CN105018350A - 一种高灵芝三萜灵芝菌丝体生产方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种高灵芝三萜灵芝菌丝体生产方法，菌种培养完成后，在25～26℃下，经过摇床种、一级放大、二级放大和发酵培养过程，最后压滤、干燥粉碎制得。本发明具有的有益效果：针对菌种设计优化了培养基配方和发酵培养基配方，改进了生产工艺，使灵芝三萜类功效成分含量大大提高，能达到普通灵芝两倍以上。高灵芝三萜灵芝茵丝体生产工艺从培养开始都是26±1℃，整个生产过程无酸碱无有机溶剂，最大程度地保护了灵芝活性功效成分，并且有利于人体的吸收利用，能最大程度地发挥出灵芝的药理作用。

Description

一种高灵芝三萜灵芝菌丝体生产方法

技术领域

本发明属于食药用菌生产工艺技术领域，具体涉及一种高灵芝三萜灵芝菌丝体生产方法。 

背景技术

灵芝被我国历代医药学家誉为扶正固本的“瑞草”，对灵芝的药理作用已有大量研究，研究表明灵芝具有广泛的药理作用，如抗肿瘤作用、免疫调节作用、抗放射与抗化疗作用、镇静安神作用、强心及抗心肌缺血作用、调节血脂作用、降血糖作用、平喘作用、保肝作用、抗缺氧和抗衰老作用等。随着现代科学对灵芝研究的深入，至目前为止，总共分离到350余种化学成分，主要是多糖类、肽类、氨基酸类、萜类、生物碱类、甾醇类、维生素类等。虽然中医源远流长，但对灵芝的药理机理还不甚了解。灵芝三萜是在灵芝中发现的一类三萜类化合物，也就是说三萜类化合物是灵芝的主要化学和药效成分之一。灵芝三萜类在抗肿瘤、保肝、降血糖、降血脂、增强单核吞噬细胞系与NK细胞功能、增强体液免疫功能、抗放射、镇痛、镇静、抗衰老等方面显示出了较强的活性。灵芝不同的菌种、不同的生长时期、不同的培养基、不同的生长环境条件其灵芝三萜类含量也不同，表现的药理功效也不同。如今开发的灵芝类药品、保健食品、食品种类繁多，不计其数，却大多数都是对低端初级灵芝产品的重复、模仿，产品仅仅停留在应用灵芝粗多糖类药理成分上，产品功效较低，药理作用不明显，生产工艺较粗放，药理成分吸收利用率不高。 

发明内容

本发明的目的之一是为了提供一种高灵芝三萜灵芝菌丝体生产方法，高灵芝三萜灵芝菌丝体中富含灵芝三萜，提高了灵芝的药理作用。 

本发明实现其目的采用的技术方案是： 

一种高灵芝三萜灵芝菌丝体生产方法，包括如下步骤： 

1)、灵芝菌种培养：培养温度为25～26℃， 

取灵芝菌种在菌种培养基中培养20～30天，所述菌种培养基的配方组成为：马铃薯200～250g、葡萄糖20～25g、磷酸二氢钾3～4g、七水硫酸镁1.5～2g、维生素B110～20mg、琼脂18～20g、水1000ml； 

2)、摇床种：保持温度在25～26℃，在30L搅拌罐中装入所述步骤1)中培养有灵芝菌种的菌种培养基，用水稀释，然后置于振荡器上，搅拌3～4天，控制搅拌速度为100～120转/min； 

3)、一级放大：保持温度在25～26℃，将所述步骤2)中稀释搅拌后的培养基负压吸入一300L种子罐中，培养2～3天； 

4)、二级放大：保持温度在25～26℃，将所述步骤3)中搅拌后的培养基负压吸入一1.5吨的种子罐中，培养2～3天； 

5)、发酵培养：保持温度在25～26℃，将所述步骤4)中培养后的培养基负压吸入一7吨的发酵罐中，并加入发酵培养基发酵， 

按质量百分数计，所述发酵培养基的配方组成为：玉米粉1～3％、蔗糖2～4％、磷酸二氢钾0.01～0.02％、硫酸铵0.2～0.3％、酵母粉0.2～0.4％、豆油0.05～0.1％、余量为水； 

待达到以下标准时，发酵结束： 

a)、待灵芝菌丝上无明显芽头和锁状联合现象，且菌丝变细，菌丝原生质凝集，菌丝有自溶现象发生时； 

b)、菌丝湿重达到15～20％； 

c)、培养基的pH值为3.0～3.5； 

6)、板框压滤：将所述步骤5)发酵后的液体培养基取出，用50～60kg的压力压滤，压干，得到固体初产物； 

7)、干燥粉碎：将所述步骤6)得到的固体初产物置于真空中干燥，干燥温度为60～65℃，干燥完成后粉碎，得到粒径为60～80目的高灵芝三萜灵芝菌丝体产物。 

芽头，指的是未发育成茎叶的嫩尖，质地柔软。 

锁状联合(clamp connection)：为两核细胞形成分裂产生双核菌丝体的一种特有形式。常发生在菌丝顶端，开始时在细胞上产生突起，并向下弯曲，与下部细胞连接，形如锁状。 

