CN111357982A - 沙棘复合发酵液及其制备方法、保健饮品、植物酵素 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及发酵技术领域,具体公开了一种沙棘复合发酵液及其制备方法、保健饮品、植物酵素,所述沙棘复合发酵液包括以下的原料:沙棘提取液、食物酶解液、培养液以及发酵剂。本发明提供的沙棘复合发酵液对酒精性肝损伤有明显的改善效果,由于是由药食两用中药及食品组成,经发酵后获得沙棘复合发酵液,具有调节酒精性肝损伤、调节酒精引起的肝脏氧化损伤、酒精代谢酶变化、脂质代谢变化的作用;同时食料安全,无明显毒副作用,解决了目前因大多采用西药进行治疗酒精性肝损伤而存在毒副作用的问题;而本发明提供的沙棘复合发酵液的制备方法简单,将沙棘制备成发酵型产品,便于储存运输,对沙棘的产业化发展具有重要意义。
Description
技术领域
本发明涉及发酵技术领域,具体是一种沙棘复合发酵液及其制备方法、保健饮品、植物酵素。
背景技术
酒精性肝损伤(Alcoholic Liver Disease,ALD)主要是指酒精性脂肪肝、酒精性肝纤维化、酒精性肝炎以及酒精性肝硬化等在内的因长期大量饮酒造成的肝中毒性损害,其发病率逐年增加,是除了病毒性肝病以外,另一个严重危害肝脏的因素。
目前,治疗酒精性肝损伤的主要方法还是以药物治疗为主。而用于治疗酒精性肝损伤的药物大多是西药居多。例如,联苯双酯是治疗病毒性肝炎和药物性肝损伤引起转氨酶升高的常用药物,具有保护肝细胞,增加肝脏的解毒功能的药理作用。但是,目前针对酒精性肝损伤大多采用药物(尤其是西药)进行治疗和缓解,存在毒副作用。
发明内容
本发明实施例的目的在于提供一种沙棘复合发酵液及其制备方法、保健饮品、植物酵素,以解决上述背景技术中提出的目前因大多采用西药进行治疗酒精性肝损伤而存在毒副作用的问题。
为实现上述目的,本发明实施例提供如下技术方案:
一种沙棘复合发酵液,包括以下按照重量份的原料:沙棘提取液9-11份、食物酶解液50-60份、培养液6-7份,以及适量的发酵剂;其中,所述食物酶解液包括以下的原料:基料、红豆粉、碳酸氢钠溶液、酶制剂、麦芽、神曲;且所述基料包括乌梅、陈皮、焦山楂、紫米、茯苓、红枣以及适量的水。
作为本发明进一步的方案:所述沙棘提取液包括以下按照重量份的原料:沙棘20-25份、玉竹1-2份、莱菔子1-2份,以及适量的水。
作为本发明再进一步的方案:所述水可以是选自纯净水、矿泉水、蒸馏水、去离子水或软水中的任意一种,这里并不作限定,可以根据需要进行选择。
作为本发明再进一步的方案:所述沙棘提取液的制备方法是按照比例称取沙棘沸水热烫2-3min,冷却,加入9-10倍所述沙棘重量的水进行打浆,然后按照比例加入玉竹、莱菔子进行混合,再加水进行煎煮,取上清液,得到所述沙棘提取液。
作为本发明再进一步的方案:所述沙棘提取液的固形物含量为4-6wt%。
作为本发明再进一步的方案:所述食物酶解液包括以下按照重量份的原料:基料80-90份、红豆粉0.96-1.28份、碳酸氢钠溶液1.2-1.6份、麦芽1-2份、神曲1-2份以及适量的酶制剂;且所述基料包括乌梅、陈皮、焦山楂、紫米、茯苓、红枣以及适量的水。
作为本发明再进一步的方案:所述碳酸氢钠溶液的质量百分浓度是0.01-1%。
优选的,所述碳酸氢钠溶液的质量百分浓度是0.05%。
作为本发明再进一步的方案:所述基料的制备方法是称取等重量的乌梅、陈皮、焦山楂、紫米、茯苓、红枣进行混合得到混合料,再将所述混合料进行浸泡,然后取出所述混合料并加入7-8倍所述混合料重量的水进行混合,得到所述基料。
优选的,所述基料的制备方法是称取等重量的乌梅、陈皮、焦山楂、紫米、茯苓、红枣进行混合得到混合料,再将所述混合料进行浸泡,然后取出所述混合料并加入7倍所述混合料重量的水进行混合,得到所述基料。
