CN110974906A - 促进神经元新生的医药组合物以及利用天麻萃取物或腺苷类似物促进神经元新生的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种促进神经元新生的医药组合物以及利用天麻萃取物或腺苷类似物促进神经元新生的方法，该天麻萃取物包含有天麻素(gastrodin)、天麻苷元(gastrodigenin)、派立辛化合物(parishins)、N6‑(4‑羟基苯甲基)腺苷(T1‑11)以及4‑羟基苯甲醛(4‑hydroxybenzaldehyde)。本发明的天麻萃取物对神经细胞具有减缓老化活性并且可以诱导小鼠海马回神经元新生。
Description
技术领域
本发明涉及医药技术领域，尤其涉及一种促进神经元新生的医药组合物以及利用天麻萃取物或腺苷类似物促进神经元新生的方法。
背景技术
天麻(Gastrodia elata Bl.)为取材自兰科多年生寄生草本植物天麻的块茎，是一种常用的中药，临床上用于治疗头痛、眩晕、肢体麻木，癫痫和破伤风引起的抽搐、神经衰弱，血管神经性头痛等。基于其在临床上的医疗用途，文献上有许多是探讨其在预防神经伤害相关的研究。例如，天麻素，一种天麻中的组成，被发现会改变沙鼠海马回(gerbilhippocampus)中的γ-胺基丁酸(gamma amino butyric acid(GABA))代谢(An,et al.(2003))。更进一步地，天麻的甲醇萃取物的乙醚分划层在对抗沙鼠局部缺血模型及施以藻胺酸(kainic acid)处理的老鼠模型中的海马回神经元伤害具有保护效果(Kim,et al.(2001)；Kim,et al.(2003))。天麻的甲醇萃取物的乙醚分划层能显着地降低对β－淀粉样蛋白诱发的神经细胞死亡。同样地，通过利用一施以藻胺酸处理的大鼠模型，Hsieh与其同僚证明投与天麻萃取物不仅显着地降低了癫痫发作的次数，并且也延后疾病开始发生的时间(Hsieh,et al(2001))。天麻出现这种抗癫痫的效果是通过其自由基清除活性的调节(Hsieh,et al.(2000))等。此外，一种天麻的甲醇萃取物通过抑制c-Jun胺基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase(JNK)活性来防止PC12细胞因血清抽离而导致的细胞凋亡(serum-deprived apoptosis)(Huang,et al.(2004))。
发明内容
本发明的主要目的，在于提供天麻萃取物或腺苷类似物对于促进神经元新生效果的有效成分或其组合物。
本发明通过一种具有天麻萃取物或腺苷类似物的医药组合物，发现该天麻萃取物或其腺苷类似物能促进神经元新生。
本发明提供一种促进神经元新生的医药组合物，包括有天麻素(gastrodin)、天麻苷元(gastrodigenin)、派立辛化合物(parishins)、N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)以及4-羟基苯甲醛(4-hydroxybenzaldehyde)。
在一实施例中，该派立辛化合物包含有派立辛A、派立辛B、派立辛C以及派立辛E。
在一实施例中，该天麻萃取物中的N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)的重量百分比为0.5-4％。该天麻素的重量百分比大于25％。该派立辛化合物的总重量百分比大于50％。
本发明更提供一种利用天麻萃取物促进神经新生的方法，该天麻萃取物包含有天麻素(gastrodin)、天麻苷元(gastrodigenin)、派立辛化合物(parishins)、N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)以及4-羟基苯甲醛(4-hydroxybenzaldehyde)。于本发明中，所指的新生的神经元为脑神经元。
此外，本发明亦提供一种利用N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)促进神经元新生的方法。新生的神经元为脑神经元。
据此，本发明的天麻萃取物或N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)对神经细胞具有减缓老化活性并且可以诱导海马回神经元新生。
附图说明
图1为本发明促进神经元新生的医药组合物的天麻萃取物TM1-2的高效液相层析(HPLC)分析的化学剖面图。
图2A为本发明促进神经元新生的医药组合物的天麻粗萃物(TM1)对于SH-SY5Y细胞β-半乳糖苷酶表现的影响；其中数值是至少独立四次实验的平均值(Mean)±平均值标准误差(SEM)；*p<0.05,**p<0.01分别代表药物处理组与空白对照组比较有显著差异。
图2B为本发明促进神经元新生的医药组合物的天麻粗萃物(TM1)对于SH-SY5Y细胞中，老化分子机制中相关蛋白的影响。
图3A为本发明促进神经元新生的医药组合物的天麻萃取物TM1-1、天麻萃取物TM1-2及N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)对SH-SY5Y抗细胞衰老活性的影响；其中数值是至少独立四次实验的平均值(Mean)±平均值标准误差(SEM)；**p<0.01代表药物处理组与空白对照组比较有显著差异。
图3B为本发明促进神经元新生的医药组合物的天麻萃取物TM1-1、天麻萃取物TM1-2及N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)对SH-SY5Y细胞中，P-RB,P16,P53,P21等老化分子机制中相关蛋白的影响。
图4A为本发明促进神经元新生的医药组合物的天麻萃取物TM1-2,N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11),天麻素(TG)及其他天麻成分(双(4-羟基苯甲基)硫化物(bis(4-hydroxylbenzyl)sulfide(T1-C))和天麻苷元(4-HBA))对SH-SY5Y抗细胞衰老活性的影响；其中数值是至少独立四次实验的平均值(Mean)±平均值标准误差(SEM)；*p<0.05,**p<0.01分别代表药物处理组与空白对照组比较有显著差异。
图4B为本发明促进神经元新生的医药组合物的天麻萃取物TM1-2,N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11),天麻素(TG)及其他天麻成分(双(4-羟基苯甲基)硫化物(bis(4-hydroxylbenzyl)sulfide(T1-C))和天麻苷元(4-HBA))对SH-SY5Y细胞中P-RB,P16,P53,P21等老化分子机制相关蛋白的影响。
图5A为本发明促进神经元新生的医药组合物的天麻萃取物(TM1-2)及N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)对半乳醣诱导的老化动物的筑巢能力的影响；其中1-9组实验分别为1:对照组,2:D-半乳糖单独处理组,3:D-半乳糖+维生素E(100mg/kg),4:D-半乳糖+TM1-2低剂量组(5mg/kg),5:D-半乳糖+TM1-2中剂量组(20mg/kg),6:D-半乳糖+TM1-2高剂量组(50mg/kg),7:D-半乳糖+T1-11低剂量组(1mg/kg),8:D-半乳糖+T1-11高剂量组(10mg/kg),9:T1-11(10mg/kg)；其中数值是平均值(Mean)±平均值标准误差(SEM)；**p<0.01代表半乳糖单独处理组与空白对照组比较有显著差异；#p<0.05代表药物处理组与半乳糖单独处理组比较有显著差异。
图5B为本发明促进神经元新生的医药组合物的天麻萃取物TM1-2及N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)对半乳醣诱导的老化动物的筑巢剩下的未撕碎棉片重量的影响；其中1-9组实验分别如图5A所述；其中数值是平均值(Mean)±平均值标准误差(SEM)；**p<0.01代表半乳糖单独处理组与空白对照组比较有显著差异；##p<0.01代表药物处理组与半乳糖单独处理组比较有显著差异。
图6为本发明促进神经元新生的医药组合物的天麻萃取物TM1-2及N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)对半乳醣诱导的老化动物的挖掘能力的影响；其中1-9组实验分别如图5A所述；其中数值是平均值(Mean)±平均值标准误差(SEM)；**p<0.01代表半乳糖单独处理组与空白对照组比较有显著差异；#p<0.05,##p<0.01分别代表药物处理组与半乳糖单独处理组比较有显著差异。
图7A为本发明促进神经元新生的医药组合物的天麻萃取物TM1-2及N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)对半乳醣诱导的老化动物在空间探索实验(probe trial)，到达原平台位置所需时间的影响；其中1-9组实验分别如图5A所述；其中数值是平均值(Mean)±平均值标准误差(SEM)；*p<0.05代表半乳糖单独处理组与空白对照组比较有显著差异；#p<0.05,##p<0.01分别代表药物处理组与半乳糖单独处理组比较有显著差异。
图7B为本发明促进神经元新生的医药组合物的天麻萃取物TM1-2及N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)对半乳醣诱导的老化动物在空间探索实验(probe trial)，穿越原平台位置次数的影响；其中1-9组实验分别如图5A所述；其中数值是平均值(Mean)±平均值标准误差(SEM)；*p<0.05代表半乳糖单独处理组与空白对照组比较有显著差异；#p<0.05代表药物处理组与半乳糖单独处理组比较有显著差异。
图8A为本发明促进神经元新生的医药组合物的天麻萃取物TM1-2及N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)对动物血液、大脑皮质和海马回中过氧化氢酶(catalase,CAT)酵素活性的影响；其中1-9组实验分别如图5A所述；其中数值是平均值(Mean)±标准偏差(SD)；**p<0.01代表半乳糖单独处理组与空白对照组比较有显著差异；#p<0.05,##p<0.01分别代表药物处理组与半乳糖单独处理组比较有显著差异。
图8B为本发明促进神经元新生的医药组合物的天麻萃取物TM1-2及N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)对动物血液、大脑皮质和海马回中超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)酵素活性的影响；其中1-9组实验分别如图5A所述；其中数值是平均值(Mean)±标准偏差(SD)；**p<0.01代表半乳糖单独处理组与空白对照组比较有显著差异；#p<0.05,##p<0.01分别代表药物处理组与半乳糖单独处理组比较有显著差异。
图9为本发明促进神经元新生的医药组合物的天麻萃取物TM1-2及N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)对血液、大脑皮质和海马回中脂质过氧化(MDA)的影响；其中1-9组实验分别如图5A所述；其中数值是平均值(Mean)±标准偏差(SD)；**p<0.01代表半乳糖单独处理组与空白对照组比较有显著差异；#p<0.05,##p<0.01分别代表药物处理组与半乳糖单独处理组比较有显著差异。
图10A为本发明促进神经元新生的医药组合物的天麻萃取物TM1-2及N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)对大脑皮质和海马回中谷胱苷肽过氧化酶(glutathioneperoxidase,GSH-PX)酵素活性的影响；其中1-9组实验分别如图5A所述；其中数值是平均值(Mean)±标准偏差(SD)；*p<0.05代表半乳糖单独处理组与空白对照组比较有显著差异；#p<0.05代表药物处理组与半乳糖单独处理组比较有显著差异。
图10B为本发明促进神经元新生的医药组合物的天麻萃取物(TM1-2)及N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)对大脑皮质和海马回中葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD)酵素活性的影响；其中1-9组实验分别如图5A所述；其中数值是平均值(Mean)±标准偏差(SD)；**p<0.01代表半乳糖单独处理组与空白对照组比较有显著差异；#p<0.05代表药物处理组与半乳糖单独处理组比较有显著差异。
图11A为本发明促进神经元新生的医药组合物的天麻萃取物TM1-2及N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)对表现溴化脱氧尿苷(5-bromo-2’-deoxyuridine(BrdU))及双皮质素(doublecortin(DCX))的新生神经元的齿状回免疫染色代表图。
图11B为图11A免疫染色图量化的结果。其中数值是平均值(Mean)±平均值标准误差(SEM)；*p<0.05代表半乳糖单独处理组与空白对照组比较有显著差异；#p<0.05代表药物处理组与半乳糖单独处理组比较有显著差异。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
下面结合附图对本发明做进一步的详细描述：
本发明为一种促进神经元新生的医药组合物，包括有天麻素(gastrodin)、天麻苷元(gastrodigenin)、派立辛化合物(parishins)、N6-(4-羟基苯甲基)腺苷N6-(4-hydroxybenzyl)adenine riboside,T1-11)以及4-羟基苯甲醛(4-hydroxybenzaldehyde)。该派立辛化合物包含有派立辛A、派立辛B、派立辛C以及派立辛E。在本发明中，该N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)的重量百分比为0.5-4％，该天麻素的重量百分比大于25％，该诸派立辛化合物的总重量百分比大于50％。
本发明更提供一种利用天麻萃取物促进神经元新生的方法，该天麻萃取物包含有天麻素(gastrodin)、天麻苷元(gastrodigenin)、派立辛化合物(parishins)、N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)以及4-羟基苯甲醛(4-hydroxybenzaldehyde)。使用本发明方法所新生的神经元为脑神经元。其中该N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)的重量百分比为0.5-4％，该天麻素的重量百分比大于25％，该类派立辛化合物的总重量百分比大于50％。
本发明亦提供一种利用经分离的N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)或其医药可接受盐促进神经元新生的方法。使用该方法所新生的神经元为脑神经元。
实施例1制备天麻萃取物
市售切成饮片的天麻(Gastrodia elata B1.)地下茎用乙醇水溶液(70％乙醇，50℃)萃取隔夜。粗萃取液经减压浓缩得天麻粗萃物TM 1。经浓缩干燥的样品导入大孔树酯(DIAION HP20)管柱，先用水冲提，取得TM1-1，再以50％乙醇冲提得天麻萃取物TM1-2。
实施例2高效液相层析分析
将实施例1上述取得的天麻萃取物TM1-2以高效液相层析(Waters 2695HighPerformance Liquid Chromatography,HPLC)分析其化学组成。用Cosmosil 5C-18AR-II,4.6x 250mm管柱，UV 270nm侦测器，流速1.0mL/min，流动相A:0.01％磷酸；B:乙腈；分析流程:0-15分,95-88％A；15-30分,88％A；30-40分,88-60％A。本发明天麻萃取物TM1-2的高效液相层析主要成分分析的结果如图1所示。
由图1所示，该高效液相层析图上出现8个主要化合物，分别为天麻素(gastrodin)、天麻苷元(gastrodigenin)、派立辛E(Parishin E)、派立辛B(Parishin B)、派立辛C(Parishin C)、N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)、派立辛A(Parishin A)以及4-羟基苯甲醛(4-hydroxybenzaldehyde)。其中N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)的重量百分比为0.5-4％，该类派立辛化合物(包括派立辛A(Parishin A)、派立辛B(Parishin B)、派立辛C(Parishin C)、派立辛E(Parishin E))的总重量百分比大于50％，天麻素的重量百分比大于25％。
实施例3老化细胞培养
SH-SY5Y细胞(购自台湾生物资源保存及研究中心(Bioresource Collection andResearch center,BCRC)，08C0066)在含10％胎牛血清，100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素的DMEM-F-12培养基中，放在二氧化碳培养箱内培养。当SH-SY5Y细胞在100mm培养皿中生长到其布满率达到80％时，进行继代培养，SH-SY5Y细胞在经过约20次继代培养后，细胞会开始呈现衰老的现象，衰老细胞其细胞内β-半乳糖苷酶的产生会大量增加。因此，测试细胞内β-半乳糖苷酶的量作为细胞老化的指标。接着利用这些已经呈现衰老的细胞进行以下衰老相关的细胞实验。
实施例4天麻粗萃取物TM1，天麻萃取物TM1-2及纯化合物N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)减缓细胞老化活性测试
前述实施例3的老化SH-SY5Y细胞先经天麻粗萃物TM1，天麻萃取物TM1-2及N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)处理24小时后，将细胞用4％甲醛(formaldehyde)进行固定，接着再使用配置好的β-半乳糖苷酶染色液进行细胞衰老指标β-半乳糖苷酶染色。实验结果(图2A)显示天麻粗萃物TM1能抑制SH-SY5Y细胞内β-半乳糖苷酶的产生，而且随着TM1的加量增加而随之显着的减少。其次，天麻萃取物TM1-2(图3A)及纯化物N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)(图3A与图4A)亦均能显着减少SH-SY5Y细胞内β-半乳糖苷酶的产生。此外，细胞老化的机制目前已知是由两个独立的途径驱动细胞老化的过程，各别为p53-p21路径及p16-Rb路径。p21和p16都是细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂(cyclin-dependent kinaseinhibitors,CDKI)，可以防止Rb被磷酸化，来抑制Rb活化，总体的作用是抑制E2F转录因子的活性，来抑制细胞周期的运行。p53、p63及p73都可以直接诱导p21蛋白的活化，使细胞周期停滞，进而使细胞进入衰老时期。实验显示，通过天麻萃取物TM1-2与N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)抑制P53,p16,p21蛋白的表现，可以有效减缓细胞的衰老(图2B,图3B,图4B)。
实施例5天麻萃取物TM1-2及N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)对于半乳糖动物模型的行为模式评估
在此实施例中，分别测试天麻萃取物TM1-2及其中纯化物N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)对于半乳糖动物模型的行为模式影响。
一共进行九组动物实验。1-9组动物实验分别为1:空白对照组,2:D-半乳糖(0.3g/kg),3:D-半乳糖(0.3g/kg)+维生素E(100mg/kg),4:D-半乳糖(0.3g/kg)+TM1-2低剂量组(5mg/kg),5:D-半乳糖(0.3g/kg)+TM1-2中剂量组(20mg/kg),6:D-半乳糖(0.3g/kg)+TM1-2高剂量组(50mg/kg),7:D-半乳糖(0.3g/kg)+T1-11低剂量组(1mg/kg),8:D-半乳糖(0.3g/kg)+T1-11高剂量组(10mg/kg),9:T1-11(10mg/kg)。D-半乳糖经颈背部皮下注射(0.3g/kg体重)，天麻萃取物TM1-2、T1-11及维生素E皆为口服(以管喂方式进行)，每日各1次，连续6周。在给予受试物的同时，除空白对照组外，各组继续给予D-半乳糖0.3g/kg体重颈背部皮下注射，空白对照组皮下注射生理盐水。维生素E组当作正对照组。
结果显示，天麻萃取物TM1-2以及N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)均可以有效改善半乳糖诱导的老化的动物行为模式包括筑巢、挖掘等，老化的小鼠会逐渐丧失这些行为特性，因此我们可以利用这些行为模式测试小鼠的老化程度。
在筑巢测验(Deacon R(2012),Deacon RM(2006))中，给予小鼠筑巢材料，他们会在笼子角落做出窝，并待在巢中。运用小鼠筑巢的天性，给予巢料棉片，计算小鼠筑巢完成程度的分数并秤量小鼠未使用的巢料棉片重量，评估小鼠老化程度(图5A及5B)。
此外利用小鼠挖掘天性，以水管挖掘试验(Deacon R(2012))，检测小鼠的挖掘行为退化程度(图6)。
再者，利用Morris水迷宫试验(Vorhees CV,et al.(2006))，评估小鼠的记忆学习能力(图7A及7B)。
由前述实验结果显示，天麻萃取物TM1-2以及N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)可以有效改善半乳糖诱发老化所导致的丧失的行为能力，并且随着天麻萃取物TM1-2及N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)的使用剂量增加，改善程度也随着增加。
实施例6天麻萃取物TM1-2及N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)减少半乳糖诱导的动物的血液及脑组织氧化损伤
动物于行为观察完后，在动物牺牲前一周，先连续由腹腔注射50mg/g溴化脱氧尿苷(5-bromo-2’-deoxyuridine,BrdU)一星期，然后将动物牺牲，取其脑组织和血液，脑组织冷冻后，一部分组织供进行本实施例的实验，其余供进行组织切片，切片组织供进行实施例7的实验。血液则经离心后取得血清，供进行以下实验。
由于老化与氧化损伤有密切关系，因此，本实施例进一步使用cayman的市售套组(kit)进行分析前述实验动物的血液和脑组织的抗氧化相关酵素(过氧化氢酶(catalase,CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、脂质过氧化物、谷胱苷肽过氧化酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)及葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphatedehydrogenase,G6PD))的活性。
实验结果可知，天麻萃取物TM1-2及N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)明显改善半乳糖诱导动物血液(serum)、大脑皮质(cortex)及海马回(hippocampus)等脑组织中的过氧化氢酶(catalase,CAT)和超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)的下降(图8A及8B)及脂质过氧化物现象(malondialdehyde,MDA)(图9)。其中1-9组实验分别如实施例5所述。
除此之外，天麻萃取物TM1-2及N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)也有效的改善大脑皮质和海马回因为半乳糖诱导老化而下降的谷胱苷肽过氧化酶(Glutathioneperoxidase,GSH-Px)及葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(Glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD)的酵素活性(图10A及10B)。其中1-9组实验分别如实施例5所述。
实施例7天麻萃取物TM1-2及N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)对于半乳糖动物模型的大脑海马回组织的神经元新生
实施例6动物于行为观察完后，在动物牺牲前一周，先连续由腹腔注射50mg/g溴化脱氧尿苷(5-bromo-2’-deoxyuridine,BrdU)一星期，然后将动物牺牲，部分冷冻脑组织进行组织切片。再将切片用从abcam购得的双皮质素(doublecortin,DCX)的一级抗体进行反应，接着再使用带有荧光标定的二级抗体(购自Jackson Labs Technologies,Inc)进行呈色，最后使用共轭焦显微镜(Confocal microscopy)进行观察及拍照。在组织切片中则明显发现服用天麻萃取物TM1-2及N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)可以改善海马回中BrdU和DCX的表现(请参阅图11A及11B所示)。
半乳糖诱导的老化小鼠其脑中海马回部分有BrdU和DCX表现细胞，有明显的下降。此结果与之前实施例5中的Morris水迷宫试验结果一致，半乳糖诱导的老化小鼠会使小鼠的记忆学习能力下降，而服用天麻萃取物TM1-2以及N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)可以减缓此老化现象。
由以上实验可知，本发明天麻萃取物TM1-2及其纯化物N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)可达到功效包括：(1)显着的减少β-半乳糖苷酶的产生且有效改善细胞老化的分子机制；(2)有效改善半乳糖诱发老化所导致的丧失的行为能力(筑巢、挖掘及记忆)，改善程度随着天麻萃取物TM1-2和N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)的使用剂量增加而增加；(3)明显改善半乳糖诱导动物血液及脑组织中的SOD和CAT下降及脂质过氧化物上升的现象，并且有效的改善因为半乳糖诱导老化而下降的GSH-Px及G6PD的活性；以及(4)改善海马回中表现BrdU和DCX细胞下降的结果。因此说明服用本发明包含有天麻萃取物TM1-2及N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)的医药组合物可以有效的促进神经元新生，进而改善减缓老化。
以上仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种促进神经元新生的医药组合物，其特征在于，包括有天麻素、天麻苷元、派立辛化合物、N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)以及4-羟基苯甲醛。
2.根据权利要求1所述的促进神经元新生的医药组合物，其特征在于，其中该派立辛化合物包含有派立辛A、派立辛B、派立辛C以及派立辛E。
3.根据权利要求1所述的促进神经元新生的医药组合物，其特征在于，其中该N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)的重量百分比为0.5-4％。
4.根据权利要求1所述的促进神经元新生的医药组合物，其特征在于，其中该天麻素的重量百分比大于25％。
5.根据权利要求1所述的促进神经元新生的医药组合物，其特征在于，其中该派立辛化合物的总重量百分比大于50％。
6.一种利用天麻萃取物促进神经元新生的方法，其特征在于，该天麻萃取物包含有天麻素、天麻苷元、派立辛化合物、N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)以及4-羟基苯甲醛。
7.根据权利要求6所述的利用天麻萃取物促进神经元新生的方法，其特征在于，其中新生的神经元为脑神经元。
8.根据权利要求6所述的促进神经元新生的医药组合物，其特征在于，其中该N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)的重量百分比为0.5-4％，该天麻素的重量百分比大于25％，该派立辛化合物的总重量百分比大于50％。
9.一种可接受盐促进神经元新生的方法，其特征在于，该方法利用经分离的N6-(4-羟基苯甲基)腺苷(T1-11)可接受盐或其医药组合物。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，其中新生的神经元为脑神经元。
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Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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Patent Citations (4)
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|---|---|---|---|---|
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| CN101524361A (zh) * | 2007-12-06 | 2009-09-09 | 中央研究院 | 腺苷类似物的制造及使用方法 |
| CN103626812A (zh) * | 2013-12-10 | 2014-03-12 | 江西本草天工科技有限责任公司 | 天麻中一种新的巴利森苷类化合物及其用途 |
| CN105748500A (zh) * | 2014-12-16 | 2016-07-13 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 一种用于防治痴呆的天麻有效成分组合物及其应用 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| NAI-KUEI HUANG ET AL.: "Neuroprotective Principles from Gastrodia elata", 《JOURNAL OF NATURAL PRODUCTS》 * |
| 谢淼 等: "天麻中巴利森苷类成分研究进展", 《广东化工》 * |
| 郭青龙 等: "《人体解剖生理学》", 31 August 2015, 中国医药科技出版社 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112675183A (zh) * | 2021-01-25 | 2021-04-20 | 山东中医药大学附属医院 | Pb在制备预防或治疗pilo诱导的癫痫药物中的应用 |
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