CN111359024A - 腹腔开放复合生物保护材料 - Google Patents

Abstract

本发明公开了腹腔开放复合生物保护材料。该材料生物羊膜和异体敷料皮。本发明的产品做为腹腔开放的早期保护材料，在降低免疫原性同时还保留了羊膜的其他组成结构，可以减少保护材料与暴露肠管的粘连，为最终的再次手术确定性关腹提供方便；同时，异体敷料皮作为暂时性创面覆盖物可有效阻隔外界接触，保持创面的液性环境，为受体细胞增殖和血管化创造适宜的酸碱度、湿度和温度；在抗渗出、抗感染方面发挥优异、独特的效果；该材料为复合材料，通过该材料的制备，可实现生物羊膜及异体敷料皮的国产化，具有较高的社会经济效益。

Description

腹腔开放复合生物保护材料

技术领域

本发明属于医用材料制备技术领域，具体涉及一种腹腔开放复合生物保护材料。

背景技术

腹腔感染、腹部创伤可伴随凝血功能、全身多脏器(肝脏、中枢神经系统)功能障碍，从而必须行腹腔开放疗法。腹腔开放疗法可降低腹腔内压力、防止腹腔间隙综合征、防治多器官功能障碍，还便于外科医师在床旁及时清除感染坏死组织、通畅引流，随时发现出血、肠瘘等并发症。腹腔开放疗法的并发症随之而来且难以回避。腹腔开放的最佳结局是早期全层筋膜缝合关腹，即在腹腔开放的短期实现治疗目的后，成功全层缝合切口各层，关闭腹腔。但是，该类患者多有腹腔感染、营养不良、空气瘘及腹壁缺损等状况，很难实现早期全层关腹。由于在腹腔开放后，人们一直致力于尽可能短期全层关腹的研究，研究思路主要着眼于临时关闭腹腔的外科技巧与机械，忽略了研究腹腔开放裸露肠管创面的病理生理机制与特点，以及裸露肠管创面保护的理论、技术和制剂。申请人曾尝试异种敷料皮行早期保护，但对后期并发症无明显改善。因此，对于裸露肠管的保护材料及出现并发症(如肠瘘)的治疗设备十分重要。

发明内容

本发明的目的在于提供一种腹腔开放复合生物保护材料。

一种腹腔开放复合生物保护材料，包括生物羊膜和异体敷料皮。

所述保护材料使用时，生物羊膜敷在靠近腹壁缺损最内层的位置，异体敷料皮覆盖在其上面并缝合。

所述生物羊膜为1-6层结构，异体敷料皮为单层结构。

本发明的有益效果：本发明的产品做为腹腔开放的早期保护材料，在降低免疫原性同时还保留了羊膜的其他组成结构，可以减少保护材料与暴露肠管的粘连，为最终的再次手术确定性关腹提供方便；同时，异体敷料皮作为暂时性创面覆盖物可有效阻隔外界接触，保持创面的液性环境，为受体细胞增殖和血管化创造适宜的酸碱度、湿度和温度；在抗渗出、抗感染方面发挥优异、独特的效果；工艺处理降低产品抗原性，延迟了免疫排斥反应发生时间，为受体细胞、组织再生提供充足时间，促进创面快速愈合；最后，该材料为复合材料，通过该材料的制备，可实现生物羊膜及异体敷料皮的国产化，具有较高的社会经济效益。

具体实施方式

为了便于理解本发明，下面将对本发明进行更全面的描述。但是，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容的理解更加透彻全面。

