CN111068025A - 一种中药组合物在制备甲状腺结节药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供的中药组合物在制备治疗甲状腺结节药物中的应用,所述中药组合物是由如下重量份比例的原料药制成的:柴胡30~35份、小麦5~10份、白芍15~20份、当归25~30份、郁金25~30份、大枣5~10份、茯苓20~25份、百合20~25份、合欢皮10~15份、甘草10~15份。本发明可抑制结节性甲状腺肿模型大鼠的甲状腺细胞增殖;能够促进模型大鼠甲状腺细胞凋亡;能偶改善结节性甲状腺肿;能够降低甲状腺组织中PCNA的水平;能够降低VEGF及FGF‑2在甲状腺组织中的表达,抑制甲状腺模型大鼠甲状腺血管的形成;能够抑制CXCR‑4在甲状腺组织中的表达,抑制结节性甲状腺肿模型大鼠的甲状腺细胞的趋化。
Description
技术领域
本发明涉及中药技术领域,尤其是涉及一种中药组合物在制备甲状腺结节药物中的应用。
背景技术
结节性甲状腺肿(是一种临床常见的甲状腺疾病,除发现颈部的肿物外多数无自觉症状,少数患者颈前有不适感觉,肿大明显者可有压迫症状,出现呼吸困难、吞咽困难和声渐等。中医学没有结节性甲状腺肿的病名,根据本病的主要临床表现,如咽部有阻塞感、颈部有胀闷感、颈部有肿块等,一般将其归类入“瘿瘤”的范畴。
结节性甲状腺肿在人群中的发病率为之间,据统计患病者中男性明显少于女性,随着年龄增长,结节性甲状腺肿的发病率逐渐增加,约岁左右中年女性为发病高峰。目前,结节性甲状腺肿的患者数量明显增加,对于结节性甲状腺肿的实验及临床研究也日益受到重视。
目前,西医治疗结节性甲状腺肿的方法主要有:甲状腺激素抑制治疗、放射性碳治疗、手术治疗等。临床研究表明以上这些治疗方法各有其并发症和副作用。甲状腺激素抑制治疗的研究表明:将抑制到以上至以下,无明显疗效,即结节无明显缩小;明显减少新发结节需将抑制到以下,但对心血管系统及骨路均有(如房颤、绝经期妇女骨密度显著下降等)较多负面影响,且甲状腺结节可再次生长,长期疗效不理想等治疗后可能引起永久性甲状腺功能减退等手术治疗可能损伤喉返、喉上神经致声渐、唉散,损伤甲状旁腺导致手足抽搐等;复发率高;易引起甲状腺功能异常等因此,有必要探索疗效显著、副作用更少的新治疗方法。
中医认为结节性甲状腺肿的主要病机是脾失健运,肝郁气滞,气血疾滞,痰湿内生,瘦湿凝结颈前,病久致血脉换阻,成气、痰、齋三者合而为患。临床中用中医药治疗结节性甲状腺肿则主要以理气化痰、活血化瘀、软坚散结为主。中医善于用中药辨证论治,标本兼治,为甲状腺结节的治疗开辟了新的手段。
因此,开发一种新的用于甲状腺结节的治疗的中药组合物是非常必要的。
发明内容
有鉴于此,本发明要解决的技术问题在于提供一种中药组合物在制备治疗甲状腺结节药物中的应用,本发明提供的组合物能够明显改善甲状腺结节患者的症状,对甲状腺结节具有明显疗效。
本发明提供了一种中药组合物在制备治疗甲状腺结节药物中的应用,所述中药组合物是由如下重量份比例的原料药制成的:柴胡30~35份、小麦5~10份、白芍15~20份、当归25~30份、郁金25~30份、大枣5~10份、茯苓20~25份、百合20~25份、合欢皮10~15份、甘草10~15份。
优选的,所述治疗包括改善结节性甲状腺肿。
优选的,所述治疗包括降低甲状腺组织中PCNA的水平和/或降低甲状腺组织中FGF-2的水平。
优选的,所述治疗包括降低甲状腺组织中CXCR-4的水平和/或降低血清VEGF的水平。
优选的,所述治疗包括促进结节性甲状腺肿模型甲状腺细胞的凋亡。
优选的,所述治疗包括甲状腺结节的体积缩小。
优选的,所述治疗包括降低症候评分和/或高危因素评分。
优选的,所述中药组合物是由如下重量份比例的原料药制成:柴胡30份、小麦5份、白芍15份、当归25份、郁金30份、大枣10份、茯苓25份、百合25份、合欢皮10份、甘草15份;
或
柴胡35份、小麦10份、白芍20份、当归30份、郁金25份、大枣5份、茯苓20份、百合20份、合欢皮15份、甘草10份;
或
柴胡33份、小麦8份、白芍16份、当归27份、郁金27份、大枣8份、茯苓23份、百合23份、合欢皮12份、甘草12份。
优选的,所述中药组合物为口服给药;所述中药组合物采用药剂学中常规的制剂方法制备成颗粒剂、胶囊剂、丸剂、片剂、口服液、散剂。
优选的,所述中药组合物制备方法具体为:
A)将柴胡、白芍、当归、郁金、合欢皮、加8~12倍量的水,浸泡提取,提取液过滤、浓缩放置室温,用85%~95%乙醇醇沉,上清液浓缩,得水提醇沉液;