作为本发明再进一步的方案:所述酶制剂包括果胶酶、纤维素酶、半纤维素酶、植酸酶、木瓜蛋白酶,且所述果胶酶的加入量是所述基料重量的0.02%-0.03%,所述纤维素酶的加入量是所述基料重量的0.56%-0.60%,所述半纤维素酶的加入量是所述基料重量的1%-1.2%,所述植酸酶的加入量是所述基料重量的0.04%-0.06%,所述木瓜蛋白酶的加入量是所述基料重量的0.50%-0.55%。
作为本发明再进一步的方案:所述食物酶解液的制备方法是按照比例称取基料、红豆粉和碳酸氢钠溶液进行混合,加热至75-85℃预煮10-15min,调节pH至5-6,加入酶制剂进行酶解,然后加入麦芽1-2份和神曲1-2份,混合均匀后静置15-16h,过滤,杀菌,得到所述食物酶解液。
作为本发明再进一步的方案:所述调节pH所用试剂可为任意本领域常规pH调节用试剂,如柠檬酸、氨水、氢氧化钠溶液、稀盐酸、氢氧化钾溶液等,这里并不作限定。
优选的,所述调节pH是采用柠檬酸调节pH至5.5。
作为本发明再进一步的方案:所述食物酶解液的固形物含量为8-10wt%。
优选的,所述食物酶解液的制备方法是按照比例称取基料、红豆粉和碳酸氢钠溶液进行混合,加热至75-85℃预煮15min,冷却后采用柠檬酸调节pH至5.5,加入所述基料重量0.02%-0.03%倍的果胶酶并在55℃保温酶解1-2h,再依次加入所述基料重量0.56%-0.60%倍的纤维素酶、所述基料重量1%-1.2%倍的半纤维素酶、所述基料重量0.04%-0.06%倍的植酸酶,静置1-2h,再加入所述基料重量0.50%-0.55%倍的木瓜蛋白酶,同时拌入麦芽1-2份和神曲1-2份,混合均匀后静置15-16h,过滤,杀菌,得到所述食物酶解液。
作为本发明再进一步的方案:所述培养液包括以下按照重量份的原料:麦芽糖90-100份、水9900-10000份、复合维生素2-3份、蛋清9-10份。
作为本发明再进一步的方案:所述培养液的制备方法是按照比例称取麦芽糖溶于水中,静置20-30min后加入复合维生素,搅拌均匀后加热煮沸,冷却至室温后加入蛋清,搅拌均匀,得到所述培养液。
作为本发明再进一步的方案:所述复合维生素是现有产品,具体可以是中美上海施贵宝制药有限公司生产的国药准字H10930015的金施尔康。
优选的,在所述培养液中,所述麦芽糖、水、复合维生素以及蛋清的重量比为100:10000:3:10。
作为本发明再进一步的方案:所述发酵剂包括以下按照重量份的原料:乳酸菌100-120份、氯化钠8-10份、醋酸4-6份。
作为本发明再进一步的方案:所述发酵剂的制备方法是按照比例称取乳酸菌、氯化钠、醋酸进行混合即可。
需要说明的是,在本发明实施例中,各原料均采用市售商品;所述神曲是中药名,为辣蓼、青蒿、杏仁泥、赤小豆、鲜苍耳子加入面粉或麸皮后发酵而成的曲剂;所述玉竹是中药名,为百合科植物玉竹的干燥根茎,具有养阴润燥、生津止渴之功效。
本发明实施例的另一目的在于提供一种沙棘复合发酵液的制备方法,所述的沙棘复合发酵液的制备方法,包括以下步骤:
1)按照比例称取沙棘提取液与食物酶解液混合均匀,加热,得到沙棘营养液;其中,所述加热是在85-95℃保温5-6min;
2)将步骤1)中得到的所述沙棘营养液中按照比例加入培养液,再加入适量的发酵剂进行混合均匀,在28-35℃下进行发酵,得到发酵液;
3)将所述发酵液中加入乳化剂进行混合均匀,过滤后取清液,巴氏灭活,得到所述沙棘复合发酵液。
作为本发明再进一步的方案:在步骤3)中,所述沙棘复合发酵液还可以包装制成成品,进行低温保存。
作为本发明再进一步的方案:所述发酵剂的加入量为所述沙棘营养液重量的0.1%-10%倍。
优选的,所述发酵剂的加入量为所述沙棘营养液重量的0.4%倍。
