CN111139196B - 一株厌氧嗜烃产气短杆菌tp-1及其应用 - Google Patents
一株厌氧嗜烃产气短杆菌tp-1及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111139196B CN111139196B CN201811300249.9A CN201811300249A CN111139196B CN 111139196 B CN111139196 B CN 111139196B CN 201811300249 A CN201811300249 A CN 201811300249A CN 111139196 B CN111139196 B CN 111139196B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- brevibacterium
- anaerobic
- philic
- hydrocarbon
- oil
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 241000588915 Klebsiella aerogenes Species 0.000 title description 10
- 241000186146 Brevibacterium Species 0.000 claims abstract description 23
- 241000186312 Brevibacterium sp. Species 0.000 claims abstract description 16
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 claims abstract description 15
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 8
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 8
- 239000003129 oil well Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000010779 crude oil Substances 0.000 claims description 31
- 239000003921 oil Substances 0.000 claims description 30
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 12
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 10
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 8
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 6
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 3
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 claims description 3
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 claims description 3
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims description 3
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 claims description 3
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 3
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 3
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 2
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 claims 2
- 241000607534 Aeromonas Species 0.000 claims 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 claims 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 abstract description 17
- 230000012010 growth Effects 0.000 abstract description 15
- VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N methane Chemical compound C VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 14
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 abstract description 10
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 abstract description 10
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 abstract description 8
- 229930195734 saturated hydrocarbon Natural products 0.000 abstract description 7
- 238000004088 simulation Methods 0.000 abstract description 5
- 238000000605 extraction Methods 0.000 abstract description 2
- 230000015784 hyperosmotic salinity response Effects 0.000 abstract description 2
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 abstract description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 abstract description 2
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 18
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 12
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 6
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000011435 rock Substances 0.000 description 4
- 241001535042 Methylobacterium mesophilicum Species 0.000 description 3
- 210000003495 flagella Anatomy 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 2
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 2
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 2
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 2
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 2
- 239000002068 microbial inoculum Substances 0.000 description 2
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000009738 saturating Methods 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 2
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 241001464968 Bacillus acidovorans Species 0.000 description 1
- 241000193764 Brevibacillus brevis Species 0.000 description 1
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 1
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 238000003794 Gram staining Methods 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- PLXBWHJQWKZRKG-UHFFFAOYSA-N Resazurin Chemical compound C1=CC(=O)C=C2OC3=CC(O)=CC=C3[N+]([O-])=C21 PLXBWHJQWKZRKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 241001052560 Thallis Species 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 150000001335 aliphatic alkanes Chemical class 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 239000008398 formation water Substances 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 230000006799 invasive growth in response to glucose limitation Effects 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000037323 metabolic rate Effects 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 239000009671 shengli Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 241001148471 unidentified anaerobic bacterium Species 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/13—Brevibacterium
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- E—FIXED CONSTRUCTIONS
- E21—EARTH OR ROCK DRILLING; MINING
- E21B—EARTH OR ROCK DRILLING; OBTAINING OIL, GAS, WATER, SOLUBLE OR MELTABLE MATERIALS OR A SLURRY OF MINERALS FROM WELLS
- E21B43/00—Methods or apparatus for obtaining oil, gas, water, soluble or meltable materials or a slurry of minerals from wells
- E21B43/16—Enhanced recovery methods for obtaining hydrocarbons
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Geology (AREA)
- Mining & Mineral Resources (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Environmental & Geological Engineering (AREA)
- Fluid Mechanics (AREA)
- General Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Geochemistry & Mineralogy (AREA)
- Production Of Liquid Hydrocarbon Mixture For Refining Petroleum (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一株厌氧嗜烃产气短杆菌(Brevibacterium sp.)TP‑1及其应用，本发明的菌株来自胜利油田河口采油厂某油井的产出液，在65℃厌氧条件下通过嗜烃产气性能反复筛选传代获得，其分类命名为：短杆菌Brevibacterium sp.，其保藏编号为：CGMCC No.16468。本发明的菌株生长温度45～80℃，生长pH值范围5～8，耐盐0～18％，对饱和烃的降解率达到50％以上，对胶质沥青质的降解率达到40％以上，生成气中甲烷的含量达到50％以上，物理模拟实验提高采收率大于15％。该菌株的发酵液应用于微生物单井吞吐，平均单井增油量大于200t。
Description
技术领域
本发明涉及一株厌氧嗜烃产气短杆菌TP-1及其在微生物采油中的应用，属于微生物采油和环境生物技术领域。
背景技术
微生物采油是通过向油藏注入经筛选的采油功能菌和/或激活剂，利用功能菌的生长代谢活动及其代谢产物对油藏中岩石、流体作用，提高原油采收率。主要原理包括微生物产生物气、产表面活性剂以及微生物对原油的降解等联合作用。微生物具有本质降粘作用，通过降解原油中的长链烷烃，破坏胶质沥青质网状结构，从而降低原油粘度；并且微生物可以通过原位产生物气，其主要成分是甲烷、二氧化碳，这些气体能够有效增加油层压力，降低原油粘度，挤压多孔介质中的残余油，提高剩余油动用程度，是微生物提高原油采收率的重要机理。
微生物采油工艺实施过程中，氧气在油藏前端很快就被注水井附近的还原性物质和好氧微生物消耗掉，不能扩散到油藏中后部，因此油藏内部实际上是一个封闭的厌氧环境。目前提高原油采收率的菌株绝大部分是好氧或兼性厌氧微生物，这些菌株对油藏厌氧环境的适应性差，生长代谢速率低，并且在厌氧条件下嗜烃产气的驱油功能的微生物较少，因此不能有效激活油藏中后部富集的剩余油，影响微生物采油效果。因此针对上述情况，需要筛选出厌氧嗜烃产气菌，有效提高厌氧菌代谢速率，降低稠油粘度，提高原油采收率。
发明内容
本发明的目的之一是提供一株能应用于微生物采油的厌氧嗜烃产气短杆菌TP-1。
本发明的目的之二是提供一种含有上述微生物菌株的菌剂或由该微生物菌株制备的发酵液。
本发明的目的之三是将上述微生物菌株、其菌剂或发酵液在微生物单井吞吐中的应用，实现厌氧嗜烃产气，提高油井的产量。
本发明的上述目的是通过以下技术方案来实现的：
本发明提供了一株厌氧嗜烃产气短杆菌(Brevibacterium sp.)TP-1，以下简称TP-1，是从胜利油田河口采油厂某油井的产出液中分离，在65℃厌氧条件下通过嗜烃产气性能反复筛选传代获得。该菌株已经在2018年9月12日提交保藏；保藏编号为：CGMCCNo.16468；保藏单位：中国微生物保藏管理委员会普通微生物中心；保藏地址：中国北京朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；该菌株的分类命名为：短杆菌Brevibacterium sp.。
本发明提供的厌氧嗜烃产气短杆菌(Brevibacterium sp.)TP-1CGMCC No.16468的菌落形态特征如下：在固体培养基上培养1～2d出现的菌落直径为0.4～0.8mm，菌落形态呈不规则椭圆形，表面湿润半透明，白色，菌体经革兰氏染色呈阳性，细菌形态为短杆状，无周生鞭毛。生长温度45～80℃，最适生长温度65℃，生长pH范围5～8，NaCl耐受性0～18％。
本发明提供的厌氧嗜烃产气短杆菌(Brevibacterium sp.)TP-1CGMCC No.16468的部分生理生化特征如表1所示：
表1 TP-1CGMCC No.16468的部分生理生化特征
注：“+”表示反应阳性“-”表示反应阴性
参照《Bergey’s Mannual of Systematic Bacteriology》的内容，根据其形态特征和生理生化特征，以及参照该菌16S rDNA基因序列在GenBnk中的比对结果构建系统发育树(图2)进行分析，鉴定TP-1为一新菌，属于短杆菌属(Brevibacterium sp.)。
本发明厌氧嗜烃产气短杆菌(Brevibacterium sp.)TP-1CGMCC No.16468的厌氧培养基：葡萄糖0.5wt％，蛋白胨1wt％，酵母粉0.3wt％，K2HPO4 0.275wt％，NaCl 1wt％，半胱氨酸0.5wt‰，pH值7，余量为水(固体培养基另加琼脂2wt％)，pH值为7.0。本发明菌株在45-80℃之间的适宜温度下厌氧生长。
厌氧嗜烃产气短杆菌TP-1CGMCC No.16468的性能评价参数：生长能力、嗜烃降解原油能力、产气能力、物理模拟实验提高采收率值。
(1)生长能力
厌氧嗜烃产气短杆菌TP-1CGMCC No.16468接种于厌氧培养基中，65℃下静置培养3d，进行细菌密度测试。
(2)嗜烃降解原油能力
厌氧嗜烃产气短杆菌TP-1接种于添加了脱水原油的厌氧培养基中，菌液与脱水原油按照10:1的比例培养15d，然后将原油采用蒸馏、过滤、干燥、离心分离等方法进行预处理，除去原油样品中的杂质，进行沥青质和原油族组分含量的测定。沥青质含量测定：根据中华人民共和国石油天然气行业标准：SH/T 0226-92，测定原油沥青质含量；原油族组分含量测定：根据中华人民共和国石油天然气行业标准：SH/T 0226-92，测定胶质和饱和烃的含量。
(3)产气能力
厌氧嗜烃产气短杆菌TP-1接种于添加了脱水原油的厌氧培养基中，菌液与脱水原油按照10:1的比例培养15d，采用气相色谱(岛津GC-2010)测定气体组分中甲烷的含量。
(4)物理模拟驱油评价
①岩心准备：装填岩心和灭菌，测定空气渗透率；
②抽真空、饱和模拟地层水，测定岩心孔隙度PV；
③饱和原油，岩心老化7d，计算束缚水饱和度；
④一次水驱，水驱至出口含水98％，计算一次水驱采收率；
⑤注入厌氧嗜烃产气短杆菌TP-1CGMCC No.16468发酵液0.2PV～0.3PV；
⑥二次水驱，水驱至出口含水100％，计算厌氧嗜烃产气短杆菌TP-1CGMCCNo.16468发酵液提高采收率值。
厌氧嗜烃产气短杆菌TP-1CGMCC No.16468的性能：厌氧条件下生长，细菌浓度可达3×108个/mL以上；厌氧条件下，菌株对饱和烃的降解率达到50％以上，对胶质沥青质的降解率达到40％以上；厌氧条件下，生成气中甲烷的含量达到50％以上；物理模拟实验提高采收率大于15％。
厌氧嗜烃产气短杆菌TP-1CGMCC No.16468在微生物单井吞吐中的应用，即通过油井向地层注入其发酵液，利用厌氧嗜烃产气短杆菌TP-1的嗜烃和产气的功能，降低稠油粘度，提高原油流动力，从而提高单井产能，平均单井增油量大于200t。
本发明与现有技术相比具有如下优点和有益效果在于：
本发明提供的厌氧嗜烃产气短杆菌TP-1CGMCC No.16468生长温度45～80℃，生长pH值范围5～8，耐盐0～18％，菌株对饱和烃的降解率达到50％以上，对胶质沥青质的降解率达到40％以上，生成气中甲烷的含量达到50％以上，物理模拟实验提高采收率大于15％。该菌株的发酵液应用于微生物单井吞吐，平均单井增油量大于200t。
附图说明
图1为本发明厌氧嗜烃产气短杆菌(Brevibacterium sp.)TP-1CGMCC No.16468的菌株形态图；
图2为本发明厌氧嗜烃产气短杆菌(Brevibacterium sp.)TP-1CGMCC No.16468的系统发育树；
图3为本发明厌氧嗜烃产气短杆菌(Brevibacterium sp.)TP-1CGMCC No.16468的耐温曲线。
图4为本发明厌氧嗜烃产气短杆菌(Brevibacterium sp.)TP-1CGMCC No.16468降解饱和烃和胶质沥青质的室内评价结果。
