CN111265534A - 白头翁皂苷b4在制备治疗/预防脓毒症的药物中的用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了白头翁皂苷B4在制备治疗和/或预防哺乳动物包括人的脓毒症的药物中的用途，对LPS诱导的脓毒症具有保护作用。

Description

白头翁皂苷B4在制备治疗/预防脓毒症的药物中的用途

技术领域

本发明涉及医药技术领域。更具体地说，本发明涉及一种白头翁皂苷B4在制备治疗/预防脓毒症的药物中的用途。

背景技术

脓毒症是由感染导致的全身炎症反应综合征(systemic inflammatory responsesyndrome,SIRS)，其发病机制复杂，是导致多器官功能障碍综合征(multiple organdysfunction syndrome,MODS)的重要原因。脓毒症常常发生在有严重疾病的患者中，如严重烧伤、多发伤、外科手术后等患者。脓毒症也常见于有慢性疾病的患者如糖尿病、慢性阻塞性支气管、白血病、再生障碍型贫血和尿路结石等。临床上常用抗生素、皮质醇激素、血管活性药物、重组人活化蛋白C和机械通气辅助治疗，不仅费用昂贵，且死亡率高居不下，严重影响人类的生活质量和生命健康。急性肺损伤(ALI)是脓毒症患者中最常见的并发症，同时也是脓毒症患者较早出现损害的器官，ALI造成弥漫性肺间质及肺水肿，导致急性低氧呼吸功能不全，其治疗方法主要是呼吸支持治疗，如氧疗、无创呼吸机、有创通气为主，从而改善低氧血症。脓毒症治疗与急性肺损伤的呼吸支持治疗不同，目前治疗脓毒症主要以抗生素、抗病毒药物等抗感染药物和血管活性药、正性肌力药等辅助治疗药物两大类，但尚未有足够的针对脓毒症发病机制的特异性药物投入临床治疗。因此，探索治疗脓毒症的新方法，具有十分重要的意义。

脂多糖(LPS)是一种细菌内毒素，是革兰氏阴性细菌细胞壁外壁的组成成分之一。多种促炎因子TNF-α、IL-1β等的表达水平显著升高，激活促炎细胞因子的主要介质，诱发炎症级联反应，在体内形成“瀑布效应”，进而激发SIRS，是脓毒症诱发MODS的关键因素。LPS单次大量气管滴注给药，可诱发与脓毒症性ALI相似的病理过程，因此可利用LPS诱导小鼠脓毒症模型，探讨注射用白头翁皂苷B4是否对其具有治疗作用。

白头翁皂苷B4是从毛茛科多年生草本植物白头翁中提取具有药理活性的五环三萜类皂苷，其具有免疫调节、抗肿瘤、抗氧化等药理作用，但白头翁皂苷B4对防治脓毒症的作用尚未见报道。

发明内容

本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。

本发明还有一个目的是提供一种白头翁皂苷B4在制备治疗/预防脓毒症的药物中的用途，对LPS诱导的脓毒症具有保护作用。

为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种白头翁皂苷B4在制备治疗和/或预防哺乳动物包括人的脓毒症的药物中的用途。

优选的是，所述药物含有治疗有效量的白头翁皂苷B4和药学上可接受的载体。

优选的是，所述药物被制成药学上允许的剂型。

优选的是，所述药物被制成注射剂。

优选的是，所述药物提高脓毒症受试者生存率。

优选的是，白头翁皂苷B4的给药剂量为不低于0.5mg/kg·d。

本发明至少包括以下有益效果：

本发明利用脂多糖诱导小鼠脓毒症模型，探讨注射用白头翁皂苷B4对LPS诱导脓毒症的保护作用及可能机制，为防治脓毒症提供理论依据。通过LPS诱导小鼠脓毒症模型，以评价指标：小鼠体重和小鼠生存率，评价注射用白头翁皂苷B4是否具有治疗脓毒症的作用。LPS(12mg/mL)诱导小鼠脓毒症模型，小鼠体重下降、在第四天全部死亡。注射用白头翁皂苷B4能够改善小鼠体重下降，并且提高小鼠存活率。实验结果表明，注射用白头翁皂苷B4对LPS诱导的脓毒症具有保护作用

本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。

附图说明

图1为本发明的白头翁皂苷B4对小鼠存活率的影响；

图2为本发明的白头翁皂苷B4对小鼠体重的影响。

具体实施方式

下面结合附图对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。

应当理解，本文所使用的诸如“具有”、“包含”以及“包括”术语并不配出一个或多个其它元件或其组合的存在或添加。

需要说明的是，下述实施方案中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。

1、材料

1.1实验动物

健康BALB/c小鼠，120只，SPF级，体重20±2g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，动物合格证号：SCXK京2016-0006。

1.2药物与试剂

注射用白头翁皂苷B4，以下简称B4(江西本草天工科技有限责任公司，批号：2018042205)；脂多糖，以下简称LPS(SIGMA公司，批号088M4067V)；地塞米松，以下简称DEX(河南润弘制药股份有限公司，批号：190321)；注射用生理盐水(四川科伦药业股份有限公司，批号：L219012211)。