作为本发明再进一步的方案:所述发酵是按照比例加入所述发酵剂先在28-35℃混合发酵24-48h,得一次发酵液,再加入0.5-0.6倍上述发酵剂加入重量的所述发酵剂在28-35℃发酵6-7天,即得二次发酵液,合并一次发酵液与二次发酵液,即可。
作为本发明再进一步的方案:所述乳化剂为食用明胶或羧甲基纤维素。
作为本发明再进一步的方案:所述乳化剂的加入量为按照每9.345L所述发酵液中加入0.7-3.5g乳化剂。
作为本发明再进一步的方案:所述的沙棘复合发酵液在制备用于治疗酒精性肝损伤、调节酒精引起的肝脏氧化损伤、酒精代谢酶变化、脂质代谢变化以及改善肝功能药物中应用。
本发明实施例的另一目的在于提供一种保健饮品,部分或全部包含上述的沙棘复合发酵液。
本发明实施例的另一目的在于提供一种植物酵素,部分或全部包含上述的沙棘复合发酵液。
与现有技术相比,本发明的有益效果是:
1)本发明制备的沙棘复合发酵液对酒精性肝损伤有明显的改善效果,通过沙棘提取液、乌梅、陈皮、焦山楂、紫米、茯苓、红枣、红豆粉、麦芽、神曲等原料的配合使用,经发酵后获得沙棘复合发酵液,具有调节酒精性肝损伤、调节酒精引起的肝脏氧化损伤、酒精代谢酶变化、脂质代谢变化的作用,可以改善肝功能,保护肝脏组织和肝细胞免受急性或慢性酒精摄入引起的肝损伤。
2)本发明由于是由药食两用中药及食品组成,食料安全,无明显毒副作用,安全性良好,无明显不适反应,可用于长期服用,解决了目前因大多采用西药进行治疗酒精性肝损伤而存在毒副作用的问题,具有广阔的市场前景;而本发明提供的沙棘复合发酵液的制备方法具有简单易行的特点,将沙棘制备成发酵型产品,便于储存运输,可以作为功能性产品使用,对沙棘的产业化发展具有重要意义,制备得到的沙棘复合发酵液可以改善酒精引起的肾脏、脾脏损伤及肝脏肥大的情况。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步详细地说明。以下实施例将有助于本领域的技术人员进一步理解本发明,但不以任何形式限制本发明。应当指出的是,对本领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干变形和改进。这些都属于本发明的保护范围。
实施例1
一种沙棘复合发酵液,具体的制备方法如下:
1)制备沙棘提取液:称取20kg沙棘沸水热烫2min,冷却后取出,加入所述沙棘10倍重量的水进行打浆,然后加入1kg玉竹、1kg莱菔子进行搅拌混合,得到搅拌料,加入所述搅拌料2.5倍重量的水,煎煮,抽取上清液,得到沙棘提取液,备用;
2)配制食物酶解液:称取等重量的乌梅、陈皮、焦山楂、紫米、茯苓、红枣进行混合得到混合料,再将所述混合料进行浸泡,然后取出所述混合料并加入8倍所述混合料重量的水进行混合,得到80kg的基料;再将所述基料中加入1.2%倍所述基料重量的红豆粉、1.5%倍所述基料重量的碳酸氢钠溶液(所述碳酸氢钠溶液的质量百分浓度是0.05%),在75℃预煮15min后,用柠檬酸调pH至5.5,加入0.02%倍所述基料重量的果胶酶,在55℃保温酶解1h,再依次加入所述基料重量0.56%倍的纤维素酶、所述基料重量1%倍的半纤维素酶、所述基料重量0.04%倍的植酸酶,静置1h,再加入所述基料重量0.50%倍的木瓜蛋白酶,同时拌入1kg的麦芽和1kg的神曲,混合均匀后静置15h,过滤,杀菌,得到所述食物酶解液,备用;
3)制备培养液:将9kg麦芽糖溶于990kg水中,静置20min后放入0.2kg复合维生素,搅拌均匀后加热煮沸,冷却至室温后加入0.9kg蛋清,搅拌均匀,得到所述培养液,备用;
4)沙棘营养液的制备:称取50kg所述食物酶解液与9kg所述沙棘提取液(一般按重量比为5:1的比例配比)混合均匀,放入灭菌锅中,加热至85℃,并保持5min,即可获得沙棘营养液,备用;