原生质是细胞内生命物质的总称。 

茵丝湿重的测定方法为：从发酵罐取样称重得到原始重量，在高速离心机中以8000转/分钟离心，最后得到菌丝真实重量，除以原始重量即为湿重。 

本发明具有的有益效果： 

针对菌种设计优化了培养基配方和发酵培养基配方，改进了生产工艺，使灵芝三萜类功效成分含量大大提高，能达到普通灵芝两倍以上。高灵芝三萜灵芝菌丝体生产工艺从培养开始都是26±1℃，整个生产过程无酸碱无有机溶剂，最大程度地保护了灵芝活性功效成分，并且有利于人体的吸收利用，能最大程度地发挥出灵芝的药理作用。 

附图说明

图1为本发明生产方法的工艺流程图。 

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步描述，但本发明的保护范围不仅仅局限于实施例。 

如图1所示，一种高灵芝三萜灵芝菌丝体生产方法，包括如下步骤： 

1)、灵芝菌种培养：培养温度为25～26℃， 

取灵芝菌种在菌种培养基中培养20～30天，所述菌种培养基的配方组成为：马铃薯200～250g、葡萄糖20～25g、磷酸二氢钾3～4g、七水硫酸镁1.5～2g、维生素B110～20mg、琼脂18～20g、水1000ml； 

2)、摇床种：保持温度在25～26℃，在30L搅拌罐中装入所述步骤1)中培养有灵芝菌种的菌种培养基，用水稀释，然后置于振荡器上，搅拌3～4天，控制搅拌速度为100～120转/min； 

3)、一级放大：保持温度在25～26℃，将所述步骤2)中稀释搅拌后的培 养基负压吸入一300L种子罐中，培养2～3天； 

4)、二级放大：保持温度在25～26℃，将所述步骤3)中搅拌后的培养基负压吸入一1.5吨的种子罐中，培养2～3天； 

5)、发酵培养：保持温度在25～26℃，将所述步骤4)中培养后的培养基负压吸入一7吨的发酵罐中，并加入发酵培养基发酵， 

按质量百分数计，所述发酵培养基的配方组成为：玉米粉1～3％、蔗糖2～4％、磷酸二氢钾0.01～0.02％、硫酸铵0.2～0.3％、酵母粉0.2～0.4％、豆油0.05～0.1％、余量为水； 

待达到以下标准时，发酵结束： 

a)、待灵芝菌丝上无明显芽头和锁状联合现象，且茵丝变细，茵丝原生质凝集，菌丝有自溶现象发生时； 

b)、菌丝湿重达到15～20％； 

c)、培养基的pH值为3.0～3.5； 

6)、板框压滤：将所述步骤5)发酵后的液体培养基取出，用50～60kg的压力压滤，压干，得到固体初产物； 

7)、干燥粉碎：将所述步骤6)得到的固体初产物置于真空中干燥，干燥温度为60～65℃，干燥完成后粉碎，得到粒径为60～80目的高灵芝三萜灵芝菌丝体产物。 

实施例1： 

一种高灵芝三萜灵芝菌丝体生产方法，包括如下步骤： 

1)、灵芝菌种培养：培养温度为25～26℃， 

取灵芝菌种在菌种培养基中培养20～30天，所述菌种培养基的配方组成为：马铃薯200g、葡萄糖20g、磷酸二氢钾3g、七水硫酸镁1.5g、维生素B110mg、琼脂18g、水1000ml； 

2)、摇床种：保持温度在25～26℃，在30L搅拌罐中装入所述步骤1)中培养有灵芝菌种的菌种培养基，用水稀释，然后置于振荡器上，搅拌3～4天，控制搅拌速度为100～120转/min； 

3)、一级放大：保持温度在25～26℃，将所述步骤2)中稀释搅拌后的培 养基负压吸入一300L种子罐中，培养2～3天； 

4)、二级放大：保持温度在25～26℃，将所述步骤3)中搅拌后的培养基负压吸入一1.5吨的种子罐中，培养2～3天； 

5)、发酵培养：保持温度在25～26℃，将所述步骤4)中培养后的培养基负压吸入一7吨的发酵罐中，并加入发酵培养基发酵， 

按质量百分数计，所述发酵培养基的配方组成为：玉米粉1％、蔗糖2％、磷酸二氢钾0.01％、硫酸铵0.2％、酵母粉0.2％、豆油0.05％、余量为水； 

待达到以下标准时，发酵结束： 

a)、待灵芝菌丝上无明显芽头和锁状联合现象，且菌丝变细，菌丝原生质凝集，菌丝有自溶现象发生时； 

b)、菌丝湿重达到15％； 

c)、培养基的pH值为3.0～3.5； 

6)、板框压滤：将所述步骤5)发酵后的液体培养基取出，用50～60kg的压力压滤，压干，得到固体初产物； 

7)、干燥粉碎：将所述步骤6)得到的固体初产物置于真空中干燥，干燥温度为60～65℃，干燥完成后粉碎，得到粒径为60～80目的高灵芝三萜灵芝菌丝体产物。 

实施例2： 

一种高灵芝三萜灵芝菌丝体生产方法，包括如下步骤： 

1)、灵芝菌种培养：培养温度为25～26℃， 

取灵芝菌种在菌种培养基中培养20～30天，所述菌种培养基的配方组成为：马铃薯250g、葡萄糖25g、磷酸二氢钾4g、七水硫酸镁2g、维生素B120mg、琼脂20g、水1000ml； 