1.3仪器

1/1000精密天平(梅特勒-托利多仪器上海有限公司型号：ME204E)。

2、方法

2.1动物造模及给药

健康BALB/c小鼠，120只，适应性喂养3天，实验室室温为(25±5)℃，相对湿度(40～70)％。常规饲料喂养，自由饮水。于造模前称小鼠体重并随机分为空白对照组、模型对照组(12mg/kg)、白头翁皂苷B4低剂量组(LPS+白头翁皂苷B4 2.5mg/kg)、白头翁皂苷B4中剂量组(LPS+白头翁皂苷B4 5mg/kg)、白头翁皂苷B4高剂量组(LPS+白头翁皂苷B4 10mg/kg)、阳性对照组(LPS+地塞米松5mg/kg)(每组20只)，为了方便记录数据，以上六组后续分别在表格中计为空白对照组、LPS模型组、B4(2.5mg/kg)组、B4(5mg/kg)组、B4(10mg/kg)组、DEX(5mg/kg)组，按照LPS剂量为12mg/kg，气管滴注(i.t)给药1次复制脓毒症小鼠模型。造模前各组小鼠腹腔注射0.4％戊巴比妥钠，0.12mL/10g麻醉后，取小鼠仰卧位，于手术台上，用小鼠开口器打开小鼠口腔，用微量注射器加18g注射滞留针软管，从会厌软骨开口处将LPS溶液(6mg/mL)(空白对照组注入等量无菌生理盐水)注入肺脏40μL，模型即建立完成，待其苏醒后给予水和饲料。注射用白头翁皂苷B4低、中、高剂量组于造模后0h、3h、24h、48h、72h尾静脉(i.v)注射注射用白头翁皂苷B4(2.5、5、10mg/kg)，阳性对照组于造模后0h腹腔(i.p)注射地塞米松(5mg/kg)，模型对照组i.v注射等量生理盐水。

2.2检测指标

2.2.1小鼠体重及存活率

每天称量并记录每组小鼠体重，计录并统计7天内各组的死亡数以及存活率的动态变化。

2.2.2统计学分析

多个样本间均数比较。方差齐性数据采用单因素方差分析LSD检验，以P＜0.05为差异具有统计学意义。

采用SPSS13.0统计软件包，各项指标结果用均数±标准差(X±S)表示，两组间均数比较采用t检验，多组间计量资料比较采用单因素方差分析(one-wayANOVA)和两两比较(LSD法)。P<0.05为差异具有统计学意义。

3、实验结果

3.1白头翁皂苷B4对小鼠存活率和体重的影响

LPS造模后小鼠开始死亡，模型对照组小鼠在第四天全部死亡，阳性对照组和白头翁皂苷B4低剂量、中剂量、高剂量组存活率高于模型对照组，阳性对照组7天存活率为85％，白头翁皂苷B4低剂量、中剂量、高剂量组存活率分别为60％、80％、80％，结果说明地塞米松和白头翁皂苷B4对LPS诱导小鼠脓毒症具有治疗和保护作用。

与空白对照组比较，模型对照组体重均显著降低(P<0.001)，与模型对照组比较，阳性对照组Day1、Day2体重高于模型对照组(P<0.05)，白头翁皂苷B4低剂量、中剂量、高剂量组小鼠药后体重均高于模型对照组。

结果显示，LPS(12mg/kg)可导致BALB/c小鼠体重减轻和死亡，而地塞米松和白头翁皂苷B4改善LPS所致体重减轻并且提高小鼠存活率的作用，且白头翁皂苷B4改善小鼠体重减轻作用较阳性药DEX效果更显著，说明白头翁皂苷B4对脓毒症具有治疗作用，详见表1、表2和图1、图2。

表1白头翁皂苷B4对小鼠存活率的影响(n＝20)

表2白头翁皂苷B4对小鼠体重的影响

注：与模型组比较，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01，▲▲▲P＜0.001

3.2结论

实验结果表明，LPS诱导小鼠体重减轻和死亡，而白头翁皂苷B4和阳性对照药DEX能够改善小鼠体重减轻和死亡，白头翁皂苷B4改善小鼠体重效果较DEX好，以上结果表明白头翁皂苷B4对LPS诱导脓毒症具有治疗作用。研究表明LPS高剂量可诱导小鼠脓毒症模型并导致小鼠死亡，本发明中白头翁皂苷B4能够显著逆转脓毒症诱导的小鼠死亡，并且较低剂量能够提高小鼠存活率至80％。本发明首次发现低剂量白头翁皂苷B4具有治疗脓毒症作用，且治疗效果优于鹅掌楸苷和阳性对照药。

本发明提取物用作药物时，可以直接使用，或者以药物制剂的形式使用。

所述药物制剂含有治疗有效量的本发明白头翁皂苷B4，其余为药物学上可接受的、对人和动物无毒和惰性的可药用载体和赋形剂。

所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料以及药物制品辅剂。将本发明的药物制剂以单位体重服用量的形式使用。本发明提取物可通过口服或者注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂(纳米制剂)、口服液、喷雾剂、栓剂等；用于注射时，可制成灭菌的水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。

本发明提取物用作药物时，以药物制剂的形式使用，优选为注射剂，其中B4纯度＞99％。

这里说明的设备数量和处理规模是用来简化本发明的说明的。对本发明的应用、修改和变化对本领域的技术人员来说是显而易见的。

尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的图例。

Claims (6)

1.白头翁皂苷B4在制备治疗和/或预防哺乳动物包括人的脓毒症的药物中的用途。

2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述药物含有治疗有效量的白头翁皂苷B4和药学上可接受的载体。

3.如权利要求2所述的用途，其特征在于，所述药物被制成药学上允许的剂型。

4.如权利要求3所述的用途，其特征在于，所述药物被制成注射剂。

5.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述药物提高脓毒症受试者生存率。

6.如权利要求1所述的用途，其特征在于，白头翁皂苷B4的给药剂量为不低于0.5mg/kg·d。

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