5)发酵:向所述沙棘营养液中加入所述培养液,所述沙棘营养液与所述培养液的重量比为10:1,加入所述沙棘营养液重量的0.1%倍的发酵剂,先在28℃混合发酵24h,得一次发酵液,再加入0.5倍上述发酵剂加入重量的所述发酵剂在28℃发酵6天,即得二次发酵液;其中,所述发酵剂的制备方法是按照比例称取乳酸菌100kg、氯化钠8kg、醋酸4kg进行混合即可;
6)乳化:合并一次发酵液与二次发酵液,再加入乳化剂,过滤取清液,巴氏灭活后包装即得所述沙棘复合发酵液;其中,乳化剂为食用明胶或羧甲基纤维素,所述乳化剂的加入量为按照每9.345L发酵液(合并一次发酵液与二次发酵液得到)中加入0.7g乳化剂。
在本实施例中,制得的沙棘复合发酵液可制成保健饮品、冻干粉或酵素产品等,可调节酒精性肝损伤,调节酒精引起的肝脏氧化损伤、酒精代谢酶、脂质代谢变化,改善肝功能。其中,植物酵素是以一种或多种新鲜蔬菜、水果和谷豆类、海藻类、药食两用本草类等为原料,加(或不加)糖类物质,经多种有益菌通过较长时间发酵而生产的功能性微生物发酵产品,拥有丰富的次生代谢产物、植物本身营养成分和益生菌等功能成分,具有一定的抗衰老、抗菌消炎、净化血液、增强机体免疫能力及解毒抗癌等多种保健功能。在日常生活中制作简单,多有食用,可广泛应用到日常饮食中。
实施例2
一种沙棘复合发酵液,具体的制备方法如下:
1)制备沙棘提取液:称取5kg沙棘沸水热烫3min,冷却后取出,加入所述沙棘10倍重量的水进行打浆,然后加入2kg玉竹、2kg莱菔子进行搅拌混合,得到搅拌料,加入所述搅拌料3倍重量的水,煎煮,抽取上清液,得到沙棘提取液,备用;
2)配制食物酶解液:称取等重量的乌梅、陈皮、焦山楂、紫米、茯苓、红枣进行混合得到混合料,再将所述混合料进行浸泡,然后取出所述混合料并加入7倍所述混合料重量的水进行混合,得到90kg的基料;再将所述基料中加入1.6%倍所述基料重量的红豆粉、2.0%倍所述基料重量的碳酸氢钠溶液(所述碳酸氢钠溶液的质量百分浓度是0.05%),在85℃预煮15min后,用柠檬酸调pH至5.5,加入0.03%倍所述基料重量的果胶酶,在55℃保温酶解2h,再依次加入所述基料重量0.60%倍的纤维素酶、所述基料重量1.2%倍的半纤维素酶、所述基料重量0.06%倍的植酸酶,静置2h,再加入所述基料重量0.55%倍的木瓜蛋白酶,同时拌入2kg的麦芽和2kg的神曲,混合均匀后静置16h,过滤,杀菌,得到所述食物酶解液,备用;
3)制备培养液:将10kg麦芽糖溶于1000kg水中,静置30min后放入0.3kg复合维生素,搅拌均匀后加热煮沸,冷却至室温后加入1kg蛋清,搅拌均匀,得到所述培养液,备用;
4)沙棘营养液的制备:称取55kg所述食物酶解液与11kg所述沙棘提取液混合均匀,放入灭菌锅中,加热至95℃,并保持6min,即可获得沙棘营养液,备用;
5)发酵:向所述沙棘营养液中加入所述培养液,所述沙棘营养液与所述培养液的重量比为10:1,加入所述沙棘营养液重量的0.4%倍的发酵剂,先在35℃混合发酵48h,得一次发酵液,再加入0.6倍上述发酵剂加入重量的所述发酵剂在35℃发酵7天,即得二次发酵液;其中,所述发酵剂的制备方法是按照比例称取乳酸菌120kg、氯化钠10kg、醋酸6kg进行混合即可;
6)乳化:合并一次发酵液与二次发酵液,再加入乳化剂,过滤取清液,巴氏灭活后包装即得所述沙棘复合发酵液;其中,乳化剂为食用明胶或羧甲基纤维素,所述乳化剂的加入量为按照每9.345L发酵液(合并一次发酵液与二次发酵液得到)中加入3.5g乳化剂。
实施例3
一种沙棘复合发酵液,具体的制备方法如下:
1)制备沙棘提取液:称取24kg沙棘沸水热烫2.5min,冷却后取出,加入所述沙棘10倍重量的水进行打浆,然后加入1.5kg玉竹、1.5kg莱菔子进行搅拌混合,得到搅拌料,加入所述搅拌料2.5倍重量的水,煎煮,抽取上清液,得到沙棘提取液,备用;
2)配制食物酶解液:称取等重量的乌梅、陈皮、焦山楂、紫米、茯苓、红枣进行混合得到混合料,再将所述混合料进行浸泡,然后取出所述混合料并加入7倍所述混合料重量的水进行混合,得到80kg的基料;再将所述基料中加入1.5%倍所述基料重量的红豆粉、1.5%倍所述基料重量的碳酸氢钠溶液(所述碳酸氢钠溶液的质量百分浓度是0.05%),在80℃预煮15min后,用柠檬酸调pH至5.5,加入0.02%倍所述基料重量的果胶酶,在55℃保温酶解2h,再依次加入所述基料重量0.56%倍的纤维素酶、所述基料重量1%倍的半纤维素酶、所述基料重量0.04%倍的植酸酶,静置1h,再加入所述基料重量0.50%倍的木瓜蛋白酶,同时拌入1.5kg的麦芽和1.5kg的神曲,混合均匀后静置15h,过滤,杀菌,得到所述食物酶解液,备用;
3)制备培养液:将10kg麦芽糖溶于1000kg水中,静置20min后放入0.3kg复合维生素,搅拌均匀后加热煮沸,冷却至室温后加入1kg蛋清,搅拌均匀,得到所述培养液,备用;
4)沙棘营养液的制备:称取50kg所述食物酶解液与10kg所述沙棘提取液混合均匀,放入灭菌锅中,加热至90℃,并保持5min,即可获得沙棘营养液,备用;
5)发酵:向所述沙棘营养液中加入所述培养液,所述沙棘营养液与所述培养液的重量比为10:1,加入所述沙棘营养液重量的0.4%倍的发酵剂,先在32℃混合发酵48h,得一次发酵液,再加入0.5倍上述发酵剂加入重量的所述发酵剂在32℃发酵7天,即得二次发酵液;其中,所述发酵剂的制备方法是按照比例称取乳酸菌110kg、氯化钠9kg、醋酸5kg进行混合即可;
6)乳化:合并一次发酵液与二次发酵液,再加入乳化剂,过滤取清液,巴氏灭活后包装即得所述沙棘复合发酵液;其中,乳化剂为食用明胶或羧甲基纤维素,所述乳化剂的加入量为按照每9.345L发酵液(合并一次发酵液与二次发酵液得到)中加入1g乳化剂。
实施例4
将实施例3中制备的所述沙棘复合发酵液采用现有方法(例如加去离子水减小浓度或减压浓缩增加浓度等)分别制备成浓度是13.375g/100mL、26.75g/100mL以及53.5g/100mL的样品。
实施例5
称取沙棘加水进行打浆,得到沙棘果肉匀浆液,且沙棘果肉匀浆液的浓度是26.75g/100mL。
实施例6
将实施例4中制备的浓度是13.375g/100mL、26.75g/100mL以及53.5g/100mL的样品进行药效试验。具体的,以ICR(Institute of Cancer Research,美国癌症研究所)雄性小鼠作为动物实验材料(ICR雄性小鼠体重18-22g,由北京维通利华实验动物技术有限公司提供),ICR雄性小鼠适应性饲养3d后,随机分为7小组,分别为正常组、模型组、沙棘果肉组、阳性药物组、低浓度组、中浓度组、高浓度组,对应的,正常组灌胃生理盐水,模型组灌胃红星二锅头白酒(北京红星股份有限公司)、沙棘果肉组灌胃实施例5中制备的沙棘果肉匀浆液、阳性药物组灌胃联苯双酯(市售,北京协和药厂(批号:170911),浓度是87.5mg/100mL)、低浓度组灌胃实施例4中制备的浓度是13.375g/100mL的样品、中浓度组灌胃实施例4中制备的浓度是26.75g/100mL的样品、高浓度组灌胃实施例4中制备的浓度是53.5g/100mL的样品。灌胃周期为15天,期间正常进食。各组具体处理方式见表1所示。测试指标酶联免疫试剂盒来自赛谱锐思(北京)科技有限公司。
表1实验各组分组及灌胃剂量
实施例7
在实施例6中的灌胃周期15天期间进行小鼠体重检测,具体是在实验期间对不同组的小鼠体重进行记录,1d/次。具体的测定结果如表2所示。
在灌胃周期15天期间,正常组小鼠状态良好,毛色光泽良好,进食正常,从表2中可以看出,体重增加明显。灌胃中后期,模型组小鼠食欲下降,毛色晦暗无光泽,反应迟钝,而沙棘复合发酵液各组小鼠体重较模型组明显有所改善,也相对较活跃。
在本实施例中,实验结果采用SPSS23.0统计软件进行统计学处理,所有实验数据以均数±标准差的形式表示,采用单因素方差分析和多重比较,检验水平α=0.05/0.01。
实施例8
在实施例6中的灌胃周期15天后进行肝损伤指标检测,具体的,对禁食后的小鼠摘眼球取血,血液样品在冰箱内4℃静置2h,冷冻离心机3000r/min离心(采用GTR10-2高速冷冻离心机)15min,取血清采用谷丙转氨酶(Alanine aminotransferase,ALT)和谷草转氨酶(Aspartate aminotransferase,AST)酶联免疫试剂盒测定肝损伤指标ALT和AST的水平,具体的肝损伤指标ALT和AST测定结果如表3所示。
在本发明实施例中,酒精性肝损伤模型组ALT和AST水平与正常组相比急剧上升(P<0.05)。而不同剂量沙棘复合发酵液均能显著抑制酒精引起的ALT水平的增加(P<0.05),且具有一定的剂量依赖性;对于AST水平,沙棘果肉匀浆液也存在使其降低的趋势,但无显著性差异。
在本实施例中,与正常组比较,#P<0.05,##P<0.01;与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01。其中,0.01<P<0.05表示显著性差异;P<0.01表示极显著性差异。
在本实施例中,实验结果采用SPSS23.0统计软件进行统计学处理,所有实验数据以均数±标准差的形式表示,采用单因素方差分析和多重比较,检验水平α=0.05/0.01。
实施例9
在实施例6中的灌胃周期15天后进行肝脏氧化损伤指标的检测,具体的,脱颈椎处死小鼠后进行解剖,取肝脏,用4℃生理盐水洗净,在滤纸上吸干水分,然后,将肝组织置于-80℃保存;取适量肝组织加入适量0.9%NaCl生理盐水(按照肝组织重量计算,每1g肝组织对应加入9mL的0.9%NaCl生理盐水)用匀浆机制成浓度是10wt%的组织匀浆,在4℃条件下3000r/min离心15min,取上清液作为匀浆样品,采用丙二醛(Malondialdehyde,MDA)和超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)酶联免疫试剂盒,按照具体试剂盒的说明书取样进行检测各指标水平,具体的肝脏氧化损伤指标MDA和SOD测定结果如表4所示。
在本实施例中,与正常组比较,#P<0.05,##P<0.01;与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01。其中,0.01<P<0.05表示显著性差异;P<0.01表示极显著性差异。
在本实施例中,实验结果采用SPSS23.0统计软件进行统计学处理,所有实验数据以均数±标准差的形式表示,采用单因素方差分析和多重比较,检验水平α=0.05/0.01。
从表4中可以看出,与正常组相比较,模型组肝组织MDA水平显著升高(P<0.01),而沙棘复合发酵液能够剂量性地降低MDA水平(P<0.01),表明酒精能够引起小鼠肝脏的氧化损伤,而沙棘复合发酵液具有改善酒精引起的肝组织MDA水平上升的作用。
进一步的,对肝组织的重要抗氧化酶SOD进行了检测,结果发现,酒精损伤肝组织时可以显著降低肝脏的SOD的活性和水平(P<0.05),而沙棘复合发酵液能够显著提高SOD的水平(P<0.01),表明沙棘复合发酵液对抗酒精引起的肝脏氧化损伤很可能是通过提高机体的SOD实现的。而沙棘果肉组相比于沙棘复合发酵液各组既不能降低肝组织MDA水平,也不能显著提高肝组织SOD水平,改善酒精性肝氧化损伤效果明显差于发酵后。
