CN111220740B - 一种分离铁观音茶叶青滋香成分及其检测方法 - Google Patents

一种分离铁观音茶叶青滋香成分及其检测方法 Download PDF

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Abstract

本发明属于分离检测技术领域，公开了分离铁观音茶叶青滋香成分及其检测方法，包括：(1)将铁观音茶叶制作物进行水蒸气蒸馏，得到馏出液，干燥处理，得到干燥后的固体物质；(2)将该固体物质溶解于溶剂中，过滤后进行凝胶渗透色谱分离，流动相流速为1～8mL/min，每收集1～8分钟得到一个流分，共得到一百个以上的流分；(3)对各个流分进行香气评定，确定具有青滋香特征的流分；(4)合并具有青滋香特征的流分，采用气相色谱‑质谱检测合并的流分，结合谱图数据库和/或谱图文献定性出该流分中的铁观音茶叶青滋香成分；(5)通过内标定量法检测出铁观音茶叶青滋香成分含量。本发明方法能够对铁观音茶叶制作物中青滋香成分进行定性定量分析。

Description

一种分离铁观音茶叶青滋香成分及其检测方法
技术领域
本发明属于分离检测技术领域，具体涉及一种分离铁观音茶叶青滋香成分及其检测方法。
背景技术
铁观音属于中国传统名茶中青茶的代表之一，铁观音茶叶加工工艺由采青、晒青、做青、杀青、包揉、烘干等工序组成，每一道工艺都赋予铁观音茶叶特殊的香气特征。铁观音具有清香、花香、果香等香气特征，同时又具有苦味、涩感等味觉特征，这些不同的感官特征来源于不同的成分组群。尽管国内外对茶叶香味物质进行了大量研究，但目前多集中于茶叶香气物质的定性分析(张峰,陈小明,范坚强,等.铁观音杀青物香料的开发及其在卷烟中的应用[J].香精香料化妆品,2016,12(6):16-20；马宇平,岳田利,毛多斌,等.“湖南毛尖”香味成分的超临界CO2萃取剂在烟草中的应用[J].烟草科技,2006,(6):30-34.)，随着所发现茶叶香气成分不断增加，如何将茶叶体系的成分分析结果和感官品质进行有效的关联，明确各种香味成分的感官贡献机制，对于茶叶提取物的生产、精制、应用、调控和仿制具有重要意义。
茶叶和烟草作为消费品，其特征具有诸多相似之处，都是以特殊的香气满足消费者的需求。青滋香是烟草香韵的重要组成部分，有学者研究报道，云南和福建烤烟的香韵中以清甜香和青滋香最为显著(李章海，王能如，王东胜，等.烤烟香型的重要影响因子及香型指数模型的构建初探[J].安徽农业科学，2009，37(5)：2055-2057.)，而青滋香可以作为区分云南和福建烤烟香韵的一个重要指标(夏玉珍，王毅，牟定荣，等，福建和云南烤烟香韵风格特征差异及与化学成分的关系[J].烟草科技,2015,48(6):68-72.)；茶叶提取物含有明显的青滋香韵，代表成分有叶醇、芳樟醇等物质，通过感官介导的方式，将化学分析手段与感官评价技术相结合，构建福建特色茶叶提取物化学成分与感官特征之间的有效联系，不仅提高福建特色茶叶提取物在烟草工业应用的可控性和针对性，并且可方便卷烟产品的调配使用和香味仿制提供关键性支持。
因此，目前需要一种铁观音茶叶青滋香成分分离及检测方法。
发明内容
发明人经过一系列对于铁观音茶叶进行分离和检测的研究，定性得到了铁观音茶叶中具有青滋香特征的化学成分，并定量检测出了铁观音茶叶中青滋香成分的含量。
本发明提供了一种分离铁观音茶叶青滋香成分及其检测方法，所述方法包括以下步骤：
(1)将铁观音茶叶制作物进行水蒸气蒸馏，得到铁观音茶叶制作物水蒸气馏出液，并将铁观音茶叶制作物水蒸气馏出液进行干燥处理，得到干燥后的固体物质；
