CN111110702A - 戈氏副拟杆菌用于制备治疗肺癌的医药组合物的用途 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及微生物领域，尤其是有关于一种戈氏副拟杆菌用于制备治疗肺癌的医药组合物的用途。本发明戈氏副拟杆菌的功效在于可增加带有肺癌的个体的存活率、平均存活时间、及体重，并抑制肺肿瘤生长，达到治疗肺癌的功效。

Description

戈氏副拟杆菌用于制备治疗肺癌的医药组合物的用途
技术领域
本发明涉及微生物领域，尤其是有关于一种戈氏副拟杆菌用于制备治疗肺癌的医药组合物的用途。
背景技术
癌症是现今造成人类死亡的主要原因之一，虽然癌症的形成机转仍未被完全地了解，据信，癌症发生(carcinogenesis)或肿瘤发生(tumorigenesis)可归因于当细胞蓄积外源性或内生性因素而导致基因变异(genetic abnormalities)时，该等细胞内的信号传递途径会发生错误而造成细胞分裂(cell division)失去控制，进而使得该等细胞逐渐形成癌细胞。癌细胞能够回避细胞凋亡(apoptosis)并且具有移动(migration)与侵入(invasion)的能力，因此癌细胞会不断地增生(proliferate)并且会经由淋巴系统(lymphatic system)或血管系统(vascular system)转移(metastasize)至身体的其他部位。
肺癌主要可分为两种，非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC,NSCLC)以及小细胞肺癌(SCLC)。非小细胞肺癌约占了肺癌的80％。在美国三种最常见的非小细胞肺癌为肺腺癌/支气管肺泡癌(35～40％)、鳞状细胞癌(25～30％)及大细胞肺癌(10～15％)。肺癌若在罹患初期诊断出来，是最容易成功治愈的。初期癌症是指还未生长至大体积或转移至身体其他部位。若是较大的或已转移的癌症较难被治疗。
目前用于治疗肺癌的主要方式包括手术治疗、放射线治疗、化学药物治疗、标靶治疗、及合并治疗。然而，上述治疗方式往往会产生副作用，例如化学药物治疗会使病患恶心、呕吐，严重者会有感染及易出血的问题，放射线治疗亦会使病患恶心、呕吐，严重者会有掉发问题。此外，传统治疗方式往往价格昂贵，并非为一般患者所能负担。为了解决上述问题，本领域的技术人员亟需研发出具有治疗肺癌功效的新颖医药品或食品产品以造福有此需求的广大族群。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的为提供一种戈氏副拟杆菌(Parabacteroidesgoldsteinii)用于制备一治疗防肺癌的医药组合物的用途。
在本发明的一实施例中，该医药组合物包含该戈氏副拟杆菌的一代谢产物。
在本发明的一实施例中，该戈氏副拟杆菌是一活菌。
在本发明的一实施例中，该戈氏副拟杆菌的有效浓度为至少1x109CFUs/天。
在本发明的一实施例中，该肺癌是一非小细胞肺癌(non-small cell lungcancer,NSCLC)。
在本发明的一实施例中，该非小细胞肺癌是一路易氏肺癌(Lewis LungCarcinoma,LLC)。
在本发明的一实施例中，该医药组合物增加一带有肺癌的个体的存活率、平均存活时间及体重，且抑制肺肿瘤生长。
在本发明的一实施例中，该抑制肺肿瘤生长是抑制一个体内不同时间点的肺肿瘤生长。
在本发明的一实施例中，该医药组合物包含除该戈氏副拟杆菌的外的它种细菌。
在本发明的一实施例中，该戈氏副拟杆菌的寄存编号为DSM 32939。
在本发明的一实施例中，该医药组合物包含一医药学上可接受的赋形剂、载剂、辅剂及/或食品添加剂。
在本发明的一实施例中，该医药组合物的剂型是一喷雾气体、一溶液、一半固态、一固态、一明胶胶囊、一软胶囊、一锭剂、一口含片、一口香糖及/或一冷冻干燥粉末制剂。
综上所述，本发明戈氏副拟杆菌的功效在于可藉由增加带有肺癌的个体的存活率(survival rate)、平均存活时间(mean survival time)、及体重，并抑制肺肿瘤生长，达到治疗肺癌的功效。
以下将进一步说明本发明的实施方式，下述所列举的实施例是用以阐明本发明，并非用以限定本发明的范围，任何熟习此技艺者，在不脱离本发明的精神和范围内，当可做些许更动与润饰，因此本发明的保护范围当视后附的申请专利范围所界定者为准。
附图说明
图1是戈氏副拟杆菌菌株MTS01在增加带有肺癌的小鼠的存活率上的效用的数据图；
图2是戈氏副拟杆菌菌株MTS01在增加带有肺癌的小鼠的平均存活时间上的效用的数据图；
图3是戈氏副拟杆菌菌株MTS01在增加带有肺癌的小鼠的体重上的效用的数据图，其中*表示p<0.05；***表示p<0.001；NS表示无统计学差异；
图4是戈氏副拟杆菌菌株MTS01在抑制肺肿瘤生长上的效用的外观照片；
图5是戈氏副拟杆菌菌株MTS01在抑制肺肿瘤生长上的效用的H&E染色图；
图6是戈氏副拟杆菌菌株MTS01在抑制肺肿瘤生长上的效用的数据图，其中**表示p<0.01；***表示p<0.001；
图7是戈氏副拟杆菌菌株MTS01在活体内植入路易氏肺癌细胞(LLC细胞)之后的第7天时抗肺癌上的效用的活体分子影像(Bioluminescence imaging)图；
图8是戈氏副拟杆菌菌株MTS01在活体内植入LLC细胞之后的第14天时抗肺癌上的效用的活体分子影像图；
图9是戈氏副拟杆菌菌株MTS01在活体内植入LLC细胞之后的第21天时抗肺癌上的效用的活体分子影像图；
图10是戈氏副拟杆菌菌株MTS01在活体内不同时间点抗肺癌上的效用的数据图，其中***表示p<0.001。
具体实施方式
定义
本文中所使用数值为近似值，所有实验数据皆表示在20％的范围内，较佳为在10％的范围内，最佳为在5％的范围内。
使用GraphPad prism 5.01软件(GraphPad Software Inc.，圣地亚哥，CA)进行统计分析。数据以平均值±标准偏差(SD)表示，各组之间的差异以单变量变异数分析(One-way ANOVA)及Dunnett多重比较检定(Dunnett’s multiple comparison test)进行统计分析。
依据本发明，戈氏副拟杆菌(Parabacteroides goldsteinii)是一种革兰氏阴性，特别厌氧的非孢子形成和非运动细菌，亦是一种益生菌(Probiotic bacteria)。
依据本发明，益生菌株(Probiotic或Probiotic bacteria)是一微生物，其菌体、混合菌株、萃取物或代谢产物对于宿主本身具有正面影响，通常源自于人体内、有益于肠道健康的活菌，亦可指外来补充、对身体可能有益的某些微生物；其中，该益生菌株的代谢产物是培养该益生菌株时，经该细菌代谢后所分泌至细菌培养液中的物质，包含培养该菌的培养液等。
依据本发明，有关细菌培养的操作程序与参数条件等是落在熟习此项技术的人士的专业素养与例行技术范畴内。
本文所述的「有效浓度」表示能直接治疗带有肺癌的个体所需戈氏副拟杆菌的数量。有效浓度依所治疗的生物种类或个体差异而可能不同，但可藉由例如浓度递增试验(concentration escalation)以实验决定其有效浓度。
如本文中所使用的，用语“代谢产物”意为培养细菌时，经该细菌代谢后所分泌至细菌培养液中的物质，包含培养该菌的培养液。
如本文中所使用的，用语“细菌成分”意为培养细菌时，该菌直接或间接相关的衍生物质，包括但不限于该细菌的代谢产物、该细菌的结构、细菌相关活性及非活性成分等。
如本文中所使用的，用语“戈氏副拟杆菌(Parabacteroides goldsteinii)”意欲涵盖那些为熟习此项技术人士可易于获得的戈氏副拟杆菌(例如，可购自于国内或国外寄存机构者)，或者利用本技艺中所惯用的微生物分离方法而从天然来源中所分离纯化出的戈氏副拟杆菌菌株。
如本文中所使用的，“治疗(treating)”或“治疗(treatment)”意指缓解(alleviating)、减少(reducing)、改善(ameliorating)、减轻(relieving)或控制(controlling)一疾病(disease)或障碍(disorder)的一或多个临床征兆(clinicalsign)，以及降低(lowering)、停止(stopping)或逆转(reversing)一正在被治疗中的病况(condition)或症状(symptom)的严重性(severity)的进展(progression)。
依据本发明，医药组合物可利用熟习此技艺者所详知的技术而被制造成一适合于非经肠地道(parenterally)或口服地(orally)投药的剂型(dosage form)，这包括，但不限于：注射品(injection)[例如，无菌的水性溶液(sterile aqueous solution)或分散液(dispersion)]、无菌的粉末(sterile powder)、锭剂(tablet)、片剂(troche)、口含锭(lozenge)、丸剂(pill)、胶囊(capsule)、分散性粉末(dispersible powder)或细颗粒(granule)、溶液、悬浮液(suspension)、乳剂(emulsion)、糖浆(syrup)、酏剂(elixir)、浓浆(slurry)以及类似物。
依据本发明的医药组合物可以一选自于由下列所构成的群组中的非经肠道途径(parenteral routes)来投药：腹膜内注射(intraperitoneal injection)、皮下注射(subcutaneous injection)、肌肉内注射(intramuscular injection)以及静脉内注射(intravenous injection)。
依据本发明的医药组合物可包含有一被广泛地使用于药物制造技术的医药学上可接受的载剂。例如，该医药学上可接受的载剂可包含一或多种选自于由下列所构成的群组中的试剂：溶剂(solvent)、乳化剂(emulsifier)、悬浮剂(suspending agent)、分解剂(decomposer)、黏结剂(binding agent)、赋形剂(excipient)、安定剂(stabilizingagent)、螯合剂(chelating agent)、稀释剂(diluent)、胶凝剂(gelling agent)、防腐剂(preservative)、润滑剂(lubricant)、吸收延迟剂(absorption delaying agent)、脂质体(liposome)以及类似物。有关这些试剂的选用与数量是落在熟习此项技术的人士的专业素养与例行技术范畴内。
依据本发明，该医药学上可接受的载剂包含有一选自于由下列所构成的群组中的溶剂：水、生理盐水(normal saline)、磷酸盐缓冲生理盐水(phosphate buffered saline,PBS)、含糖溶液、含有醇的水性溶液(aqueous solution containing alcohol)，以及它们的组合。
依据本发明，医药组合物可被当作食品添加物(food additive)，藉由习知方法于原料制备时添加，或是于食品的制作过程中添加，而与任一种可食性材料配制成供人类与非人类动物摄食的食品产品。
依据本发明，食品产品的种类包括但不限于：饮料(beverages)、发酵食品(fermented foods)、烘培产品(bakery products)、健康食品(health foods)以及膳食补充品(dietary supplements)。
利用本发明实施例的戈氏副拟杆菌于治疗肺癌时，可为但不限于以口服方式给药。其给药时可与一般食物一同食用，因此制备包含戈氏副拟杆菌医药组合物时，该医药组合物可进一步包括蛋白质、单醣、双醣、寡醣、低聚醣、多醣、碳水化合物、胺基酸、脂质、维他命或其任意组合的成分。
此外，于制备包含本发明实施例的戈氏副拟杆菌的医药组合物时，亦可进一步加入所属技术领域所熟知的赋形剂、载剂、辅剂及/或食品添加剂。且其剂型可为但不限于一喷雾气体、一溶液、一半固态、一固态、一明胶胶囊、一软胶囊、一锭剂、一口含片、一口香糖及/或一冷冻干燥粉末制剂。同时，本发明实施例的戈氏副拟杆菌或包含其他成分的医药组合物，亦可进一步用于制备食品、保健食品、膳食补充品或疫苗组合物。
实施例1.戈氏副拟杆菌菌株MTS01在增加带有肺癌的小鼠的存活率上的效用评估
本实施例中使用6～8周龄且无特定病原体的C57BL/6J雄性小鼠，该小鼠是购自实验研究院(中国台湾)，且该所有小鼠随意喂食食物和水，将小鼠饲养于室温(19～23℃)、12小时白天黑暗周期(12-hour day-dark cycle)的环境中。该小鼠是饲养在无特定病原体的设施中，并按照美国国立卫生研究院的指导原则进行治疗。在以下实验中，对C57BL/6J雄性小鼠在尾静脉中注射路易氏肺癌(Lewis Lung Carcinoma,LLC)细胞(1×106细胞)，然后在整个实验过程中监测肿瘤的生长及体积。
本实施例中所用的戈氏副拟杆菌(Parabacteroides goldsteinii,P.goldsteinii)MTS01是一种能治疗肺癌的益生菌株(Probiotic bacteria)。该戈氏副拟杆菌是寄存于DSMZ-德国微生物保藏中心(Deutsche Sammlung von Mikroorganismen undZellkulturen,DSMZ)；保存地址：德国布伦瑞克市38124因霍芬大街7B；保藏日期2018年10月29日；保藏编号DSM 32939；以及寄存于食品工业发展研究所；2019年2月15日；编号BCRC910869。戈氏副拟杆菌为绝对厌氧细菌，需于37℃的无氧培养箱培养约48小时；其中，该系统包含10％的二氧化碳、10％的氢气、及80％的氮气。该菌的液态培养液为NIH巯基乙酸肉汤(NIH thioglycollate broth)(TGC II)(购自BD，美国，编号为225710)，固态培养基则为厌氧血液琼脂盘(Anaerobic blood agar plate)(Ana.BAP)(购自启新生物科技公司，台湾)。该菌长期保存于-80℃冰箱，保护液为25％的甘油，无须特殊降温处理，且可经由冷冻干燥进行保存，以稳定其活性。
本实施例比较组所用的迪氏副拟杆菌(Parabacteroides distasonis)购自于美国典型培养物保藏中心(American Type Culture Collection，ATCC)(ATCC8503)。使用YCFA培养基进行培养，在厌氧室中于37℃在50mL的YCFA培养基中培养24小时。透过在4℃下以8,000×g离心10分钟获得细胞沉淀物。透过将经培养的细菌细胞悬浮于无氧PBS中(具有最终细胞密度为1×109CFU)来制备用于口服投药的细胞悬浮液。每天给予100μL的悬浮液。
本发明实施例使用的非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)是路易氏肺癌(Lewis Lung Carcinoma,LLC)细胞，购自于美国典型培养物保藏中心(AmericanType Culture Collection，ATCC)(
Figure BDA0002255313270000071
CRL1642TM)，并在添加有10％胎牛血清(fetalbovine serum)(Gibco,USA)、100U/mL青霉素及100μg/mL链霉素的杜贝可氏改良的依格氏培养基(Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium,DMEM)(Gibco,USA)中进行培养，并在37℃的含5％二氧化碳的潮湿环境中培育。
将雄性C57BL/6J小鼠随机地分成4组(每组n＝10)，包括正常对照组、病理对照组、实验组及比较组，其中正常对照组的小鼠以无菌饮用水处理，并每天一次喂食PBS口服灌胃，持续3周；病理对照组的小鼠以新霉素(Neomycin)(1g/L)(配于饮用水中)处理7天，然后透过尾静脉静脉注射LLC细胞(1×106)，并在整个实验期间每天一次喂食PBS口服灌胃；实验组的小鼠以新霉素(1g/L)(配于饮用水中)处理7天，然后透过尾静脉静脉注射LLC细胞(1×106)，并在整个实验期间每天一次口服喂食戈氏副拟杆菌MTS01(1×109CFU)；比较组的小鼠以新霉素(1g/L)(配于饮用水中)处理7天，然后透过尾静脉静脉注射LLC细胞(1×106)，并在整个实验期间每天一次口服喂食迪氏副拟杆菌(1×109CFU)。本实施例的结果以三个独立实验代表(n＝10)，结果显示于图1。
图1是戈氏副拟杆菌菌株MTS01在增加带有肺癌的小鼠的存活率上的效用的数据图。由图1可见，静脉注射LLC细胞21天后，病理对照组小鼠的存活率为20％，实验组小鼠的存活率为50％，并高于比较组小鼠的存活率，而正常对照组小鼠在整个实验期间是健康且存活的。本实施例的结果显示，本发明戈氏副拟杆菌菌株MTS01可增加带有肺癌的小鼠的存活率。
实施例2.戈氏副拟杆菌菌株MTS01在增加带有肺癌的小鼠的平均存活时间上的效用评估
本实施例中使用的实验动物、戈氏副拟杆菌、迪氏副拟杆菌及路易氏肺癌的种类及培育方式与实施例1所记载的内容相同。
将雄性C57BL/6J小鼠随机地分成4组(每组n＝10)，包括正常对照组、病理对照组、实验组及比较组，其中正常对照组的小鼠以无菌饮用水处理，并每天一次喂食PBS口服灌胃，持续4周；病理对照组的小鼠以新霉素(Neomycin)(1g/L)(配于饮用水中)处理7天，然后透过尾静脉静脉注射LLC细胞(1×106)，并在整个实验期间每天一次喂食PBS口服灌胃；实验组的小鼠以新霉素(1g/L)(配于饮用水中)处理7天，然后透过尾静脉静脉注射LLC细胞(1×106)，并在整个实验期间每天一次口服喂食戈氏副拟杆菌MTS01(1×109CFU)；比较组的小鼠以新霉素(1g/L)(配于饮用水中)处理7天，然后透过尾静脉静脉注射LLC细胞(1×106)，并在整个实验期间每天一次口服喂食迪氏副拟杆菌(1×109CFU)。本实施例的结果以三个独立实验代表(n＝10)，结果显示于图2。
图2是戈氏副拟杆菌菌株MTS01在增加带有肺癌的小鼠的平均存活时间上的效用的数据图。由图2可见，实验组小鼠的平均存活时间为22.6天，高于病理对照组小鼠的平均存活时间(19.3天)(P<0.01)及比较组小鼠的平均存活时间，而正常对照组小鼠在整个实验期间是健康且存活的。本实施例的结果显示，本发明戈氏副拟杆菌菌株MTS01可增加带有肺癌的小鼠的平均存活时间。
实施例3.戈氏副拟杆菌菌株MTS01在增加带有肺癌的小鼠的体重上的效用评估
本实施例中使用的实验动物、戈氏副拟杆菌、迪氏副拟杆菌及路易氏肺癌的种类及培育方式与实施例1所记载的内容相同。
将雄性C57BL/6J小鼠随机地分成4组(每组n＝10)，包括正常对照组、病理对照组、实验组及比较组，其中正常对照组的小鼠以无菌饮用水处理，并每天一次喂食PBS口服灌胃，持续4周；病理对照组的小鼠以新霉素(Neomycin)(1g/L)(配于饮用水中)处理7天，然后透过尾静脉静脉注射LLC细胞(1×106)，并在整个实验期间每天一次喂食PBS口服灌胃；实验组的小鼠以新霉素(1g/L)(配于饮用水中)处理7天，然后透过尾静脉静脉注射LLC细胞(1×106)，并在整个实验期间每天一次口服喂食戈氏副拟杆菌MTS01(1×109CFU)；比较组的小鼠以新霉素(1g/L)(配于饮用水中)处理7天，然后透过尾静脉静脉注射LLC细胞(1×106)，并在整个实验期间每天一次口服喂食迪氏副拟杆菌(1×109CFU)。
为了研究戈氏副拟杆菌对改善LLC引起的体重减轻的影响，在实验期间的4周内每周监测各组小鼠的体重。体重增加的计算公式为最终体重(4周)减去起点体重(0周)。对于体重变化，体重增加值除以原始体重。本实施例的结果显示于图3。
图3是戈氏副拟杆菌菌株MTS01在增加带有肺癌的小鼠的体重上的效用的数据图。由图3可见，与正常对照组相较之下，病理对照组小鼠的体重增加有显著的降低。然而，与病理对照组相较之下，实验组小鼠的体重增加随着同时喂食本发明戈氏副拟杆菌菌株MTS01而有显著的增加，而比较组的小鼠则无此现象。本实施例的结果显示，本发明戈氏副拟杆菌菌株MTS01可有效地改善LLC引起的个体体重减轻的问题。
实施例4.戈氏副拟杆菌菌株MTS01在抑制肺肿瘤生长上的效用评估
本实施例中使用的实验动物、戈氏副拟杆菌、迪氏副拟杆菌及路易氏肺癌的种类及培育方式与实施例1所记载的内容相同。
将雄性C57BL/6J小鼠随机地分成4组(每组n＝10)，包括正常对照组、病理对照组、实验组及比较组，其中正常对照组的小鼠以无菌饮用水处理，并每天一次喂食PBS口服灌胃，持续3周；病理对照组的小鼠以新霉素(Neomycin)(1g/L)(配于饮用水中)处理7天，然后透过尾静脉静脉注射LLC细胞(1×106)，并在整个实验期间每天一次喂食PBS口服灌胃；实验组的小鼠以新霉素(1g/L)(配于饮用水中)处理7天，然后透过尾静脉静脉注射LLC细胞(1×106)，并在整个实验期间每天一次口服喂食戈氏副拟杆菌MTS01(1×109CFU)；比较组的小鼠以新霉素(1g/L)(配于饮用水中)处理7天，然后透过尾静脉静脉注射LLC细胞(1×106)，并在整个实验期间每天一次口服喂食迪氏副拟杆菌(1×109CFU)。本实施例的结果以三个独立实验代表(n＝10)。
在口服喂食戈氏副拟杆菌MTS01之后的21天，将各组小鼠牺牲，接而将肺移除并观察肺的外观。本实验结果显示于图4。
图4是戈氏副拟杆菌菌株MTS01在抑制肺肿瘤生长上的效用的外观照片。由图4可见，在带有LLC的组别中的多个部位发现了实体瘤(如箭头所示)。而与病理对照组相较之下，实验组小鼠的肺肿瘤数目有显著的减少，而比较组则无此现象。本实验结果显示，本发明戈氏副拟杆菌菌株MTS01可抑制肺肿瘤生长。
接着，将正常对照组、病理对照组及实验组小鼠的肺叶固定于10％中性缓冲福尔马林(neutral-buffered formalin)中处理，然后以石蜡包埋并切成4μm的厚度。之后，使用玻片扫描仪对苏木精与曙红(Hematoxylin and Eosin,H&E)染色的肺部进行组织学检查，并对整个肺叶拍照(Olympus VS120)。使用H&E染色的肺部切片进行全玻片扫描及500μm或250μm光学变焦的代表性影像。本实验结果显示于图5。
图5是戈氏副拟杆菌菌株MTS01在抑制肺肿瘤生长上的效用的H&E染色图。由图5可见，与正常对照组相较之下，病理对照组小鼠的肺肿瘤数目有显著的增加。然而，与病理对照组相较之下，实验组小鼠的肺肿瘤数目有显著的减少。本实验结果显示，本发明戈氏副拟杆菌菌株MTS01可抑制肺肿瘤生长。
接着，对正常对照组、病理对照组及实验组小鼠的肺肿瘤进行秤重，实验结果显示于图6。
图6是戈氏副拟杆菌菌株MTS01在抑制肺肿瘤生长上的效用的数据图。由图6可见，与正常对照组相较之下，病理对照组的肺肿瘤重量有显著的增加。然而，与病理对照组相较之下，实验组的肺肿瘤重量有显著的降低。本实验结果显示，本发明戈氏副拟杆菌菌株MTS01在带有肺肿瘤的小鼠模型中可抑制肿瘤生长。
实施例5.戈氏副拟杆菌菌株MTS01在活体内(in vivo)不同时间点抗肺癌上的效用评估
本实施例中使用的实验动物、戈氏副拟杆菌、迪氏副拟杆菌及路易氏肺癌的种类及培育方式是相同于实施例1所记载者。
将雄性C57BL/6J小鼠随机地分成3组(每组n＝10)，包括正常对照组、病理对照组及实验组，其中正常对照组的小鼠以无菌饮用水处理，并每天一次喂食PBS口服灌胃；病理对照组的小鼠以新霉素(Neomycin)(1g/L)(配于饮用水中)处理7天，然后透过尾静脉静脉注射LLC细胞(1×106)，并在整个实验期间每天一次喂食PBS口服灌胃；实验组的小鼠以新霉素(1g/L)(配于饮用水中)处理7天，然后透过尾静脉静脉注射LLC细胞(1×106)，并在整个实验期间每天一次口服喂食戈氏副拟杆菌MTS01(1×109CFU)。本实施例的结果以三个独立实验代表(n＝10)。
在植入LLC细胞之后的第0、7、14及21天，用异氟烷(isoflurane)麻醉各组小鼠，接而腹腔内注射以萤火虫D-冷光素(firefly D-luciferin)(15mg/mL配于PBS；GoldBiotechnology)，7分钟之后用冷却的电荷耦合装置(charge-coupled device,CCD)相机(IVIS；PerkinElmer)成像，及使用IVIS Lumina XR成像系统(PerkinElmer)进行活体内成像。冷光素剂量为150mg/kg。本实施例的结果显示于图7至图10。刻度以辐射效率表示冷光强度。
