CN111182901A - 用于在肥厚型心肌病的治疗中使用的玛伐凯泰 - Google Patents

Abstract

提供了用于治疗肥厚型心肌病和舒张功能障碍的方法。

Description

用于在肥厚型心肌病的治疗中使用的玛伐凯泰

相关申请的交叉参考

本申请要求2017年8月4日提交的美国临时申请序列号62/541,591；2017年11月10日提交的美国临时申请序列号62/584,537；2018年3月7日提交的美国临时申请序列号62/639,922；以及2018年5月15日提交的美国临时申请序列号62/671,585的优先权权益，将所述临时申请的整个内容通过引用并入本文。

背景技术

遗传性(可遗传)肥厚型心肌病(HCM)包括一组高度渗透性、单基因、常染色体显性的心肌病。HCM由促成心肌的功能单元即肌节的蛋白质中的任一种中的超过1,000个已知点突变中的一个或多个造成。在一般人群中，发现500名个体中约1名具有由其他已知原因(例如，高血压或心瓣病)无法解释的左心室肥厚，并且一旦排除了其他可遗传原因(例如，溶酶体贮积病)、代谢原因或浸润原因，这些个体中有许多可能显示出患有HCM。

用于HCM的医学疗法仅限于症状的治疗并且不能解决正常肌节功能中的疾病--破裂的根本基础原因。目前可用的疗法在缓解症状方面是不定地有效性的，但典型地显示出随着疾病持续时间增加，功效降低。因此，凭经验用β-阻滞剂、非二氢吡啶钙通道阻滞剂和/或双异丙吡胺管理患者。这些药剂没有一种带有用于治疗HCM的标记指示，并且基本上没有严格的临床试验证据可用于指导它们的使用。加重该令人遗憾的情况是多年来未鉴定出用于HCM的新的医学疗法的事实。在大约60％的HCM患者中，左心室流出道变得阻塞，阻碍了血液流动并且产生LV腔与主动脉之间的压力梯度。对于血流动力学上显著的流出道阻塞(梯度≥50mmHg)的患者，可以利用肌切除术或间隔酒精消融术来减轻血液动力学阻塞，但伴有显著的临床发病率和死亡率。提供了弥补对于HCM和相关心脏病症的改善治疗的长期需要的新的治疗剂和方法。

发明内容

在一个方面，提供了治疗肥厚型心肌病(HCM)的方法。所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的如本文所述的化合物1，其中所述药学有效量为约2mg至50mg、或约5mg至30mg的总日剂量。

在另一个方面，本文提供了治疗心肌舒张功能障碍的方法。所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的如本文所述的化合物1，其中所述药学有效量为约2mg至50mg、或约5mg至30mg的总日剂量。

在另一个方面，本文提供了在有需要的个体中治疗肥厚型心肌病的方法，所述方法包括以有效实现且维持200至750ng/mL的化合物1的血液血浆浓度的量向所述个体施用化合物1。在一些实施方案中，将化合物1的血液血浆浓度实现且维持在350至700ng/mL下。在一些实施方案中，所述实现且维持化合物1的所需血液血浆浓度的有效量为2至15mg的化合物1。在一些实施方案中，所述实现且维持化合物1的所需血液血浆浓度的有效量为2.5至15mg的化合物1。在一些实施方案中，所述实现且维持化合物1的所需血液血浆浓度的有效量为2至20mg的化合物1。在一些实施方案中，所述实现且维持化合物1的所需血液血浆浓度的有效量为2.5至20mg的化合物1。在一些实施方案中，在初始施用后基于所测定的血液血浆浓度调整化合物1的所述日剂量。在一些实施方案中，HCM为阻塞性HCM(oHCM)。在一些实施方案中，HCM为非阻塞性HCM。

附图说明

图1示出了TTE分析群体中的静息LVEF(％；2DE)。

图2A示出了相对于化合物1(MYK-461)的血浆浓度，静息LVEF(2DE)的自基线的变化。

图2B示出了相对于化合物1(MYK-461)的血浆浓度，静息LVOT-VTI(左心室流出道-速度时间积分，cm)的自基线的变化。

图3绘示了研究方案。附图中使用的缩写是：CPET，心肺运动测试；D，天；EOS，研究结束；HSE，血流动力学应激超声心动描记术；LVEF，左心室射血分数；PK，药代动力学样品；QD，每日一次；RE/V，静息超声心动描记术/Valsalva；W，周。

图4示出了运动后LVOT梯度随时间推移自基线的变化。

图5示出了接受化合物1疗法的受试者中在第0、4、和12周的应激射血分数(EF)百分比。

图6示出了在第0周与第12周之间接受化合物1(10、15、或20mg)的受试者中的静息LVOT梯度。

图7是静息LVOT梯度相对于化合物1浓度的绘图。

图8是静息左心室射血分数(LVEF)(％)相对于化合物1浓度的绘图。

图9是在研究的每个周测量的平均静息LVOT梯度的绘图。在第12周后停止化合物1的施用。

图10是在研究的每个周测量的平均静息左心室射血分数(LVEF)(％)的绘图。在第12周后停止化合物1的施用。

图11说明了当在心肺运动测试期间测量耗氧量(mL/kg/min)和动脉乳酸(mM/L)时可以获得的一类绘图。

图12示出了在心肺运动测试(CPET)期间在基线处(第0周，实心条)和在第12周后(虚线条)测量的峰值VO₂(pVO₂)。

图13示出了在心肺运动测试(CPET)期间在基线处(第0周，实心条)和在第12周后(虚线条)测量的峰值循环动力。

图14是pVO₂绝对变化相对于左心室射血分数(LVEF)绝对变化的绘图。

图15是接受化合物1的受试者中在第0、4、8和12周的N末端B型利尿钠肽前体(NT-proBNP)浓度(pg/mL)的绘图。

图16是N末端B型利尿钠肽前体(NT-proBNP)浓度(pg/mL)相对于化合物1的浓度(ng/mL)的绘图。

图17示出了在基线(第0周)处、在化合物1施用12周后、以及在第16周(化合物1施用12周和化合物1清除4周)后的受试者的纽约心脏协会(NYHA)功能等级。

图18示出了在所指示时间(第1天-第12周)处每名受试者的平均呼吸困难症状评分。化合物1施用至第12周。

图19是在Pioneer-HCM-B试验的第4、12和16周(施用化合物1 12周，清除4周)的平均运动后静息LVOT梯度(mm Hg)的绘图。

图20是在Pioneer-HCM-B试验的第1-8、12和16周(施用化合物1 12周，清除4周)的静息LVEF(％)变化的绘图。

图21说明了在Pioneer-HCM-B试验期间第12周后个体中NYHA功能等级的改善和化合物1清除4周后改善的逆转。

图22说明了在整个Pioneer-HCM-B试验中呼吸困难峰值的快速改善。还显示出，在化合物1清除4周后改善逆转。

图23说明了在Pioneer-HCM-B试验期间在第12周时峰值VO₂的改善。

图24是静息LVOT(mmHg)随化合物1浓度变化的绘图。群组B是空心正方形并且群组A是实心方形。

图25示出了用于确认在阻塞性肥厚型心肌病(oHCM)患者中的安全性和功效的关键试验的研究设计。

具体实施方式

本文描述了在受试者中用于治疗肥厚型心肌病(HCM)的方法。所述方法包括在治疗患者方面具有很大功效并且在患者中耐受性良好的特定给药方案。

定义

虽然本文中已示出并描述了本发明的各种实施方案和方面，但对本领域技术人员而言将显而易见的是，仅通过实例的方式提供此类实施方案和方面。在不脱离本发明的情况下，本领域技术人员现将会想到众多变化、改变和替代。应理解，本文所述的本发明的实施方案的各种替代方案可用于实践本发明。

本文使用的章节标题只是出于组织的目的，而不应解释为限制所描述的主题。本申请中引用的所有文件或文件的部分，包括但不限于专利、专利申请、文章、书籍、手册和论文，均出于任何目的特此明确地以引用的方式整体并入本文。

除非另有定义，否则本文使用的技术和科学术语具有与本领域普通技术人员通常所理解的相同的意义。参见例如Singleton等人,D_{ICTIONARY OF} M_{ICROBIOLOGY AND} M_OLECULAR B_IOLOGY,第2版,J.Wiley&Sons(New York,NY 1994)；Sambrook等人,M_OLECULAR CLONING,A LABORATORYMANUAL,Cold Springs Harbor Press(Cold Springs Harbor,NY 1989)。与本文所述的类似或等同的任何方法、设备和材料可被用于实践本发明。提供以下定义以有利于理解本文中频繁使用的某些术语，并且不意味着限制本公开的范围。

如本文所用，术语“一个/种(a或an)”意指一个/种或多个/种。

术语“包含(comprise)”、“包括(include)”和“具有”及其衍生词在本文中可互换地用作广泛的开放式术语。例如，使用“包含”、“包括”或“具有”意指包含、具有、或包括任何元素，所述元素不仅是含有动词的条款的主题所涵盖的元素。

如本文所用，术语“约”意指包括指定值的值范围，本领域普通技术人员将合理地认为所述值范围与指定值相似。在一些实施方案中，术语“约”意指在使用本领域通常可接受的测量值的标准偏差内的平均值。在一些实施方案中，约意指延伸至指定值的+/-10％的范围。在一些实施方案中，约意指指定值。

如本文所用，“治疗(treatment)”或“治疗(treating)”、或“缓和”或“改善”在本文中可互换使用。这些术语是指用于获得有益或希望的结果(包括但不限于治疗益处)的途径。所谓治疗益处意指所治疗的基础病症的根除或改善。此外，治疗益处是通过与基础病症相关的一种或多种生理症状的根除或改善以使得在患者中观察到改善而实现，尽管患者仍可能被基础病症困扰。治疗包括通过施用组合物使得疾病的临床症状发展缓慢；遏制疾病，即使得疾病的临床症状减少；抑制疾病，即通过在症状最初出现后施用组合物来阻止临床症状的发展；和/或减轻疾病，即通过在其最初出现后施用组合物来使得临床症状消退。例如，本文所述的某些方法通过减少或降低HCM的发生率或进展来治疗肥厚型心肌病(HCM)；或通过减少HCM的症状来治疗HCM。指示HCM的症状、或测试结果将是已知的或可以由本领域普通技术人员确定，并且可以包括但不限于呼吸急促(尤其是在运动期间)、胸痛(尤其是在运动期间)、晕厥(尤其是在运动期间或刚运动后)、心跳快速、颤动或悸动感、心房和心室性心律不齐、心脏杂音、左心室肥厚但未扩张、心肌增厚、左心室壁增厚、跨左心室流出道(LVOT)压力梯度升高、运动后LVOT梯度升高和高左心室射血分数(LVEF)。

“有效量”或“药学有效量”为足以达成所述目的(例如，实现施用其所要实现的作用、治疗疾病、降低酶活性、减少疾病或病症的一个或多个症状、降低细胞中的病毒复制)的量。“有效量”的实例为足以促进疾病的一个或多个症状的治疗或减少的量，其也可被称为“治疗有效量”。一个或多个症状的“减少”(以及该短语的语法等同物)意指一个或多个症状的严重程度或频率的降低、或一个或多个症状的消除。功效还可以表达为“倍数”增加或减少。例如，治疗有效量可以具有相对于对照至少1.2倍、1.5倍、2倍、5倍，或更多的作用。

“患者”或“受试者”或“有需要的受试者”是指罹患或易患可通过使用本文提供的方法来治疗的疾病或病症的活生物体。所述术语不一定指示受试者已被诊断患有特定疾病，但典型地是指处于医疗监督下的个体。非限制性实例包括人、其他哺乳动物、牛、大鼠、小鼠、狗、猫、猴、山羊、绵羊、牛、鹿、以及其他非哺乳动物。在一些实施方案中，患者、受试者或有需要的受试者是人。

肥厚型心肌病(HCM)在临床上定义为在无已知原因(如压力超负荷、全身性疾病、或浸润性过程)情况下的无法解释的左心室(LV)肥厚。HCM的表型特征是心肌过度收缩伴有LV顺应性降低，所述LV顺应性降低在临床上表现为心室腔大小减小、射血分数常常超常、壁厚增加和舒张功能障碍。HCM患者具有的一些症状和体征包括但不限于呼吸急促(尤其是在运动期间)、胸痛(尤其是在运动期间)、晕厥(尤其是在运动期间或刚运动后)、心跳快速、颤动或悸动感、和心脏杂音。

阻塞性HCM(oHCM)定义为在静息时、在Valsalva动作期间或紧接在此之后、或运动后，个体中至少30mmHg(即30mm Hg或更高)的跨LVOT压力梯度。在一些实施方案中，患有oHCM的个体具有至少40mm Hg、45mm Hg或50mm Hg的LVOT压力梯度。在一些实施方案中，在静息时测量个体中跨LVOT压力梯度。在一些实施方案中，在进行Valsalva动作期间或紧接在此之后测量个体中跨LVOT压力梯度。在一些实施方案中，在运动后测量个体中跨LVOT的压力梯度。阻塞程度和与心力衰竭并存的临床症状表现是侵入性干预的主要标准。oHCM可能导致心力衰竭、心律不齐和/或死亡的严重症状。阻塞缓解改善症状和功能。

如本文所用，“Valsalva梯度”是指在个体进行Valsalva动作的同时，该个体中跨LVOT压力梯度。

舒张功能障碍存在或是一系列疾病的重要特征，所述疾病包括但不限于肥厚型心肌病(HCM)、射血分数保留型心力衰竭(HFpEF)–包括主动松弛障碍和室腔僵硬障碍(糖尿病性HFpEF)、扩张型心肌病(DCM)、缺血性心肌病、心脏移植同种异体移植物血管病、限制性心肌病–包括炎症性亚组(例如Loefllers和EMF)、浸润性亚组(例如淀粉样蛋白、类肉瘤和XRT)、储存亚组(例如、血色素沉着病、法布里(Fabry)病和糖原储存病)、特发性/遗传性亚组(诸如Trop I(β肌球蛋白HC)、Trop T(α肌动蛋白)和结蛋白相关(通常包括骨骼肌))、先天性心脏病亚组(包括压力超负荷的RV、法洛四联症(Tetrology of Fallot)(术前和术后早期舒张功能障碍、术后收缩功能障碍)和肺动脉狭窄)和心脏瓣膜病(例如主动脉瓣狭窄–包括老年AVR/TAVR后和先天形式)。

方法

在一个方面，本文提供了治疗肥厚型心肌病(HCM)的方法。所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的具有下式的化合物1：

或其药学上可接受的盐，其中治疗有效量为约2mg至50mg的总日剂量。在一些实施方案中，日剂量为约1mg至50mg。在一些实施方案中，化合物1的总日剂量为约2mg至30mg、10mg至20mg、2mg至10mg、或2mg至5mg。在一些实施方案中，化合物1的总日剂量为2.5mg至15mg。在一些实施方案中，化合物1的总日剂量为5mg至15mg。在一些实施方案中，化合物1的总日剂量为2mg至15mg。在一些实施方案中，化合物1的总日剂量为2.5mg至15mg。在一些实施方案中，化合物1的总日剂量为1mg至15mg。在一些实施方案中，所述实现且维持化合物1的所需血液血浆浓度的有效量为2.5至20mg的化合物1。

在一个实施方案中，本发明涉及在有需要的受试者中治疗肥厚型心肌病(HCM)。在另一个实施方案中，所述治疗涉及受试者中的阻塞性HCM。在另一实施方案中，所述治疗包括向受试者施用治疗有效量的化合物1。在又另一个实施方案中，给予治疗有效量，以使得所述受试者中化合物1的血浆浓度在225-600ng/mL之间。在一些实施方案中，给予治疗有效量，以使得所述受试者中化合物1的血浆浓度在350-700ng/mL之间。在一些实施方案中，化合物1的血液血浆浓度在150-600ng/mL之间。在一些实施方案中，化合物1的血液血浆浓度在200-400ng/mL之间。在另一个实施方案中，所述治疗包括向受试者施用化合物1，由此受试者内的LVOT降低而没有LVEF的显著变化。在又另一个实施方案中，所述治疗包括向所述受试者同时施用除化合物1之外的一种或多种β阻滞剂。

患有肥厚型心肌病的个体可以是有症状的或无症状的。一般而言，有症状的个体是表现出证据或具有表明其心脏病症存在的表现(诸如对体力活动的限制)的那些个体，而没有经历这些限制的个体被认为是无症状的。作为非限制性实例，属于NYHA II类、III类或IV类的个体被认为是有症状的个体，并且属于NYHA I类的个体被认为是无症状的。在一些实施方案中，在本文所述的方法中治疗的个体患有症状性肥厚型心肌病。在一些实施方案中，在本文所述的方法中治疗的个体患有无症状性肥厚型心肌病。

在一些实施方案中，受试者在开始用化合物1治疗前至少一至八周的时段内没有接受β-阻滞剂疗法。在一些实施方案中，受试者在开始用化合物1治疗前至少一周、两周、三周、或四周的时段内没有接受β-阻滞剂疗法。在一些实施方案中，受试者在开始用化合物1治疗前至少两周的时段内没有接受β-阻滞剂疗法。在一些实施方案中，受试者在开始用化合物1治疗前至少三周的时段内没有接受β-阻滞剂疗法。在一些实施方案中，受试者在开始用化合物1治疗前至少四周的时段内没有接受β-阻滞剂疗法。

在一些实施方案中，化合物1与β-阻滞剂疗法组合施用。在这种组合疗法中，β-阻滞剂疗法和化合物1通常根据标签说明书施用。

在一些实施方案中，受试者在开始用化合物1治疗前至少一至八周的时段内没有接受Ca通道阻滞剂疗法。在一些实施方案中，受试者在开始用化合物1治疗前至少一周、两周、三周、或四周的时段内没有接受Ca通道阻滞剂疗法。在一些实施方案中，受试者在开始用化合物1治疗前至少两周的时段内没有接受Ca通道阻滞剂疗法。在一些实施方案中，受试者在开始用化合物1治疗前至少三周的时段内没有接受Ca通道阻滞剂疗法。在一些实施方案中，受试者在开始用化合物1治疗前至少四周的时段内没有接受Ca通道阻滞剂疗法。

在一些实施方案中，化合物1与Ca通道阻滞剂疗法组合施用。在这种组合疗法中，Ca通道阻滞剂疗法和化合物1通常根据标签说明书施用。

在本文所述的方法中，化合物1与附加药物的共同施用可能是希望的。在一些实施方案中，附加药物选自由β-阻滞剂疗法和Ca通道阻滞剂疗法组成的组。

在一些实施方案中，由本文提供的方法治疗的HCM是阻塞性HCM(oHCM)。

在一些实施方案中，oHCM的特征为在静息时所述受试者中具有至少30mmHg(例如，约30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60mmHg或更高)跨左心室流出道(LVOT)压力梯度。

在一些实施方案中，oHCM的特征为在静息时所述受试者中具有至少35mmHg(例如，约35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60mmHg或更高)跨左心室流出道(LVOT)压力梯度。

在一些实施方案中，oHCM的特征为在静息时所述受试者中具有至少40mmHg(例如，约40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60mmHg或更高)跨左心室流出道(LVOT)压力梯度。

在一些实施方案中，oHCM的特征为在静息时所述受试者中具有至少45mmHg(例如，约45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60mmHg或更高)跨左心室流出道(LVOT)压力梯度。

在一些实施方案中，oHCM的特征为在静息时所述受试者中具有至少50mmHg(例如，约50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60mmHg或更高)跨左心室流出道(LVOT)压力梯度。

在一些实施方案中，oHCM的特征为在进行Valsalva动作期间或紧接在此之后所述受试者中具有至少30mmHg(例如，约30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60mmHg或更高)跨左心室流出道(LVOT)压力梯度。

在一些实施方案中，oHCM的特征为在进行Valsalva动作期间或紧接在此之后所述受试者中具有至少35mmHg(例如，约35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60mmHg或更高)跨左心室流出道(LVOT)压力梯度。

在一些实施方案中，oHCM的特征为在进行Valsalva动作期间或紧接在此之后所述受试者中具有至少40mmHg(例如，约40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60mmHg或更高)跨左心室流出道(LVOT)压力梯度。

在一些实施方案中，oHCM的特征为在进行Valsalva动作期间或紧接在此之后所述受试者中具有至少45mmHg(例如，约45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60mmHg或更高)跨左心室流出道(LVOT)压力梯度。

在一些实施方案中，oHCM的特征为在进行Valsalva动作期间或紧接在此之后所述受试者中具有至少50mmHg(例如，约50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60mmHg或更高)跨左心室流出道(LVOT)压力梯度。

在一些实施方案中，oHCM的特征为在运动后所述受试者中具有至少30mmHg(例如，约30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60mmHg或更高)跨左心室流出道(LVOT)压力梯度。

