CN111220739B - 一种评价安溪铁观音春茶杀青物品质的方法 - Google Patents
一种评价安溪铁观音春茶杀青物品质的方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种评价安溪铁观音春茶杀青物品质的方法,其通过水蒸汽蒸馏法提取茶纯露,并以气相色谱‑质谱联用法(GC‑MS)检测纯露中10种特征香味成分的含量,以特征香味成分含量的允差范围对安溪铁观音春茶杀青物品质进行判读。所述方法具有可靠性高、代表性强以及可操作性好的优点。
Description
技术领域
本发明属于香精香料领域,具体涉及一种评价安溪铁观音春茶杀青物品质的方法。
背景技术
近年来,随着个性化、多样化和不断升级的消费趋势,烟草行业推出不少创新型卷烟产品,如各种果香、酒香、茶香等不同香气的卷烟制品。以茶香为特征的卷烟产品有“七匹狼(金砖)”系列、“泰山”全系列和“娇子(硬龙凤呈祥)”等。不同牌号卷烟所用的茶香精的来源有所不同,如“七匹狼(金砖)”系列所用香精来自铁观音茶原料的提取物。福建茶叶品质优良,种类众多,茶叶、茶树花具有独特的香气风格与香韵,卷烟开发人员筛选特色的茶叶、茶树花,以现代化的提取、分离技术提取其中的香味物质,得到多种形式的茶香精,如纯露、精油等。这些茶香精的使用,将茶叶、茶树花的香气风格与特征香韵融入“七匹狼”卷烟产品中,不仅强化了卷烟产品的风格特征,而且赋予了深厚的文化底蕴。
茶香精属于天然植物提取物,年份、生长周期、气候等因素都可能影响茶叶、茶树花等原料的质量,进而影响茶香精的品质,因此有必要建立茶原料品质的评价方法,以保证茶香精质量稳定。
发明内容
本发明的目的旨在提供一种评价安溪铁观音春茶杀青物品质的方法,所述方法包括通过水蒸汽蒸馏法提取茶纯露,并从中筛选出10种特征香味成分,以特征香味成分含量的允差范围对茶叶的品质进行判读。
因此,在一个方面,本申请提供一种评价安溪铁观音春茶杀青物品质的方法,其包括以下步骤:
(1)将3-5倍(例如3、4或5倍)重量的水加入安溪铁观音春茶杀青物中进行水蒸汽蒸馏,收集纯露,至纯露重量为水的重量的30-40%时停止收集;
(2)采用GC-MS对步骤(1)所述纯露进行检测,获得纯露中下述10种成分的含量:叶醇、苯甲醛、氧化芳樟醇(呋喃型)、芳樟醇、苯乙醇、香叶醇、吲哚、茉莉酮、二氢猕猴桃内酯和茉莉酸甲酯;
(3)将步骤(2)中所测得的10种成分的含量与下述相应含量进行比较:
叶醇0.440-0.600μg/g;苯甲醛0.210-0.266μg/g;氧化芳樟醇(呋喃型)1.500-1.800μg/g;芳樟醇3.000-3.500μg/g;苯乙醇1.400-1.900μg/g;香叶醇1.500-1.800μg/g;吲哚3.000-4.000μg/g;茉莉酮0.600-0.750μg/g;二氢猕猴桃内酯0.026-0.028μg/g;茉莉酸甲酯0.070-0.100μg/g;
(4)当步骤(2)所测得的10种成分含量中8、9或10个在步骤(3)中所述相应成分含量范围内时,判定所述杀青物品质为优。
在一些实施方案中,步骤(2)中所述GC-MS中气相色谱条件选自下述的一项或多项:
i)色谱柱:Agilent DB-5MS(60m×0.25mm×0.25μm);
ii)载气:He;
iii)柱流量:1mL/min;
iv)进样口温度:280℃;
v)进样量:1μL;
vi)进样模式:分流进样,分流比5:1;
v)升温模式:程序升温,50℃保持1min,以3℃/min升温到300℃,保持6min。