(2)将步骤(1)中所获得的固体物质溶解于溶剂中，过滤后进行凝胶渗透色谱分离，凝胶渗透色谱采用的流动相流速为1～8mL/min，例如2mL/min、3mL/min、4mL/min、5mL/min、6mL/min、7mL/min，每收集1～8分钟(例如2、3、4、5、6、7分钟)得到一个流分，共得到一百个以上的流分；
(3)按照GB/T 14454.2-2008“香料香气评定法”对步骤(2)中各个流分进行香气评定，确定具有青滋香特征的流分；
(4)将具有青滋香特征的流分合并，并采用气相色谱-质谱(GC-MS)来检测合并的具有青滋香特征的流分，得到检测谱图，结合谱图数据库和/或谱图文献以定性出该流分中的铁观音茶叶青滋香成分；
(5)通过内标定量法检测出铁观音茶叶青滋香成分的含量。
在本发明的一些实施方案中，在步骤(1)中铁观音茶叶制作物包括铁观音茶叶加工制作过程中的采青物、晒青物、做青物、杀青物、包揉物、烘干物和成品茶；优选地，所述铁观音茶叶制作物选自铁观音茶叶做青物和铁观音茶叶杀青物；更优选地，所述杀青物包括纯露、精油、净油、提取物等形式。
在本发明的一些实施方案中，在步骤(1)中水蒸气蒸馏包括水中蒸馏、水上蒸馏和直通水蒸气蒸馏，优选直通水蒸气蒸馏，更优选水蒸气蒸馏的冷凝温度为10℃～25℃，例如15℃～25℃、10℃～25℃、10℃～20℃。
在本发明的一些实施方案中，在步骤(1)中干燥处理包括自然蒸发干燥、真空蒸发干燥和冷冻干燥处理；优选地，干燥处理为冷冻干燥处理；更优选地，冷冻干燥处理包括将铁观音茶叶制作物水蒸气馏出液置于冰箱中冷冻6～12小时(例如7、8、9、10、11小时)，和将冷冻后的所述馏出液进行干燥处理。
在本发明的一些实施方案中，在本发明的一些实施方案中，在步骤(2)中固体物质和溶剂的配置浓度为0.05～1g/mL，例如0.05～0.8g/mL，例如0.05～0.6g/mL，例如0.05～0.4g/mL，包括例如0.1g/mL、0.2g/mL、0.3g/mL、0.4g/mL、0.5g/mL、0.6g/mL、0.7g/mL、0.8g/mL。
在本发明的一些实施方案中，步骤(2)中溶剂选自乙醇、丙醇、异丙醇、丙二醇、水及其中任意多种的组合，优选为乙醇。
在本发明的一些实施方案中，在步骤(2)中凝胶渗透色谱所用的填料包括SephadexG-10、Sephadex G-15、Sepharose 6B、SepharoseConA、Sephadex G-25和SephadexLH-20，优选SephadexG-10、Sephadex G-15和Sephadex LH-20。
在本发明的一些实施方案中，在步骤(2)中凝胶渗透色谱所用的流动相包括乙醇、丙醇、异丙醇、丙二醇、水及其中任意多种的组合，优选乙醇、水及其组合。
在本发明的一些实施方案中，在步骤(2)中经过凝胶渗透色谱分离得到一百个以上的流分，例如约100～180个流分，例如约110～170个流分，例如约120～150个流分，例如约115～145个流分，例如117个、125个、133个、145个流分。
在本发明的一些实施方案中，在步骤(3)中按照GB/T14454.2-2008“香料香气评定法”(例如其中的三角评析法)对通过凝胶渗透色谱分离得到的各个流分的嗅觉特征进行香气评定，确定具有青滋香特征的流分，每次评价时评香人员不少于5人。
在本发明的一些实施方案中，在步骤(4)中铁观音茶叶青滋香成分为代表性的7种青滋香成分，它们包括叶醇、正己酸乙酯2-甲基丁酸丁酯、苯乙醛、水杨酸甲酯、二氢猕猴桃内酯。
在本发明的一些实施方案中，在步骤(4)中气相色谱-质谱的条件在于如下(a)至(k)中的一项或多项：
(a)色谱柱选自DB-5MS及其等效柱；
优选地，色谱柱的规格为60m×0.25mm×0.25μm；
(b)气相色谱采用的载气为氦气；
(c)气相色谱的载气流量为0.5～10mL/min；
(d)气相色谱的进样温度为280℃；
