻(C.reisiglii)、C.reniformis、C.rotunda、C.rubescens、C.rugosa、嗜糖小球藻(C.saccharophila)、盐生小球藻(C.salina)、简单小球藻(C.simplex)、C.singularis、C.sorokiniana、C.spaerckii、球形小球藻(C.sphaerica)、斯蒂格小球藻(C.stigmatophora)、C.subsphaerica、C.terricola、他伯氏小球藻(C.trebouxioides)、万尼氏小球藻(C.vannielii)、多变小球藻(C.variabilis)、C.viscosa、C.volutis、普通小球藻(C.vulgaris)、C.zopfingiensis。有利地，根据本发明，小球藻属的藻类可以是选自种C.sorokiniana和普通小球藻(C.vulgaris)的藻类。
当微藻属于裸藻属时，它们可选自以下种：绿裸藻(E.viridis)、纤细裸藻(E.gracilis)、E.limosa、E.globosa、E.prowsei、E.polomorpha。
当微藻属于栅列藻属时，它们可选自以下种：丰富栅藻(S.abundans)、S.aciculatus、S.aculeolatus、S.aculeotatus、尖细栅藻(S.acuminatus)、尖形栅藻(S.acutiformis)、尖栅藻(S.acutus)、S.aldavei、S.alternans、S.ambuehlii、安徽栅藻(S.anhuiensis)、奇形栅藻(S.anomalus)、S.antennatus、S.antillarum、S.apicaudatus、S.apiculatus、弯曲栅藻(S.arcuatus)、S.aristatus、被甲栅藻(S.armatus)、S.arthrodesmiformis、S.arvernensis、S.asymmetricus、S.bacillaris、S.baculiformis、S.bajacalifornicus、S.balatonicus、S.basiliensis、布那迪栅藻(S.bernardii)、S.bicaudatus、S.bicellularis、S.bidentatus、S.bijuga、S.bijugatus、双对栅藻(S.bijugus)、巴西栅藻(S.brasiliensis)、S.breviaculeatus、S.brevispina、S.caribeanus、龙骨栅藻(S.carinatus)、S.caudato-aculeolatus、S.caudatus、S.chlorelloides、S.circumfusus、S.coalitus、S.costatogranulatus、S.crassidentatus、S.curvatus、S.decorus、齿牙栅藻(S.denticulatus)、S.deserticola、S.diagonalis、S.dileticus、二形栅藻(S.dimorphus)、S.disciformis、S.dispar、S.distentus、S.ecornis、S.ellipsoideus、S.ellipticus、S.falcatus、S.fenestratus、S.flavescens、S.flexuosus、S.furcosus、S.fuscus、S.fusiformis、S.gracilis、S.graevenitzii、S.grahneisii、颗粒栅藻(S.granulatus)、S.gujaratensis、古氏栅藻(S.gutwinskii)、S.hanleyi、S.helveticus、S.heteracanthus、S.hindakii、S.hirsutus、S.hortobagyi、S.houlensis、黄山栅藻(S.huangshanensis)、具齿栅藻(S.hystrix)、S.incrassatulus、S.indianensis、S.indicus、S.inermis、S.insignis、S.intermedius、爪哇栅藻(S.javanensis)、S.jovais、S.jugalis、S.kerguelensis、S.kissii、S.komarekii、S.lefevrei、S.linearis、S.littoralis、S.longispina、S.longus、S.luna、S.lunatus、S.magnus、S.maximus、S.microspina、S.minutus、S.mirus、S.morzinensis、S.multicauda、S.multiformis、S.multispina、S.multistriatus、S.naegelii、S.nanus、S.notatus、S.nygaardii、S.oahuensis、斜生栅藻(S.obliquus)、S.obtusiusculus、S.obtusus、S.olvalternus、S.oocystiformis、奥菠菜栅藻(S.opoliensis)、S.ornatus、椭圆栅藻(S.ovalternus)、S.pannonicus、S.papillosum、S.parisiensis、S.parvus、S.pecsensis、扇形栅藻(S.pectinatus)、裂孔栅藻(S.perforates)、S.planctonicus、S.plarydiscus、扁盘栅藻(S.platydiscus)、S.pleiomorphus、S.polessicus、多齿牙栅藻(S.polydenticulatus)、S.polyglobulus、S.polyspinosus、S.praetervisus、S.prismaticus、凸头栅藻(S.producto-capitatus)、隆顶栅藻(S.protuberans)、假型被甲栅藻(S.pseudoarmatus)、假型布那迪栅藻(S.pseudobernardii)、假型齿牙栅藻(S.pseudodenticulatus)、假型颗粒栅藻(S.pseudogranulatus)、S.pseudohystrix、S.pyrus、S.quadrialatus、四尾栅藻(S.quadricauda)、S.quadricaudata、S.quadricaudus、S.quadrispina、S.raciborskii、S.ralfsii、S.reginae、规整栅藻(S.regularis)、S.reniformis、S.rostrato-spinosus、S.rotundus、S.rubescens、S.scenedesmoides、S.schnepfii、S.schroeteri、S.securiformis、S.semicristatus、S.semipulcher、S.sempervirens、S.senilis、S.serrato-perforatus、锯齿栅藻(S.serratus)、S.serrulatus、S.setiferus、S.sihensis、S.smithii、S.soli、S.sooi、S.spicatus、S.spinoso-aculeolatus、多棘栅藻(S.spinosus)、S.spinulatus、S.striatus.、S.subspicatus、S.tenuispina、S.terrestris、S.tetradesmiformis、S.transilvanicus、S.tricostatus、热带栅藻(S.tropicus)、S.tschudyi、S.vacuolatus、S.variabilis、S.velitaris、S.verrucosus、S.vesiculosus、S.westii、S.weberi、S.wisconsinensis、武汉栅藻(S.wuhanensis)、S.wuhuensis。有利地，根据本发明，栅列藻属的藻类可以是选自斜生栅藻或丰富栅藻的藻类。
当微藻是硅藻时，它们可以选自下列属：菱形藻属(Nitzschia)、舟形藻属(Navicula)、布纹藻属(Gyrosigma)、褐指藻属(Phaeodactylum)、海链藻属(Thalassiosira)等。