在一些实施方案中,步骤(2)中所述GC-MS中质谱条件选自下述的一项或多项:
i)MS传输线温度:280℃;
ii)EI离子源温度:280℃;
iii)四极杆温度:150℃;
iv)EI电离能量:70eV;
v)扫描模式:全扫描+选择离子扫描。
在一些实施方案中,在步骤(2)用GC-MS对所述纯露进行检测前,还包括对其用1-7倍体积的乙酸乙酯进行萃取的步骤。
在一些实施方案中,其中步骤(3)中所述各成分含量为:叶醇0.464-0.497μg/g;苯甲醛0.217-0.266μg/g;氧化芳樟醇(呋喃型)1.634-1.766μg/g;芳樟醇3.093-3.462μg/g;苯乙醇1.443-1.624μg/g;香叶醇1.728-1.781μg/g;吲哚3.396-3.615μg/g;茉莉酮0.673-0.705μg/g;二氢猕猴桃内酯0.0266-0.0272μg/g;茉莉酸甲酯0.084-0.090μg/g。
在本发明的实施方案中,特征香味成分浓度单位“μg/g”是指每克茶叶纯露中含所述μg的香味成分。
在一些实施方案中,所述安溪铁观音为红心安溪铁观音。
在一些实施方案中,所述安溪铁观音产地为安溪祥华村。
术语解释:
本发明中,“祥华”位于安溪西部,为铁观音产地,主要包括祥华村,东坑村,祥地村,多卿和白坂村。在一些实施方案中,特指祥华村。
本发明中,如无特别说明,“杀青”是指采用一定温度,使鲜叶中的酶失去活性,或是将酶钝化的过程。杀青的方式包括:滚筒杀青、锅炒杀青、热风杀青、蒸汽杀青、微波杀青或蒸汽-热风混合式杀青等。“杀青物”是指经过杀青处理后的物质。经上述处理得到的茶叶即为本文中所述的“杀青物”。
本发明中,术语“气相色谱”或“GC”是指将样品混合物蒸发并注射进通过包含固定相(由液体或颗粒固体组成)的柱运动的载气(如氮气或氦气)流、并根据化合物对固定相的亲合力分离成其各组成化合物的一种色谱分离方法。
本发明中,术语“质谱法”或“MS”指通过化合物的质量鉴定化合物的分析技术。质谱的基本原理是使试样中各组分在离子源中发生电离,生成不同荷质比的带电荷的离子,经加速电场的作用,形成离子束,进入质量分析器。在质量分析器中,再利用电场和磁场使发生相反的速度色散,将它们分别聚焦而得到质谱图,从而确定其质量。MS技术通常包括(1)电离化合物以形成带电荷的化合物;和(2)检测带电荷的化合物的分子量和计算质荷比。化合物可被电离和通过任何适合的方法检测。“质谱仪”通常包括电离源和离子检测器。
发明的有益效果
本发明提供一种评价安溪铁观音春茶杀青物品质的方法,其通过水蒸汽蒸馏法提取茶纯露,并以气相色谱-质谱联用法(GC-MS)检测纯露中10种特征香味成分的含量,以特征香味成分含量的允差范围对安溪铁观音春茶杀青物品质进行判读。所述方法具有可靠性高、代表性强以及可操作性好的优点。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述,但是本领域技术人员将会理解,下列实施例仅用于说明本发明,而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体条件者,按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例1
以安溪铁观音春茶茶叶杀青物为对象,提取茶叶纯露,然后进行冻干、复溶、经色谱柱层析分离,根据各流分香韵特征进行分组,对能代表茶叶主要香韵特征的组别采用固相微萃取-气质联用法(SPME-GC-MS)进行定性分析,筛选具有特征香韵的41种主要香味成分并进行定量分析,测定各成分在乙醇介质中的嗅觉阈值,获得相应的香气活力值(OAV)。在此基础上,选取其中OAV较高并且含量达到检测要求的10种特征香味成分作为目标化合物,并将其允差范围作为评价杀青茶品质的指标,建立质量评价方法。
(1)纯露的提取(实验室)
称取1.5kg的茶叶杀青物到不锈钢蒸层中,置于蒸发釜内。称取6.0kg的开水,将开水分两次均匀洒在茶叶原料上,水不浸泡原料。设置蒸发釜加热温度125-150℃,原料温度100-110℃,冷凝水保持室温。从第一滴纯露冷凝液开始收集,重量约2.0kg时停止。
(2)特征香味成分的选择
1)GPC分离纯露
将茶叶纯露冻干浓缩,并用甲醇复溶、过滤,清液用凝胶色谱柱(GPC)分离,共收集117个流分。对各流分的嗅觉特征进行评价,将香气特征类似的流分进行合并,去除无明显香气特征的流份后共可分为11各组分,分组合并情况及各组分香气特征描述如表1所示。
表1凝胶色谱分离后各组分香气特征评价
2)香味成分定性分析
用固相微萃取-气质联用法(SPME-GC-MS)进行初步分析。组分5、6、7茶香香气特征清新、自然、丰富,能较完整代表茶叶纯露的良性特征,同时去除了一些纯露在存放、处理过程中产生的不良气息;分析结果显示组分5、6、7香气成分也较为类似,因此将组分5、6、7进行合并,并采用多种类型的SPME纤维头对合并后的组分进行深入分析。汇总分析结果,获得茶叶纯露合并流分中挥发性成分共100种。
3)主要香味成分定量分析
进一步从香气特征、商品化性、安全性等方面进行筛选,并购置标样通过GC-MS进行保留时间对比和香气评价,最终确定出茶叶纯露中香气成分共41种(表2),根据其标样的香气特征可分为花香、果香、奶香、青滋香、豆香、甜香、脂蜡香和可可香八种香韵,其中花香化合物16种,果香化合物13种,奶香化合物3种,青滋香化合物5种,豆香、甜香、脂蜡香和可可香化合物各1种。
表2茶叶纯露香气成分及其香气描述
其中,所述GC-MS具体检测方法如下:
内标溶液的配制
称取约0.25g的丙酸苏合香酯到25mL的棕色容量瓶中,以无水乙醇定容,为内标储备液,浓度约为10mg/mL。准确移取0.25mL内标储备液到25mL的棕色容量瓶中,以无水乙醇定容,为内标工作溶液,浓度约为100μg/mL。
样品标准溶液的配制
分别称取0.25g固态标准品到烧杯中,加入少量乙酸乙酯完全溶解,转移到棕色容量瓶中。接着分别移取0.25g的液态标准品到上述棕色容量瓶中,乙酸乙酯定容,为标准储备液,浓度约为10mg/mL。然后准确移取0.25mL的标准储备液到25mL的棕色容量瓶中,乙酸乙酯定容,为一级标准溶液,浓度约为100μg/mL。准确移取0.25mL的一级标准溶液到25mL的棕色容量瓶中,乙酸乙酯定容,为二级标准溶液,浓度约为1μg/mL。
样品标准工作溶液的配制
分别移取1、5mL的二级标准溶液到10mL棕色容量瓶中,加入0.3mL的内标工作溶液,得到浓度约为0.1、0.5、μg/mL的标准工作溶液。再分别移取0.1、0.2、0.5、1.0、2.0mL的一级标准溶液到10mL棕色容量瓶中,加入0.3mL的内标工作溶液,得到浓度约为1、2、5、10、20μg/mL的标准工作溶液。
检测方法
