TW202008988A - 促進神經元新生並能抑制或延緩老化的天麻萃取物以及利用天麻萃取物或腺苷類似物促進神經元新生並抑制或延緩老化的方法 - Google Patents

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Abstract

本發明為涉及一種利用天麻萃取物或腺苷類似物促進神經元新生的方法，該天麻萃取物包含有天麻素(gastrodin)、天麻苷元(gastrodigenin)、派立辛化合物(parishins)、N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)以及4-羥基苯甲醛(4-hydroxybenzaldehyde)。本發明的天麻萃取物對神經細胞具有減緩老化活性並且可以誘導小鼠海馬迴神經元新生。

Description

促進神經元新生的醫藥組合物以及利用天麻萃取物或腺苷類似物促進神經元新生的方法
本發明為涉及一種利用天麻萃取物或腺苷類似物促進神經元新生的方法，該天麻萃取物包含有天麻素(gastrodin)、天麻苷元(gastrodigenin)、派立辛化合物(parishins)、N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)以及4-羥基苯甲醛(4-hydroxybenzaldehyde)。本發明的天麻萃取物對神經細胞具有抗老化活性並且可以誘導小鼠海馬迴神經元新生
天麻(Gastrodia elata Bl.)係取材自蘭科多年生寄生草本植物天麻的塊莖，是一種常用的中藥，臨床上用於治療頭痛、眩暈、肢體麻木，癲癇和破傷風引起的抽搐、神經衰弱，血管神經性頭痛等。基於其在臨床上的醫療用途，文獻上有許多係探討其在預防神經傷害相關的研究。例如，天麻素，一種天麻中的組成，被發現會改變沙鼠海馬迴(gerbil hippocampus)中的γ-胺基丁酸(Gamma Amino Butyric Acid(GABA))代謝(An,et al.(2003))。更進一步地，天麻的甲醇萃取物之乙醚分劃層在對抗沙鼠局部缺血模型及施以藻胺酸(kainic acid)處理之老鼠模型中的海馬迴神經元傷害具有保護效果(Kim,et al.(2001)；Kim,et al.(2003))。天麻的甲醇萃取物之乙 醚分劃層能顯著地降低對β-澱粉樣蛋白誘發的神經細胞死亡。同樣地，藉由利用一施以藻胺酸處理之大鼠模型，Hsieh與其同僚證明投與天麻萃取物不僅可顯著地降低了癲癇發作的次數，並且也延遲了開始的時間(Hsieh,et al(2001))。天麻出現這種抗癲癇的效果係藉由其自由基清除活性的調節(Hsieh,et al.(2000))等。此外，一種天麻的甲醇萃取物藉由抑制c-Jun胺基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase(JNK)活性來防止PC12細胞因血清抽離的細胞凋亡(serum-deprived apoptosis)(Huang,et al.(2004))
本發明之主要目的，在於探討天麻萃取物或腺苷類似物對於促進神經元新生效果的有效成分或組成。
本發明透過一種具有天麻萃取物或腺苷類似物的醫藥組合物，發現該天麻萃取物或其腺苷類似物能促進神經元新生。
本發明提供一種促進神經元新生的醫藥組合物，包括有天麻素(gastrodin)、天麻苷元(gastrodigenin)、派立辛化合物(parishins)、N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)以及4-羥基苯甲醛(4-hydroxybenzaldehyde)。
於一實施例中，該派立辛化合物包含有派立辛A、派立辛B、派立辛C以及派立辛E。
於一實施例中，該天麻萃取物中之N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)的重量百分比為0.5-4%。該天麻素的重量百分比大於25%。該派立辛化合物的總重量百分比大於50%。
本發明更提供一種利用天麻萃取物促進神經新生的方法，該 天麻萃取物包含有天麻素(gastrodin)、天麻苷元(gastrodigenin)、派立辛化合物(parishins)、N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)以及4-羥基苯甲醛(4-hydroxybenzaldehyde)。於本發明中，所指的新生的神經元為腦神經元。
此外，本發明亦提供一種利用N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)促進神經元新生的方法。新生的神經元為腦神經元。
據此，本發明的天麻萃取物或N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)對神經細胞具有減緩老化活性並且可以誘導海馬迴神經元新生。
圖1：本發明促進神經元新生的醫藥組合物的天麻萃取物(TM1-2)之高效液相層析儀(HPLC)分析之化學剖面圖。
圖2A：本發明促進神經元新生的醫藥組合物的天麻粗萃物(TM1)對於SH-SY5Y細胞β-半乳糖苷酶表現的影響。
圖2B：本發明促進神經元新生的醫藥組合物的天麻粗萃物(TM1)對於SH-SY5Y細胞中，老化分子機制中相關蛋白之影響。
圖3A：本發明促進神經元新生的醫藥組合物的天麻萃取物(TM1-1)、天麻萃取物(TM1-2)及N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)對SH-SY5Y抗細胞衰老活性的影響。
圖3B：本發明促進神經元新生的醫藥組合物的天麻萃取物(TM1-1)、天麻萃取物(TM1-2)及N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)對SH-SY5Y細胞中，P-RB,P16,P53,P21等老化分子機制中相關蛋白之影響。
圖4A：本發明促進神經元新生的醫藥組合物的天麻萃取物(TM1-2),N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)，天麻素(TG)及其他天麻成分(雙(4-羥基苯甲基)硫化物(bis(4-hydroxylbenzyl)sulfide(T1-C))和天麻苷元(4-HBA))對SH-SY5Y抗細胞衰老活性的影響。
圖4B：本發明促進神經元新生的醫藥組合物的天麻萃取物(TM1-2),N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)，天麻素(TG)及其他天麻成分(雙(4-羥基苯甲基)硫化物(bis(4-hydroxylbenzyl)sulfide(T1-C))和天麻苷元(4-HBA))對SH-SY5Y細胞中P-RB,P16,P53,P21等老化分子機制相關蛋白之影響。
圖5A：本發明促進神經元新生的醫藥組合物的天麻萃取物(TM1-2)及N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)對半乳醣誘導之老化動物的築巢完成度的影響。其中1-9組實驗分別為1：對照組，2：D-半乳糖處理組，3：D-半乳糖+維生素E(100mg/kg),4：D-半乳糖+TM1-2低劑量組(5mg/kg),5：D-半乳糖+TM1-2中劑量組(20mg/kg),6：D-半乳糖+TM1-2高劑量組(50mg/kg),7：D-半乳糖+T1-11低劑量組(1mg/kg),8：D-半乳糖+T1-11高劑量組(10mg/kg),9：T1-11(10mg/kg)。
圖5B：本發明促進神經元新生的醫藥組合物的天麻萃取物(TM1-2)及N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)對半乳醣誘導之老化動物的築巢剩下的未撕碎棉片重量的影響。其中1-9組實驗分別如圖5A所述。
圖6：本發明促進神經元新生的醫藥組合物的天麻萃取物(TM1-2)及N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)對半乳醣誘導之老化動物的挖掘 能力的影響。其中1-9組實驗分別如圖5A所述。
圖7A：本發明促進神經元新生的醫藥組合物的天麻萃取物(TM1-2)及N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)對半乳醣誘導之老化動物在探索實驗(probe trial)，到達原平台位置所需時間的影響。其中1-9組實驗分別如圖5A所述。
圖7B：本發明促進神經元新生的醫藥組合物的天麻萃取物(TM1-2)及N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)對半乳醣誘導之老化動物在探索實驗(probe trial)，穿越原平台位置次數的影響。其中1-9組實驗分別如圖5A所述。
圖8A：本發明促進神經元新生的醫藥組合物的天麻萃取物(TM1-2)及N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)對動物血液、大腦皮質和海馬迴中過氧化氫酶(Catalase,CAT)酵素活性的影響。其中1-9組實驗分別如圖5A所述。
圖8B：本發明促進神經元新生的醫藥組合物的天麻萃取物(TM1-2)及N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)對動物血液、大腦皮質和海馬迴中超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)酵素活性的影響。其中1-9組實驗分別如圖5A所述。
圖9：本發明促進神經元新生的醫藥組合物的天麻萃取物(TM1-2)及N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)對血液、大腦皮質和海馬迴中脂質過氧化的影響。其中1-9組實驗分別如圖5A所述。
圖10A：本發明促進神經元新生的醫藥組合物的天麻萃取物(TM1-2)及N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)對大腦皮質和海馬迴中谷胱苷肽 過氧化酶(Glutathione peroxidase,GSH-PX)酵素活性的影響。其中1-9組實驗分別如圖5A所述。
圖10B：本發明促進神經元新生的醫藥組合物的天麻萃取物(TM1-2)及N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)對大腦皮質和海馬迴中葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(Glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD)酵素活性的影響。其中1-9組實驗分別如圖5A所述。
圖11A：本發明促進神經元新生的醫藥組合物的天麻萃取物(TM1-2)及N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)對表現溴化去氧尿苷(5-bromo-2’-deoxyuridine(BrdU))及雙皮質素(doublecortin(DCX))的新生神經元的齒狀迴免疫染色代表圖。
圖11B：圖11A免疫染色圖量化的結果。
有關本發明之詳細說明及技術內容，現就配合圖式說明如下：本發明為一種促進神經元新生的醫藥組合物，包括有天麻素(gastrodin)、天麻苷元(gastrodigenin)、派立辛化合物(parishins)、N6-(4-羥基苯甲基)腺苷N6-(4-hydroxybenzyl)adenine riboside,T1-11)以及4-羥基苯甲醛(4-hydroxybenz-aldehyde)。該派立辛化合物包含有派立辛A、派立辛B、派立辛C以及派立辛E。於本發明中，該N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)的重量百分比為0.5-4%，該天麻素的重量百分比大於25%，該諸派立辛化合物的總重量百分比大於50%。
本發明更提供一種利用天麻萃取物促進神經元新生的方法，該天麻萃取物包含有天麻素(gastrodin)、天麻苷元(gastrodigenin)、派立辛化合物(parishins)、N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)以及4-羥基苯甲醛(4-hydroxybenzaldehyde)。使用本發明方法所新生的神經元為腦神經元。其中該N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)的重量百分比為0.5-4%，該天麻素的重量百分比大於25%，該諸派立辛化合物的總重量百分比大於50%。
本發明亦提供一種利用經分離的N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)或其醫藥可接受鹽促進神經元新生的方法。使用該方法所新生的神經元為腦神經元。
實施例1 製備天麻萃取物
市售切成飲片的天麻(Gastrodia elata B1.)地下莖用乙醇水溶液(70%乙醇，50℃)萃取隔夜。粗萃取液經減壓濃縮得天麻粗萃物TM 1。經濃縮乾燥的樣品導入大孔樹酯(DIAION HP20)管柱，先用水沖提，取得TM1-1，再以50%乙醇沖提得天麻萃取物TM1-2。
實施例2 高效液相層析分析
將實施例1取得的天麻萃取物(TM1-2)以高效液相層析儀(Waters 2695 High Performance Liquid Chromatography,HPLC)分析其化學組成。用Cosmosil 5C-18 AR-II,4.6 x 250mm管柱，UV 270nm偵測器，流速1.0mL/min，流動相A：0.01%磷酸；B：乙腈；分析流程：0-15分，95-88%A；15-30分，88% A；30-40分，88-60% A。本發明天麻萃取物(TM1-2)之高效液相層析(HPLC)主要成分分析之結果如圖1所示。
由圖1所示，該高效液相層析(HPLC)圖上出現8個化合物， 分別為天麻素(gastrodin)、天麻苷元(gastrodigenin)、派立辛E(Parishin E)、派立辛B(Parishin B)、派立辛C(Parishin C)、N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)、派立辛A(Parishin A)以及4-羥基苯甲醛(4-hydroxybenzaldehyde)。其中N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)的重量百分比為0.5-4%，諸派立辛化合物(包括派立辛A(Parishin A)、派立辛B(Parishin B)、派立辛C(Parishin C)、派立辛E(Parishin E))的總重量百分比大於50%，天麻素的重量百分比大於25%。
實施例3 老化細胞培養
SH-SY5Y細胞(購自台灣生物資源保存及研究中心(Bioresource Collection and Research center,BCRC)，08C0066)在含10%胎牛血清，100U/ml青黴素和100μg/ml鏈黴素的DMEM-F-12培養基中，放在二氧化碳培養箱內培養。當SH-SY5Y細胞在100mm培養皿中生長到其佈滿率達到80%時，進行繼代培養，SH-SY5Y細胞在經過約20次繼代培養後，細胞會開始呈現衰老的現象，衰老細胞其細胞內β-半乳糖苷酶的產生會大量增加。因此，測試細胞內β-半乳糖苷酶的量作為細胞老化的指標。接著利用這些已經呈現衰老的細胞進行以下衰老相關的細胞實驗。
實施例4 天麻粗萃取物TM1，天麻萃取物TM1-2及純化合物N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)減緩細胞老化活性測試