(e)气相色谱的升温程序为：以3℃/分钟的速度，从50℃升至300℃，在300℃保持1分钟；
(f)气相色谱采用不分流模式；
(g)质谱的传输线温度为280℃；
(h)质谱的EI离子源温度为230℃；
(i)质谱的四级杆温度为150℃；
(j)质谱的EI电离能为70eV；
(k)质谱的扫描模式为选择离子扫描，根据保留时间划分时间段。
在本发明的一些实施方案中，在步骤(4)中采用气相色谱-质谱(GC-MS)检测得到的检测谱图选自总离子色谱图和质量色谱图。
在本发明的一些实施方案中，在步骤(4)中谱图数据库为NIST库检索，和通过保留时间和/或定性离子进行定性分析。
在本发明的一些实施方案中，本发明的方法包括以下步骤：
(1)将铁观音茶叶制作物进行水蒸气蒸馏，得到铁观音茶叶制作物水蒸气馏出液，并将铁观音茶叶制作物水蒸气馏出液进行干燥处理，得到干燥后的固体物质；
(2)将步骤(1)中所获得的固体物质溶解于溶剂如乙醇中，固体物质和溶剂的配置浓度为0.05～1g/mL，例如0.05～0.8g/mL，过滤后进行凝胶渗透色谱分离，其中凝胶渗透色谱分离的操作条件为填料为SephadexG-10，以乙醇或水为流动相，流动相的流速为1～8mL/min，例如1～6mL/min。每1～8分钟、例如1～6分钟收集得到一个流分，共得到一百个以上的流分；
(3)按照GB/T 14454.2-2008“香料香气评定法”对步骤(2)中各个流分进行香气评定，确定具有青滋香特征的流分；
(4)将具有青滋香特征的流分合并，并采用气相色谱-质谱(GC-MS)来检测合并的具有青滋香特征的流分，得到检测谱图，结合谱图数据库和/或谱图文献以定性出该流分中的铁观音茶叶青滋香成分，所述青滋香成分包括叶醇、正己酸乙酯、2-甲基丁酸丁酯、苯乙醛、芳樟醇、水杨酸甲酯、二氢猕猴桃内酯；
其中，气相色谱的操作条件为：色谱柱为DB-5MS(规格为60m×0.25mm×0.25μm)；载气为氦气；载气流量为1mL/min；进样温度为280℃；升温程序为：从50℃开始，以3℃/min升至300℃，在300℃保持1min；采用不分流模式；质谱的操作条件为：传输线温度为280℃；EI离子源温度为230℃；四级杆温度为150℃；EI电离能为70eV；扫描模式：选择离子扫描，根据保留时间划分时间段；
(5)通过内标定量法检测出铁观音茶叶青滋香成分的含量。
在本发明的一些实施方案中，通过保留时间和/或定量离子进行定量分析。
在本发明的一些实施方案中，在步骤(5)中在内标定量法中内标为丙酸苏合香酯，浓度为10mg/mL，和溶剂为丙酮。
术语解释：
本发明中，铁观音茶叶制作物包括铁观音初制物和铁观音成品茶。
本发明中，铁观音初制物是指将铁观音鲜叶经一系列工序加工成铁观音成品茶叶的过程中得到的任意中间产物，包括但不限于铁观音采青物、铁观音晒青物、铁观音做青物、铁观音杀青物、铁观音包揉物、铁观音烘干物等。其中，在铁观音鲜叶经一系列工序制作铁观音成品茶叶过程中，做青工序得到铁观音做青物；在铁观音鲜叶经一系列工序制作铁观音成品茶叶过程中，杀青工序得到铁观音杀青物。
本发明中，铁观音成品茶指铁观音鲜叶经采青、晒青、做青、杀青、包揉、烘干、拣选等系列工序所制作的成品茶叶。
本发明中，术语“气相色谱”或“GC”是指将样品混合物蒸发并注射进通过包含固定相(由液体或颗粒固体组成)的柱运动的载气(如氮气或氦气)流、并根据化合物对固定相的亲合力分离成其各组成化合物的一种色谱分离方法。
本发明中，术语“质谱法”或“MS”是指通过化合物的质量鉴定化合物的分析技术。质谱的基本原理是使试样中各组分在离子源中发生电离，生成不同荷质比的带电荷的离子，经加速电场的作用，形成离子束，进入质量分析器。在质量分析器中，再利用电场和磁场使发生相反的速度色散，将它们分别聚焦而得到质谱图，从而确定其质量。MS技术通常包括(1)电离化合物以形成带电荷的化合物；和(2)检测带电荷的化合物的分子量和计算质荷比。化合物可被电离和通过任何适合的方法检测。“质谱仪”通常包括电离源和离子检测器。
本发明取得的有益效果包括但不限于：
1、本发明方法能够对铁观音茶叶制作物(包括初制物和成品茶)中具有青滋香特征的化学成分进行定性定量分析，可作为一种茶叶及茶叶制品青滋香韵成分的高效、便捷制备方法。
2、本发明方法不局限于铁观音茶叶杀青物，可适用于铁观音茶叶及过程产物所制备的样品，将香料香气评定法(GB/T 14454.2-2008)引入青滋香成分的研究中，能够有利地指导铁观音茶叶青滋香成分的凝胶渗透色谱分离。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。以下对至少一个示例性实施例的描述实际上仅仅是说明性的，决不作为对本发明及其应用或使用的任何限制。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
内标定量法
在内标定量法检测中，所用混合标准溶液中含有7种青滋香成分及1种内标标准物质，溶剂为丙酮；所述7种青滋香成分及内标的名称、保留时间和定性离子的信息如表1所示。
表1 7种青滋香成分及内标名称、定量离子和定性离子信息
序号 化合物名称 保留时间(min) 定量离子 定性离子
1 叶醇 10.826 67 82
2 正己酸乙酯 17.036 60 73
3 2-甲基丁酸丁酯 19.131 57 85
4 苯乙醛 19.512 91 92
5 芳樟醇 22.096 71 93
6 水杨酸甲酯 26.826 120 152
7 二氢猕猴桃内酯 41.961 111 137
8 丙酸苏合香酯(内标) 30.921 122 178
用丙酮将7种青滋香成分及1种内标标准物质配成混合标准溶液，按一定比例稀释，获得系列浓度的混合标准溶液(共7个)，所有标准工作溶液中内标丙酸苏合香酯的浓度为10μg/mL，标准溶液中各标准物质的浓度见表2所示：
表2工作标准溶液浓度表
Figure BDA0002416000160000081
将系列浓度的混合标准溶液进行上述的GC-MS分析，根据各成分的定量离子峰面积与浓度的关系建立标准曲线，铁观音茶叶杀青物中7种青滋香成分的工作曲线及相关系数如表3所示：
表3铁观音茶叶杀青物中7种青滋香成分的工作曲线及相关系数
Figure BDA0002416000160000082
实施例1
本实施例的铁观音茶叶杀青物中青滋香成分的分离及检测方法，所述方法包括：
将铁观音杀青物放置于蒸馏釜内，采用直通水蒸气方式进行水蒸气蒸馏，冷凝器的温度控制在15℃～20℃。取获得的铁观音茶叶杀青物水蒸气馏出液100mL，置于冰箱中冷冻6小时，冷冻后的样品在冷冻干燥机中进行干燥处理，得到干燥后的固体。
将0.2g固体溶解于2mL乙醇中，充分震荡后过滤，过滤后的样品进行凝胶渗透色谱分离。凝胶渗透色谱分离的操作条件：填料为SephadexG-10，以乙醇为流动相，流动相的流速为3mL/min。通过流分收集器每3min收集一个流分，共收集117个流分，分别标记为F1、F2、F3、F4、F5、F6…F117。
按照GB/T 14454.2-2008“香料香气评定法”，由六位评香员对上述117个流份分别进行香气评价，取平均结果。平均结果显示：剔除一些无气味、杂气的流分，鉴别出主要以青滋香香韵为主的流分，流分F51～F57具有清新的青香、花香，甜的、茉莉似气息；流分F58～F64同流分F51～F57接近，香气较弱。
将流分F51～F57、流分F58～F64合并得到铁观音青滋香韵组分1#，对其进行嗅香评价结果为：有茶香韵、较强的青滋香韵、似茉莉的花香、甜香气息，可以体现铁观音青滋香特征。使用GC-MS定性分析，其中，气相色谱的操作条件为：色谱柱为DB-5MS(规格为60m×0.25mm×0.25μm)；载气为氦气；载气流量为1mL/min；进样温度为280℃；升温程序为：从50℃开始，以3℃/min升至300℃，在300℃保持1min；采用不分流模式；质谱的操作条件为：传输线温度为280℃；EI离子源温度为230℃；四级杆温度为150℃；EI电离能为70eV；扫描模式：选择离子扫描，根据保留时间划分时间段。
根据总离子色谱图和质量色谱图，结合NIST库检索，进行保留时间比对和嗅觉特征评价，定性出铁观音茶叶杀青物代表性7种青滋香成分。通过内标定量法检测铁观音茶叶杀青物中的代表性7种青滋香成分含量，结果如表5所示。
实施例2
本实施例的铁观音茶叶杀青物中青滋香成分的分离及检测方法，所述方法包括：
将铁观音杀青物放置于蒸馏釜内，采用直通水蒸气方式进行水蒸气蒸馏，冷凝器的温度控制在15℃～20℃。取铁观音茶叶杀青物水蒸气馏出液500mL，置于冰箱中冷冻12小时，冷冻后的样品在冷冻干燥机中进行干燥处理，得到干燥后的固体。
将0.4g固体加入2mL乙醇中，充分震荡后过滤，过滤后的样品进行凝胶渗透色谱分离。凝胶渗透色谱分离的操作条件：填料为SephadexG-10，以水为流动相，流动相流速为4mL/min。通过流分收集器每3min收集一个流分，共收集145个流分，分别标记为F1、F2、F3、F4、F5、F6…F145。
按照GB/T 14454.2-2008“香料香气评定法”，由六位评香员对上述145个流分进行香气评价，取平均结果、平均结果显示：剔除一些无气味、杂气的流分，鉴别出主要以青滋香香韵为主的流分，流分F59～F67具有清新的青香、花香，甜的、蜜甜气息；流分F68～F80同流分F59～F67接近，香气更弱；
将流分F59～F67、流分F68～F80合并得到铁观音青滋香韵组分2#，对其进行嗅香评价结果为：有茶香韵、较强的青滋香韵、似茉莉的花香、甜香气息，可以体现铁观音青滋香特征。使用GC-MS定性分析，其中，气相色谱的操作条件为：色谱柱为DB-5MS(规格为60m×0.25mm×0.25μm)；载气为氦气；载气流量为1mL/min；进样温度为280℃；升温程序为：从50℃开始，以3℃/min升至300℃，在300℃保持1min；采用不分流模式；质谱的操作条件为：传输线温度为280℃；EI离子源温度为230℃；四级杆温度为150℃；EI电离能为70eV；扫描模式：选择离子扫描，根据保留时间划分时间段。
根据总离子色谱图和质量色谱图，结合NIST库检索，进行保留时间比对和嗅觉特征评价，定性出铁观音茶叶杀青物代表性7种青滋香成分。通过内标定量法检测铁观音茶叶杀青物中的代表性7种青滋香成分含量，结果如表5所示。
实施例3
按照本发明的青滋香特征成分检测方法，对通过实施例1、2得到的铁观音青滋香韵组分1#、2#进行青滋香特征成分定量分析。
表5铁观音茶叶杀青物中7种青滋香韵成分的定量测定结果
Figure BDA0002416000160000111
通过分析，可以有效确定青滋香特征香韵的关键成分含量，对于本发明得到的铁观音青滋香组分是有效、准确的测试，并为后续应用提供质量稳定的检测方法。
对比例1
凝胶渗透色谱分离的操作条件中，流动相的流速为10mL/min，通过流分收集器每持续收集9min得到一个流分，共得到84个流分。其余与实施例1相同。
流分嗅辩分离结果发现：84个流分中铁观音青滋香流分不能清晰的分离开来，与花香、果香等其它特征香韵相混淆。
定性检测与定量结果与实施例1的区别在于：将有相关流分合并后，通过色谱分离，特征成分也无法进行有效分离，峰型重叠，无法进行定性与定量分析。
对比例2
在气相色谱的操作条件中，升温程序为：以5℃/分钟的速度，从50℃升至300℃，在300℃保持1分钟。其余与实施例1相同。
定性检测与定量结果与实施例1的区别在于：特征成分也无法进行有效分离，峰型重叠，无法进行定性与定量分析。
显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。

Claims (22)

1.一种分离铁观音茶叶青滋香成分及其检测方法，所述方法包括以下步骤：
(1)将铁观音茶叶制作物进行水蒸气蒸馏，得到铁观音茶叶制作物水蒸气馏出液，并将铁观音茶叶制作物水蒸气馏出液进行干燥处理，得到干燥后的固体物质；
(2)将步骤(1)中所获得的固体物质溶解于溶剂中，过滤后进行凝胶渗透色谱分离，凝胶渗透色谱采用的流动相流速为1～8mL/min，每收集1～8分钟得到一个流分，共得到一百个以上的流分；
(3)按照GB/T 14454.2-2008“香料香气评定法”对步骤(2)中各个流分进行香气评定，确定具有青滋香特征的流分；
(4)将具有青滋香特征的流分合并，并采用气相色谱-质谱来检测合并的具有青滋香特征的流分，得到检测谱图，结合谱图数据库和/或谱图文献以定性出该流分中的铁观音茶叶青滋香成分；
(5)通过内标定量法检测出铁观音茶叶青滋香成分的含量；
其中在步骤(2)中所述溶剂选自乙醇、丙醇、异丙醇、丙二醇、水中的一种或多种，所述凝胶渗透色谱所用的填料选自SephadexG-10、Sephadex G-15、Sepharose 6B、SepharoseConA、Sephadex G-25和Sephadex LH-20，所述凝胶渗透色谱所用的流动相选自乙醇、丙醇、异丙醇、丙二醇、水中的一种或多种；
其中在步骤(4)中气相色谱-质谱的条件在于：色谱柱选自DB-5MS；和气相色谱的升温程序为：以3℃/分钟的速度，从50℃升至300℃，在300℃保持1分钟。
2.根据权利要求1所述的方法，其中在步骤(1)中所述铁观音茶叶制作物选自铁观音茶叶加工制作过程中的采青物、晒青物、做青物、杀青物、包揉物、烘干物、成品茶中的一种或多种。
3.根据权利要求2所述的方法，其中所述铁观音茶叶制作物选自铁观音茶叶做青物和铁观音茶叶杀青物。
4.根据权利要求2所述的方法，其中所述杀青物选自纯露、精油、净油、提取物的形式中的一种或多种。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中在步骤(1)中所述水蒸气蒸馏选自水中蒸馏、水上蒸馏、直通水蒸气蒸馏中的一种或多种。
6.根据权利要求5所述的方法，其中所述水蒸气蒸馏为直通水蒸气蒸馏。
7.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述水蒸气蒸馏的冷凝温度为10～25℃。
8.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中在步骤(1)中所述干燥处理选自自然蒸发干燥、真空蒸发干燥、冷冻干燥处理中的一种或多种。
9.根据权利要求8所述的方法，其中所述干燥处理为冷冻干燥处理。
10.根据权利要求9所述的方法，其中所述冷冻干燥处理包括将铁观音茶叶制作物水蒸气馏出液置于冰箱中冷冻6～12小时，和将冷冻后的所述馏出液进行干燥处理。
11.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中在步骤(2)中所述固体物质和溶剂的配置浓度为0.05～1g/mL。
12.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述溶剂为乙醇。
13.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述凝胶渗透色谱所用的填料为SephadexG-10、Sephadex G-15或Sephadex LH-20。
14.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述凝胶渗透色谱所用的流动相为乙醇、水或其组合。
15.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中在步骤(4)中气相色谱-质谱中的条件还在于如下的一项或多项：色谱柱的规格为60m×0.25mm×0.25μm；气相色谱采用的载气为氦气；气相色谱的载气流量为0.5～10mL/min；气相色谱的进样温度为280℃；气相色谱采用不分流模式；质谱的传输线温度为280℃；质谱的EI离子源温度为230℃；质谱的四级杆温度为150℃；质谱的EI电离能为70eV；或质谱的扫描模式为选择离子扫描，根据保留时间划分时间段。
16.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中在步骤(4)中铁观音茶叶青滋香成分为代表性的7种青滋香成分，它们包括叶醇、正己酸乙酯、2-甲基丁酸丁酯、苯乙醛、芳樟醇、水杨酸甲酯、二氢猕猴桃内酯。
17.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，所述方法包括以下步骤：
(1)将铁观音茶叶制作物进行水蒸气蒸馏，得到铁观音茶叶制作物水蒸气馏出液，并将铁观音茶叶制作物水蒸气馏出液进行干燥处理，得到干燥后的固体物质；
(2)将步骤(1)中所获得的固体物质溶解于溶剂中，固体物质和溶剂的配置浓度为0.05～1g/mL，过滤后进行凝胶渗透色谱分离，其中凝胶渗透色谱分离的操作条件为填料为SephadexG-10，以乙醇或水为流动相，流动相的流速为1～8mL/min，每1～8分钟收集得到一个流分，共得到一百个以上的流分；
(3)按照GB/T 14454.2-2008“香料香气评定法”对步骤(2)中各个流分进行香气评定，确定具有青滋香特征的流分；
(4)将具有青滋香特征的流分合并，并采用气相色谱-质谱来检测合并的具有青滋香特征的流分，得到检测谱图，结合谱图数据库和/或谱图文献以定性出该流分中的铁观音茶叶青滋香成分，所述青滋香成分包括叶醇、正己酸乙酯、2-甲基丁酸丁酯、苯乙醛、芳樟醇、水杨酸甲酯、二氢猕猴桃内酯；
其中，气相色谱的操作条件为：色谱柱为DB-5MS，规格为60m×0.25mm×0.25μm；载气为氦气；载气流量为1mL/min；进样温度为280℃；升温程序为：从50℃开始，以3℃/min升至300℃，在300℃保持1min；采用不分流模式；质谱的操作条件为：传输线温度为280℃；EI离子源温度为230℃；四级杆温度为150℃；EI电离能为70eV；扫描模式：选择离子扫描，根据保留时间划分时间段；
(5)通过内标定量法检测出铁观音茶叶青滋香成分的含量。
18.根据权利要求17所述的方法，其中在步骤(2)中所述溶剂为乙醇。
19.根据权利要求17所述的方法，其中在步骤(2)中固体物质和溶剂的配置浓度为0.05～0.8g/mL。
20.根据权利要求17所述的方法，其中在步骤(2)中所述流动相的流速为1～6mL/min。
21.根据权利要求17所述的方法，其中在步骤(2)中每1～6分钟收集得到一个流分。
22.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中在步骤(5)中在内标定量法中内标为丙酸苏合香酯，浓度为10mg/mL，和溶剂为丙酮。
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