分别将标准工作溶液和纯露萃取液样品注入气相色谱-质谱联用仪检测。采用的气相色谱条件如下:色谱柱:Agilent DB-5MS(60m x 0.25mm x 0.25μm);载气:He;进样量:1μL;进样口温度:280℃;进样模式:分流进样,分流比5:1;柱流量:1mL/min;柱温箱升温程序:50℃保持1min,以3℃/min升温到300℃,保持6min。采用的质谱条件如下:MS传输线温度:280℃,EI离子源温度:280℃,四极杆温度:150℃;EI电离能量:70eV;扫描模式:全扫描+选择离子扫描。
以各香味成分和内标的定量离子峰面积对其相应浓度进行回归分析,得到标准曲线,相关系数大于等于0.994。将香味成分和内标的定量离子峰面积比,代入标准曲线,求得茶叶纯露样品中的香味成分的含量。各香味成分保留时间、定性及定量离子的参数以及含量见表3。
表3香味成分及内标化合物的保留时间和选择离子
4)主要香味成分嗅觉阈值和OAV值的测定
测定相应成分在乙醇介质中的嗅觉阈值和相应的香气活力值(OAV)。嗅觉阈值以及香气活力值(OAV值)测定方法:将各特征香气成分的标准品分别配制成1.0mg/mL的乙醇溶液,然后分别逐级等倍稀释九次,获得各成分的系列浓度标准溶液。针对每个成分的系列浓度标准溶液,按照GB/T 22366-2008中“最优估计阈值的估计”的方法,香气评价人员通过香气评价从标准溶液及2个空白液(乙醇、水)中辨识出标准溶液,以每位评价人员辨识失误的最高浓度及其相邻高一级浓度的几何平均值作为该人员评价对应成分的BET值。针对每个成分,计算10位评价人员BET值的几何平均值作为该成分的香气阈值(T),然后通过以下公式计算得到每种成分的香气活性值(OAV),结果见表4。
OAV=C/T
其中,C为前述样品中的香味成分含量(μg/mL)。
表4主要香气成分表征结果
根据上述检测结果从中选择以下10种成分作为后续质量评价的关键指标:叶醇、苯甲醛、氧化芳樟醇、芳樟醇、苯乙醇、香叶醇、吲哚、茉莉酮、二氢猕猴桃内酯和茉莉酸甲酯。
(3)特征香味成分含量允差范围
取同一批次的茶叶杀青物,参照(1)中方法,连续5天提取茶叶纯露,得到5批纯露样品,首先进行嗅辨评价,5批纯露样品的感官质量无显著性差异。然后同时进行萃取、GC-MS检测(检测方法参考(2)3)),得到特征香味成分的含量,统计标准偏差(表5)。
其中萃取方法如下:
称取15.0g的茶叶纯露到塑料离心管中,加入3mL乙酸乙酯,同时加入90μL内标工作溶液。以2000rpm涡旋振荡5min,振荡2次,然后以8000rpm离心5min,促进分层,取上层清液到色谱瓶中,待测。
表5 5批次茶叶杀青物纯露的特征香味成分的含量
经计算得到10种特征香味成分的允差范围为:
叶醇0.440-0.600μg/g;
苯甲醛0.210-0.266μg/g;
氧化芳樟醇(呋喃型)1.500-1.800μg/g;
芳樟醇3.000-3.500μg/g;
苯乙醇1.400-1.900μg/g;
香叶醇1.500-1.800μg/g;
吲哚3.000-4.000μg/g;
茉莉酮0.600-0.750μg/g;
二氢猕猴桃内酯0.026-0.028μg/g;
茉莉酸甲酯0.070-0.100μg/g。
实施例2
采用与实施例1相同的提取、萃取和检测条件制取不同季节(A,秋季)、不同产地(B、C、D,分别是祥华嘉馨农场、新寨村、祥地村)、相同产地季节(E)的茶叶杀青物,经嗅辨评价发现不同季节、不同产地的茶叶杀青物的纯露与实施例1所提取的纯露具有显著性差异,特征香味成分的检测结果如表6所示。从表可见,不同季节的茶叶杀青物A的纯露和不同产地的茶叶杀青物B、C、D的纯露中特征香味成分的含量基本上在实施例1所建立的含量范围之外,而相同产地季节的茶叶杀青物E的纯露中特征香味成分则基本上在含量范围之内,检测结果与嗅辨评价结果是一致的。