前述實施例3之老化SH-SY5Y細胞先經天麻粗萃物TM1，天麻萃取物TM1-2及N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)處理24小時後，將細胞用4%甲醛(formaldehyde)進行固定，接著再使用配置好的β-半乳糖苷酶染色液進行細胞衰老指標β-半乳糖苷酶染色。實驗結果(圖2A)顯示天麻粗萃物TM1能抑制SH-SY5Y細胞內β-半乳糖苷酶的產生，而且隨著TM1的加量增 加而隨之顯著的減少。其次，天麻萃取物TM1-2(圖3A)及純化物N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)(圖3A與圖4A)亦均能顯著減少SH-SY5Y細胞內β-半乳糖苷酶的產生。此外，細胞老化的機制目前已知是由兩個獨立的途徑驅動細胞老化的過程，各別為p53-p21路徑及p16-Rb路徑。p21和p16都是細胞週期蛋白依賴性激酶抑制劑(Cyclin-dependent kinase inhibitors,CDKI)，可以防止Rb被磷酸化，來抑制Rb活化，總體的作用是抑制E2F轉錄因子的活性，來抑制細胞週期的運行。p53、p63及p73都可以直接誘導p21蛋白的活化，使細胞週期停滯，進而使細胞進入衰老時期。實驗顯示，藉由天麻萃取物TM1-2與N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)抑制P53,p16,p21蛋白的表現，可以有效減緩細胞的衰老(圖2B，圖3B，圖4B)。
實施例5 天麻萃取物TM1-2及N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)對於半乳糖動物模型的行為模式評估
於此實施例中，分別測試天麻萃取物TM1-2及其中純化物N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)對於半乳糖動物模型的行為模式影響。
一共進行九組動物實驗。1-9組動物實驗分別為1：空白對照組，2：D-半乳糖(0.3g/kg),3：D-半乳糖(0.3g/kg)+維生素E(100mg/kg),4：D-半乳糖(0.3g/kg)+TM1-2低劑量組(5mg/kg),5：D-半乳糖(0.3g/kg)+TM1-2中劑量組(20mg/kg),6：D-半乳糖(0.3g/kg)+TM1-2高劑量組(50mg/kg),7：D-半乳糖(0.3g/kg)+T1-11低劑量組(1mg/kg),8：D-半乳糖(0.3g/kg)+T1-11高劑量組(10mg/kg),9：T1-11(10mg/kg)。D-半乳糖經頸背部皮下注射(0.3g/kg體重)，天麻萃取物TM1-2、T1-11及維生素E皆為口服(以胃管方式進行)，每日各1次，連續6週。在給予受試物的同時，除空白對照 組外，各組繼續給予D-半乳糖0.3g/kg體重頸背部皮下注射，空白對照組皮下注射生理鹽水。維生素E組當作正對照組。
結果顯示，天麻萃取物TM1-2以及N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)均可以有效改善半乳糖誘導之老化的動物行為模式包括建造巢穴、挖掘成墊料等，老化的小鼠會逐漸喪失這些行為特性，因此我們可以利用這些行為模式測試小鼠的老化程度。
於築巢測驗(Deacon R(2012),Deacon RM(2006))中，給予小鼠築巢材料，他們會在籠子角落做出窩，並待在巢中。運用小鼠築巢的天性，給予巢料棉片，計算小鼠築巢完成程度的分數並秤量小鼠未使用的巢料棉片重量，評估小鼠老化程度(圖5A及5B)。
此外利用小鼠挖掘天性，以水管挖掘試驗(Deacon R(2012))，檢測小鼠的挖掘行為退化程度(圖6)。
再者，利用Morris水迷宮試驗(Vorhees CV,et al.(2006))，評估小鼠的記憶學習能力(圖7A及7B)。
由前述實驗結果顯示，天麻萃取物TM1-2以及N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)可以有效改善半乳糖誘發老化所導致的喪失之行為能力，並且隨著天麻萃取物TM1-2及N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)的使用劑量增加，改善程度也隨著增加。
實施例6 天麻萃取物TM1-2及N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)減少半乳糖誘導之動物的血液及腦組織氧化損傷
動物於行為觀察完後，於動物犧牲前一週，先連續由腹腔注射50mg/g溴化去氧尿苷(5-bromo-2’-deoxyuridine,BrdU)一星期，然後將動 物犧牲，取其腦組織和血液，腦組織冷凍後，一部分組織供進行本實施例之實驗，其餘供進行組織切片，切片組織供進行實施例7之實驗。血液則經離心後取得血清，供進行以下實驗。
由於老化與氧化損傷有密切關係，因此，本實施例進一步使用cayman的市售套組(kit)進行分析前述實驗動物的血液和腦組織之抗氧化相關酵素(過氧化氫酶(Catalase,CAT)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、脂質過氧化物、谷胱苷肽過氧化酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)及葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(Glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD))的活性。
實驗結果可知，天麻萃取物TM1-2及N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)明顯改善半乳糖誘導動物血液(serum)、大腦皮質(cortex)及海馬迴(hippocampus)等腦組織中的過氧化氫酶(Catalase,CAT)和超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)的下降(圖8A及8B)及脂質過氧化物現象(圖9)。其中1-9組實驗分別如實施例5所述。
除此之外，天麻萃取物TM1-2及N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)亦有效的改善因為半乳糖誘導老化而下降的谷胱苷肽過氧化酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)及葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(Glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD)的酵素活性(圖10A及10B)。其中1-9組實驗分別如實施例5所述。
實施例7 天麻萃取物TM1-2及N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)對於半乳糖動物模型的大腦海馬迴組織的神經元新生
實施例6動物於行為觀察完後，於動物犧牲前一週，先連續 由腹腔注射50mg/g溴化去氧尿苷(5-bromo-2’-deoxyuridine,BrdU)一星期，然後將動物犧牲，部分冷凍腦組織進行組織切片。再將切片用從abcam購得之雙皮質素(doublecortin,DCX)的一級抗體進行反應，接著再使用帶有螢光標定的二級抗體(購自Jackson Labs Technologies,Inc)進行呈色，最後使用共軛焦顯微鏡(Confocal microscopy)進行觀察及拍照。於組織切片中則明顯發現服用天麻萃取物(T1-2)及N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)可以改善海馬迴中BrdU和DCX表現細胞下降的結果(請參閱圖11A及11B所示)。
半乳糖誘導的老化小鼠其腦中海馬迴部分有BrdU和DCX表現細胞，有明顯的下降。此結果與之前實施例5中的Morris水迷宮試驗結果一致，半乳糖誘導的老化小鼠會使小鼠的記憶學習能力下降，而服用天麻萃取物TM1-2以及N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)可以減緩此老化現象。
由以上實驗可知，本發明天麻萃取物TM1-2及其純化物N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)可達到功效包括：(1)顯著的減少β-半乳糖苷酶的產生且有效改善細胞老化的分子機制；(2)有效改善半乳糖誘發老化所導致的喪失之行為能力(築巢、挖掘及記憶)，改善程度隨著天麻萃取物TM1-2和N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)的使用劑量增加而增加；(3)明顯改善半乳糖誘導動物血液及腦組織中的SOD和CAT及脂質過氧化物下降的現象，並且有效的改善因為半乳糖誘導老化而下降的GSH-Px及G6PD的活性；以及(4)改善海馬迴中表現BrdU和DCX細胞下降的結果。因此說明服用本發明包含有天麻萃取物(TM1-2)及N6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)的醫藥組合物可以有效的促進神經元新生，進而改善減緩老化。
以上已將本發明做一詳細說明，惟以上所述者，僅為本發明 之一較佳實施例而已，當不能以此限定本發明實施之範圍，即凡依本發明申請專利範圍所作之均等變化與修飾，皆應仍屬本發明之專利涵蓋範圍內。

Claims (10)

  1. 一種促進神經元新生的醫藥組合物，包括有天麻素(gastrodin)、天麻苷元(gastrodigenin)、派立辛化合物(parishins)、N 6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)以及4-羥基苯甲醛(4-hydroxybenzaldehyde)。
  2. 如請求項第1項所述促進神經新生的醫藥組合物，其中該派立辛化合物包含有派立辛A、派立辛B、派立辛C以及派立辛E。
  3. 如請求項第1項所述促進神經元新生的醫藥組合物，其中該N 6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)的重量百分比為0.5-4%。
  4. 如請求項第1項所述促進神經元新生的醫藥組合物，其中該天麻素的重量百分比大於25%。
  5. 如請求項第1項所述促進神經元新生的醫藥組合物，其中該派立辛化合物的總重量百分比大於50%。
  6. 一種利用天麻萃取物促進神經元新生的方法，該天麻萃取物包含有天麻素(gastrodin)、天麻苷元(gastrodigenin)、派立辛化合物、N 6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)以及4-羥基苯甲醛(4-hydroxybenzaldehyde)。
  7. 如請求項第6項所述的方法，其中新生的神經元為腦神經元。
  8. 如請求項第6項所述的方法，其中該N 6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)的重量百分比為0.5-4%，該天麻素的重量百分比大於25%，該派立辛化合物的總重量百分比大於50%。
  9. 一種利用經分離的N 6-(4-羥基苯甲基)腺苷(T1-11)或其醫藥可接受鹽促進神經元新生的方法。
  10. 如請求項第9項所述的方法，其中新生的神經元為腦神經元。
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