图7是戈氏副拟杆菌菌株MTS01在活体内植入LLC细胞之后的第7天时抗肺癌上的效用的活体分子影像(Bioluminescence imaging)图。由图7可见，与正常对照组相较之下，病理对照组测得的冷光强度有显著的增加。然而，与病理对照组相较之下，实验组测得的冷光强度有显著的降低。本实验结果显示，本发明戈氏副拟杆菌菌株MTS01在活体内植入LLC细胞之后的第7天时具有抗肺癌效用。
图8是戈氏副拟杆菌菌株MTS01在活体内植入LLC细胞之后的第14天时抗肺癌上的效用的活体分子影像图。由图8可见，与正常对照组相较之下，病理对照组测得的冷光强度有显著的增加。然而，与病理对照组相较之下，实验组测得的冷光强度有显著的降低。本实验结果显示，本发明戈氏副拟杆菌菌株MTS01在活体内植入LLC细胞之后的第14天时具有抗肺癌效用。
图9是戈氏副拟杆菌菌株MTS01在活体内植入LLC细胞之后的第21天时抗肺癌上的效用的活体分子影像图。由图9可见，与正常对照组相较之下，病理对照组测得的冷光强度有显著的增加。然而，与病理对照组相较之下，实验组测得的冷光强度有显著的降低。本实验结果显示，本发明戈氏副拟杆菌菌株MTS01在活体内植入LLC细胞之后的第21天时具有抗肺癌效用。
图10是戈氏副拟杆菌菌株MTS01在活体内不同时间点抗肺癌上的效用的数据图。由图10可见，与正常对照组相较之下，病理对照组测得的冷光强度会随着LLC细胞植入时间增加而有显著增加的情形。然而，与病理对照组相较之下，实验组测得的冷光强度虽会随着LLC细胞植入时间有增加的情形，但增加幅度却有显著的降低。本实施例的结果显示，本发明戈氏副拟杆菌菌株MTS01在活体内不同时间点皆具有抗肺癌效用。
综上所述，本发明戈氏副拟杆菌可藉由增加带有肺癌的个体的存活率、平均存活时间、及体重，并抑制肺肿瘤生长，达到治疗肺癌的功效。
以上所述仅为举例性，而非为限制性者。任何未脱离本发明的精神与范畴，而对其进行的等效修改或变更，均应包含于后附的申请专利范围中。

Claims (12)

1.一种戈氏副拟杆菌(Parabacteroides goldsteinii)用于制备一治疗肺癌的医药组合物的用途。
2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述医药组合物包含所述戈氏副拟杆菌的一代谢产物。
3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述戈氏副拟杆菌是一活菌。
4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述戈氏副拟杆菌的有效浓度为至少1x109CFUs/天。
5.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述肺癌是一非小细胞肺癌。
6.根据权利要求5所述的用途，其特征在于，所述非小细胞肺癌是一路易氏肺癌。
7.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述医药组合物增加一带有肺癌的个体的存活率、平均存活时间及体重，且抑制肺肿瘤生长。
8.根据权利要求7所述的用途，其特征在于，所述抑制肺肿瘤生长是抑制一个体内不同时间点的肺肿瘤生长。
9.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述医药组合物包含除所述戈氏副拟杆菌之外的它种细菌。
10.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述戈氏副拟杆菌的寄存编号为DSM32939。
11.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述医药组合物包含一医药学上可接受的赋形剂、载剂、辅剂及/或食品添加剂。
12.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述医药组合物的剂型是喷雾气体、溶液、半固态、固态、明胶胶囊、软胶囊、锭剂、口含片、口香糖和/或冷冻干燥粉末制剂。
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