在一些实施方案中，oHCM的特征为在运动后所述受试者中具有至少35mmHg(例如，约35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60mmHg或更高)跨左心室流出道(LVOT)压力梯度。

在一些实施方案中，oHCM的特征为在运动后所述受试者中具有至少40mmHg(例如，约40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60mmHg或更高)跨左心室流出道(LVOT)压力梯度。

在一些实施方案中，oHCM的特征为在运动后所述受试者中具有至少45mmHg(例如，约45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60mmHg或更高)跨左心室流出道(LVOT)压力梯度。

在一些实施方案中，oHCM的特征为在运动后所述受试者中具有至少50mmHg(例如，约50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60mmHg或更高)跨左心室流出道(LVOT)压力梯度。

在一些实施方案中，化合物1口服施用。在一些实施方案中，化合物1以包含2mg、2.5mg、5mg、7.5mg、10mg、15mg、20mg、或25mg的化合物1的单位剂型施用。在一些实施方案中，化合物1以单剂量、分开剂量、或连续剂量每日施用。

在一些实施方案中，化合物1以2.5、5、10、15、20或25mg的日剂量量每日施用一次。在一些实施方案中，化合物1每日施用两次。在一些实施方案中，化合物1每日施用三次。

在一些实施方案中，化合物1每日施用，持续至少十二周。在一些实施方案中，化合物1每日施用，持续至少十周。在一些实施方案中，化合物1每日施用，持续至少八周。在一些实施方案中，化合物1每日施用，持续至少六周。在一些实施方案中，化合物1每日施用，持续至少四周。在一些实施方案中，化合物1每日施用，持续至少两周。

在一些实施方案中，化合物1每日施用，持续至少7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83或84天。

在一些实施方案中，治疗有效量足以在施用化合物后将受试者中的运动后或静息LVOT梯度降低至小于30mmHg(例如，约29、28、27、26、25、24、23、22、21、20、19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5mmHg)。在一些实施方案中，治疗有效量足以在施用化合物后将受试者中的运动后梯度LVOT降低至小于10mmHg(例如，约9、8、7、6、5mmHg)。运动后(应激)梯度LVOT可以通过本领域中已知的任何方法测量。

在一些实施方案中，化合物1的治疗有效量足以改善、稳定化或延迟受试者的纽约心脏协会(NYHA)功能分级的恶化。NYHA功能分级将心力衰竭症状的严重程度分级为四个功能等级之一。NYHA功能分级在临床实践和研究中被广泛使用，因为它提供了可用于评估对治疗的应答和指导管理的严重程度的标准描述。基于症状的严重程度和体力活动进行的NYHA功能分级：

I级：体力活动不受限制。日常的体力活动不会引起过度气喘、疲倦、或心悸。

II级：体力活动稍微受限制。静息时舒适，但日常的体力活动导致过度气喘、疲倦、或心悸。

III级：体力活动明显受限制。静息时舒适，但轻于日常的体力活动导致过度气喘、疲倦、或心悸。

IV级：进行任何体力活动都会出现不适。静息时可能出现症状。如果进行任何生理活动，则不适增加。

化合物1的施用可用于治疗心力衰竭的所有NYHA功能等级，但特别是NYHA功能分级系统的II-IV级。

在一些实施方案中，施用治疗有效量的化合物1降低受试者的纽约心脏协会(NYHA)功能分级。在一些实施方案中，NYHA功能分级从IV级降低至III级、从IV级降低至II级、或从IV级降低至I级。在一些实施方案中，NYHA功能分级从III级降低至II级。在一些实施方案中，NYHA功能分级从III级降低至I级。在一些实施方案中，NYHA功能分级从II级降低至I级。

在一些实施方案中，治疗有效量为约2mg至约10mg(例如，约2、2.5、3、4、5、6、7、7.5、8、9、10mg/天)的总日剂量。在一些实施方案中，治疗有效量为约5mg至约25mg(例如，约5、6、7、7.5、8、9、10、11、12、12.5、13、14、15、16、17、17.5、18、19、20、21、22、23、24或25mg/天)的总日剂量。在一些实施方案中，治疗有效量为约15mg至约20mg(例如，约15、16、17、18、19、或20mg/天)的总日剂量。在一些实施方案中，治疗有效量为约2mg的总日剂量。在一些实施方案中，治疗有效量为约2.5mg的总日剂量。在一些实施方案中，治疗有效量为约5mg的总日剂量。在一些实施方案中，治疗有效量为约7.5mg的总日剂量。在一些实施方案中，治疗有效量为约10mg的总日剂量。在一些实施方案中，治疗有效量为约12.5mg的总日剂量。在一些实施方案中，治疗有效量为约15mg的总日剂量。在一些实施方案中，治疗有效量为约20mg的总日剂量。在一些实施方案中，治疗有效量为约25mg的总日剂量。

在一些实施方案中，根据个体患者需求调整总日剂量。例如，可以在开始化合物1疗法1至8周后(例如1、2、3、4、5、6、7、8周、或之间的任何天数后)根据受试者的应答概况调整总日剂量。在一些实施方案中，当受试者的纽约心脏协会(NYHA)功能分级降低时，减少总日剂量。作为该减少的非限制性实例，在一些实施方案中，当受试者的NYHA功能分级从III级降低至I级、从III级降低至II级、或从II级降低至I级时，将总日剂量从5mg减少至2.5mg。在一些实施方案中，当受试者的纽约心脏协会(NYHA)功能分级不降低或恶化时，增加总日剂量。作为该增加的非限制性实例，在一些实施方案中，将总日剂量从5mg增加至7.5mg或10mg或15mg。

在一些实施方案中，用于调整总日剂量的个体受试者需求是受试者的静息左心室射血分数和静息左心室流出道(LVOT)峰值梯度。例如，在一些实施方案中，总日剂量为5mg，并且当受试者的静息左心室射血分数(LVEF)为≥55％并且静息左心室流出道(LVOT)峰值梯度为≥30mm Hg时，增加所述剂量。在一些实施方案中，当受试者的静息左心室射血分数(LVEF)为≥55％并且静息左心室流出道(LVOT)峰值梯度为≥30mm Hg至<50mm Hg时，将总日剂量增加至7.5mg。在一些实施方案中，当受试者的静息左心室射血分数(LVEF)为≥55％并且静息左心室流出道(LVOT)峰值梯度为≥50mm Hg时，将总日剂量增加至10mg。在另外的非限制性实例中，在一些实施方案中，总日剂量为5mg，并且当受试者的静息左心室射血分数(LVEF)为54％-46％并且静息左心室流出道(LVOT)峰值梯度为≥50mm Hg时，将所述剂量增加至7.5mg。

在一些实施方案中，可以根据受试者的左心室射血分数(LVEF)水平调整治疗有效量。

在一些实施方案中，本文提供的方法还包括在施用化合物之前测量受试者中的左心室射血分数(LVEF)，从而提供第一LVEF值(基线)。在一些实施方案中，本文提供的方法还包括在开始化合物后某一时间(例如，1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、或28天)测量受试者中的LVEF，从而提供第二LVEF值，并且计算第二LVEF值相比于第一LVEF值的变化百分比。因此，在一些实施方案中，根据LVEF的变化百分比调整总日剂量。

在一些实施方案中，在施用化合物后4周测量第二LVEF。在一些实施方案中，当所述变化百分比小于10％(例如，约9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％或更小)时，将总日剂量增加10mg。在一些实施方案中，当所述变化百分比为10％或更高但低于15％(例如，约10％、11％、12％、13％、或14％)时，将总日剂量增加5mg。在一些实施方案中，当所述变化百分比为15％或更高但低于20％(例如，约15％、16％、17％、18％、或19％)时，将总日剂量保持不变。在一些实施方案中，当所述变化百分比为20％或更高(例如，约20％、21％、22％、23％、24％、25％、26％、27％、28％、29％、30％或更高)时，将总日剂量减少5mg。

在一些实施方案中，可以根据受试者的重量调整治疗有效量。在一些实施方案中，本文提供的方法还包括在施用化合物1之前测量受试者的体重。在一些实施方案中，当所述受试者具有60kg或更小的体重时，初始日剂量为约10mg。在一些实施方案中，当所述受试者具有超过60kg的体重时，初始日剂量为约15mg。在一些实施方案中，化合物以该日剂量的治疗有效量施用，持续至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、或28天。

在一些实施方案中，当所述受试者具有60kg或更小的重量时，日剂量为约10mg，持续治疗的前四周。在一些实施方案中，当所述受试者具有超过60kg的重量时，日剂量为约15mg，持续治疗的前四周。

在本文所述的每一种方法中，在一些实施方案中，个体体重为至少45kg。

在一些实施方案中，可以根据化合物1的血浆浓度调整治疗有效量。在一些实施方案中，所述方法还包括在施用化合物1后至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、或28天测量化合物1的血浆浓度。在一些实施方案中，化合物1的日剂量的治疗有效量可以如本文所述那样调整。

在一些实施方案中，可以基于‘谷’测量调整治疗有效量。‘谷’测量(浓度或任何药效动力学测量)是指临下一个剂量之前进行的测量。例如，对于每日一次(QD)给药，这些测量每约24小时临患者服用其下一剂量(典型地片剂或胶囊)之前发生。出于药代动力学原因，将这些测量用作标准化评估和最小化变化性的一种方式。当个体“实现且维持”化合物1的一定血液血浆浓度时，个体的谷测量值不低于参考的最小水平或不高于参考的最大水平。

还可以基于个体代谢化合物1的能力做出对剂量的调整。化合物1的慢代谢者可以包括具有CYP 2C19或CYP 3A4酶的突变形式的个体。可以向化合物1的慢代谢者施用较低的起始剂量并且/或者可以将所述剂量调整至更低的量，诸如1mg。例如，在一些实施方案中，向化合物1的慢代谢者施用2.5mg的初始剂量并且如果个体血浆中化合物1的谷测量值高于所希望的最大水平，则可以将所述剂量向下调整至1mg。在一些实施方案中，向化合物1的慢代谢者施用1mg的初始剂量。在一些实施方案中，化合物1的慢代谢者为日本人后裔。

在一些实施方案中，本文的方法进一步包括在施用后两周测量化合物1的血浆浓度。

在一些实施方案中，受试者在治疗之前具有15mm或更厚(例如，约15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49mm或更厚)的左心室壁厚。

在一些实施方案中，受试者在治疗之前具有约18至约37kg/m²的体质指数(BMI)。在一些实施方案中，受试者在治疗之前具有约18至约50kg/m²或更大(例如，约18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50kg/m²)的体质指数(BMI)。

在一些实施方案中，受试者在治疗之前具有55％或更高(例如，55％、56％、57％、58％、59％、60％、61％、62％、63％、64％、65％、66％、67％、68％、69％、70％、71％、72％、73％、74％、75％、76％、77％、78％、79％、或80％或更高)的LVEF。

在一些实施方案中，受试者在治疗之前具有30mmHg或更高(例如，约30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、或80mmHg或更高)的LVOT梯度。

在一些实施方案中，受试者在治疗之前具有50mmHg或更高(例如，约50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、或80mmHg或更高)的运动后LVOT梯度。

在另一个方面，本文提供了在有需要的受试者中治疗心肌舒张功能障碍的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的具有下式的化合物1：

或其药学上可接受的盐，其中所述治疗有效量为约2mg至50mg的总日剂量。

在一些实施方案中，治疗有效量为约2mg至30mg的总日剂量。在一些实施方案中，治疗有效量为约2mg的总日剂量。在一些实施方案中，治疗有效量为约10mg至15mg的总日剂量。

需要针对舒张功能障碍进行治疗的受试者包括来自特征在于非阻塞性肥厚型心肌病(非-o HCM)、的患者群体的受试者、或特征在于射血分数保留型心力衰竭(HFpEF)的受试者。需要针对舒张功能障碍进行治疗的受试者包括表现出如通过超声心动描记术测量的左心室僵硬或如通过心脏磁共振测量的左心室僵硬的受试者。

在一些实施方案中，有需要的受试者来自特征在于HFpEF的患者群体。在一些实施方案中，患有HFpEF的受试者具有≥50％的射血分数并且具有异常舒张功能的证据。异常舒张功能包括受损的左心室松弛性、充盈、舒张扩张性、或僵硬度。这些特性可以使用超声心动描记术测量。在一些实施方案中，当满足以下超声心动描记术值中的至少一个时，认为受试者患有异常舒张功能：间隔e’<7cm/s；侧壁e’<10cm/s，平均E/e’比率>14；LA容积指数>34mL/m²；峰值TR速度>2.8m/s。在一些实施方案中，当满足以上列出的值中的至少三个时，认为受试者患有异常舒张功能。

在一些实施方案中，有需要的受试者表现出如通过超声心动描记术测量的左心室僵硬。当满足以下特征中的至少一个时，认为受试者患有如通过超声心动描记术测量的左心室僵硬：二尖瓣E/A比率>0.8；间隔e’<7cm/s；侧壁e’<10cm/s，平均值E/e’≥14；LA容积指数>34mL/m²；峰值TR速度>2.8m/s。在一些实施方案中，当满足以上列出的值中的至少三个时，认为受试者患有左心室僵硬。

用于使用超声心动描记术诊断舒张功能障碍的另外确定因子描述于J Am SocEchocardiogr.29(4):277-314(2016)中，出于所有目的将所述文献的内容并入本文。

在一些实施方案中，有需要的受试者表现出如通过心脏磁共振测量的左心室僵硬。使用心脏磁共振来测定峰值充盈率、至峰值充盈时间、和峰值舒张应变率。因此，在一些实施方案中，当满足以下特征中的至少一个时，受试者患有如通过心脏磁共振测量的左心室僵硬：异常的峰值充盈率、至峰值充盈时间、或峰值舒张应变率。

患有舒张功能障碍的受试者还可以显示出血液中生物标记物的增加水平。例如，在患有舒张功能障碍的个体的血液中脑钠肽(BNP)或N末端脑钠肽前体(NT-pro BNP)以升高的水平存在。因此，在一些实施方案中，有需要的受试者表现出脑钠肽(BNP)或N末端脑钠肽前体(NT-pro BNP)的升高血清血液水平。在一些实施方案中，当浓度为至少35、45、55、65、75、85、95、100、105、115pg/mL时，受试者的BNP的血清血液水平是升高的。在一些实施方案中，当浓度为至少35pg/mL时，受试者的BNP的血清血液水平是升高的。在一些实施方案中，当浓度为至少85pg/mL时，受试者的BNP的血清血液水平是升高的。在一些实施方案中，当pro-NT BNP的浓度为至少95、105、115、125、135、145、155、165、或175pg/mL时，受试者的pro-NT BNP的血清血液水平是升高的。在一些实施方案中，当浓度为至少125pg/mL时，受试者的pro-NT BNP的血清血液水平是升高的。在一些实施方案中，当浓度为至少155pg/mL时，受试者的pro-NT BNP的血清血液水平是升高的。

本领域技术人员将认识到，可以从体内的多个不同位置获取血液样品，手臂和手指是最常见的两个位置。在一些实施方案中，血液从受试者的手臂抽取。

在一些方面，治疗肥厚型心肌病的方法包括在治疗过程期间实现且维持化合物1的特定血液血浆浓度。例如，在一些实施方案中，治疗HCM的方法包括实现且维持200至750ng/mL的化合物1的血液血浆浓度。在一些实施方案中，化合物1的血液血浆浓度为350至700ng/mL。

实现且维持所需血液血浆浓度的化合物1的量将根据个体而变化。在一些实施方案中，实现且维持化合物1的所需血液血浆浓度的施用量为2至15mg。在一些实施方案中，实现且维持化合物1的所需血液血浆浓度的施用量为2.5至15mg。在一些实施方案中，实现且维持化合物1的所需血液血浆浓度的施用量为5mg。在一些实施方案中，实现且维持化合物1的所需血液血浆浓度的施用量为2mg。在一些实施方案中，实现且维持化合物1的所需血液血浆浓度的施用量为2.5mg。在一些实施方案中，实现且维持化合物1的所需血液血浆浓度的施用量为10mg。在一些实施方案中，实现且维持化合物1的所需血液血浆浓度的施用量为15mg。在一些实施方案中，在治疗期间根据所测量水平调整向个体施用的实现且维持所需血液血浆浓度的量。当化合物1的血液血浆浓度超过上限阈值时，降低化合物1的施用量，并且当化合物1的血液血浆浓度低于下限阈值时，增加化合物1的施用量。作为非限制性实例，化合物1的施用量可以从5mg降低至2mg、从5mg降低至2.5mg、从10mg降低至7.5mg、从7.5mg降低至5mg、从15mg降低至12.5mg、或从12.5mg降低至10mg。作为另外的非限制性实例，化合物1的施用量可以从5mg增加至7.5mg、从5mg增加至10mg、从5mg增加至7.5mg、从10mg增加至12.5mg或从10mg增加至15mg。

在一些实施方案中，本文提供了在有需要的个体中治疗肥厚型心肌病的方法，所述方法包括以有效实现且维持200至750ng/mL的化合物1的血液血浆浓度的量向所述个体施用化合物1。在一些实施方案中，在有需要的个体中治疗肥厚型心肌病的方法，所述方法包括以有效实现且维持350至700ng/mL的化合物1的血液血浆浓度的量向所述个体施用化合物1。

在一些实施方案中，本文提供了在有需要的个体中治疗肥厚型心肌病的方法，所述方法包括以有效实现且维持150至1000ng/mL的化合物1的血液血浆浓度的量向所述个体施用化合物1。在一些实施方案中，在有需要的个体中治疗肥厚型心肌病的方法，所述方法包括以有效实现且维持200至1000ng/mL的化合物1的血液血浆浓度的量向所述个体施用化合物1。

在一些实施方案中，2至15mg的化合物1实现且维持200至750ng/mL的化合物1的血液血浆浓度。在一些实施方案中，5至15mg的化合物1实现且维持200至750ng/mL的化合物1的血液血浆浓度。在一些实施方案中，约2.5mg的化合物1实现且维持200至750ng/mL的化合物1的血液血浆浓度。在一些实施方案中，约5mg的化合物1实现且维持200至750ng/mL的化合物1的血液血浆浓度。在一些实施方案中，约10mg的化合物1实现且维持200至750ng/mL的化合物1的血液血浆浓度。在一些实施方案中，约15mg的化合物1实现且维持200至750ng/mL的化合物1的血液血浆浓度。

在一些实施方案中，2至15mg的化合物1实现且维持350至700ng/mL的化合物1的血液血浆浓度。在一些实施方案中，5至15mg的化合物1实现且维持350至700ng/mL的化合物1的血液血浆浓度。在一些实施方案中，约2.5mg的化合物1实现且维持350至700ng/mL的化合物1的血液血浆浓度。在一些实施方案中，约5mg的化合物1实现且维持350至700ng/mL的化合物1的血液血浆浓度。在一些实施方案中，约10mg的化合物1实现且维持350至700ng/mL的化合物1的血液血浆浓度。在一些实施方案中，约15mg的化合物1实现且维持350至700ng/mL的化合物1的血液血浆浓度。

在一些实施方案中，2至15mg的化合物1实现且维持200至400ng/mL的化合物1的血液血浆浓度。在一些实施方案中，5至15mg的化合物1实现且维持200至400ng/mL的化合物1的血液血浆浓度。在一些实施方案中，约2.5mg的化合物1实现且维持200至400ng/mL的化合物1的血液血浆浓度。在一些实施方案中，约5mg的化合物1实现且维持200至400ng/mL的化合物1的血液血浆浓度。在一些实施方案中，约10mg的化合物1实现且维持200至400ng/mL的化合物1的血液血浆浓度。在一些实施方案中，约15mg的化合物1实现且维持200至400ng/mL的化合物1的血液血浆浓度。

在一些实施方案中，本文提供了在有需要的个体中治疗肥厚型心肌病(HCM)的方法，所述方法包括

向所述个体施用5mg日剂量的化合物1，持续至少一周，以及

当所述个体中化合物1的血液血浆浓度低于200ng/mL时，将所述日剂量增加至10mg；或者

当所述个体中化合物1的血液血浆浓度高于750ng/mL时，将所述日剂量减少至2.5mg；或者

当所述个体中化合物1的血液血浆浓度为200至750ng/mL时，将所述日剂量维持在5mg的化合物1。

在一些实施方案中，在施用5mg的化合物1持续至少一周后，

当所述个体中化合物1的血液血浆浓度低于350ng/mL时，将所述日剂量增加至10mg；

当所述个体中化合物1的血液血浆浓度高于700ng/mL时，将所述日剂量减少至2.5mg；

当所述个体中化合物1的血液血浆浓度为350ng/mL至700ng/mL时，将所述日剂量维持在5mg。

在一些实施方案中，当除了上文提出的化合物1的血液血浆浓度之外，个体Valsalva梯度大于或等于30mm Hg时，仅进行日剂量的增加。如果个体Valsalva梯度小于30mm Hg并且个体中化合物1的血液血浆浓度低于所提出浓度，则维持个体的日剂量。

在一些实施方案中，向个体施用5mg的化合物1，持续至少一周。在一些实施方案中，向个体施用5mg的化合物1，持续至少四周。在一些实施方案中，向个体施用5mg的化合物1，持续至少六周。在一些实施方案中，向个体施用5mg的化合物1，持续至少八周。

在一些实施方案中，在施用5mg的化合物1持续至少一周后，将所述日剂量增加至10mg，并且持续10mg日剂量的化合物1持续至少一周，所述方法进一步包括

当所述个体中化合物1的血液血浆浓度低于200ng/mL时，将所述日剂量增加至15mg；或者

当所述个体中化合物1的血液血浆浓度高于750ng/mL时，将所述日剂量减少至5mg；或者

当所述个体中化合物1的血液血浆浓度为200至750ng/mL时，将所述日剂量维持在10mg的化合物1。

在一些实施方案中，在施用5mg的化合物1持续至少一周后，将所述日剂量增加至10mg，并且持续10mg日剂量的化合物1持续至少一周，所述方法进一步包括

当所述个体中化合物1的血液血浆浓度低于350ng/mL时，将所述日剂量增加至15mg；或者

当所述个体中化合物1的血液血浆浓度高于700ng/mL时，将所述日剂量减少至5mg；或者

当所述个体中化合物1的血液血浆浓度为350至700ng/mL时，将所述日剂量维持在10mg的化合物1。

在一些实施方案中，当除了上文提出的化合物1的血液血浆浓度之外，个体Valsalva梯度大于或等于30mm Hg时，仅进行日剂量的增加。如果个体Valsalva梯度小于30mm Hg并且个体中化合物1的血液血浆浓度低于所提出浓度，则维持个体的日剂量。

在一些实施方案中，向个体施用10mg的化合物1，持续至少两周。在一些实施方案中，向个体施用10mg的化合物1，持续至少四周。在一些实施方案中，向个体施用10mg的化合物1，持续至少六周。在一些实施方案中，向个体施用10mg的化合物1，持续至少八周。

在一些实施方案中，在施用5mg的化合物1持续至少一周后，将所述日剂量减少至2mg，并且再施用2mg的化合物1持续至少一周，所述方法进一步包括

当所述个体中化合物1的血液血浆浓度低于200ng/mL时，将所述日剂量增加至5mg；或者

当所述个体中化合物1的血液血浆浓度为200至750ng/mL时，将所述日剂量维持在2mg的化合物1。

在一些实施方案中，在施用5mg的化合物1持续至少一周后，将所述日剂量减少至2.5mg，并且再施用2mg的化合物1持续至少一周，所述方法进一步包括

当化合物1的血液血浆浓度低于350ng/mL时，将所述日剂量增加至5mg；或者

当化合物1的血液血浆浓度为350至700ng/mL时，将所述日剂量维持在2mg的化合物1。

在一些实施方案中，当除了上文提出的化合物1的血液血浆浓度之外，个体Valsalva梯度大于或等于30mm Hg时，仅进行日剂量的增加。如果个体Valsalva梯度小于30mm Hg并且个体中化合物1的血液血浆浓度低于所提出浓度，则维持个体的日剂量。

在一些实施方案中，向个体施用2mg的化合物1，持续至少两周。在一些实施方案中，向个体施用2mg的化合物1，持续至少四周。可替代地，在一些实施方案中，可以施用2.5mg的化合物1而不是2mg。

在一些实施方案中，HCM为阻塞性HCM(oHCM)。在一些实施方案中，HCM为非阻塞性HCM。

在一些实施方案中，本文提供了在有需要的个体中通过实现且维持200至750ng/mL的化合物1的血液血浆浓度来治疗肥厚型心肌病(HCM)的方法，所述方法包括

a)向个体施用选自由以下组成的组的日剂量：2.5、5、10、和15mg的化合物1。

在一些实施方案中，化合物1的血液血浆浓度为350至700ng/mL。

在一些实施方案中，以上步骤a)的日剂量选自由2、2.5、5、10、12.5、和15mg的化合1组成的组。

在一些实施方案中，所述方法进一步包括

b-i)当所述个体中化合物1的血液血浆浓度低于200ng/mL时，将所述日剂量增加至下一最高剂量量；或者

b-ii)当所述个体中化合物1的血液血浆浓度高于750ng/mL时，将所述日剂量减少至下一最低剂量量；或者

b-iii)当所述个体中化合物1的血液血浆浓度为200至750ng/mL时，维持化合物1的所述日剂量。

在一些实施方案中，所述方法进一步包括

b-i)当所述个体中化合物1的血液血浆浓度低于350ng/mL时，将所述日剂量增加至下一最高剂量量；或者

b-ii)当所述个体中化合物1的血液血浆浓度高于700ng/mL时，将所述日剂量减少至下一最低剂量量；或者

b-iii)当所述个体中化合物1的血液血浆浓度为350至700ng/mL时，维持化合物1的所述日剂量。

在一些实施方案中，当除了上文提出的化合物1的血液血浆浓度之外，个体Valsalva梯度大于或等于30mm Hg时，仅进行日剂量的增加(步骤b-i))。如果个体Valsalva梯度小于30mm Hg并且个体中化合物1的血液血浆浓度低于所提出浓度，则维持个体的日剂量。

在一些实施方案中，所述方法进一步包括

c)每两至四周重复步骤b)。

在一些实施方案中，所述方法进一步包括

c)每两至六周重复步骤b)。

在一些实施方案中，所述方法进一步包括

c)每两至八周重复步骤b)。

在一些实施方案中，所述方法进一步包括

c)每两至十二周重复步骤b)。

在一些实施方案中，每2周重复步骤b)。在一些实施方案中，每4周重复步骤b)。在一些实施方案中，每6周重复步骤b)。在一些实施方案中，每8周重复步骤b)。在一些实施方案中，每10周重复步骤b)。在一些实施方案中，每12周重复步骤b)。

在一些实施方案中，HCM为阻塞性HCM(oHCM)。在一些实施方案中，HCM为非阻塞性HCM。

在一些实施方案中，本文提供了在有需要的个体中通过在所述个体中实现且维持在200至750ng/mL之间的化合物1的血液血浆浓度来治疗肥厚型心肌病(HCM)的方法，所述方法包括施用日剂量2.5至15mg的化合物1并且当所述个体中化合物1的血液血浆浓度小于200ng/mL时增加所述日剂量；或者当所述个体中化合物1的血液血浆浓度大于750ng/mL时减少所述日剂量。

在一些实施方案中，本文提供了在有需要的个体中通过在所述个体中实现且维持在350至700ng/mL之间的化合物1的血液血浆浓度来治疗肥厚型心肌病(HCM)的方法，所述方法包括施用日剂量2.5至15mg的化合物1并且当所述个体中化合物1的血液血浆浓度小于350ng/mL时增加所述日剂量；或者当所述个体中化合物1的血液血浆浓度大于700ng/mL时减少所述日剂量。

在一些实施方案中，本文提供了在有需要的个体中通过在所述个体中实现且维持在200至400ng/mL之间的化合物1的血液血浆浓度来治疗肥厚型心肌病(HCM)的方法，所述方法包括施用日剂量2.5至15mg的化合物1并且当所述个体中化合物1的血液血浆浓度小于200ng/mL时增加所述日剂量；或者当所述个体中化合物1的血液血浆浓度大于400ng/mL时减少所述日剂量。

在一些实施方案中，当除了上文提出的化合物1的血液血浆浓度之外，个体Valsalva梯度大于或等于30mm Hg时，仅进行化合物1的日剂量的增加。如果个体Valsalva梯度小于30mm Hg并且个体中化合物1的血液血浆浓度低于所提出浓度，则维持个体的日剂量。

在一些实施方案中，HCM为阻塞性HCM(oHCM)。在一些实施方案中，HCM为非阻塞性HCM。

在一些实施方案中，本文提供了在有需要的个体中通过实现且维持在200至750ng/mL之间的化合物1的血液血浆浓度来治疗肥厚型心肌病(HCM)的方法，所述方法包括

a)施用日剂量2.5至15mg的化合物1，持续至少1周；

b)测量所述个体中化合物1的血液血浆浓度；以及

c)当所述个体中化合物1的所述血液血浆浓度小于200ng/mL时，增加化合物1的所述日剂量；或者

当所述个体中化合物1的所述血液血浆浓度大于750ng/mL时，减少化合物1的所述日剂量；或者

当所述个体中化合物1的所述血液血浆浓度为200至750ng/mL时，继续化合物1的相同日剂量。

在一些实施方案中，当除了上文提出的化合物1的血液血浆浓度之外，个体Valsalva梯度大于或等于30mm Hg时，仅进行步骤c)中的日剂量的增加。如果个体Valsalva梯度小于30mm Hg并且个体中化合物1的血液血浆浓度低于所提出浓度，则维持个体的日剂量。

在一些实施方案中，所述方法进一步包括

d)每1至12周重复步骤a)至c)。

在一些实施方案中，本文提供了在有需要的个体中通过在所述个体中实现且维持在350至700ng/mL之间的化合物1的血液血浆浓度来治疗肥厚型心肌病(HCM)的方法，所述方法包括

a)施用日剂量2至15mg的化合物1，持续至少1周；

b)测量所述个体中化合物1的血液血浆浓度；以及

c)当所述个体中化合物1的所述血液血浆浓度小于350ng/mL时，增加化合物1的所述日剂量；或者

当所述个体中化合物1的所述血液血浆浓度大于700ng/mL时，减少化合物1的所述日剂量；或者

当所述个体中化合物1的所述血液血浆浓度为350至700ng/mL时，继续化合物1的相同日剂量。

在一些实施方案中，当除了上文提出的化合物1的血液血浆浓度之外，个体Valsalva梯度大于或等于30mm Hg时，仅进行步骤c)中的日剂量的增加。如果个体Valsalva梯度小于30mm Hg并且个体中化合物1的血液血浆浓度低于所提出浓度，则维持个体的日剂量。

在一些实施方案中，所述方法进一步包括

d)每1至12周重复步骤a)至c)。

在一些实施方案中，每2周重复步骤a)至c)。在一些实施方案中，每4周重复步骤a)至c)。在一些实施方案中，每6周重复步骤a)至c)。在一些实施方案中，每8周重复步骤a)至c)。在一些实施方案中，每10周重复步骤a)至c)。在一些实施方案中，每12周重复步骤a)至c)。

在一些实施方案中，所述日剂量选自由以下组成的组：2、2.5、5、7.5、10、12.5和15mg的化合物1，并且在步骤c)中将化合物1的所述日剂量增加或减少至化合物1的下一最高量或最低量。在一些实施方案中，所述日剂量选自由以下组成的组：2.5、5、10、和15mg的化合物1，并且在步骤c)中将化合物1的所述日剂量增加或减少至化合物1的下一最高量或最低量。在一些实施方案中，步骤a)中化合物1的初始日剂量为5mg。

在一些实施方案中，HCM为阻塞性HCM(oHCM)。在一些实施方案中，HCM为非阻塞性HCM。

在一些实施方案中，本文提供了用于在有需要的个体中治疗肥厚型心肌病(HCM)的方法，所述方法包括向所述个体施用选自由以下组成的组的量的化合物1的总日剂量：2mg、5mg、10mg、和15mg。在一些实施方案中，化合物1的所述总日剂量选自由以下组成的组：2.5mg、5mg、7.5mg、10mg、12.5mg、和15mg。

在一些实施方案中，化合物1的所述总日剂量为2mg。在一些实施方案中，化合物1的所述总日剂量为2.5mg。在一些实施方案中，化合物1的所述总日剂量为5mg。在一些实施方案中，化合物1的所述总日剂量为7.5mg。在一些实施方案中，化合物1的所述总日剂量为10mg。在一些实施方案中，化合物1的所述总日剂量为12.5mg。在一些实施方案中，化合物1的所述总日剂量为15mg。

在一些实施方案中，所述HCM为阻塞性HCM(oHCM)。在一些实施方案中，所述HCM为非阻塞性HCM。

在一些实施方案中，本文提供了在有需要的个体中治疗肥厚型心肌病(HCM)的方法，所述方法包括

a)向所述个体施用日剂量2至15mg的化合物1，持续至少1周；

b)监测所述个体；以及

c)基于药代动力学和/或药效动力学测量调整化合物1的日剂量。

在一些实施方案中，步骤b)中的监测使用非侵入性监测技术。所述非侵入性监测技术包括但不限于测量峰值氧气更新(VO₂)水平、评估NYHA功能分级、测量Valsalva梯度、用超声心动图测量心脏活动、及其组合。在一些实施方案中，所采用的非侵入性监测技术为测量峰值VO₂。

在一些实施方案中，步骤b)中的监测包括测量所述个体中化合物1的血液血浆浓度或所述个体中N末端脑钠肽前体(NT-pro BNP)的血液血浆浓度。

使用来自监测步骤的结果来调整化合物1的日剂量以最佳地治疗所述个体。例如，在一些实施方案中，所述调整步骤包括：

当所述个体在所述非侵入性监测技术中的一个或多个中未展示出临床改善时，增加化合物1的所述日剂量；或者

当所述个体在所述非侵入性监测技术中的一个或多个中展示出临床消退时，减少化合物1的所述日剂量；或者

当所述个体在所述非侵入性监测技术中的一个或多个中展示出临床改善时，继续化合物1的相同日剂量。

评估临床改善、停滞或消退将取决于所采用的监测技术。例如，当评估峰值VO₂水平时，自基线2.0mL/kg/min或更多的峰值VO₂增加被认为临床改善，自基线2.0mL/kg/min或更多的峰值VO₂减少被认为临床消退，并且峰值VO₂的小于2.0mL/kg/min差异被认为无临床变化。超声心动描记术特别有用于评估左心室僵硬。当满足以下特征中的至少一个时，认为受试者患有异常的左心室僵硬：二尖瓣E/A比率>0.8；E/e’≥14；间隔e’<7cm/s；侧壁e’<10cm/s。左心室僵硬的临床改善或消退是在列出的特征之一存在至少5％变化的情况下，而小于5％的变化被认为无临床改善。

在一些实施方案中，监测化合物1的血液血浆浓度并且所述调整步骤包括

当所述个体中化合物1的所述血液血浆浓度小于200ng/mL时，增加化合物1的所述日剂量；或者

当所述个体中化合物1的所述血液血浆浓度大于750ng/mL时，减少化合物1的所述日剂量；或者

当所述个体中化合物1的所述血液血浆浓度为200至750ng/mL时，继续化合物1的相同日剂量。

在一些实施方案中，监测化合物1的血液血浆浓度并且所述调整步骤包括

当所述个体中化合物1的所述血液血浆浓度小于350ng/mL时，增加化合物1的所述日剂量；或者

当所述个体中化合物1的所述血液血浆浓度大于700ng/mL时，减少化合物1的所述日剂量；或者

当所述个体中化合物1的所述血液血浆浓度为350至700ng/mL时，继续化合物1的相同日剂量。

在一些实施方案中，当除了上文提出的化合物1的血液血浆浓度之外，个体Valsalva梯度大于或等于30mm Hg时，仅进行日剂量的增加。如果个体Valsalva梯度小于30mm Hg并且个体中化合物1的血液血浆浓度低于所提出浓度，则维持个体的日剂量。

在一些实施方案中，所述方法进一步包括

d)每1至12周重复步骤a)至c)。

在一些实施方案中，每2周重复步骤a)至c)。在一些实施方案中，每4周重复步骤a)至c)。在一些实施方案中，每6周重复步骤a)至c)。在一些实施方案中，每8周重复步骤a)至c)。在一些实施方案中，每10周重复步骤a)至c)。在一些实施方案中，每12周重复步骤a)至c)。

在一些实施方案中，所述方法进一步包括

d)每1至12周重复步骤a)至c)。

在一些实施方案中，每2周重复步骤a)至c)。在一些实施方案中，每4周重复步骤a)至c)。在一些实施方案中，每6周重复步骤a)至c)。在一些实施方案中，每8周重复步骤a)至c)。在一些实施方案中，每10周重复步骤a)至c)。在一些实施方案中，每12周重复步骤a)至c)。

在一些实施方案中，所述日剂量选自由以下组成的组：2、2.5、5、7.5、10、12.5和15mg的化合物1，并且在步骤c)中将化合物1的所述日剂量增加或减少至化合物1的下一最高量或最低量。在一些实施方案中，所述日剂量选自由以下组成的组：2、2.5、5、10、和15mg的化合物1，并且在步骤c)中将化合物1的所述日剂量增加或减少至化合物1的下一最高量或最低量。在一些实施方案中，步骤a)中化合物1的初始日剂量为5mg。

在一些实施方案中，HCM为阻塞性HCM(oHCM)。在一些实施方案中，HCM为非阻塞性HCM。

本文还设想了在有需要的个体中通过向个体施用负荷剂量来治疗肥厚型心肌病(HCM)的方法。“负荷剂量”建立了个体的血液血浆中的化合物1的基线量，其使得迅速实现且维持化合物1的所需血液血浆浓度。“负荷剂量”时间框包括3天、5天、7天、10天、或14天。“负荷剂量”量包括15mg每天一次、12.5mg每天一次、10mg每天一次、7.5mg每天一次的总日剂量。在完成“负荷剂量”后，可以使用本文所述的剂量调整重新调整给药水平以实现且维持所需的血液血浆浓度。

由此，在一些实施方案中，本文提供了在有需要的个体中治疗肥厚型心肌病(HCM)的方法，所述方法包括

a)向所述个体施用负荷剂量的化合物1，持续3至14天；

b)测量所述个体中化合物1的血液血浆浓度；以及

c)基于本申请中所述的血液血浆浓度调整化合物1的所述日剂量，以实现且维持化合物1的所需血液血浆浓度。

在一些实施方案中，本文提供了在有需要的个体中消除与肥厚型心肌病(HCM)相关的症状、改善肥厚型心肌病、或降低肥厚型心肌病的发生率的方法。所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的化合物1或其药学上可接受的盐，其中所述治疗有效量为约2mg至50mg的总日剂量。在一些实施方案中，化合物1的总日剂量为约2mg至30mg、10mg至20mg、2mg至10mg、或2mg至5mg。在一些实施方案中，化合物1的总日剂量为2.5mg至15mg。在一些实施方案中，化合物1的总日剂量为5mg至15mg。在一些实施方案中，化合物1的总日剂量为2mg至15mg。在一些实施方案中，化合物1的总日剂量为2.5mg至15mg。在一些实施方案中，消除与HCM的发作相关的症状、改善HCM、或降低HCM的发生率的方法进一步包括本文所述的剂量调整步骤，以实现且维持所需血液血浆浓度。

在一些实施方案中，本文提供了在有需要的个体中预防或延迟肥厚型心肌病(HCM)的发作的方法。所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的化合物1或其药学上可接受的盐，其中所述治疗有效量为约2mg至50mg的总日剂量。在一些实施方案中，化合物1的总日剂量为约2mg至30mg、10mg至20mg、2mg至10mg、或2mg至5mg。在一些实施方案中，化合物1的总日剂量为2.5mg至15mg。在一些实施方案中，化合物1的总日剂量为5mg至15mg。在一些实施方案中，化合物1的总日剂量为2mg至15mg。在一些实施方案中，化合物1的总日剂量为2.5mg至15mg。在一些实施方案中，预防或延迟HCM的发作的方法进一步包括本文所述的剂量调整步骤，以实现且维持所需血液血浆浓度。

药物组合物

可以以适于递送至受试者的各种组合物制备化合物1。适于施用至受试者的组合物典型地包含化合物1、或其药学上可接受的盐，和药学上可接受的赋形剂。

用于施用本文所述的化合物1或药学上可接受的药物组合物可以方便地呈现于单位剂型中并且可以通过药剂学和药物递送领域中已知的任何方法制备。所有方法包括将活性成分与含有一种或多种辅助成分的载体结合的步骤。一般来讲，药物组合物通过使活性成分与液体载体或细分的固体载体或两者均匀且紧密地结合，并且然后在需要时使产物成型为所需制剂来制备。在药物组合物中，通常包含量足以对心肌收缩力产生所需作用(即减小HCM中常常超常的收缩期收缩力)并且改善心脏舒张期中的左心室松弛性的活性剂。这种改善的松弛性可以缓解肥厚型心肌病和其他舒张功能障碍病因学中的症状。它还可以改善舒张功能障碍引起冠状血流量损害的作用，从而改善冠状血流量以作为心绞痛和缺血性心脏病的辅助剂。它还可以为HCM和因例如来自心脏瓣膜病或全身性高血压的慢性容积或压力超负荷引起的其他原因的左心室肥厚中不利的左心室重塑赋予益处。

含有化合物1或其药学上可接受的盐的药物组合物可以呈适于口服使用的形式，例如作为片剂、锭剂、水性或油性混悬剂、可分散粉剂或颗粒剂、乳剂、硬胶囊或软胶囊、糖浆剂、酏剂、溶液剂、口腔贴片、口腔凝胶、口香糖、咀嚼片、泡腾粉和泡腾片。旨在用于口服使用的组合物可以根据本领域已知用于制造药物组合物的任何方法来制备，并且此类组合物可以含有一种或多种选自由甜味剂、调味剂、着色剂、抗氧化剂和防腐剂组成的组的药剂，以便提供药学上雅致且适口的制剂。片剂含有与适于制造片剂的无毒的药学上可接受的赋形剂混合的活性成分。这些赋形剂可以例如为惰性稀释剂，诸如纤维素、二氧化硅、氧化铝、碳酸钙、碳酸钠、葡萄糖、甘露醇、山梨糖醇、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；成粒剂和崩解剂，例如玉米淀粉或海藻酸；粘合剂，例如PVP、纤维素、PEG、淀粉、明胶或阿拉伯胶；和润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石。片剂可以是未包衣的或它们可以通过已知技术以肠溶或其他形式包衣以延迟在胃肠道中的崩解和吸收，并且从而在更长时期内提供持续作用。例如，可以采用延时材料，诸如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。所述片剂也可被包衣以形成用于控制释放的渗透型治疗片剂。

用于口服使用的制剂也可以呈现为硬明胶胶囊，其中活性成分与惰性固体稀释剂(例如碳酸钙、磷酸钙或高岭土)混合；或呈现为软明胶胶囊，其中活性成分与水或油性介质(例如花生油、液体石蜡或橄榄油)混合。另外，可以用非水混溶性成分诸如油制备乳液并且将其用表面活性剂诸如单-甘油二酯、PEG酯等稳定化。

水性混悬液含有与适于制造水性混悬液的赋形剂混合的活性材料。此类赋形剂为助悬剂，例如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙甲基纤维素、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄蓍胶和阿拉伯树胶；分散剂或润湿剂可以为天然存在的磷脂(例如，卵磷脂)，或环氧烷与脂肪酸的缩合产物(例如，聚氧乙烯硬脂酸酯)，或环氧乙烷与长链脂肪醇的缩合产物(例如十七亚乙基氧基鲸蜡醇)，或环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的缩合产物(诸如聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯)，或环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的缩合产物(例如，聚乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯)。水性混悬液也可以含有一种或多种防腐剂(例如，对羟基苯甲酸乙酯或正丙酯)、一种或多种着色剂、一种或多种调味剂、和一种或多种甜味剂(诸如蔗糖或糖精)。

可以通过将活性成分悬浮于植物油，例如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油中；或矿物油，诸如液体石蜡中来配制油性混悬液。油性混悬液可以含有增稠剂，例如蜂蜡、硬石蜡或鲸蜡醇。可以添加甜味剂诸如以上所阐述的那些，和调味剂来提供适口的口服制剂。这些组合物可以通过添加抗氧化剂诸如抗坏血酸来保存。

适于通过添加水来制备水性混悬液的可分散粉剂和颗粒剂提供了与分散剂或润湿剂、助悬剂以及一种或多种防腐剂混合的活性成分。适合的分散剂或润湿剂和助悬剂通过已在以上提及的那些药剂来例证。还可以存在另外的赋形剂，例如甜味剂、调味剂和着色剂。

本文所述的药物组合物还可以呈水包油乳液的形式。油相可以是植物油，例如橄榄油或花生油；或矿物油，例如液态石蜡；或这些物质的混合物。适合的乳化剂可以是天然存在的树胶，例如阿拉伯树胶或黄蓍胶；天然存在的磷脂，如大豆、卵磷脂、衍生自脂肪酸和己糖醇酐的酯或偏酯(例如脱水山梨糖醇单油酸酯)；以及所述偏酯与环氧乙烷的缩合产物，例如聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯。乳液还可以含有甜味剂和调味剂。

糖浆和酏剂可以用甜味剂，例如甘油、丙二醇、山梨糖醇或蔗糖配制。此类制剂还可以含有缓和剂、防腐剂和调味剂以及着色剂。可以与例如环糊精、PEG和表面活性剂组合地制备口服溶液。

药物剂型

本披露包括化合物1及其药学上可接受的盐的新颖的药物剂型。本文所述的剂型适于向受试者口服施用。剂型可以呈适于口服施用的任何形式，包括但不限于胶囊或片剂。

在一些实施方案中，本披露提供了含有2-10mg或2-15mg具有下式的化合物1的单一单位剂量胶囊或片剂形式：

在一些实施方案中，化合物1的量为约2至5mg。在一些实施方案中，化合物1的量为约5至10mg。在一些实施方案中，化合物1的量为约2.5mg。在一些实施方案中，化合物1的量为约5mg。在一些实施方案中，化合物1的量为约7.5mg。在一些实施方案中，化合物1的量为约10mg。

在一些实施方案中，化合物1的单一单位剂量形式为胶囊。在一些实施方案中，化合物1的单一单位剂量形式为片剂。

在一些实施方案中，单一单位剂量形式为呈#0、#1、#2、#3、#4、或#5号的胶囊。在一些实施方案中，单一单位剂量形式为呈#4号的胶囊。在一些实施方案中，单一单位剂量形式为呈#5号的胶囊。

药盒

本披露还涵盖药盒，其包括本发明的药物组合物和剂型。

在一些方面，本发明提供了包括化合物1的药盒。本文所述的一些药盒包括描述施用化合物1的方法的标签。本文所述的一些药盒包括描述治疗肥厚型心肌病(HCM)的方法的标签。在一些实施方案中，本文所述的药盒包括描述治疗阻塞性HCM(oHCM)的方法的标签。在一些实施方案中，本文所述的药盒包括描述降低受试者的左心室流出道(LVOT)梯度的方法的标签。在一些实施方案中，本文所述的药盒包括描述降低受试者的静息左心室流出道(LVOT)压力梯度的方法的标签。在一些实施方案中，本文所述的药盒包括描述降低受试者的应激左心室流出道(LVOT)梯度的方法的标签。

本发明的组合物包括但不限于在瓶子、广口瓶、小瓶、安瓿、试管或被食品与药物管理局(FDA)或其他监察机构批准的其他容器-闭合系统包含化合物1的组合物，所述容器-闭合系统可以提供一个或多个含有化合物的剂量。包装或分配器还可以随附有由规定药物的制造、使用或销售的政府机构指定的形式的与容器相关的通知，所述通知指示被所述机构批准。在某些方面，试剂盒可以包括如本文所述的制剂或组合物、包含制剂的容器闭合系统或包含制剂的剂量单位形式，和描述如本文所述的使用方法的通知或说明书。

实施例

实施例1.(S)-3-异丙基-6-((1-苯基乙基)氨基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备。

化合物1.1.异丙基脲。在氩气下在0℃下向异丙胺(15.3g，0.258mol，1.0当量)于CH₂Cl₂(200mL)中的搅拌溶液中滴加异氰酸三甲基甲硅烷基酯(30g，0.26mol，1.0当量)。使所得混合物达到环境温度且搅拌过夜。在冷却至0℃之后，滴加CH₃OH(100mL)。将所得溶液在室温下搅拌2小时(h)并且然后减压浓缩。将粗制残余物由CH₃OH:Et₂O(1:20)重结晶，产生15.4g(58％)呈白色固体的标题化合物。LC/MS:m/z(ES+)103(M+H)⁺。

化合物1.2.1-异丙基巴比妥酸。向1.1(14.4g，0.14mol，1.00当量)于CH₃OH(500mL)中的搅拌溶液中添加丙二酸二甲酯(19.55g，0.148mol，1.05当量)和甲醇钠(18.9g，0.35mol，2.50当量)。将所得混合物在65℃下搅拌过夜。在冷却至环境温度并且然后冷却至0℃之后，使用浓HCl水溶液将pH小心地调整至3。将所得混合物减压浓缩。将残余物溶解于EtOH(200mL)中且过滤。将滤液减压浓缩并且将残余物通过硅胶柱色谱法使用CH₂Cl₂/CH₃OH(20:1)作为洗脱液进行纯化，产生16.8g(50％)呈白色固体的标题化合物。LC/MS：m/z(ES+)171(M+H)⁺。¹¹H-NMR(300MHz,d₆-DMSO):δ11.19(s,1H),4.83(m,1H),3.58(s,2H),1.32(d,J＝6.0Hz,6H)。

化合物1.3.6-氯-3-异丙基嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮。在氩气下向含有化合物1.2(11.4g，66.99mmol，1.00当量)的100-mL圆底烧瓶中添加三乙基苄基氯化铵(21.3g，93.51mmol，1.40当量)和POCl₃(30mL)。将所得混合物在50℃下搅拌过夜。在冷却至室温之后，将混合物减压浓缩。将残余物溶解在CH₂Cl₂(150mL)中，然后缓慢添加H₂O(100mL)。将相分离并且将有机层用H₂O(100mL)洗涤、用无水Na₂SO₄干燥，且减压浓缩。将粗制残余物通过硅胶柱色谱法使用EtOAc/石油醚(1:1)作为洗脱液进行纯化，产生5.12g(40％)呈淡黄色固体的标题化合物。¹H-NMR(300MHz,d₆-DMSO)：δ12.22(s,1H),5.88(s,1H),4.95(m,1H),1.34(d,J＝6.0Hz,6H)。

化合物1.(S)-3-异丙基-6-((1-苯基乙基)氨基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮。向6-氯-3-异丙基嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(1.3，1.0g，5.31mmol)于1,4-二噁烷(20mL)中的溶液中添加(S)-α-甲基苄胺(Sigma-Aldrich，1.43g，11.7mmol，2.2当量)。将反应混合物在80℃下搅拌24h。在冷却至环境温度之后，将混合物减压浓缩。将残余物溶解于EtOAc(70mL)中并用1NHCl水溶液(2x 50mL)和盐水(40mL)洗涤。将有机层用无水Na₂SO₄干燥并且然后减压浓缩至原始体积的一半，产生沉淀物。添加己烷(20mL)并且将混合物在室温下搅拌。将所得固体通过过滤收集、用己烷(20mL)洗涤，且干燥，产生1.0g(69％)呈白色固体的标题化合物。LC/MS：m/z(ES+)274(M+H)⁺。¹H-NMR(400MHz,d₆-DMSO):δ9.77(s,1H),7.32(m,4H),7.24(m,1H),6.50(d,J＝6.8Hz,1H),4.87(m,1H),4.52(m,1H),4.31(d,J＝6.8Hz,1H),1.37(m,3H),1.24(m,6H)。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δppm7.39-7.20(m,5H),5.01(m,1H),4.48(m,1H),1.49(d,J＝6.7Hz,3H),1.36(m,6H)。

实施例2.I期临床研究

三项临床研究研究了化合物1到目前为止的安全性和耐受性；2项研究的进行已完成并且1项研究正在进行中。在健康男性中进行了双盲、安慰剂对照、单一递增剂量研究(SAD)(化合物1-002)。使受试者接受范围为1mg至48mg的单一剂量。也完成了在患有临床稳定的HCM中进行开放标签序贯组SAD研究(化合物1-001)；施用最多至144mg的单一剂量。此外，正在进行双盲、安慰剂对照、多次递增剂量(MAD)研究(化合物1-003)，其中使健康成人受试者接受化合物1的最多至25mg每日一次(QD)的多剂量，持续长达28天。

(1)48mg群组(n＝4名患者)；96mg群组(n＝6)；144mg群组(n＝5)。

(2)每个群组随机化6:2化合物1或匹配安慰剂。

(3)每个群组随机化10:2化合物1或匹配安慰剂。

(4)25mg群组治疗持续25天。

2.1化合物1-002试验

在研究化合物1-002中，将1mg至48mg的单一剂量作为口服混悬液施用至健康男性。所有剂量的水平均耐受良好，其中没有严重的不良事件(SAE)、死亡、或因报告的不良事件(AE)导致的从研究中撤出。治疗突发AE的发生率未随着剂量显现出增加。化合物1的药代动力学(PK)概况显示出快速吸收和随后的分布，之后是较长的消除期，其中平均消除半衰期为大约8天。如通过3种独立的超声心动描记术测量(左心室射血分数[LVEF]、LV分数缩短(LVFS)和LVOT速度时间积分[VTI])所评估的，单一剂量≥12mg的化合物1与LV收缩力自基线的可检测降低相关联。在健康受试者中研究的最高剂量(48mg)下，相对于基线，任何时间点处LVEF的平均降低量为-6％。在本研究中测试的任何剂量水平下均未检测到收缩期血压(BP)或心率(HR)的变化。

2.2化合物1-001试验

在研究MYK-461-001中，将最多至144mg的单一剂量施用至15名患有HCM的受试者。除了接受144mg剂量的5名受试者中的1名之外，所有剂量水平均耐受良好，而没有死亡、因AE导致的撤出、或剂量相关的治疗突发AE。该受试者经历了描述为血管迷走性反应的SAE，其特征在于一定时期的心搏停止和低血压，其自发消退而没有后遗症。就因果关系评估而言，没有非临床或其他临床数据暗示化合物1参与心脏离子通道电流调节或心脏冲动产生或传导。化合物1没有记录的血管活性特性，并且对平滑肌肌球蛋白没有生物化学活性。对该事件的其他潜在贡献因素包括使用150mg QD的琥珀酸美托洛尔进行的慢性β阻滞，以及受试者在紧接事件前的手握力评估期间无意中进行了Valsalva动作的观察结果。

如表2中的结果所示，在单剂量化合物1之后患者中的LVOT阻塞消退。招募于001研究中的两名受试者显示出LVOT压力梯度(激发后)。向每名患者施用单一96mg剂量的化合物1。给药后，两名患者的梯度均消退。

研究化合物1-001中的初步PK分析揭示，患有HCM的受试者中的PK概况与健康受试者的PK概况相似。所有患有HCM的受试者均展示出根据通过3种独立的超声心动描记术测量中的至少1种记录LV收缩力降低的机制验证。在2名受试者中，单剂量96mg化合物1之后，Valsalva后可测量的LVOT梯度降低至<10mm Hg。

2.3化合物1-003试验

在研究化合物1-003中，已对4个健康成人受试者群组进行给药，每组排定给药28天。化合物1在最多至25mg QD的多剂量下均耐受良好。所有AE的严重程度均为轻度或中度，并且没有SAE。在群组3中，接受设盲治疗(化合物1 12.5mg或安慰剂QD)的12名受试者中有3名患有腹泻和/或腹部绞痛。这些受试者中有一名由于再次激发后再发生腹泻而停用，而其他2名受试者成功地重新开始服用研究药物。研究者认为这些胃肠道AE的严重程度为轻度或中度并且可能与研究药物有关。群组4(化合物1 25mg或安慰剂)中未报告胃肠道AE。

研究人员在第25天停止了群组4中的给药，因为接受设盲治疗(化合物1 25mg或安慰剂QD)的12名受试者中有5名实现了LVEF降低≥20％的剂量递增的预定停止标准。所有受试者均保持无症状。

在较高剂量水平组(12.5mg QD和25mg QD)中收缩力降低的PD证据是明显的。这些数据以及到目前为止所有研究中所有受试者的PK和PD数据已被合并到稳健PK-PD模型中，以有助于为当前研究告知也可能是有效的安全给药策略。

总体而言，已在HCM患者和健康志愿者中展示出有利的安全性概况，如下表3中所示。

在1期试验中在所有患者组中观察到临床相关和剂量依赖性应答。

(1)48mg群组(n＝4名患者)；96mg群组(n＝6)；144mg群组(n＝5)。

(2)每个群组随机化6:2化合物1或匹配安慰剂。

(3)每个群组随机化10:2化合物1或匹配安慰剂。

(4)25mg群组治疗持续25天。

下表5概述了三个1期项目。

实施例3.用于在患有症状性肥厚型心肌病和左心室流出道阻塞的受试者中评价 化合物1的功效、药代动力学、药效动力学、安全性和耐受性的2期开发标签初步研究 (Pioneer-HCM-A)

研究目的：

主要目的：

·在患有症状性肥厚性心肌病(HCM)和LVOT阻塞的受试者中表征12周化合物1治疗对降低运动后峰值左心室流出道(LVOT)梯度的影响

次要目的：

·在患有症状性HCM和LVOT阻塞的受试者中评估实现运动后峰值梯度<30mm Hg的LVOT梯度应答的受试者比例

·在患有症状性HCM和LVOT阻塞的受试者中评估12周化合物1治疗对呼吸困难症状评分、峰值耗氧量(pVO₂)和呼气量(VE)/二氧化碳产生量(VCO₂)斜率的影响

·在患有症状性HCM和LVOT阻塞的受试者中评价化合物1的药代动力学(PK)

·在患有症状性HCM和LVOT阻塞的受试者中评价化合物1的药效动力学(PD)，如通过患有症状性HCM和LVOT阻塞的受试者中的多种超声心动描记术成像参数所评估的

·在患有症状性HCM和LVOT阻塞的受试者中评价化合物1的安全性和耐受性

·在患有症状性HCM和LVOT阻塞的受试者中清除4周后评价化合物1的影响的治疗后可逆性

探究性目的：

·在患有症状性HCM和LVOT阻塞的受试者中评估实现运动后峰值梯度<10mm Hg的LVOT梯度应答的受试者比例

·在患有症状性HCM和LVOT阻塞的受试者中评估12周化合物1治疗对纽约心脏协会(NYHA)功能分级、N末端B型利尿钠肽前体(NT-proBNP)水平和堪萨斯城心肌病调查问卷(Kansas CityCardiomyopathy Questionnaire)(KCCQ)总结评分(OSS)的影响

·在患有症状性HCM和LVOT阻塞的受试者中评估化合物1治疗对使用光学生物传感器评估的动脉脉搏波形态的影响

·在患有症状性HCM和LVOT阻塞的受试者中评估化合物1治疗对如使用心脏监测皮肤贴皮评估的心率和心律的影响

纳入标准：

每名受试者必须满足以下标准才能纳入本研究。

1.能够理解并遵守研究程序，理解研究涉及的风险，并在第一个研究-特异性程序之前，根据联邦、地方和机构指南提供书面知情同意书。

2.筛选访视时年龄在18至70岁的男性或女性。

3.被诊断患有HCM(在无全身性或其他已知原因的情况下肥厚而未扩张的左心室)，初诊时左心室[LV]壁厚≥15mm，或在阳性HCM家族史的情况下为≥13mm。

4.筛选访视时的使用机构的标准公式计算的体质指数(BMI)为18至37kg/m²(包括端值)。

5.如通过中心实验室所评估，在筛选访视时所有安全实验室参数(化学、血液学和尿液分析)均在正常限值(实验室参考范围)内，或者如果超出限值，则必须同时满足以下两个标准：

-研究者认为在临床上不重要

-如果是肝功能测试结果，必须<1.5×实验室参考范围的上限。

6.如由研究者和研究基地的超声心动描记术实验室所测定，在筛选访视时已记录左心室射血分数(LVEF)≥55％。

7.如由研究者和研究基地的超声心动描记术实验室所测定，在筛选访视时，静息LVOT梯度≥30mg Hg并且运动后峰值LVOT梯度≥50mm Hg。

8.由研究者判断，NYHA功能II级或更高是归因于LVOT阻塞。

9.根据研究者和研究基地的超声心动描记术实验室的判断，具有足够的声学窗口，以实现准确的经胸超声心动图(TTE)。

10.从筛选访视到最后一剂研究性药物产品(IMP)后3个月，女性受试者不得妊娠或哺乳，并且如果性活跃，则必须使用以下可接受的节育方法之一。

-双屏障方法(例如，男性使用避孕套并且女性使用隔膜或宫颈帽)

-屏障+激素避孕(例如，男性使用避孕套，并且女性使用激素避孕)

-女性手术不育达6个月或绝经2年。永久性不育包括在筛选前至少6个月进行子宫切除术、双侧卵巢切除术、双侧输卵管切除术和/或有记录的双侧输卵管阻塞。如果女性在停止所有外源激素治疗后有至少2年或更长时间闭经，并且促卵泡激素(FSH)水平在绝经后范围内，则所述女性被认为绝经后的。

11.具有女性伴侣(包括绝经后伴侣)的男性受试者必须同意从筛选访视到最后一剂研究药物后3个月使用高效的避孕措施。高效的避孕措施包括有记录的输精管结扎术、戒除性交、双屏障方法(例如，男性使用避孕套并且女性使用隔膜或宫颈帽)或屏障+激素避孕(例如，男性使用避孕套并且女性使用激素避孕)。由于可能存在射精中分泌药物的风险，其伴侣当前正在妊娠的男性受试者(包括接受输精管切除术的男性)应在研究期间和最后一剂研究药物后3个月内使用屏障方法。此外，具有性伴侣的男性受试者应在研究期间和最后一次剂研究药物后3个月内使用避孕套，即使伴侣未妊娠或有能力妊娠，以防止将化合物1在射精中传递给伴侣。

12.必须能够根据既定指南完成呼吸困难数字评定量表(NRS)和KCCQ。

排除标准：

符合以下任何标准的受试者将被排除在研究之外。

1.对化合物1或化合物1制剂的任何组分有超敏反应。

2.存在妨碍运动应激测试的任何医学疾患。

3.持续性室性快速型心律失常的病史。

4.过去6个月内运动引起的晕厥病史。

5.活动性感染。

6.持续性心房纤颤或筛选时心房纤颤。

7.具有QTc Fridericia(QTcF)>500ms，或研究者认为会对受试者安全造成风险的任何其他心电图(ECG)异常(例如，II度II型房室传导阻滞)。

8.主动脉瓣狭窄或固定性主动脉下阻塞。

9.临床过程期间随时有LV收缩功能障碍(LVEF<45％)的病史。

10.冠状动脉疾病的病史。

11.任何类型的恶性肿瘤病史，但以下情况除外：筛选前超过5年的原位宫颈癌或筛选前超过2年的手术切除的非黑素瘤性皮肤癌。

12.在针对人类免疫缺陷病毒(HIV)、丙型肝炎病毒(HCV)或乙型肝炎病毒(HBV)的感染进行筛选时血清学测试阳性。

13.筛选时酒精或滥用药物的测试阳性。

14.研究者或MyoKardia医师认为，可能对受试者安全造成风险或干扰研究评价、程序或完成的任何其他临床上显著的病症、疾患或疾病(除上述那些外)的病史或证据。

15.在筛选前30天、或相应消除半衰期的至少5倍(以较长者为准)内参加其中受试者接受任何研究性药物(或当前正在使用研究性装置)的临床试验。先前参加化合物1的临床试验是可接受的，只要符合这些标准。

16.当前每天使用超过10支香烟或同等量的含烟草或含尼古丁产品。

17.研究者认为需要持续使用β-阻滞剂、钙通道阻滞剂或双异丙吡胺进行治疗的受试者。研究者认为可以安全撤出的服用这些任何药物的受试者是合格的，只要可以在筛选访视前至少14天停用药物。

18.先前用心脏毒性剂诸如多柔比星或类似剂治疗，或者当前用具有负性肌力活性的抗心律失常药物如氟卡尼或普罗帕酮治疗。

19.无法遵守研究限制/要求，包括需要访视临床基地的次数。

20.由MyoKardia、研究者或其工作人员或家庭雇用或为由他们所雇佣的人员的亲属。

总体研究设计和计划

这是一项用于评价化合物1在患有症状性HCM和LVOT阻塞的受试者中的功效、PK、PD、安全性和耐受性的2期开放标签初步研究。将招募大约10名患有症状性HCM，具有静息LVOT梯度≥30mmHg和运动后峰值LVOT梯度≥50mm Hg的成人受试者。所述研究将具有12周的治疗期和4周的清除期(图3)。

在筛选时，受试者将以仰卧位或左侧卧位进行经胸超声心动描记术(TTE)检查。除了标准化的完整TTE，还将收集静息瞬时峰值LVOT梯度(基线)和诱发的峰值LVOT梯度。然后，将对受试者进行标准的症状受限运动测试(血液动力学应激超声心动描记术)。将系统评估受试者的呼吸困难和/或心绞痛的症状。紧接在运动后通过TTE评估瞬时峰值LVOT梯度。

在第1天，将进行静息TTE，抽取血液样品以用于PK，并且受试者将经由心肺运动测试(CPET)进行对pVO₂、VE/VCO₂和其他变量的评估。CPET后，将在研究基地向受试者给予开放标签的口服化合物1，并且在给药后观察至少1小时，在给药后1小时评估生命体征和ECG。然后将向受试者提供足以在家中进行QD给药的化合物1。

将在第1、2、3、4、5、6、7、8、12和16周在研究基地对受试者进行评价。在这些访视中的每一次中，将进行静息TTE并抽取血液样品用于PK。在研究访视日，将在研究基地施用研究药物，以便在给药前约2小时收集用于PK的血液样品。在第4、12和16周，将进行血液动力学应激超声心动描记术，并且评估峰值LVOT梯度。将在第10周与第12周之间(包括端值)进行CPET。

化合物1的起始剂量对于体重约60kg的受试者为10mg，并且对于体重>60kg的受试者为15mg。在第4周结束时(第28天)，评价每名受试者的LVEF，并且可以基于表6中的预先确定的标准、在研究者与医学监护者之间的协商下，受试者的剂量增加、减少或保持不变。如果化合物1血浆浓度在第2周超过750ng/mL，则无论第4周的LVEF数据如何，均不得增加剂量；然而，在这种情况下，允许根据LVEF数据降低剂量。随后，受试者将从第5周至第12周接受该剂量。

LVEF，左心室射血分数；QD，每日一次。

^a如果在第2周化合物1的血浆浓度>750ng/mL，则不允许增加剂量。

对于所有提供同意的受试者，将在第1天抽取血液以评估HCM基因型和可能的附加脱氧核糖核酸(DNA)测序。

此外，受试者可以单独地同意收集药物遗传学样品，所述药物遗传学样品将被储存以用于对功效、安全性相关的、PD或PK参数的遗传生物标记物进行潜在的未来分析，如由未来研究使用具有临床意义的终点通过DNA测序或其他遗传测试所测定。

将在第1天和第12周从所有受试者中收集血液样品，并且将其储存以用于探究性循环生物标志物分析，例如与疾病活动、代谢途径、功效测量或安全性测量相关的蛋白质组学分析。

预期的研究持续时间为大约8个月(招募4个月以及研究进行4个月)。预期每名受试者在研究中不超过140天：筛选最多至28天以及研究进行最多至112天。

化合物1、施用和时间表

研究药物包括化合物1的速释型口服片剂，其以4种强度提供：2mg、5mg、10mg和20mg。化合物1片剂是未包衣的并且外观为纯白色。2mg和5mg片剂的形状为圆凸形且大小不同，而10mg和20mg片剂为大小不同的椭圆形。

化合物1片剂是根据现行良好制造规范(cGMP)法规制造的。它们将在带有感应密封件和儿童安全帽的高密度聚乙烯瓶中提供，每瓶30个计数。所有研究药物均应根据适用的当地法规指南进行标记。

化合物1片剂必须在20℃至25℃(68℉至77℉)的受控室温下储存在由MyoKardia提供的包装中。在研究基地处的研究药物将储存在只有授权的研究人员才能进入的安全区域中。

至少每4周将IMP在适当标记的30个计数高密度聚乙烯瓶中与每日给药的书面说明书一起提供给受试者。将指示受试者将化合物1片剂/瓶储存在阴凉干燥的地方。药物应与大约8盎司的水一起服用。

实施例4.在患有症状性肥厚型心肌病和左心室流出道阻塞的受试者中评价化合 物1的功效、药代动力学、药效动力学、安全性和耐受性的2期结果(Pioneer-HCM-A)

大体按照实施例3中所述的程序获得以下结果。以下试验中的每名受试者在筛选访视前至少14天停用β-阻滞剂、钙通道阻滞剂和/或双异丙吡胺治疗。

在第0、4和12周，在接受化合物1疗法(10或15mg)的受试者中测量了应激LVOT梯度和应激射血分数百分比。在两名患者群体中，消除了应激LVOT梯度，同时LVEF的变化最小。参见图4和图5。

还在接受合物1(10、15或20mg)的受试者中测量了静息LVOT梯度。在低暴露于化合物1时，静息LVOT梯度早在1周的时候在大多数受试者中得以消除并且到第2周在所有受试者中得以消除。参见图6。

图7绘制了静息LVOT梯度相对于化合物1浓度。

图8绘制了静息左心室射血分数(LVEF)(％)相对于化合物1浓度。所述图显示出静息LVEF的暴露依赖性减少。

图9绘制了在研究的每周测量的平均静息LVOT梯度。图10绘制了在研究的每周测量的平均静息左心室射血分数(LVEF)(％)。在第12周后停止化合物1的施用。在停止化合物1之后阻塞性HCM(oHCM)表型恢复。

图11说明了当在心肺运动测试期间测量耗氧量(mL/kg/min)和动脉乳酸(mM/L)时可以获得的一类绘图。

图12示出了在CPET期间在基线处(第0周，实心)和在第12周后(虚线条)测量的峰值VO₂。化合物1改善CPET度量。

图13示出了在CPET期间在基线处(第0周，实心)和在第12周后(虚线条)测量的峰值循环动力。化合物1改善CPET度量。

图14绘制了pVO₂绝对变化相对于左心室射血分数(LVEF)绝对变化。该绘图显示，在LVEF减少最少的患者中使用化合物1疗法的运动能力的增加最大。

图15绘制了接受化合物1的受试者中在第0、4、8、和12周的N末端B型利尿钠肽前体(NT-proBNP)浓度(pg/mL)。图16绘制了N末端B型利尿钠肽前体(NT-proBNP)浓度(pg/mL)相对于化合物1的浓度。这些图显示，NT-proBNP水平在化合物1持续4周后降低，但可以在更高的暴露下回升。

图17示出了在基线(第0周)处、在化合物1施用12周后、以及在第16周(化合物1施用12周和化合物1清除4周)后的受试者的纽约心脏协会(NYHA)功能等级。

图18示出了在所指示时间(第1天-第16周)处每名受试者的平均呼吸困难症状评分。化合物1施用至第12周。第16周数据点是在4周化合物1清除之后。总体而言，数据显示，呼吸困难在化合物1施用时改善，在停止疗法后恢复。

2期试验表明：

·化合物1在最多至20mg QD的剂量下均耐受良好

·浓度>225ng/mL的化合物1与静息梯度降低至低于血流动力学显著性相关联

·在用化合物1治疗的oHCM患者中两个预后CPET量度，即峰值VO₂(pVO₂)和循环动力(CP)改善

·pVO₂(>3mL/min/kg)的最稳健改善与静息LVEF的最小变化相关联

·225-600ng/mL的化合物1血浆浓度对心肌收缩力和梯度降低具有正性肌力作用

·在化合物1疗法下NYHA等级和呼吸困难评分改善。

实施例5.用于在患有症状性肥厚型心肌病和左心室流出道阻塞的受试者中评价 化合物1的药代动力学、药效动力学、安全性和耐受性的2期开发标签初步研究(Pioneer- HCM-B)

该试验类似于实施例3中所述的试验，但具有若干个重要差异。例如，2期-B试验中的受试者将不需要停用其β-阻滞剂疗法，并且化合物1的剂量将降低至2至5mg。下表7描述了相比于以上所述的2期-A试验的一些试验细节。

实施例6.在患有症状性肥厚型心肌病和左心室流出道阻塞的受试者中评价化合 物1的功效、药代动力学、药效动力学、安全性和耐受性的2期结果(Pioneer-HCM-B)

大体按照实施例3和实施例5中所述的程序获得以下结果。

图19绘制了在试验的第4、12和16周(施用化合物1 12周，清除4周)的平均运动后静息LVOT梯度(mm Hg)。

图20绘制了在试验的第1-8、12和16周(施用化合物1 12周，清除4周)的静息LVEF(％)变化。

图21说明了在第12周后个体中NYHA功能等级的改善和化合物1清除4周后改善的逆转。

图22说明了在整个试验中呼吸困难峰值的快速改善。还显示出，在化合物1清除4周后逆转了改善。

图23说明了在试验期间到第12周峰值VO₂的变化。

图24绘制了静息LVOT(mmHg)随化合物1浓度变化。群组B是空心正方形并且群组A是实心方形。

群组B(2-5mg每日剂量)的结果示出在下表8中。值得注意的是，4名受试者具有≥2.9mL/kg/min的峰值VO₂的改善

表8：群组B概述

^*10名患者中有5名具有pVO₂的>1.5mL/kg/min改善

^**10名患者中有9名的NYHA等级改善

值得注意的是，10名患者中有5名具有pVO₂的>1.5mL/kg/min改善，并且10名患者中有8名具有改善的NYHA等级。

2期试验的A部分和B部分表明：

·350至700ng/mL的化合物1血浆浓度与降低至基本低于30mmHg水平的LVOT梯度相关联

·梯度降低伴随有症状、运动期间pVO₂的改善，NT pro-BNP降低以及对舒张功能的超声心动描记术测量的改善

·350至700ng/mL的化合物1血浆浓度导致oHCM的临床改善(症状改善和峰值VO₂)，同时保持LVEF≥55％

·治疗性浓度范围耐受良好，并且与LVEF的有限降低相关联，这常常表示基线处存在的过度收缩状态正常化

·超过1000ng/mL的浓度与过度的药理作用相关联

2期试验的A部分和B部分还表明用化合物1时的舒张改善(参见表9和表10)

表9：群组A：基线和第12周的e’和E/e’

表10：群组B：基线和第12周的e’和E/e’

实施例7.用于确认在oHCM患者中的安全性和功效的关键试验(Explorer-HCM)

试验将持续24周，并且包括约220人。该试验中测量的关键度量为峰值VO₂。图25示出了研究设计。

这是一项3期、双盲、随机、安慰剂对照、多中心、国际化、平行组的研究，用于在患有症状性oHCM的参加者中评价玛伐凯泰(mavacamten)相比于安慰剂(1:1)的安全性、耐受性和功效。将招募大约220名参加者。这包括同意在所选定基地参加CMR子研究的约80参加者(每个治疗组约40名)。将根据NYHA功能分级(II或III)、当前使用β-阻滞剂治疗(是或否)、计划在研究期间使用的测功机类型(跑步机或运动自行车)以及对CMR子研究的同意(是或否)对随机化进行分层。

研究包括汇总于图25中的3个时期。

筛选期(第-28天至第-1天)：参加者将在1至2天内接受各种常规、心肺、实验室、症状和PRO评估，以评估合格标准，包括HCM的存在和阻塞的存在(在静息或诱发时)。研究者还应确认参加者可以充分进行Valsalva动作。关键筛选测试包括ECG；在静息时、在Valsalva动作下和运动后进行的TTE；和CPET。如由核心实验室(心电图核心实验室、超声心动描记术核心实验室和CPET核心实验室)报告的筛选测试结果将用于确认随机化的合格性。至少需要14天来进行筛选程序。

CPET和运动后TTE可以在筛选期间的同一天或分开的数天进行。如果在同一天进行CPET和运动后TTE，则参加者必须为这两个程序仅运动一次，并且参加者将进行CPET，之后进行运动后TTE。如果参加者在不同的天进行CPET和运动后TTE，则参加者首先进行静息、Valsalva和运动后TTE(并将超声心动图发送至核心实验室以测定每者的LVOT梯度)，并且在稍后的一天进行CPET。

正在接受针对其oHCM疾患的治疗的参加者应服用如由研究者确定并通过HCM治疗指南告知的针对其疾患的最佳医学疗法(例如，β-阻滞剂、维拉帕米(verapamil)或地尔硫卓)。该治疗应在筛选前至少2周是稳定且耐受良好的。除非出现安全性或耐受性问题，否则在筛选时的伴随药物应在整个研究过程中保持稳定的剂量。

如果研究者已确定不接受针对参加者基础oHCM疾患的任何治疗是有根据的选择(例如，在先前对β-阻滞剂不耐受或禁忌的情况下)，则也可以考虑所述参加者用于招募。在这种情况下，在研究中应不计划在随机化后开始治疗(使用β-阻滞剂、维拉帕米或地尔硫卓)。

双盲治疗期(第1天[随机化]至第30周/EOT)：满足所有合格标准的参加者将首先经由交互式响应系统(IXRS)以1:1的比例进行随机分配，以接受用玛伐凯泰5mg起始剂量或匹配安慰剂QD进行的治疗。

总体而言，30周的双盲治疗期包括总共排定10次的临床访视，从而保持每2至4周的参加者维持。所有的临床访视包括但不限于：临床评价(症状、PRO评估、AE/SAE评估、伴随药物)。在除第8周和第14周的访视外的所有访视时，将进行ECG、TTE和实验室评估。在除第14周外的所有访视时，将抽取用于PK(谷血浆浓度)的血液。应使研究者和研究基地人员对在随机化后的每次排定的访视时进行的TTE结果不知情。可能出现例外：如果在基地测量的LVEF≤30％，则将通知研究者并将永久停用研究药物。

在随机化之后，首先在第4周访问参加者以初步评价临床耐受性和安全性。在这次访视进行PK样品收集和设盲TTE。在第4周的结果超出PK/PD标准(700ng/mL<谷PK<1000ng/mL)的不太可能的情况下，经由IXRS将剂量在第6周降低至2.5mg。

随后在第6周和第12周访问参加者，以进行重复评价。将进行设盲评估，包括谷PK以及在Valsalva下对LVEF和LVOT梯度的TTE测量，以指导经由IXRS进行的剂量调整。在第8周和第14周，将基于第6周和第12周评估的结果调整剂量(剂量增加、剂量减少、剂量保持不变)。

为了增加安全性，将抽取第8周血液样品，以测定谷血浆PK。如果PK大于700且小于1000ng/mL，则在2周后安排未排定的访视以降低剂量。在任何时候，如果PK血浆浓度≥1000ng/mL，则将暂时停用研究药物。

在第14周后，不再进行另外排定的剂量调定。第18、22和26周的设盲评估可以告知研究药物的剂量降低或暂时停用。每当减少玛伐凯泰的剂量时，参加者将继续以降低的剂量继续服用至EOT(第30周)，除非出现进一步的安全性问题或不耐受性。

在第30周/EOT，参加者将完成运动后TTE(在第26周与第30周之间)和CPET(在第30周)。对于在第30周之前永久停用治疗的任何参加者，应尽快进行提前终止(ET)访视，包括CPET和运动后TTE。还将鼓励进行ET的参加者完成所有剩余的研究访视和评估，包括第30周。

治疗后随访期(第30周/EOT至第38周/研究结束[EOS])：在双盲治疗期结束后(第30周)，将在第34周通过电话联系参加者并且使其在第38周返回以进行EOS访视。在EOS访视时，将重复进行基线静息评估。该治疗后随访期仅适用于在第22周后接受研究药物的参加者。

纳入标准

每名参加者必须满足以下标准才能招募于本研究中。

1.能够理解并遵守研究程序，理解研究涉及的风险，并在第一个研究特异性的程序之前，根据联邦、地方和机构指南提供书面知情同意书

2.在筛选时为至少18岁

3.在筛选时体重大于45kg

4.具有足够的声学窗口，以实现准确的TTE

5.诊断为患有符合当前美国心脏病学会基金会/美国心脏协会和欧洲心脏病学会指南的oHCM，即满足以下两个标准(由超声心动描记术核心实验室记录的标准)：

a.在没有其他心脏疾病(例如高血压、主动脉瓣狭窄)或全身性疾病的情况下且在最大LV壁厚≥15mm(或在HCM阳性家族史的情况下为≥13mm)的情况下，患有无法解释的LV肥厚而心室腔未扩张，以及

b.在筛选期间，如在静息时、Valsalva动作后或运动后通过超声心动描记术所评估，LVOT峰值梯度≥50mmHg(通过超声心动描记术核心实验室解释确认的)

6.通过筛选TTE的超声心动描记术核心实验室读取记录的LVEF≥55％

7.在筛选时具有NYHA II或III级症状

8.在筛选时记录的静息时血氧饱和度≥90％

9.能够进行直立式CPET，并且在筛选时每次中心读取的呼吸交换比(RER)≥1.0；如果RER在0.91与1.0之间，则只有在中心CPET实验室确定在受试者中实现了峰值运动量后，才可以招募参加者(对于次峰值表现的唯一允许原因是[1]收缩期血压(SBP)减少或[2]重度心绞痛，如CPET实验室手册中所述)

10.从筛选访视到最后一剂研究性药物产品(IMP)后3个月，女性参加者不得妊娠或哺乳，并且如果性活跃，则必须使用以下可接受的节育方法之一。对于本研究，激素避孕药不被认为是高度有效的避孕，因为玛伐凯泰可能会降低激素避孕药的有效性。

·双屏障方法(例如，输精管切除术或男性使用避孕套并且女性使用隔膜或宫颈帽)

·屏障(例如，男性使用避孕套)加上女性使用非激素型子宫内避孕器(IUD)或子宫内系统(IUS)

·女性手术不育达6个月或绝经2年。永久性不育包括在筛选前至少6个月进行子宫切除术、双侧卵巢切除术、双侧输卵管切除术和/或有记录的双侧输卵管阻塞。如果女性在停止所有外源激素治疗后有至少2年或更长时间闭经，并且促卵泡激素(FSH)水平在绝经后范围内，则所述女性被认为绝经后的11.具有性伴侣的男性参加者必须同意在研究期间和最后一剂IMP后3个月内使用避孕套，以防止在射精中将玛伐凯泰传递至伴侣

排除标准

符合以下任何标准的参加者将被排除在研究之外。

1.先前参加使用玛伐凯泰的临床研究

2.对玛伐凯泰制剂的任何组分有超敏反应

3.在筛选前30天、或相应消除半衰期的至少5倍(以较长者为准)内参加其中参加者接受任何研究性药物(或当前正在使用研究性装置)的临床试验

4.已知可引起模拟oHCM的心肌肥厚的浸润性或贮积性病症，诸如Fabry病、淀粉样变性或Noonan综合征伴有LV肥厚

5.患有妨碍直立式运动应激测试的任何医学疾患

6.筛选前6个月内有运动时晕厥或持续性室性快速型心律失常的病史

7.有复苏的心脏骤停(随时)史或已知在筛选前6个月内发生危及生命的室性心律失常的适当的植入式心脏复律-除颤器(ICD)放电史

8.患有阵发性间歇性心房纤颤并且筛选时根据研究者对参加者的ECG的评价存在心房纤颤

9.在筛选前未进行抗凝治疗持续至少4周和/或在筛选的6个月内未充分控制心率的持续性或永久性心房纤颤(注–进行抗凝治疗且充分控制心率的持续性或永久性心房纤颤的患者是允许的)

10.当前用双异丙吡胺或雷诺嗪治疗(筛选前14天内)或计划在研究期间用所述药物治疗

11.当前用β-阻滞剂和维拉帕米的组合或β-阻滞剂和地尔硫卓的组合治疗(筛选前14天内)或计划在研究期间用所述组合治疗

12.对于服用β-阻滞剂、维拉帕米或地尔硫卓的个体，在筛选前<14天对该药物进行任何剂量调整或预期在研究期间使用这些药物的治疗方案变化

13.在筛选TTE时在Valsalva动作下的LVOT梯度(Valsalva梯度)<30mmHg

14.在筛选前6个月内已用侵入性室间隔减容(invasive septalreduction)(手术肌切除术或经皮ASA)成功治疗，或计划在研究期间进行这些治疗中的任一种(注意：在筛选前>6个月进行了不成功的肌切除术或经皮ASA的个体如果满足LVOT梯度标准的研究合格标准，则可以被招募)

15.筛选前6个月内放置ICD或计划在研究期间放置ICD

16.Fridericia校正(QTcF)>480ms的QT间期，或研究者认为会对参加者安全造成风险的任何其他ECG异常(例如，二度II型房室传导阻滞)

17.有记录的阻塞性冠状动脉疾病(一支或多支心外膜冠状动脉狭窄>70％)或心肌梗塞病史

18.在筛选时已知中度或重度(根据研究者的判断)主动脉瓣狭窄

19.根据研究者的判断，患有可能导致研究参加提前终止或干扰对研究中功效和安全性评估的测量或解释的任何急性或严重共患疾患(例如，重大感染或血液学、肾脏、代谢、胃肠道或内分泌功能障碍)

20.患有限制运动能力或全身动脉血氧饱和度的肺部疾病

21.筛选10年内临床上显著的恶性肿瘤的病史：

·已成功治疗非转移性皮肤鳞状细胞癌或基底细胞癌或已充分治疗原位宫颈癌的参加者可纳入研究

·患有其他恶性肿瘤且在筛选之前无癌症超过10年的参加者可以纳入研究

22.如由中心实验室所评估，在筛选时安全实验室参数(化学、血液学、凝血和尿液分析)超出正常限值(根据中心实验室参考范围)；然而，安全实验室参数超出正常限值的参加者如果以满足以下所有条件则可以纳入：

·研究人员认为超出正常限值的安全实验室参数在临床上不显著

·如果有丙氨酸转氨酶或天冬氨酸转氨酶结果，则该值必须<3×实验室参考范围的上限

·以身体大小调整的估计肾小球滤过率≥30mL/min/1.73m2

23.在针对人类免疫缺陷病毒、丙型肝炎病毒或乙型肝炎病毒的感染进行筛选时具有阳性血清学测试

24.研究者认为，具有可能对参加者安全造成风险或干扰研究评价、程序或完成的任何其他临床上显著的病症、疾患或疾病的病史或证据

25.目前正在服用或在筛选前14天内服用了违禁药物，诸如CYP2C19抑制剂(例如，奥美拉唑)、强CYP 3A4抑制剂、或圣约翰草(St.John’s Wort)

26.先前用心脏毒性剂诸如多柔比星或类似物治疗

27.无法遵守研究要求，包括需要访视临床基地的次数

28.是与临床研究基地、任何研究供应商或研究赞助商直接关联的人员的一级亲属

玛伐凯泰和匹配安慰剂、施用和时间表

玛伐凯泰胶囊和匹配安慰剂具有相同的外观。研究药物呈现为2号蓝色不透明胶囊，其在主体上打印有黄条带并且在帽上打印有黑条带。每个胶囊含有白色至灰白色粉末。活性胶囊以4种强度提供：2.5mg、5mg、10mg和15mg。

玛伐凯泰活性胶囊和安慰剂胶囊已根据现行良好制造规范(cGMP)法规制造。它们将在带有感应密封件和儿童安全帽的高密度聚乙烯瓶中提供，每瓶30个计数。所有研究药物均应根据适用的当地法规指南进行标记。

玛伐凯泰活性胶囊和安慰剂胶囊必须在2℃至25℃(36℉至77℉)下储存在由MyoKardia提供的包装中。在研究基地处的研究药物将储存在只有授权的研究人员才能进入的安全区域中。

研究药物将在适当标记的30个计数高密度聚乙烯瓶中提供给参加者。参加者将按照研究者的指导服用研究药物。将指示参加者将研究药物胶囊和瓶子储存在阴凉干燥的地方。研究药物应与大约8盎司(48大匙或约235mL)的水一起服用。

剂量调整

剂量调定期(第1天至第14周)

双盲治疗期将包括在第8周和第14周的两步剂量调定方案，所述方案被设计以针对每个参加者基于参加者自己的PK/PD应答参数实现安全且有效的给药(图25和表11)。

在该研究中，研究药物的起始剂量为5mg玛伐凯泰或匹配安慰剂QD，并且每个参加者将从第1天到第8周接受该剂量的研究药物，除非在第4周满足PK/PD标准，在这种情况下，将在第6周减少剂量(表11)。

在第8周和第14周，分别基于其在第6周和第12周的PK/PD评估的结果，对参加者进行剂量调整(剂量增加、剂量减少或剂量不变)(表11)。需注意，将表11提供用于IXRS编程。基地和研究者不会主动调整剂量。所有剂量调整将经由IXRS以双盲方式发生，并且对所有参加者(无论是接受玛伐凯泰还是匹配安慰剂)都进行可能导致设盲剂量调整的评估。然而，需注意，除非参加者暂时停用或永久停用治疗，否则服用安慰剂的参加者将继续(以设盲方式)服用安慰剂。

为了增加安全性，将抽取第8周血液样品，以测定谷血浆PK。如果PK大于700且小于1000ng/mL，则在2周后安排未排定的访视以降低剂量(参见表11)。剂量降低将经由IXRS发生。为了避免潜在的偏见，IXRS将从安慰剂组中随机选择参加者来进行未排定的随访访视。

如果在研究期间的任何时间减少玛伐凯泰剂量，则参加者将继续服用降低剂量至EOT(第30周)，除非出现安全性问题或不耐受性，需要进一步降低剂量或停用剂量。

基于由先前的玛伐凯泰临床研究所告知的PK模型，并且根据招募患者的人口统计学，对于以下剂量估计以下百分比的参加者将达到目标稳态浓度：2.5mg(<1％)、5mg(5％–20％)、10mg(40％–50％)和15mg(30％–55％)。

如果满足向下调定的PK/PD标准，则将如下实施剂量降低：

表11：设盲剂量调整时间表(第1天至第14周)

向下调定的PK/PD标准(要求LVEF≥50％)^a

缩写：IXRS，交互式响应系统；LVEF，左室射血分数；PD，药效动力学；PK，药代动力学。

^aLVEF和谷PK将基于评估从核心实验室直接传达至IXRS，由此使得研究者、研究基地人员和负责人对其不知情。

^b如果满足PK标准，则应用降低剂量。

^c用于降低剂量的第8周评估仅基于血浆PK值，第8周将不进行TTE，并且因此没有LVEF结果。

在第6周和第12周：如果不满足向下调定的PK/PD标准，则可以如下进行可能的剂量向上调定：

剂量调定(需要LVEF≥50％)

缩写：IXRS，交互式响应系统；LVEF，左室射血分数；PD，药效动力学；PK，药代动力学。

^a调定调整也基于第6周和第12周(包括由核心实验室报告的峰值Valsalva梯度测量)直接传达至IXRS，由此使得保持设盲。如果LVEF<50％，则参见暂时停用部分。

给药期(第14周至第30周)

在第14周进行第二次剂量调定后，不再有进一步向上调定；意图是使剂量保持不变，除非出于安全性或其他原因提前停用。在第14周后，参加者将按排定的4周间隔(第18、22、26和30周[±7天])返回临床基地以进行监测。每次访视时，评估AE、伴随药物和症状，并且进行ECG、血浆PK和TTE以进行持续的安全性监测。每次访视时，还通过胶囊计数来监测对研究药物的顺应性。如果满足PK/PD标准，则需要在2周后进行未排定的访视以降低剂量，如表12中所示。

表12设盲剂量调整时间表(第14周至第30周/EOT)

用于剂量降低的PK/PD标准(要求LVEF≥50％)a

缩写：EOT，治疗结束；IXRS，交互式响应系统；LVEF，左室射血分数；PD，药效动力学；PK，药代动力学。

^aLVEF和谷PK将基于评估从核心实验室直接传达至IXRS，由此使得研究者、研究基地人员和负责人对它们不知情。如果LVEF<50％，则参见暂时停用部分。

^b如果满足PK标准，则应用降低剂量。

导致暂时停用的设盲剂量调整

除了上述设盲剂量调整(不在停用剂量之前)之外，在治疗期间的任何时间(T)，在如下所述的药理作用夸大(收缩功能障碍)、高于预期的血浆浓度、或QTcF过度延长的情况下，可以暂时停止给药。

如果参加者具有静息LVEF<50％、血浆药物浓度≥1000ng/mL或QTcF≥500msec(如分别由超声心动描记术中心实验室、PK分析实验室或ECG核心实验室所测定)，则将向研究者和负责人传达已满足暂时停用的标准。收到该信息后，研究基地/研究者将通过电话联系参加者，并且指示参加者在2至4周(T+2至4周)内停用研究药物并返回现场访视。这可以对应于排定的或未排定的访视。需注意，为避免潜在的偏见，对于因安全性信号而进行未排定的随访访视的每名参加者，IXRS将从安慰剂组中随机选择参加者来进行未排定的随访访视。

在随访访视(T+2至4周)时，将重复ECG、血浆PK和TTE，并且计划在2周后(T+4至6周)进行另一次未排定的访视。如果LVEF≥50％并且血浆药物浓度<1000ng/mL且QTcF<500毫秒，则对于研究的剩余部分将如下(先前剂量→重新开始剂量)以较低的剂量(在T+6周)重新开始研究药物：

·安慰剂→安慰剂

·2.5mg→安慰剂

·5mg→2.5mg

·10mg→5mg

·15mg→10mg

如果在随访访视时LVEF、血浆药物浓度和/或QTcF持续超出范围，则将研究药物永久改变为安慰剂。

研究评估

对于要求参加者处于半卧位或仰卧位的评估，应在所有时间点对处于相同位置的参加者进行评估。当要在同一时间点进行多个评估时，评估的优选顺序是ECG、生命体征、PK和随后TTE，全部在研究药物给药之前。评估的顺序在特定时间点可能会略有不同(例如，在第1天和第30周/EOT，附加的1小时给药后PK采样)，以有利于所需评估的最同时进行。研究者认为，在需要时，可以进行未排定的或附加的安全性评估。只要有可能，就鼓励与医疗监护者进行讨论。

超声心动描记术和心肺运动测试

所有超声心动描记术数据将发送到中心成像实验室并且CPET数据将发送到中心实验室；预先指定的来自多次访视的超声心动描记术结果和仅来自筛选访视的CPET结果将被传输至IXRS，以确认合格性和保持设盲。

静息经胸超声心动描记术

在现场访视期间，将在给药前评估静息TTE。将评估静息时的瞬时峰值LVOT梯度和诱发的峰值LVOT梯度(Valsalva动作)。研究者还应确认在筛选期间参加者可以充分进行Valsalva动作。当获得多普勒信号时，应注意选择最佳的窗口和角度，以评估LVOT梯度并避免由二尖瓣反流(MR)喷射(如果存在)产生的污染。还将分析左心室射血分数(二维LVEF)和左心室分数缩短以及多种其他超声心动描记术测量(参见研究参考手册)。除了超声波检查医师不知情，还应使研究者和当地研究团队对在随机化后的每次排定的访视时进行的所有TTE结果不知情。在筛选和EOT时，应在运动后应激超声心动描记术和/或CPET之前进行静息TTE。

运动后应激超声心动描记术

在筛选时以及在研究药物给药之前的第26周与第30周之间，参加者将接受标准的症状受限运动测试(运动后应激超声心动描记术)。该测试可以与CPET在不同的天进行；但是，如果两个程序均在同一天进行，则参加者必须仅对两项测试运动一次，其中参加者首先进行CPET，并且然后进行运动后应激超声心动描记术)。紧接在运动后通过TTE评估瞬时峰值LVOT梯度。当获得多普勒信号时，应注意选择最佳的窗口和角度，以评估LVOT梯度并避免由MR喷射(如果存在)产生的污染。进行标准心肌病疗法(例如，β-阻滞剂或钙通道阻滞剂)的参加者只要有可能应在基线时和在EOT应激超声心动图时服用相同剂量，并且应在运动测试之前施用该药物。

心肺运动测试

在筛选时和在研究药物给药之前的第30周，将使用标准化跑步机或自行车测功机进行CPET。对于给定参加者进行的所有CPET，必须使用相同的方式(跑步机或直立自行车)。对于CPET不允许进行仰卧位测试(即，使用卧式自行车)。禁食4小时后(允许饮水)进行症状受限运动测试。鼓励参加者最大程度地表现，以实现他们的预期峰值运动心率(HR)和发挥水平。将在静息时和在峰值运动时评估心血管和其他多项性能参数，包括但不限于以下各项：耗氧量(VO₂)、以年龄预测的VO₂百分比、二氧化碳产生量(VCO₂)、呼出气量(VE)、VE/VO₂比、通气效率(VE/VCO₂斜率)、RER、循环动力(峰值VO₂/峰值SBP)、实现的代谢当量(METS)、峰值运动时的O₂脉搏、和潮气末CO₂。服用标准心肌病疗法(例如，β-阻滞剂或钙通道阻滞剂)的参加者只要有可能应在筛选和EOT CPET时服用相同剂量，并且应在运动测试之前施用该药物。

纽约心脏协会等级

心力衰竭的NYHA功能分级基于参加者的症状将参加者分配至4类中的1类。在每次研究访视时将由研究者评估心力衰竭分级并且按照临床数据库中所指出的那样进行记录。

心力衰竭的纽约心脏协会功能分级

患者症状等级

I体力活动不受限制。日常的体力活动不会引起过度疲倦、心悸、呼吸困难(呼吸急促)。

II体力活动稍微受限制。静息时舒适。日常的体力活动导致疲倦、心悸、呼吸困难(呼吸急促)。

III体力活动明显受限制。静息时舒适。轻于日常的体力活动引起疲倦、心悸或呼吸困难。

IV不能在无不适的情况下进行任何体力活动。静息时心力衰竭的症状。如果进行任何体力活动，则不适增加。

来源：http://www.heart.org/HEARTORG/Conditions/HeartFailure/AboutHeartFailure/Classes-of-Heart-Failure_UCM_306328_Article.jsp#.VrtuzPkrKUl

肥厚型心肌病症状调查问卷

HCM症状调查问卷(HCMSQ)是一种自填式11项调查问卷，其评估HCM的核心症状(疲劳/疲倦、心悸、胸痛、头晕和呼吸急促)。参加者每天晚上完成一次HCMSQ。HCMSQ将在手持电子设备上完成。筛选访视时将向参加者给予使用电子设备的培训。在筛选期期间，参加者将至少连续7天完成HCMSQ。从第1天至第6周，参加者将每日完成HCMSQ。对于剩余的治疗期间(直到第30周/EOT)，参加者将每4周连续7天完成HCMSQ；参加者还将在第38周/EOS连续7天完成HCMSQ。将使用电子设备上的提醒警报和来自基地工作人员的临床提醒用于确保按时间表完成HCMSQ。

探究性评估

患者总体严重程度印象和患者总体变化印象

患者总体严重程度印象(PGIS)是一种单项调查问卷，其要求参加者在过去的一周内在5点分类评定量表(无、轻度、中度、重度、极重度)上对其总体症状严重程度进行评定。患者总体变化印象(PGIC)是一种单项调查问卷，其要求参加者在7点分类评定量表(非常佳至非常差)上对症状严重程度随时间(自开始服用研究药物以来)的总体变化进行评定。访视时完成的PGIC和其他PRO评估应在可能的情况下在进行任何其他研究程序之前，以及在与研究基地工作人员进行有关研究或研究治疗的任何有意义的讨论之前完成。

工作生产力和活动受损调查问卷

工作生产力和活动受损(WPAI-SHP)调查问卷是作为患者报告的对工作和进行定期活动能力的定量评估而创建的。具体而言，WPAI-SHP询问特定健康问题(在本例中为HCM)对旷工、出勤和日常活动受损的影响。访视时完成的WPAI-SHP和其他PRO评估应在可能的情况下在进行任何其他研究程序之前，以及在与研究基地工作人员进行有关研究或研究治疗的任何有意义的讨论之前完成。

欧洲生命质量5维调查问卷(5个水平)

欧洲生命质量5维5水平调查问卷(EQ-5D-5L)是一种通用的PRO工具，其测量健康状况和与健康相关的生命质量。EQ-5D-5L有2个组成部分：(1)从考虑“今日”行动性、自我护理、日常活动、疼痛/不适和焦虑/抑郁的5个项目中得出的健康效用指数评分；和(2)从范围为0至100的单一视觉模拟量表(VAS)得出的当前(“现在”)总体健康状态评分。贡献于EQ-5D-5L健康效用指数评分的项目均具有相同的5点响应量表(1＝没问题，2＝轻微问题，3＝中度问题，4＝重度问题，5＝非常重度问题)。VAS被锚定有“最佳可想象的健康状态”和“最差可想象的健康状态”。EQ-5D-5L对于许多卫生技术评估机构接受覆盖决策至关重要。访视时完成的EQ-5D-5L和其他PRO评估应在可能的情况下在进行任何其他研究程序之前，以及在与研究基地工作人员进行有关研究或研究治疗的任何有意义的讨论之前完成。

堪萨斯城心肌病调查问卷(23项版本)

堪萨斯城心肌病调查问卷(23项版本)(KCCQ-23)是患者报告的调查问卷，其使用2周的回顾测量患者心血管疾病或其治疗对以下6个不同领域的影响：症状/体征、身体限制、生命质量、社交限制、自我效能和症状稳定性。除了单独领域之外，还可以从KCCQ-23中计算出2个汇总评分：总体汇总评分(包括总症状、身体限制、社交限制和生命质量评分)和临床汇总评分(合并总症状和身体限制量表)。评分范围为0至100，其中评分越高反映健康状态越好。在可能的情况下在进行任何其他研究程序之前，以及在与研究基地工作人员进行有关研究或研究治疗的任何有意义的讨论之前。

手腕佩戴式加速计

在研究期间的2个时间点处，参加者将被提供一个加速度计(GT9X ActiGraphLink)佩戴在手腕上，以收集关于活动的数据。设备具有足够的电池寿命以存储长达11天的活动数据。在一段时间的数据收集后，将归还加速度计以进行数据上传和分析。分析将描述每日步伐计数。这些数据将用于探究在使用研究药物治疗之前和期间进行的体力活动的量和类型。将在筛选(第1天前至少11天)时和在第26周提供加速度计。

药代动力学、药物遗传学和生物标记物评估

药代动力学评估

在所有第1天后现场访视时，在给药前将收集血液样品用于玛伐凯泰血浆浓度评估。在第30周(最后剂量)时，也将在给药后1-2小时内收集PK血液样品用于PK建模。研究者和/或负责人认为，适当时，可以收集未排定的或附加的PK样品。

在从第1天至第30周的所有访视时，都将在研究基地施用研究药物，以有利于PK样品的收集。给药日期和时间将被记录。所有谷PK样品将被发送到核心实验室以进行处理，并且结果将被传输至IXRS。

基因型/药物遗传学/生物标记物评估

HCM基因分型

对于提供同意的参加者，将在第1天给药之前抽取血液以评估HCM基因型和可能的附加DNA测序。如果具有针对与HCM相关的遗传突变呈阳性的先前临床基因型测试的参加者同意提供结果，则不进行进一步的基因型评估。

药物遗传学评估

在筛选时抽取血液以进行CYP 2C19基因分型。来自该药物遗传学样品的剩余物质也将被储存以用于对功效、安全性相关的、PD或PK参数的遗传生物标记物进行潜在的未来分析，如由未来研究使用具有临床意义的终点通过DNA测序或其他遗传测试所测定。筛选失败的样品必须毁掉。

探究性生物标记物评估

将在第1天和第30周收集血液样品并且将其储存以用于疾病的相关探究性标记物，包括但不限于与疾病活动、代谢途径、功效测量或安全性测量相关的蛋白质组和/或RNA分析。

NT-proBNP

在所有筛选后的现场访视时，将采集血液样品以用于NT-proBNP浓度。NT-proBNP的所有血液抽取都必须在静息时和进行任何运动之前抽取。NT-proBNP的血清浓度将包括在为定期IDMC会议提供的数据包中。研究者((例如，用于心力衰竭的医学管理)和/或负责人认为，适当时，可以收集未排定的或附加的血液样品。只要有可能，就鼓励与医疗监护者进行讨论

安全性评估

将在整个研究中评估安全性。安全性评估包括医学病史、体格检查、ECG、生命体征、观察到的和参加者报告的AE、妊娠测试和安全性实验室结果。由研究者判断为临床上重要的任何异常发现将记录为AE。

将通过CEAC裁定以下安全性终点：死亡、中风、急性心肌梗塞、所有住院(CV和非CV)、心力衰竭(HF)事件(包括HF住院和HF的急诊室(ER)/门诊(OP)就诊)、心房纤颤/颤动(刚来自筛选)、ICD疗法、复苏的心脏骤停、室性快速型心律失常(包括室性心动过速(VT)和室性纤颤(VF)；以及在CEAC复查期间鉴定的任何Torsades de Pointe)。

医学病史

将在筛选访视时记录完整的医学病史，其将包括以下方面的评价(过去或现在)：总体、头颈部、眼睛、耳朵、鼻子、喉咙、胸部/呼吸道、心脏/心血管、胃肠道/肝脏、妇科/泌尿生殖器、肌肉骨骼/四肢、皮肤、神经/精神科、内分泌/代谢、血液学/淋巴、过敏/药物敏感性、既往手术、药物滥用、或任何其他疾病或病症以及临床研究的参加(研究药物和/或设备或其他疗法)。

体格检查

在选定的访视时，将进行全面的体格检查，包括神经系统检查(粗大运动和深部肌腱反射)、身高(仅进行筛选)和体重，以及以下各项的评估：总体外观、皮肤、头颈部、口部、淋巴结、甲状腺、腹部、肌肉骨骼、心血管和呼吸系统。在所有其他访视中，将进行简短的心肺体格检查，并如通过间隔史所指示对其他系统进行评估。

在筛选时测量身高(cm)和体重(kg)，并且计算体质指数(kg/m₂)。参加者将被要求脱去他们的鞋子并穿上临床基地指定的衣服。

将在筛选和第30周时在诊所内获取体重。

12导联ECG

在筛选时和在除了第8和14周访视之外的所有现场研究访视时，休息10分钟后将进行12导联ECG评价。所有的ECG数据都将发送到中心心脏实验室并传输至IXRS。

在第1天，将在给药前2小时内进行ECG。在所有其他访视时，均将在给药前获取ECG。

如果研究者认为出于任何其他安全性原因需要进行12导联ECG安全性评估，则他/她可以进行所述评估。这些评估应记录为未排定的评估

心脏监测皮肤贴片

在研究期间的两个时间点处，参加者将佩戴小型设备来收集长达14天的连续HR和心律数据。所述整装设备使用医用粘合剂附接至皮肤并且包括表面电极、用于捕获连续ECG波形的内部电子设备、用于捕获体力活动的加速度计、足够多的固态存储器来存储多日数据、以及为设备供电的电池。在一段时间的数据收集后，所述设备将被运送至核心实验室，在那里将存储在设备上的连续ECG波形和活动记录上传以进行分析。所述分析将提供关于在设备正确应用和运行期间的HR、心律和体力活动的全面披露能力。所述设备将用于探究使用研究药物治疗之前和期间的HR和心律模式。

生命体征

除第8周和第14周访视外，在每次现场研究访视时都要评估生命体征。在筛选、ET、第30周/EOT和第38周时，将获得完整的生命体征，包括温度、HR、呼吸频率和血压(BP)。在所有其他访视时，仅需要HR和BP。

将在参加者处于相同位置的情况下时获得生命体征；休息至少5分钟后，将经由自动记录仪获取BP。

在所有访视时，将在给药前获取生命体征。警报值将被标记。有关另外的细节，查阅研究实验室手册。

其他安全性评估

对于所有具有分娩可能性的女性，将在筛选时进行血清妊娠测试。此外，在整个研究期间，将每4-6周在诊所或家里进行尿液妊娠测试。如果任何尿液检测呈阳性，将进行确认性血清测试。

心脏磁共振成像子研究

对于有资格的参加基地，参加者可以选择参加CMR子研究。将招募大约80名参加者(每个治疗组约40名)。参加者将在第1天和第30周进行CMR。有关另外的细节，查阅CMR子研究参考手册。

在本研究期间的参加者限制

以下限制适用于研究期间的指定时间。如果参加者不遵守这些限制或任何实验室测试(例如，药物、酒精、妊娠)中的测试呈阳性，则他或她可能会被排除或撤出研究。

·从第一次给药前的72小时开始直到最后的随访访视，除了在协议规定的运动测试期间之外，参加者不得做非常规的剧烈运动

·在筛选时开始，将要求受试者戒除献血或献血浆，直到最后的研究访视后3个月

·从第1天开始直到最终的随访访视，要求参加者戒除葡萄柚或葡萄柚汁、塞维利亚(Seville)橙和奎宁(例如通宁水)。

实施例8.化合物1的松弛性特性

化合物1稳定化肌球蛋白的肌动蛋白关闭状态，从而减少可用于参加收缩的肌球蛋白头部的数量。这种减少导致收缩功能直接降低，并且可以通过在心脏舒张期间需要较少的头部分离来改善舒张顺应性。关于化合物1和相关化合物的这项额外工作表明，临床医生可能会通过选择不同的药剂和这些药剂的剂量来独立选择优化收缩和舒张作用的药剂，从而以较低的负性肌力代价提供更大的松弛性益处。优化这些作用的能力允许使用化合物1和相关化合物来在收缩功能扰动极小的情况下治疗舒张功能障碍(包括RCM)的疾病。

临床前，化合物1以不同于其他负性肌力药的概况降低了收缩力。急性或慢性化合物1施用减小了心肌收缩力并增加了LV舒张末期尺寸，同时保持全身性动脉血压和LV舒张末期压力，这表明扩张性改善。与其他负性肌力药的急性作用形成对比，尽管前负荷(EDV)显著增加，但化合物1保持了舒张末期压力以及估计的(线性)舒张末期僵硬度，这与压力-体积关系的有益的向下/向右移动相一致。

来自阻塞性HCM中的PIONEER研究的新数据(表13：群组A；表14：群组B)进一步表明，在舒张功能受损的情况下，化合物1正在改善左心室顺应性，这表现为LVEDV的增加伴随有LV充盈压的降低(如通过E/e’所评估)。

表13.化合物1对LVOT梯度和LV收缩和舒张功能的超声心动描记术测量的影响-群组A(10-15mg/天)N＝10(LVEF N＝4)；平均值±SD。

表14.化合物1对LVOT梯度和LV收缩和舒张功能的超声心动描记术测量的初步影响-群组B(2mg/天)平均值±SD(N)在此患者的数目为6-8名，而不是表10中的10名。

	基线	第4周	P值<sup>*</sup>
				静息梯度(mm Hg)	84±76(6)	59±61(5)	0.0625
运动后梯度(mm Hg)	70±45(6)	93±56(6)	0.0313
				静息LVEF(％)	71±4(6)	73±6(6)	0.4375
运动后LVEF(％)	78±9(5)	76±3(6)	0.6250
				心搏量(mL)	73.3±6.5(6)	77.8±14.3(6)	0.6875
NT-pro BNP(pg/mL)	2162±3601(8)	1258±1789(7)	0.0781
				E/e’	14.0±3.4(6)	10.7±3.5(6)	0.0625
侧壁e’(cm/s)	5.4±1.0(6)	7.0±1.2(6)	0.0313
				间隔e’(cm/s)	3.9±1.1(6)	4.5±1.4(6)	0.4063
平均e’(cm/s)	4.7±1.0(6)	5.7±1.3(6)	0.0938

化合物1(15mg/天)消除了oHCM患者中的LVOT梯度并减小了静息LV收缩功能。这伴随有LV充盈压(E/e’降低)和舒张壁应力(NTpro-BNP降低)的改善和舒张峰值二尖瓣环速度的增加，其伴随有LVEDV的增加，这与LV舒张功能的改善不一致。不能排除LV后负荷降低对二尖瓣环速度的影响。

初步来说，化合物1(2mg/天，持续4周)对迄今为止分析过的患者中的LVOT静息和运动梯度具有一致的影响。在该给药水平上，在静息时和紧接在运动后的LV收缩功能不受化合物1的影响。然而，在没有后负荷变化的情况下，观察到对LV充盈压(↓E/e’和NTpro-BNP)以及舒张峰值二尖瓣环速度(e')的有益影响。这与对舒张功能的有益影响是一致的。

正性松弛剂的居前潜在适应症将包括(按复杂度递增的顺序)：

·症状性非阻塞性HCM

·遗传性限制性非浸润性限制性心肌病(例如肌钙蛋白I、T；结蛋白相关的)

·主动松弛的症状性病症(存在于大约75％的HFpEF中)，不包括浸润性疾病(淀粉样蛋白)和纤维化(硬皮病、放射疗法诱导的心肌病、特发性纤维化)

·症状性后主动脉瓣置换术(手术或经导管)后。

技术成功可能性最高的潜在适应症是有证据表明存在主动松弛病症的那些。最均一的群体可能是症状性非阻塞性HCM患者组。对于更广泛的HFpEF群体，将根据ESC 2016指南选择合格的患者，所述指南规定正常(≥50％)的射血分数并伴随有舒张功能异常的直接证据：受损的LV松弛性、充盈、舒张扩张性或僵硬度，如通过超声心动描记术(二尖瓣E/A比率>0.8；E/e’≥14；间隔e’<7cm/s；侧壁e’<10cm/s)或心脏磁共振(异常的峰值充盈率、至峰值充盈时间、峰值舒张应变率)结合升高水平的BNP(>35pg/mL)或NT-pro BNP(>125pg/mL)...测量的”

实施例9.化合物1血液血浆浓度的测定

使用与串联质谱法(MS/MS)耦合的高压液相色谱(HPLC)在人血浆中测量化合物1浓度。迄今为止，该方法已用于所有临床试验中的化合物1生物分析，并且已使用血浆收集了所有临床数据。该方法的简要说明如下。

使用液-液萃取和HPLC/MS/MS来测定人血浆中化合物1的浓度。将提取物的等分试样注入到与三重四极质谱仪(Sciex API5500)耦合的HPLC仪器上。使用来自Supelco的Lux3u Cellulose-4HPLC柱(150x 2.0mm)将化合物1与样品提取物中可能存在的干扰化合物分离。内标是化合物1的多氘化类似物，以确保测定中使用的内标具有与分析物相似的化学特性，但具有不同质量以用于选择性检测。将化合物1的产物离子的峰面积相对于内标的产物离子的峰面积进行测量以测定浓度。

Claims (193)

1.一种在有需要的受试者中治疗肥厚型心肌病(HCM)的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的具有下式的化合物1：

或其药学上可接受的盐，其中所述治疗有效量为约1mg至50mg的总日剂量。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述治疗有效量为约2mg至30mg的总日剂量。

3.如权利要求1所述的方法，其中所述治疗有效量为约10mg至20mg的总日剂量。

4.如权利要求1所述的方法，其中所述治疗有效量为约5mg至15mg的总日剂量。

5.如权利要求1所述的方法，其中所述治疗有效量为约2mg至10mg的总日剂量。

6.如权利要求1所述的方法，其中所述治疗有效量为约2mg至5mg的总日剂量。

7.如权利要求1所述的方法，其中所述治疗有效量为约2mg至15mg的总日剂量。

8.如权利要求1-6中任一项所述的方法，其中所述受试者在开始用化合物1治疗前至少两周的时段内没有接受β-阻滞剂疗法。

9.如权利要求1-6中任一项所述的方法，其中化合物1与β-阻滞剂疗法组合施用。

10.如权利要求1至9中任一项所述的方法，其中施用所述总日剂量持续8至12周的时段。

11.如权利要求1至10中任一项所述的方法，其中施用治疗有效量的化合物1改善、稳定化或延迟受试者的纽约心脏协会(NYHA)功能分级的恶化。

12.如权利要求11所述的方法，其中施用治疗有效量的化合物1降低所述受试者的纽约心脏协会(NYHA)功能分级。

13.如权利要求12所述的方法，其中所述NYHA功能分级从IV级降低至III级、从IV级降低至II级、或从IV级降低至I级。

14.如权利要求12所述的方法，其中所述NYHA功能分级从III级降低至II级。

15.如权利要求12所述的方法，其中所述NYHA功能分级从III级降低至I级。

16.如权利要求12所述的方法，其中所述NYHA功能分级从II级降低至I级。

17.如权利要求1至10中任一项所述的方法，其中根据个体患者需求调整所述总日剂量。

18.如权利要求17所述的方法，其中在化合物1施用1至8周后调整所述总日剂量。

19.如权利要求18所述的方法，其中在2周后调整所述总日剂量。

20.如权利要求18所述的方法，其中在4周后调整所述总日剂量。

21.如权利要求18所述的方法，其中在6周后调整所述总日剂量。

22.如权利要求18所述的方法，其中在8周后调整所述总日剂量。

23.如权利要求17至22中任一项所述的方法，其中当所述受试者的纽约心脏协会(NYHA)功能分级降低时，减少所述总日剂量。

24.如权利要求23所述的方法，其中当所述受试者的NYHA功能分级从III级降低至I级、从III级降低至II级、或从II级降低至I级时，将所述总日剂量从5mg减少至2.5mg。

25.如权利要求17至22中任一项所述的方法，其中当所述受试者的纽约心脏协会(NYHA)功能分级不降低或恶化时，增加所述总日剂量。

26.如权利要求25所述的方法，其中所述总日剂量从5mg增加至7.5mg、10mg、或15mg。

27.如权利要求17至22中任一项所述的方法，其中所述总日剂量为5mg，并且当所述受试者的静息左心室射血分数(LVEF)为≥55％并且静息左心室流出道(LVOT)峰值梯度为≥30mm Hg时，增加所述剂量。

28.如权利要求27所述的方法，其中当所述受试者的静息LVEF为≥55％并且静息LVOT峰值梯度为≥30mm Hg至<50mm Hg时，将所述总日剂量增加至7.5mg。

29.如权利要求27所述的方法，其中当所述受试者的静息LVEF为≥55％并且静息LVOT峰值梯度为≥50mm Hg时，将所述总日剂量增加至10mg。

30.如权利要求17至22中任一项所述的方法，其中所述总日剂量为5mg，并且当所述受试者的静息左心室射血分数(LVEF)为54％-46％并且静息左心室流出道(LVOT)峰值梯度为≥50mm Hg时，将所述剂量增加至7.5mg。

31.如权利要求1至30中任一项所述的方法，其中所述HCM为阻塞性HCM(oHCM)。

32.如权利要求1所述的方法，其中所述受试者在开始治疗之前具有至少30mmHg的跨所述受试者的左心室流出道(LVOT)压力梯度。

33.如权利要求1所述的方法，其中所述治疗有效量足以在所述受试者中将运动后峰值梯度LVOT降低至小于或等于30mmHg。

34.如权利要求1所述的方法，其中所述治疗有效量足以在所述受试者中将运动后峰值梯度LVOT降低至小于或等于20mmHg。

35.如权利要求1所述的方法，其中治疗有效量足以在所述受试者中将运动后峰值梯度LVOT降低至小于10mmHg。

36.如权利要求1所述的方法，其中治疗有效量足以在所述受试者中产生-100mmHg或更多的基线至第12周运动后峰值LVOT梯度的变化。

37.如权利要求1所述的方法，其中治疗有效量足以在所述受试者中使峰值VO₂(mL/kg/min)增加+3.0或更多。

38.如权利要求1所述的方法，其中治疗有效量足以在所述受试者中使峰值VO₂(mL/kg/min)增加+2.0或更多。

39.如权利要求1所述的方法，其中治疗有效量足以在所述受试者中使峰值VO₂(mL/kg/min)增加+1.5或更多。

40.如权利要求1所述的方法，其中所述化合物1口服施用。

41.如权利要求1所述的方法，其中所述化合物1每日施用一次。

42.如权利要求1所述的方法，其中所述化合物1每日施用两次。

43.如权利要求1所述的方法，其中所述化合物1每日施用至少十二周。

44.如权利要求1所述的方法，其中所述化合物1每日施用至少四周。

45.如权利要求1所述的方法，其中所述化合物1以包含2.5mg、5mg、7.5mg、10mg、或20mg的所述化合物1的单位剂型施用。

46.如权利要求1所述的方法，其中所述治疗有效量为约10mg至约25mg的总日剂量。

47.如权利要求1所述的方法，其中所述治疗有效量为约15mg至约20mg的总日剂量。

48.如权利要求1所述的方法，其中所述治疗有效量为约2.5mg的总日剂量。

49.如权利要求1所述的方法，其中所述治疗有效量为约5mg的总日剂量。

50.如权利要求1所述的方法，其中所述治疗有效量为约7.5mg的总日剂量。

51.如权利要求1所述的方法，其中所述治疗有效量为约10mg的总日剂量。

52.如权利要求1所述的方法，其中所述治疗有效量为约15mg的总日剂量。

53.如权利要求1所述的方法，其中所述治疗有效量为约20mg的总日剂量。

54.如权利要求1所述的方法，其中所述治疗有效量为约25mg的总日剂量。

55.如权利要求1所述的方法，其中所述治疗有效量为选自由10、15、20和25mg组成的组的每日施用一次的剂量量。

56.如权利要求1所述的方法，所述方法进一步包括在所述施用之前测量所述受试者中的左心室射血分数(LVEF)，从而提供第一LVEF值。

57.如权利要求1所述的方法，所述方法进一步包括在所述施用后四周测量所述受试者中的LVEF，从而提供第二LVEF值，并且计算所述第二LVEF值相比于所述第一LVEF值的变化百分比。

58.如权利要求57所述的方法，其中根据所述变化百分比调整所述总日剂量。

59.如权利要求57所述的方法，其中当所述变化百分比小于10％时将所述总日剂量增加10mg。

60.如权利要求57所述的方法，其中当所述变化百分比为10％或更高但低于15％时将所述总日剂量增加5mg。

61.如权利要求57所述的方法，其中当所述变化百分比为15％或更高但低于20％时将所述总日剂量保持不变。

62.如权利要求57所述的方法，其中当所述变化百分比为20％或更高时将所述总日剂量降低5mg。

63.如权利要求1所述的方法，所述方法进一步包括在施用所述化合物1之前测量所述受试者的重量。

64.如权利要求63所述的方法，其中当所述受试者具有60kg或更小的重量时，所述日剂量为约10mg，持续所述治疗的前四周。

65.如权利要求63所述的方法，其中当所述受试者具有超过60kg的重量时，所述日剂量为约15mg，持续所述治疗的前四周。

66.如权利要求1所述的方法，所述方法进一步包括在所述施用后两周测量所述化合物1的血浆浓度。

67.如权利要求66所述的方法，其中当所述化合物1的所述血浆浓度高于750ng/mL时，所述日剂量对于所述治疗的剩余过程保持相同。

68.如权利要求1所述的方法，其中所述受试者在治疗之前具有15mm或更厚的左心室壁厚。

69.如权利要求1所述的方法，其中所述受试者在治疗之前具有约18至约37kg/m²的体质指数(BMI)。

70.如权利要求1所述的方法，其中所述受试者在治疗之前具有55％或更高的LVEF。

71.如权利要求1所述的方法，其中所述受试者在治疗之前具有50mmHg或更高的运动后峰值LVOT梯度。

72.一种单一单位剂量胶囊形式，其包含2-15mg的具有下式的化合物1：

73.如权利要求72所述的单一单位剂量胶囊形式，其中所述胶囊包含约2.5mg的化合物1。

74.如权利要求72所述的单一单位剂量胶囊形式，其中所述胶囊包含约5mg的化合物1。

75.如权利要求72所述的单一单位剂量胶囊形式，其中所述胶囊包含约7.5mg的化合物1。

76.如权利要求72所述的单一单位剂量胶囊形式，其中所述胶囊包含约10mg的化合物1。

77.如权利要求72所述的单一单位剂量胶囊形式，其中所述胶囊包含约15mg的化合物1。

78.一种单一单位剂量片剂形式，其包含2-15mg的具有下式的化合物1：

79.如权利要求78所述的单一单位剂量片剂形式，其中所述片剂包含约2.5mg的化合物1。

80.如权利要求78所述的单一单位剂量片剂形式，其中所述片剂包含约5mg的化合物1。

81.如权利要求78所述的单一单位剂量片剂形式，其中所述片剂包含约7.5mg的化合物1。

82.如权利要求78所述的单一单位剂量片剂形式，其中所述片剂包含约10mg的化合物1。

83.如权利要求78所述的单一单位剂量片剂形式，其中所述片剂包含约15mg的化合物1。

84.一种药物组合物，其包含2-15mg的具有下式的化合物1：

85.如权利要求84所述的药物组合物，其包含约2.5mg的化合物1。

86.如权利要求84所述的药物组合物，其包含约5mg的化合物1。

87.如权利要求84所述的药物组合物，其包含约7.5mg的化合物1。

88.如权利要求84所述的药物组合物，其包含约10mg的化合物1。

89.如权利要求84所述的药物组合物，其包含约15mg的化合物1。

90.一种药盒，其包括如权利要求72至76中任一项所述的单位剂量。

91.如权利要求90所述的药盒，所述药盒进一步包括具有施用化合物1的说明书的标签。

92.一种在有需要的受试者中治疗心肌舒张功能障碍的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的具有下式的化合物1：

或其药学上可接受的盐，其中所述治疗有效量为约2mg至50mg的总日剂量。

93.如权利要求92所述的方法，其中所述治疗有效量为约2mg至30mg的总日剂量。

94.如权利要求92所述的方法，其中所述治疗有效量为约2mg的总日剂量。

95.如权利要求92所述的方法，其中所述治疗有效量为约10mg至15mg的总日剂量。

96.如权利要求92所述的方法，其中所述治疗有效量为约2mg至15mg的总日剂量。

97.如权利要求92至95中任一项所述的方法，其中所述有需要的受试者来自特征在于非阻塞性肥厚型心肌病(非-o HCM)或射血分数保留型心力衰竭(HFpEF)的患者群体；或所述有需要的受试者表现出如通过超声心动描记术测量的异常左心室僵硬或如通过心脏磁共振或通过其他诊断技术测量的左心室僵硬。

98.如权利要求97所述的方法，其中所述有需要的受试者来自特征在于非阻塞性肥厚型心肌病的患者群体。

99.如权利要求97所述的方法，其中所述有需要的受试者来自特征在于HFpEF的患者群体。

100.如权利要求97或权利要求99所述的方法，其中所述患有HFpEF的受试者具有≥50％的射血分数并且具有异常舒张功能的证据。

101.如权利要求97所述的方法，其中所述有需要的受试者表现出如通过超声心动描记术测量的左心室僵硬。

102.如权利要求97或权利要求101所述的方法，其中当满足以下特征中的至少一个时，所述受试者患有如通过超声心动描记术测量的左心室僵硬：二尖瓣E/A比率>0.8；E/e’≥14；间隔e’<7cm/s；侧壁e’<10cm/s。

103.如权利要求97所述的方法，其中所述有需要的受试者表现出如通过心脏磁共振测量的左心室僵硬。

104.如权利要求97或权利要求103所述的方法，其中当满足以下特征中的至少一个时，所述受试者患有如通过心脏磁共振测量的左心室僵硬：异常的峰值充盈率、至峰值充盈时间、或峰值舒张应变率。

105.如权利要求97或权利要求101至104中任一项所述的方法，其中所述受试者进一步表现出脑钠肽(BNP)或N末端脑钠肽前体(NT-pro BNP)的升高血清血液水平。

106.如权利要求105所述的方法，其中当存在至少35pg/mL的BNP或125pg/mL的NT-proBNP时，BNP或NT-pro BNP的血清血液水平是升高的。

107.一种用于在有需要的个体中治疗肥厚型心肌病的方法，所述方法包括以有效实现且维持200至750ng/mL的化合物1的血液血浆浓度的量向所述个体施用化合物1。

108.如权利要求107所述的方法，其中2至15mg的化合物1实现且维持200至750ng/mL的化合物1的血液血浆浓度。

109.如权利要求107所述的方法，其中5至15mg的化合物1实现且维持200至750ng/mL的化合物1的血液血浆浓度。

110.如权利要求107所述的方法，其中约2.5mg的化合物1实现且维持200至750ng/mL的化合物1的血液血浆浓度。

111.如权利要求107所述的方法，其中约5mg的化合物1实现且维持200至750ng/mL的化合物1的血液血浆浓度。

112.如权利要求107所述的方法，其中约10mg的化合物1实现且维持200至750ng/mL的化合物1的血液血浆浓度。

113.如权利要求107所述的方法，其中约15mg的化合物1实现且维持200至750ng/mL的化合物1的血液血浆浓度。

114.如权利要求107至113中任一项所述的方法，其中化合物1的所述血液血浆浓度为350至700ng/mL。

115.如权利要求107至114中任一项所述的方法，其中所述HCM为阻塞性HCM(oHCM)。

116.如权利要求107至114中任一项所述的方法，其中所述HCM为非阻塞性HCM。

117.一种用于在有需要的个体中治疗肥厚型心肌病(HCM)的方法，所述方法包括向所述个体施用5mg日剂量的化合物1，持续至少一周，以及

当所述个体中化合物1的血液血浆浓度低于200ng/mL时，将所述日剂量增加至10mg；或者

当所述个体中化合物1的血液血浆浓度高于750ng/mL时，将所述日剂量减少至2.5mg；或者

当所述个体中化合物1的血液血浆浓度为200至750ng/mL时，将所述日剂量维持在5mg的化合物1。

118.如权利要求117所述的方法，其中

当所述个体中化合物1的血液血浆浓度低于350ng/mL时，将所述日剂量增加至10mg；

当所述个体中化合物1的血液血浆浓度高于700ng/mL时，将所述日剂量减少至2.5mg；

当所述个体中化合物1的血液血浆浓度为350ng/mL至700ng/mL时，将所述日剂量维持在5mg。

119.如权利要求117或118所述的方法，其中

当所述个体的Valsalva梯度大于或等于30mm Hg并且所述个体中化合物1的血液血浆浓度低于所提出的量时，增加所述日剂量；

当所述个体的Valsalva梯度小于30mm Hg并且所述个体中化合物1的血液血浆浓度低于所提出的量时，维持所述日剂量。

120.如权利要求117或119中任一项所述的方法，其中向所述个体施用5mg的化合物1，持续至少两周。

121.如权利要求117或119中任一项所述的方法，其中向所述个体施用5mg的化合物1，持续至少四周。

122.如权利要求117或119中任一项所述的方法，其中向所述个体施用5mg的化合物1，持续至少六周。

123.如权利要求117或119中任一项所述的方法，其中向所述个体施用5mg的化合物1，持续至少八周。

124.如权利要求117至121中任一项所述的方法，其中将所述日剂量增加至10mg并且施用化合物1持续至少一周，所述方法进一步包括

当所述个体中化合物1的血液血浆浓度低于200ng/mL时，将所述日剂量增加至15mg；或者

当所述个体中化合物1的血液血浆浓度高于750ng/mL时，将所述日剂量减少至5mg；或者

当所述个体中化合物1的血液血浆浓度为200至750ng/mL时，将所述日剂量维持在10mg的化合物1。

125.如权利要求124所述的方法，其中

当所述个体中化合物1的血液血浆浓度低于350ng/mL时，将所述日剂量增加至15mg；

当所述个体中化合物1的血液血浆浓度高于700ng/mL时，将所述日剂量减少至5mg；

当所述个体中化合物1的血液血浆浓度为350ng/mL至700ng/mL时，将所述日剂量维持在10mg。

126.如权利要求124或125所述的方法，其中所述

当所述个体的Valsalva梯度大于或等于30mm Hg并且所述个体中化合物1的血液血浆浓度低于所提出的量时，增加所述日剂量；

当所述个体的Valsalva梯度小于30mm Hg并且所述个体中化合物1的血液血浆浓度低于所提出的量时，维持所述日剂量。

127.如权利要求124至126中任一项所述的方法，其中向所述个体施用10mg的化合物1，持续至少两周。

128.如权利要求124至126中任一项所述的方法，其中向所述个体施用10mg的化合物1，持续至少四周。

129.如权利要求124至126中任一项所述的方法，其中向所述个体施用10mg的化合物1，持续至少六周。

130.如权利要求124至126中任一项所述的方法，其中向所述个体施用10mg的化合物1，持续至少八周。

131.如权利要求117至121中任一项所述的方法，其中将所述日剂量减少至2.5mg并且再施用化合物1持续至少一周，所述方法进一步包括

当所述个体中化合物1的血液血浆浓度低于200ng/mL时，将所述日剂量增加至5mg；或者

当所述个体中化合物1的血液血浆浓度为200至750ng/mL时，将所述日剂量维持在2.5mg的化合物1。

132.如权利要求131所述的方法，其中

当所述个体中化合物1的血液血浆浓度低于350ng/mL时，将所述日剂量增加至5mg；

当所述个体中化合物1的血液血浆浓度为350ng/mL至700ng/mL时，将所述日剂量维持在2.5mg。

133.如权利要求131或132所述的方法，其中所述

当所述个体的Valsalva梯度大于或等于30mm Hg并且所述个体中化合物1的血液血浆浓度低于所提出的量时，增加所述日剂量；

当所述个体的Valsalva梯度小于30mm Hg并且所述个体中化合物1的血液血浆浓度低于所提出的量时，维持所述日剂量。

134.如权利要求131至133中任一项所述的方法，其中向所述个体施用2.5mg的化合物1，持续至少两周。

135.如权利要求131或133中任一项所述的方法，其中向所述个体施用2.5mg的化合物1，持续至少四周。

136.如权利要求117至135中任一项所述的方法，其中所述HCM为阻塞性HCM(oHCM)。

137.如权利要求117至135中任一项所述的方法，其中所述HCM为非阻塞性HCM。

138.一种用于在有需要的个体中通过实现且维持200至750ng/mL的化合物1的血液血浆浓度来治疗肥厚型心肌病(HCM)的方法，所述方法包括

a)向个体施用选自由以下组成的组的日剂量：2.5、5、10、和15mg的化合物1。

139.如权利要求138所述的方法，其中化合物1的所述血液血浆浓度为350至700ng/mL。

140.如权利要求138所述的方法，其进一步包括

b-i)当所述个体中化合物1的血液血浆浓度低于200ng/mL时，将所述日剂量增加至下一最高剂量量；或者

b-ii)当所述个体中化合物1的血液血浆浓度高于750ng/mL时，将所述日剂量减少至下一最低剂量量；或者

b-iii)当所述个体中化合物1的血液血浆浓度为200至750ng/mL时，维持化合物1的所述日剂量。

141.如权利要求139所述的方法，其进一步包括

b-i)当所述个体中化合物1的血液血浆浓度低于350ng/mL时，将所述日剂量增加至下一最高剂量量；或者

b-ii)当所述个体中化合物1的血液血浆浓度高于700ng/mL时，将所述日剂量减少至下一最低剂量量；或者

b-iii)当化合物1的血液血浆浓度为350至700ng/mL时，维持化合物1的所述日剂量。

142.如权利要求140或141所述的方法，其中当所述个体的Valsalva梯度大于或等于30mm Hg并且所述个体中化合物1的血液血浆浓度低于所提出的量时，进行步骤b-i)中的增加所述日剂量；当所述个体的Valsalva梯度小于30mm Hg并且所述个体中化合物1的血液血浆浓度低于所提出的量时，维持化合物1的所述日剂量。

143.如权利要求140至142中任一项所述的方法，其进一步包括c)每两至四周重复步骤b)。

144.如权利要求140至142中任一项所述的方法，其进一步包括c)每四至六周重复步骤b)。

145.如权利要求140至142中任一项所述的方法，其进一步包括c)每四至八周重复步骤b)。

146.如权利要求138至145中任一项所述的方法，其中所述HCM为阻塞性HCM(oHCM)。

147.如权利要求138至145中任一项所述的方法，其中所述HCM为非阻塞性HCM。

148.一种用于在有需要的个体中通过在所述个体中实现且维持在200至750ng/mL之间的化合物1的血液血浆浓度来治疗肥厚型心肌病(HCM)的方法，所述方法包括施用日剂量2.5至15mg的化合物1并且当所述个体中化合物1的血液血浆浓度小于200ng/mL时增加所述日剂量；或者当所述个体中化合物1的血液血浆浓度大于750ng/mL时减少所述日剂量。

149.如权利要求148所述的方法，其中将所述个体中化合物1的所述血液血浆浓度实现且维持在350至700ng/mL下；当所述个体中化合物1的血液血浆浓度小于350ng/mL时增加化合物1的所述日剂量；或者当所述个体中化合物1的血液血浆浓度小于700ng/mL时减少化合物1的所述日剂量。

150.如权利要求148或149所述的方法，其中所述

当所述个体的Valsalva梯度大于或等于30mm Hg并且所述个体中化合物1的血液血浆浓度低于所提出的量时，增加化合物1的所述日剂量；以及

当所述个体的Valsalva梯度小于30mm Hg并且所述个体中化合物1的血液血浆浓度低于所提出的量时，维持所述日剂量。

151.如权利要求148至150中任一项所述的方法，其中所述HCM为阻塞性HCM(oHCM)。

152.如权利要求148至150中任一项所述的方法，其中所述HCM为非阻塞性HCM。

153.一种用于在有需要的个体中通过在所述个体中实现且维持在200至750ng/mL之间的化合物1的血液血浆浓度来治疗肥厚型心肌病的方法，所述方法包括

a)施用日剂量2.5至15mg的化合物1，持续至少1周；

b)测量所述个体中化合物1的血液血浆浓度；以及

c)当所述个体中化合物1的所述血液血浆浓度小于200ng/mL时，增加化合物1的所述日剂量；或者

当所述个体中化合物1的所述血液血浆浓度大于750ng/mL时，减少化合物1的所述日剂量；或者

当所述个体中化合物1的所述血液血浆浓度为200至750ng/mL时，继续化合物1的相同日剂量。

154.如权利要求153所述的方法，其中将所述个体中化合物1的血液血浆浓度实现且维持为350ng/mL至700ng/mL，并且步骤c)包括

当所述个体中化合物1的所述血液血浆浓度小于350ng/mL时，增加化合物1的所述日剂量；或者

当所述个体中化合物1的所述血液血浆浓度大于700ng/mL时，减少化合物1的所述日剂量；或者

当所述个体中化合物1的所述血液血浆浓度为350至700ng/mL时，继续化合物1的相同日剂量。

155.如权利要求153或154所述的方法，其中所述

当所述个体的Valsalva梯度大于或等于30mm Hg并且所述个体中化合物1的血液血浆浓度低于所提出的量时，增加化合物1的所述日剂量；或者

当所述个体的Valsalva梯度小于30mm Hg并且所述个体中化合物1的血液血浆浓度低于所提出的量时，维持所述日剂量。

156.如权利要求153或154所述的方法，其进一步包括d)每1至12周重复步骤a)至c)。

157.如权利要求156所述的方法，其中每2周重复所述步骤a)至c)。

158.如权利要求156所述的方法，其中每4周重复所述步骤a)至c)。

159.如权利要求156所述的方法，其中每6周重复所述步骤a)至c)。

160.如权利要求156所述的方法，其中每8周重复所述步骤a)至c)。

161.如权利要求156所述的方法，其中每10周重复所述步骤a)至c)。

162.如权利要求156所述的方法，其中每12周重复所述步骤a)至c)。

163.如权利要求153至162中任一项所述的方法，其中步骤a)中化合物1的初始日剂量为5mg。

164.如权利要求153至162中任一项所述的方法，其中所述日剂量选自由以下组成的组：2、2.5、5、10和15mg的化合物1，并且在步骤c)中将化合物1的所述日剂量增加或减少至化合物1的下一最高量或最低量。

165.如权利要求153至164中任一项所述的方法，其中所述HCM为阻塞性HCM(oHCM)。

166.如权利要求153至164中任一项所述的方法，其中所述HCM为非阻塞性HCM。

167.一种用于在有需要的个体中治疗肥厚型心肌病的方法，所述方法包括向所述个体施用选自由以下组成的组的量的化合物1的总日剂量：2.5mg、5mg、10mg和15mg。

168.如权利要求167所述的方法，其中化合物1的所述总日剂量为2.5mg。

169.如权利要求167所述的方法，其中化合物1的所述总日剂量为5mg。

170.如权利要求167所述的方法，其中化合物1的所述总日剂量为10mg。

171.如权利要求167所述的方法，其中化合物1的所述总日剂量为15mg。

172.如权利要求167至171中任一项所述的方法，其中所述HCM为阻塞性HCM(oHCM)。

173.如权利要求167至171中任一项所述的方法，其中所述HCM为非阻塞性HCM。

174.一种用于在有需要的个体中治疗肥厚型心肌病的方法，所述方法包括

a)向所述个体施用日剂量为2至15mg的化合物1，持续至少1周；

b)监测所述个体；以及

c)基于药代动力学和/或药效动力学测量调整化合物1的所述日剂量。

175.如权利要求174所述的方法，其中所述监测为非侵入性监测技术。

176.如权利要求175所述的方法，其中所述非侵入性监测技术选自由以下组成的组：测量峰值VO₂水平、评估NYHA功能分级、测量Valsalva梯度、用心电图或超声心动图测量心脏活动、及其组合。

177.如权利要求176所述的方法，其中

所述调整步骤包括

当所述个体在所述非侵入性监测技术中的一个或多个中未展示出临床改善时，增加化合物1的所述日剂量；或者

当所述个体在所述非侵入性监测技术中的一个或多个中展示出临床消退时，减少化合物1的所述日剂量；或者

当所述个体在所述非侵入性监测技术中的一个或多个中展示出临床改善时，继续化合物1的相同日剂量。

178.如权利要求174所述的方法，其中

所述监测步骤包括测量所述个体中化合物1的血液血浆浓度并且/或者所述监测步骤包括测量所述个体中N末端脑钠肽前体(NT-pro BNP)的血液血浆浓度。

179.如权利要求178所述的方法，其中

所述调整步骤包括

当所述个体中化合物1的所述血液血浆浓度小于200ng/mL时，增加化合物1的所述日剂量；或者

当所述个体中化合物1的所述血液血浆浓度大于750ng/mL时，减少化合物1的所述日剂量；或者

当所述个体中化合物1的所述血液血浆浓度为200至750ng/mL时，继续化合物1的相同日剂量。

180.如权利要求178所述的方法，其中

所述调整步骤包括

当所述个体中化合物1的所述血液血浆浓度小于350ng/mL时，增加化合物1的所述日剂量；或者

当所述个体中化合物1的所述血液血浆浓度大于700ng/mL时，减少化合物1的所述日剂量；或者

当所述个体中化合物1的所述血液血浆浓度为350至700ng/mL时，继续化合物1的相同日剂量。

181.如权利要求179或180所述的方法，其中所述

当所述个体的Valsalva梯度大于或等于30mm Hg并且所述个体中化合物1的血液血浆浓度低于所提出的量时，增加化合物1的所述日剂量；或者

当所述个体的Valsalva梯度小于30mm Hg并且所述个体中化合物1的血液血浆浓度低于所提出的量时，维持所述日剂量。

182.如权利要求174至181中任一项所述的方法，其进一步包括d)每1至12周重复步骤a)至c)。

183.如权利要求182所述的方法，其中每2周重复所述步骤a)至c)。

184.如权利要求182所述的方法，其中每4周重复所述步骤a)至c)。

185.如权利要求182所述的方法，其中每6周重复所述步骤a)至c)。

186.如权利要求182所述的方法，其中每8周重复所述步骤a)至c)。

187.如权利要求182所述的方法，其中每10周重复所述步骤a)至c)。

188.如权利要求182所述的方法，其中每12周重复所述步骤a)至c)。

189.如权利要求174至188中任一项所述的方法，其中步骤a)中化合物1的初始日剂量为5mg。

190.如权利要求174至189中任一项所述的方法，其中所述日剂量选自由以下组成的组：2、2.5、5、10和15mg的化合物1，并且在步骤c)中将化合物1的所述日剂量增加或减少至化合物1的下一最高量或最低量。

191.如权利要求174至189中任一项所述的方法，其中所述日剂量选自由以下组成的组：2.5、5、7.5、10、12.5和15mg的化合物1，并且在步骤c)中将化合物1的所述日剂量增加或减少至化合物1的下一最高量或最低量。

192.如权利要求174至189中任一项所述的方法，其中所述HCM为阻塞性HCM(oHCM)。

193.如权利要求174至189中任一项所述的方法，其中所述HCM为非阻塞性HCM。

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