将大枣、茯苓、百合、甘草、小麦加60%~80%乙醇,提取,提取液滤过,浓缩,放置室温,加入水水沉过夜,上清液浓浓缩,得醇提水沉液;
B)取上述水提醇沉液和醇提水沉液混合均匀,加入矫味剂混匀,加水至,搅匀,煮沸,冷藏,过滤,调节pH至8.0~9.0,封装即得。
与现有技术相比,本发明提供了一种中药组合物在制备治疗甲状腺结节药物中的应用,所述中药组合物是由如下重量份比例的原料药制成的:柴胡30~35份、小麦5~10份、白芍15~20份、当归25~30份、郁金25~30份、大枣5~10份、茯苓20~25份、百合20~25份、合欢皮10~15份、甘草10~15份。研究发现本发明可抑制结节性甲状腺肿模型大鼠的甲状腺细胞增殖;能够促进模型大鼠甲状腺细胞凋亡;能偶改善结节性甲状腺肿;能够降低甲状腺组织中PCNA的水平;能够降低VEGF及FGF-2在甲状腺组织中的表达,抑制甲状腺模型大鼠甲状腺血管的形成;能够抑制CXCR-4在甲状腺组织中的表达,抑制结节性甲状腺肿模型大鼠的甲状腺细胞的趋化。
具体实施方式
本发明提供了一种中药组合物在制备甲状腺结节药物中的应用,本领域技术人员可以借鉴本文内容,适当改进组分和配比实现。特别需要指出的是,所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的,它们都属于本发明保护的范围。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述,相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文的方法和应用进行改动或适当变更与组合,来实现和应用本发明技术。
本发明提供了一种中药组合物在制备治疗甲状腺结节药物中的应用,所述中药组合物是由如下重量份比例的原料药制成的:柴胡30~35份、小麦5~10份、白芍15~20份、当归25~30份、郁金25~30份、大枣5~10份、茯苓20~25份、百合20~25份、合欢皮10~15份、甘草10~15份。
在本发明其中一部分实施例中,本发明提供的中药组合物是由如下重量份比例的原料药制成:柴胡30份、小麦5份、白芍15份、当归25份、郁金30份、大枣10份、茯苓25份、百合25份、合欢皮10份、甘草15份;
在本发明其中一部分实施例中,本发明提供的中药组合物是由如下重量份比例的原料药制成:柴胡35份、小麦10份、白芍20份、当归30份、郁金25份、大枣5份、茯苓20份、百合20份、合欢皮15份、甘草10份;
在本发明其中一部分实施例中,本发明提供的中药组合物是由如下重量份比例的原料药制成:柴胡33份、小麦8份、白芍16份、当归27份、郁金27份、大枣8份、茯苓23份、百合23份、合欢皮12份、甘草12份。
本发明对于上述组分的来源不进行限定,本领域技术人员熟知的市售即可。
本发明所述中药组合物为口服给药。
按照本发明,所述中药组合物采用药剂学中常规的制剂方法制备成颗粒剂、胶囊剂、丸剂、片剂、口服液、散剂。
本发明制备上述制剂的过程中,还包括本领域技术人员常规的可接受的辅料,在此不进行限定。
按照本发明,所述中药组合物制备方法具体为:
A)将柴胡、白芍、当归、郁金、合欢皮、加8~12倍量的水,浸泡提取,提取液过滤、浓缩放置室温,用85%~95%乙醇醇沉,上清液浓缩,得水提醇沉液。
将大枣、茯苓、百合、甘草、小麦加60%~80%乙醇,提取,提取液滤过,浓缩,放置室温,加入水水沉过夜,上清液浓浓缩,得醇提水沉液;
B)取上述水提醇沉液和醇提水沉液混合均匀,加入矫味剂混匀,加水至,搅匀,煮沸,冷藏,过滤,调节pH至8.0~9.0,封装即得。
本发明按照上述重量份首先将柴胡、白芍、当归、郁金、合欢皮、加8~12倍量的水,浸泡0.5~2小时,提取2~4次,每次1~4小时,提取液过滤、浓缩至1.1-1.5,放置室温,用85%~95%乙醇醇沉至60%~85%,上清液浓缩至1.10-1.20,得水提醇沉液。
大枣、茯苓、百合、甘草、小麦加60%~80%乙醇,提取1~3次,每次1~3小时,提取液滤过,浓缩至1.2-1.5,放置室温,加入1-2倍量的水水沉过夜,上清液浓浓缩至1.20-1.25,得醇提水沉液。
取上述水提醇沉液和醇提水沉液混合均匀,加入矫味剂混匀,加水至1000mL,搅匀,煮沸1小时,冷藏48小时,滤过,调节pH至8.0-9.0,封装即得。
在本发明中,所述治疗包括改善结节性甲状腺肿。
本发明实验中发现,本发明的中药组合物对大鼠结节性甲状腺肿的甲状腺结节有明显的改善作用。
在本发明中,所述治疗包括降低甲状腺组织中PCNA的水平和/或降低甲状腺组织中FGF-2的水平。所述甲状腺组织为结节性甲状腺肿的组织。
本发明实验中发现,中药组合物通过降低甲状腺组织中PCNA的表达,抑制甲状腺细胞的增殖,治疗甲状腺结节,效果明显。中药组合物能够抑制甲状腺组织中FGF-2的表达。所述甲状腺组织为结节性甲状腺肿的组织。
在本发明中,所述治疗包括降低甲状腺组织中CXCR-4的水平和/或降低模型组大鼠血清VEGF的水平。所述甲状腺组织为结节性甲状腺肿的组织。
本发明实验中发现,中药组合物能够降低大鼠甲状腺组织中CXCR-4的表达,对结节性甲状腺肿有治疗改善作用。所述甲状腺组织为结节性甲状腺肿的组织。
本发明实验中发现,中药组合物均能降低模型组大鼠血清VEGF的浓度。
在本发明中,所述治疗包括促进肿胀后甲状腺细胞的凋亡。
本发明实验中发现,中药组合物能够有效增多大鼠甲状腺细胞的凋亡率,对结节性甲状腺肿的治疗有较好的疗效。
所述治疗包括抑制甲状腺模型大鼠甲状腺血管的形成。
在本发明中,所述治疗包括甲状腺结节的体积缩小。
在本发明中,所述治疗包括降低症候评分和/或高危因素评分。
本发明提供了一种中药组合物在制备治疗甲状腺结节药物中的应用,所述中药组合物是由如下重量份比例的原料药制成的:柴胡30~35份、小麦5~10份、白芍15~20份、当归25~30份、郁金25~30份、大枣5~10份、茯苓20~25份、百合20~25份、合欢皮10~15份、甘草10~15份。本发明组合物具有行气活血、祛痰化瘀之功效,适用于甲状腺结节患者。研究发现本发明可抑制结节性甲状腺肿模型大鼠的甲状腺细胞增殖;能够促进模型大鼠甲状腺细胞凋亡;能偶改善结节性甲状腺肿;能够降低甲状腺组织中PCNA的水平;能够降低VEGF及FGF-2在甲状腺组织中的表达,抑制甲状腺模型大鼠甲状腺血管的形成;能够抑制CXCR-4在甲状腺组织中的表达,抑制结节性甲状腺肿模型大鼠的甲状腺细胞的趋化。临床试验表明本组合物能够明显改善结节性甲状腺患者的症状,总有效率为93.5%,且未见明显不良反应。
为了进一步说明本发明,以下结合实施例对本发明提供的一种中药组合物在制备甲状腺结节药物中的应用进行详细描述。
本发明如未注明具体条件者,均按照常规条件或制造商建议的条件进行,所用原料药或辅料,以及所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例1中药组合物口服液的制备
柴胡33份、小麦8份、白芍16份、当归27份、郁金27份、大枣8份、茯苓23份、百合23份、合欢皮12份、甘草12份。
柴胡、白芍、当归、郁金、合欢皮、加10倍量的水,浸泡1小时,提取3次,每次1.5小时,提取液过滤、浓缩至1.15,放置室温,用90%乙醇醇沉至75%,上清液浓缩至1.15,得水提醇沉液;
大枣、茯苓、百合、甘草、小麦加70%乙醇,提取3次,每次1小时,提取液滤过,浓缩至1.2,放置室温,加入1倍量的水水沉过夜,上清液浓浓缩至1.20,得醇提水沉液。
取上述水提醇沉液和醇提水沉液混合均匀,加入矫味剂混匀,加水至1000mL,搅匀,煮沸1小时,冷藏48小时,滤过,调节pH至8.5,封装,灭菌,即得。
实施例2中药组合物颗粒剂的制备
该药物组合物颗粒剂由以下重量份的原料药制成:
柴胡30份、小麦5份、白芍15份、当归25份、郁金30份、大枣10份、茯苓25份、百合25份、合欢皮10份、甘草15份
柴胡、白芍、当归、郁金、合欢皮、加8倍量的水,浸泡2小时,提取2次,每次2小时,提取液过滤、浓缩至1.15,放置室温,用90%乙醇醇沉至80%,上清液浓缩至1.10,得水提醇沉液;
大枣、茯苓、百合、甘草、小麦加75%乙醇,提取2次,每次2小时,提取液滤过,浓缩至1.25,放置室温,加入1.5倍量的水水沉过夜,上清液浓浓缩至1.20,得醇提水沉液。
将上述两种浓缩液混合均匀,喷雾干燥,得喷干粉,加入适量的糊精、甜菊素,干法制粒,即得颗粒剂。
实施例3中药组合物胶囊剂的制备
该药物组合物胶囊剂可以由以下重量份的原料制成:
柴胡35份、小麦10份、白芍20份、当归30份、郁金25份、大枣5份、茯苓20份、百合20份、合欢皮15份、甘草10份。
柴胡、白芍、当归、郁金、合欢皮、加9倍量的水,浸泡1小时,提取2次,每次2小时,提取液过滤、浓缩至1.20,放置室温,用90%乙醇醇沉至70%,上清液浓缩至1.15,得水提醇沉液;
