CN111012808A - 药用柽柳提取物及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种药用柽柳提取物，该提取物可以有效治疗糖尿病及前驱糖尿病及其并发症，治疗非酒精性脂肪肝，动脉粥样硬化，且该药用柽柳提取物与阿卡波糖复配后可协同降低餐后血糖的升高，通过以下方法制备所得：S1、取柽柳叶100g，置于手提式DFT‑200高速旋转中药粉碎机中，粉碎20秒，共5次，粉碎后，置于1.5L的乙醇水溶液中2天，用3层滤纸除去植物残渣，得到植物乙醇水提物液；S2、将所得的植物乙醇水提物液用真空旋转蒸发仪去除大部分滤液，得到油状液体；S3、在油状液体中加入适量石油醚，混匀，静置，7500g，离心10分钟，弃去石油醚液体，沉淀重新溶解到无水乙醇中，蒸干后即得到提取物粉末。

Description

药用柽柳提取物及其应用
技术领域
本发明涉及药用制剂领域，具体涉及一种药用柽柳提取物及其应用。
背景技术
随着现代社会人民生活水平日益提高，生活节奏的不断加快，高脂油炸食品和久坐成为很高比例人群的日常生活方式，随之而来的高脂饮食诱发的一系列疾病已经成为严重威胁人类健康的主要因素之一。长期高脂饮食极易造成高血脂症、非酒精性脂肪肝及动脉粥样硬化等一系列疾病。调查显示，我国成人由高脂饮食诱发的脂质代谢紊乱患者已达1.8亿。
长期高脂饮食极易诱发高血脂症其主要特征为血清中胆固醇水平、甘油三酯或两者均高于正常值。而高血脂症又极易诱发以动脉粥样硬化、冠心病等疾病为代表的心脑血管疾病。同时，长期高脂饮食即长期吸收过量的脂质易使脂质聚集在脂肪组织和肝脏组织，进而诱发肥胖和非酒精性脂肪肝等脂肪性肝病。正因为高脂饮食会导致一系列疾病的发生，故加强对高脂饮食诱导疾病的预防和治疗对健康具有重要意义。预防和治疗高脂饮食诱导疾病可采用改变生活方式，干预饮食和加强运动的方式，但其实施有困难，大部分人无法坚持，故通常无法达到预期的效果，故采用合适药物防治高脂饮食诱导疾病为常见手段。现有药物主要针对高脂饮食诱导疾病的具体疾病进行治疗，少见综合治疗。
针对高血脂症，其首选药物为是他汀类药物，其应用较广泛，其能够抑制肝脏合成胆固醇，降低血脂，并且对动脉硬化有一定的治疗作用。贝特类、树脂类、烟酸类和鱼油类等也是治疗高血脂症的常见药物。副作用和耐药性问题是制约着降脂药物发展的瓶颈，如他汀类药物可致肌副作用和肝副作用，同时因多靶点问题，长期使用会造成耐药性增强。针对非酒精性脂肪肝，除降血脂类药物(他汀类、贝特类)外，临床则常用胰岛素增敏剂类药物(如类双胍、噻唑烷二酮类)，抗氧化类药物(维生素E)，但是其往往会导致肝脏负担的加重，使其使用上受到限制。针对动脉粥样硬化，目前临床上常见药物主要有降血脂药物、抗血小板药物、扩张血管药物及溶血栓和抗凝血药物等，仍制约着其发展。较严重的肝脏和肾脏副作用。开发安全有效的高脂饮食诱导疾病防治药物和保健产品具有重要的创新意义及临床使用价值。
糖尿病是一种以血糖升高为特点、可诱发多种并发症、严重威胁人类健康的慢性疾病。加强运动和控制饮食是控制血糖及治疗糖尿病和前驱糖尿病主要手段之一。但是对于多数糖尿病和前驱糖尿病患者来说，加强运动和控制饮食对于很多人是无法有效实现的，故进行口服降糖药物进行治疗是十分有必要的。目前现有口服药物主要包括双胍类、α-葡萄糖苷酶抑制剂、胰岛素增敏剂及其他新靶点降糖药物。
不同糖尿病药物各具特色，可针对不同特征的糖尿病患者，但是糖尿病患者病情复杂多样，仍有部分患者无法得到有效治疗，同时现有各种药物也存在各种缺陷，大多药物都有一定副作用，故高效低毒的治疗糖尿病药物始终都是亟需的。相对而言，干预前驱糖尿病药物的研究尚处起步阶段，目前仅对一些现有降糖药物进行了临床评价。发现降糖药二甲双胍、阿卡波糖和伏格列波糖仅能够降低2型糖尿病风险率25-40％，对比于生活方式干预(43％)并没有明显优势，仅有罗格列酮、吡格列酮等噻唑烷二酮类能较好降低由前驱糖尿病向二型糖尿病的转化率，可降低60％-70％的风险。但是相对而言，噻唑烷二酮类药物具有一定肝毒性，并增加了心血管疾病和膀胱癌风险，同时其并不适用于血脂紊乱的患者，其应用受到较大制约。因现有药物大多存在干预前驱糖尿病药效低或副作用大的缺点，所以开发高效低毒的抗前驱糖尿病药物更为迫切。
柽柳，又称西河柳，中国药典记载其具有发表透疹，祛风除湿等功效，可用于治疗麻疹不透、风湿痹痛等症。柽柳中含有多种黄酮化合物，包括山奈甲黄素、槲皮素-3′，4′-二甲醚、柽柳素、槲皮素、山奈酚、芹菜素、鼠李柠檬素、山奈酚-4′，7-二甲醚、芦丁、柽柳素-7-O-β-D-葡萄糖苷等，药理活性主要为保肝、解热、镇痛、止咳、抗炎、抗菌、抗氧化等作用。
发明内容
为解决上述问题，本发明提供了一种药用柽柳提取物及其应用。
为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：
药用柽柳提取物，该提取物具有α-糖苷酶活性，活性在10g/ml至200μg/ml，通过以下方法制备所得：
S1、取柽柳叶100g，置于手提式DFT-200高速旋转中药粉碎机中，粉碎20秒，共5次。粉碎后，置于1.5L的乙醇水溶液中2天，用3层滤纸除去植物残渣，得到植物乙醇水提物液；
S2、将所得的植物乙醇水提物液用真空旋转蒸发仪去除大部分滤液，得到油状液体；
S3、在油状液体中加入适量石油醚，混匀，静置，7500g，离心10分钟，弃去石油醚液体，沉淀重新溶解到无水乙醇中，蒸干后即得到提取物粉末。
进一步地，所述步骤S1中，乙醇水溶液的浓度为90％、70％、50％、30％或10％。
进一步地，所述步骤S3中，油状液体与石油醚的质量比为1∶1-1∶100。
进一步地，申请人研究发现：
本发明的药用柽柳提取物可用于制备治疗糖尿病及前驱糖尿病及其并发症的药物，该药物可以为片剂、胶囊剂、滴丸剂或颗粒剂(例如，片剂可为普通片、薄膜片、肠溶片等，取适量提取物粉末，加入适量稀释剂选自淀粉、糊精、甘露醇、微晶纤维素，适量的粘合剂选自水、乙醇、纤维素、淀粉、明胶，适量的崩解剂选自羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素、海藻酸钠，以及适当的润滑剂选自硬脂酸镁、滑石粉、聚乙二醇，加入甜味剂，选自D-木糖、木糖醇、麦芽糖醇、甜叶菊素、天冬甜母，按常规湿法制粒，干燥后整粒或者干法制粒后压片，如为包薄膜衣片，用成膜材料选自纤维素类、聚乙二醇类，按常规包衣，分装入密闭瓶或者铝塑板中。胶囊剂可为普通胶囊剂、肠溶胶囊剂等，可将提取物粉末加入适当辅料选自碳酸钙、甘露醇、氧化镁、微粉硅胶等，适当润滑剂选自滑石粉、硬脂酸镁、乙二醇酯、聚硅酮类，以及适当的粘合剂选自矿物油、食油，并加入适当甜味剂，选自D-木糖、木糖醇、麦芽糖醇、甜叶菊素、天冬甜母，混合成干粉或者制成颗粒，填充入胶囊，分装在密闭瓶或者铝塑板中)，该药用柽柳提取物可显著降低血糖水平及糖耐量水平，可显著降低糖尿病诱发的肝脏病变导致的转氨酶升高，可显著降低糖尿病诱发的肾脏病变导致的血浆中尿素和肌酐的升高。
本发明的药用柽柳提取物可用于制备治疗非酒精性脂肪肝，动脉粥样硬化的药物，该药物可以为片剂、胶囊剂、滴丸剂或颗粒剂，该药用柽柳提取物可显著降低血浆中的TG和TC含量，并降低AI动脉粥样硬化指数；显著降低肝脏中的TG和TC含量，且可显著降低肝脏脂肪化情况，减少肝脏脂肪空泡。
本发明的药用柽柳提取物与阿卡波糖复配后可协同降低餐后血糖的升高。
本发明提供了柽柳提取物的新应用，其可以有效治疗糖尿病及前驱糖尿病及其并发症，治疗非酒精性脂肪肝，动脉粥样硬化，且该药用柽柳提取物与阿卡波糖复配后可协同降低餐后血糖的升高，其副作用较小，善综合治疗。
附图说明
图1柽柳提取物干预8周高脂饮食小鼠后，小鼠肝脏形态的变化。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。以下实施例将有助于本领域的技术人员进一步理解本发明，但不以任何形式限制本发明。应当指出的是，对本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进。这些都属于本发明的保护范围。
以下实施例中，柽柳提取物为90％乙醇水溶液制备所得。
实施例1
药用柽柳提取物的制备：
S1、取柽柳叶100g，置于手提式DFT-200高速旋转中药粉碎机中，粉碎20秒，共5次。粉碎后，置于1.5L的乙醇水溶液中2天，用3层滤纸除去植物残渣，得到植物乙醇水提物液；
S2、将所得的植物乙醇水提物液用真空旋转蒸发仪去除大部分滤液，得到油状液体；
S3、在油状液体中加入适量石油醚，混匀，静置，7500g，离心10分钟，弃去石油醚液体，沉淀重新溶解到无水乙醇中，蒸干后即得到提取物粉末。
以下实施例中：标准基础饲料购自常州鼠一鼠二生物科技有限公司，黄油购自麦琪琳食品有限公司。尿素氮(BUN)、肌苷(Cr)、谷丙转氨酶(ALT)和谷丙转氨酶(AST)等检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所；血糖试纸和血糖测试仪购自罗氏中国；总胆固醇(TC)和总甘油三酯(TG)等检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所；H-E染色试剂盒购于北京索来宝生物试剂有限公司。乙醇等有机试剂购自天津大茂试剂有限公司。
实施例2
药用柽柳提取物治疗糖尿病及前驱糖尿病及其并发症的效果研究
(1)糖尿病和前驱糖尿病小鼠模型的建立
取体重为16-20g昆明小鼠，适应环境3天后，喂食高脂高糖食物(36.4％淀粉，25.6％黄油，20％蛋白，1％胆固醇和0.1％胆汁酸)和3％蔗糖的水，经过5周饮食诱导胰岛素抵抗后，尾静脉注射60mg/kg STZ。注射后第7天和21天进行口服葡萄糖耐受实验。餐后2小时血糖在11.1mM以上的小鼠为糖尿病小鼠(DM小鼠)。
取体重为16-20g昆明小鼠，适应环境3天后，喂食高脂高糖食物(36.4％淀粉，25.6％黄油，20％蛋白，1％胆固醇和0.1％胆汁酸)和3％蔗糖的水，经过5周饮食诱导胰岛素抵抗后，尾静脉注射15mg/kg STZ。注射后第7天和21天进行口服葡萄糖耐受实验。2次血糖均符合空腹小于7.8mM且2小时血糖在7.8mM至11.1mM之间小鼠为前驱糖尿病小鼠(IGT小鼠)。
(2)糖尿病治疗给药过程：
8只正常昆明小鼠，喂食标准饲料，设为NM组。另32只糖尿病小鼠分为4组(n＝8)，喂食高脂高糖饲料，整个实验分组如下：
NM1组：正常小鼠每天给药一次0.5％羧甲基纤维素钠溶液(其他药物溶于此溶液)；
MD1组：糖尿病小鼠每天给药一次0.5％羧甲基纤维素钠溶液；
LTC1(low dose of Tamarix chinensis)组：糖尿病小鼠每天给药20mg/kg柽柳提取物；
MTC1(middle dose of Tamarix chinensis)组：糖尿病小鼠每天给药200mg/kg柽柳提取物；
HTC1(high dose of Tamarix chinensis)组：糖尿病小鼠每天给药500mg/kg柽柳提取物；
给药8周后，在给药结束后进行口服葡萄糖耐量实验，并按照试剂盒说明书测定其溶血液的糖化血红蛋白含量，测定肝脏，肾脏等组织相关氧化损伤情况。
柽柳提取物治疗糖尿病相关结果：
表1.柽柳提取物干预8周糖尿病小鼠后血糖变化
Figure BDA0002361911030000061
结果可知，给药一段时间柽柳提取物可显著降低血糖水平及糖耐量水平，治疗糖尿病。
表2.柽柳提取物干预8周糖尿病小鼠后肝脏功能变化
Figure BDA0002361911030000062
Figure BDA0002361911030000071
结果可知，给药一段时间柽柳提取物可显著降低糖尿病诱发的肝脏病变导致的转氨酶升高，治疗糖尿病肝病并发症。
表3.柽柳提取物干预8周糖尿病小鼠后肾脏功能变化
Figure BDA0002361911030000072
结果可知，给药一段时间柽柳提取物可显著降低糖尿病诱发的肾脏病变导致的血浆中尿素和肌酐的升高，治疗糖尿病肾病并发症。
前驱糖尿病治疗给药过程：
8只正常昆明小鼠，喂食标准饲料，设为NM组。另32只前驱糖尿病小鼠分为4组(n＝8)，喂食高脂高糖饲料，整个实验分组如下：
NM2组：正常小鼠每天给药一次0.5％羧甲基纤维素钠溶液(其他药物溶于此溶液)；
MD2组：前驱糖尿病小鼠每天给药一次0.5％羧甲基纤维素钠溶液；
LTC2(low dose of Tamarix chinensis)组：前驱糖尿病小鼠每天给药20mg/kg柽柳提取物；
MTC2(middle dose of Tamarixchinensis)组：前驱糖尿病小鼠每天给药200mg/kg柽柳提取物；
HTC2(high dose of Tamarix chinensis)组：前驱糖尿病小鼠每天给药500mg/kg柽柳提取物；
给药8周后，在给药结束后进行口服葡萄糖耐量实验。并按照试剂盒说明书测定其溶血液的糖化血红蛋白含量，测定肝脏，肾脏等组织相关氧化损伤情况。
柽柳提取物治疗前驱糖尿病相关结果
表4.柽柳提取物干预8周前驱糖尿病小鼠后，小鼠血糖分类及相对发病率减少比例RRRD的变化
Figure BDA0002361911030000081
结果可知，给药一段时间柽柳提取物可显著降低前驱糖尿病向糖尿病的转化率，干预前驱糖尿病。
药用柽柳提取物治疗非酒精性脂肪肝，动脉粥样硬化的效果研究
给药过程：
8只正常昆明小鼠，喂食标准饲料，设为NM组。另32只糖尿病小鼠分为4组(n＝8)，喂食进口饲料D15421，可诱导高血脂，非酒精性脂肪肝，动脉粥样硬化，整个实验分组如下：
NM3组：正常小鼠每天给药一次0.5％羧甲基纤维素钠溶液(其他药物溶于此溶液)；
MD3组：高脂饮食小鼠每天给药一次0.5％羧甲基纤维素钠溶液；
LTC3(low dose of Tamarix chinensis)组：高脂饮食小鼠每天给药20mg/kg柽柳提取物；
MTC3(middle dose of Tamarix chinensis)组：高脂饮食小鼠每天给药200mg/kg柽柳提取物；
HTC3(high dose of Tamarix chinensis)组：高脂饮食小鼠每天给药500mg/kg柽柳提取物；
给药8周后，在给药结束后进行口服葡萄糖耐量实验。并按照试剂盒说明书测定血脂代谢物在血浆和肝脏中的变化及肝脏HE切片。
表5.柽柳提取物干预8周高脂饮食小鼠后，小鼠血浆脂质代谢物的变化
Figure BDA0002361911030000091
结果可知，给药一段时间柽柳提取物可显著降低血浆中的TG和TC含量，并降低AI动脉粥样硬化指数，其可治疗高血脂，预防并治疗动脉粥样硬化。
表6.柽柳提取物干预8周高脂饮食小鼠后，小鼠肝脏脂质代谢物的变化
Figure BDA0002361911030000092
结果可知，给药一段时间柽柳提取物可显著降低肝脏中的TG和TC含量，具有治疗非酒精性脂肪肝的疗效。
分析切片可知，给药一段时间柽柳提取物可显著降低肝脏脂肪化情况，减少肝脏脂肪空泡，治疗非酒精性脂肪肝。
药用柽柳提取物与阿卡波糖复配后降低餐后血糖升高的效果研究
正常wistar大鼠，禁食8小时后分别如下组给药：
A组：0.5％羧甲基纤微素钠；
B组：2mg/kg阿卡波糖；
C组：200mg/kg柽柳提取物和2mg/kg阿卡波糖；
半小时后，每只大鼠灌胃3g/kg淀粉。并测定餐后血糖。
表7.柽柳提取物和阿卡波糖联用后对血糖变化的影响。
Figure BDA0002361911030000093
Figure BDA0002361911030000101
结果可知，柽柳提取物和阿卡波糖联用后可显著餐后60分钟血糖的升高，其效果优于单用阿卡波糖，可降低阿卡波糖剂量。
以上对本发明的具体实施例进行了描述。需要理解的是，本发明并不局限于上述特定实施方式，本领域技术人员可以在权利要求的范围内做出各种变化或修改，这并不影响本发明的实质内容。在不冲突的情况下，本申请的实施例和实施例中的特征可以任意相互组合。

Claims (10)

1.药用柽柳提取物，其特征在于：该提取物具有d-糖苷酶活性，活性在10μg/ml至200μg/ml，通过以下方法制备所得：
S1、取柽柳叶100g，置于手提式DFT-200高速旋转中药粉碎机中，粉碎20秒，共5次，粉碎后，置于1.5L的乙醇水溶液中2天，用3层滤纸除去植物残渣，得到植物乙醇水提物液；
S2、将所得的植物乙醇水提物液用真空旋转蒸发仪去除大部分滤液，得到油状液体；
S3、在油状液体中加入适量石油醚，混匀，静置，7500g，离心10分钟，弃去石油醚液体，沉淀重新溶解到无水乙醇中，蒸干后即得到提取物粉末。
2.如权利要求1所述的药用柽柳提取物，其特征在于：所述步骤S1中，乙醇水溶液的浓度为90％、70％、50％、30％或10％。
3.如权利要求1所述的药用柽柳提取物的应用，其特征在于：其可用于制备治疗糖尿病及前驱糖尿病及其并发症的药物。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于：药用柽柳提取物可显著降低血糖水平及糖耐量水平。
5.如权利要求3所述的应用，其特征在于：药用柽柳提取物可显著降低糖尿病诱发的肝脏病变导致的转氨酶升高。
6.如权利要求3所述的应用，其特征在于：药用柽柳提取物可显著降低糖尿病诱发的肾脏病变导致的血浆中尿素和肌酐的升高。
7.如权利要求1所述的药用柽柳提取物的应用，其特征在于：其可用于制备治疗非酒精性脂肪肝，动脉粥样硬化的药物。
8.如权利要求7所述的应用，其特征在于：药用柽柳提取物可显著降低血浆中的TG和TC含量，并降低AI动脉粥样硬化指数。
9.如权利要求7所述的应用，其特征在于：药用柽柳提取物可显著降低肝脏中的TG和TC含量，且可显著降低肝脏脂肪化情况，减少肝脏脂肪空泡。
10.如权利要求1所述的药用柽柳提取物的应用，其特征在于：其与阿卡波糖复配后可协同降低餐后血糖的升高。
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CN106176846A (zh) * 2016-09-20 2016-12-07 山东省医学科学院基础医学研究所 一种治疗酒精性肝损伤的药物的制备方法
CN109758489A (zh) * 2019-01-28 2019-05-17 山东理工大学 一种预防或治疗糖尿病的药用提取物及其应用

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