CN108721601A - 一种预防和/或治疗肾损伤和肾衰竭的组合物 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种预防和/或治疗肾损伤和肾衰竭的组合物，包括MG53蛋白、MG53蛋白突变体的一种或几种，其中MG53蛋白突变体为MG53蛋白的Coiled‑coil结构域中的丝氨酸位点突变为丙氨酸，具体为MG53 S150A、MG53 S189A、MG53 S211A的一种或多种，并进一步公开了组合物用于预防和/或治疗肾损伤和肾衰竭；本发明的含MG53蛋白和/或其突变体的组合物利用重组人MG53蛋白通过实验研究证明了MG53对于预防和/或治疗肾损伤和肾衰竭药物中的慢性溃疡具有明显的预防和或治疗作用，这对充分开发在肾损伤和肾衰竭方面的临床应用具有更加重要的意义。

Description

一种预防和/或治疗肾损伤和肾衰竭的组合物

技术领域

本发明涉及医药领域，涉及一种预防和/或治疗肾损伤和肾衰竭的组合物。

背景技术

急性肾损伤(AKI)或急性肾功能衰竭(ARF)由感染、烧伤、创伤、肾动脉狭窄及休克等各种原因引起，其中脓毒血症是临床发生急性肾损伤的最重要原因之一，是一种临床常见的危重症疾病，其起病急，病程进展快，死亡率及病死率高，且发病率呈逐年上升的趋势。据报道，ARF的恶化导致约5％需入院治疗，4-15％需进行心肺旁路手术，多达30％需进行重症监护治疗。一般来说，急性肾损伤的病死率为45％，而合并脓毒症后病死率可骤升至70％，成为危重症急救医学中的重大难题之一。

慢性肾衰竭(CRF)是一中进行性的肾单位损伤，以肾排泄功能、内环境稳定和内分泌功能等发生障碍为特征，是多种原发性或继发性肾脏疾病晚期的共同归宿，同时会伴随贫血和出血、高血压、心律失常、心力衰竭、心包炎、晚期肾衰竭、尿毒症性肺炎、记忆力减退、谵语、昏迷及躁狂、胃炎、结肠炎、恶心呕吐、腹泻及口中有尿味等多种症状，危害严重。

AKI、ARF或者CRF的病因复杂，但总体概括起来分为肾缺血和肾中毒。因此有必要用不同的模型上效果进行评价。庆大霉素、氯化汞、甘油、内毒素等肾毒性物质肌内注射或者急性尿路梗阻可造成动物肾血流量减少，肾小管内皮细胞肿胀，增大了肾血管阻力，血管节段性坏死，外模纤维化，血管自身调节能力丧失，进一步造成肾小球滤过率下降及肾小管坏死；而夹闭肾动脉或者切除肾致肾小球和肾小管血流减少，肾小球滤过率减少，肾组织缺血。缺氧加重对肾组织损害。肾缺血、肾中毒、输尿管结扎造模均是业内公认的肾损伤模型，边造模边给药或者造模前预防性给药是的常规做法，造模结束后给予上市的药物不会看到明显回调作用，业内的专家也认可这种造模方法，从另一个角度说明上市药物疗效不佳。

MG53蛋白是骨骼肌特异性蛋白mitsugumin53，简称MG53或TRIM72。mitsugumin53(MG53)，是一种肌肉特异性tripartite motif family(TRIM)家族蛋白，也是一种细胞膜修复机制的重要组成部分，初期的研究表明，在骨骼肌和心肌中MG53能够作为一种结构蛋白促进细胞膜损伤的修复，同时也能够调节细胞内小泡的转运和骨骼肌细胞再生；另外在心肌中，MG53还通过介导Caveolin-3与PI3K的结合，激活再灌注损伤救援通路，进而在心脏缺血预处理中发挥重要保护功能。虽然天然MG53蛋白主要局限于骨骼肌和心肌组织，但在外源性MG53蛋白同样具有生物活性，行使其修复功能，但在治疗及预防肾功能疾病方面尚未见其应用。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种预防和/或治疗肾损伤和肾衰竭的组合物。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种预防和/或治疗肾损伤和肾衰竭的组合物，包括MG53蛋白突变体。

