CN111289501A - 一种基于间接比色法检测no的试剂盒及其制备使用方法 - Google Patents
一种基于间接比色法检测no的试剂盒及其制备使用方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111289501A CN111289501A CN202010109039.2A CN202010109039A CN111289501A CN 111289501 A CN111289501 A CN 111289501A CN 202010109039 A CN202010109039 A CN 202010109039A CN 111289501 A CN111289501 A CN 111289501A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- reagent
- buffer solution
- kit
- detecting
- colorimetric method
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 title claims abstract description 27
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 24
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title abstract description 9
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 65
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 23
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 22
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims abstract description 20
- 239000008213 purified water Substances 0.000 claims abstract description 20
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims abstract description 18
- 229910017053 inorganic salt Inorganic materials 0.000 claims abstract description 7
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 claims abstract description 7
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 239000003223 protective agent Substances 0.000 claims abstract description 3
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims abstract description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 25
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 12
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 10
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 8
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 8
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- NUFBIAUZAMHTSP-UHFFFAOYSA-N 3-(n-morpholino)-2-hydroxypropanesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)CC(O)CN1CCOCC1 NUFBIAUZAMHTSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- CTENFNNZBMHDDG-UHFFFAOYSA-N Dopamine hydrochloride Chemical compound Cl.NCCC1=CC=C(O)C(O)=C1 CTENFNNZBMHDDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims description 5
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 claims description 5
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 claims description 5
- 229960004106 citric acid Drugs 0.000 claims description 5
- 229960001149 dopamine hydrochloride Drugs 0.000 claims description 5
- CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-M ethanesulfonate Chemical compound CCS([O-])(=O)=O CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 5
- OEZPVSPULCMUQB-VRTOBVRTSA-N hydron;(e)-(3-methyl-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazine;chloride Chemical compound Cl.C1=CC=C2S\C(=N\N)N(C)C2=C1 OEZPVSPULCMUQB-VRTOBVRTSA-N 0.000 claims description 5
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 claims description 5
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 5