当微藻属于菱形藻属时，它们选自以下种：N.abbreviata、N.abonuensis、N.abridia、N.accedens、N.accommodata、N.aciculariformis、N.acicularioides、N.acicularis(包括所有这些变种)、N.acidoclinata、N.actinastroides、N.actydrophila、N.acula、N.acuminata(包括所有这些变种)、N.acuta、N.adamata、N.adamatoides、N.adapta、N.adducta、N.adductoides、N.admissa、N.admissoides、N.aequalis、N.aequatorialis、N.aequora、N.aequorea、N.aerophila、N.aerophiloides、N.aestuari、N.affinis、N.africana、N.agnewii、趋光菱形藻(N.agnita)、N.alba、N.albicostalis、亚历山大菱形藻(N.alexandrina)、N.alicae、N.allanssonii、N.alpina、N.alpinobacillum、N.amabilis、N.ambigua、N.americana、N.amisaensis、N.amphibia、N.amphibia(包括所有这些变种)、N.amphibioides、N.amphicephala、N.amphilepta、N.amphioxoides、N.amphioxys(包括所有这些种类)、N.amphiplectans、N.amphiprora、N.amplectens、N.amundonii、N.anassae、N.andicola、N.angularis(包括所有这些变种)、N.angulata、N.angustata(包括所有这些变种)、N.angustatula、N.angustiforaminata、N.aniae、N.antarctica、N.antillarum、N.apiceconica、N.apiculata、N.archibaldii、N.arcuata、N.arcula、N.arcus、N.ardua、N.aremonica、N.arenosa、N.areolata、N.armoricana、N.asperula、N.astridiae、N.atomus、N.attenuata、N.aurantiaca、金色菱形藻(N.aurariae)、N.aurica、N.auricula、N.australis、N.austriaca、N.bacata(包括所有这些变种)、N.bacillariaeformis、N.bacilliformis、N.bacillum、N.balatonis、N.balcanica、N.baltica、N.barbieri(包括所有这些变种)、N.barkleyi、N.barronii、N.barrowiana、N.bartholomei、N.bathurstensis、N.bavarica、N.behrei、N.bergii、N.beyeri、N.biacrula、N.bicapitata(包括所有这些变种)、N.bicuneata、N.bifurcata、N.bilobata(包括所有这些变种)、N.birostrata、N.bisculpta、N.bita、N.bizertensis、N.blankaartensis、N.bombiformis、N.borealis、N.bosumtwiensis、N.braarudii、N.brebissonii(包括所有这些变种)、N.bremensis(包括所有这些变种)、N.brevior、N.brevirostris、N.brevissima(包括所有这些变种)、N.brevistriata、N.brightwellii、N.brittonii、N.brunoi、N.bryophila、N.buceros、N.bukensis、N.bulnheimiana、N.buschbeckii、N.calcicola、N.caledonensis、N.calida(包括所有这些变种)、N.californica、N.campechiana、N.capensis、N.capitata、N.capitellata(包括所有这些变种)、N.capuluspalae、N.carnicobarica、N.carnico-barica、N.challengeri、N.chalonii、N.chandolensis、N.chardezii、N.chasei、N.chauhanii、N.chungara、N.chutteri、N.circumsuta、N.clarissima、N.clausii、N.clementei、N.clementia、N.clevei、新月菱形藻(N.closterium)(包括所有这些变种)、N.coarctata、N.cocconeiformis、普通菱形藻(N.communis)(包括所有这些变种)、N.commutata、N.commutatoides、N.compacta、N.compressa(包括所有这些变种)、N.concordia、N.confinis、N.conformata、N.confusa、N.congolensis、N.constricta(包括所有这些变种)、N.consummata、N.corpulenta、N.costei、N.coutei、N.creticola、N.cucumis、N.cursoria、N.curta、N.curvata、N.curvilineata、N.curvipunctata、N.curvirostris(包括所有这些变种)、N.curvula(包括所有这些变种)、N.cuspidata、N.cylindriformis、N.cylindrus、N.dakariensis、N.davidsonii、N.dealpina、N.debilis、N.decipiens、N.delauneyi、N.delicatissima、N.delicatula、N.delognei、N.denticula(包括所有这些变种)、N.denticuloides、N.desertorum、N.dianae、N.diaphana、N.diducta、N.didyma、N.dietrichii、N.dilatata、N.diluviana、N.dippelii、N.directa、N.diserta、N.disputata、细端菱形藻(N.dissipata)(包括所有这些变种)、N.dissipatoides、N.distans(包括所有这些变种)、N.distantoides、N.divaricata、N.divergens、N.diversa、N.diversecostata、N.doljensis、N.draveillensis、N.droebakensis、N.dubia(包括所有这些变种)、N.dubiformis、N.dubioides、N.ebroicensis、N.eglei、N.elegans、N.elegantula、N.elegens、N.elliptica、N.elongata、N.entomon、N.epiphytica、N.epiphyticoides、N.epithemiformis、N.epithemioides、N.epithemoides(包括所有这些变种)、N.epsilon、N.erlandssonii、N.erosa、N.etoshensis、N.examinanda、N.eximia、N.famelica、N.fasciculata、N.febigeri、N.ferox、N.ferrazae、N.fibula-fissa、N.filiformis(包括所有这些变种)、N.flexa、N.flexoides、N.fluminensis、N.fluorescens、N.fluvialis、N.fogedii、N.fonticola(包括所有这些变种)、N.fonticoloides、N.fonticula、N.fontifuga、N.forfica、N.formosa、N.fossalis、N.fossilis、N.fragilariiformis、N.franconica、N.fraudulenta、N.frauenfeldii、N.frequens、N.frickei、N.frigida(包括所有这些变种)、碎片菱形藻(N.frustuloides)、N.frustulum(包括所有这些变种)、N.fruticosa、N.fundi、N.fusiformis、N.gaarderi、N.gaertnerae、N.gandersheimiensis、N.garrensis、N.gazellae、N.geitleri、N.geitlerii、N.gelida(包括所有这些变种)、N.geniculata、N.gessneri、N.gieskesii、N.gigantea、N.gisela、N.glabra、N.glacialis(包括所有这些变种)、N.glandiformis、N.goetzeana(包括所有这些变种、N.gotlandica、N.graciliformis、N.gracilis(包括所有这些变种)、N.gracillima、N.graciloides、N.gradifera、N.graeffii、N.grana、N.grandis、N.granii(包括所有这些变种)、N.granulata(包括所有这些变种)、N.granulosa、N.groenlandica、N.grossestriata、N.grovei、N.gruendleri、N.grunowii、N.guadalupensis、N.guineensis、N.guttula、N.gyrosigma、N.habirshawii、N.habishawii、N.hadriatica、N.halteriformis、N.hamburgiensis、汉氏菱形藻N.hantzschiana(包括所有这些变种)、N.harderi、N.harrissonii、N.hassiaca、N.heidenii、N.heimii、N.hemistriata、N.heteropolica、N.heuflerania、N.heufleriana(包括所有这些变种)、N.hiemalis、N.hiengheneana、N.hierosolymitana、N.hoehnkii、N.holastica、N.hollerupensis、N.holsatica、N.homburgiensis、N.hudsonii、N.hummii、N.hungarica(包括所有这些变种)、N.hustedti、N.hustedtiana、N.hyalina、N.hybrida(包括所有这些变种)、N.hybridaeformis、N.ignorata(包括所有这些变种)、N.iltisii、N.impressa、N.improvisa、N.incerta、N.incognita、平庸菱形藻N.inconspicua、N.incrustans、N.incurva(包括所有这些变种)、N.indica、N.indistincta、N.inducta、N.inflatula、N.ingenua、N.inimasta、N.innominata、N.insecta、N.insignis(包括所有这些变种)、中型菱形藻(N.intermedia)(包括所有这些变种)、N.intermissa、N.interrupta、N.interruptestriata、N.invicta(包括所有这些变种)、N.invisa、N.invisitata、N.iranica、N.irregularis、N.irremissa、N.irrepta、N.irresoluta、N.irritans、N.italica、N.janischii、N.jelineckii、N.johnmartinii、N.juba、N.jucunda、N.jugata(包括所有这些变种)、N.jugiformis、N.kahlii、N.kanakarum、N.kanayae、N.kavirondoensis、N.kerguelensis、N.kimberliensis、N.kittlii、N.kittonii、N.knysnensis、N.kolaczeckii、N.kotschyi、N.kowiensis、N.krachiensis、N.krenicola、N.kuetzingiana(包括所有这些变种)、N.kuetzingii、N.kuetzingioides、N.kurzeana、N.kurzii、N.kützingiana(包括所有这些变种)、N.labella、N.labuensis、N.lacrima、N.lacunarum、N.lacunicola、N.lacus-karluki、N.lacustris、N.lacuum、N.laevis、N.laevissima、N.lagunae、N.lagunensis、N.lamprocampa(包括所有这些变种)、N.lanceola(包括所有这些变种)、N.lanceolata(包括所有这些变种)、N.lancettula、N.lancettuloides、N.lange-bertalotii、N.latens、N.latestriata、N.latiuscula、N.lauenbergiana、N.lauenburgiana、N.lecointei、N.leehyi、N.legleri、N.lehyi、N.leistikowii、N.lesbia、N.lesinensis、N.lesothensis、N.leucosigma、N.levidensis(包括所有这些变种)、N.liebetruthii(包括所有这些变种)、N.ligowskii、N.limicola、N.limulus、N.linearis(包括所有这些变种)、N.lineata、N.lineola、N.linkei、N.lionella、N.littoralis(包括所有这些变种)、N.littorea、N.longa、N.longicollum、N.longirostris、N.longissima(包括所有这些变种)、N.lorenziana(包括所有这些变种)、N.lucisensibilis、N.lunaris、N.lunata、N.lurida、N.luzonensis、N.macaronesica、N.macedonica、N.macera、N.machardyae、N.macilenta(包括所有这些变种)、N.magnacarina、N.mahihaensis、N.mahoodii、N.maillardii、N.major、N.majuscula(包括所有这些变种)、N.makarovae、N.manca、N.mancoides、N.manguini、N.marginata、N.marginulata(包括所有这些变种)、N.marina、N.martiana、N.maxima、N.media、N.medioconstricta、N.mediocris、N.mediterranea、N.metzeltinii、小头菱形藻(N.microcephala)(包括所有这些变种)、N.migrans、N.minuta、N.minutissima、N.minutula、N.miramarensis、N.miserabilis、N.mitchelliana、N.modesta、N.moissacensis(包括所有这些变种)、N.mollis、N.monachorum、N.monoensis、N.montanestris、N.morosa、N.multistriata、N.nana、N.natalensis、N.natans、N.nathorsti、N.navicularis、N.navis-varingica、