MG53蛋白突变体为以下的任意一种：

1)包括MG53突变体多肽；

2)包括编码MG53突变体多肽的核酸；

3)包括MG53突变体多肽、编码MG53突变体多肽的核酸；

4)包括MG53突变体多肽、小窝蛋白-3；

5)包括编码MG53突变体多肽的核酸、小窝蛋白-3；

6)包括MG53突变体多肽、编码MG53突变体多肽的核酸、小窝蛋白-3。

上述的MG53蛋白突变体为MG53蛋白的Coiled-coil结构域中的丝氨酸位点突变为除苏氨酸和酪氨酸以外的非极性氨基酸，优选为丙氨酸，即MG53蛋白突变体为MG53 S150A、MG53 S189A、MG53 S211A的一种或多种。

本发明含MG53蛋白突变体的组合物利用重组人MG53蛋白的突变体通过实验研究证明了含MG53突变体的组合物对于预防和/或治疗肾损伤和肾衰竭药物中的慢性溃疡具有明显的预防和或治疗作用，这对充分开发在肾损伤和肾衰竭方面的临床应用具有更加重要的意义。

进一步，辅料包括MG53蛋白或MG53蛋白突变体相应的激动剂和/或拮抗剂，激动剂包括磷脂酰丝氨酸、锌或锌盐、钙离子、Zn-1-羟基吡啶-2-硫酮、三七、氧化剂、乙基汞硫代水杨酸钠中的一种或者多种组合。

采用上述进一步的有益效果在于：上述的激动剂可增强本发明组合物的活性、促进反应，其与受体既有高亲和力，也有高内在活性，能与受体结合产生最大效应。

本发明还提供了一种预防和/或治疗肾损伤和肾衰竭的组合物，包括MG53蛋白。

MG53蛋白为以下的任意一种：

1)包括MG53多肽、小窝蛋白-3；

2)包括编码MG53多肽的核酸、小窝蛋白-3；

3)包括MG53多肽、编码MG53多肽的核酸、小窝蛋白-3；

MG53蛋白的制备方法如下：首先从人的骨骼肌或者心肌组织提取总RNA(totalRNA),然后用MG53的特异引物进行一部分PCR扩增，然后将PCR产物直接纯化测序，测序结果证实序列的正确后，将片段与真核表达载体pcDNA4/V5-His A中，用转染试剂将该载体转入293T细胞系，然后利用Zeocin筛选标记进行筛选稳定表达细胞系(293T-MG53)。扩大培养该细胞系，然后纯化获取MG53蛋白。

本发明含MG53蛋白的组合物利用重组人MG53蛋白通过实验研究证明了含MG53蛋白的组合物对于预防和/或治疗肾损伤和肾衰竭药物中的慢性溃疡具有明显的预防和或治疗作用，这对充分开发在肾损伤和肾衰竭方面的临床应用具有更加重要的意义。

进一步，辅料包括MG53蛋白或MG53蛋白突变体相应的激动剂和/或拮抗剂，激动剂包括磷脂酰丝氨酸、锌或锌盐、钙离子、Zn-1-羟基吡啶-2-硫酮、三七、氧化剂、乙基汞硫代水杨酸钠中的一种或者多种组合。

采用上述进一步的有益效果在于：上述的激动剂可增强本发明组合物的活性、促进反应，其与受体既有高亲和力，也有高内在活性，能与受体结合产生最大效应。

进一步，上述组合物为口服制剂或注射给药制剂；口服制剂为片剂、胶囊、口服液或颗粒剂；注射给药制剂为水针剂、无菌分装制剂或冻干粉针剂。

采用上述进一步的有益效果在于：能够根据不同的情况以合适的剂型给药，以便发挥组合物的最佳疗效。

本发明含MG53蛋白和/或其突变体的组合物用于预防和/或治疗由放射性造影剂(也称为造影介质)、肾脏毒素(如环孢霉素)、抗生素(包括氨基糖苷类)、抗癌药(如顺铂、吉西他滨、阿霉素等)、感染、烧伤、创伤、肾动脉狭窄及休克原因引起的急性肾损伤，慢性肾功能衰竭，肾纤维化以及糖尿病肾病。

