CN111000241A - 一种益生菌联合鱼肝油胶囊及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种益生菌联合鱼肝油胶囊及其制备方法。该技术方案以益生菌冻干粉、鳕鱼肝油、维生素E、甘油、明胶、超纯水为原料,首先给出了各组分的配方用量;在此基础上,利用甘油、超纯水、明胶制备溶胶,利用鳕鱼肝油、维生素E、益生菌冻干粉制备内容物料液,再将内容物料液和胶液压成软胶囊,经定型、干燥后得到成品。本发明在提高免疫力、促进大脑发育和预防夜盲症等方面具有很好的功效,而且,本发明全程同线处理,生产方法简单方便、工艺合理,避免了因鱼肝油性质不稳定造成的营养流失,整个制备工艺在一定的洁净区内完成,保证了工作环境的洁净,最大程度上降低环境对内容物和胶液的影响。
Description
技术领域
本发明涉及医疗保健食品技术领域,具体涉及一种益生菌联合鱼肝油胶囊及其制备方法。
背景技术
鳕鱼多是生活在海洋底层和深海中下层的冷水性鱼类,广泛分布在世界各大洋。鳕鱼肉质白细鲜嫩,营养丰富,为食用经济鱼类之一。鳕鱼肝油中含有较多的ω-3系列多不饱和脂肪酸,且富含维生素A和维生素D。大量研究表明,ω-3系列多不饱和脂肪酸,在抗血小板聚集、抗动脉硬化、抑制肿瘤生长、改善脑功能以及视网膜功能等方面具有良好的生理功效,故具有较高的营养价值和医学价值。
益生菌是一类对宿主有益的活性微生物,定植于宿主肠道、生殖系统内,其主要功能有改善宿主微生态平衡;帮助营养物质的消化吸收;产生重要的营养物质;抵抗细菌病毒的感染,提升免疫力,清除有害菌对身体的伤害等。
现有技术中,益生菌产品主要用于促进消化、提高免疫力,鱼肝油产品主要用于补充维生素A及D,帮助钙的吸收;两种产品各自均以单方形式发挥作用,尚未见将二者联用改善保健功效的报道。此外,如何在产品制备环节中实现益生菌成分与鱼肝油成分的整合,同时不影响各成分的生物学活性,现有技术中也无可以借鉴的生产工艺。
发明内容
本发明旨在针对现有技术的技术缺陷,提供一种益生菌联合鱼肝油胶囊及其制备方法,以解决现有技术中常规益生菌单方产品及鱼肝油单方产品在保健功效方面有待完善的技术问题。
本发明要解决的另一技术问题是如何在一套生产工艺中实现益生菌与鱼肝油两种活性成分的整合,同时不影响各自的活性。
本发明要解决的再一技术问题是如何确保上述生产工艺环境友好,并降低生产环境对内容物及胶液的影响。
为实现以上技术目的,本发明采用以下技术方案:
一种益生菌联合鱼肝油胶囊,包括以下重量份的成分:鳕鱼肝油200~300份,维生素E 5~10份,益生菌冻干粉200~300份,明胶180~360份,甘油60~120份,超纯水150~300份。
作为优选,该益生菌联合鱼肝油胶囊包括以下重量份的成分:鳕鱼肝油250份,维生素E 5份,益生菌冻干粉250份,明胶250份,甘油100份,超纯水250份。
作为优选,所述益生菌冻干粉包括以下重量百分比的成分:植物乳杆菌5%~10%,嗜酸乳杆菌10%~25%,干酪乳杆菌5%~10%,乳双歧杆菌10%~20%。
以上任一项所述益生菌联合鱼肝油胶囊的制备方法,包括以下步骤:
1)将配方量的甘油和配方量的超纯水在无菌条件下混合,加热至55~65℃混匀,向其中加入配方量的明胶,搅拌均匀,而后保温搅拌40~50min,化胶;抽真空;经100目过滤,得到胶液;
2)取配方量的鳕鱼肝油、维生素E、益生菌冻干粉在无菌条件下混合搅拌15~30min,得到内容物料液;
3)将步骤2)所得的内容物料液与步骤1)所得的胶液压成软胶囊,得到0.5~0.8g/粒的胶囊;而后以15~28℃的温度、25%~45%的相对湿度定型2~5h;而后以20~30℃的温度、20%~40%的相对湿度通风干燥12~24h,得到所述益生菌联合鱼肝油胶囊。
作为优选,所述益生菌冻干粉是通过以下方法制备的:将菌种接种到MRS斜面培养基上,在37℃下培养24h,而后转接到扩大培养基中,在37℃下培养24h,而后以1%体积的接种量转接至发酵培养基中,在37℃下发酵16~24h,直至发酵液pH为4.1~4.5,终止发酵;离心收集菌泥,按1:1的重量比加入浓度为1%的海藻酸钠溶液重悬菌泥,再按1:1的体积比加入浓度为16%的脱脂牛奶重悬,-20℃冻存后再置于-80℃冻存24h,至样品完全冷冻;而后用低温真空冷冻干燥机冻干制得冻干粉。
作为优选,所述离心收集菌泥,包括以下步骤:先将离心筒清洗干净并用75%浓度的酒精或紫外光消毒,而后以4700rpm的转速离心20min,取沉淀用PBS重悬,以50mL的离心管为容器,以6000rpm的转速离心5~10min,收集菌泥。
作为优选,所鳕述鱼肝油是通过以下方法制备的:将鳕鱼肝脏搅碎后,与等重量的蒸馏水混合;对所得的混合液,用浓度为1mol/L的氢氧化钠溶液调节其pH至8,而后向其中加入2%碱性蛋白酶,在恒温振荡器中以45℃的温度、130rpm的转速酶解4h;调节pH使碱性蛋白酶失活,而后以4500rpm的转速趁热离心,分离上层得到粗鱼肝油;对所述粗鱼肝油先后进行脱胶、脱酸、脱色后,得到所述鳕鱼肝油。
作为优选,所述脱胶包括以下步骤:向所述粗鱼肝油中加入浓度为70%~80%的磷酸水溶液,搅拌均匀并对容器进行密封,将该容器置于恒温振荡器中以65℃的温度、130rpm的转速处理30min,而后冷却并静置分层,以4500rpm的转速离心15min,去除沉淀,得到脱胶后的鱼肝油;
所述脱酸包括以下步骤:向脱胶后的鱼肝油中加入浓度为25%~35%的氢氧化钠水溶液,搅拌均匀,在恒温振荡器中以65℃的温度、100rpm的转速处理30min,而后冷却并静置分层,以4500rpm的转速离心15min,去除沉淀,得到脱酸后的鱼肝油;
所述脱色包括以下步骤:将脱酸后的鱼肝油置于温度为60℃的恒温振荡器中,向其中加入活性白土进行脱色和干燥,而后在减压条件下加热到80℃保持15min,得到所述鳕鱼肝油。
作为优选,步骤1)中,甘油、超纯水、明胶的混合或搅拌,是在无菌搅拌机中实现的;步骤2)中所述的混合搅拌,是在无菌搅拌机中实现的。
作为优选,步骤3)中所述的压成软胶囊,是在滚模式软胶囊机中实现的,操作条件包括:转速2.0~4.2rpm,喷体温度38~55℃,胶皮厚度0.55~0.70mm。
本发明提供了一种益生菌联合鱼肝油胶囊及其制备方法。该技术方案以益生菌冻干粉、鳕鱼肝油、维生素E、甘油、明胶、超纯水为原料,首先给出了各组分的配方用量;在此基础上,利用甘油、超纯水、明胶制备溶胶,利用鳕鱼肝油、维生素E、益生菌冻干粉制备内容物料液,再将内容物料液和胶液压成软胶囊,经定型、干燥后得到成品。本发明在提高免疫力、促进大脑发育和预防夜盲症等方面具有很好的功效,而且,本发明全程同线处理,生产方法简单方便、工艺合理,避免了因鱼肝油性质不稳定造成的营养流失,整个制备工艺在一定的洁净区内完成,保证了工作环境的洁净,最大程度上降低环境对内容物和胶液的影响。
本发明所提供的益生菌联合鱼肝油胶囊具有的良好保健功能,具有提高免疫力、改善夜盲症和预防佝偻病等多重功效。本发明帮助食用者在改善肠道菌群平衡、提高免疫力的同时补充适量的维生素A及D,预防夜盲症等疾病的发生。
本发明的技术效果集中体现在以下方面:
1)本发明以鱼肝油和益生菌冻干粉为主要原料。鱼肝油取自深海鳕鱼的肝脏,其中富含ω-3系列多不饱和脂肪酸、维生素A和维生素D,具有促进大脑发育和预防夜盲症等良好的生理功效;益生菌有促进消化、提高免疫力等能力;将益生菌与鱼肝油完美的结合在一起,具有极高的营养价值,有利于人体健康。
2)本发明将各个组份组合,均衡营养的同时不仅发挥出各个组份原有的功效,各组份还可以相互协同,并且克服了单一原料可能带来的弊端,具有很好的保健功效。
3)本发明产品中加入了适量的维生素E,具有良好的抗氧化作用,可以延长产品的保质期。
4)本发明全程同线处理,整个制备工艺在一定的洁净区内完成,保证了工作环境的洁净,最大程度的降低环境对内容物和胶液的影响。
具体实施方式
以下将对本发明的具体实施方式进行详细描述。为了避免过多不必要的细节,在以下实施例中对属于公知的结构或功能将不进行详细描述。以下实施例中所使用的近似性语言可用于定量表述,表明在不改变基本功能的情况下可允许数量有一定的变动。除有定义外,以下实施例中所用的技术和科学术语具有与本发明所属领域技术人员普遍理解的相同含义。
实施例1
一种益生菌联合鱼肝油胶囊,包括以下重量份的成分:鳕鱼肝油250份,维生素E 5份,益生菌冻干粉250份,明胶250份,甘油100份,超纯水250份。其中益生菌冻干粉的包括以下重量百分比的成分:5%-10%植物乳杆菌、10%-25%嗜酸乳杆菌、5%-10%干酪乳杆菌、10%-20%乳双歧杆菌。
上述益生菌联合鱼肝油胶囊的制备方法,包括以下步骤:
一、益生菌冻干粉的制备:
S1、菌种活化
将植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌和乳双歧杆菌四个菌种分别接种到四个斜面MRS培养基上,置于37℃生化培养箱中培养24h,得到扩大培养所需的菌种;
S2、扩大培养
制备扩大培养所需的培养基冷却至室温,在无菌条件下按比例接种四个菌种,摇匀后放置于37℃生化培养箱中静止发酵24h;
S3、生产发酵
制备发酵培养基,转入100L的发酵罐中,以体积1%的量接扩大培养后的菌种,搅拌均匀,控制发酵温度37℃,发酵16-24h,pH降到4.1-4.5即可终止发酵;
S4、菌泥收集
将发酵液采用大体积离心机4700rpm离心20min,离心前将离心筒清洗干净并用75%酒精或紫外消毒;弃上清,PBS重悬后采用50mL离心管再次6000rpm离心5-10min;弃上清,称重菌泥重量,按1:1加入1%灭菌的海藻酸钠重悬菌泥,再按1:1体积加入16%灭菌的脱脂牛奶重悬,-20℃冻存后再置于-80℃冻存24h左右,至样品完全冷冻;
S5、用低温真空冷冻干燥机冻干制得冻干粉。
二、鱼肝油的制备:
S1、将一定量的新鲜鱼肝脏绞碎后放入烧杯中,加入等量蒸馏水混合;
S2、使用1mol/L氢氧化钠溶液调节混合液pH为8左右,加入一定量的2%碱性蛋白酶,并置于45℃恒温振荡器中,使用相同转速(130rpm)酶解4h;
S3、酶解结束后调节pH使碱性蛋白酶灭活,然后4500rpm趁热离心,分离上层得到粗鱼肝油;
S4、脱胶:将步骤3所得的粗鱼肝油中加入70%-80%的磷酸水溶液搅拌均匀并作密封处理,把盛有原料的烧杯置于65℃恒温振荡器中使用相同转速100rpm处理30min,然后冷却并静置分层,在4500rpm转速下离心15min后去除沉淀得到脱胶后的鱼肝油;
S5、脱酸:将步骤4所得的脱胶后的鱼肝油中加入25%-35%的氢氧化钠水溶液搅拌均匀,把盛有原料的烧杯置于65℃恒温振荡器中使用相同转速100rpm处理30min,然后冷却并静置分层,在4500rpm转速下离心15min后去除沉淀得到脱酸后的鱼肝油;
S6、脱色:将步骤5所得的脱酸后的鱼肝油放置于60℃恒温振荡器中,加入适量活性白土进行脱色和干燥,然后在减压条件下加热到80℃保持15min,得到鱼肝油。
三、胶液的制备:
S1、按配方比例称取甘油、超纯水、明胶,备用;
S2、将甘油和纯化水加入无菌搅拌机中混合,加热至55-65℃混匀,然后加入明胶,搅拌均匀,保温搅拌40-50min,化胶;抽真空;
S3、过滤(100目);静置保温,得胶液备用。
四、内容物料液的制备:
S1、按比例称取鱼肝油、维生素E、益生菌冻干粉,备用;
S2、将鳕鱼肝油、维生素E、益生菌冻干粉加入无菌搅拌机中混合15-30min,得内容物料液备用。
五、压丸、定型、干燥:
S1、压丸:将内容物料液、胶液在滚模式软胶囊机压成软胶囊,保持转速2.0-4.2rpm,喷体温度保持在38-55℃,胶皮厚度为0.55-0.70mm,得到0.5-0.8g/粒的胶囊;
S2、定型:定型2-5h,温度15-28℃,相对湿度25%-45%;
S3、干燥:通风干燥12-24h,温度20-30℃,相对湿度20%-40%,制得益生菌联合鱼肝油胶囊。
以下通过实验方法考察其中部分成分的活性以及产品性能:
1、益生菌活性和数量的测定及评价
取相同益生菌浓度的标准益生菌培养液和益生菌联合鱼肝油胶囊的培养液各取0.1ml分别加入到装有0.9ml无菌生理盐水的1.5mlEP管中,吹打均匀后从中取出0.1ml加入下一支装有0.9ml无菌生理盐水的EP管中,以此类推对菌液作10倍梯度稀释,将平板平均分为6个区域,分别吸取10-2~10-7各稀释浓度菌液10μL点在不同的区域,每个稀释度在同一区域点三个样作为平行,点样结束后放置数分钟待菌液被营养琼脂吸附彻底后倒扣放在37℃生化培养箱培养24h,计数不同稀释度的3次平行的菌落数。实验结果如以下表1所示。
细胞密度=3次点样菌落数的平均值/稀释度/0.01
表1:菌体计数结果
由实验结果可知,本发明中鱼肝油对益生菌活性和数量的影响较小。
2、鱼肝油活性的测定及评价
在本实验中,通过液相色谱法分别测定相同纯度的标准鱼肝油组和益生菌联合鱼肝油胶囊组中维生素A和维生素D3的含量,每组取三个样本,其测量结果分别记录于表2、表3中:
表2:各个实验样品的维生素A含量
表3:各个试验样品的维生素D3含量
由表2、表3实验结果可知,本发明中益生菌对鱼肝油的活性影响较小。
3、益生菌联合鱼肝油胶囊疗效的评价
实验一:小鼠学习能力的评价
选用SPF级3-4周体重在18-22g的雄性昆明系小鼠,连续五天进行水迷宫实验,将学习记忆能力低下(水迷宫耗时超过30s)小鼠淘汰,余下小鼠随机分为四组,每组5只,两组作为实验组,另外两组作为对照组。实验组每天给予益生菌联合鱼肝油胶囊10mg/kg,对照组给予等量的氯化钠溶液,每日一次,连续给药4周,末次给药后进行小鼠跳台实验。
小鼠跳台试验:实验前一周每天抚摸实验动物1-5min,连续7天,借以消除实验动物对实验者的恐惧。实验开始前打开小鼠跳台实验箱,将参加实验的小鼠先放入反应箱铜栅处自由活动3min,熟悉实验环境。然后通以37v交流电,设置实验时间为5min,小鼠受到电机后寻找跳台以躲避电击,实验时将实验小鼠直接放置于跳台,观察并记录小鼠第一次跳下跳台的时间(潜伏期)和5min内从跳台跳下的错误次数,小鼠跳台实验数据记录于表4:
表4:小鼠跳台实验结果
实验二:小鼠免疫能力的评价
取实验一中小鼠的脾脏制备成为细胞悬液,通过离心得到分离较好的单细胞悬液,对CD4、CD8表面抗原染色,使用细胞流式检测仪检测,分析CD4+T细胞、CD8+T细胞的占比,检测结果见表5:
表5:细胞流式检测结果
表4实验结果显示小鼠跳台实验中,实验组的潜伏期和5min内错误次数较对照组都有显著的降低,由此可见益生菌联合鱼肝油胶囊可以提高学习能力,促进大脑发育。
表5细胞流式结果显示实验组的脾脏CD4+T细胞、CD8+T细胞的占比对比对照组有所升高,且实验组小组较对照组小鼠活动能力强,提示实验组小鼠较对照组小鼠免疫力有所提高。由此可见益生菌联合鱼肝油胶囊不仅可以提高免疫力,还具有提高大脑学习能力和促进大脑发育等多重功效。
4、益生菌联合鱼肝油胶囊急性毒性试验
采用最大耐受剂量法,选用体重为18-22g的昆明种小鼠24只,分别分为2组,雌雄各半。取本发明益生菌联合鱼肝油胶囊内容物50g加1%的羧甲基纤维素钠至100mL。给小鼠一日内间隔4小时经口灌胃2次,每次灌胃体积为0.2mL/10g.bw,累积剂量为20.00g/kg.bw。首次灌胃前禁食16小时,灌胃后连续观察两周,记录中毒表现及死亡情况。实验结果如以下表6所示:
表6:急性毒性试验
性别 | 小鼠组别 | 动物数(只) | 剂量(g/kg.bw) | 死亡数(只) | MTD(g/kg.bw) |
雌 | 1 | 8 | 20 | 0 | >20.00 |
雄 | 2 | 8 | 20 | 0 | >20.00 |
以20.00g/kg.bw剂量的益生菌联合鱼肝油胶囊内容物给三组昆明种小鼠灌胃后未见明显中毒症状,观察14天无死亡。观察期末将受试动物处死进行解剖检查,肝、脾、肾、胃、肠、心、肺等主要脏器,未见明显异常改变。说明本发明益生菌联合鱼肝油胶囊对昆明种小鼠雌雄小鼠最大耐受量大于20.00g/kg.bw,属于无毒级。
实施例2
一种益生菌联合鱼肝油胶囊,包括以下重量份的成分:鳕鱼肝油200份,维生素E 5份,益生菌冻干粉200份,明胶180份,甘油60份,超纯水150份。其中,所述益生菌冻干粉包括以下重量百分比的成分:植物乳杆菌5%,嗜酸乳杆菌10%,干酪乳杆菌5%,乳双歧杆菌10%。
上述益生菌联合鱼肝油胶囊的制备方法,包括以下步骤:
1)将配方量的甘油和配方量的超纯水在无菌条件下混合,加热至55℃混匀,向其中加入配方量的明胶,搅拌均匀,而后保温搅拌40min,化胶;抽真空;经100目过滤,得到胶液;
2)取配方量的鳕鱼肝油、维生素E、益生菌冻干粉在无菌条件下混合搅拌15min,得到内容物料液;
3)将步骤2)所得的内容物料液与步骤1)所得的胶液压成软胶囊,得到0.5g/粒的胶囊;而后以15℃的温度、25%%的相对湿度定型2h;而后以20℃的温度、20%的相对湿度通风干燥12h,得到所述益生菌联合鱼肝油胶囊。
其中,所述益生菌冻干粉是通过以下方法制备的:将菌种接种到MRS斜面培养基上,在37℃下培养24h,而后转接到扩大培养基中,在37℃下培养24h,而后以1%体积的接种量转接至发酵培养基中,在37℃下发酵16h,直至发酵液pH为4.1,终止发酵;离心收集菌泥,按1:1的重量比加入浓度为1%的海藻酸钠溶液重悬菌泥,再按1:1的体积比加入浓度为16%的脱脂牛奶重悬,-20℃冻存后再置于-80℃冻存24h,至样品完全冷冻;而后用低温真空冷冻干燥机冻干制得冻干粉。
所述离心收集菌泥,包括以下步骤:先将离心筒清洗干净并用75%浓度的酒精或紫外光消毒,而后以4700rpm的转速离心20min,取沉淀用PBS重悬,以50mL的离心管为容器,以6000rpm的转速离心5min,收集菌泥。
其中,所鳕述鱼肝油是通过以下方法制备的:将鳕鱼肝脏搅碎后,与等重量的蒸馏水混合;对所得的混合液,用浓度为1mol/L的氢氧化钠溶液调节其pH至8,而后向其中加入2%碱性蛋白酶,在恒温振荡器中以45℃的温度、130rpm的转速酶解4h;调节pH使碱性蛋白酶失活,而后以4500rpm的转速趁热离心,分离上层得到粗鱼肝油;对所述粗鱼肝油先后进行脱胶、脱酸、脱色后,得到所述鳕鱼肝油。
所述脱胶包括以下步骤:向所述粗鱼肝油中加入浓度为70%的磷酸水溶液,搅拌均匀并对容器进行密封,将该容器置于恒温振荡器中以65℃的温度、130rpm的转速处理30min,而后冷却并静置分层,以4500rpm的转速离心15min,去除沉淀,得到脱胶后的鱼肝油;
所述脱酸包括以下步骤:向脱胶后的鱼肝油中加入浓度为25%的氢氧化钠水溶液,搅拌均匀,在恒温振荡器中以65℃的温度、100rpm的转速处理30min,而后冷却并静置分层,以4500rpm的转速离心15min,去除沉淀,得到脱酸后的鱼肝油;
所述脱色包括以下步骤:将脱酸后的鱼肝油置于温度为60℃的恒温振荡器中,向其中加入活性白土进行脱色和干燥,而后在减压条件下加热到80℃保持15min,得到所述鳕鱼肝油。
步骤1)中,甘油、超纯水、明胶的混合或搅拌,是在无菌搅拌机中实现的;步骤2)中所述的混合搅拌,是在无菌搅拌机中实现的。
步骤3)中所述的压成软胶囊,是在滚模式软胶囊机中实现的,操作条件包括:转速2.0rpm,喷体温度38℃,胶皮厚度0.55mm。
实施例3
一种益生菌联合鱼肝油胶囊,包括以下重量份的成分:鳕鱼肝油300份,维生素E10份,益生菌冻干粉300份,明胶360份,甘油120份,超纯水300份。其中,所述益生菌冻干粉包括以下重量百分比的成分:植物乳杆菌10%,嗜酸乳杆菌25%,干酪乳杆菌10%,乳双歧杆菌20%。
上述益生菌联合鱼肝油胶囊的制备方法,包括以下步骤:
1)将配方量的甘油和配方量的超纯水在无菌条件下混合,加热至65℃混匀,向其中加入配方量的明胶,搅拌均匀,而后保温搅拌50min,化胶;抽真空;经100目过滤,得到胶液;
2)取配方量的鳕鱼肝油、维生素E、益生菌冻干粉在无菌条件下混合搅拌30min,得到内容物料液;
3)将步骤2)所得的内容物料液与步骤1)所得的胶液压成软胶囊,得到0.8g/粒的胶囊;而后以28℃的温度、45%的相对湿度定型5h;而后以30℃的温度、40%的相对湿度通风干燥24h,得到所述益生菌联合鱼肝油胶囊。
其中,所述益生菌冻干粉是通过以下方法制备的:将菌种接种到MRS斜面培养基上,在37℃下培养24h,而后转接到扩大培养基中,在37℃下培养24h,而后以1%体积的接种量转接至发酵培养基中,在37℃下发酵24h,直至发酵液pH为4.5,终止发酵;离心收集菌泥,按1:1的重量比加入浓度为1%的海藻酸钠溶液重悬菌泥,再按1:1的体积比加入浓度为16%的脱脂牛奶重悬,-20℃冻存后再置于-80℃冻存24h,至样品完全冷冻;而后用低温真空冷冻干燥机冻干制得冻干粉。
所述离心收集菌泥,包括以下步骤:先将离心筒清洗干净并用75%浓度的酒精或紫外光消毒,而后以4700rpm的转速离心20min,取沉淀用PBS重悬,以50mL的离心管为容器,以6000rpm的转速离心10min,收集菌泥。
其中,所鳕述鱼肝油是通过以下方法制备的:将鳕鱼肝脏搅碎后,与等重量的蒸馏水混合;对所得的混合液,用浓度为1mol/L的氢氧化钠溶液调节其pH至8,而后向其中加入2%碱性蛋白酶,在恒温振荡器中以45℃的温度、130rpm的转速酶解4h;调节pH使碱性蛋白酶失活,而后以4500rpm的转速趁热离心,分离上层得到粗鱼肝油;对所述粗鱼肝油先后进行脱胶、脱酸、脱色后,得到所述鳕鱼肝油。
所述脱胶包括以下步骤:向所述粗鱼肝油中加入浓度为80%的磷酸水溶液,搅拌均匀并对容器进行密封,将该容器置于恒温振荡器中以65℃的温度、130rpm的转速处理30min,而后冷却并静置分层,以4500rpm的转速离心15min,去除沉淀,得到脱胶后的鱼肝油;
所述脱酸包括以下步骤:向脱胶后的鱼肝油中加入浓度为35%的氢氧化钠水溶液,搅拌均匀,在恒温振荡器中以65℃的温度、100rpm的转速处理30min,而后冷却并静置分层,以4500rpm的转速离心15min,去除沉淀,得到脱酸后的鱼肝油;
所述脱色包括以下步骤:将脱酸后的鱼肝油置于温度为60℃的恒温振荡器中,向其中加入活性白土进行脱色和干燥,而后在减压条件下加热到80℃保持15min,得到所述鳕鱼肝油。
步骤3)中所述的压成软胶囊,是在滚模式软胶囊机中实现的,操作条件包括:转速4.2rpm,喷体温度55℃,胶皮厚度0.70mm。
实施例4
一种益生菌联合鱼肝油胶囊,包括以下重量份的成分:鳕鱼肝油250份,维生素E 5份,益生菌冻干粉250份,明胶250份,甘油100份,超纯水250份。
上述益生菌联合鱼肝油胶囊的制备方法,包括以下步骤:
1)将配方量的甘油和配方量的超纯水在无菌条件下混合,加热至60℃混匀,向其中加入配方量的明胶,搅拌均匀,而后保温搅拌45min,化胶;抽真空;经100目过滤,得到胶液;
2)取配方量的鳕鱼肝油、维生素E、益生菌冻干粉在无菌条件下混合搅拌22min,得到内容物料液;
3)将步骤2)所得的内容物料液与步骤1)所得的胶液压成软胶囊,得到0.7g/粒的胶囊;而后以21℃的温度、35%的相对湿度定型3.5h;而后以25℃的温度、30%的相对湿度通风干燥18h,得到所述益生菌联合鱼肝油胶囊。
以上对本发明的实施例进行了详细说明,但所述内容仅为本发明的较佳实施例,并不用以限制本发明。凡在本发明的申请范围内所做的任何修改、等同替换和改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种益生菌联合鱼肝油胶囊,其特征在于包括以下重量份的成分:鳕鱼肝油200~300份,维生素E 5~10份,益生菌冻干粉200~300份,明胶180~360份,甘油60~120份,超纯水150~300份。
2.根据权利要求1所述的一种益生菌联合鱼肝油胶囊,其特征在于包括以下重量份的成分:鳕鱼肝油250份,维生素E 5份,益生菌冻干粉250份,明胶250份,甘油100份,超纯水250份。
3.根据权利要求1所述的一种益生菌联合鱼肝油胶囊,其特征在于所述益生菌冻干粉包括以下重量百分比的成分:植物乳杆菌5%~10%,嗜酸乳杆菌10%~25%,干酪乳杆菌5%~10%,乳双歧杆菌10%~20%。
4.权利要求1~3任一项所述益生菌联合鱼肝油胶囊的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
1)将配方量的甘油和配方量的超纯水在无菌条件下混合,加热至55~65℃混匀,向其中加入配方量的明胶,搅拌均匀,而后保温搅拌40~50min,化胶;抽真空;经100目过滤,得到胶液;
2)取配方量的鳕鱼肝油、维生素E、益生菌冻干粉在无菌条件下混合搅拌15~30min,得到内容物料液;
3)将步骤2)所得的内容物料液与步骤1)所得的胶液压成软胶囊,得到0.5~0.8g/粒的胶囊;而后以15~28℃的温度、25%~45%的相对湿度定型2~5h;而后以20~30℃的温度、20%~40%的相对湿度通风干燥12~24h,得到所述益生菌联合鱼肝油胶囊。
5.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于所述益生菌冻干粉是通过以下方法制备的:将菌种接种到MRS斜面培养基上,在37℃下培养24h,而后转接到扩大培养基中,在37℃下培养24h,而后以1%体积的接种量转接至发酵培养基中,在37℃下发酵16~24h,直至发酵液pH为4.1~4.5,终止发酵;离心收集菌泥,按1:1的重量比加入浓度为1%的海藻酸钠溶液重悬菌泥,再按1:1的体积比加入浓度为16%的脱脂牛奶重悬,-20℃冻存后再置于-80℃冻存24h,至样品完全冷冻;而后用低温真空冷冻干燥机冻干制得冻干粉。
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于所述离心收集菌泥,包括以下步骤:先将离心筒清洗干净并用75%浓度的酒精或紫外光消毒,而后以4700rpm的转速离心20min,取沉淀用PBS重悬,以50mL的离心管为容器,以6000rpm的转速离心5~10min,收集菌泥。
7.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于所鳕述鱼肝油是通过以下方法制备的:将鳕鱼肝脏搅碎后,与等重量的蒸馏水混合;对所得的混合液,用浓度为1mol/L的氢氧化钠溶液调节其pH至8,而后向其中加入2%碱性蛋白酶,在恒温振荡器中以45℃的温度、130rpm的转速酶解4h;调节pH使碱性蛋白酶失活,而后以4500rpm的转速趁热离心,分离上层得到粗鱼肝油;对所述粗鱼肝油先后进行脱胶、脱酸、脱色后,得到所述鳕鱼肝油。
8.根据权利要求7所述的制备方法,其特征在于:
所述脱胶包括以下步骤:向所述粗鱼肝油中加入浓度为70%~80%的磷酸水溶液,搅拌均匀并对容器进行密封,将该容器置于恒温振荡器中以65℃的温度、130rpm的转速处理30min,而后冷却并静置分层,以4500rpm的转速离心15min,去除沉淀,得到脱胶后的鱼肝油;
所述脱酸包括以下步骤:向脱胶后的鱼肝油中加入浓度为25%~35%的氢氧化钠水溶液,搅拌均匀,在恒温振荡器中以65℃的温度、100rpm的转速处理30min,而后冷却并静置分层,以4500rpm的转速离心15min,去除沉淀,得到脱酸后的鱼肝油;
所述脱色包括以下步骤:将脱酸后的鱼肝油置于温度为60℃的恒温振荡器中,向其中加入活性白土进行脱色和干燥,而后在减压条件下加热到80℃保持15min,得到所述鳕鱼肝油。
9.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于步骤1)中,甘油、超纯水、明胶的混合或搅拌,是在无菌搅拌机中实现的;步骤2)中所述的混合搅拌,是在无菌搅拌机中实现的。
10.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于步骤3)中所述的压成软胶囊,是在滚模式软胶囊机中实现的,操作条件包括:转速2.0~4.2rpm,喷体温度38~55℃,胶皮厚度0.55~0.70mm。
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