N.navrongensis、N.neglecta、N.nelsonii、N.neocaledonica、N.neoconstricta、N.neofrigida、N.neogena、N.neotropica、N.nereidis、N.nicobarica、N.nienhuisii、N.normannii、N.notabilis、N.nova、N.novae-guineaensis、N.novae-guineensis、N.novaehollandiae、N.nova-zealandia、N.nyassensis、N.oberheimiana、N.obesa、N.obliquecostata、N.obscura、N.obscurepunctata、N.obsidialis、N.obsoleta、N.obsoletiformis、N.obtusa(包括所有这些变种)、N.obtusangula、N.oceanica、N.ocellata、N.oliffi、N.omega、N.osmophila、N.ossiformis、N.ostenfeldii、N.ovalis、N.paaschei、N.pacifica、N.palacea、N.palea(包括所有这些变种)、N.paleacea、N.paleaeformis、N.paleoides、N.palustris、N.pamirensis、N.panduriformis(包括所有这些变种)、N.pantocsekii、N.paradoxa(包括所有这些变种)、N.parallela、N.pararostrata、N.partita、N.parvula(包括所有这些变种)、N.parvuloides、N.paxillifer、N.peisonis、N.pelagica、N.pellucida、N.pennata、N.peragallii、N.perindistincta、N.perminuta、N.perpusilla(包括所有这些变种)、沟坑菱形藻(N.perspicua)、N.persuadens、N.pertica、N.perversa、N.petitiana、N.philippinarum、N.pilum、N.pinguescens、N.piscinarum、N.plana(包括所有这些变种)、N.planctonica、N.plicatula、N.plioveterana、N.polaris、N.polymorpha、N.ponciensis、N.praecurta、N.praefossilis、N.praereinholdii、N.princeps、N.procera、N.prolongata(包括所有这些变种)、N.prolongatoides、N.promare、N.propinqua、N.pseudepiphytica、N.pseudoamphioxoides、N.pseudoamphioxys、N.pseudoamphyoxys、N.pseudoatomus、N.pseudobacata、N.pseudocapitata、N.pseudocarinata、N.pseudocommunis、N.pseudocylindrica、N.pseudodelicatissima、N.pseudofonticola、N.pseudohungarica、N.pseudohybrida、N.pseudonana、N.pseudoseriata、N.pseudosigma、N.pseudosinuata、N.pseudostagnorum、绒毛菱形藻(N.pubens)、N.pulcherrima、N.pumila、N.punctata(包括所有这些变种)、N.pungens(包括所有这些变种)、N.pungiformis、N.pura、N.puriformis、微小菱形藻(N.pusilla)(包括所有这些变种)、N.putrida、四边形菱形藻(N.quadrangula)、N.quickiana、N.rabenhorstii、N.radicula(包括所有这些变种)、N.rautenbachiae、N.recta(包括所有这些变种)、N.rectiformis、N.rectilonga、N.rectirobusta、N.rectissima、N.regula、N.reimeri、N.reimerii、N.reimersenii、N.retusa、N.reversa、N.rhombica、N.rhombiformis、N.rhopalodioides、N.richterae、N.rigida(包括所有这些变种)、N.ritscheri、N.robusta、N.rochensis、N.rolandii、N.romana、N.romanoides、N.romanowiana、N.rorida、N.rosenstockii、N.rostellata、N.rostrata、N.ruda、N.rugosa、N.rupestris、N.rusingae、N.ruttneri、N.salinarum、N.salinicola、N.salpaespinosae、N.salvadoriana、N.sansimoni、N.sarcophagum、N.scabra、N.scalaris、N.scaligera、N.scalpelliformis、N.schoenfeldii、N.schwabei、N.schweikertii、N.scutellum、N.sellingii、N.semicostata、N.semirobusta、N.separanda、N.seriata(包括所有这些变种)、N.serpenticola、N.serpentiraphe、N.serrata、N.sibula(包括所有这些变种)、N.sigma(包括所有这些变种)、N.sigmaformis、N.sigmatella、N.sigmoidea(包括所有这些变种)、N.silica、N.silicula(包括所有这些变种)、N.siliqua、N.similis、N.simplex、N.simpliciformis、N.sinensis、N.sinuata(包括所有这些变种)、N.smithii、N.sociabilis、N.socialis(包括所有这些变种)、N.solgensis、N.solida、N.solita、N.soratensis、N.sp.、N.spathulata(包括所有这些变种)、N.speciosa、N.spectabilis(包括所有这些变种)、N.sphaerophora、N.spiculoides、N.spiculum、N.spinarum、N.spinifera、N.stagnorum、N.steenbergensis、N.stellata、N.steynii、N.stimulus、N.stoliczkiana、N.stompsii(包括所有这些变种)、N.strelnikovae、N.stricta、N.strigillata、N.striolata、N.subaccommodata、N.subacicularis、N.subacuta、N.subamphioxioides、N.subapiculata、N.subbacata、N.subcapitata、N.subcapitellata、N.subcohaerens(包括所有这些变种)、N.subcommunis、N.subconstricta、N.subcurvata、N.subdenticula、N.subfalcata、N.subfraudulenta、N.subfrequens、N.subfrustulum、N.subgraciloides、N.subinflata、N.subinvicta、N.sublaevis、N.sublanceolata、N.sublica、N.sublinearis、N.sublongirostris、N.submarina、N.submediocris、N.subodiosa、N.subpacifica、N.subpunctata、N.subromana、N.subrostrata、N.subrostratoides、N.subrostroides、N.subsalsa、N.subtilioides、N.subtilis(包括所有这些变种)、N.subtubicola、N.subvitrea、N.suchlandtii、N.sulcata、N.sundaensis、N.supralitorea、N.tabellaria、N.taenia、N.taeniiformis、N.tantata、N.tarda、N.taylorii、N.temperei、N.tenella、N.tenerifa、N.tenuiarcuata、N.tenuirostris、N.tenuis(包括所有这些变种)、N.tenuissima、N.tergestina、N.terrestris、N.terricola、N.thermalis(包括所有这些变种)、N.thermaloides、N.tibetana、N.tirstrupensis、N.tonoensis、N.towutensis、N.translucida、N.tropica、N.tryblionella(包括所有这些变种)、N.tsarenkoi、N.tubicola、N.tumida、N.turgidula、N.turgiduloides、N.umaoiensis、N.umbilicata、N.umbonata、N.vacillata、N.vacua、N.valdecostata、N.valdestriata、N.valens、N.valga、N.valida(包括所有这些变种)、N.vanheurckii、N.vanoyei、N.vasta、N.ventricosa、N.vermicularioides、N.vermicularis(包括所有这些变种)、N.vermicularoides、N.vexans、N.victoriae、N.vidovichii、N.vildaryana、N.villarealii、N.virgata、N.visurgis、N.vitrea(包括所有这些变种)、N.vivax(包括所有这些变种)、N.vixnegligenda、N.vonhauseniae、N.vulga、N.weaveri、N.weissflogii、N.westii、N.williamsiii、N.wipplingeri、N.witkowskii、N.wodensis、N.woltereckii、N.woltereckoides、N.wuellerstorfii、N.wunsamiae、N.yunchengensis、N.zebuana、N.zululandica。
有利地，根据本发明，菱形藻属的藻类可以是选自种N.sp的藻类。
当微藻属于红球藻属时，它们可以选自种：H.allmanii、H.buetschlii、H.capensis、H.carocellus、H.droebakensis、H.grevilei、H.insignis、H.lacustris、H.murorum、H.pluvialis、H.salinus、H.sanguineis、H.thermalis、H.zimbabwiensis。
当微藻属于破囊壶菌属(Aurantiochytrium)，它们选自种：A.limacinum、A.mangrovei。
当微藻属于裂殖壶菌属(Schizochytrium)，它们选自种：S.aggregatum、S.limacinum、S.mangrovei、S.minutum、S.octosporum。
当微藻属于隐甲藻属(Crypthecodinium)，它们选自种：寇氏隐甲藻(C.cohnii)、C.setense。
当微藻属于四爿藻属(Tetraselmis)，它们选自种：T.alacris、T.apiculata、T.arnoldii、T.ascus、T.astigmatica、T.bichlora、T.bilobata、T.bolosiana、T.chui、T.contracta、T.convolutae、T.cordiformis、T.desikacharyi、T.elliptica、T.fontiana、T.gracilis、T.hazenii、T.helgolandica、T.impellucida、T.incisa、T.inconspicua、T.indica、T.levis、T.maculata、T.marina、T.mediterranea、T.micropapillata、T.rubens、T.striata、T.subcordiformis、T.suecica、T.tetrabrachia、T.tetrathele、T.verrucosa、T.viridis、T.wettsteinii。
根据本发明的特定实施方案，所述原生生物选自小球藻、Galdieria、裸藻、蓝藻和硅藻。
微生物培养方法也是也是技术人员众所周知的，无论是以营养缺陷型、异养型或兼养型方式(参考文献)。用于适应上述不同微生物的这些不同培养模式的培养基对于本领域技术人员也是众所周知的(参考文献)。
本发明特别适用于所谓的长期培养(数天至数月)，其经受微生物粘附于培养它们的反应器壁的现象。
用于这些不同培养方法的反应器也是本领域技术人员众所周知的，诸如在鼓泡塔、气升(课程：微生物的工业应用(Industrial Applications of Microbes)，ParvinderKaur博士，第11-12页)，发酵罐(TrytonTM)、管状光生物反应器(Schott,Synoxis Algae)、管道和生物反应器。
生物反应器的壁由本领域技术人员已知的材料制成，诸如柔性塑料、不锈钢、混凝土或砖。
本发明特别适用于在包含至少一个透明壁以允许光(无论其是自然光还是人造光)穿过的反应器中进行的自养或兼养方式的培养。
本领域技术人员众所周知的透光壁可以由玻璃、硼硅酸盐、塑料(诸如聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)、聚氯乙烯(PVC)、聚乙烯(PE)，特别是低密度聚乙烯(LDPE)、聚碳酸酯、聚苯乙烯(PS)。透明壁有利地由PMMA、PVC、PE或聚碳酸酯制成。
本发明特别适用于自养模式的鼓泡塔型透明壁反应器，用于培养微藻，诸如碳汇。这些碳汇是鼓泡塔或“气升”，用于以营养缺陷型方式生长微藻，其中使环境空气通过，并且二氧化碳作为碳源被微生物吸收。随着它们繁殖，它们通过吸收二氧化碳来清除空气的污染。此类系统在WO 2014/063229或WO 2017/077061中特别描述。
微藻需要光以便分裂。环境中光的可用性对于开发微藻至关重要。然而，对反应器壁的粘附降低了可用光和生长能力，并因此降低了微藻的碳吸收能力。
碳汇对应于一个含有微藻的可变体积的柱，该微藻每年将能够捕获1至10,000吨的CO2。
在某些情况下，光不是从生物反应器外部通过透明壁得来，而是通过将密封光源浸没在容器中而被带入生物反应器内部。例如，可以使用发光的对折挡板系统(WO2014/174182)。然后，本发明使得可以减少细胞对光源的粘附。
通过限制粘附，增加了生物反应器中的光可用性。结果，微藻维持其生长能力并且降低了柱清洁成本。
这些碳汇中使用的微藻通常选自叶绿素和非叶绿素微藻，也选自通常具有阴性外膜(negative outer membranes)的其他微生物。这些通常具有阴性外膜并且能够在碳汇中使用的微生物对于本领域技术人员是众所周知的，特别是小球藻属、Galdieria、裸藻属、蓝藻和硅藻的那些微生物。
所使用的培养基包括“BG-11生长培养基”，由(UTEX Culture Collection ofAlgae,205W.24th St,Biological Labs 218,The University of Texas at Austin(F0402),Austin,TX 78712USA)描述并出售。对于自养培养，除了来自通过培养基的空气中的二氧化碳之外，培养基不包括任何碳源。然而，为了开始或重新开始微藻生长，可以暂时添加除二氧化碳之外的碳源，诸如葡萄糖。
培养基中的环境空气流速对应于0.3到0.5vvm的流速。含有CO2的外部空气穿过鼓泡器而被注入到柱中。注入的空气也可以来自含有1％至20％CO2的植物烟雾(例如来自焚烧厂)。
当达到最大量的生物质时，碳汇被排干。最后，碳汇再次充满要接种微藻的培养基。
絮凝剂是本领域技术人员众所周知的。它们通常在微生物培养结束时使用，在培养完成时添加到发酵中，以促进生物质与培养基的分离(Hanotu J.等,2012)。培养完成后的这些添加物通常不会不利于回收的微藻的使用，例如用于水产养殖饲料(US 2013/205850)。
这些絮凝剂是有机或无机的，诸如脱乙酰壳多糖、羧甲基纤维素(arboxymethylcellulose)、淀粉或淀粉衍生物(诸如大米淀粉、玉米淀粉、木薯淀粉、黄色糊精、马铃薯淀粉、用于有机絮凝剂的预糊化淀粉或阳离子淀粉)，或用于无机絮凝剂的硫酸铝、氯化钙、氯化锌或氯化铁。
与现有技术的用途不同，根据本发明的絮凝剂的用途是培养期间在培养基中实现的，不是为了促进生物质与培养基的分离，而是为了通过防止培养基与反应器壁粘附来促进在培养基中维持这种生物质。
必须能够使用根据本发明的絮凝剂而不影响培养的微生物的生长能力和生物学活性。确实，生存力测试表明，絮凝剂和氯化铁尤其不会干扰微藻的生长。(图1、2和3)
技术人员将知晓如何通过简单的实验室测试来选择最适合于所培养的微生物及其生长条件的絮凝剂。
优选地，根据本发明的生长培养基中使用的絮凝剂选自氯化锌和氯化铁，更优选氯化铁。这些絮凝剂是可商购的，特别是来自供应商(诸如VWR和Sigma)的名称为氯化铁(III)、氯化铁、高氯化铁。
技术人员将能够通过简单的实验室测试来确定防止微生物与壁粘附所必需的絮凝剂的适当量。
本领域技术人员将知晓如何确定待添加的絮凝剂的量，特别是获得至少10％，有利地至少30％的絮凝功效(沉淀的生物质相对于总生物质的百分比)。实际上，对于相同的浓度，絮凝功效根据絮凝剂而变化。培养基的组成和所用微生物菌株也可对絮凝功效有影响。这些调整是技术人员已知的常规开发工作的一部分。
有利地，培养基中的絮凝剂的量的范围为50至450mg/L，更特别地为150至350mg/L。
向培养基中添加絮凝剂可导致悬浮的细胞聚集体的形成。为了防止或限制这种聚集体的形成，培养应在正常搅拌条件下进行，诸如机械或被动搅拌，诸如在鼓泡塔或气升反应器中。
可以在培养期间的任何时间向培养基中添加絮凝剂，以防止或限制在反应器壁上形成粘附。优选地，在培养过程开始时将絮凝剂添加到培养基中，并保持在培养基中直至培养结束。
本发明还涉及适合于培养微生物的培养基，其特征在于其包含50至450mg/L，更特别地150至350mg/L的上述絮凝剂，特别是氯化铁。
实施例
进行两种微藻培养，一种不含絮凝剂的对照，一种含有絮凝剂FeCl3。
材料和方法
微藻
在该实施例中使用的微藻来自种Chlorella sorokiniana。
培养基
使用了BG-11生长培养基(UTEX)。
培养条件
在柱上接种0.5g/L的微藻。温度保持恒定在30℃。亮度设置为500μEinstein/m2/s。在长达160小时(对照)和189小时(FeCl3)下，pH值稳定在6.3，然后不进行调节，pH值升至8以稳定在该水平直到实验结束。选择不进一步调节pH值是因为高pH值增加微藻粘附至壁上的能力。
生物质回收
用泵回收生物质，获得悬浮液中的生物质以及保留在柱底的生物质。然后将一定体积的水添加到柱中，以疏松残留在壁上的微藻。对每批进行干质量测量。
光的通过
对光通过柱的能力的分析是在排列在柱壁上的24个点处进行的，如图5所示。这些测量值以μEinstein/m2/s表示。
结果
图4显示有和没有絮凝剂情况下生物质产生的差异。对于使用絮凝剂进行的实验，与没有絮凝剂的相同培养相比，可看到在培养基中最多可产生1g/L的额外生物质。这种额外的生物质是由于微藻无法粘附到壁造成的。
在实验结束时，区分生长培养基中的生物质和粘附至壁的生物质。
在不含FeCl3的实验中，培养基中悬浮的总生物质为14.7g，柱底部残留的生物质为5.6g。粘附至在壁的生物质为1.013g，其占总生物质的4.74％。
在用FeCl3进行的实验中，悬浮在培养基中的总生物质为18g，残留在柱底的生物质为1.11g。粘附至壁的生物质为0.043g，其占总生物质的0.22％。
在使用FeCl3的情况下，可以观察到更多量的悬浮生物质，或94％的悬浮的生物质，相较于对照组的69％。
表1柱的3个区域中DM的比例
Figure BDA0002506721320000151
Figure BDA0002506721320000161
下表2给出了光通过柱壁的分析结果。
在如图5中的柱的示意图所示的24个点进行了光测量。在没有微藻的清洁柱、具有微藻的对照柱和具有微藻的含FeCl3的柱上测量光。
表2：柱上的24个点的测量
Figure BDA0002506721320000162
Figure BDA0002506721320000171
在组成柱下部的12个点上，在FeCl3的存在下，光穿透率大2.78倍。
表3：柱下半部分的12个点的测量
Figure BDA0002506721320000172
整个结果表明，由于在培养基中存在絮凝剂，由于防止了微生物在反应器壁上的粘附，从而改善了微生物的培养。
在异养或兼养模式下，在其他培养条件下用其他微生物也获得类似的结果，特别是在长期培养的情况下，尤其是对于小球藻、Galdieria、裸藻、蓝藻、硅藻的培养。
参考文献
-L.Delauney,C.Compere&M.Lehaitre,Biofouling protection for marineenvironmental sensors-Ocean Science,6,503–511,2010
-J.Hanotu,H.C.Hemaka Bandulasena&W.B.Zimmerman,MicroflotationPerformance for Algal Separation,Biotechnology and Bioengineering,2012；109:7,1663-1673
-J.S.Nordin,H.M.Tsuchiya&A.G.Fredrickson,Interfacial PhenomenaGoverning Adhesion of Chlorella to Glass Surfaces,Biotechnology andBioengineering,1967；IX,545-558
-Nicholas B.Wyatt,Lindsey M.Gloe,Patrick V.Brady,John C.Hewson,AnneM.Grillet,Matthew G.Hankins&Phillip I.Pohl,Critical Conditions for FerricChloride-Induced Flocculation of Freshwater Algae-Biotechnol.Bioeng.2012；109:493–501.
-Suchitra Rakesh,Sudhir Saxena,Dolly W.Dhar,Radha Prasanna&AnilK.Saxena,Comparative evaluation of inorganic and organic amendments for theirflocculation efficiency of selected microalgae--Springer Science+BusinessMedia Dordrecht 2013
-Yeong Hwan Seo,Mina Sung,Bohwa Kim&Jong-In Han,Ferric chloridebaseddownstream process for microalgae based biodiesel production-DOI:10.1016/j.biortech.2015.01.004
-WO 2014/063229
-WO2014/174182
-WO 2017/077061
-US 2013/205850