表6不同季节和产地的茶叶杀青物纯露特征香味成分的含量
结论
本发明通过从提取的茶叶杀青物纯露中筛选10种特征香味成分,并建立茶纯露特征香味成分的含量允差范围,结合嗅辨评价,可用于评价茶叶杀青物的质量。
尽管本发明的具体实施方式已经得到详细的描述,本领域技术人员将会理解,根据已经公开的所有教导,可以对那些细节进行各种修改和替换,这些改变均在本发明的保护范围之内。本发明的全部范围由所附权利要求及其任何等同物给出。
Claims (6)
1.一种评价安溪铁观音春茶杀青物品质的方法,其包括以下步骤:
(1)将3-5倍重量的水加入安溪铁观音春茶杀青物中进行水蒸汽蒸馏,收集纯露,至纯露重量为水的重量的30-40%时停止收集,用1-7倍体积的乙酸乙酯对收集得到的纯露进行萃取;
(2)采用GC-MS对经步骤(1)所得纯露进行检测,获得纯露中下述10种成分的含量:叶醇、苯甲醛、呋喃型氧化芳樟醇、芳樟醇、苯乙醇、香叶醇、吲哚、茉莉酮、二氢猕猴桃内酯和茉莉酸甲酯;
(3)将步骤(2)中所测得的10种成分的含量与下述相应含量进行比较:
叶醇0.440-0.600μg/g;苯甲醛0.210-0.266μg/g;呋喃型氧化芳樟醇1.500-1.800μg/g;芳樟醇3.000-3.500μg/g;苯乙醇1.400-1.900μg/g;香叶醇1.500-1.800μg/g;吲哚3.000-4.000μg/g;茉莉酮0.600-0.750μg/g;二氢猕猴桃内酯0.026-0.028μg/g;茉莉酸甲酯0.070-0.100μg/g;
(4)当步骤(2)所测得的10种成分含量中8、9或10个在步骤(3)中相应成分含量范围内时,判定所述杀青物品质为优;
其中所述安溪铁观音产地为安溪祥华村。
2.权利要求1所述的方法,其中步骤(1)中将3、4或5倍重量的水加入安溪铁观音春茶杀青物中进行水蒸汽蒸馏。
3.权利要求1所述的方法,其中步骤(2)中所述GC-MS中气相色谱条件选自下述的一项或多项:
i)色谱柱:Agilent DB-5MS,60m×0.25mm×0.25μm;
ii)载气:He;
iii)柱流量:1mL/min;
iv)进样口温度:280℃;
v)进样量:1μL;
vi)进样模式:分流进样,分流比5:1;
v)升温模式:程序升温,50℃保持1min,以3℃/min升温到300℃,保持6min。
4.权利要求1或2所述的方法,其中步骤(2)中所述GC-MS中质谱条件选自下述的一项或多项:
i)MS传输线温度:280℃;
ii)EI离子源温度:280℃;
iii)四级杆温度:150℃;
iv)EI电离能量:70eV;
v)扫描模式:全扫描+选择离子扫描。
5.权利要求1所述的方法,其中步骤(3)中各成分含量为:叶醇0.464-0.497μg/g;苯甲醛0.217-0.266μg/g;呋喃型氧化芳樟醇1.634-1.766μg/g;芳樟醇3.093-3.462μg/g;苯乙醇1.443-1.624μg/g;香叶醇1.728-1.781μg/g;吲哚3.396-3.615μg/g;茉莉酮0.673-0.705μg/g;二氢猕猴桃内酯0.0266-0.0272μg/g;茉莉酸甲酯0.084-0.090μg/g。
6.权利要求1所述的方法,其中所述安溪铁观音为红心安溪铁观音。
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