- 229960000999 sodium citrate dihydrate Drugs 0.000 claims description 5
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- ZGTMUACCHSMWAC-UHFFFAOYSA-L EDTA disodium salt (anhydrous) Chemical compound [Na+].[Na+].OC(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC(O)=O)CC([O-])=O ZGTMUACCHSMWAC-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 claims description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 4
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 claims description 2
- GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N Triethanolamine Chemical compound OCCN(CCO)CCO GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 claims description 2
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 claims description 2
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 claims description 2
- 239000006166 lysate Substances 0.000 claims description 2
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 claims description 2
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 claims description 2
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 claims description 2
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 claims description 2
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 claims description 2
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 claims 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 claims 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 9
- 230000008901 benefit Effects 0.000 abstract description 2
- 230000007547 defect Effects 0.000 abstract description 2
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N Nitric oxide Chemical compound O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 160
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 9
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 7
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 7
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 6
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M Nitrite anion Chemical compound [O-]N=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 6
- 208000032982 Hemorrhagic Fever with Renal Syndrome Diseases 0.000 description 5
- FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N potassium nitrate Inorganic materials [K+].[O-][N+]([O-])=O FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 3
- 208000006545 Chronic Obstructive Pulmonary Disease Diseases 0.000 description 3
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 3
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 3
- 208000026106 cerebrovascular disease Diseases 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 3
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 3
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 229930064664 L-arginine Natural products 0.000 description 2
- 235000014852 L-arginine Nutrition 0.000 description 2
- 108090000913 Nitrate Reductases Proteins 0.000 description 2
- 102000008299 Nitric Oxide Synthase Human genes 0.000 description 2
- 108010021487 Nitric Oxide Synthase Proteins 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 2
- 206010008118 cerebral infarction Diseases 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 2
- 208000020832 chronic kidney disease Diseases 0.000 description 2
- 208000022831 chronic renal failure syndrome Diseases 0.000 description 2
- DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N creatinine Chemical compound CN1CC(=O)NC1=N DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N dopamine Chemical compound NCCC1=CC=C(O)C(O)=C1 VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 2
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 238000001631 haemodialysis Methods 0.000 description 2
- 230000000322 hemodialysis Effects 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 235000010333 potassium nitrate Nutrition 0.000 description 2
- 239000004323 potassium nitrate Substances 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 206010002383 Angina Pectoris Diseases 0.000 description 1
- 208000037157 Azotemia Diseases 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000006306 Cor pulmonale Diseases 0.000 description 1
- 206010010970 Cor pulmonale chronic Diseases 0.000 description 1
- 208000000461 Esophageal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010018364 Glomerulonephritis Diseases 0.000 description 1
- 206010018366 Glomerulonephritis acute Diseases 0.000 description 1
- 206010018367 Glomerulonephritis chronic Diseases 0.000 description 1
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 1
- 101001018064 Homo sapiens Lysosomal-trafficking regulator Proteins 0.000 description 1
- 208000035150 Hypercholesterolemia Diseases 0.000 description 1
- 206010061216 Infarction Diseases 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 208000019693 Lung disease Diseases 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 102100033472 Lysosomal-trafficking regulator Human genes 0.000 description 1
- 235000010703 Modiola caroliniana Nutrition 0.000 description 1
- 244000038561 Modiola caroliniana Species 0.000 description 1
- 206010030155 Oesophageal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- 208000004880 Polyuria Diseases 0.000 description 1
- 208000004186 Pulmonary Heart Disease Diseases 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- XJLXINKUBYWONI-DQQFMEOOSA-N [[(2r,3r,4r,5r)-5-(6-aminopurin-9-yl)-3-hydroxy-4-phosphonooxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] [(2s,3r,4s,5s)-5-(3-carbamoylpyridin-1-ium-1-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methyl phosphate Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 XJLXINKUBYWONI-DQQFMEOOSA-N 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 231100000851 acute glomerulonephritis Toxicity 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- PLZFHNWCKKPCMI-UHFFFAOYSA-N cadmium copper Chemical compound [Cu].[Cd] PLZFHNWCKKPCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012930 cell culture fluid Substances 0.000 description 1
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026636 chronic pulmonary heart disease Diseases 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229940109239 creatinine Drugs 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 230000035619 diuresis Effects 0.000 description 1
- 229960003638 dopamine Drugs 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 201000004101 esophageal cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000007574 infarction Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 230000023404 leukocyte cell-cell adhesion Effects 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 230000002107 myocardial effect Effects 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 1
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 description 1
- 230000010355 oscillation Effects 0.000 description 1
- 238000012261 overproduction Methods 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 1
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 238000005375 photometry Methods 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 239000010453 quartz Substances 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 238000001223 reverse osmosis Methods 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N silicon dioxide Inorganic materials O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 1
- 208000010110 spontaneous platelet aggregation Diseases 0.000 description 1
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 208000009852 uremia Diseases 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/75—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated
- G01N21/77—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator
- G01N21/78—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator producing a change of colour
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/17—Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
- G01N21/25—Colour; Spectral properties, i.e. comparison of effect of material on the light at two or more different wavelengths or wavelength bands
- G01N21/31—Investigating relative effect of material at wavelengths characteristic of specific elements or molecules, e.g. atomic absorption spectrometry
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Plasma & Fusion (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
本发明提供了一种基于间接比色法检测NO的试剂盒，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，其中，试剂R1包括缓冲液、无机盐、保护剂、表面活性剂、防腐剂，溶剂为纯化水；试剂R2包括缓冲液、无机盐、防腐剂，溶剂为纯化水。本发明还提供了一种基于间接比色法检测NO的试剂盒的制备使用方法。本发明的优点在于：解决了现有市场上流通的检测NO的缺点，可以使用全自动生化分析仪检测NO，操作简便、检测速度快、精密度高、重复性好，最重要的一点是还能提高试剂的灵敏度和稳定性。
Description
技术领域
本发明涉及生物化学和试剂制备领域，尤其涉及一种基于间接比色法检测NO的试剂盒及其制备使用方法。
背景技术
一氧化氮(NO)是一种化学性质比较活泼的气体分子。在生理条件下，机体内NO浓度极低，是由一氧化氮合成酶(nitric oxide sythase，NOS)催化L-精氨酸(L-Arg)，在NADPH和O2的参与下形成的。NO在生物体内是一种双重作用的信使分子，作为第二信使和神经递质，同时是细胞间和细胞内信息传递的重要调节因子。NO具有独特的理化性质和生物学活性作用。在病理条件下，当NO的代谢失衡，就会导致心血管、呼吸、神经等系统的多种疾病。
研究表明，NO可能就是血管内皮舒张因子(endothelium-derived relaxingfator,EDRF)，其异常与临床多种疾病的发生及发展有关。NO具有扩张血管、调节血压、抑制白细胞黏附和血小板聚集和介导心肌细胞凋亡等作用，在心血管疾病的防治和干预治疗方面发挥了重要的作用。
以下为NO浓度在临床上的具体表现与意义：
(1)心、脑血管病
高血压病：高血压的发病及病情与血中NO水平有关，病情越重，NO降低越明显，两者呈显著负相关。
冠心病：NO在冠心病的发病及发展过程中起着重要作用，冠心病患者NO浓度显著低于对照组(P＜0.05)，而且，心绞痛发作与否，是否伴有高血压、高胆固醇血症，血清NO浓度差异均有显著性。
脑梗塞：脑梗塞患者发病24小时后NO水平与神经功能分呈显著正相关，与梗塞灶直径无显著相关性。
(2)肺病
慢性肺心病：NO反映肺心病心衰状况并与肺部的炎症有关。
慢性阻塞性肺疾病(COPD)：COPD急性发作期患者，血清NO浓度明显降低，随着病情好转而有所增加，但即使在缓解期，NO水平仍低于正常值，说明NO在COPD的发生和发展中起着重要作用。
(3)肾脏疾病
肾小球肾炎：急性肾小球肾炎好转的患者血清NO含量明显高于正常人，提示体内NO合成亢进；慢性肾小球肾炎好转的患者血清NO含量明显低于正常人，揭示内源性NO合成不足。说明NO在肾脏的致病作用具有双重性。
慢性肾功能衰竭：慢性肾功能衰竭患者不同病变时期和透析前后血清中NO含量的变化，发现尿毒症期(血清肌酐＞445umol/L)则明显升高；血液透析后NO浓度较透析前明显下降。
肾综合征出血热(HFRS)：通过检测NO在HFRS患者血清中的动态变化，发现HFRS患者从发热期至多尿期NO含量明显增加，提示NO在HFRS的血管内皮损伤和免疫活性物质分泌异常均起重要作用，对患者作NO的动态观察可作为判断病情的有效指标。
72例肾脏病患者的血清NO水平显著高于健康对照组，说明各种肾病的发生发展过程可能与NO的产生过多有关。
(4)肿瘤
肝癌患者NO含量较正常对照组明显增高，乳腺癌和宫颈癌患者NO水平也增高，消化道癌如食管癌和胃癌患者NO水平低于正常对照组。肺癌和卵巢癌患者仅轻度升高，与正常对照组比较无显著差异。而良性肿瘤患者血清NO水平则明显下降，不同良性肿瘤患者之间的血清NO水平比较无明显差异。
因此，检测血清NO含量，不仅可以作为差别肿瘤良恶性的指标，而且对于临床辨别癌变部位有一定的帮助。
由于NO在生物体内半衰期极短(大约几秒钟)，很快就被转变为硝酸盐/亚硝酸盐(NO2 -/NO3 -)的代谢产物，所以临床上不能直接测定血清NO含量，而是通过测定血清中其代谢产物含量间接代表血清NO含量。目前，文献报道的测定血清NO应用的方法有：硝酸盐还原酶法、镀铜镉振荡还原法、改良的Griess法、催化光度法、示波极谱法、分光光度法和化学发光法。血清NO浓度已经成为衡量人体健康与疾病状态的重要指标之一，也成为监测很多疾病状态的重要指标。
然而，在实现血清NO浓度检测的过程中，现有技术存在以下缺陷：(1)操作繁琐、自动化低，不适于大量样本的检测；(2)耗时较长，需要几个小时以上；(3)检测试剂的灵敏度和稳定性不好，无法长期保存。
据此，目前急需一种操作简单、自动化程度高、检测快，并且灵敏度与稳定性好的NO检测方法。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于提供一种操作简单、自动化程度高、检测快，并且灵敏度与稳定性好的基于间接比色法检测NO的试剂盒及其制备使用方法。
本发明采用以下技术方案解决上述技术问题：
一种基于间接比色法检测NO的试剂盒，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，包括的成分及相应含量为：
试剂R1：
其溶剂为纯化水；
其溶剂为纯化水。
作为本发明的优选方式之一，所述试剂R1中，所述缓冲液为柠檬酸缓冲液、磷酸缓冲液、HEPES缓冲液、三羟甲基氨基甲烷缓冲液、甘氨酸缓冲液、2-(N-吗啡啉)乙磺酸缓冲液、3-(N-吗啉基)-2-羟基丙磺酸缓冲液中的一种或多种；所述无机盐为3-甲基-2-苯并噻唑啉酮腙盐酸盐、EDTA-Na2、EDTA、二水柠檬酸钠、盐酸多巴胺、NaOH、氯化钠、氯化镁中的一种或多种；所述保护剂为乙二醇、三乙胺、丙三醇、三乙醇胺中的一种或多种；所述表面活性剂为曲拉通X-100、吐温-20、吐温-80中的一种或多种；所述防腐剂为Proclin300、叠氮钠中的一种或多种。
作为本发明的优选方式之一，所述试剂R1包括的成分及相应含量具体为：
其溶剂为纯化水。
作为本发明的优选方式之一，所述试剂R2中，所述缓冲液为柠檬酸缓冲液、磷酸缓冲液、HEPES缓冲液、三羟甲基氨基甲烷缓冲液、甘氨酸缓冲液、2-(N-吗啡啉)乙磺酸缓冲液、3-(N-吗啉基)-2-羟基丙磺酸缓冲液中的一种或多种；所述无机盐为3-甲基-2-苯并噻唑啉酮腙盐酸盐、EDTA-Na2、EDTA、二水柠檬酸钠、盐酸多巴胺、NaOH、氯化钠、氯化镁中的一种或多种；所述防腐剂为Proclin300、叠氮钠中的一种或多种。
作为本发明的优选方式之一，所述试剂R2包括的成分及相应含量具体为：
其溶剂为纯化水。
一种上述基于间接比色法检测NO的试剂盒的制备方法，包括如下具体步骤：
(1)配制试剂R1：
按照试剂R1的组分含量，将各组分物质于同一容器中混合，混合均匀后，调pH至5.35-5.45，制得试剂R1；
(2)配制试剂R2：
按照试剂R2的组分含量，将各组分物质于同一容器中混合，混合均匀后，调pH至6.75-6.85，制得试剂R2。
一种上述基于间接比色法检测NO的试剂盒的使用方法，包括如下具体步骤：
(1)吸取10μL样本，加入240μL试剂R1，37℃孵育5min；
(2)加入80μL试剂R2，置37℃孵育；
(3)孵育1min后读取吸光值A1；孵育5min后读取吸光值A2；按照ΔA＝A2-A1来计算ΔA，根据ΔA测算样本中NO含量。
作为本发明的优选方式之一，所述基于间接比色法检测NO的试剂盒用于细胞裂解液、细胞培养液、组织裂解液、血清、血浆、尿液中NO含量的测定。
作为本发明的优选方式之一，所述基于间接比色法检测NO的试剂盒还可用于食品或环境领域对水溶液中硝酸盐的检测。
原理：
人体血清中的一氧化氮(NO)在氧及水的存在下，可生成与该一氧化氮(NO)同等摩尔浓度的亚硝酸盐(NO2-)和硝酸盐(NO3-)，而在酸性介质条件下，亚硝酸盐(NO2-)和硝酸盐(NO3-)又能与多巴胺和3-甲基-2-苯并噻唑啉酮腙盐酸盐反应，生成紫红色复合物，在最大吸收峰545nm波长处读取吸光度值变化率，即可求出此时人体血清中亚硝酸盐(NO2-)和硝酸盐(NO3-)的总浓度。通过上述亚硝酸盐(NO2-)和硝酸盐(NO3-)与一氧化氮(NO)同等摩尔浓度的关系，可间接测定出人体血清中一氧化氮(NO)浓度水平。
本发明相比现有技术的优点在于：
(1)相比其它方法，本发明试剂盒利用价格低廉的催化剂及还原剂取代了硝酸盐还原酶法中价格高昂的还原酶，操作简便，反应时间短，5-10分钟即可将硝酸盐转化为亚硝酸盐；
(2)相比同类产品，本发明试剂盒具有更高的灵敏度和特异性，适用于大量样本的检测，提升了NO检测的应用价值；
(3)本发明解决了还原剂及催化剂在反应体系中无法久存，会迅速沉淀分解的问题；本试剂盒中的试剂为液体，可直接使用，且稳定性好，可在2-8℃条件下长期保存；
(4)本发明试剂盒可在全自动生化分析仪上使用，成本低廉、自动化高、节省检测时间，并且，精密度高、重复性好。
附图说明
图1是实施例7中基于间接比色法检测NO的试剂盒的拟合曲线图。
具体实施方式
下面对本发明的实施例作详细说明，本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。
实施例1
本实施例的一种基于间接比色法检测NO的试剂盒，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，包括的成分及相应含量为：
试剂R1(pH 5.35)：
其溶剂为纯化水。
试剂R2(pH 6.75)：
柠檬酸缓冲液或三羟甲基氨基甲烷缓冲液 0.6g/mL
EDTA 3g/mL
Proclin300 0.05％
其溶剂为纯化水。
实施例2
本实施例的一种基于间接比色法检测NO的试剂盒，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，包括的成分及相应含量为：
试剂R1(pH 5.45)：
其溶剂为纯化水。
试剂R2(pH 6.85)：
甘氨酸缓冲液或2-(N-吗啡啉)乙磺酸缓冲液 15g/mL
二水柠檬酸钠或盐酸多巴胺 50g/mL
叠氮钠 0.5％
其溶剂为纯化水。
实施例3
本实施例的一种基于间接比色法检测NO的试剂盒，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，包括的成分及相应含量为：
试剂R1(pH 5.4)：
其溶剂为纯化水。
试剂R2(pH 6.8)：
3-(N-吗啉基)-2-羟基丙磺酸缓冲液 7.5g/mL
氯化镁 25g/mL
Proclin30 0.25％
其溶剂为纯化水。
实施例4
本实施例的一种基于间接比色法检测NO的试剂盒，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，包括的成分及相应含量为：
试剂R1(pH 5.4)：
其溶剂为纯化水。
试剂R2(pH 6.8)：
其溶剂为纯化水。
实施例5
本实施例的一种上述实施例1-4中基于间接比色法检测NO的试剂盒的制备方法，包括如下具体步骤：
(1)配制试剂R1：
按照试剂R1的组分含量，将各组分物质于同一容器中混合，混合均匀后，调pH，制得试剂R1(可于2-8℃保存，备用)；
(2)配制试剂R2：
按照试剂R2的组分含量，将各组分物质于同一容器中混合，混合均匀后，调pH，制得试剂R2(可于2-8℃保存，备用)。
实施例6
本实施例的一种上述实施例1-4中基于间接比色法检测NO的试剂盒的使用方法。
一、校准质控液的配制：
校准和质控品为KNO3溶液，用去离子水将2000μmol/L硝酸钾溶液稀释，配制成500μmol/L校准-S，45μmol/L的质控-QC1和120μmol/L的质控-QC2(具体见表1)。
表1校准-S、质控-QC1与质控-QC2的具体配制表
| 浓度 | 原料用量(mL) | Proclin300 | 配制量(mL) | |
| 校准-S | 500 | 20.0 | 0.08 | 80 |
| 质控-QC1 | 45 | 1.8 | 0.08 | 80 |
| 质控-QC2 | 120 | 4.8 | 0.08 | 80 |
其中，校准品和质控硝酸根成分物质：包含硝酸钾基准物质和三次纯化水(反渗透、离子交换、石英器蒸馏)。
二、测试条件：
检测仪器：日立7180；
温度：37℃；
比色杯：1cm；
分析方法：两点终点法；
测光点：19-30；
主副波长：540/0nm
样本量/R1/R2:10μL/240μL/80μL；
反应方向：(+)。
三、操作步骤：见表2。
表2本发明试剂盒的操作步骤
校准方式：2点线性校准模式，用纯化水为零点，建立工作曲线。
计算方法：以校准品浓度对相应△A拟合校准曲线，样本浓度值通过校准曲线得出。
NO浓度(μmol/L)＝标准浓度×△A测定/△A标准。
实施例7
本实施例用以评价上述实施例中基于间接比色法检测NO的试剂盒：
(1)线性相关性验证
线性相关系数：利用实施例4配方配制试剂，在[5.0μmol/L-400.0μmol/L]范围内用接近线性区间下限的低值标本稀释接近线性区间上限的高值标本，混合成至少5个不同浓度(Xi)的标本，每个标本重复测定3次，分别计算测定结果的均值(yi)，结果表3。以稀释浓度(Xi)为自变量，以测定结果均值(yi)为因变量求出线性回归方程。按公式(1)计算线性回归的相关系数r，所得结果应符合“5.0μmol/L-400.0μmol/L范围内线性相关系数r≥0.9900”。
表3本发明NO检测试剂盒线性相关性比对值
图1是NO试剂盒的直线拟合曲线图，结合图1可知，本发明NO试剂盒的直线拟合曲线为：y＝1.0233x-1.1135，R2＝0.9998，R2>0.99，满足临床技术要求。
(2)准确度验证
取高、低两个水平的质控品，按照操作步骤进行测定，用同一批号试剂重复测定3次，测试结果记为(xi)，按(2)式求出相对偏差(Bi)，3次结果均应符合测定值与质控品靶值相对偏差≤15.0％的要求；如果3次结果中有2次符合要求，1次不符合要求，应重新连续测试20次，并分别按照公式(2)计算相对偏差(Bi)，当大于等于19次结果符合要求，准确度被验证，即符合测定值与质控品靶值相对偏差≤10.0％。
式中：xi为测定结果；
T为靶值。
结果表明，检测值较靶值相对偏差较小，准确度较高；准确度检测结果具体见表4。
表4本发明试剂盒的准确度验证结果
从检测结果可以看出，低值质控的相对偏差为2.8％，高值质控的相对偏差为1.7％，均小于10％，故满足临床要求。
(3)精密度验证
在重复条件下，取(50.0±10.0)μmol/L和(200.0±40.0)μmol/L浓度的样本(质控品、校准品或其他定值样本)，用同一批号试剂重复测定10次，分别计算测定值的平均值和标准差，按公式(3)计算批内变异系数(CV)，所得结果应符合CV≤5.0％。
式中：SD为标准差，计算公式为
dn为同水平各次所测值的偏差，计算公式为
xn为同水平各次所测值；
精密度检测数据如表5，检测结果表明所述试剂盒在检测高值和低值样本时的变异系数较小，分别为1.57％和3.41％，精密度较好。
表5本发明试剂盒的精密度验证结果
(4)灵敏度及特异度验证
采用市售检测试剂盒检测筛选50份阳性血清50份阴性血清，与所述试剂盒同步检测此100份血清样本，按各试剂盒判定标准设高于参考标准为阳性，低于参考标准为阴性，以市售测试剂盒为金标准计算各试剂盒的灵敏度和特异度，结果见表6。结果表明，所述试剂盒有较高的灵敏度及特异度，可显著地提高临床检测的准确性满足临床检测的需求。
表6本发明试剂盒的灵敏度及特异度与市售试剂盒比较
综上所述，利用本NO检测制备的试剂盒具有较高的准确性，成本低，操作简单，可以在生化仪上实现自动化检测，可用于检测人体NO自由基总浓度，在临床上用于心血管等疾病的辅助诊断。本发明的试剂盒也可以在食品或环境领域对水溶液中硝酸盐的检测，本发明具有广阔的应用前景。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (8)
1.一种基于间接比色法检测NO的试剂盒，其特征在于，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，包括的成分及相应含量为：
试剂R1：
其溶剂为纯化水；
试剂R2：
缓冲液 0.6-15g/mL
无机盐 3-50g/mL
防腐剂 0.05％-0.5％
其溶剂为纯化水。
2.根据权利要求1所述的基于间接比色法检测NO的试剂盒，其特征在于，所述试剂R1中，所述缓冲液为柠檬酸缓冲液、磷酸缓冲液、HEPES缓冲液、三羟甲基氨基甲烷缓冲液、甘氨酸缓冲液、2-(N-吗啡啉)乙磺酸缓冲液、3-(N-吗啉基)-2-羟基丙磺酸缓冲液中的一种或多种；所述无机盐为3-甲基-2-苯并噻唑啉酮腙盐酸盐、EDTA-Na2、EDTA、二水柠檬酸钠、盐酸多巴胺、NaOH、氯化钠、氯化镁中的一种或多种；所述保护剂为乙二醇、三乙胺、丙三醇、三乙醇胺中的一种或多种；所述表面活性剂为曲拉通X-100、吐温-20、吐温-80中的一种或多种；所述防腐剂为Proclin300、叠氮钠中的一种或多种。
3.根据权利要求2所述的基于间接比色法检测NO的试剂盒，其特征在于，所述试剂R1包括的成分及相应含量具体为：
其溶剂为纯化水。
4.根据权利要求1所述的基于间接比色法检测NO的试剂盒，其特征在于，所述试剂R2中，所述缓冲液为柠檬酸缓冲液、磷酸缓冲液、HEPES缓冲液、三羟甲基氨基甲烷缓冲液、甘氨酸缓冲液、2-(N-吗啡啉)乙磺酸缓冲液、3-(N-吗啉基)-2-羟基丙磺酸缓冲液中的一种或多种；所述无机盐为3-甲基-2-苯并噻唑啉酮腙盐酸盐、EDTA-Na2、EDTA、二水柠檬酸钠、盐酸多巴胺、NaOH、氯化钠、氯化镁中的一种或多种；所述防腐剂为Proclin300、叠氮钠中的一种或多种。
5.根据权利要求4所述的基于间接比色法检测NO的试剂盒，其特征在于，所述试剂R2包括的成分及相应含量具体为：
其溶剂为纯化水。
6.一种如权利要求1-5任一所述的基于间接比色法检测NO的试剂盒的制备方法，其特征在于，包括如下具体步骤：
(1)配制试剂R1：
按照试剂R1的组分含量，将各组分物质于同一容器中混合，混合均匀后，调pH至5.35-5.45，制得试剂R1；
(2)配制试剂R2：
按照试剂R2的组分含量，将各组分物质于同一容器中混合，混合均匀后，调pH至6.75-6.85，制得试剂R2。
7.一种如权利要求1-5任一所述的基于间接比色法检测NO的试剂盒的使用方法，其特征在于，包括如下具体步骤：
(1)吸取10μL样本，加入240μL试剂R1，37℃孵育5min；
(2)加入80μL试剂R2，置37℃孵育；
(3)孵育1min后读取吸光值A1；孵育5min后读取吸光值A2；按照ΔA＝A2-A1来计算ΔA，根据ΔA测算样本中NO含量。
8.根据权利要求7所述的基于间接比色法检测NO的试剂盒的使用方法，其特征在于，所述基于间接比色法检测NO的试剂盒用于细胞裂解液、细胞培养液、组织裂解液、血清、血浆、尿液中NO含量的测定。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010109039.2A CN111289501A (zh) | 2020-02-21 | 2020-02-21 | 一种基于间接比色法检测no的试剂盒及其制备使用方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010109039.2A CN111289501A (zh) | 2020-02-21 | 2020-02-21 | 一种基于间接比色法检测no的试剂盒及其制备使用方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN111289501A true CN111289501A (zh) | 2020-06-16 |
Family
ID=71021472
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202010109039.2A Pending CN111289501A (zh) | 2020-02-21 | 2020-02-21 | 一种基于间接比色法检测no的试剂盒及其制备使用方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN111289501A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112051259A (zh) * | 2020-08-31 | 2020-12-08 | 武汉生之源生物科技股份有限公司 | 一种一氧化氮检测试剂盒及检测方法 |
| CN117007788A (zh) * | 2023-08-03 | 2023-11-07 | 中拓生物有限公司 | 一种一氧化氮测定试剂盒及其制备方法和应用 |
Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102472746A (zh) * | 2009-08-04 | 2012-05-23 | 3M创新有限公司 | 检测氮氧化物的方法 |
| CN102944673A (zh) * | 2012-11-30 | 2013-02-27 | 北京华宇亿康生物工程技术有限公司 | 一种用于检测血清中甘胆酸含量的试剂盒（胶乳增强免疫比浊法） |
| CN106053838A (zh) * | 2016-07-12 | 2016-10-26 | 安徽伊普诺康生物技术股份有限公司 | 一种测定转铁蛋白的试剂盒及其制备方法 |
| CN206114533U (zh) * | 2016-11-01 | 2017-04-19 | 上海碧云天生物技术有限公司 | 一种一氧化氮检测试剂盒 |
| CN109212176A (zh) * | 2018-08-30 | 2019-01-15 | 中拓生物有限公司 | 一种丙酮酸测定试剂盒及其制备方法和应用 |
| CN109557238A (zh) * | 2018-12-24 | 2019-04-02 | 湖南新大陆生物技术有限公司 | 一种一氧化氮检测方法及其应用 |
| CN110308282A (zh) * | 2019-06-21 | 2019-10-08 | 中生北控生物科技股份有限公司 | 一种稳定的同型半胱氨酸循环酶法检测试剂盒 |