Claims (14)

1.一种在适于微生物生长的培养基中培养该微生物的方法，其特征在于，所述培养基包含适当量的絮凝剂，以防止该微生物与进行培养的反应器的壁粘附。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述絮凝剂选自氯化铁或氯化锌。
3.根据权利要求1或2之一所述的方法，其特征在于，所述培养基包含50至450mg/L的絮凝剂。
4.根据权利要求1至3之一所述的方法，其特征在于，在培养开始时所述絮凝剂被添加到所述培养基中，并保持到培养结束。
5.根据权利要求1至4之一所述的方法，其特征在于，所述反应器是碳汇。
6.根据权利要求1至5之一所述的方法，其特征在于，所述培养以自养模式或以兼养模式进行，并且所述反应器包括至少一个对光透明的壁。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述对光透明的壁是聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)、聚氯乙烯(PVC)、聚乙烯(PE)或聚碳酸酯。
8.根据权利要求1至7之一所述的方法，其特征在于，所述微生物选自原生生物。
9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述微生物是选自叶绿素微藻的微藻。
10.在微生物的培养期间在培养基中的絮凝剂防止所述微生物与进行培养的反应器的壁粘附的用途。
11.根据权利要求10所述的用途，其特征在于，所述絮凝剂选自氯化铁或氯化锌。
12.根据权利要求10或11之一所述的用途，其特征在于，所述微生物选自原生生物。
13.根据权利要求12所述的用途，其特征在于所述微生物是选自叶绿素微藻的微藻。
14.一种适用于培养微生物的培养基，其特征在于，其包含50至450mg/L的选自氯化铁或氯化锌的絮凝剂。
CN201880076104.7A 2017-11-23 2018-11-23 抗粘附培养基 Pending CN111386333A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR1761095 2017-11-23
FR1761095A FR3073860B1 (fr) 2017-11-23 2017-11-23 Milieu de culture anti-adhesion
PCT/EP2018/082318 WO2019101899A1 (fr) 2017-11-23 2018-11-23 Milieu de culture anti-adhésion

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN111386333A true CN111386333A (zh) 2020-07-07

Family

ID=61003214

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201880076104.7A Pending CN111386333A (zh) 2017-11-23 2018-11-23 抗粘附培养基

Country Status (11)

Country Link
US (1) US20200347348A1 (zh)
EP (1) EP3714030A1 (zh)
CN (1) CN111386333A (zh)
AU (1) AU2018371980B2 (zh)
CA (1) CA3083147A1 (zh)
FR (1) FR3073860B1 (zh)
IL (1) IL274501A (zh)
MA (1) MA50791A (zh)
MX (1) MX2020005233A (zh)
SG (1) SG11202004574UA (zh)
WO (1) WO2019101899A1 (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR3130841A1 (fr) 2021-12-21 2023-06-23 Fermentalg Methode d’injection du co2 et elimination de l’o2 dans un reacteur a plaques

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20020079270A1 (en) * 2000-12-27 2002-06-27 Genady Borodyanski Microalgae separator apparatus and method
CN101979498A (zh) * 2010-12-01 2011-02-23 华东理工大学 一种微藻高产率异养培养的方法
US20130205850A1 (en) * 2012-02-13 2013-08-15 Heliae Development Llc Microalgae as a mineral vehicle in aquafeeds
CN205241674U (zh) * 2015-12-15 2016-05-18 新奥科技发展有限公司 一种微藻收集装置
RU2603733C1 (ru) * 2015-11-05 2016-11-27 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" Способ флокуляции биомассы микроводорослей

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2351566B1 (es) * 2009-03-09 2012-06-14 Repsol Ypf, S.A Método de cultivo de microorganismos y fotobiorreactor empleado en dicho método.
KR101148194B1 (ko) * 2010-01-20 2012-05-23 성균관대학교산학협력단 투명 필름으로 이루어진 광합성 생물 반응기
WO2014063229A1 (en) 2012-10-24 2014-05-01 Pond Biofuels Inc. Process of operating a plurality of photobioreactors
FR3004724B1 (fr) 2013-04-22 2015-05-22 Fermentalg Reacteur a eclairage integre
FR3043331B1 (fr) 2015-11-06 2019-11-22 Suez Environnement Puits de carbone urbain

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20020079270A1 (en) * 2000-12-27 2002-06-27 Genady Borodyanski Microalgae separator apparatus and method
CN101979498A (zh) * 2010-12-01 2011-02-23 华东理工大学 一种微藻高产率异养培养的方法
US20130205850A1 (en) * 2012-02-13 2013-08-15 Heliae Development Llc Microalgae as a mineral vehicle in aquafeeds
RU2603733C1 (ru) * 2015-11-05 2016-11-27 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" Способ флокуляции биомассы микроводорослей
CN205241674U (zh) * 2015-12-15 2016-05-18 新奥科技发展有限公司 一种微藻收集装置

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
JOHN S. NORDIN: "Interfacial Phenomena Governing Adhesion of Chlorella to Glass Surfaces", 《BIOTECHNOLOGY AND BIOENGINEERING》 *
魏德洲: "《固体物料分选学》", 31 August 2015, 冶金工业出版社 *

Also Published As

Publication number Publication date
CA3083147A1 (fr) 2019-05-31
SG11202004574UA (en) 2020-06-29
AU2018371980A1 (en) 2020-05-21
AU2018371980B2 (en) 2024-08-29
WO2019101899A1 (fr) 2019-05-31
MA50791A (fr) 2020-09-30
FR3073860B1 (fr) 2024-07-12
US20200347348A1 (en) 2020-11-05
IL274501A (en) 2020-06-30
MX2020005233A (es) 2020-08-24
EP3714030A1 (fr) 2020-09-30
FR3073860A1 (fr) 2019-05-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Narala et al. Comparison of microalgae cultivation in photobioreactor, open raceway pond, and a two-stage hybrid system
Wang et al. Removal of nutrients from undiluted anaerobically treated piggery wastewater by improved microalgae
Chisti Large-scale production of algal biomass: raceway ponds
Shen et al. Microalgae mass production methods
Hu et al. Development of microalgal biofilm for wastewater remediation: from mechanism to practical application
Osundeko et al. Implications of sludge liquor addition for wastewater-based open pond cultivation of microalgae for biofuel generation and pollutant remediation
CN109234167B (zh) 一种小球藻及其在沼液净化中的应用
Al-Shatri et al. Growth of Scenedesmus dimorphus in different algal media and pH profile due to secreted metabolites
CN102382769A (zh) 通过三氯化铁絮凝作用采收微藻及培养水体的再循环利用
Arriada et al. Nannochloropsis oculata growth in produced water: an alternative for massive microalgae biomass production
CN106754390A (zh) 一株高产蛋白的小球藻及其培养方法和应用
WO2012135150A2 (en) Production of cyanobacterial or algal biomass using chitin as a nitrogen source
Minggat et al. Nutrient absorption and biomass production by the marine diatom Chaetoceros muelleri: effects of temperature, salinity, photoperiod, and light intensity
CN110255719A (zh) 一种假交替单胞菌防控米氏凯伦藻引发赤潮的方法
Fatemeh et al. Effects of environmental factors on the growth, optical density and biomass of the green algae Chlorella vulgaris in outdoor conditions
WO2014083534A1 (en) Mixotrophic cultivation of microalgae for the production of biofuel
Min et al. Pilot-scale cultivation of water-net in secondary effluent using an open pond raceway for nutrient removal and bioethanol production
Wahi et al. Impact of protozoan Vahlkampfia sp. on the growth of algae Chlorella vulgaris glamtr
WO2015041349A1 (ja) 底面の微細藻類を種藻として用いる、微細藻類の液面浮遊培養方法、藻類バイオマスの製造方法、及び微細藻類
Wang et al. Advanced treatment of secondary effluent from wastewater treatment plant by a newly isolated microalga Desmodesmus sp. SNN1
CN111386333A (zh) 抗粘附培养基
Liu et al. Screening of antibiotics to obtain axenic cell cultures of a marine microalga Chrysotila roscoffensis
Hariz et al. Growth and biomass production of native microalgae Chlorella sp., chlamydomonas sp. and Scenedesmus sp. cultivated in Palm Oil Mill Effluent (POME) at different Cultivation conditions
Zhao et al. Microalgae cultivation
Kim et al. Polypropylene bundle attached multilayered stigeoclonium biofilms cultivated in untreated sewage generate high biomass and lipid productivity

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination