CN110982777A - 细胞分选方法及系统 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种细胞分选方法及系统,细胞分选方法包含:取得哺乳类妊娠雌性体的子宫颈检体,其包含胎盘滋养层细胞和子宫颈细胞;以及使用介电泳晶片对子宫颈检体进行分选处理,以从子宫颈检体中分选出胎盘滋养层细胞和子宫颈细胞。本发明可从哺乳类妊娠雌性体的子宫颈检体中分选出产前胎儿基因检测所需的胎盘滋养层细胞,且以分选出的胎盘滋养层细胞进行的胎儿基因检测可具有高准确度。
Description
技术领域
本发明是有关于一种细胞分选方法及系统,且特别是指一种可从子宫颈检体分选出胎盘滋养层细胞的细胞分选方法及系统。
背景技术
产前胎儿染色体检查为新生儿有无基于分析结果判断胎儿是否患有先天性疾病。常见的产前胎儿染色体检查技术主要是通过抽血、羊膜穿刺术或绒毛取样术等技术来进行,其中又以羊膜穿刺术和绒毛取样术得到的检查结果准确度较高。然而,羊膜穿刺术和绒毛取样术均属于侵入式检查,其有一定机率造成流产,甚至是有危害母体生命安全的风险。
发明内容
本发明的主要目的在于提供一种细胞分选方法及系统,其可从哺乳类妊娠雌性体的子宫颈检体中分选出产前胎儿基因检测所需的胎盘滋养层细胞,且以分选出的胎盘滋养层细胞进行的胎儿基因检测可具有高准确度。此外,对子宫颈检体的采集可通过非侵入式方式进行,故可避免流产和危害母体生命安全等风险。上述哺乳类妊娠雌性体不以人类物种为限,其他哺乳类动物,例如猪、牛、马等,亦适用于本发明。以下举例若干哺乳类的孕期天数:猪:约114天;牛:约280天;马:约335至342天;狗、猫:约58至70天;兔:约30至33天;白鼠:约21天;仓鼠:约15至18天;天竺鼠:约63至68天。牛的孕期与人类近似,故其检体采样可于其孕期为第5周至第20周时进行,而猪的检体采样可于其孕期为约12-54天时进行,以可早期采样为导向。
根据上述目的,本发明提出一种细胞分选方法,此细胞分选方法包含:取得哺乳类妊娠雌性体的子宫颈检体,此子宫颈检体包含胎盘滋养层细胞和子宫颈细胞;去除上述子宫颈检体中的粘液;对上述这些胎盘滋养层细胞与上述这些子宫颈细胞进行分散处理;以及对上述子宫颈检体进行离心处理,以去除上述子宫颈检体中的上清液;以及使用介电泳晶片对子宫颈检体进行分选处理,以从子宫颈检体中分选出这些胎盘滋养层细胞和这些子宫颈细胞。
依据本发明的一或多个实施例,上述哺乳类妊娠雌性体为孕妇。
依据本发明的一或多个实施例,上述子宫颈检体是在孕妇的孕期为5周至20周时所采集。
依据本发明的一或多个实施例,使用介电泳晶片分选出的上述这些胎盘滋养层细胞和上述这些子宫颈细胞是在温度约为摄氏4度的环境下进行。
依据本发明的一或多个实施例,上述细胞分选方法还包含:使用保存液对上述子宫颈检体进行固定处理。
依据本发明的一或多个实施例,上述细胞分选方法还包含:在去除子宫颈检体中的上清液后,将上述子宫颈检体溶于导电液中,使上述子宫颈检体的细胞密度达到约为20万个/毫升至50万个/毫升(ml-1),且使上述子宫颈检体的导电度达到小于50微西门子/厘米(μS/cm)。
依据本发明的一或多个实施例,上述对这些胎盘滋养层细胞与这些子宫颈细胞进行分散处理是通过使用孔径约为70微米至100微米的筛网进行。
根据上述目的,本发明另提出一种细胞分选系统,此细胞分选系统包含光诱发介电泳晶片、投影模块和电能供应单元。光诱发介电泳晶片用以产生内部电场,以对哺乳类妊娠雌性体的子宫颈检体进行分选处理,以从子宫颈检体中分选出胎盘滋养层细胞和子宫颈细胞。投影模块用以朝向光诱发介电泳晶片投射图案化光源,使得光诱发介电泳晶片产生光激发效应而改变内部电场,借以分选出这些胎盘滋养层细胞和这些子宫颈细胞。电能供应单元用以提供电能至光诱发介电泳晶片,使光诱发介电泳晶片产生该内部电场,此电能供应单元产生的电压的频率大约为2万赫兹至7万赫兹。若子宫颈检体经过固定处理,则电能供应单元产生的电压的峰值约为10伏特至50伏特;若子宫颈检体未经过固定处理,则电能供应单元产生的电压的峰值约为6伏特至15伏特。
依据本发明的一或多个实施例,上述哺乳类妊娠雌性体为孕妇,且上述子宫颈检体为孕妇的孕期为5周至20周时对孕妇的子宫颈部位所采集的检体。
依据本发明的一或多个实施例,上述细胞分选系统还包含温度控制单元,此温度控制单元用以在细胞分选系统对上述子宫颈检体进行分选处理时,将光诱发介电泳晶片所处的环境的温度控制在约为摄氏4度。
本发明的优点至少在于,通过本发明的细胞分选方法及系统,可以非侵入式方式对母体进行子宫颈检体的采集,故可避免侵入式方式具有的风险,且可从子宫颈检体中分选出产前胎儿基因检测所需的胎盘滋养层细胞。依本发明的细胞分选方法及系统所分选出的胎盘滋养层细胞进行胎儿基因检测,可具有高准确度。此外,相较于公知萃取胎盘滋养层细胞所使用的细胞分选方法,本发明的细胞分选方法及系统具有低硬体成本的优势。
附图说明
为了更完整了解实施例及其优点,现参照并结合附图做下列描述,其中:
图1为依据本发明实施例的细胞分选方法的流程图;
图2A和图2B为依据本发明实施例的细胞分选系统的示意图;
图3A为依据本发明实施例的光诱发介电泳晶片的结构图;
图3B和图3C为图3A的流道层的平面图的不同示例;以及
图4A和图4B分别为图3A的光诱发介电泳晶片在未受到图案化光源的投射下和在受到图案化光源的投射下的电场分布示意图。
主要附图标记说明:
100-细胞分选方法,200-细胞分选系统,210-介电泳晶片,220、220’-承载平台,220A-开口区,230-注入单元,240A、240B-收集单元,250-影像观测模块,260-投影模块,262-发光元件,264-光调变器,300-光诱发介电泳晶片,310-第一基板,320-第一电极层,330-半导体层,340、340’-流道层,350-第二电极层,360-第二基板,372、372’-注入开口,373、373’-注入区,374、374’-第一流出开口,375、375’-第一收集区,376、376’-第二流出开口,377、377’-第二收集区,380、380’-投射区域,AC-电能供应单元,C1-子宫颈细胞,C2-胎盘滋养层细胞,D1-正介电泳力,D2-负介电泳力IN-注入接口,OUT1、OUT2-流出接口,PC-计算机设备,S110、S120、S130-步骤。
具体实施方式
以下仔细讨论本发明的实施例。然而,可以理解的是,实施例提供许多可应用的发明概念,其可实施于各式各样的特定内容中。所讨论的特定实施例仅供说明,并非用以限定本发明的范围。
请参照图1,图1为依据本发明实施例的细胞分选方法100的流程图。细胞分选方法100是用以对从哺乳类妊娠雌性体身上采集到的子宫颈检体进行检测,使得专业医事人员,例如医师和医检师等,得以依据检测结果进行诊断或相关分析。
应注意的是,细胞分选方法100可适用于许多哺乳类物种,其不以人类物种为限。其他哺乳类动物,例如猪、牛、马等,亦适用于细胞分选方法100。以下举例若干生物的孕期天数:猪:约114天;牛:约280天;马:约335至342天;狗、猫:约58至70天;兔:约30至33天;白鼠:约21天;仓鼠:约15至18天;天竺鼠:约63至68天。牛的孕期与人类近似,其检体采样可于其孕期为第5周至第20周时进行,而猪的检体采样时间可于其孕期为约12-54天进行,以可早期采样为导向。为方便说明,以下实施例均以人类的孕妇为例,而这些实施例亦适用于除人类外的其他哺乳类妊娠雌性体。
首先,进行步骤S110,对孕妇的子宫颈部位进行采样,以取得子宫颈检体。采集到的子宫颈检体包含胎盘滋养层细胞(placental trophoblast cell)和子宫颈细胞等。采集子宫颈检体时使用的工具可以是例如细胞刷(cytobrush)、木抹棒(ayre spatula)、子宫颈刷(cervical brush)、细胞签(cytopick)等非侵入式工具,但不限于此。进一步地,可对孕期第5周至第20周时的孕妇进行子宫颈检体采样,其步骤为将非侵入式工具插入子宫颈,轻轻地依顺时针或逆时针方向转一圈,轻轻刮取鳞状及柱状表皮细胞交界处的细胞,以安全且顺利地采集有效的子宫颈检体。在采集子宫颈检体之前,可先使用棉棒或其他医疗器材去除在子宫颈表面上过多的粘液,以利于后续对子宫颈检体的处理。
采集到子宫颈检体后,接着进行步骤S120,对子宫颈检体进行分选前处理,其可包含检体固定、粘液去除和/或上清液去除等处理。以下说明步骤S120的各个处理。
在检体固定的处理上,可使用含有重量百分浓度约为30%至60%的甲醇(methanol)的10毫升保存液,在摄氏4度下对子宫颈检体进行固定处理约30至60分钟,使得子宫颈检体中的细胞维持完整形态,而不会使其内含物漏出,以维持细胞的导电度及延长细胞的保存时间。其他例如乙醇和丙酮等保存液亦可用于子宫颈检体的固定。
由于采集到的子宫颈检体通常包含粘液,使得子宫颈检体中的胎盘滋养层细胞和子宫颈细胞容易通过粘液粘附成团,其可能影响细胞分选的效果,故宜先将子宫颈检体中的粘液去除后再进行后续步骤。举例而言,可使用粘液溶解液来溶解子宫颈检体中的粘液,以避免或减少子宫颈检体中的细胞粘附成团。粘液溶解液可以包含乙酰半胱胺酸(acetylcysteine),其浓度可以是每毫升20毫克,且可在摄氏37度下将子宫颈检体置入于其中约20至45分钟。然而,本发明不以上述为限,其他适用的粘液溶解液,例如二硫苏糖醇(dithiothreitol)和冰醋酸等,亦可用于溶解子宫颈检体中的粘液,且处理时间和/或粘液溶解液的浓度亦可依据粘液溶解液的种类和/或粘液浓稠度等对应调整。
完成粘液溶解处理后,可再使用孔径约为70至100微米的筛网,进一步地分散子宫颈检体中的胎盘滋养层细胞和子宫颈细胞,并进行细胞计数,以判别采集的细胞数是否足够。
接着,对子宫颈检体进行离心处理,以去除上清液。进行离心处理使用的离心机的转速可设定为300G至400G,且离心处理的时间大约为5至10分钟。在初步去除上清液后,可再利用10毫升的导电液(其导电度小于10μS/cm)清洗子宫颈检体,且再次进行上述离心处理,以进一步去除上清液。离心处理完成后,将子宫颈检体回溶至包含0.25-0.5%牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin;BSA)的导电液中,使得此导电液的细胞密度达到每毫升20万至50万个细胞,且其导电度小于50μS/cm,并保存于摄氏4度的环境,以避免細胞死亡。导电液可以是例如蔗糖溶液或是其他的单糖或双糖溶液,其体积摩尔浓度可大约为200毫摩尔/每升至300毫摩尔/每升,且其亦可作为细胞的营养液。
步骤S120可依照不同条件进行全部或部分处理。举例而言,若欲采集活细胞以进行后续细胞分选和分析,则可不进行检体固定处理,以避免细胞的活性丧失。若是子宫颈检体中的粘液量少且细胞粘附成团的程度轻微,则亦可不使用粘液溶解液来溶解子宫颈检体中的粘液。
在前处理步骤(即步骤S120)完成后,接着进行步骤S130,使用介电泳晶片对该子宫颈检体进行分选处理。图2A为依据本发明实施例的细胞分选系统200的示意图。细胞分选系统200包含介电泳晶片210、承载平台220、注入单元230、收集单元240A、240B和影像观测模块250。
介电泳晶片210用以对溶液中的胎盘滋养层细胞和子宫颈细胞进行分选处理。介电泳晶片210用以产生内部电场,且利用介电泳力(dielectrophoresis force;DEP force)原理,使得胎盘滋养层细胞和子宫颈细胞受到不同的介电泳力作用而移动至不同处。如此一来,胎盘滋养层细胞和子宫颈细胞可被介电泳晶片210分选出。步骤S130可在约为摄氏4度的环境下进行。也就是说,介电泳晶片210在约为摄氏4度的环境下进行分选处理,以延长细胞的保存时间。
承载平台220用以承载介电泳晶片210。在一些实施例中,承载平台220具有容置结构,以容置并固定介电泳晶片210的位置。容置结构可为环形凸出结构、矩形凹陷结构、卡榫结构或任何其他可固定介电泳晶片210的位置的结构。
注入单元230连接至光诱发介电泳晶片210的注入接口IN,其用以将包含胎盘滋养层细胞和子宫颈细胞的溶液注入至介电泳晶片210中。注入单元230可包含泵浦或其他可控制流体注入至光诱发介电泳晶片210中的速率的元件。在一些实施例中,注入单元230以约3微升/分至6微升/分的流速将溶液注入至介电泳晶片210中。收集单元240A、240B分别连接至介电泳晶片210的两个流出接口,其分别用以收集经由介电泳晶片210分选后的胎盘滋养层细胞和子宫颈细胞。
影像观测模块250设置于介电泳晶片210的上方,其可供使用者观测在介电泳晶片210中的分选情形。在一些实施例中。影像观测模块250可包含影像处理单元,其可对撷取到的分选情形画面进行影像分析处理以产生分析结果,且可根据分析结果来即时调整细胞分选系统200的参数,例如注入单元230的液体注入流速或其他可调整的参数。在其他实施例中,影像观测模块250可耦接具有影像分析功能的实体(例如计算机设备PC),且上述影像分析处理的步骤可在此实体中进行。
本发明的介电泳晶片210可以是光诱发介电泳晶片或其他可产生介电泳力以分选出不同细胞的晶片。若是介电泳晶片210为光诱发介电泳晶片,则如图2B所示,细胞分选系统200还包含投影模块260,其可设置在介电泳晶片210的下方且用以产生图案化光源,且承载平台220’包含开口区220A,使得投影模块260发出的图案化光源可通过开口区220A而投射至介电泳晶片210。投影模块260的光出射度(luminous exitance)和其产生的图案化光源的波长范围可分别介于9万勒克斯(lux)与12万勒克斯之间和介于380纳米与1400纳米之间。投影模块260包含发光元件262和光调变器264。发光元件262用以产生光源,其可以是例如灯泡、发光二极管或激光器等,但不限于此。举例而言,发光元件262可以是发光二极管,其用以发射出包含可见光波长的光源。光调变器264将发光元件262产生的光源转换为图案化光源,且将图案化光源投射至介电泳晶片210中的细胞分选区域。在一些实施例中,光调变器264为数字微型反射镜元件(digital micromirror device;DMD)或硅基液晶(liquidcrystal on silicon;LCoS)元件,其接收发光元件262发出的光源,且依据图像资料将接收到的光源转换为图案化光源。
投影模块260可通讯连接计算机设备PC,以从计算机设备PC接收图像资料,且通过接收到的图像资料来决定输出的图案化光源。详细而言,投影模块260可通过有线通讯(例如VGA、HDMI、eDP、USB)或无线通讯(例如WiFi、蓝牙)等方式通讯连接计算机设备PC,且计算机设备PC传输图像资料至投影模块260,接着再经由光调变器264的处理,依据图像资料将发光元件262发出的光源转换为图案化光源。此外,影像观测模块250可与投影模块260耦接至同一计算机设备PC。在一些实施例中,投影模块260更可包含透镜和/或反射镜等元件,其用以调整图案化光源的焦距和/或平面范围等。
另外,在介电泳晶片210为光诱发介电泳晶片的例子中,可在介电泳晶片210与投影模块260之间另设置透镜(图未绘示),以调整介电泳晶片210的投射区域大小。透镜(图未绘示)的调整倍数可依据细胞分选系统200的架构来决定,例如介电泳晶片210与投影模块260之间的距离、介电泳晶片210中流道层340的结构和/或投影模块260的光出射度等。透镜(图未绘示)可配置于承载平台220的开口区220A中、介电泳晶片210与开口区220A之间或者开口区220A与投影模块260之间。
图3A为本发明实施例的光诱发介电泳晶片300的示意图。光诱发介电泳晶片300可以是图2的介电泳晶片210的一示例。光诱发介电泳晶片300包含第一基板310、第一电极层320、半导体层330、流道层340、第二电极层350和第二基板360。第一基板310为可透光的透明基板,例如玻璃基板或塑胶基板等,但不限于此。
第一电极层320设置于第一基板310上,且其包含透明导电材料,例如氧化铟锡(indium tin oxide;ITO)、氧化铟锌(indium zinc oxide;IZO)或其他类似的导电材料。
半导体层330设置于第一电极层320上,其可包含间接能隙(indirect bandgap)材料,例如硅、锗或其他类似的材料。此外,半导体层330的结晶型态可为非晶硅(amorphoussilicon)、单晶硅(monocrystalline silicon)、微晶硅(nanocrystalline silicon)、多晶硅(polycrystalline silicon)或上述组合。
流道层340设置于半导体层330上,其用以导引包含细胞的液体的流动。图3B为流道层340的平面图案的一示例。如图3B所示,流道层340定义出注入开口372、注入区373、第一流出开口374、第一收集区375、第二流出开口376和第二收集区377,且注入区373、第一收集区375、第二收集区377交会于投射区域380中。流体经由注入开口372而注入至流道层340中。注入区373用以导引注入的液体至投射区域380。若投射区域380受到图案化光源的投射,则第一电极层320与第二电极层350之间的内部电场产生改变,使得流体中的胎盘滋养层细胞和子宫颈细胞往不同的方向移动,则第一收集区375可导引分选出的胎盘滋养层细胞经由第一流出开口374而流出至光诱发介电泳晶片300外,且第二收集区377可导引分选出的子宫颈细胞经由第二流出开口376而流出至光诱发介电泳晶片300外。或者,依据图案化光源的图案,第一收集区375可导引分选出的子宫颈细胞经由第一流出开口374而流出至光诱发介电泳晶片300外,且第二收集区377可导引分选出的胎盘滋养层细胞经由第二流出开口376而流出至光诱发介电泳晶片300外。
第二电极层350设置于流道层340上。在一些实施例中,第二电极层350透明导电材料,例如氧化铟锡、氧化铟锌或其他类似的导电材料。在此实施例中,第一电极层320和第二电极层350外接电源,以在第一电极层320与第二电极层350之间提供电压差,从而在第一电极层320与第二电极层350之间产生内部电场。
第二基板360设置于第二电极层350上,其为可透光的透明基板,例如玻璃基板或塑胶基板等,但不限于此。此外,在第二基板360上具有注入接口IN和流出接口OUT1、OUT2,其中注入接口IN用以提供液体注入至注入开口372的途径,而流出接口OUT1、OUT2分别用以提供不同细胞由第一流出开口374和第二流出开口376流出至光诱发介电泳晶片300外的途径。
在一些实施例中,第一基板310和第二基板360的厚度约为0.7毫米,第一电极层320和第一电极层350的厚度约为50纳米至500纳米,半导体层330的厚度约为1微米至2微米,流道层340的厚度大约为30微米至100微米。此外,在一些实施例中,注入区373与第一收集区375之间的夹角约为169度,第一收集区375与第二收集区377之间的夹角约为22度,注入区373、第一收集区375和第二收集区377的宽度大约为0.8毫米至20毫米,注入开口372、第一流出开口374和第二流出开口376的口径约为1.1毫米。在一些实施例中,且投射区域380的尺寸大约介于1毫米×1毫米与10毫米×10毫米之间。光诱发介电泳晶片300中各部分的厚度、宽度及夹角等数值可根据实际需求对应调整,并不以上述数值为限。
图3C为本发明另一实施例的流道层340’的平面图案。流道层340’中的注入开口372’、注入区373’、第一流出开口374’、第一收集区375’、第二流出开口376’、第二收集区377’和投射区域380’分别对应如图3B所示的注入开口372、注入区373、第一流出开口374、第一收集区375、第二流出开口376、第二收集区377和投射区域380,其差异在于,注入区373’与第一收集区375’属于同一直线方向,而注入区373’与第二收集区377’之间具有折弯角度。图案化光源的图案可依据流道层340’的平面图案对应设计,使得子宫颈检体中的胎盘滋养层细胞和子宫颈细胞可被分选出且流入至不同的收集区。
图4A和4B分别为光诱发介电泳晶片300中未受到图案化光源的投射下及受到图案化光源的投射下的电场分布示意图。如图4A所示,在光诱发介电泳晶片300中未受到图案化光源的投射下,第一电极层320和第二电极层350分别电性连接至电能供应单元AC的两端,使得第一电极层320和第二电极层350之间产生均匀电场,此时子宫颈细胞C1和胎盘滋养层细胞C2不会受到不均匀电场的影响而往特定的方向移动。电能供应单元AC产生的电压的频率可以是2万赫兹至7万赫兹。若是子宫颈检体经过步骤S120中的固定处理,则电压的峰值可以是10伏特至50伏特;若是子宫颈检体未经过步骤S120中的固定处理,则电压的峰值可以较低,其约为6伏特至15伏特。此外,含子宫颈检体的液体注入至光诱发介电泳晶片300中的流速可以是每分钟3至6微升。
如图4B所示,在受到图案化光源的投射下,光诱发介电泳晶片300产生光激发效应而改变第一电极层320和第二电极层350之间的电场分布,使得胎盘滋养层细胞C2及子宫颈细胞C1受到变动的光源投射图案化处产生介电泳力进行分离;子宫颈细胞C1受到正介电泳力(positive DEP force)D1的作用而移动至图案化光源的照射处,而胎盘滋养层细胞C2受到负介电泳力(negative DEP force)D2的作用而移动至图案化光源的照射处外。
在光诱发介电泳晶片300对子宫颈细胞C1和胎盘滋养层细胞C2进行分选时,光诱发介电泳晶片300的亮区(即图案化光源的照射处)对暗区(即未被图案化光源照射之处)的阻抗值比值为5以上,以进一步提升子宫颈细胞C1和胎盘滋养层细胞C2的分选效果。在一些实施例中,光诱发介电泳晶片300的亮区和暗区的阻抗值分别在10欧姆以下和50欧姆以上。
依据上述实施例分选出胎盘滋养层细胞后,受限于胎盘滋养层细胞的稀有性,为了从少量样品中获得更多资讯,在一些实施例中,进行基因检测前细胞需进行全基因组放大(whole genome amplification;WGA)以增加有限DNA样本的数量,接着再利用基因定序技术(例如使用次世代定序仪)来进行基因检测,以基于检测结果判断胎儿是否患有染色体非整数倍体异常、染色体片段缺失/重复及单基因疾病,例如唐氏症(Down syndrome)、威廉氏症(Williams-Beuren syndrome)及地中海贫血等。或者,若是分选出的胎盘滋养层细胞的纯度高,也可使用基因晶片侦测全基因体的基因增加或减少来进行基因检测,例如小胖威利症候群(Prader-Willi syndrome)、猫哭症候群(Cri du chat syndrome)或其他因染色体微小片段缺失/重复所造成的罕见疾病。
在进行胎盘滋养层细胞的全基因组放大处理之前,可先进行胎盘滋养层细胞的纯度验证,首先,分离后的细胞先萃取细胞DNA后利用标记荧光的聚合酶连锁反应(polymerase chain reaction;PCR)引子对多个短相连重复序列(short tandom repeat;STR)多态位点进行扩增。接着,再采用具高解析度的毛细管电泳且利用荧光侦测技术对扩增片段进行分离且确定其长度,以实现对多态位点的分型,并通过计算而得到胎盘滋养层细胞的纯度。
对于孕期为第5周至第10周的孕妇采集到的子宫颈检体而言,依据上述实施例分选出的胎盘滋养层细胞的纯度大约是30%至50%;对于孕期为第10周至第15周的孕妇采集到的子宫颈检体而言,依据上述实施例分选出的胎盘滋养层细胞的纯度大约是40%至60%;而对于孕期为第15周至第20周的孕妇采集到的子宫颈检体而言,依据上述实施例分选分选出的胎盘滋养层细胞的纯度大约是50%至70%。相较于透过抽血方式取得之胎盘滋养层细胞的纯度,依据上述实施例分选出的胎盘滋养层细胞的纯度可大幅提升,进而增加胎儿基因检测的准确度。
通过本发明的细胞分选方法及系统,可以非侵入式方式对母体进行子宫颈检体的采集,故可避免侵入式方式具有的风险,且可从子宫颈检体中分选出产前胎儿基因检测所需的胎盘滋养层细胞。依本发明的细胞分选方法及系统所分选出的胎盘滋养层细胞进行胎儿基因检测,可具有高准确度。此外,相较于公知萃取胎盘滋养层细胞所使用的细胞分选方法,本发明的细胞分选方法及系统具有低硬体成本的优势。
虽然本发明已以实施例公开如上,然其并非用以限定本发明,任何所属技术领域中的技术人员,在不脱离本发明的精神和范围内,当可作些许的更动与润饰,故本发明的保护范围当视权利要求所界定的为准。
Claims (10)
1.一种细胞分选方法,其特征在于,包含:
取得哺乳类妊娠雌性体的子宫颈检体,所述子宫颈检体包含胎盘滋养层细胞和子宫颈细胞;
去除所述子宫颈检体中的粘液;
对所述胎盘滋养层细胞与所述子宫颈细胞进行分散处理;
对所述子宫颈检体进行离心处理,以去除所述子宫颈检体中的上清液;以及
使用介电泳晶片对所述子宫颈检体进行分选处理,以从所述子宫颈检体中分选出所述胎盘滋养层细胞和所述子宫颈细胞。
2.根据权利要求1所述的细胞分选方法,其特征在于,所述哺乳类妊娠雌性体是孕妇。
3.根据权利要求2所述的细胞分选方法,其特征在于,所述子宫颈检体是在所述孕妇的孕期为第5周至第20周时所采集。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的细胞分选方法,其特征在于,使用介电泳晶片分选出所述胎盘滋养层细胞和所述子宫颈细胞系在温度为摄氏4度的环境下进行。
5.根据权利要求1至3中任一项所述的细胞分选方法,其特征在于,还包含:
使用保存液对所述子宫颈检体进行固定处理。
6.根据权利要求1所述的细胞分选方法,其特征在于,还包含:
在去除所述子宫颈检体中的上清液后,将所述子宫颈检体溶于导电液中,使所述子宫颈检体的细胞密度达到20万个/毫升至50万个/毫升,且使所述子宫颈检体的导电度达到小于50微西门子/厘米。
7.根据权利要求1所述的细胞分选方法,其特征在于,对所述胎盘滋养层细胞与所述子宫颈细胞进行分散处理是通过使用孔径为70微米至100微米的筛网进行。
8.一种细胞分选系统,其特征在于,包含:
光诱发介电泳晶片,用以产生内部电场,以对哺乳类妊娠雌性体的子宫颈检体进行分选处理,以从所述子宫颈检体中分选出胎盘滋养层细胞和子宫颈细胞;
投影模块,用以朝向所述光诱发介电泳晶片投射图案化光源,使得所述光诱发介电泳晶片产生光激发效应而改变所述内部电场,借以分选出所述胎盘滋养层细胞和所述子宫颈细胞;以及
电能供应单元,用以提供电能至所述光诱发介电泳晶片,使所述光诱发介电泳晶片产生所述内部电场,所述电能供应单元产生的电压的频率为2万赫兹至7万赫兹;
其中,若所述子宫颈检体经过固定处理,则所述电能供应单元产生的电压的峰值为10伏特至50伏特;若所述子宫颈检体未经过固定处理,则所述电能供应单元产生的电压的峰值为6伏特至15伏特。
9.根据权利要求8所述的细胞分选系统,其特征在于,所述哺乳类妊娠雌性体是孕妇,且所述子宫颈检体为所述孕妇的孕期为5周至20周时对所述孕妇的子宫颈部位所采集的检体。
10.根据权利要求8所述的细胞分选系统,其特征在于,还包含:
温度控制单元,用以在所述细胞分选系统对所述子宫颈检体进行分选处理时,将所述光诱发介电泳晶片所处的环境的温度控制在摄氏4度。
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