实施例1生物羊膜的制备

(1)分娩后获取的胎盘在1小时内无菌操作取下羊膜组织；

(2)用0.6％戊二醛溶液将羊膜上的血液等杂质清洗干净，放入装有0.1％聚山梨酯80溶液的无菌PP瓶中；放入-40℃环境冷冻至少18小时后使用；

(3)生产使用放于前4℃环境中20小时解冻；

(4)在无菌环境中取出羊膜，放入400ml A液中揉洗4遍；

(5)将羊膜平铺于无菌PP板上，清除基底层粘液；

(6)用pH7.0的磷酸盐缓冲液浸泡60分钟；

(7)用0.6％戊二醛溶液揉洗30分钟；

(8)将羊膜平铺于2层无菌尼龙网之间，裁剪适宜的尺寸；

(9)将产品随尼龙网装入包装袋中，加入20ml0.9％氯化钠溶液，抽取内部气体后双层密封包装；-80℃冷冻保存。

实施例2异体敷料皮的制备

(1)将验收合格并于-80℃冷冻保存的异体皮肤原料取出，在万级洁净间内用37℃A液解冻处理，随后纯化水清洗2次，每次25分钟；

(2)0.1％聚山梨酯80溶液处理3次，每次25分钟，再纯化水清洗2次，每次25分钟；

(3)pH7.0的磷酸盐缓冲液处理2次，每次25分钟，再纯化水清洗2次，每次25分钟；

(4)用pH为7.3的0.9％氯化钠溶液清洗2次，每次25分钟；

(5)加适量0.9％氯化钠溶液后双层密封包装；30KGy辐照灭菌。

实施例3腹腔开放复合生物保护材料的使用

保护材料使用时，生物羊膜敷在靠近腹壁缺损最内层的位置，异体敷料皮覆盖在其上面并缝合。根据损伤程度的不同，生物羊膜设置为1-6层，异体敷料皮设置为单层。

实施例4材料张力测试实验

根据GB/T3923.1-1997规定的方法，将实验材料分为3组：组1：生物羊膜(双层)；组2：异体敷料皮(双层)；组3：生物羊膜和异体敷料皮的复合材料，进行张力测试，测试结果如表1所示：

表1

注：*代表与组1组比较P<0.05。

由表1可以看出，采用双层异体敷料皮抗张强度最大，但是，异体敷料皮为表层敷料不能单独使用，生物羊膜可单独使用，但是抗张强度太低，因此，采用异体敷料皮和生物羊膜复合的方案最佳，既能有较大抗张强度，又能兼顾相容性和可植入性。

实施例5细胞增殖测试实验

将大鼠成纤维细胞种植在实施例4制备得到的组1-组3的实验材料，5天和7天分别行CCK-8细胞增殖实验，CCK-8细胞增殖实验采用深圳市拓普生物科技有限公司生产的CCK-8检测细胞增殖试剂盒，按照说明书操作指南进行试验，测试结果如表2所示：

表2

注：*代表与组1组比较P<0.05。

由表2可以看出，采用单一生物羊膜和单一异体敷料皮的细胞增殖量显著小于两种材料复合的方案，材料复合使用后，增加了细胞增殖的速度和数量。

实施例6伤口愈合测试实验

将SD雌性大鼠给予10％水合氯醛腹腔注射麻醉(0.4ml/100g)，常规腹部备皮，消毒铺巾。取腹部正中纵行切口，长约5cm，切开皮肤皮下组织，沿切口向两侧钝性分离皮下组织，将腹直肌连同其下腹横肌、腹横筋膜和腹膜一并切除，制备大小约为2×2cm²的大鼠腹壁全层缺损模型，以实施例4组1-组3所制备的材料修补(每组5只大鼠)，采用4-0丝线间断缝合，皮肤和皮下组织用3-0丝线间断缝合。缝合后，观察大鼠的伤口愈合情况：伤口无红肿，新生毛细血管生成，胶原生成，触碰无痛感症状时标志着伤口愈合，计算各组大鼠的愈合时间，测其平均愈合时间见表3所示：

表3

注：*代表与组1组比较P<0.05。

由表3可以看出，采用单一生物羊膜和单一异体敷料皮的伤口愈合时间显著大于生物羊膜和异体敷料皮复合材料，材料复合使用后，缩短了伤口愈合的时间。

本发明复合生物保护材料包括生物羊膜及异体敷料皮。生物羊膜内的上皮细胞与普通有核体细胞不同，不表达HLA-A、B、C及DR抗原，因此具有极低的抗原性，形成前经深低温冷冻处理进一步清除组织抗原性，移植后不会发生免疫排斥反应。同时，生物羊膜的网状纤维膜性结构和细胞外基质与人体内其他膜组织高度重合，富含多种生长因子、功能性蛋白等物质，使其具备优秀的诱导细胞分化增值、抗炎、防粘连作用，因此，生物羊膜是腹腔关闭过程中用于膜组织缺损修复、保护裸露创面的首选生物材料。

异体敷料皮取材于新鲜异体中厚皮片，经工艺处理后降低皮肤组织的抗原性，保留皮肤表皮层及部分真皮层相对完整的组织结构。异体敷料皮的低抗原性可以延迟免疫排斥反应发生，延长创面覆盖时间，保证在创面修复期内持续为创面提供适宜的细胞增殖、血管化环境。另外，其天然的皮肤框架结构具有优秀的抗拉强度，能够承受一定的力学负荷，保证创面不易因外力撕裂，尤其是腹部创面。

最后，在腹腔关闭过程中，将两种生物材料结合使用，在发挥各自效用的时候，可克服生物羊膜对外界环境的敏感、机械性能不足以及异体敷料皮易与深层组织粘连的缺点，为腹腔开放疗法后腹腔关闭创造优异的条件，促进创面快速愈合。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (3)

1.一种腹腔开放复合生物保护材料，其特征在于，包括生物羊膜和异体敷料皮。

2.根据权利要求1所述腹腔开放复合生物保护材料，其特征在于，所述保护材料使用时，生物羊膜敷在靠近腹壁缺损最内层的位置，异体敷料皮覆盖在其上面并缝合。

3.根据权利要求1所述腹腔开放复合生物保护材料，其特征在于，所述生物羊膜为1-6层结构，异体敷料皮为单层结构。