| CN110487781A (zh) * | 2019-07-12 | 2019-11-22 | 甘肃膜科检验检测有限公司 | 一种氮氧化物的检测方法 |
-
2020
- 2020-02-21 CN CN202010109039.2A patent/CN111289501A/zh active Pending
Patent Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102472746A (zh) * | 2009-08-04 | 2012-05-23 | 3M创新有限公司 | 检测氮氧化物的方法 |
| CN102944673A (zh) * | 2012-11-30 | 2013-02-27 | 北京华宇亿康生物工程技术有限公司 | 一种用于检测血清中甘胆酸含量的试剂盒（胶乳增强免疫比浊法） |
| CN106053838A (zh) * | 2016-07-12 | 2016-10-26 | 安徽伊普诺康生物技术股份有限公司 | 一种测定转铁蛋白的试剂盒及其制备方法 |
| CN206114533U (zh) * | 2016-11-01 | 2017-04-19 | 上海碧云天生物技术有限公司 | 一种一氧化氮检测试剂盒 |
| CN109212176A (zh) * | 2018-08-30 | 2019-01-15 | 中拓生物有限公司 | 一种丙酮酸测定试剂盒及其制备方法和应用 |
| CN109557238A (zh) * | 2018-12-24 | 2019-04-02 | 湖南新大陆生物技术有限公司 | 一种一氧化氮检测方法及其应用 |
| CN110308282A (zh) * | 2019-06-21 | 2019-10-08 | 中生北控生物科技股份有限公司 | 一种稳定的同型半胱氨酸循环酶法检测试剂盒 |
| CN110487781A (zh) * | 2019-07-12 | 2019-11-22 | 甘肃膜科检验检测有限公司 | 一种氮氧化物的检测方法 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| 王峰: "新双试剂多巴胺―3-甲基-2-苯并噻唑啉酮腙盐酸盐快速测定蔬菜鲜样中的硝态氮", 《食品工业科技》 * |
| 赛柏蓝: "源自哈佛独家新品上市招商，引爆亿万市场！", 《搜狐新闻》 * |
| 陈永红等: "多巴胺和3-甲基-2-苯并噻唑啉酮腙盐酸盐双试剂在环境水样NO_3~--N快速测定中的应用", 《分析仪器》 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112051259A (zh) * | 2020-08-31 | 2020-12-08 | 武汉生之源生物科技股份有限公司 | 一种一氧化氮检测试剂盒及检测方法 |
| CN117007788A (zh) * | 2023-08-03 | 2023-11-07 | 中拓生物有限公司 | 一种一氧化氮测定试剂盒及其制备方法和应用 |
| CN117007788B (zh) * | 2023-08-03 | 2024-03-19 | 中拓生物有限公司 | 一种一氧化氮测定试剂盒及其制备方法和应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN104459164B (zh) | 一种血清肌酐检测试剂 | |
| CN104198473B (zh) | 一种稳定的尿酸检测试剂盒 | |
| Davenport et al. | Differentiation of acute from chronic renal impairment by detection of carbamylated haemoglobin | |
| WO2022095576A1 (zh) | 一种新型N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶检测试剂 | |
| CN112029817B (zh) | 一种肌酐检测试剂盒及其使用方法 | |
| CN102288559B (zh) | 一种检测淀粉酶的方法和试剂盒 | |
| CN111289501A (zh) | 一种基于间接比色法检测no的试剂盒及其制备使用方法 | |
| CN112662736B (zh) | 一种快速简易消除血清中羟苯磺酸钙、酚磺乙胺药物干扰的尿酸试剂盒的制备方法 | |
| CN109613280B (zh) | 一种血清铁测定试剂盒及其制备方法和应用 | |
| CN109212176B (zh) | 一种丙酮酸测定试剂盒及其制备方法和应用 | |
| CN111304283A (zh) | 一种基于循环酶速率法测定hcy的试剂盒及其制备使用方法 | |
| CN104596959A (zh) | 一种基于dna酶检测钾离子浓度的方法 | |
| CN111394424A (zh) | 一种抗羟苯磺酸钙干扰的人血清肌酐含量检测试剂及方法 | |
| CN104714040B (zh) | 血清中葡萄糖氧化酶双试剂测定方法 | |
| CN114277089A (zh) | 一种达比加群的检测试剂及试剂盒 | |
| CN112710853B (zh) | 一种抗干扰、稳定的血清直接胆红素（酶法）测定试剂盒及其制备方法和应用 | |
| US3547586A (en) | Inorganic phosphate assay,and reagents therefor | |
| US4105408A (en) | Urea assay | |
| CN113655006B (zh) | 泌尿系结石成石危险因素检测试系统 | |
| US20090011431A1 (en) | Diagnosis of Sepsis by the Selective Determination of the Concentration of Cu/Zn Superoxide Dismutase (Cu/Zn Sod) in Patient Samples | |
| CN106047988A (zh) | 一种测定1,5‑脱水葡糖醇的试剂盒及其制备方法 | |
| CN107254508B (zh) | 一种h2o2偶联的指示系统检测唾液酸的试剂盒 | |
| CN106324234B (zh) | 修饰的n-乙酰神经氨酸醛缩酶及其制备方法和应用 | |
| CN107764877A (zh) | 一种高灵敏的血清总胆汁酸电化学检测方法 | |
| CN103674938A (zh) | 缺血修饰白蛋白组合测定试剂、测定方法及试剂盒 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20200616 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |