CN111154660A - 一种高开环高含量莫纳可林k的水溶性功能红曲及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种高开环高含量莫纳可林K的水溶性功能红曲及其制备方法和应用,所述制备方法为:将紫色红曲霉诱变株在发酵培养基中进行液态深层发酵,得到所述水溶性功能红曲;所述紫色红曲霉诱变株保藏编号:CCTCC NO:M2018586;所述发酵培养基包括碳源、糖醇、氮源和无机盐;所述碳源包括大米;所述无机盐包括钾的磷酸盐和基础无机盐。本申请突破性地只采用大米为碳源,配合糖醇和特殊含量的钾的磷酸盐,通过发明人原有紫色红曲霉诱变株进行液态深层发酵制备得到高开环、高含量莫纳可林K的水溶性功能红曲,无甘油残留的安全隐患,符合QB/T2847‑‑2007、GB2760‑‑2014标准的要求,应用前景广阔。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术领域,更具体地,涉及一种高开环高含量莫纳可林K的水溶性功能红曲及其制备方法和应用。
背景技术
以大米为原料,由红曲霉发酵生成的含发酵自然产生的莫纳可林K等生物活性物质的红曲称为功能红曲。功能红曲对合成胆固醇的限速酶HMG-CoA还原酶具有特异性的抑制作用,在临床上具有降血脂、降血压及抗肿瘤等功效。
红曲菌株发酵会合成开环结构与闭环结构的MonacolinK类物质,但只有开环结构的酸式结构的MonacolinK才具有活性,其可直接与合成胆固醇的限速酶HMG-CoA还原酶结合,抑制该酶的活性。闭环结构的内脂结构的MonacolinK无活性,需经人体肝脏分泌的羟基酸脂酶参与水解成开环结构的MonacolinK才具活性,肝脏分泌羟基酸脂酶会损害肝脏功能,增加肝脏的负担,从而造成肝脏的慢性中毒,患者需定期进行肝功能的检查,这就是通常所言的功能红曲毒性问题的所在。
功能红曲的工业化生产可分为固态发酵和液态发酵两种方式。目前,功能红曲的生产全部采用大米为原料,以三角瓶进行固态发酵,产品中开环结构的MonacolinK只有20%左右,产品味苦,不溶于水,副作用大,严重影响了产品的使用。此外固态发酵还存在发酵过程代谢物难于调控、易染菌、周期长、产量低、劳动强度大、生产效率低等弊端。
现有技术中,单独使用大米粉作碳源进行功能红曲的液态发酵,所产生的活性物质成分较低,发酵醪液MonacolinK含量通常在5~30mg/L,无经济价值,无法批量生产及应用。目前在实验室,功能红曲的液态发酵大多采用大米粉、葡萄糖与甘油作复合碳源,或单独使用甘油作碳源进行液态发酵。采用摇瓶发酵试验,发酵醪液MonacolinK含量可达1000~1600mg/L,15L试验罐发酵,发酵醪液MonacolinK含量可达889mg/L。但甘油为化工原料,非食品添加剂,既不符合功能红曲的中国轻工行业标准QB/T2847--2007的原料要求,也不符合食品安全国家标准--食品添加剂使用标准GB2760--2014的规定,上述技术无法应用于生产。
因此,需要开发出能够单独采用大米作为碳源的液态发酵方法,从而生产出符合QB/T2847--2007、GB2760--2014标准且具有高开环、高含量莫纳可林K的水溶性功能红曲。
发明内容
本发明为克服上述现有技术所述的缺陷,提供一种高开环高含量莫纳可林K的水溶性功能红曲的制备方法,提供的制备方法能够单独采用大米作为碳源,不使用甘油作为发酵原料,符合QB/T2847--2007、GB2760--2014标准,而且,制得的水溶性功能红曲中莫纳可林K开环比例高、含量高,应用前景广阔。
本发明的另一目的在于提供上述制备方法制得的高开环高含量莫纳可林K的水溶性功能红曲。
本发明的又一目的在于提供上述高开环高含量莫纳可林K的水溶性功能红曲在制备降血脂制剂中的应用。
为解决上述技术问题,本发明采用的技术方案是:
一种高开环高含量莫纳可林K的水溶性功能红曲的制备方法,所述制备方法为:将紫色红曲霉诱变株在发酵培养基中进行液态深层发酵,得到所述水溶性功能红曲;
所述紫色红曲霉诱变株于2018年09月03日保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号:CCTCC NO:M2018586;
所述发酵培养基包括碳源、糖醇、氮源和无机盐;所述碳源包括大米;所述无机盐包括钾的磷酸盐和基础无机盐,所述钾的磷酸盐按重量体积比计的含量为0.23%~1.0%kg/m3。
上述紫色红曲霉诱变株已在中国专利申请CN109517740A中公开。该紫色红曲霉诱变株能够生产高开环、高含量莫纳可林K的水溶性功能红曲,几乎不产桔霉素,经鉴定能够用于食品、保健品、药品生产。
所述发酵培养基以大米为碳源,不包括甘油。
现有技术的制备方法一般使用含有甘油的培养基,甘油在红曲霉发酵过程中具有重要作用,是现有技术制备功能红曲的液态发酵培养基中不可缺少的成分。
本申请突破性地只采用大米为碳源,配合糖醇和特殊含量的钾的磷酸盐,得到一种全新的发酵培养基,上述紫色红曲霉诱变株在该培养基中竟然能够通过液态深层发酵能够制备得到高开环、高含量莫纳可林K的水溶性功能红曲,无桔霉素或含量极低。
其中,糖醇和特殊含量的钾的磷酸盐在发酵培养基中具有重要作用。发明人研究发现,糖醇能够增加紫色红曲霉诱变株的胞外代谢物的分泌,最大限度地降低胞内代谢物的反馈抑制。该特殊含量的钾的磷酸盐能够有效提高该紫色红曲霉诱变株中酶的活性,实现以大米为碳源的条件下,大幅提高开环莫纳可林K的产量;较低含量的钾的磷酸盐则无法实现该技术效果。
本发明通过上述技术创新,在发明人原有的紫色红曲霉诱变株基础上,实现只采用大米作为碳源,不采用甘油作为发酵原料,通过上述紫色红曲霉诱变株液态深层发酵生产具有高开环、高含量MonacolinK的水溶性功能红曲。
由于发酵培养基以大米为碳源、不使用甘油,无甘油残留的安全隐患,符合中国轻工行业标准QB/T2847--2007和食品安全国家标准--食品添加剂使用标准GB2760--2014的要求,产品的应用范围大大增加,可广泛用于食品、保健品、药品的生产。而且,上述制备方法工艺简单、易于规模化生产、绿色环保。
发酵结束后,进行固液分离,得到发酵滤液和滤渣。发酵滤液通过真空低温浓缩制成液态产品;滤渣经洗涤得菌丝体,后经真空低温干燥粉碎制成固态产品。液态产品中开环结构的莫纳可林K含量占莫纳可林K总含量的比例能够达到90%~95%,固态产品中开环结构的莫纳可林K含量占莫纳可林K总含量的比例能够达到85%~90%,两产品中开环、闭环结构的莫纳可林K的质量含量能够达到0.8%~1.5%,两产品均无异味、苦味,具功能红曲特有的香味,水溶性好,不含桔霉素或含量极低。
液态产品中的莫纳可林K为胞外莫纳可林K,本发明提供的方法制得产品中胞外莫纳可林K占总莫纳可林K含量的75%以上。
尤其突出的是,本发明提供的方法制得的产品在后续浓缩或干燥的后处理过程中,莫纳可林K中开环与闭环的比例不会减小,所以,本发明制得的功能红曲产品中可能存在有利于稳定开环莫纳可林K的成分。而现有技术在制备莫纳可林K时,经过同样的后处理,莫纳可林K中开环与闭环的比例会大幅减小。
优选地,所述大米为大米粉。
更优选地,所述大米粉为籼米粉和/或粳米粉。
优选地,所述碳源按重量体积比计的含量为6%~20%kg/m3。
更优选地,所述碳源按重量体积比计的含量为8%~12%kg/m3。
优选地,所述钾的磷酸盐为三水合磷酸二氢钾和/或三水合磷酸氢二钾。
优选地,所述钾的磷酸盐按重量体积比计的含量为0.23%~1.0%kg/m3。
更优选地,所述钾的磷酸盐按重量体积比计的含量为0.30%~0.35%kg/m3。
优选地,所述糖醇为碳原子数为小于等于6的糖醇。
优选地,所述糖醇为山梨糖醇、甘露糖醇、木糖醇或赤藓糖醇的一种或几种。
优选地,所述糖醇按重量体积比计的含量为1%~12%kg/m3。
更优选地,所述糖醇按重量体积比计的含量为2%~6%kg/m3。
优选地,所述氮源为大豆水解物和/或玉米浆。所述大豆水解物和玉米浆为本领域常用的氮源。
优选地,所述基础无机盐包括MgSO4·7H2O、(NH4)2SO4、NaNO3和ZnSO4·7H2O。
优选地,所述发酵培养基包括如下按重量体积比计算的组分:碳源6%~20%,糖醇1%~12%,大豆水解物5%~12%,玉米浆0.5%~2%,钾的磷酸盐0.23%~1.0%,MgSO4·7H2O 0.05%~0.20%,(NH4)2SO4 0.05%~0.20%,NaNO3 0.1%~0.4%,ZnSO4·7H2O 0.1%~0.3%,余量为水;所述重量体积比的单位为kg/m3。
优选地,所述发酵培养基的pH值为3.0~5.0。所述发酵培养基一般需要在121℃温度下灭菌处理30min。
发酵过程中,可以采用本领域中常用的接种量。优选地,接种量按体积比为6%~15%。
优选地,所述液态深层发酵条件为,前3天温度为30~35℃,3天后的温度为23~26℃;转速120~180rpm;罐压0.03~0.07Mpa;通风比1:0.7~2.5。发酵培养16~22天即可。
优选地,所述液态产品的浓缩温度为40~60℃。
优选地,所述固态产品的干燥温度为40~60℃。
上述方法中,发酵时接种用的种子液可以采用本领域常用的方法培养得到。
优选地,所述高开环高含量莫纳可林K的水溶性功能红曲的制备方法在发酵前进行种子液的制备,所述种子液由上述紫色红曲霉诱变株在种子培养基中培养得到。
优选地,所述种子培养基包括如下按重量体积比计算的组分:葡萄糖4%~12%,蛋白胨2.0%~5.0%,玉米浆0.5%~2.0%,NaNO3 0.1%~0.4%,MgSO4·7H2O 0.05%~0.20%,K2HPO4·3H2O 0.05%~0.25%,余量为水;所述重量体积比的单位为kg/m3。所述种子培养基的pH值为自然。
优选地,所述种子液的培养条件为,30~35℃,120~200rpm,通风比1:1.2~2.0,罐压0.04~0.06Mpa,在种子培养基中培养10~42h。
优选地,所述种子液的培养是先培养一级种子,再将一级种子培养成二级种子。培养一级种子时,接种量为5%~10%,可以在80L的种子罐中进行。培养二级种子时,接种量为6%~12%,可以在240L的种子罐中进行。
上述制备方法制得的高开环高含量莫纳可林K的水溶性功能红曲也在本发明的保护范围内。
所述高开环高含量莫纳可林K的水溶性功能红曲包括液态产品和固态产品,所述液态产品中开环结构的莫纳可林K含量占莫纳可林K总含量的90%~95%;所述固态产品中开环结构的莫纳可林K含量占莫纳可林K总含量的85%~90%。
所述高开环高含量莫纳可林K的水溶性功能红曲中莫纳可林K的质量含量为0.8%~1.5%。
所述高开环高含量莫纳可林K的水溶性功能红曲中不含桔霉素或含量极低。
本发明还保护上述高开环高含量莫纳可林K的水溶性功能红曲在制备降血脂制剂中的应用。
本发明还保护一种降血脂制剂,所述降血脂制剂含有上述高开环高含量莫纳可林K的水溶性功能红曲。
与现有技术相比,本发明的有益效果是:
本申请突破性地只采用大米为碳源,配合糖醇和特殊含量的钾的磷酸盐,通过原有紫色红曲霉诱变株进行液态深层发酵制备得到高开环、高含量莫纳可林K的水溶性功能红曲,无甘油残留的安全隐患,符合QB/T2847--2007、GB2760--2014标准的要求。该方法制得的高开环高含量莫纳可林K的水溶性功能红曲,符合食品、保健品、药品的安全质量要求,其中液态产品可作为生产食品、保健品、药品口服液的原料,固态产品亦可作为生产食品、保健品、药品的原料,应用前景广阔。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明作进一步的说明。
实施例中的原料均可通过市售得到;
本发明中的紫色红曲霉诱变株于2018年09月03日保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号:CCTCC NO:M2018586;保藏地址:中国武汉,中国典型培养物保藏中心。实施例中使用的紫色红曲霉诱变株即为该诱变株。
除非特别说明,本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。
实施例1
一种高开环高含量莫纳可林K的水溶性功能红曲的制备方法,具体如下:
(1)种子液的制备
一级种子液的制备:
采用紫色红曲霉(Monascus purpureus Went)诱变株TY02作为生产种子。以摇瓶种液按5%接种量(V/V)接种于灭菌降温的种子培养基(葡萄糖4%,蛋白胨2.0%,玉米浆0.5%,NaNO3 0.1%,MgSO4·7H2O 0.05%,K2HPO4·3H2O 0.05%,组分按重量体积比计,单位为kg/m3;pH值自然)中进行培养增殖,30℃,150rpm,通风比1:1.2,罐压0.04Mpa,培养36h,使菌体处于对数生长期。
二级种子液的制备:
以处于对数生长期的一级种子液按6%接种量(V/V)接种于灭菌降温的种子培养基(葡萄糖5%,蛋白胨2.5%,玉米浆0.7%,NaNO3 0.15%,MgSO4·7H2O 0.05%,K2HPO4·3H2O 0.05%,组分按重量体积比计,单位为kg/m3;pH值自然)中进行培养增殖,30℃,120rpm,通风比1:1.3,罐压0.04Mpa,培养25h,使菌体处于对数生长期。
(2)发酵:采用液态深层发酵
以处于对数生长期的二级种子液按6%接种量(V/V)接种于灭菌降温的发酵培养基(碳源6%,糖醇1%,大豆水解物5%,玉米浆0.5%,磷酸盐0.23%,MgSO4·7H2O 0.05%,(NH4)2SO4 0.05%,NaNO3 0.1%,ZnSO4·7H2O 0.1%,组分按重量体积比计,单位为kg/m3;pH值3.0,其中碳源为按质量比40∶60混合的籼米粉和粳米粉;磷酸盐为按质量比45:55混合的三水合磷酸二氢钾、三水合磷酸氢二钾;糖醇为按质量比35:65混合的甘露糖醇、赤藓糖醇)。发酵在1.5T发酵罐中进行,发酵培养基于0~3天,30℃;4~20天,23℃;120rpm;罐压:0.03Mpa,通风比:1:0.7,培养20天。
后处理:发酵结束,进行固液分离,发酵滤液经真空低温浓缩得液态产品,液态产品固含物含量为58%;滤渣经洗涤得菌丝体,后经真空低温干燥粉碎而成固态产品。其中:发酵滤液浓缩温度为45℃,菌丝体干燥温度为45℃。
实施例2
一种高开环高含量莫纳可林K的水溶性功能红曲的制备方法,具体如下:
(1)种子液的制备
一级种子液的制备:
采用紫色红曲霉(Monascus purpureus Went)诱变株TY02作为生产种子。以摇瓶种液按6%接种量(V/V)接种于灭菌降温的种子培养基(葡萄糖5%,蛋白胨2.5%,玉米浆0.7%,NaNO3 0.15%,MgSO4·7H2O 0.09%,K2HPO4·3H2O 0.10%,组分按重量体积比计,单位为kg/m3;pH值自然)中进行培养增殖,31℃,160rpm,通风比1:1.5,罐压0.05Mpa,培养30h,使菌体处于对数生长期。
二级种子液的制备:
以处于对数生长期的一级种子液按7%接种量(V/V)接种于灭菌降温的种子培养基(葡萄糖7%,蛋白胨2.8%,玉米浆0.9%,NaNO3 0.20%,MgSO4·7H2O 0.08%,K2HPO4·3H2O 0.08%,组分按重量体积比计,单位为kg/m3;pH值自然)中进行培养增殖,31℃,130rpm,通风比1:1.5,罐压0.04Mpa,培养22h,使菌体处于对数生长期。
(2)发酵:采用液态深层发酵
以处于对数生长期的二级种子液按8%接种量(V/V)接种于灭菌降温的发酵培养基(碳源9%,糖醇3%,大豆水解物6.5%,玉米浆0.8%,磷酸盐0.28%,MgSO4·7H2O0.08%,(NH4)2SO4 0.08%,NaNO3 0.15%,ZnSO4·7H2O 0.12%,,组分按重量体积比计,单位为kg/m3;pH值3.5,其中碳源为按质量比50∶50混合的籼米粉和粳米粉;磷酸盐为按质量比40:60混合的三水合磷酸二氢钾、三水合磷酸氢二钾;糖醇为按质量比30:70混合的山梨糖醇、赤藓糖醇),发酵在1.5T发酵罐中进行,发酵培养基于0~3天,31℃;4~20天,24℃;135rpm;罐压:0.04Mpa,通风比:1:1.2,培养20天。
后处理:发酵结束,进行固液分离,发酵滤液经真空低温浓缩得液态产品,液态产品固含物含量为56%;滤渣经洗涤得菌丝体,后经真空低温干燥粉碎而成固态产品。其中:发酵滤液浓缩温度为50℃,菌丝体干燥温度为50℃。
实施例3
一种高开环高含量莫纳可林K的水溶性功能红曲的制备方法,具体如下:
(1)种子液的制备
一级种子液的制备:
采用紫色红曲霉(Monascus purpureus Went)诱变株TY02作为生产种子。以摇瓶种液按8%接种量(V/V)接种于灭菌降温的种子培养基(葡萄糖8%,蛋白胨3.0%,玉米浆1.2%,NaNO3 0.2%,MgSO4·7H2O 0.1%,K2HPO4·3H2O 0.15%,组分按重量体积比计,单位为kg/m3;pH值自然)中进行培养增殖,32℃,180rpm,通风比1:1.8,罐压0.04Mpa,培养26h,使菌体处于对数生长期。
二级种子液的制备:
以处于对数生长期的一级种子液按8%接种量(V/V)接种于灭菌降温的种子培养基(葡萄糖8.5%,蛋白胨3.2%,玉米浆1.0%,NaNO3 0.25%,MgSO4·7H2O 0.10%,K2HPO4·3H2O 0.15%,组分按重量体积比计,单位为kg/m3;pH值自然)中进行培养增殖,32℃,150rpm,通风比1:1.8,罐压0.05Mpa,培养18h,使菌体处于对数生长期。
(2)发酵:采用液态深层发酵
以处于对数生长期的二级种子液按10%接种量(V/V)接种于灭菌降温的发酵培养基(碳源12%,糖醇5%,大豆水解物9%,玉米浆1.0%,磷酸盐0.35%,MgSO4·7H2O 0.1%,(NH4)2SO4 0.1%,NaNO3 0.2%,ZnSO4·7H2O 0.15%,组分按重量体积比计,单位为kg/m3;pH值4.0,其中碳源为按质量比60∶40混合的籼米粉和粳米粉;磷酸盐为按质量比20:80混合的三水合磷酸二氢钾、三水合磷酸氢二钾;糖醇为按质量比70:30混合的山梨糖醇、木糖醇),发酵在1.5T发酵罐中进行,发酵培养基于0~3天,32℃;4~21天,24.5℃;140rpm;罐压:0.04Mpa,通风比:1:1.6,培养21天。
后处理:发酵结束,进行固液分离,发酵滤液经真空低温浓缩得液态产品,液态产品固含物含量为55%;滤渣经洗涤得菌丝体,后经真空低温干燥粉碎而成固态产品。其中:发酵滤液浓缩温度为48℃,菌丝体干燥温度为48℃。
实施例4
一种高开环高含量莫纳可林K的水溶性功能红曲的制备方法,具体如下:
(1)种子液的制备
一级种子液的制备:
采用紫色红曲霉(Monascus purpureus Went)诱变株TY02作为生产种子。以摇瓶种液按10%接种量(V/V)接种于灭菌降温的种子培养基(葡萄糖12%,蛋白胨5%,玉米浆2.0%,NaNO3 0.4%,MgSO4·7H2O 0.2%,K2HPO4·3H2O 0.25%,组分按重量体积比计,单位为kg/m3;pH值自然)中进行培养增殖,35℃,200rpm,通风比1:2.0,罐压0.06Mpa,培养18h,使菌体处于对数生长期。
二级种子液的制备:
以处于对数生长期的一级种子液按12%接种量(V/V)接种于灭菌降温的种子培养基(葡萄糖12%,蛋白胨5.0%,玉米浆2.0%,NaNO3 0.4%,MgSO4·7H2O0.20%,K2HPO4·3H2O 0.25%,组分按重量体积比计,单位为kg/m3;pH值自然)中进行培养增殖,35℃,200rpm,通风比1:2.0,罐压0.06Mpa,培养10h,使菌体处于对数生长期。
(2)发酵:采用液态深层发酵
以处于对数生长期的二级种子液按15%接种量(V/V)接种于灭菌降温的发酵培养基(碳源20%,糖醇12%,大豆水解物12%,玉米浆2.0%,磷酸盐1.0%,MgSO4·7H2O0.20%,(NH4)2SO4 0.20%,NaNO3 0.4%,ZnSO4·7H2O 0.3%,组分按重量体积比计,单位为kg/m3;pH值5.0,其中碳源为按质量比80∶20混合的籼米粉和粳米粉;磷酸盐为按质量比30:70混合的三水合磷酸二氢钾、三水合磷酸氢二钾;糖醇为按质量比50:50混合的木糖醇、甘露糖醇),发酵在1.5T发酵罐中进行,发酵培养基于0~3天,35℃;4~18天,26℃;180rpm;罐压:0.07Mpa,通风比:1:2.5,培养18天。
后处理:发酵结束,进行固液分离,发酵滤液经真空低温浓缩得液态产品,液态产品固含物含量为57%;滤渣经洗涤得菌丝体,后经真空低温干燥粉碎而成固态产品。其中:发酵滤液浓缩温度为52℃,菌丝体干燥温度为52℃。
实施例5
一种高开环高含量莫纳可林K的水溶性功能红曲的制备方法,具体如下:
(1)种子液的制备
一级种子液的制备:
采用紫色红曲霉(Monascus purpureus Went)诱变株TY02作为生产种子。以摇瓶种液按7%接种量(V/V)接种于灭菌降温的种子培养基(葡萄糖6%,蛋白胨3.5%,玉米浆1.0%,NaNO3 0.25%,MgSO4·7H2O 0.12%,K2HPO4·3H2O0.12%,组分按重量体积比计,单位为kg/m3;pH值自然)中进行培养增殖,33℃,140rpm,通风比1:1.6,罐压0.05Mpa,培养22h,使菌体处于对数生长期。
二级种子液的制备:
以处于对数生长期的一级种子液按9%接种量(V/V)接种于灭菌降温的种子培养基(葡萄糖10%,蛋白胨3.5%,玉米浆1.2%,NaNO3 0.12%,MgSO4·7H2O 0.12%,K2HPO4·3H2O 0.15%,组分按重量体积比计,单位为kg/m3;pH值自然)中进行培养增殖,33℃,135rpm,通风比1:1.6,罐压0.05Mpa,培养15h,使菌体处于对数生长期。
(2)发酵:采用液态深层发酵
以处于对数生长期的二级种子液按9%接种量(V/V)接种于灭菌降温的发酵培养基(碳源10%,糖醇4%,大豆水解物8%,玉米浆1.2%,磷酸盐0.30%,MgSO4·7H2O 0.12%,(NH4)2SO4 0.12%,NaNO3 0.25%,ZnSO4·7H2O 0.18%,组分按重量体积比计,单位为kg/m3;pH值4.5,其中碳源为按质量比30∶70混合的籼米粉和粳米粉;磷酸盐为按质量比15:85混合的三水合磷酸二氢钾、三水合磷酸氢二钾;糖醇为按质量比25:75混合的木糖醇、赤藓糖醇),发酵在1.5T发酵罐中进行,发酵培养基于0~3天,33℃;4~21天,25℃;130rpm;罐压:0.04Mpa,通风比:1:1.8,培养21天。
后处理:发酵结束,进行固液分离,发酵滤液经真空低温浓缩得液态产品,液态产品固含物含量为54%;滤渣经洗涤得菌丝体,后经真空低温干燥粉碎而成固态产品。其中:发酵滤液浓缩温度为55℃,菌丝体干燥温度为52℃。
实施例6
本实施例提供的高开环高含量莫纳可林K的水溶性功能红曲在制备降血脂制剂中的应用。
具体地,实施例1制得的液态产品和固态产品均可作为活性成分,用于制备口服液或胶囊,作为降血脂制剂。
对比例1
与实施例1相比区别在于,本对比例的发酵培养基中磷酸盐按重量体积比的含量为0.18%;
其他原料和步骤与实施例1相同。
测试方法
(1)产品中莫纳可林K的开环比例测试方法:依据QB/T 2847-2007测试。
(2)产品中莫纳可林K的含量测试方法:依据QB/T 2847-2007测试。
(3)桔霉素含量的测试方法:依据QB/T 2847-2007测试。
实施例1~5制得的功能红曲的测试结果如表1所示,本发明采用发明人原有的紫色红曲霉诱变株,只采用大米作为碳源,不使用甘油作为发酵原料,配合特殊的发酵培养基组分,通过液态深层发酵方法,获得高开环、高含量莫纳可林K的水溶性功能红曲。该功能红曲中莫纳可林K的开环比例达到85%~95%,能最大限度地减少人体分泌羟基酸脂酶而造成肝脏的负担,也就是常言的功能红曲的毒性,即能产生降脂作用。同时该功能红曲中莫纳可林K的质量含量能够达到0.8~1.5%,为高开环、高含量莫纳可林K的水溶性功能红曲,制成的功能红曲产品,无苦味,具有功能红曲的特有香味,水溶性好,无桔霉素或含量极低。高开环、高含量莫纳可林K的水溶性功能红曲在食品、保健品、药品上的应用十分广泛,市场潜力极大。
而对比例1则无法获得高含量MonacolinK的水溶性功能红曲,其液态产品和固态产品中MonacolinK的含量分别为0.45%和0.52%。
表1实施例1~5制得的功能红曲的测试结果
显然,本发明的上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例,而并非是对本发明的实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说,在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等,均应包含在本发明权利要求的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种高开环高含量莫纳可林K的水溶性功能红曲的制备方法,其特征在于,将紫色红曲霉诱变株在发酵培养基中进行液态深层发酵,得到所述水溶性功能红曲;
所述紫色红曲霉诱变株于2018年09月03日保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号:CCTCC NO:M2018586;
所述发酵培养基包括碳源、糖醇、氮源和无机盐;所述碳源包括大米;所述无机盐包括钾的磷酸盐和基础无机盐;所述钾的磷酸盐按重量体积比计的含量为0.23%~1.0%kg/m3。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述大米为大米粉,所述大米粉为籼米粉和/或粳米粉。
3.根据权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于,所述碳源按重量体积比计的含量为6%~20%kg/m3。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述钾的磷酸盐为三水合磷酸二氢钾和/或三水合磷酸氢二钾。
5.根据权利要求1或4所述的制备方法,其特征在于,所述钾的磷酸盐按重量体积比计的含量为0.30%~0.35%kg/m3。
6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述糖醇为碳原子数为小于等于6的糖醇。
7.根据权利要求1或6所述的制备方法,其特征在于,所述糖醇为山梨糖醇、甘露糖醇、木糖醇或赤藓糖醇的一种或几种。
8.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述糖醇按重量体积比计的含量为1%~12%kg/m3。
9.权利要求1~8任一项所述制备方法制得的高开环高含量莫纳可林K的水溶性功能红曲。
10.权利要求9所述的高开环高含量莫纳可林K的水溶性功能红曲在制备降血脂制剂中的应用。
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