图5为本发明厌氧嗜烃产气短杆菌(Brevibacterium sp.)TP-1CGMCC No.16468产气室内评价结果。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此：
实施例1：
本发明提供的厌氧嗜烃产气短杆菌(Brevibacterium sp.)TP-1CGMCC No.16468的形态特征和生理生化特征。
参照《Bergey’s Mannual of Systematic Bacteriology》的实验方法进行，检测其革兰氏染色，菌体大小和形态，有无鞭毛和芽孢，生长温度，以及触酶、淀粉水解、明胶液化、半乳糖、木糖、乳糖等生化特征。
研究结果表明，如图2所示，该菌株为革兰氏染色阳性、菌体呈短杆状、无周生鞭毛、能运动、厌氧，生长温度45～80℃，最适生长温度65℃，生长pH范围5～8，NaCl耐受性0～18％。
实施例2：
本发明提供的厌氧嗜烃产气短杆菌(Brevibacterium sp.)TP-1CGMCC No.16468菌液性能评价。
厌氧培养基：葡萄糖0.5wt％，蛋白胨1wt％，酵母粉0.3wt％，K2HPO40.275wt％，NaCl 1wt％，半胱氨酸0.5wt‰，pH值7，向配制好的每1L激活剂中加入1mL刃千青指示剂，煮沸，通氮气继续煮至指示剂的颜色褪去，待温度降至室温后用氮气保护分装至厌氧瓶中。121℃灭菌20min，接种量2％，温度65℃，静置培养3d后评价。
菌液的性能参数评价方法：
(1)生长能力评价
厌氧嗜烃产气短杆菌(Brevibacterium sp.)TP-1CGMCC No.16468接种于厌氧培养基中，65℃下静置培养3d，进行细菌密度测试，菌浓达到3.0×108个/mL。
(2)嗜烃降解原油能力
厌氧嗜烃产气短杆菌TP-1接种于添加了脱水原油的厌氧培养基中，菌液与脱水原油按照10:1的比例培养15d，然后将原油采用蒸馏、过滤、干燥、离心分离等方法进行预处理，除去原油样品中的杂质，进行沥青质和原油族组分含量的测定。沥青质含量测定：根据中华人民共和国石油天然气行业标准：SH/T 0226-92，测定原油沥青质含量；原油族组分含量测定：根据中华人民共和国石油天然气行业标准：SH/T 0226-92，测定胶质和饱和烃的含量。经测定，菌株对饱和烃的降解率为56.3％，对胶质沥青质的降解率为46.8％。
(3)产气能力
厌氧嗜烃产气短杆菌TP-1接种于添加了脱水原油的厌氧培养基中，菌液与脱水原油按照10:1的比例培养15d，采用气相色谱(岛津GC-2010)测定气体组分中甲烷的含量。经测定，生成气中甲烷的含量为57.42％。
Claims (5)
1.一株厌氧嗜烃产气短杆菌(Brevibacterium sp.)TP-1，其特征在于，其微生物保藏编号是CGMCC No.16468。
2.一种微生物菌剂，其特征在于，包括：权利要求1所述的厌氧嗜烃产气短杆菌(Brevibacterium sp.)TP-1和厌氧培养基。
3.如权利要求2所述的微生物菌剂，其特征在于，所述的厌氧培养基组成：葡萄糖0.5wt％，蛋白胨1wt％，酵母粉0.3wt％，K2HPO4 0.275wt％，NaCl 1wt％，半胱氨酸0.5wt‰，pH值7，余量为水，pH值为7.0。
4.权利要求1所述的厌氧嗜烃产气短杆菌(Brevibacterium sp.)TP-1或权利要求2-3任何一项所述的微生物菌剂在微生物单井吞吐中的应用。
5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述的在微生物单井吞吐中的应用，即通过油井向地层注入其发酵液，利用厌氧嗜烃产气短杆菌TP-1的嗜烃和产气功能，降低稠油粘度，提高原油流动力，从而提高单井产量。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201811300249.9A CN111139196B (zh) | 2018-11-02 | 2018-11-02 | 一株厌氧嗜烃产气短杆菌tp-1及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201811300249.9A CN111139196B (zh) | 2018-11-02 | 2018-11-02 | 一株厌氧嗜烃产气短杆菌tp-1及其应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN111139196A CN111139196A (zh) | 2020-05-12 |
| CN111139196B true CN111139196B (zh) | 2021-06-25 |
Family
ID=70516174
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201811300249.9A Active CN111139196B (zh) | 2018-11-02 | 2018-11-02 | 一株厌氧嗜烃产气短杆菌tp-1及其应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN111139196B (zh) |
Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0391151A2 (de) * | 1989-04-03 | 1990-10-10 | Bayer Ag | Mikrobieller Abbau von mehrfach halogenierten Aromaten |
| CN101131087A (zh) * | 2006-08-25 | 2008-02-27 | 上海中油企业集团有限公司 | 特重原油的生物采油方法 |
| CN105483058A (zh) * | 2016-01-09 | 2016-04-13 | 国家海洋局北海环境监测中心 | 一种石油降解菌剂及其制备方法 |
| CN107795306A (zh) * | 2016-08-30 | 2018-03-13 | 中国石油化工股份有限公司 | 一种低渗透油藏内源微生物采油的方法 |
| CN109112078A (zh) * | 2017-06-26 | 2019-01-01 | 湖南省林业科学院 | 一株短杆菌菌株及应用 |
| CN111205842A (zh) * | 2020-02-13 | 2020-05-29 | 陕西文岭微生物科技有限公司 | 一种提高石油采收率的微生物采油工艺技术 |
| CN111849798A (zh) * | 2019-08-30 | 2020-10-30 | 上海傲江生态环境科技有限公司 | 一种微生物菌群复配液以及石油烃污染土壤处理方法 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7147787B2 (en) * | 1999-11-19 | 2006-12-12 | Microtek Medical Holdings, Inc | Process for treatment of aqueous environments containing a water-soluble polymer |
-
2018
- 2018-11-02 CN CN201811300249.9A patent/CN111139196B/zh active Active
Patent Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0391151A2 (de) * | 1989-04-03 | 1990-10-10 | Bayer Ag | Mikrobieller Abbau von mehrfach halogenierten Aromaten |
| CN101131087A (zh) * | 2006-08-25 | 2008-02-27 | 上海中油企业集团有限公司 | 特重原油的生物采油方法 |
| CN105483058A (zh) * | 2016-01-09 | 2016-04-13 | 国家海洋局北海环境监测中心 | 一种石油降解菌剂及其制备方法 |
| CN107795306A (zh) * | 2016-08-30 | 2018-03-13 | 中国石油化工股份有限公司 | 一种低渗透油藏内源微生物采油的方法 |
| CN109112078A (zh) * | 2017-06-26 | 2019-01-01 | 湖南省林业科学院 | 一株短杆菌菌株及应用 |
| CN111849798A (zh) * | 2019-08-30 | 2020-10-30 | 上海傲江生态环境科技有限公司 | 一种微生物菌群复配液以及石油烃污染土壤处理方法 |
| CN111205842A (zh) * | 2020-02-13 | 2020-05-29 | 陕西文岭微生物科技有限公司 | 一种提高石油采收率的微生物采油工艺技术 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| Biodegradation of hydrocarbons by microbial strains in the presence of Ni and Pb;Chuanqing Zhong等;《3 Biotech》;20191211;第1-11页 * |
| Biosurfactant production by hydrocarbon-degrading Brevibacterium and Vibrio isolates from the sea pen Pteroeides spinosum (Ellis, 1764);Marco Graziano等;《Journal of Basic Microbiology》;20160427;第963-974页 * |
| 两株高效原油降解混合菌的性能分析;李兴丽等;《中国石油大学学报（自然科学版）》;20080430;第132-134页 * |
| 含油污泥中石油降解菌的分离及其降解特性;任丽君等;《环境工程学报》;20150705;第3538-3544页 * |
| 稠油降解微生物的筛选鉴定及其降解特性;刘宪斌等;《环境工程学报》;20140705;第3069-3074页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN111139196A (zh) | 2020-05-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Belyaev et al. | Methanogenic bacteria from the Bondyuzhskoe oil field: general characterization and analysis of stable-carbon isotopic fractionation | |
| CA2531963C (en) | A process for enhanced recovery of crude oil from oil wells using novel microbial consortium | |
| Drent et al. | Fermentation of inulin by Clostridium thermosuccinogenes sp. nov., a thermophilic anaerobic bacterium isolated from various habitats | |
| CN107387044A (zh) | 一种利用煤层本源真菌提高生物煤层气产量的方法 | |
| CN106948797B (zh) | 一种增产煤层气的方法 | |
| CN105154355A (zh) | 一株热反硝化地芽孢杆菌cf-1及其用途 | |
| CN106811426B (zh) | 用于乳化原油的热堆肥芽孢杆菌菌株、培养方法及应用 | |
| CN109779587B (zh) | 一种环保型的生物采油方法 | |
| CN103060245A (zh) | 一种利用煤层有机杂质制取生物煤层气的复合微生物菌剂及其应用 | |
| CN107523517B (zh) | 一种油藏本源微杆菌及其在石油开采中的应用 | |
| Ramachandran et al. | Hydrogen production and end-product synthesis patterns by Clostridium termitidis strain CT1112 in batch fermentation cultures with cellobiose or α-cellulose | |
| CN102041274A (zh) | 一种利用专性厌氧丁酸梭菌发酵制氢的方法 | |
| CN108219765A (zh) | 一种以无机盐为主的油藏内源微生物激活剂及其驱油方法 | |
| CN111139196B (zh) | 一株厌氧嗜烃产气短杆菌tp-1及其应用 | |
| CN105154367B (zh) | 一株盐单胞菌tf-1及其应用 | |
| CN113738322B (zh) | 一种利用产氢产乙酸菌改变煤渗透率的方法 | |
| CN102690773A (zh) | 一株肠杆菌fy-07及其静态液体深层发酵生产细菌纤维素的方法 | |
| CN116262900B (zh) | 一种微生物驱油菌及其菌剂与其制备方法和应用 | |
| CN102168049B (zh) | 一种生产破胶酶的菌株及其应用 | |
| CN110656070B (zh) | 一株嗜热兼性厌氧微生物菌株及其应用 | |
| CN111139195A (zh) | 一株嗜热厌氧乳化地芽孢杆菌yr-3及应用 | |
| CN112796720A (zh) | 一种应用微生物提高低渗透油藏采收率的方法 | |
| CN108060094B (zh) | 一种土壤堆肥芽孢杆菌和微生物菌剂及其应用 | |
| CN1540136A (zh) | 一种评价微生物驱油能力的方法 | |
| CN108102977A (zh) | 一种含油污泥中石油烃类的降解菌株jn2及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |