CN111012899A - Il-38的新用途 - Google Patents

Il-38的新用途 Download PDF

Info

Publication number
CN111012899A
CN111012899A CN202010018127.1A CN202010018127A CN111012899A CN 111012899 A CN111012899 A CN 111012899A CN 202010018127 A CN202010018127 A CN 202010018127A CN 111012899 A CN111012899 A CN 111012899A
Authority
CN
China
Prior art keywords
sepsis
mouse
mice
medicament
treating
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202010018127.1A
Other languages
English (en)
Inventor
徐昉
陈彦青
柴雨森
王川江
林时辉
谢珂
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Chongqing Medical University
Original Assignee
Chongqing Medical University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Chongqing Medical University filed Critical Chongqing Medical University
Priority to CN202010018127.1A priority Critical patent/CN111012899A/zh
Publication of CN111012899A publication Critical patent/CN111012899A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A61K38/20—Interleukins [IL]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本发明属于医药技术领域，公开了IL‑38的新用途，尤其是IL‑38在制备治疗脓毒症的药物中的用途。试验结果显示，IL‑38可以显著减轻小鼠炎症反应，提高小鼠存活率，减轻小鼠肺部损伤。表明IL‑38可以用于脓毒症的治疗，为脓毒症的治疗提供了新的靶点。

Description

IL-38的新用途
技术领域
本发明属于医药技术领域，具体涉及IL-38的新用途，尤其是IL-38在制备治疗脓毒症的药物中的用途。
背景技术
脓毒症(sepsis)是指由感染引起的全身炎症反应综合征(systemicinflammatory responsesyndrome,SIRS)，临床上证实有细菌存在或有高度可疑感染灶。虽然脓毒症是由感染引起，但是一旦发生后，其发生发展遵循其自身的病理过程和规律，故从本质上讲脓毒症是机体对感染性因素的反应。脓毒症可以由任何部位的感染引起，临床上常见于肺炎、腹膜炎、胆管炎、泌尿系统感染、蜂窝织炎、脑膜炎、脓肿等。脓毒症是严重创伤、烧伤、休克、大手术后常见的并发症,进一步发展可导致脓毒性休克、多器官功能障碍综合征(MODS)，其病死率高达30％～50％，已成为创、烧伤患者的重要死亡原因之一。
脓毒症发病机制复杂，机体炎症反应是其发病的核心环节，目前脓毒症的发病机制仍然需要进一步研究。虽然针对脓毒症的治疗手段在近些年不断取得突破，但其死亡率仍然高达30％左右。
白细胞介素(IL-)即是由多种细胞产生并作用于多种细胞的一类细胞因子，至少发现了38个白细胞介素，分别命名为IL-1～IL38，功能复杂，成网络，复杂重叠；在免疫细胞的成熟、活化、增殖和免疫调节等一系列过程中均发挥重要作用，此外它们还参与机体的多种生理及病理反应。根据细胞因子的结构同源性可将其分为几个蛋白质家族，如IL-1家族、IL-6家族、IL-10家族、肿瘤坏死因子家族和造血因子家族等。
IL-38是IL-1家族新成员，是最近发现的IL-1家族细胞因子的第10个成员。IL-38的特异性受体为IL-36R，它是IL-36的部分受体拮抗剂。目前还没有关于IL-38治疗脓毒症的相关报道。
发明内容
IL-1β、IL-17A、IL-6在脓毒症中发挥促炎作用的炎症因子，而IL-2、IL-10在脓毒症中发挥抑制炎症反应作用的炎症因子。本发明采用盲肠结扎穿刺手术(CLP)诱导制备小鼠脓毒症模型，实验组使用IL-38重组蛋白进行腹腔注射，检测IL-38对脓毒症模型小鼠血清中各炎症因子的变化。结果显示，使用IL-38治疗后，IL-1β、IL-17A、IL-6显著降低，而IL-2、IL-10显著增高。因此本发明提供了IL-38在制备IL-1β、IL-17A、IL-6表达抑制剂中的用途、在制备IL-2、IL-10表达促进剂中的用途。
本发明还提供了IL-38在制备减轻炎症反应的药物中的用途。
进一步的，取肺组织检测IL-38对小鼠肺组织损伤严重程度的影响。结果显示IL-38可以显著减轻小鼠肺部损伤程度，同时明显减少中性粒细胞的聚集。因此IL-38在制备减轻肺损伤的药物中的用途。
综上所述，本发明通过血清检测及HE染色首次证明IL-38可以有效减轻小鼠炎症反应，提高小鼠存活率，减轻小鼠肺部损伤，发挥治疗脓毒症的作用。因此本发明提供了IL-38在制备治疗脓毒症的药物中的用途。
其中，所述药物包括IL-38。
进一步的，所述药物还包括药学上可接受的辅料。
所述药物可以为当前药品领域任何剂型，优选的，所述药物为丸剂、胶囊剂、片剂、粉剂、颗粒剂或口服液。
各药物剂型可根据该剂型实际需要选取合适的可接受辅料来制备，这属于本领域常规的剂型制备技术。
由上述技术方案可知，本发明提供了IL-38在制备治疗脓毒症的药物中的用途。试验结果显示，IL-38可以显著减轻小鼠炎症反应，提高小鼠存活率，减轻小鼠肺部损伤。表明IL-38可以用于脓毒症的治疗，为脓毒症的治疗提供了新的靶点。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。
图1示IL-38对脓毒症小鼠血清检测结果的影响；其中A为小鼠血清IL-1β检测结果，B为小鼠血清IL-10检测结果，C为小鼠血清IL-2检测结果，D为小鼠血清IL-6检测结果，E为小鼠血清IL-17A检测结果；
图2示IL-38对脓毒症小鼠肺组织损伤严重程度评分统计结果图；
图3示IL-38对脓毒症小鼠MPO统计结果图；
图4示IL-38对脓毒症小鼠IL-17A统计结果图。
具体实施方式
本发明公开了IL-38的新用途。本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及产品已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
为了进一步理解本发明，下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
如无特殊说明，本发明实施例中所涉及的试剂均为市售产品，均可以通过商业渠道购买获得。
实施例1、
一、试验方法：
1、实验动物及材料:
实验小鼠购自重庆医科大学实验动物中心，均为SPF级健康雄性C57bl/6小鼠，共25只，年龄在8～12周，体重20～25g。
白细胞介素-38，20μg溶解于50μlPBS溶液中制得IL-38溶液。
给药剂量：每克小鼠体重给予1μg白细胞介素-38溶液。
2、模型制备：
盲肠结扎穿刺手术(CLP)诱导制备小鼠脓毒症模型：首先使用3.5％多聚甲醛溶液(PBS溶解)腹腔注射麻醉小鼠。实验组小鼠术前1h按上述标准腹腔注射IL-38重组蛋白溶液。待小鼠完全麻醉后备皮小鼠上腹部皮肤并使用碘伏消毒，延腹中线剪开小鼠腹部打开腹膜，与小鼠腹腔左侧找到一深棕色盲端，即为盲肠，使用手术缝线距离盲肠末端1厘米结扎盲肠，并使用12号针对穿盲肠的结扎部分，挤出少量粪便，将盲肠纳回腹腔，缝合腹膜及腹部皮肤。造模24小时后收集小鼠血清-80℃保存，4％甲醛溶液固定小鼠肺组织待用。
3、小鼠血清检测：
使用R&D公司ELISA检测试剂盒检测小鼠血清IL-38浓度，使用ebioscience公司小鼠细胞因子/趋化因子检测试剂盒检测小鼠血清IL-1β、IL-10、IL-17A、IL-6、IL-2的表达。
4、小鼠肺组织损伤严重程度的检测
将肺组织固定，包埋，切片，并用苏木精和曙红(hematoxylin and eosin，H&E)染色进行组织病理学分析。小鼠肺脏用10％多聚甲醛固定24h，常规方法石蜡包埋，作4μm切片，60℃烘干脱腊，二甲苯脱腊，梯度酒精水花，3％过氧化氢阻断内源性过氧化物酶活性10分钟，洗去过氧化氢，施加0.3％Triton X-100(50μL)，浸润15分钟破膜，随后将切片在山羊血清中温育，加上山羊抗MPO，IL-17A和凋亡检测抗体(15μg/ml)，置于4℃环境下的湿盒孵育过夜。洗涤切片并加入链霉菌抗生物蛋白-过氧化物酶复合物，加入二氨基联苯胺(DAB)促使IL-33显色，苏木精染核，随后用梯度酒精二甲苯脱水，最后用中性树胶密封。
按照双盲法对肺损伤进行评分，由不同的三人根据以下四个肺损伤评分指标评判：1肺泡充血；2出血；3间隙或血管壁中性粒细胞浸润或聚集；4肺泡间隔增厚或透明膜形成。评分标准为：0分：无或非常轻微的损伤，1分：轻度损伤，2分：中度损伤，3分：严重损伤，4分：非常严重的损伤。统计肺损伤评分各指标最后获得的总分将三组评分平均后即为肺损伤评分。
小鼠肺脏用10％多聚甲醛固定24h，常规方法石蜡包埋，作4μm切片，60℃烘干后二甲苯脱蜡，梯度酒精洗脱二甲苯，3％过氧化氢阻断内源性过氧化物酶活性10分钟，洗去过氧化氢，施加0.3％Triton X-100(50μL)，浸润15分钟破膜，随后将切片在山羊血清中温育，加上山羊抗MPO抗体(15μg/ml)或山羊抗IL-17A抗体，置于4℃环境下的湿盒孵育过夜。洗涤切片并加入链霉菌抗生物蛋白-过氧化物酶复合物，加入二氨基联苯胺(DAB)促使MPO或IL-17A显色，苏木精染核，随后用梯度酒精二甲苯脱水，最后用中性树胶密封。
使用显微镜观察并拍照，每张片子采集5个高倍视野图像，使用“Image J”软件进行灰度分析后进行统计学分析，并使用“graphpad”软件制柱状图。
5、统计学分析
应用SPSS 19.0软件进行统计学分析，计量资料以均数加减标准差
Figure BDA0002359698330000051
表示。同一时间，不同组间比较采用t检验；不同时间、不同组间采用双因素方差分析(Two-way ANOVA)，P<0.05表明差异有统计学意义。
二、实验结果：
1、血清检测：
脓毒症小鼠血清检测结果显示，使用IL-38治疗后，IL-1β、IL-17A、IL-6显著降低，而IL-2、IL-10显著增高(图1)。
2、HE染色结果：
小鼠肺组织损伤严重程度的检测结果显示IL-38可以显著减轻小鼠肺部损伤程度(图2)。
MPO为中性粒细胞标记物，中性粒细胞是破坏肺组织的重要细胞，使用IL-38治疗后中性粒细胞肺内聚集明显减少(图3)。
IL-17A是重要的促炎因子，可以诱导中心粒细胞聚集，加重肺损伤。使用IL-38治疗后，脓毒症小鼠肺部IL-17A表达降低，中性粒细胞明显减少(图4)。

Claims (8)

1.IL-38在制备IL-1β、IL-17A、IL-6表达抑制剂中的用途。
2.IL-38在制备IL-2、IL-10表达促进剂中的用途。
3.IL-38在制备减轻炎症反应的药物中的用途。
4.IL-38在制备减轻肺损伤的药物中的用途。
5.IL-38在制备治疗脓毒症的药物中的用途。
6.根据权利要求1-5任一项所述的用途，所述药物包含IL-38。
7.根据6所述的用途，所述药物还包含药学上可接受的辅料。
8.根据权利要求7任一项所述的用途，所述药物为丸剂、胶囊剂、片剂、粉剂、颗粒剂或口服液。
CN202010018127.1A 2020-01-08 2020-01-08 Il-38的新用途 Pending CN111012899A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010018127.1A CN111012899A (zh) 2020-01-08 2020-01-08 Il-38的新用途

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010018127.1A CN111012899A (zh) 2020-01-08 2020-01-08 Il-38的新用途

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN111012899A true CN111012899A (zh) 2020-04-17

Family

ID=70202431

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010018127.1A Pending CN111012899A (zh) 2020-01-08 2020-01-08 Il-38的新用途

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111012899A (zh)

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1529611A (zh) * 2001-05-16 2004-09-15 Ү���о�����չ���޹�˾ Il-18抑制剂在治疗或预防脓毒症中的应用
WO2016012312A1 (en) * 2014-07-25 2016-01-28 Fraunhofer-Gesellschft Zur Förderung Der Angewandten Forschung E.V. N-terminally truncated interleukin-38
CN106749612A (zh) * 2016-10-14 2017-05-31 四川大学华西医院 中介素相关多肽及其在脓毒症预防和治疗中的用途
CN108333373A (zh) * 2018-03-28 2018-07-27 徐昉 血清炎症因子的应用

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1529611A (zh) * 2001-05-16 2004-09-15 Ү���о�����չ���޹�˾ Il-18抑制剂在治疗或预防脓毒症中的应用
WO2016012312A1 (en) * 2014-07-25 2016-01-28 Fraunhofer-Gesellschft Zur Förderung Der Angewandten Forschung E.V. N-terminally truncated interleukin-38
CN106749612A (zh) * 2016-10-14 2017-05-31 四川大学华西医院 中介素相关多肽及其在脓毒症预防和治疗中的用途
CN108333373A (zh) * 2018-03-28 2018-07-27 徐昉 血清炎症因子的应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
MICHAEL A. FLIERL等: "Adverse functions of IL-17A in experimental sepsis", 《THE FASEB JOURNAL》 *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Fukuda et al. Aldosterone-induced kidney injury is mediated by NFκB activation
JPH10114681A (ja) 抗線維症薬
Fukui et al. Clinical evaluation of a pasteurized factor XIII concentrate administration in Henoch-Schönlein purpura
Prather et al. Niclosamide as a potential nonsteroidal therapy for endometriosis that preserves reproductive function in an experimental mouse model
JPH05508158A (ja) 免疫抑制剤としての３―フェニル―５，６―ジヒドロベンゾ〔ｃ〕アクリジン―７―カルボン酸および関連化合物
KR20150028754A (ko) 화학요법을 받은 환자용 어주번트를 제조하기 위한 조성물
CN108721601A (zh) 一种预防和/或治疗肾损伤和肾衰竭的组合物
CN111084765A (zh) 表大麻二醇水合物在制备预防和/或治疗脑损伤药物中的应用及其药物组合物
CN114732818A (zh) 一种抗特发性肺纤维化药物尼达尼布在结核病治疗中的应用
Ashour et al. Pentosan polysulfate sodium augments the therapeutic effect of 5-aminosalicylic acid in DSS colitis model; the role of IL-35 expression
CN111012899A (zh) Il-38的新用途
Zhang et al. Therapeutic effects of anticoagulant agents on preeclampsia in a murine model induced by phosphatidylserine/phosphatidylcholine microvesicles
CN116687915A (zh) 佛手柑内酯在制备治疗肺损伤和慢性肾病保护药物中的应用
CN112891362B (zh) 一种用于治疗脓毒症的药物组合物及其应用
CN112656819B (zh) 植物乳杆菌在促进肝脏再生方面的应用
CN111000983A (zh) 一种新的重组人白细胞介素-1受体拮抗剂的药用用途
CN114615975B (zh) 欧当归内酯a在制备治疗或预防肾病药物中的用途
Wong et al. Comparative effects of tetrandrine and berbamine on guineapig airway microvascular leakage induced by platelet-activating factor and other allergic mediators
CN100425234C (zh) 用于治疗胃病的含有抗溃疡药和粘膜保护剂的药物组合物
CN108969517B (zh) 一种银杏内酯组合物在制备用于肾组织纤维化的药物中的应用
Guo et al. Parecoxib sodium alleviates ischemia reperfusion‐induced pulmonary injury via inhibiting ERK/NF‐κB and further activating the HIF‐1α pathway
CN113274389B (zh) 氟非尼酮在制备治疗急性肺损伤药物中的应用
CN114209812B (zh) α-苦瓜素在制备抗炎药物中的用途
WO2017113650A1 (zh) 葫芦烷型四环三萜类化合物抗肺纤维化应用
CN114569722B (zh) 抑制血小板焦亡的试剂在制备预防和/或治疗脓毒症的药物中的用途

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20200417