CN111096956A - 一种基于阴离子海藻酸钠的pH响应肠靶向活性因子载运体系的制备方法 - Google Patents
一种基于阴离子海藻酸钠的pH响应肠靶向活性因子载运体系的制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种基于阴离子海藻酸钠的pH响应肠靶向活性因子载运体系的制备方法，属于微胶囊制备技术领域。本发明以阴离子多糖海藻酸钠为壁材，采用微流控技术利用原位内外凝胶法包被活性因子原花青素，接着通过层层自组装在海藻酸钙表面修饰壳聚糖，形成具有一定强度、尺寸均一、壳核结构、pH敏感、肠靶向的活性因子载运体系，并能显著改善原花青素的稳定性，保护原花青素免受外界环境和胃液强酸等因素的影响，将原花青素运输到肠道部位释放，提高原花青素的生物利用度，为开发新型多功能活性因子载运体系提供新的思路，推进其在食品领域中应用。本发明操作简单，所用材料成本低廉，包埋条件温和，易于规模化生产。
Description
技术领域
本发明属于微胶囊制备技术领域，具体地说，涉及一种基于阴离子海藻酸钠的pH响应肠靶向活性因子载运体系的制备方法。
背景技术
原花青素作为一种活性因子，是目前国际上公认的清除人体内自由基最有效的天然抗氧化剂，由于其酚羟基性质活泼，在实际应用中有许多问题需要解决：1)稳定性差，在生产、贮藏及运输过程中易受光、热等环境因素的影响；2)通过口腔进入人体内对消化液的低pH和酶等作用敏感。目前常采用各种技术制备载运体系封装原花青素，通过将其与周围环境分开，解决其稳定性问题。
传统制备载体的方法有复凝聚法、相分离法、溶剂蒸发法等，但是这些方法制备出的载体颗粒相对不均一，单分散性差等。微流控技术则是近十多年来发展起来的在微米尺度空间对流体进行操控为主要特征的科学技术，其制备的微球粒径均一，尺寸可控，且具有壳核、多室、中空、孔壳等结构优势，可实现功能因子的控释。常采用壁材有海藻酸钠、透明质酸、壳聚糖等。
海藻酸钠是一种聚电解质阴离子多糖，在二价阳离子诱导下可形成凝胶，具有良好的生物相容性和降解性。它还具有一定的黏附性、pH敏感性且形成条件温和，可用作装载功能因子的载运体系。但是，采用微流控技术制备的海藻酸钙水凝胶网络孔隙尺寸较大，吸收溶胀后易破碎，造成功能因子的快速释放。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的缺点，采用微流控技术提供一种基于阴离子海藻酸钠的pH响应肠靶向活性因子载运体系的制备方法。本发明以原花青素为活性因子，阴离子海藻酸钠为壁材，采用微流控技术利用原位内外凝胶法制备壳核活性因子载运体系，利用静电相互作用在其表面修饰壳聚糖，降低孔隙结构，成功保护原花青素并实现其缓释，此外，该载运体系还具有pH敏感、肠靶向功能。
为了达到上述目的，本发明提供一种基于阴离子海藻酸钠的pH响应肠靶向活性因子载运体系的制备方法，包括如下步骤：
S1、配制内相原花青素-羧甲基纤维素钠溶液：将羧甲基纤维素钠溶液与原花青素水溶液混合均匀，得内相；所述内相中羧甲基纤维素钠的终浓度是9～11mg/mL，所述原花青素的终浓度是4～6mg/mL；
S2、配制中间相海藻酸钠-乙二胺四乙酸二钠钙溶液：将海藻酸钠溶液与乙二胺四乙酸二钠钙溶液混合均匀，得中间相；所述中间相中海藻酸钠的终浓度与步骤S1所述内相中羧甲基纤维素钠的终浓度相等，所述乙二胺四乙酸二钠钙的终浓度9～11mg/mL；
S3、配制外相棕榈油：在棕榈油中加入吐温80和醋酸，在功率100～200W条件下超声25～35min，得外相；其中，所述棕榈油和所述吐温80的体积比是100:1～3，所述棕榈油和所述醋酸的体积比是100:1～3；
S4、配制收集液：将氯化钙溶液与含有醋酸的壳聚糖水溶液混合均匀，得收集液；所述收集液中氯化钙的终浓度为4～6mg/mL，所述壳聚糖的终浓度为4～6mg/mL；所述含有醋酸的壳聚糖水溶液中，醋酸和水的重量比为(0.5～1.5):100；
S5、采用微流控技术制备样品：将步骤S1所述内相、步骤S2所述中间相和步骤S3所述外相通过注射泵注射到微流控装置的芯片内，将所述芯片放置在含有收集液的收集槽内；所述注射泵流速为：内相流速为100～120μL/h，中间相流速为100～120μL/h，外相流速为3550～3650μL/h；反应结束后，将所述收集液离心，去除上层油相，所得溶液是活性因子载运体系；其中，所述内相、中间相、外相和收集液的体积比是1:1:30:(18～48)。
优选方式下，步骤S1所述羧甲基纤维素钠溶液的制备方法为：取羧甲基纤维素钠加入水中，600～1000rpm下搅拌6～12h，配制成羧甲基纤维素钠溶液；所述原花青素水溶液的制备方法为：取原花青素加入水中，在功率100～200W条件下超声5～10min，配制成原花青素水溶液。
优选方式下，步骤S2所述海藻酸钠溶液的制备方法为：取海藻酸钠加入水中，600～1200rpm下搅拌6～12h，配制成海藻酸钠水溶液；所述乙二胺四乙酸二钠钙溶液的制备方法为：取乙二胺四乙酸二钠钙加入水中，在功率100～200W条件下超声5～10min，配制成乙二胺四乙酸二钠钙溶液。
优选方式下，步骤S4所述氯化钙溶液的制备方法为：取氯化钙加入水中，在功率100～200W条件下超声5～10min，配制成氯化钙溶液；所述含有醋酸的壳聚糖水溶液的制备方法为：取壳聚糖加入含有醋酸的水溶液中，600～1000rpm下搅拌6～12h，配制成含有醋酸的壳聚糖水溶液；其中，所述含有醋酸的水溶液中，醋酸和水的体积比是(0.5～1.5):100。
优选方式下，步骤S5所述离心参数为：转速3000rpm、时间10min。
优选方式下，所述基于阴离子海藻酸钠的pH响应肠靶向活性因子载运体系的制备方法，包括步骤：
S1、配制内相原花青素-羧甲基纤维素钠溶液：
取羧甲基纤维素钠加入水中，600rpm下搅拌6h至其溶解，配制成浓度为20mg/mL的羧甲基纤维素钠溶液；
取原花青素加入水中，在功率100W条件下超声10min，配制成浓度为10mg/mL原花青素水溶液；
将浓度为20mg/mL的羧甲基纤维素钠溶液与浓度为10mg/mL的原花青素水溶液按照体积比1:1混合均匀，得内相；
S2、配制中间相海藻酸钠-乙二胺四乙酸二钠钙溶液：
取海藻酸钠加入水中，1000rpm下搅拌12h，配制成浓度为20mg/mL的海藻酸钠水溶液；
取乙二胺四乙酸二钠钙加入水中，在功率100W条件下超声10min，配制成浓度为20mg/mL乙二胺四乙酸二钠钙溶液；
将浓度为20mg/mL的海藻酸钠溶液与浓度为20mg/mL乙二胺四乙酸二钠钙溶液按照体积比为1:1混合均匀，得中间相；
S3、配制外相棕榈油：
在棕榈油中加入吐温80和醋酸，在功率100W条件下超声30min，得外相；所述棕榈油和所述吐温80的体积比为100:2；所述棕榈油和所述醋酸的体积比为100:2；
S4、配制收集液：
取氯化钙加入水中，在功率100W条件下超声10min，配制成浓度为10mg/mL氯化钙溶液；
取壳聚糖加入含有醋酸的水溶液中，600rpm下搅拌6h，配制成含有醋酸的壳聚糖水溶液；其中，所述含有醋酸的壳聚糖水溶液中，所述醋酸和水的体积比是1:100，所述壳聚糖的浓度为10mg/mL；
将浓度为10mg/mL的氯化钙溶液与含有醋酸的壳聚糖水溶液按照体积比1:1混合均匀，得收集液；
S5、采用微流控技术制备样品：
将步骤S1所述内相0.1mL、步骤S2所述中间相0.1mL和步骤S3所述外相3mL通过注射泵注射到微流控装置的芯片内，将所述芯片放置在含有1.8mL收集液的收集槽内；所述注射泵流速为：内相流速为120μL/h，中间相流速为120μL/h，外相流速为3600μL/h；反应结束后，将所述收集液3000rpm离心10min，去除上层油相，所得溶液是活性因子载运体系。
本发明的有益效果是：
以原花青素作为活性因子，阴离子海藻酸钠为壁材，采用微流控技术利用原位内外凝胶法即油相中醋酸与中间相乙二胺四乙酸二钠钙相遇，释放出钙离子与海藻酸钠发生交联反应生成海藻酸钙，钙源分布均匀，降低其内部交联差异程度，并进一步在收集液中进行二次外部交联包被原花青素，形成具有一定强度、尺寸均一、壳核结构的活性因子载运体系；利用静电相互作用在表面修饰壳聚糖对载运体系进行层层自组装，提高原花青素的包埋效果并克服其在偏中性环境(pH5～7.4)中稳定性差等问题；壁材海藻酸钠和壳聚糖的pH敏感性，使制备的载运体系具有pH刺激释放与肠靶向功能；本发明操作简单，只需要控制各相的流速即可，所使用原料均为食品级，成本低廉，包埋条件温和，易于规模化生产；本发明制备的活性因子载运体系是一种海洋多糖载运体系，可用于保健品及功能性食品领域。
因此，本发明以海藻酸钠和壳聚糖为壁材，采用微流控技术制备获得的活性因子载运体系具有壳核、pH敏感，肠靶向等功能特性。
附图说明:
图1为本发明微流控技术制备的活性因子载运体系的示意图；
图2为本发明对比例2制备的活性因子载运体系的荧光倒置图；
图3为本发明实施例3制备的活性因子载运体系的荧光倒置图；
图4为本发明对比例1制备的活性因子载运体系的扫描电镜图；
图5为本发明实施例1制备的活性因子载运体系的扫描电镜图；
图6为本发明对比例1制备的活性因子载运体系和实施例1制备的活性因子载运体系的红外光谱图；
图7为本发明原花青素、维生素C、对比例1制备的活性因子载运体系和实施例1制备的活性因子载运体系的DPPH清除率变化；
图8为本发明原花青素、维生素C、对比例1制备的活性因子载运体系和实施例1制备的活性因子载运体系的OH自由基清除率变化；
图9为本发明原花青素、对比例2制备的活性因子载运体系和实施例3制备的活性因子载运体系在不同pH条件下原花青素保留率变化；
图10为本发明对比例2制备的活性因子载运体系的荧光倒置对照图；
图11为本发明对比例2制备的活性因子载运体系在唾液中消化情况；
图12为本发明对比例2制备的活性因子载运体系在胃液中消化情况；
图13为本发明对比例2制备的活性因子载运体系在小肠液中消化情况；
图14为本发明实施例3制备的活性因子载运体系的荧光倒置对照图；
图15为本发明实施例3制备的活性因子载运体系在唾液中消化情况；
图16为本发明实施例3制备的活性因子载运体系在胃液中消化情况；
图17为本发明实施例3制备的活性因子载运体系在小肠液中消化情况。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明作进一步说明。
一种基于阴离子海藻酸钠的pH响应肠靶向活性因子载运体系的制备方法，以原花青素为活性因子，阴离子海藻酸钠为壁材，采用微流控技术利用原位内外凝胶法制备活性因子载运体系，并采用壳聚糖经层层自组装修饰载运体系，表征活性因子载运体系的包埋效果、稳定性及其pH刺激释放和靶向性。包括如下步骤：
S1、配制内相原花青素-羧甲基纤维素钠溶液：将羧甲基纤维素钠溶液与原花青素水溶液混合均匀，得内相；所述内相中羧甲基纤维素钠的终浓度是9～11mg/mL，所述原花青素的终浓度是4～6mg/mL；
S2、配制中间相海藻酸钠-乙二胺四乙酸二钠钙溶液：将海藻酸钠溶液与乙二胺四乙酸二钠钙溶液混合均匀，得中间相；所述中间相中海藻酸钠的终浓度与步骤S1所述内相中羧甲基纤维素钠的终浓度相等，所述乙二胺四乙酸二钠钙的终浓度9～11mg/mL；
S3、配制外相棕榈油：在棕榈油中加入吐温80和醋酸，在功率100～200W条件下超声25～35min，得外相；其中，所述棕榈油和所述吐温80的体积比是100:1～3，所述棕榈油和所述醋酸的体积比是100:1～3；
S4、配制收集液：将氯化钙溶液与含有醋酸的壳聚糖水溶液混合均匀，得收集液；所述收集液中氯化钙的终浓度为4～6mg/mL，所述壳聚糖的终浓度为4～6mg/mL；所述含有醋酸的壳聚糖水溶液中，醋酸和水的体积比为(0.5～1.5):100；
S5、采用微流控技术制备样品：将步骤S1所述内相、步骤S2所述中间相和步骤S3所述外相通过注射泵注射到微流控装置的芯片内，将所述芯片放置在含有收集液的收集槽内；所述注射泵流速为：内相流速为100～120μL/h，中间相流速为100～120μL/h，外相流速为3550～3650μL/h；反应结束后，将所述收集液离心，去除上层油相，所得溶液是活性因子载运体系；其中，所述内相、中间相、外相和收集液的体积比是1:1:30:(18～48)；所述活性因子载运体系中原花青素的浓度为100～250μg/mL。
优选方式下，步骤S1所述羧甲基纤维素钠溶液的制备方法为取羧甲基纤维素钠加入水中，600～1000rpm下搅拌6～12h，配制成羧甲基纤维素钠溶液；步骤S1所述原花青素水溶液的制备方法为取原花青素加入水中，在功率100～200W条件下超声5～10min，配制成原花青素水溶液。
优选方式下，步骤S2所述海藻酸钠溶液的制备方法为取海藻酸钠加入水中，600～1200rpm下搅拌6～12h，配制成海藻酸钠水溶液；所述乙二胺四乙酸二钠钙溶液的制备方法为取乙二胺四乙酸二钠钙加入水中，在功率100～200W条件下超声5～10min，配制成乙二胺四乙酸二钠钙溶液。
优选方式下，步骤S4所述氯化钙溶液的制备方法为取氯化钙加入水中，在功率100～200W条件下超声5～10min，配制成浓度为8～12mg/mL氯化钙溶液；所述壳聚糖水溶液的制备方法为取壳聚糖加入含有醋酸的水溶液中，600～1000rpm下搅拌6～12h，配制成含有醋酸的壳聚糖水溶液；其中，所述醋酸和水的体积比是(0.5～1.5):100。
本研究以原花青素为活性因子，阴离子海藻酸钠为壁材，利用微流控技术制备具有壳核结构、pH响应和肠靶向的活性因子载运体系，分析原花青素稳定性和模拟消化过程的变化，确定其是否存在pH刺激响应和肠靶向功能，可以为开发具有多功能载运体系提供新思路，在推进活性因子载运体系在食品领域中实际应用具有重要作用。
下述各例中，所述原花青素的生产厂家为天津尖峰天然产物研究开发有限公司，Item#:002。
实施例1：
一种基于阴离子海藻酸钠的pH响应肠靶向活性因子载运体系的制备方法，包括步骤：
S1、配制内相原花青素-羧甲基纤维素钠溶液：
取羧甲基纤维素钠加入水中，600rpm下搅拌6h至其溶解，配制成浓度为20mg/mL的羧甲基纤维素钠溶液；
取原花青素加入水中，在功率100W条件下超声10min，配制成浓度为10mg/mL原花青素水溶液；
将浓度为20mg/mL的羧甲基纤维素钠溶液与浓度为10mg/mL的原花青素水溶液按照体积比1:1混合均匀，得内相；
S2、配制中间相海藻酸钠-乙二胺四乙酸二钠钙溶液：
取海藻酸钠加入水中，1000rpm下搅拌12h，配制成浓度为20mg/mL的海藻酸钠水溶液；
取乙二胺四乙酸二钠钙加入水中，在功率100W条件下超声10min，配制成浓度为20mg/mL乙二胺四乙酸二钠钙溶液；
将浓度为20mg/mL的海藻酸钠溶液与浓度为20mg/mL乙二胺四乙酸二钠钙溶液按照体积比为1:1混合均匀，得中间相；
S3、配制外相棕榈油：
在棕榈油中加入吐温80和醋酸，在功率100W条件下超声30min，得外相；所述棕榈油和所述吐温80的体积比为100:2；所述棕榈油和所述醋酸的体积比为100:2；
S4、配制收集液：
取氯化钙加入水中，在功率100W条件下超声10min，配制成浓度为10mg/mL氯化钙溶液；
取壳聚糖加入含有醋酸的水溶液中，600rpm下搅拌6h，配制成含有醋酸的壳聚糖水溶液；其中，所述含有醋酸的壳聚糖水溶液中，所述醋酸和水的体积比是1:100，所述壳聚糖的浓度为10mg/mL；
将浓度为10mg/mL的氯化钙溶液与含有醋酸的壳聚糖水溶液按照体积比1:1混合均匀，得收集液；
S5、采用微流控技术制备样品：
将步骤S1所述内相0.1mL、步骤S2所述中间相0.1mL和步骤S3所述外相3mL通过注射泵注射到微流控装置的芯片内，将所述芯片放置在含有1.8mL收集液的收集槽内；所述注射泵流速为：内相流速为120μL/h，中间相流速为120μL/h，外相流速为3600μL/h；反应结束后，将所述收集液3000rpm离心10min，去除上层油相，所得溶液是活性因子载运体系；本实施例得原花青素运载体系2mL，所述活性因子载运体系中原花青素的浓度为250μg/mL。
实施例2：
一种基于阴离子海藻酸钠的pH响应肠靶向活性因子载运体系的制备方法，包括步骤：
S1、配制内相原花青素-羧甲基纤维素钠溶液：
取羧甲基纤维素钠加入水中，600rpm下搅拌6h至其溶解，配制成浓度为20mg/mL的羧甲基纤维素钠溶液；
取原花青素加入水中，在功率100W条件下超声10min，配制成浓度为10mg/mL原花青素水溶液；
将浓度为20mg/mL的羧甲基纤维素钠溶液与浓度为10mg/mL的原花青素水溶液按照体积比1:1混合均匀，得内相；
S2、配制中间相海藻酸钠-乙二胺四乙酸二钠钙溶液：
取海藻酸钠加入水中，1000rpm下搅拌12h，配制成浓度为20mg/mL的海藻酸钠水溶液；
取乙二胺四乙酸二钠钙加入水中，在功率100W条件下超声10min，配制成浓度为20mg/mL乙二胺四乙酸二钠钙溶液；
将浓度为20mg/mL的海藻酸钠溶液与浓度为20mg/mL乙二胺四乙酸二钠钙溶液按照体积比为1:1混合均匀，得中间相；
S3、配制外相棕榈油：
在棕榈油中加入吐温80和醋酸，在功率100W条件下超声30min，得外相；所述棕榈油和所述吐温80的体积比为100:2；所述棕榈油和所述醋酸的体积比为100:2；
S4、配制收集液：
取氯化钙加入水中，在功率100W条件下超声10min，配制成浓度为10mg/mL氯化钙溶液；
取壳聚糖加入含有醋酸的水溶液中，600rpm下搅拌6h，配制成含有醋酸的壳聚糖水溶液；其中，所述含有醋酸的壳聚糖水溶液中，所述醋酸和水的体积比是1:100，所述壳聚糖的浓度为10mg/mL；
将浓度为10mg/mL的氯化钙溶液与含有醋酸的壳聚糖水溶液按照体积比1:1混合均匀，得收集液；
S5、采用微流控技术制备样品：
将步骤S1所述内相0.1mL、步骤S2所述中间相0.1mL和步骤S3所述外相3mL通过注射泵注射到微流控装置的芯片内，将所述芯片放置在含有4.8mL收集液的收集槽内；所述注射泵流速为：内相流速为120μL/h，中间相流速为120μL/h，外相流速为3600μL/h；反应结束后，将所述收集液3000rpm离心10min，去除上层油相，所得溶液是活性因子载运体系。本实施例得原花青素运载体系5mL，所述活性因子载运体系中原花青素的浓度为100μg/mL。
实施例3：
本实施例使用5-([4,6-二氯三嗪-2-基]氨基)荧光素对原花青素进行标记，使用荧光标记的原花青素作为活性因子，基于阴离子海藻酸钠制备pH响应肠靶向活性因子载运体系，目的是确认原花青素是否装载在活性因子载运体系中，并监测原花青素的释放情况；
一种基于阴离子海藻酸钠的pH响应肠靶向活性因子载运体系的制备方法，包括步骤：
S1、配制内相原花青素-羧甲基纤维素钠溶液：
取羧甲基纤维素钠加入水中，600rpm下搅拌6h至其溶解，配制成浓度为20mg/mL的羧甲基纤维素钠溶液；
取100mg的原花青素加入到100mL 0.2M的氢氧化钠水溶液中，加入5-([4,6-二氯三嗪-2-基]氨基)荧光素，所述原花青素和荧光素的重量比100:1，黑暗条件下600rpm下搅拌24h，采用分子量为500Da的透析袋避光透析48h，然后将透析袋内样品在1Pa、-50℃条件下冷冻干燥48h，获得荧光标记的原花青素；所述氢氧化钠水溶液的浓度为0.2M，即取0.8g氢氧化钠加入100mL水中；
取荧光标记的原花青素加入水中，在功率100W条件下超声10min，配制成浓度为10mg/mL荧光标记的原花青素水溶液；
将浓度为20mg/mL的羧甲基纤维素钠溶液与浓度为10mg/mL荧光标记的原花青素水溶液按照体积比1:1混合均匀，得内相；
S2、配制中间相海藻酸钠-乙二胺四乙酸二钠钙溶液：
取海藻酸钠加入水中，1000rpm下搅拌12h，配制成浓度为20mg/mL的海藻酸钠水溶液；
取乙二胺四乙酸二钠钙加入水中，在功率100W条件下超声10min，配制成浓度为20mg/mL乙二胺四乙酸二钠钙溶液；
将浓度为20mg/mL的海藻酸钠溶液与浓度为20mg/mL乙二胺四乙酸二钠钙溶液按照体积比为1:1混合均匀，得中间相；
S3、配制外相棕榈油：
在棕榈油中加入吐温80和醋酸，在功率100W条件下超声30min，得外相；所述棕榈油和所述吐温80的体积比为100:2；所述棕榈油和所述醋酸的体积比为100:2；
S4、配制收集液：
取氯化钙加入水中，在功率100W条件下超声10min，配制成浓度为10mg/mL氯化钙溶液；
取壳聚糖加入含有醋酸的水溶液中，600rpm下搅拌6h，配制成含有醋酸的壳聚糖溶液；其中，所述含有醋酸的壳聚糖水溶液中，所述醋酸和水的体积比是1:100，所述壳聚糖的浓度为10mg/ml；
将浓度为10mg/mL的氯化钙溶液与与含有醋酸的壳聚糖水溶液按照体积比1:1混合均匀，得收集液；
S5、采用微流控技术制备样品：
将步骤S1所述内相0.1mL、步骤S2所述中间相0.1mL和步骤S3所述外相3mL通过注射泵注射到微流控装置的芯片内，将所述芯片放置在含有1.8mL收集液的收集槽内；所述注射泵流速为：内相流速为120μL/h，中间相流速为120μL/h，外相流速为3600μL/h；反应结束后，将所述收集液3000rpm离心10min，去除上层油相，所得溶液是荧光标记的活性因子载运体系；本实施例得原花青素运载体系2mL，所述活性因子载运体系中荧光标记的原花青素的浓度为250μg/mL。
对比例1：
一种基于阴离子海藻酸钠的pH响应肠靶向活性因子载运体系的制备方法，包括步骤：
S1、配制内相原花青素-羧甲基纤维素钠溶液：
取羧甲基纤维素钠加入水中，600rpm下搅拌6h至其溶解，配制成浓度为20mg/mL的羧甲基纤维素钠溶液；
取原花青素加入水中，在功率100W条件下超声10min，配制成浓度为10mg/mL原花青素水溶液；
将浓度为20mg/mL的羧甲基纤维素钠溶液与浓度为10mg/mL的原花青素水溶液按照体积比1:1混合均匀，得内相。
S2、配制中间相海藻酸钠-乙二胺四乙酸二钠钙溶液：
取海藻酸钠加入水中，1000rpm下搅拌12h，配制成浓度为20mg/mL的海藻酸钠水溶液；
取乙二胺四乙酸二钠钙加入水中，在功率100W条件下超声10min，配制成浓度为20mg/mL乙二胺四乙酸二钠钙溶液；
将浓度为20mg/mL的海藻酸钠溶液与浓度为20mg/mL乙二胺四乙酸二钠钙溶液按照体积比为1:1混合均匀，得中间相；
S3、配制外相棕榈油：
在棕榈油中加入吐温80和醋酸，在功率100W条件下超声30min，得外相；所述棕榈油和所述吐温80的体积比为100:2；所述棕榈油和所述醋酸的体积比为100:2；
S4、配制收集液：
取氯化钙加入水中，在功率100W条件下超声10min，配制成浓度为10mg/mL氯化钙溶液；
S5、采用微流控技术制备样品：
将步骤S1所述内相0.1mL、步骤S2所述中间相0.1mL和步骤S3所述外相3mL通过注射泵注射到微流控装置的芯片内，将所述芯片放置在含有1.8mL收集液的收集槽内；所述注射泵流速为：内相流速为120μL/h，中间相流速为120μL/h，外相流速为3600μL/h；反应结束后，将所述收集液3000rpm离心10min，去除上层油相，所得溶液是活性因子载运体系；本对比例得原花青素运载体系2mL，所述活性因子载运体系中原花青素的浓度为250μg/mL。
对比例2：
本对比例使用5-([4,6-二氯三嗪-2-基]氨基)荧光素对原花青素进行标记，使用荧光标记的原花青素制备作为活性因子，基于阴离子海藻酸钠制备pH响应肠靶向活性因子载运体系，目的是确认原花青素是否装载在活性因子载运体系中，并监测原花青素的释放情况；
一种基于阴离子海藻酸钠的pH响应肠靶向活性因子载运体系的制备方法，包括步骤：
S1、配制内相原花青素-羧甲基纤维素钠溶液：
取羧甲基纤维素钠加入水中，600rpm下搅拌6h至其溶解，配制成浓度为20mg/mL的羧甲基纤维素钠溶液；
取100mg的原花青素加入到100mL 0.2M的氢氧化钠水溶液中，加入5-([4,6-二氯三嗪-2-基]氨基)荧光素，所述原花青素和荧光素的重量比100:1，黑暗条件下600rpm下搅拌24h，采用分子量为500Da的透析袋避光透析48h，然后将透析袋内样品在1Pa、-50℃条件下冷冻干燥48h，获得荧光标记的原花青素；所述氢氧化钠溶液的浓度为0.2M，即取0.8g氢氧化钠加入100mL水中；
取荧光标记的原花青素加入水中，在功率100W条件下超声10min，配制成浓度为10mg/mL原花青素水溶液；