步骤2)～步骤4)如同实施例1； 

5)、发酵培养：保持温度在25～26℃，将所述步骤4)中培养后的培养基负压吸入一7吨的发酵罐中，并加入发酵培养基发酵， 

按质量百分数计，所述发酵培养基的配方组成为：玉米粉3％、蔗糖4％、磷酸二氢钾0.02％、硫酸铵0.3％、酵母粉0.4％、豆油0.1％、余量为水； 

待达到以下标准时，发酵结束： 

a)、待灵芝菌丝上无明显芽头和锁状联合现象，且菌丝变细，菌丝原生质凝集，茵丝有自溶现象发生时； 

b)、菌丝湿重达到20％； 

c)、培养基的pH值为3.0～3.5； 

步骤6)～7)如同实施例1。 

实施例3： 

一种高灵芝三萜灵芝菌丝体生产方法，包括如下步骤： 

1)、灵芝菌种培养：培养温度为25～26℃， 

取灵芝菌种在菌种培养基中培养20～30天，所述菌种培养基的配方组成为：马铃薯225g、葡萄糖22.5g、磷酸二氢钾3.5g、七水硫酸镁1.7g、维生素B115mg、琼脂19g、水1000ml； 

步骤2)～步骤4)如同实施例1； 

5)、发酵培养：保持温度在25～26℃，将所述步骤4)中培养后的培养基负压吸入一7吨的发酵罐中，并加入发酵培养基发酵， 

按质量百分数计，所述发酵培养基的配方组成为：玉米粉2％、蔗糖3％、磷酸二氢钾0.015％、硫酸铵0.25％、酵母粉0.3％、豆油0.07％、余量为水； 

待达到以下标准时，发酵结束： 

a)、待灵芝菌丝上无明显芽头和锁状联合现象，且茵丝变细，茵丝原生质凝集，菌丝有自溶现象发生时； 

b)、茵丝湿重达到17％； 

c)、培养基的pH值为3.0～3.5； 

步骤6)～7)如同实施例1。 

最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本发明而并非限制本发明所描述的技术方案；因此，尽管本说明书参照上述的各个实施例对本发明已进行了详细的说明，但是，本领域的普通技术人员应当理解，仍然可以对本发明进行修改或等同替换；而一切不脱离本发明的精神和范围的技术方案及其改进，其均应涵盖在本发明的权利要求范围中。 

Claims (1)

1.一种高灵芝三萜灵芝茵丝体生产方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)、灵芝菌种培养：培养温度为25～26℃，

取灵芝菌种在菌种培养基中培养20～30天，所述菌种培养基的配方组成为：马铃薯200～250g、葡萄糖20～25g、磷酸二氢钾3～4g、七水硫酸镁1.5～2g、维生素B110～20mg、琼脂18～20g、水1000ml；

2)、摇床种：保持温度在25～26℃，在30L搅拌罐中装入所述步骤1)中培养有灵芝菌种的菌种培养基，用水稀释，然后置于振荡器上，搅拌3～4天，控制搅拌速度为100～120转/min；

3)、一级放大：保持温度在25～26℃，将所述步骤2)中稀释搅拌后的培养基负压吸入一300L种子罐中，培养2～3天；

4)、二级放大：保持温度在25～26℃，将所述步骤3)中搅拌后的培养基负压吸入一1.5吨的种子罐中，培养2～3天；

5)、发酵培养：保持温度在25～26℃，将所述步骤4)中培养后的培养基负压吸入一7吨的发酵罐中，并加入发酵培养基发酵，

按质量百分数计，所述发酵培养基的配方组成为：玉米粉1～3％、蔗糖2～4％、磷酸二氢钾0.01～0.02％、硫酸铵0.2～0.3％、酵母粉0.2～0.4％、豆油0.05～0.1％、余量为水；

待达到以下标准时，发酵结束：

a)、待灵芝菌丝上无明显芽头和锁状联合现象，且菌丝变细，菌丝原生质凝集，菌丝有自溶现象发生时；

b)、菌丝湿重达到15～20％；

c)、培养基的pH值为3.0～3.5；

6)、板框压滤：将所述步骤5)发酵后的液体培养基取出，用50～60kg的压力压滤，压干，得到固体初产物；

7)、干燥粉碎：将所述步骤6)得到的固体初产物置于真空中干燥，干燥温度为60～65℃，干燥完成后粉碎，得到粒径为60～80目的高灵芝三萜灵芝菌丝体产物。