大枣、茯苓、百合、甘草、小麦加80%乙醇,提取2次,每次2.5小时,提取液滤过,浓缩至1.2,放置室温,加入2倍量的水水沉过夜,上清液浓浓缩至1.20,得醇提水沉液。
将上述两种浓缩液混合均匀,干燥,粉碎成细粉,加入1.5%硬脂酸镁、糊精,混合均匀,充填,即得硬胶囊。
实施例4中药组合物滴丸剂的制备
该药物组合物胶囊剂可以由以下重量份的原料制成:
柴胡30份、小麦5份、白芍15份、当归25份、郁金20份、大枣5份、茯苓20、百合20份、合欢皮10份、甘草10份
柴胡、白芍、当归、郁金、合欢皮、加11倍量的水,浸泡1.5小时,提取3次,每次1.5小时,提取液过滤、浓缩至1.12,放置室温,用90%乙醇醇沉至75%,上清液浓缩至1.13,得水提醇沉液;
大枣、茯苓、百合、甘草、小麦加60%乙醇,提取3次,每次1.5小时,提取液滤过,浓缩至1.22,放置室温,加入1.5倍量的水水沉过夜,上清液浓浓缩至1.25,得醇提水沉液。
将上述两种浓缩液混匀,干燥,粉碎成细粉,加入适量聚乙二醇6000和聚乙二醇4000,加热熔融,搅拌均匀,滴入二甲基硅油冷却剂中,滴丸,即得滴丸剂。
实施例5中药组合物散剂的制备
该药物组合物散剂可以由以下重量份的原料制成:
柴胡32份、小麦10份、白芍20份、当归30份、郁金25份、大枣5份、茯苓25份、百合25份、合欢皮15份、甘草10份。
以上10味药,粉碎成细粉,过筛,混合均匀,即得。
实施例6中药组合物片剂的制备
该药物组合物胶囊剂可以由以下重量份的原料制成:
柴胡33份、小麦10份、白芍16份、当归27份、郁金27份、大枣8份、茯苓23份、百合23份、合欢皮12份、甘草12份
柴胡、白芍、当归、郁金、合欢皮、加12倍量的水,浸泡2小时,提取3次,每次1.5小时,提取液过滤、浓缩至1.3,放置室温,用95%乙醇醇沉至85%,上清液浓缩至1.15,得水提醇沉液;
大枣、茯苓、百合、甘草、小麦加70%乙醇,提取2次,每次2小时,提取液滤过,浓缩至1.3,放置室温,加入2倍量的水水沉过夜,上清液浓浓缩至1.20-1.25,得醇提水沉液。
将上述两种浓缩液混合均匀,干燥,粉碎,加入适量辅料,填充即得。
实施例7中药组合物对大鼠结节性甲状腺肿组织结构的影响
SD雄性大鼠72只,体重120-140g。所有大鼠均在实验室分笼飼养,每笼6只大鼠,所有大鼠均给予标准大鼠饲料和自来水。随机分组,每组各12只,即实施例1中药组合物低剂量(0.9g生药/kg)、解郁丸中剂量(1.8g生药/kg)、解郁丸高剂量(3.6g生药/kg)、阳性对照药组(0.01mg/kg)、模型组(蒸馏水)、正常空白组(蒸馏水)。
大鼠喂养14天后开始造模实验,正常组灌服给予生理盐水,其他各组灌服给予浓度为0.1%的丙基硫氧嘧啶溶液,每天早上8:30灌胃1次,连续给药8周。给药结束利用多普勒观察,模型组大鼠甲状腺组织的滤泡上皮细胞高度肿胀,内质网扩张,内质网的表面核糖体分布密集,表明造模成功。自第九周开始,阳性药对照组灌服给予左甲状腺素钠片,药物组分别给予低、中、高剂量的中药组合物,模型组、正常组灌服给予蒸馏水,每天早上8:30灌胃给药一次,各组均连续给药10周。
灌服治疗10周后,所有大鼠用5%浓度的苯巴比妥,按30mg/kg体重腹腔注射麻醉后,切开颈部皮肤,剥离并暴露气管,分别找到两侧甲状腺,完整分离甲状腺组织,去掉肌肉等其他组织。将每只大鼠的左侧甲状腺各切取一部分,分别放入装有2.5%戊二酸的各个1.5mLEP管中固定,用于制作电镜观察的超徼组织切片。将超薄组织切片分别放入酷酸双氧抽及枸橼酸铅染液中染色;用1%NaOH溶液洗一次,再水洗二次后干燥;置于透射电镜观察。
2结果
观察组织切片的结果表明:正常组大鼠的甲状腺组织细胞质有较多的融媒体,各处可见粗面内质网,粗面内质网表面可见密布的核糖体小颗粒,细胞间的交界复合体清晰可见,滤泡腔内充满大小较为均句一致的细小颗粒状物质,滤泡腔边缘存在较多的徽线毛。模型组大鼠甲状腺组织的滤泡上皮细胞高度肿胀,内质网扩张,内质网的表明核糖体分布密集。与正常组相比,中药组合物低、中、高及阳性对照药组各甲状腺组织中溶酶体数量均减少;与模型组比较,各给药组大鼠甲状腺组织的滤泡腔可见,内质网扩张,细胞质内多见游离的核糖体小颗粒。结果提示中药组合物对大鼠结节性甲状腺肿的甲状腺结果又明显的改善作用。
实施例8中药组合物对结节性甲状腺肿大鼠甲状腺细胞增殖的影响
SD雄性大鼠72只,体重120-140g。所有大鼠均在实验室分笼飼养,每笼6只大鼠,所有大鼠均给予标准大鼠饲料和自来水。随机分组,每组各12只,即实施例1中药组合物低剂量(0.9g生药/kg)、解郁丸中剂量(1.8g生药/kg)、解郁丸高剂量(3.6g生药/kg)、阳性对照药组(0.01mg/kg)、模型组(蒸馏水)、正常空白组(蒸馏水)。
大鼠喂养14天后开始造模实验,正常组灌服给予生理盐水,其他各组灌服给予浓度为0.1%的丙基硫氧嘧啶溶液,每天早上8:30灌胃1次,连续给药8周。给药结束利用多普勒观察,模型组大鼠甲状腺组织的滤泡上皮细胞高度肿胀,内质网扩张,内质网的表面核糖体分布密集,表明造模成功。自第九周开始,阳性药对照组灌服给予左甲状腺素钠片,药物组分别给予低、中、高剂量的中药组合物,模型组、正常组灌服给予蒸馏水,每天早上8:30灌胃给药一次,各组均连续给药10周。
灌服治疗10周后,所有大鼠用5%浓度的苯巴比妥,按30mg/kg体重腹腔注射麻醉后,切开颈部皮肤,剥离并暴露气管,分别找到两侧甲状腺,完整分离甲状腺组织,去掉肌肉等其他组织。将每只大鼠的左侧甲状腺各切取一部分,分别放入各个1.5mL;于-20℃冰箱中保存备用,采用Western Blotting方法检测各组大鼠甲状腺组织中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。
实验数据采用SPSS13.0统计软件进行统计学处理分析,结果均已均数±标准差表示。
表1各组对大鼠甲状腺组织中PCNA的表达
注:与模型组对比,**P<0.01;与阳性药对比,&&P<0.01
由表1结果可知,与模型组比较,各给药组均能够显著降低大鼠甲状腺细胞中PCNA的表达;与阳性对照药比较,中药组合物低剂量组大鼠甲状腺细胞PCNA的表达有显著差异,而中、高剂量的中药组合物组大鼠甲状腺细胞PCNA的表达无显著差异,且随着给药浓度增大而抑制PCNA的表达加强。结果提示中药组合物通过降低甲状腺组织中PCNA的表达,抑制甲状腺细胞的增殖,治疗甲状腺结节,效果明显。
实施例9中药组合物对结节性甲状腺肿大鼠甲状腺细胞凋亡的影响
SD雄性大鼠72只,体重120-140g。所有大鼠均在实验室分笼飼养,每笼6只大鼠,所有大鼠均给予标准大鼠饲料和自来水。随机分组,每组各12只,即实施例1中药组合物低剂量(0.9g生药/kg)、解郁丸中剂量(1.8g生药/kg)、解郁丸高剂量(3.6g生药/kg)、阳性对照药组(0.01mg/kg)、模型组(蒸馏水)、正常空白组(蒸馏水)。
大鼠喂养14天后开始造模实验,正常组灌服给予生理盐水,其他各组灌服给予浓度为0.1%的丙基硫氧嘧啶溶液,每天早上8:30灌胃1次,连续给药8周。给药结束利用多普勒观察,模型组大鼠甲状腺组织的滤泡上皮细胞高度肿胀,内质网扩张,内质网的表面核糖体分布密集,表明造模成功。自第九周开始,阳性药对照组灌服给予左甲状腺素钠片,药物组分别给予低、中、高剂量的中药组合物,模型组、正常组灌服给予蒸馏水,每天早上8:30灌胃给药一次,各组均连续给药10周。
灌服治疗10周后,所有大鼠用5%浓度的苯巴比妥,按30mg/kg体重腹腔注射麻醉后,切开颈部皮肤,剥离并暴露气管,分别找到两侧甲状腺,完整分离甲状腺组织,去掉肌肉等其他组织。将每只大鼠的左侧甲状腺各切取一部分,分别放入各个1.5mL;于-20℃冰箱中保存备用。取贮存的样品适量制备细胞悬液,依次采用Annexin V法、流式细胞仪检测大鼠甲状腺细胞凋亡情况。
实验数据采用SPSS13.0统计软件进行统计学处理分析,结果均已均数±标准差表示。
表2各组对大鼠甲状腺细胞凋亡的影响
注:与模型组比较,**P<0.01;与阳性对照组比较,&&P<0.01
由表2可知,与模型组比较,各给药组均能够显著增加大鼠甲状腺细胞的凋亡率;与阳性对照药比较,低剂量组有显著性差异,中、高剂量无显著差异;随着剂量浓度的升高,大鼠甲状腺细胞凋亡例随之增大。结果提示,中药组合物能够有效增多大鼠甲状腺细胞的凋亡率,对结节性甲状腺肿的治疗有较好的疗效。
实施例10中药组合物对结节性甲状腺肿大鼠血管生成的影响
SD雄性大鼠72只,体重120-140g。所有大鼠均在实验室分笼飼养,每笼6只大鼠,所有大鼠均给予标准大鼠饲料和自来水。随机分组,每组各12只,即实施例2中药组合物低剂量(1.1g生药/kg)、解郁丸中剂量(2.2g生药/kg)、解郁丸高剂量(4.4g生药/kg)、阳性对照药组(0.01mg/kg)、模型组(蒸馏水)、正常空白组(蒸馏水)。
大鼠喂养14天后开始造模实验,正常组灌服给予生理盐水,其他各组灌服给予浓度为0.1%的丙基硫氧嘧啶溶液,每天早上8:30灌胃1次,连续给药8周。给药结束利用多普勒观察,模型组大鼠甲状腺组织的滤泡上皮细胞高度肿胀,内质网扩张,内质网的表面核糖体分布密集,表明造模成功。自第九周开始,阳性药对照组灌服给予左甲状腺素钠片,药物组分别给予低、中、高剂量的中药组合物,模型组、正常组灌服给予蒸馏水,每天早上8:30灌胃给药一次,各组均连续给药10周。
灌服治疗10周后,所有大鼠用浓度为5%的苯巴比妥腹腔注射麻醉,用剪刀剪短大鼠甲状软骨上方组织,将大鼠提起使血液滴入准备好的促凝管中,共采血量约为2mL。进一步切开颈部皮肤,暴露器官,找到甲状软骨部位,将甲状腺组织分离完全,去掉其他组织。将每只大鼠的左侧甲状腺各切去一少部分,分别置于含有4%多聚甲醛的EP管中,备用。制备血清及组织切片样品,ELISA法检测血清中血管内皮生长因子(VEGF)含量;免疫组织化学法检测成纤维细胞生长因子FGF-2的表达。
实验数据采用SPSS13.0统计软件进行统计学处理分析,结果均已均数±标准差表示。
表3各组对大鼠血清中VEGF的影响
注:与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01;与阳性对照组比较,&P<0.05,&&P<0.01
由表3可知,与模型组比较,各给药组大鼠血清中VEGF的浓度均有明显下降,其中中药组合物中、高剂量均有显著性差异,随着给药剂量的升高,大鼠血清中VEGF的浓度逐渐降低。结果表明中药组合物均能降低模型组大鼠血清VEGF的浓度,且中、高剂量效果显著性差异较大。
表4各组大鼠甲状腺组织中FGF-2表达分析
注:与模型组对照组比较,**p<0.01;与阳性对照药组比较&&p<0.01
由表4可知,与模型组对比,各给药组大鼠甲状腺组织的FGF-2阳性表达和累计光密度均显著降低(p<0.01);与阳性对照药组相比,中药组合物低剂量组大鼠甲状腺组织的阳性表达的面积和累积光密度有显著差异(p<0.01),中药组合物中、高剂量组无显著差异。结果提示中药组合物能够抑制甲状腺组织中FGF-2的表达,达到治疗结节性甲状腺肿的疗效。
实施例11中药组合物对结节性甲状腺肿大细胞趋化的影响
SD雄性大鼠72只,体重120-140g。所有大鼠均在实验室分笼飼养,每笼6只大鼠,所有大鼠均给予标准大鼠饲料和自来水。随机分组,每组各12只,即实施例2中药组合物低剂量(1.1g生药/kg)、解郁丸中剂量(2.2g生药/kg)、解郁丸高剂量(4.4g生药/kg)、阳性对照药组(0.01mg/kg)、模型组(蒸馏水)、正常空白组(蒸馏水)。
大鼠喂养14天后开始造模实验,正常组灌服给予生理盐水,其他各组灌服给予浓度为0.1%的丙基硫氧嘧啶溶液,每天早上8:30灌胃1次,连续给药8周。给药结束利用多普勒观察,模型组大鼠甲状腺组织的滤泡上皮细胞高度肿胀,内质网扩张,内质网的表面核糖体分布密集,表明造模成功。自第九周开始,阳性药对照组灌服给予左甲状腺素钠片,药物组分别给予低、中、高剂量的中药组合物,模型组、正常组灌服给予蒸馏水,每天早上8:30灌胃给药一次,各组均连续给药10周。
灌服治疗10周后,所有大鼠用5%浓度的苯巴比妥,按体重30mg/kg腹腔注射麻醉后,切开颈部皮肤,暴露气管,分别找到两侧甲状腺,完整分离甲状腺组织,去掉肌肉等其他组织。将每只大鼠的右侧甲状腺各切取一部分,分别放入装有4%多聚甲酸的管中固定,用于制备石蜡切片。采用免疫化学发光法检测各组大鼠甲状腺组织中趋化因子受体CXCR-4的表达情况。
实验数据采用SPSS13.0统计软件进行统计学处理分析,结果均已均数±标准差表示。
表5各组对大鼠甲状腺组织中CXCR-4表达分析
注:与模型组对照组比较,**p<0.01;与阳性对照药组比较&&p<0.01
由表5可知,与模型组对比,各给药组大鼠甲状腺组织CXCR-4表达面积和累积光密度均明显降低;与阳性对照药组比较,中药组合物低、中剂量有显著差异,高剂量无显著差异,且中药组合物在给药剂量与大鼠甲状腺组织中CXCR-4的表达呈量效关系。结果提示,中药组合物能够降低大鼠甲状腺组织中CXCR-4的表达,对结节性甲状腺肿有治疗改善作用。
实施例12临床试验
为阐明本发明中药组合物治疗甲状腺结节的活性,用上述实施例制备得的颗粒进行以下临床试验。
1资料与方法
1.1一般资料
收集100例甲状腺结节患者病例,随机分为治疗组和对照组,每组各50例。治疗组中,男性25例,女性25例;年龄为(37.6±10.6)岁;对照组中,男性25例,女性25例;年龄为(36.3±10.5)岁。两组患者在性别、年龄、发病时间及结节方面的差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性。
1.2诊断标准
1.2.1西医诊断:依据参照《外科诊疗常规》及《中国甲状腺疾病诊治指南》中的诊断标准:(1)症状:颈部结节,无红肿热痛,结节较大时可有颈部不适感、吞咽不利等症状。(2)体格检查:可扪及单侧或双侧甲状腺一个及以上结节,质地中等,边界清楚,无压痛,可随吞咽上下活动。(3)B超检查可发现单个或多个结节,可为囊性、囊实性、腺瘤样或混合性肿物。④无影像学检查显示肿物压迫气管移位或肿块内有钙化灶的情况。
1.2.2中医辨证分型标准:参照《中西医结合肿瘤学》、《中医临床诊疗术语证候部分》以及《中药新药临床研究指导原则》制定气滞痰凝证:主证:颈部肿块,随吞咽上下活动,不红,不热,不痛。次证:颈部胀满不适,吞咽不利,情绪抑郁,烦躁,乏力,胸胁脘腹胀闷窜痛,咯白痰,苔白腻脉弦滑。
1.3入排标准:
1.3.1纳入标准:所有患者均经病理学检查证实,影像学检查:甲状腺彩超显示≥1个甲状腺结节;触诊颈部甲状腺肿大;患者对该项研究内容和治疗方案知情,已签署同意书。
1.3.2排除标准:证实为恶性结节者,短期内结节体积增长超过30%;甲状腺功能亢进或甲状腺功能减退者;对治疗配方药物过敏者;患有感染性疾病,严重心脑血管疾病,或严重肝肾功能不全患者;孕妇;资料收集不全患者。
1.4治疗方法:对照组患者应用左甲状腺素钠治疗,左甲状腺素钠片(深圳市中联制药有限公司生产),50~100μg/次,1次/d,晨起温水送服。治疗组:服用本发明实施例1制备的口服液治疗,一日两次,每次10mL。一个月为一疗程,观察治疗三个疗程后判断疗效。
1.5观察指标:
1.5.1按照《中药新药临床研究指南》中甲状腺疾病疗效判定标准拟定。症候评分:颈部胀满不适,吞咽不利,情绪抑郁或烦躁,乏力,胸胁脘腹胀闷窜痛,咯白痰共6个代表症状,每一项症状按照无、轻、中、重四个等级分别计0、1、2、3分。
1.5.2高危因素评分:微小钙化:结节内无微小钙化计1分,有微小钙化计2分;边界清晰度:边界清晰计1分,边界不清计3分,介于二者之间计2分;低回声结节:等回声或高回声计1分,低回声计2分;内部血流信号:内部无血流信号或血流信号占结节面积的1/3计1分,内部血流信号分布面积占结节面积1/3以上或几乎布满结节计2分;评分范围介于4-9分。
1.5.3结节体积计算方法:V(cm3)=π/6×长径(cm)×横径(cm)×宽径(cm)。
1.6疗效评定方法各积分的减分率=(治疗前积分-治疗后积分)/治疗前积分×100%。
1.6.1症状疗效评定:临床痊愈:症状消失或基本消失,症状积分减少≥95%;显效:症状明显改善,症状积分减少≥70%;有效:症状均有好转,症状积分减少≥30%;无效:症状均无好转和改善,甚或加重,症状积分减少不足30%。
1.6.2高危因素疗效评定:治疗前后积分比较。
1.6.3结节体积疗效评定:临床痊愈:结节消失;显效:结节体积减少2/3以上;有效:结节体积减少1/3以上;无效:结节体积减少1/3以下或无变化或体积增大。
1.7统计学分析:统计学分析采用spss16.0统计软件进行分析,计数资料两样本率的比较采用χ2检验,计量资料以表示,治疗前后比较用配对t检验,组间比较采用t检验,P<0.05表示差异有统计学意义。
2结果
2.1两组临床疗效比较:治疗结束后治疗组临床痊愈13例,显效19例,有效15例,无效3例,总有效率94.0%;对照组临床痊愈10例,显效22例,有效12例,无效9例,总有效率82.0%,治疗组的治疗效果明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。见表6。
表6治疗后两组患者临床疗效比较
注:与对照组比较,*P<0.05。
2.2两组治疗前后证候总积分比较:治疗后两组证候积分均显著改善,与治疗前比较差异均有显著性意义(P<0.05,P<0.01);治疗后两组间比较,治疗组症候总积分减少的更多,差异也有统计学性意义(P<0.05)。见表7。
表7两组治疗前后症候总积分比较(分)
注:与治疗前比较,*P<0.05,**P<0.01;组间比较,&P<0.05。
2.3两组高危因素、结节体积变化情况:治疗后,治疗组高危因素评分较治疗前明显降低(P<0.01),结节体积缩小(P<0.05);对照组治疗前后高危因素评分、结节体积差异无统计学意义(P>0.05)。见表3。
表3两组高危因素评分和结节体积变化情况比较
注:与治疗前比较,*P<0.05,**P<0.01;组间比较,&P<0.05。
2.4不良反应:治疗组在观察期间病人无任何主观不适,血、尿、大便常规及心、肝、肾功能等检查均未出现异常。
本观察结果显示,治疗组的治疗效果明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);与对照组比较治疗组症候总积分减少的更少,差异也有统计学性意义(P<0.05);治疗组结节评分降低、体积缩小均达到统计学意义(P<0.05,P<0.01),优于左甲状腺素钠片。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (10)
1.一种中药组合物在制备治疗甲状腺结节药物中的应用,其特征在于,所述中药组合物是由如下重量份比例的原料药制成的:柴胡30~35份、小麦5~10份、白芍15~20份、当归25~30份、郁金25~30份、大枣5~10份、茯苓20~25份、百合20~25份、合欢皮10~15份、甘草10~15份。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述治疗包括改善结节性甲状腺肿。
3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述治疗包括降低甲状腺组织中PCNA的水平和/或降低甲状腺组织中FGF-2的水平。
4.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述治疗包括降低甲状腺组织中CXCR-4的水平和/或降低血清VEGF的水平。
5.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述治疗包括促进结节性甲状腺肿模型甲状腺细胞的凋亡。
6.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述治疗包括甲状腺结节的体积缩小。
7.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述治疗包括降低症候评分和/或高危因素评分。
8.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述中药组合物是由如下重量份比例的原料药制成:柴胡30份、小麦5份、白芍15份、当归25份、郁金30份、大枣10份、茯苓25份、百合25份、合欢皮10份、甘草15份;
或
柴胡35份、小麦10份、白芍20份、当归30份、郁金25份、大枣5份、茯苓20份、百合20份、合欢皮15份、甘草10份;
或
柴胡33份、小麦8份、白芍16份、当归27份、郁金27份、大枣8份、茯苓23份、百合23份、合欢皮12份、甘草12份。
9.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述中药组合物为口服给药;所述中药组合物采用药剂学中常规的制剂方法制备成颗粒剂、胶囊剂、丸剂、片剂、口服液、散剂。
10.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述中药组合物制备方法具体为:
A)将柴胡、白芍、当归、郁金、合欢皮、加8~12倍量的水,浸泡提取,提取液过滤、浓缩放置室温,用85%~95%乙醇醇沉,上清液浓缩,得水提醇沉液;
将大枣、茯苓、百合、甘草、小麦加60%~80%乙醇,提取,提取液滤过,浓缩,放置室温,加入水水沉过夜,上清液浓浓缩,得醇提水沉液;
B)取上述水提醇沉液和醇提水沉液混合均匀,加入矫味剂混匀,加水至,搅匀,煮沸,冷藏,过滤,调节pH至8.0~9.0,封装即得。
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宋文佳等: "蒋士卿教授治疗甲状腺结节的经验", 《中医临床研究》 * |
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PB01 | Publication | ||
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SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20200428 |
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