实施例10
在实施例6中的灌胃周期15天后进行肝组织高密度脂蛋白胆固醇(High densityliptein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(Low density lipoproteinchesterol,LDL-C)和甘油三酯(Triglyceride,TG)指标的检测,具体的,脱颈椎处死小鼠后进行解剖,取肝脏,用4℃生理盐水洗净,在滤纸上吸干水分,然后,将肝组织置于-80℃保存;取适量肝组织加入适量0.9%NaCl生理盐水(按照肝组织重量计算,每1g肝组织对应加入9mL的0.9%NaCl生理盐水)用匀浆机制成浓度是10wt%的组织匀浆,在4℃条件下3000r/min离心15min,取上清液作为匀浆样品,采用HDL-C、LDL-C和TG酶联免疫试剂盒,按照具体试剂盒的说明书取样进行检测各指标水平,具体的测定结果如表5所示。
在本实施例中,与正常组比较,#P<0.05,##P<0.01;与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01。其中,0.01<P<0.05表示显著性差异;P<0.01表示极显著性差异。
在本实施例中,实验结果采用SPSS23.0统计软件进行统计学处理,所有实验数据以均数±标准差的形式表示,采用单因素方差分析和多重比较,检验水平α=0.05/0.01。
从表5中可以看出,与正常组相比较,模型组肝组织TG和LDL-C水平显著升高(P<0.01),对于HDL-C水平具有下降趋势,但影响无显著差异。此外,与模型组相比,沙棘复合发酵液能显著降低TG和LDL-C水平(P<0.05),对HDL-C的水平也有一定的提高作用。相比于沙棘复合发酵液,沙棘果肉组不能显著提高HDL-C水平以及降低LDL-C水平,且对于降低TG水平的效果也不及沙棘复合发酵液,表明沙棘发酵后其对于肝脏脂肪化的改善效果更佳。
实施例11
在实施例6中的灌胃周期15天后进行肝重指数、脾重指数及肾重指数的检测,具体的,脱颈椎处死小鼠后进行解剖,取各组的小鼠的肝脏、脾脏和肾脏,去掉杂质,用滤纸吸干脏器表面的血污后,用精密电子天平(BSA124S Sartorius精密分析天平)称重得肝脏、脾脏和肾脏重量,计算脾脏指数和胸腺指数,即肝重指数=肝脏重量/小鼠体重×100%,脾重指数=脾脏重量/小鼠体重×100%,肾重指数=肾脏重量/小鼠体重×100%。具体的测定结果如表6所示。
在本实施例中,与正常组比较,#P<0.05,##P<0.01;与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01。其中,0.01<P<0.05表示显著性差异;P<0.01表示极显著性差异。
在本实施例中,实验结果采用SPSS23.0统计软件进行统计学处理,所有实验数据以均数±标准差的形式表示,采用单因素方差分析和多重比较,检验水平α=0.05/0.01。
从表6中可以看出,与正常组相比较,模型组肝重指数显著升高(P<0.01),肾重指数及脾重指数均显著降低(P<0.01)。与模型组比较,沙棘复合发酵液高、中、低剂量组肝重指数呈显著下降趋势,肾重指数呈上升趋势(P<0.05),脾重指数呈显著上升趋势,表明沙棘复合发酵液具有改善酒精引起的肾脏和脾脏损伤,肝脏肥大的作用。
从以上结果可以看出,本发明实施例中,采用灌胃沙棘复合发酵液的小鼠酒精性肝损伤有明显的改善,与正常组相比,酒精性肝损伤能够显著提高动物血清中ALT和AST水平,同时显著提高肝组织MDA、LDL-C、TG水平,降低抗氧化酶SOD水平。与模型组比较,沙棘复合发酵液各组能够显著降低血清AST水平,对ALT水平有降低趋势,对于肝组织MDA、LDL-C、TG水平具有显著降低作用,对于SOD水平有显著提高作用,对于HDL-C水平有提高趋势,且沙棘复合发酵液具有改善酒精引起的肾脏、脾脏损伤及肝脏肥大。综上所述,沙棘复合发酵液相比于其余组具有明显改善小鼠酒精性肝损伤的作用,且其改善酒精性肝损伤,可能是通过调节脂质代谢,调节肝组织中氧化应激反应及改善肝功能实现的。
上面对本发明的较佳实施方式作了详细说明,但是本发明并不限于上述实施方式,在本领域的普通技术人员所具备的知识范围内,还可以在不脱离本发明宗旨的前提下作出各种变化。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引申出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之中。
Claims (10)
1.一种沙棘复合发酵液,其特征在于,包括以下按照重量份的原料:沙棘提取液9-11份、食物酶解液50-60份、培养液6-7份,以及适量的发酵剂;其中,所述食物酶解液包括以下的原料:基料、红豆粉、碳酸氢钠溶液、酶制剂、麦芽、神曲,且所述基料包括乌梅、陈皮、焦山楂、紫米、茯苓、红枣以及适量的水。
2.根据权利要求1所述的沙棘复合发酵液,其特征在于,所述沙棘提取液的制备方法是按照重量份称取沙棘20-25份,加水进行打浆后按照重量份加入玉竹1-2份、莱菔子1-2份进行混合,再加水进行煎煮,取上清液,得到所述沙棘提取液。
3.根据权利要求1所述的沙棘复合发酵液,其特征在于,所述食物酶解液包括以下按照重量份的原料:基料80-90份、红豆粉0.96-1.28份、碳酸氢钠溶液1.2-1.6份、麦芽1-2份、神曲1-2份以及适量的酶制剂;且所述基料包括乌梅、陈皮、焦山楂、紫米、茯苓、红枣以及适量的水。
4.根据权利要求3所述的沙棘复合发酵液,其特征在于,所述食物酶解液的制备方法是按照比例称取基料、红豆粉和碳酸氢钠溶液进行混合,调节pH后加入酶制剂进行酶解,然后加入麦芽和神曲,混合均匀后静置,过滤,杀菌,得到所述食物酶解液。
5.根据权利要求1所述的沙棘复合发酵液,其特征在于,所述酶制剂包括果胶酶、纤维素酶、半纤维素酶、植酸酶、木瓜蛋白酶,且所述果胶酶的加入量是所述基料重量的0.02%-0.03%倍,所述纤维素酶的加入量是所述基料重量的0.56%-0.60%倍,所述半纤维素酶的加入量是所述基料重量的1%-1.2%倍,所述植酸酶的加入量是所述基料重量的0.04%-0.06%倍,所述木瓜蛋白酶的加入量是所述基料重量的0.50%-0.55%倍。
6.根据权利要求1所述的沙棘复合发酵液,其特征在于,所述培养液包括以下按照重量份的原料:麦芽糖90-100份、水9900-10000份、复合维生素2-3份、蛋清9-10份。
7.根据权利要求1所述的沙棘复合发酵液,其特征在于,所述发酵剂包括以下按照重量份的原料:乳酸菌100-120份、氯化钠8-10份、醋酸4-6份。
8.一种如权利要求1-7任一所述的沙棘复合发酵液的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)按照比例称取沙棘提取液与食物酶解液混合均匀,加热,得到沙棘营养液;
2)将所述沙棘营养液中按照比例加入培养液,再加入适量的发酵剂进行混合均匀,再进行发酵,得到发酵液;
3)将所述发酵液中加入乳化剂混合均匀,过滤后取清液,灭活,得到所述沙棘复合发酵液。
9.一种保健饮品,其特征在于,部分或全部包含如权利要求1-7任一所述的沙棘复合发酵液。
10.一种植物酵素,其特征在于,部分或全部包含如权利要求1-7任一所述的沙棘复合发酵液。
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