将浓度为20mg/mL的羧甲基纤维素钠溶液与浓度为10mg/mL的原花青素水溶液按照体积比1:1混合均匀，得内相；
S2、配制中间相海藻酸钠-乙二胺四乙酸二钠钙溶液：
取海藻酸钠加入水中，1000rpm下搅拌12h，配制成浓度为20mg/mL的海藻酸钠水溶液；
取乙二胺四乙酸二钠钙加入水中，在功率100W条件下超声10min，配制成浓度为20mg/mL乙二胺四乙酸二钠钙溶液；
将浓度为20mg/mL的海藻酸钠溶液与浓度为20mg/mL乙二胺四乙酸二钠钙溶液按照体积比为1:1混合均匀，得中间相；
S3、配制外相棕榈油：
在棕榈油中加入吐温80和醋酸，在功率100W条件下超声30min，得外相；所述棕榈油和所述吐温80的体积比为100:2；所述棕榈油和所述醋酸的体积比为100:2；
S4、配制收集液：
取氯化钙加入水中，在功率100W条件下超声10min，配制成浓度为10mg/mL氯化钙溶液；
S5、采用微流控技术制备样品：
将步骤S1所述内相0.1mL、步骤S2所述中间相0.1mL和步骤S3所述外相3mL通过注射泵注射到微流控装置的芯片内，将所述芯片放置在含有1.8mL收集液的收集槽内；所述注射泵流速为：内相流速为120μL/h，中间相流速为120μL/h，外相流速为3600μL/h；反应结束后，将所述收集液3000rpm离心10min，去除上层油相，所得溶液是活性因子载运体系；本对比例得原花青素运载体系2mL，所述活性因子载运体系中原花青素的浓度为250μg/mL。
对上述各例制备的活性因子载运体系的微观结构、包埋率、红外光谱、抗氧化性能、稳定性和模拟消化等进行分析。
图1为本发明采用微流控技术制备活性因子载运体系的示意图，原花青素与羧甲基纤维素钠作为内相，中间相海藻酸钠和乙二胺四乙酸二钠钙对其进行包裹，在外相酸性溶液的刺激下，乙二胺四乙酸二钠钙释放钙离子与海藻酸钠发生交联反应生成海藻酸钙，并进一步在收集液中添加钙离子和壳聚糖，通过两次交联和层层自组装形成具有一定机械强度、尺寸均一的活性因子载运体系。
图2为对比例2制备的活性因子载运体系荧光倒置图，从图中可以看出制备的活性因子载运体系具有一定壳核结构；图3为实施例3制备的活性因子载运体系，与对比例2相比，实施例3由于通过层层自组装在荧光标记的活性因子载运体系表面修饰壳聚糖，尺寸相对较大，但同时可保护海藻酸钙体系中的原花青素，防止其发生释放，通过对比其荧光强度，实施例3制备的荧光标记的活性因子载运体系荧光强度相对较强也可以证明装载的原花青素含量相对较高。
图4为对比例1制备的活性因子载运体系表层扫描电镜图，该载运体系表面有一定的缝隙；图5为实施例1制备的活性因子载运体系表面扫描电镜图，与对比例1相比，实施例1表面修饰壳聚糖的活性因子载运体系表面缝隙降低，可间接证明本发明的制备方法提高了原花青素的装载率，同时在释放过程中减缓其释放速率。
表1
表1为对比例1和实施例1制备的活性因子载运体系的基本指标表征。以原花青素在280nm处特征吸收峰值为测量值，测定浓度范围为0.01～0.04mg/mL的原花青素浓度，获得标准曲线为y＝26.6000x-0.1143(x表示原花青素的浓度，y吸光值)，R2＝0.9996；通过测定样品(所述样品分别为实施例1制备的活性因子载运体系和对比例1制备的活性因子载运体系)上清液在280nm处特征吸收峰值，结合所述标准曲线计算上清液中原花青素的浓度，原花青素的包埋率＝1-上清液原花青素浓度/总原花青素浓度，计算得出对比例1制备的活性因子载运体系中原花青素的包埋率为69.53％，实施例1中原花青素的包埋率为72.26％，高于对比例1包埋效果；接着采用激光粒度仪测定对比例1和实施例1中活性因子载运体系的粒径和电位，与对比例1相比，实施例1制备的活性因子载运体系由于表面修饰壳聚糖粒径相对较大，为64.97μm；对比例1制备的活性因子载运体系在酸性条件下收集带正电荷，为13.72±1.03mV，实施例1制备的活性因子载运体系表面修饰的壳聚糖为阳离子多糖，因此其电位相对高于对比例1，为20.10±1.42mV。
图6为对比例1和实施例1制备的活性因子载运体系的红外光谱图，与对比例1相比，实例1在1547cm-1处出现新峰，为壳聚糖的-NH2弯曲振动吸收峰，表明实例1制备的活性因子载运体系表面修饰上壳聚糖；羟基吸收峰从3407向3401cm-1低波数移动，表明壳聚糖与海藻酸钙之间存在氢键相互作用；对比例1制备的活性因子载运体系在1631cm-1处为海藻酸钙的COO-非对称伸缩振动；当表面修饰壳聚糖后，实施例1制备的活性因子载运体系的特征吸收峰向1645cm-1处蓝移，是由于海藻酸钙与壳聚糖中的氨基之间存在酰胺键；此外，实施例1中原花青素在800～750cm-1处指纹区消失，表明其被装载在海藻酸钙-壳聚糖体系中。
图7为原花青素、对比例1制备的活性因子载运体系和实施例1制备的活性因子载运体系与对照维生素C的DPPH清除率变化情况，分别将原花青素浓度、对比例1制备的活性因子载运体系中的原花青素浓度、和实施例1制备的活性因子载运体系中的原花青素浓度、维生素C的浓度梯度稀释为1μg/mL、2.5μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL，测定其清除DPPH能力，测定方法参照文献李晓英,薛梅,樊汶樵.蓝莓花、茎、叶酚类物质含量及抗氧化活性比较[J].食品科学,2017,3,142-147.；
结果显示，在原花青素浓度为1～20μg/mL范围内，原花青素及活性因子载运体系对DPPH自由基清除能力呈现明显的剂量依赖效应；原花青素、对比例1制备的活性因子载运体系和实施例1制备的活性因子载运体系清除能力均高于维生素C对照品；此外，在含有相同浓度原花青素条件下，包埋后的原花青素，即活性因子载运体系仍然具有较好的抗氧化能力。
图8为原花青素、对比例1制备的活性因子载运体系和实施例1制备的活性因子载运体系与对照维生素C的羟基自由基清除率变化情况，分别将原花青素浓度、对比例1制备的活性因子载运体系中的原花青素浓度、和实施例1制备的活性因子载运体系中的原花青素浓度、维生素C的浓度梯度稀释为25μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、150μg/mL、200μg/mL、250μg/mL，测定其清除羟基自由基的能力，测定方法参照文献李晓英,薛梅,樊汶樵.蓝莓花、茎、叶酚类物质含量及抗氧化活性比较[J].食品科学,2017,3,142-147.；
与对比例1相比，原花青素、对比例1制备的活性因子载运体系和实施例1制备的活性因子载运体系清除能力相对较强；此外，在含有相同浓度原花青素条件下，包埋后的原花青素，即活性因子载运体系仍然具有较好的抗氧化能力。
图9为原花青素、对比例1制备的活性因子载运体系和实施例1制备的活性因子载运体系在不同pH条件下孵育1h原花青素保留率变化情况，采用酶标仪测定原花青素溶液(浓度20μg/mL)或活性因子载运体系在280nm处的吸光值。原花青素的保留率＝不同pH条件下原花青素吸光值/未经处理原花青素吸光值，活性因子载运体系的保留率＝不同pH条件下活性因子载运体系吸光值/未经处理活性因子载运体系的吸光值，从图中可以看出，在pH2～4范围内，原花青素的保留率保持在80％以上，相对较为稳定，然后随着pH增加，原花青素保留率明显下降，说明在偏中性环境中原花青素性质不稳定，易发生降解；对比例1制备的活性因子载运体系则随着pH值增加原花青素的保留率呈现上升趋势，主要与对比例1制备的活性因子载运体系表面孔隙有关，导致原花青素的释放，且随着pH增加，原花青素的释放速度相对较高；实施例1制备的活性因子载运体系在pH2～6范围内其保留率无明显变化，当pH为7.4时，壁材海藻酸钠对偏中性环境敏感，裂解释放大量原花青素，导致其保留率快速增加。表明实施例1制备的活性因子载运体系在偏中性环境中具有pH刺激响应释放原花青素的特性；此外，与未进行包被的原花青素相比，采用实施例1制备的原花青素运载体系能够改善原花青素在pH5～7.4的偏中性环境中原花青素性质不稳定的问题。
图10为对比例2制备的荧光标记的活性因子载运体系的荧光倒置图，即对照组；
唾液消化：取对比例2制备的含有原花青素100μg/mL的荧光标记的活性因子载运体系1mL，加入0.5mL的唾液，在37℃的恒温培养箱中以转速160rpm/min震荡5min，得唾液消化样品；拍摄所述唾液消化样品的荧光倒置图，如11所示；
胃液消化：将所述唾液消化样品中加入1mL的胃液，用1mol/L盐酸调节溶液的pH为2，在37℃的恒温培养箱中以转速160rpm/min震荡2h，得胃液消化样品，拍摄样品的荧光倒置图，如图12所示；
小肠液消化：在所述胃液消化样品中加入1mL的小肠液，用1mol/L的氢氧化钠调节溶液的pH为7.4，在37℃的恒温培养箱中以转速160rpm/min震荡2h，得小肠液消化样品，拍摄样品的荧光倒置图，如图13所示。
与对照组相比，对比例2制备的荧光标记的活性因子载运体系在唾液和胃液中未发生明显变化，在小肠液中由于受到pH影响释放原花青素。
图14为实施例3制备的荧光标记的活性因子载运体系的荧光倒置图，即对照组；
唾液消化：取实施例3制备的含有原花青素100μg/mL的荧光标记的活性因子载运体系1mL，加入0.5mL的唾液，在37℃的恒温培养箱中以转速160rpm/min震荡5min，得唾液消化样品；拍摄所述唾液消化样品的荧光倒置图，如15所示；
胃液消化：将所述唾液消化样品中加入1mL的胃液，用1mol/L盐酸调节溶液的pH为2，在37℃的恒温培养箱中以转速160rpm/min震荡2h，得胃液消化样品，拍摄样品的荧光倒置图，如图16所示；
小肠液消化：在所述胃液消化样品中加入1mL的小肠液，用1mol/L的氢氧化钠调节溶液的pH为7.4，在37℃的恒温培养箱中以转速160rpm/min震荡2h，得小肠液消化样品，拍摄样品的荧光倒置图，如图17所示。
与对照组相比，实施例3制备的荧光标记的活性因子载运体系也是在小肠液中释放原花青素，但其荧光强度整体高于对比例2，主要与原花青素的含量有关，进一步证明壳聚糖的层层自组装可提高原花青素装载率。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (9)
1.一种基于阴离子海藻酸钠的pH响应肠靶向活性因子载运体系的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、配制内相原花青素-羧甲基纤维素钠溶液：将羧甲基纤维素钠溶液与原花青素水溶液混合均匀，得内相；所述内相中羧甲基纤维素钠的终浓度是9～11mg/mL，所述原花青素的终浓度是4～6mg/mL；
S2、配制中间相海藻酸钠-乙二胺四乙酸二钠钙溶液：将海藻酸钠溶液与乙二胺四乙酸二钠钙溶液混合均匀，得中间相；所述中间相中海藻酸钠的终浓度与步骤S1所述内相中羧甲基纤维素钠的终浓度相等，所述乙二胺四乙酸二钠钙的终浓度为9～11mg/mL；
S3、配制外相棕榈油：在棕榈油中加入吐温80和醋酸，在功率100～200W条件下超声25～35min，得外相；其中，所述棕榈油和所述吐温80的体积比是100:1～3，所述棕榈油和所述醋酸的体积比是100:1～3；
S4、配制收集液：将氯化钙溶液与含有醋酸的壳聚糖水溶液混合均匀，得收集液；所述收集液中氯化钙的终浓度为4～6mg/mL，所述壳聚糖的终浓度为4～6mg/mL；所述含有醋酸的壳聚糖水溶液中，醋酸和水的重量比为(0.5～1.5):100；
S5、采用微流控技术制备样品：将步骤S1所述内相、步骤S2所述中间相和步骤S3所述外相通过注射泵注射到微流控装置的芯片内，将所述芯片放置在含有收集液的收集槽内；所述注射泵流速为：内相流速100～120μL/h，中间相流速100～120μL/h，外相流速3550～3650μL/h；反应结束后，将所述收集液离心，去除上层油相，所得溶液是活性因子载运体系；其中，所述内相、中间相、外相和收集液的体积比是1:1:30:(18～48)。
2.根据权利要求1所述基于阴离子海藻酸钠的pH响应肠靶向活性因子载运体系的制备方法，其特征在于，步骤S1所述羧甲基纤维素钠溶液的制备方法为：取羧甲基纤维素钠加入水中，600～1000rpm搅拌6～12h，配制成羧甲基纤维素钠溶液。
3.根据权利要求1所述基于阴离子海藻酸钠的pH响应肠靶向活性因子载运体系的制备方法，其特征在于，步骤S1所述原花青素水溶液的制备方法为：取原花青素加入水中，在功率100～200W超声5～10min，配制成原花青素水溶液。
4.根据权利要求1所述基于阴离子海藻酸钠的pH响应肠靶向活性因子载运体系的制备方法，其特征在于，步骤S2所述海藻酸钠溶液的制备方法为：取海藻酸钠加入水中，600～1200rpm搅拌6～12h，配制成海藻酸钠水溶液。
5.根据权利要求1所述基于阴离子海藻酸钠的pH响应肠靶向活性因子载运体系的制备方法，其特征在于，步骤S2所述乙二胺四乙酸二钠钙溶液的制备方法为：取乙二胺四乙酸二钠钙加入水中，在功率100～200W超声5～10min，配制成乙二胺四乙酸二钠钙溶液。
6.根据权利要求1所述基于阴离子海藻酸钠的pH响应肠靶向活性因子载运体系的制备方法，其特征在于，步骤S4所述氯化钙溶液的制备方法为：取氯化钙加入水中，在功率100～200W超声5～10min，配制成氯化钙溶液。
7.根据权利要求1所述基于阴离子海藻酸钠的pH响应肠靶向活性因子载运体系的制备方法，其特征在于，步骤S4所述含有醋酸的壳聚糖水溶液的制备方法为：取壳聚糖加入含有醋酸的水溶液中，600～1000rpm搅拌6～12h，配制成含有醋酸的壳聚糖水溶液；其中，所述含有醋酸的水溶液中，醋酸和水的体积比是(0.5～1.5):100。
8.根据权利要求1所述基于阴离子海藻酸钠的pH响应肠靶向活性因子载运体系的制备方法，其特征在于，步骤S5所述离心的参数为：转速3000rpm，时间10min。
9.根据权利要求1所述基于阴离子海藻酸钠的pH响应肠靶向活性因子载运体系的制备方法，其特征在于，包括步骤：
S1、配制内相原花青素-羧甲基纤维素钠溶液：
取羧甲基纤维素钠加入水中，600rpm搅拌6h，配制成浓度为20mg/mL的羧甲基纤维素钠溶液；
取原花青素加入水中，在功率100W超声10min，配制成浓度为10mg/mL原花青素水溶液；
将浓度为20mg/mL的羧甲基纤维素钠溶液与浓度为10mg/mL的原花青素水溶液按体积比1:1混合均匀，得内相；
S2、配制中间相海藻酸钠-乙二胺四乙酸二钠钙溶液：
取海藻酸钠加入水中，1000rpm搅拌12h，配制成浓度为20mg/mL的海藻酸钠水溶液；
取乙二胺四乙酸二钠钙加入水中，在功率100W条件下超声10min，配制成浓度为20mg/mL的乙二胺四乙酸二钠钙溶液；
将浓度为20mg/mL的海藻酸钠溶液与浓度为20mg/mL的乙二胺四乙酸二钠钙溶液按照体积比为1:1混合均匀，得中间相；
S3、配制外相棕榈油：
在棕榈油中加入吐温80和醋酸，在功率100W超声30min，得外相；所述棕榈油和所述吐温80的体积比为100:2；所述棕榈油和所述醋酸的体积比为100:2；
S4、配制收集液：
取氯化钙加入水中，在功率100W超声10min，配制成浓度为10mg/mL的氯化钙溶液；
取壳聚糖加入含有醋酸的水溶液中，600rpm搅拌6h，配制成含有醋酸的壳聚糖水溶液；其中，所述醋酸和水的体积比是1:100，所述壳聚糖的浓度为10mg/mL；
将浓度为10mg/mL的氯化钙溶液与含有醋酸的壳聚糖水溶液按照体积比1:1混合均匀，得收集液；
S5、采用微流控技术制备样品：将步骤S1所述内相0.1mL、步骤S2所述中间相0.1mL和步骤S3所述外相3mL通过注射泵注射到微流控装置的芯片内，将所述芯片放置在含有1.8mL收集液的收集槽内；所述注射泵流速为：内相流速120μL/h，中间相流速120μL/h，外相流速3600μL/h；反应结束后，将所述收集液3000rpm离心10min，去除上层油相，所得溶液是活性因子载运体系。
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Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111991370A (zh) * | 2020-08-20 | 2020-11-27 | 四川大学 | 具有泵送恒速释药特性的肠靶向双腔室海藻酸钙基复合微胶囊及其制备方法 |
| CN112587503A (zh) * | 2020-12-21 | 2021-04-02 | 大连工业大学 | 一种刺激响应型虾青素纳米颗粒及其制备方法和在线粒体靶向、缓解结肠炎症方向的应用 |
| WO2021136513A1 (zh) * | 2020-01-03 | 2021-07-08 | 大连工业大学 | 一种基于阴离子海藻酸钠的pH响应肠靶向活性因子载运体系的制备方法 |
| CN113288881A (zh) * | 2021-04-29 | 2021-08-24 | 大连工业大学 | 一种pH响应型活性因子载运体系的制备方法及其在肠靶向中的应用 |
| CN113995015A (zh) * | 2021-11-17 | 2022-02-01 | 合肥工业大学 | 一种控制酸奶后酸化的方法 |
| CN115260544A (zh) * | 2022-07-26 | 2022-11-01 | 武汉纺织大学 | 多重交联的3d凝胶材料的快速成型方法 |
| CN115281339A (zh) * | 2022-08-09 | 2022-11-04 | 河南工业大学 | 一种原花青素微胶囊的制备方法 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1383819A (zh) * | 2002-05-17 | 2002-12-11 | 天津市园艺工程研究所 | 一种原花青素缓释微囊 |
| CN102068409A (zh) * | 2011-01-13 | 2011-05-25 | 清华大学 | 一种基于微流控技术制备单分散性微乳、脂质体和微球的方法 |
| CN103271424A (zh) * | 2013-05-28 | 2013-09-04 | 上海交通大学 | 一种香精微胶囊的制备方法 |
| US20140127290A1 (en) * | 2012-11-08 | 2014-05-08 | Ohio State Innovation Foundation | Microcapsules Encapsulating Living Cells |
| CN107875139A (zh) * | 2017-10-09 | 2018-04-06 | 中山大学 | 一种壳核α‑生育酚微胶囊及其制备方法 |
| CN107930542A (zh) * | 2017-11-13 | 2018-04-20 | 王华楠 | 一步法连续制备海藻酸钙微凝胶的微流控技术 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109589885A (zh) * | 2018-12-18 | 2019-04-09 | 西南石油大学 | 一种单分散性含油海藻酸钙微囊的制备方法 |
| CN110241003A (zh) * | 2019-05-30 | 2019-09-17 | 南方医科大学珠江医院 | 微流控装置及其使用方法、制备方法 |
| CN110547452A (zh) * | 2019-09-18 | 2019-12-10 | 大连工业大学 | 一种明胶-海藻酸钠复凝聚原花青素微胶囊的制备方法 |
| CN111096956A (zh) * | 2020-01-03 | 2020-05-05 | 大连工业大学 | 一种基于阴离子海藻酸钠的pH响应肠靶向活性因子载运体系的制备方法 |
-
2020
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Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1383819A (zh) * | 2002-05-17 | 2002-12-11 | 天津市园艺工程研究所 | 一种原花青素缓释微囊 |
| CN102068409A (zh) * | 2011-01-13 | 2011-05-25 | 清华大学 | 一种基于微流控技术制备单分散性微乳、脂质体和微球的方法 |
| US20140127290A1 (en) * | 2012-11-08 | 2014-05-08 | Ohio State Innovation Foundation | Microcapsules Encapsulating Living Cells |
| CN103271424A (zh) * | 2013-05-28 | 2013-09-04 | 上海交通大学 | 一种香精微胶囊的制备方法 |
| CN107875139A (zh) * | 2017-10-09 | 2018-04-06 | 中山大学 | 一种壳核α‑生育酚微胶囊及其制备方法 |
| CN107930542A (zh) * | 2017-11-13 | 2018-04-20 | 王华楠 | 一步法连续制备海藻酸钙微凝胶的微流控技术 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| CHEN, RENCAI ET AL.: ""Formulation and statistical optimization of gastric floating alginate/oil/chitosan capsules loading procyanidins: in vitro and in vivo evaluations"", 《INTERNATIONAL JOURNAL OF BIOLOGICAL MACROMOLECULES》 * |
| 李安平等主编: "《食品添加剂原理与安全使用》", 30 September 2011, 长沙：国防科技大学出版社 * |
| 顾其胜主编: "《海藻酸盐基生物医用材料与临床医学》", 30 April 2015, 上海：上海科学技术出版社 * |
Cited By (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2021136513A1 (zh) * | 2020-01-03 | 2021-07-08 | 大连工业大学 | 一种基于阴离子海藻酸钠的pH响应肠靶向活性因子载运体系的制备方法 |
| CN111991370A (zh) * | 2020-08-20 | 2020-11-27 | 四川大学 | 具有泵送恒速释药特性的肠靶向双腔室海藻酸钙基复合微胶囊及其制备方法 |
| CN111991370B (zh) * | 2020-08-20 | 2021-06-08 | 四川大学 | 具有泵送恒速释药特性的肠靶向双腔室海藻酸钙基复合微胶囊及其制备方法 |
| CN112587503A (zh) * | 2020-12-21 | 2021-04-02 | 大连工业大学 | 一种刺激响应型虾青素纳米颗粒及其制备方法和在线粒体靶向、缓解结肠炎症方向的应用 |
| CN112587503B (zh) * | 2020-12-21 | 2023-11-17 | 大连工业大学 | 一种刺激响应型虾青素纳米颗粒及其制备方法和在线粒体靶向、缓解结肠炎症方向的应用 |
| CN113288881A (zh) * | 2021-04-29 | 2021-08-24 | 大连工业大学 | 一种pH响应型活性因子载运体系的制备方法及其在肠靶向中的应用 |
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| CN115260544A (zh) * | 2022-07-26 | 2022-11-01 | 武汉纺织大学 | 多重交联的3d凝胶材料的快速成型方法 |
| CN115260544B (zh) * | 2022-07-26 | 2024-04-26 | 武汉纺织大学 | 多重交联的3d凝胶材料的快速成型方法 |
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