CN111184759A - 一种余甘子总皂苷的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种余甘子总皂苷的制备方法,具体涉及一种采用酶法—超声破壁法提取余甘子总皂苷的方法。其处理步骤包括:准备余甘子,将其粉碎,研磨,成为粉末,以料液比1:8加入pH值4.5的柠檬酸‑磷酸氢二钠缓冲液,混匀后按质量加入5~20%的纤维素酶和半纤维素酶混合酶液,50℃酶解1~2h后,4000r/min离心10min,收集上清液,取适量酶法破壁沉淀物,分别以料液比1:8加入温水、40~60%无水乙醇、0.08mol/L pH值为3.8的柠檬酸‑磷酸氢二钠缓冲液,提取60~120min,并于相同条件下进行超声波辅助提取,提取结束后,4000r/min离心10min,取上清液,合并两次上清液,在80℃下干燥,得到余甘子总皂苷。本发明具有高效、溶液有效成分含量较高、抗氧化性较强的优点。
Description
技术领域:
本发明涉及一种余甘子总皂苷的制备方法,属于功能性有效成分提取领域。
背景技术:
余甘子在我国已有2000年的栽培历史,主要分布在云南、贵州、福建、广东、广西、台湾等省区,其中广西西南及西北部分布最多。 余甘子含有丰富的超氧化歧化酶(EUP)、维生素4、多酚类及多糖等活性物质,除此之外还含有丰富的皂苷。皂苷具有防止炎症、抗癌、抗真菌、提高免疫活性等生理活性作用,此外,皂苷也是余甘子回味甘甜的重要呈味成分。丰富的余甘子资源,皂苷的功效使得对其总皂苷提取工艺的研究具有十分重要的现实意义。
本方法采用酶法—超声破壁提取是指通过纤维素酶对植物细胞进行破壁处理。以提取组织中有效成分的一种提取方法。应用酶法提取植物中有效成分,植物经破壁处理后,同一植物的不同组织、部位因细胞破碎,能高度混合均匀,实现了植物内产品的物质基础的均一 ,无高温溶剂提取的工艺,减少了有效成分损失的环节,最大限度地保留原植物的全成分。再结合超声波的空化效应以及机械效应,从而使细胞中的有效成分得以释放直接与溶剂接触并溶解在其中,从而提高有效成分的提取率。
发明内容:
本发明是针对现有技术的不足,旨在提供一种高效性和选择性、操作简便、产率高、副产物少、可工业化实现的制备余甘子总皂苷的方法。
本发明的技术方案按照下列步骤进行:
a. 准备余甘子,将其粉碎,研磨,成为粉末,以料液比1:8加入pH值4.5的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液,匀后按质量加入5~20%的纤维素酶和半纤维素酶混合酶液,50℃酶解1~2h后,4000 r/min 离心 10 min,收集上清液,
b. 取适量酶法破壁沉淀物,分别以料液比1:8加入温水、40~60%的无水乙醇、0.08mol/L pH 值 3.8的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液,提取60~120min,并于相同条件下进行超声波辅助提取。
c. 提取结束后,4000 r/min 离心 10 min,取上清液,合并两次上清液,以80℃下干燥,得到余甘子总皂苷。
2. 步骤a中所述的离心机功率为900W,转速为1000~20000r/min。
3. 步骤b中所述的超声萃取的条件为:频率30KHz,超声温度30~40℃。
4. 步骤c中所述的离心机功率为900W,转速为1000~20000r/min。
本发明的优点在于:
1.本发明采用植物纤维素酶法处理原料,实现了植物破壁,有效成分充分溶出,同时又避免加热,从而可有效避免余甘子总皂苷成分的破坏。
2.本发明采用酶法—超声破壁法提取余甘子总皂苷,具有高效、溶液有效成分含量较高、抗氧化性较强的优点。
下面将结合具体实施方式进一步说明本发明,但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施方式:
实施例1:
准备余甘子,将其粉碎,研磨,成为粉末,以料液比1:8加入pH值4.5的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液,匀后按质量加入5%的纤维素酶和半纤维素酶混合酶液,50℃酶解1h后,4000 r/min 离心 10 min, 收集上清液,取适量酶法破壁沉淀物,分别以料液比1:8加入温水(30℃)、50%无水乙醇、0.08 mol/L pH 值 3.8的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液,提取60 min,并于相同条件下将物料置于30KHz超声波装置中提取,提取结束后,4000 r/min 离心 10 min,取上清液,合并两次上清液,以80℃下干燥, 得到余甘子总皂苷,提取率为85.28%,经UV检测,余甘子总皂苷的含量为90.17%。
实施例2:
准备余甘子,将其粉碎,研磨,成为粉末,以料液比1:8加入pH值4.5的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液,匀后按质量加入15%的纤维素酶和半纤维素酶混合酶液,50℃酶解2h后,4000 r/min 离心 10 min, 收集上清液,取适量酶法破壁沉淀物,分别以料液比1:8加入温水(45℃)、60%无水乙醇、0.08 mol/L pH 值 3.8的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液,提取80 min,并于相同条件下将物料置于30KHz超声波装置中提取,提取结束后,4000 r/min 离心 10 min,取上清液,合并两次上清液,以80℃下干燥, 得到余甘子总皂苷,提取率为87.35%,经UV检测,余甘子总皂苷的含量为93.02%。
实施例3:
准备余甘子,将其粉碎,研磨,成为粉末,以料液比1:8加入pH值4.5的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液,匀后按质量加入20%的纤维素酶和半纤维素酶混合酶液,50℃酶解1h后,4000 r/min 离心 10 min, 收集上清液,取适量酶法破壁沉淀物,分别以料液比1:8加入温水(50℃)、40%无水乙醇、0.08 mol/L pH 值 3.8的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液,提取120 min,并于相同条件下将物料置于30KHz超声波装置中提取,提取结束后,4000 r/min 离心 10min,取上清液,合并两次上清液,以80℃下干燥, 得到余甘子总皂苷,提取率为88.21%,经UV检测,余甘子总皂苷的含量为89.84%。
Claims (4)
1.一种余甘子总皂苷的制备方法,其特征在于:
a. 准备余甘子,将其粉碎,研磨,成为粉末,以料液比1:8加入pH值4.5的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液,匀后按质量加入5~20%的纤维素酶和半纤维素酶混合酶液,50℃酶解1~2h后,4000 r/min 离心 10 min,收集上清液,
b. 取适量酶法破壁沉淀物,分别以料液比1:8加入温水、40~60%无水乙醇、0.08 mol/LpH 值 3.8的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液,提取60~120min,并于相同条件下进行超声波辅助提取;
c. 提取结束后,4000 r/min 离心10 min,取上清液,合并两次上清液,以80℃下干燥,得到余甘子总皂苷。
2.根据权利要求1所述的一种余甘子总皂苷的制备方法,其特征在于,步骤a中所述的离心机功率为900W,转速为1000~20000r/min。
3.根据权利要求1所述的一种余甘子总皂苷的制备方法,其特征在于,步骤b中所述的超声萃取的条件为:频率30KHz,超声温度30~40℃。
4.根据权利要求1所述的一种余甘子总皂苷的制备方法,其特征在于,步骤c中所述的离心机功率为900W,转速为1000~20000r/min。
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CN111616362A (zh) * | 2020-06-29 | 2020-09-04 | 山东省经济林管理站 | 一种核桃雄花抗氧化剂及其制备方法和应用 |
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