附图说明

图1为本发明Western Blot检测小鼠肾组织中p-IKKβ蛋白的表达的检测结果图；

图2为本发明Western Blot检测小鼠肾组织中p-IκBα蛋白的表达的检测结果图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

冻干制剂的制备

活性成分：利用常规的基因重组技术生产重组MG53蛋白，其方法如下：

首先从人的骨骼肌或者心肌组织提取总RNA(total RNA),然后用MG53的特异引物进行一部分PCR扩增，然后将PCR产物直接纯化测序，测序结果证实序列的正确后，将片段与真核表达载体pcDNA4/V5-His A中，用转染试剂将该载体转入293T细胞系，然后利用Zeocin筛选标记进行筛选稳定表达细胞系(293T-MG53)。扩大培养该细胞系，然后经过亲和层析、离子交换层析等分离纯化步骤，获得纯度达到95％以上的MG53蛋白，按照Edman法测定蛋白N-末端序列，其序列与SEQ NO.1一致，同时通过质谱法测定分子量，与预期分子量53KDa相吻合，证明得到的蛋白为重组MG53蛋白，并经检测物热源物质和生物活性测定，符合国家注射用蛋白的质量标准，将MG53蛋白的Coiled-coil结构域中的丝氨酸位点突变为丙氨酸，得到MG53蛋白的突变体。

辅料：甘露醇、组氨酸、蔗糖。

将辅料溶解，与相应的MG53蛋白突变体混合，调整PH值到6.5、组成为每毫升液体含0.5毫克重组MG53蛋白突变体、50毫克甘露醇、25毫克蔗糖、2毫克组氨酸、经过滤除菌后，冷冻干燥，即为冻干制剂，规格按照需要确定。

实施例2

MG3蛋白突变体对小鼠急性肾损伤模型的影响

目的：利用小鼠急性肾损伤模型研究MG53蛋白突变体的作用

材料和方法：BALB/c小鼠，雄性，体重18-22g，按体重随机分为：正常对照组、模型对照组、低剂量组0.5mg/kg)、中剂量组(2mg/kg)、高剂量组(5mg/kg)，每组15只。

实验组灌胃给药相应量的组合物，正常对照组、模型对照组均分别静脉注射给予相应体积的生理盐水。每天一次，连续给药7天。末次给药后，除正常对照组外，其余各组按50mg/kg腹腔注射内毒素建立内毒素急性肾损伤模型，正常对照组按相同剂量注射生理盐水。

1)一般状况

模型组小鼠自腹腔注射内毒素LPS(E.coil O55:B5)后分观察小鼠饮食、饮水、活动、粪便等一般状况并做记录，随后摘眼球取血，脱颈椎处死小鼠解剖收集双侧肾脏标本。

2)形态学观察

形态观察：肉眼观察肾脏形态、色泽、包膜等的改变。取右肾经10％甲醛中固定，石蜡包埋，切片，HE染色后观察，按表1进行组织病理学损伤评分。

表1 Paller氏评分标准

肾小管明显扩张，细胞扁平	1分
		肾小管内有脱落坏死细胞，但未成管型或细胞碎片	1分
管型	2分
		空泡细胞	1分
细胞核固缩	1分
		上皮细胞颗粒变形	1分

3)肾功能及炎症因子检测

收集眼球血液放入小试管中，静置，血液凝固后，3000转离心10min，吸取血清，按血尿素氮(blood tireanitrogen，BUN)和血肌肝(serum ereatinine，SCr)试剂盒说明书操作，采用全自动生化分析仪检测血浆BUN和的SCr含量。ELISA法测血清中TNF-α，IL-1β及IL-6含量。

4)肾脏组织中NF-κB信号通路蛋白的表达

采用免疫印迹法(western blot)法检测肾脏组织NF-κB信号通路相关蛋白NF-κBp65，磷酸化的IκBα和IKKβ。按100mg肾脏组织加1ml细胞裂解液比例置冰浴中充分匀浆，4℃，12000×g离心，取上清液，BCA法测定蛋白浓度，各组取等量待测样品与蛋白质上样缓冲液按1：4比例混合，100℃加热5min使蛋白质变性，取50μg蛋白上样，10％SDS-PAGE凝胶电泳，湿转法转印至PVDF膜上，5％脱脂奶粉封闭1h，用1×TBST洗膜3次，每次10min，分别与一抗NF-κBp65，磷酸化的IκBα和IKKβ抗体在4℃条件下孵育过夜，1×TBST洗涤3次，每次10min，PVDF膜与相应二抗辣根过氧化物酶标抗体在室温条件下孵育0.5h，1×TBST洗涤3次，每次10min，ECL Plus化学发光显色，胶片检测待测蛋白质条带，运用Quantity One软件分析光密度值，结果用目标条带与内参actin的蛋白条带光密度值比值表示。

结果和讨论：

1)一般情况

实验中，在各时间点观察正常对照组小鼠，均活动自如，进食正常，无病态。模型对照组经腹腔注射LPS(E.coli 055:B5)50mg/kg后，小鼠出现烦燥不安，而后活动减少。2h时大多蜷缩萎糜，拒食，口唇发紫；6时一些小鼠除有上述症状外还出现腹泻、竖毛症状直到12h时症状仍没有缓解。在各观察时间内均无小鼠死亡。治疗组较模型对照组各时间点症状均有明显减轻。

2)肾脏组织病理变化

正常对照组肾脏镜下结构均正常：肾小球形态结构正常清晰，无细胞水肿、胞浆疏松现象；肾小管上皮细胞排列整齐，胞浆红润，未见炎性细胞。模型对照组肾小管上皮细胞水肿，腔内多量管型，局部上皮细胞片灶状坏死塌陷，肾间质水肿明显，肾小囊腔扩张，肾小球缩小。肾小管上皮细胞肿胀明显，胞浆疏松，淡染，有散在坏死。低剂量组肾小管上皮细胞未见坏死改变，但上皮细胞水肿显著，胞浆疏松化，可见腔内管型，肾间质水肿减轻，肾小囊腔略扩张；中剂量组肾小管上皮细胞水肿减轻，腔内管型不明显，肾间质水肿不明显。肾小囊腔不扩张；高剂量组肾小管上皮细胞水肿明显减轻，未见腔内管型，无肾间质水肿，肾小囊大致正常，但较模型组损伤明显减轻，根据Paller氏评分标准判定结果如表2所示。

表2本发明对LPS诱导急性肾损伤小鼠的组织病理评分的影响(±SD)

组别	剂量(mg/kg)	组织病理评分
			正常对照组	—	0
模型对照组	—	7.2±1.0
			MG53低剂量组	0.5	3.5±0.7*
MG53中剂量组	2	2.4±0.6**
			MG53高剂量组	5	1.1±0.9**

与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01；模型组小鼠组织病理评分明显升高。给药后，均能明显降低评分指数。其中高剂量组组织病理评分与模型组比较有显著差异(P<0.01)。

3)血清中BUN、SCr含量

尿素氮(BUN)和血肌酐(SCr)作肾损伤严重程度的重要指标，常被用于肾功能的评估。其含量的变化与肾损伤密切相关，结果如表3所示。

表3本发明对LPS诱导的小鼠血清中BUN、SCr的影响(±SD)

与正常组比较，##P<0.01；与模型组比较，*P<0.05

实验结果显示模型对照组与正常对照组比较，小鼠血清中BUN和SCr含量显著升高(P<0.01)，给药预治疗后，与模型组比较，各剂量组均能显著降低BUN和SCr含量(P<0.05)。

4)血清中TNF-α，IL-1β和IL-6含量变化如表4所示

表4小鼠血清中TNF-α，IL-1β和IL-6含量的比较(±SD)

与正常组比较，#P<0.05，##P<0.01；与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01；

模型对照组与正常对照组比较，小鼠血清中TNF-α，IL-1β和IL-6含量显著升高(P<0.05)，给药预治疗后，与模型组比较，各剂量组均能降低血清中TNF-α，IL-1β和IL-6含量(P<0.05)。

5)Western Blot检测肾组织NF-κBp65,磷酸化的IKKβ和IκBα蛋白表达

Western Blot检测小鼠肾组织中P65、p-IKKβ和p-IκBα蛋白的表达，统计结果分别见图1、图2，实验结果显示，模型组小鼠肾脏组织中后NF-κBp65及磷酸化的IKKβ和IκBα蛋白表达较正常组显著升高(P<0.01)，各剂量组较模型组有降低趋势即本发明制得的组合物具有预防脓毒性急性肾损伤的功效。

实施例3

MG3蛋白突变体对肾切除导致大鼠慢性肾衰的影响

目的：利用大鼠慢性肾衰模型研究MG53蛋白突变体对其的作用

材料和方法：大鼠120只，体重150-200g，动物喂养1周，将动物分为6组，每组20只，即正常组，模型组，谷胱甘肽静脉注射(150mg/kg)组，MG53突变体低剂量组，MG53突变体中剂量组，MG53突变体高剂量组，除正常组外，大鼠用5/6肾切除方法制成慢性肾衰模型，

第一次手术切除左肾2/3，一周后行第二次手术切除右肾，第二次手术后5周开始给药，MG53突变体给药方式为尾静脉注射给药，给药后4周、8周分别大鼠眼框取血，测定血清肌酐和尿素氮，给药后4周处死10只，试验结束处死10只，作病理切片，观察肾功能的病理改变。

病理改变：给药第4周模型组光镜下见肾小球有不同程度代偿性肥大，系膜细胞增生，系膜基质增多，肾小球毛细血管襻呈分叶状，部分肾小球囊腔消失，毛细血管管壁增厚，肾小管肿胀、扩张，管腔内有蛋白沉积，部分小管萎缩，间质有炎性细胞浸润，各给药组亦见上述改变，但病变程度较轻，随剂量增大，病变程度减轻；给药第8周模型组光镜下见系膜细胞增生，基质明显增多，毛细血管管壁塌陷，毛细血管节段性硬化，硬化区多在血管壁附近硬化的肾小球内可见均质圆形PAS染色深红色的沉积物，个别肾小球有局灶球囊粘连，局灶新月体形成，间质可见炎细胞浸润，纤维组织增生，各组肾小球硬化程度不等，随剂量增大，病变程度减轻。无显著性差异，结果如表5所示。

表5 MG53突变体对肾切除慢性肾衰大鼠给药4周血清肌酐和尿素氮的影响

*，p＜0.01，与模型组比较

结果与讨论：从表5结果可以看出，谷胱甘肽静脉注射(150mg/kg)组和MG53突变体低、中、高剂量组明显降低大鼠慢性肾衰血清肌酐和尿素氮(与模型组比较，p＜0.01)。

实施例4

MG3蛋白突变体对单侧输尿管结扎大鼠肾间质纤维化的影响

目的：利用单侧输尿管结扎大鼠肾间质纤维化研究MG53蛋白突变体对其的作用。

材料和方法：鼠120只，体重200-230g，动物喂养1周，各大鼠以10％水合氯醛3.0mL/kg腹腔注射麻醉后，将大鼠右侧卧位固定于手术台上，剪毛后用碘酒、75％酒精消毒手术区，行左侧腹切口，逐层切开皮肤、肌肉及腹壁各层，暴露并分离左侧输尿管，其中20只大鼠仅切开腹腔并游离左侧输尿管，但不结扎和剪断，作为假手术组，其余100大鼠用4-0丝线结扎成两道，上一道结扎点位于左肾下极水平，然后在两道结扎点间剪断输尿管，逐层缝合，100只造模大鼠随机分为5组，即模型组、依那普利(4mg/kg)组，MG53突变体低、中、高剂量组。各组给药21天后，10％水合氯醛麻醉后处死各组动物，生理盐水反复灌洗后留取左侧肾脏，肾组织经4％的多聚甲醛缓冲液固定。切取适量肾组织，按羟脯氨酸试剂盒测定说明测定羟脯氨酸，结果如表6所示。

表6 MG53突变体对单侧输尿管结扎大鼠肾间质纤维化的影响

组别	剂量(mg/kg)	羟脯氨酸(ug/g)
			正常组	--	310±51
模型组	--	780±12
			依那普利组	4	492±120*
MG53突变体低剂量组	0.5	550±43**
			MG53突变体中剂量组	2	410±30**
MG53突变体高剂量组	5	350±21**

*，p＜0.05，与模型组比较；**，p＜0.01，与模型组比较

结果与讨论：从表6可以看出，MG53突变体低、中、高组降低大鼠羟脯氨酸水平(与模型组比较，p＜0.01)。

序列表

<110> 慎东

<120> 一种预防和/或治疗肾损伤和肾衰竭的组合物

<160> 1

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 474

<212> PRT

<213> 人MG53蛋白()

<400> 1

Met Ser Ala Ala Pro Gly Leu Leu His Gln Glu Leu Ser Cys Pro Leu

1 5 10 15

Cys Leu Gln Leu Phe Asp Ala Pro Val Thr Ala Glu Cys Gly His Ser

20 25 30

Phe Cys Arg Ala Cys Leu Gly Arg Val Ala Gly Glu Pro Ala Ala Asp

35 40 45

Gly Thr Val Leu Cys Pro Cys Cys Gln Ala Pro Thr Arg Pro Gln Ala

50 55 60

Leu Ser Thr Asn Leu Gln Leu Ala Arg Leu Val Glu Gly Leu Ala Gln

65 70 75 80

Val Pro Gln Gly His Cys Glu Glu His Leu Asp Pro Leu Ser Ile Tyr

85 90 95

Cys Glu Gln Asp Arg Ala Leu Val Cys Gly Val Cys Ala Ser Leu Gly

100 105 110

Ser His Arg Gly His Arg Leu Leu Pro Ala Ala Glu Ala His Ala Leu

115 120 125

Lys Thr Gln Leu Pro Gln Gln Lys Leu Gln Leu Gln Glu Ala Cys Met

130 135 140

Arg Lys Glu Lys Ser Val Ala Val Leu Glu His Gln Leu Val Glu Val

145 150 155 160

Glu Glu Thr Val Arg Gln Phe Arg Gly Ala Val Gly Glu Gln Leu Gly

165 170 175

Lys Met Arg Val Phe Leu Ala Ala Leu Glu Gly Ser Leu Asp Arg Glu

180 185 190

Ala Glu Arg Val Arg Gly Glu Ala Gly Val Ala Leu Arg Arg Glu Leu

195 200 205

Gly Ser Leu Asn Ser Tyr Leu Glu Gln Leu Arg Gln Met Glu Lys Val

210 215 220

Leu Glu Glu Val Ala Asp Lys Pro Gln Thr Glu Phe Leu Met Lys Tyr

225 230 235 240

Cys Leu Val Thr Ser Arg Leu Gln Lys Ile Leu Ala Glu Ser Pro Pro

245 250 255

Ala Arg Leu Asp Ile Gln Leu Pro Ile Ile Ser Asp Asp Phe Lys Phe

260 265 270

Gln Val Trp Arg Lys Met Phe Arg Ala Leu Met Pro Ala Leu Glu Glu

275 280 285

Leu Thr Phe Asp Pro Ser Ser Ala His Pro Ser Leu Val Val Ser Ser

290 295 300

Ser Gly Arg Arg Val Glu Cys Ser Glu Gln Lys Ala Pro Pro Ala Gly

305 310 315 320

Glu Asp Pro Arg Gln Phe Asp Lys Ala Val Ala Val Val Ala His Gln

325 330 335

Gln Leu Ser Glu Gly Glu His Tyr Trp Glu Val Asp Val Gly Asp Lys

340 345 350

Pro Arg Trp Ala Leu Gly Val Ile Ala Ala Glu Ala Pro Arg Arg Gly

355 360 365

Arg Leu His Ala Val Pro Ser Gln Gly Leu Trp Leu Leu Leu Arg Glu

370 375 380

Gly Lys Ile Leu Glu Ala His Val Glu Ala Lys Glu Pro Arg Ala Leu

385 390 395 400

Arg Ser Pro Glu Arg Arg Pro Thr Arg Ile Gly Leu Tyr Leu Ser Phe

405 410 415

Gly Asp Gly Val Leu Ser Phe Tyr Asp Ala Ser Asp Ala Asp Ala Leu

420 425 430

Val Pro Leu Phe Ala Phe His Glu Arg Leu Pro Arg Pro Val Tyr Pro

435 440 445

Phe Phe Asp Val Cys Trp His Asp Lys Gly Lys Asn Ala Gln Pro Leu

450 455 460

Leu Leu Val Gly Pro Glu Gly Ala Glu Ala

465 470

Claims (10)

1.一种预防和/或治疗肾损伤和肾衰竭的组合物，其特征在于，所述组合物包括MG53蛋白或/和MG53蛋白突变体。

2.根据权利要求1所述的一种预防和/或治疗肾损伤和肾衰竭的组合物，其特征在于，所述MG53蛋白为以下的任意一种：

1)包括MG53多肽、小窝蛋白-3；

2)包括编码MG53多肽的核酸、小窝蛋白-3；

3)包括MG53多肽、编码MG53多肽的核酸、小窝蛋白-3。

3.根据权利要求1所述的一种预防和/或治疗肾损伤和肾衰竭的组合物，其特征在于，所述MG53蛋白突变体为以下的任意一种：

1)包括MG53突变体多肽；

2)包括编码MG53突变体多肽的核酸；

3)包括MG53突变体多肽、编码MG53突变体多肽的核酸；

4)包括MG53突变体多肽、小窝蛋白-3；

5)包括编码MG53突变体多肽的核酸、小窝蛋白-3；

6)包括MG53突变体多肽、编码MG53突变体多肽的核酸、小窝蛋白-3。

4.根据权利要求1或3所述的一种预防和/或治疗肾损伤和肾衰竭的组合物，其特征在于，所述MG53蛋白突变体为MG53蛋白的Coi led-coi l结构域中的丝氨酸位点突变为除苏氨酸和酪氨酸以外的非极性氨基酸，所述MG53蛋白突变体为MG53S150A、MG53S189A、MG53S211A的一种或多种。

5.根据权利要求4所述的一种预防和/或治疗肾损伤和肾衰竭的组合物，其特征在于，所述MG53蛋白突变体为MG53蛋白的Coi led-coi l结构域中的丝氨酸位点突变为丙氨酸，所述MG53蛋白突变体为MG53S150A、MG53S189A、MG53S211A的一种或多种。

6.根据权利要求1-3任一项所述的一种预防和/或治疗肾损伤和肾衰竭的组合物，其特征在于，还包括MG53蛋白或MG53蛋白突变体相应的激动剂和/或拮抗剂。

7.根据权利要求6所述的一种预防和/或治疗肾损伤和肾衰竭的组合物，其特征在于，所述激动剂包括磷脂酰丝氨酸、锌或锌盐、钙离子、Zn-1-羟基吡啶-2-硫酮、三七、氧化剂、乙基汞硫代水杨酸钠中的一种或者多种组合。

8.根据权利要求1-3任一项所述的一种预防和/或治疗肾损伤和肾衰竭的组合物，其特征在于，所述组合物加工成口服制剂或注射给药制剂。

9.根据权利要求8任一项所述的一种预防和/或治疗肾损伤和肾衰竭的组合物，其特征在于，所述口服制剂为片剂、胶囊、口服液或颗粒剂；所述注射给药制剂为水针剂、无菌分装制剂或冻干粉针剂。

10.根据权利要求8任一项所述的一种预防和/或治疗肾损伤和肾衰竭的组合物，其特征在于，所述肾损伤和肾衰竭包括由放射性造影剂、肾脏毒素、抗生素、抗癌药、感染、烧伤、创伤、肾动脉狭窄及休克原因引起的急性肾损伤，慢性肾功能衰竭，肾纤维化以及糖尿病肾病。